PROTOCOLO PARA LA DETERMINACIN DEL CONTENIDO DE MATERIA ORGNICA EN MUESTRAS DE

SUELOS Y SEDIMENTOS- Mtodo Walkley y Black (1965)

Fundamento de la tcnica

La materia orgnica se oxida con el dicromato (Cr2O7-2) y esa reaccin se acelera con el calor
generado al agregar 2 volmenes de cido sulfrico (H 2SO4) en 1 volumen de dicromato de potasio
(K2Cr2O7) 1N.

El exceso de dicromato se determina por titulacin con una solucin estndar de sulfato
ferroso (FeSO4); y el contenido de materia orgnica se calcula a partir de la cantidad de dicromato
reducido.

El mtodo recupera entre 60-86% del carbono orgnico, por lo que al momento de realizar
los clculos se debe multiplicar por un factor de correccin. Ese factor de correccin tiene en cuenta
la relacin miliequivalentes-Normalidad, la proporcin de carbono que no se oxida y, en nuestro caso,
el tipo de muestra con que se trabaja. Luego de la consulta con investigadores del Depto. de Qumica
se estipul el factor 0,1995 para la determinacin de materia orgnica en nuestro laboratorio.

Reactivos

1) Dicromato de potasio (K2Cr2O7): 1N

Disolver 49,04gr de dicromato de potasio en 1 lt de agua destilada. IMPORTANTE: El
dicromato debe estar seco a 105C previo a su pesado. Para ello se pone el peso cercano a la
cantidad necesaria en un vidrio de reloj o cpsula de Petri en la estufa y se deja 24 a 48hs.
2) cido sulfrico concentrado (H2SO4)
3) Indicador: Ferrona
4) Sulfato ferroso (FeSO4.7H2O): 0,5N
Disolver 140gr de sulfato ferroso en agua destilada, agregar 15ml de cido sulfrico
concentrado y completar a 1lt con agua destilada. IMPORTANTE: preparar este reactivo el
mismo da previo a realizar las determinaciones.

NOTA: Para mayor exactitud, es importante utilizar matraces para el preparado de los reactivos.
Preparar los reactivos necesarios para la cantidad de muestras a tratar, adems de tres testigos.

Procedimiento y preparacin de las muestras para la titulacin

1) Secar las muestras al aire.

2) Pasar las muestras secas por un tamiz N 35 (0,5mm de abertura). Si las muestras tienen
mucha conchilla o raicillas es necesario tamizar las muestras por un tamiz N 60 (0,25mm) o
retirar dicho material con pinza.
El objetivo del mtodo es cuantificar solo el carbono orgnico mineralizado, por lo que, la
presencia de conchilla y/o races en las muestras estaran sobreestimando el contenido de
carbono real.
3) Pesar 0,5gr de las muestras secas y tamizadas y colocar el material pesado en 1 erlenmeyer
de 500ml. Si son muestras con poco contenido de materia orgnica, pesar 1gr. Anotar el peso
exacto inicial de cada muestra. Colocar todos los erlenmeyers con las muestras dentro de la
campana y encender el extractor.
4) Aadir 10ml de dicromato de potasio (K 2Cr2O7) y mezclar.
 5) Aadir rpidamente 20ml de cido sulfrico concentrado, agitar suavemente para mezclar y
luego agitar vigorosamente durante 1 minuto.
6) Dejar reposar 30 minutos. Los testigos pueden reposar por 20 minutos.
7) Agregar 200 ml de agua destilada.
8) Filtrar las muestras en los erlenmeyers de 250 ml. Para ello, sobre cada erlenmeyer de 250 ml
se coloca un embudo de vidrio y papel de filtro comn.

IMPORTANTE

- Previo al comienzo de la determinacin verificar que el material de vidrio necesario este

limpio y en condiciones. Por cada muestra se necesita un erlenmeyer de 500ml, un
erlenmeyer de 250ml y un embudo de vidrio. Prever, adems de la cantidad de muestras, tres
testigos. Se aconseja dejar todo el material de vidrio listo y rotulado sobre la mesa grande del
laboratorio el da previo a la determinacin.
- USAR PROPIPETAS para aadir los distintos reactivos a las muestras.
- Trabajar con GUANTES durante todo el proceso y con BARBIJO mientras se trabaja con el
cido sulfrico concentrado.
- Trabajar con delantal y calzado cerrado.
- Leer el protocolo de normas de seguridad en el laboratorio del IGCyC.

Titulacin
Es importante verificar previamente con agua destilada el buen funcionamiento de las buretas de
25ml necesarias para realizar la titulacin. Luego es necesario limpiar las mismas con la solucin de
sulfato ferroso para evitar diluciones del reactivo al momento de la titulacin.

1) Colocar el sulfato ferroso en la bureta y enrazar en 20ml. Asegurarse que el paso del lquido
est cerrado.
2) Colocar en la muestra a titular 2-3 gotas del indicador y un buzo. Colocar el erlenmeyer sobre
el agitador, debajo de la bureta con el sulfato ferroso.
3) Comenzar a aadir sulfato ferroso a la muestra prestando atencin a los cambios de color.
La muestra pasa del color NARANJA, al color VERDE ESMERALDA y finalmente al ROJO. En
este punto finaliza la titulacin y hay que anotar los mililitros de sulfato ferroso que se
utilizaron.

Clculo %C = (ml sulfato ferroso TESTIGOS ml sulfato ferroso MUESTRA) x 0,1995

Peso inicial de la muestra

Clculo % Materia Orgnica: %C x 1,724