UNIVERSIDAD PRIVADASAN JUAN BAUTISTA

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

ESCUELA DE ENFERMERA

CURSO: BIOLOGA HUMANA

GUIA DE PRCTICA

Profesor: Bilogo Magster Scotto Espinoza Carlos

 INDICE

Prctica N CONTENIDO
Bioseguridad.
1
Determinacin de la acidez o alcalinidad de las sustancias de
2
uso comn

3 Biomolculas en los seres vivos identificacion de

carbohidratos, lpidos y protenas

4 Biomolculas en los seres vivos identificacion del ADN

5 Microscopia

Observacin y reconocimiento de clulas procariotes y

6
eucariotes
7 Observacin de organelas celulares
Permeabilidad celular
8

Divisin celular (Mitosis)

9

Determinacin de grupos sanguneos (Sistema ABO y actor

10
Rh)
 INTRODUCCIN

La biologa es la ciencia de la vida que estudia la estructura y funcin de los organismos

vivos y sus componentes. Las aplicaciones de la investigacin bsica en biologa molecular
son numerosas, desde la tecnologa para trasplantar diverso rganos, manipulacin de
genes, disear frmacos contra patgenos o enfermedades humanas, incrementar la
produccin mundial de alimentos, generar vida sinttica, clonacin celular, terapia gnica,
uso de la nanotecnologa para curar enfermedades y otros.

La gua de prcticas del curso de Biologa Humana tiene como objetivo entrenar al
estudiante con los procedimientos llevados a cabo en el laboratorio y desarrollar su
pensamiento cientfico que lo lleve comprender los trminos bsicos de la Biologa.

El estudiante debe emplear esta gua en cada prctica de laboratorio y estar informado
sobre la prctica que se llevar a cabo en cada sesin.

El alumno debe cumplir con los objetivos planteados al final de cada prctica. As mismo
debe presentar un informe de cada prctica la semana siguiente a realizada la misma.

El profesor del curso.

 PAUTAS PARA PRESENTAR UN INFORME DE PRCTICAS

El alumno debe presentar un informe de cada prctica realizada que incluya las siguientes
partes:

1. Cartula: Ttulo de la prctica, grupo y profesor de prctica.

2. Planteamiento del problema.
3. Marco terico: Hiptesis y Objetivos.
4. Materiales y mtodo
5. Resultados: Debern incluir todas sus observaciones por medio de Tablas y Grficos.
6. Discusin: Comentarios sobre los resultados obtenidos y su relacin con la hiptesis
del trabajo.
7. Cuestionario: Desarrollar las preguntas realizadas.
8. Referencias bibliogrficas: Libros, revistas cientficas y/o artculos a los que ha
consultado para elaborar su informe.

Del estilo de redaccin:

El informe se presenta a mano, no digitalizado a excepcin de la cartula.

La redaccin puede hacerse usando verbos en pretrito para la 3 persona plural.
Por ejemplo: Pusimos a calentar el agua, Se puso a calentar el agua.
El informe no puede exceder las 6 pginas, usando hoja de tamao carta.
No deben incluirse grficos o imgenes decorativas. Solo lo que se requiera la
entrega en el marco terico o en los resultados.
Se puede incluir Tablas elaboradas en formato Excel e insertos en el en el marco
terico o en los resultados.
Tomar en cuenta la ortografa y la redaccin. Recomendaciones:
o Utilizar frases cortas. Un mismo prrafo puede contener 3 o 4 ideas
relacionadas, separadas por puntos seguidos.
o No repetir verbos, adverbios o adjetivos ni ideas en el mismo prrafo.
o Mantener la misma forma verbal de principio a fin.
Mantener el orden y limpieza.
 CALIFICACIN DE UN INFORME DE PRCTICAS

Seccin Construccin Orientaciones Ptje.

Ttulo de la
investigacin
Debe ser especfico. Informe de laboratorio o Trabajo prctico no son vlidos.
Encabezado Autores Deben anotarse los autores del informe del laboratorio. 1.0
Fecha Debe anotarse la fecha de entrega del informe
Planteamient
Planteamiento 1,0
o del
del problema
Debe indicar el tema de la prctica, que procedimiento se van a realizar. Por qu?
problema

Debe incluir los aspectos tericos que respaldan la hiptesis y el diseo experimental.
No se trata de escribir un ensayo sobre el tema, sino de introducir al lector en el tema y
explicarle en qu nos basamos para suponer la hiptesis. Debe ir siempre de los
Marco terico
general a lo especfico.
Hacia el final del marco terico debe incluirse la pregunta que motiva la investigacin.
Otra posibilidad es que quede expresada dentro de los objetivos.
Deben ser similares a los entregados por el profesor en la gua de laboratorio, siempre
1.0
Materiales y referidos a lo que se intenta probar con el procedimiento experimental. Por ejemplo,
Mtodo Pretendemos averiguar cmo afecta la contaminacin del agua en la germinacin de
Objetivos
las semillas (menciona el objetivo y la pregunta que se intenta responder)
No corresponde anotar como objetivo ideas como queremos aprender ms sobre este
tema Vale decir, se trata de objetivos especficos y bien concretos.
Debe estar redactada segn la frmula Si, , entonces. Bsicamente debe incluir el
Hiptesis supuesto terico en la primera parte (Si,) y el procedimiento general que se aplicar a
partir de tal supuesto terico (entonces, )
Se tienen que anotar en una lista de dos o tres columnas todos los materiales utilizados
para llevar a cabo el procedimiento experimental. Deben aparecer clasificados en las
Materiales
siguientes categoras: Material de vidrio; instrumentos (de medicin, observacin, etc.);
Resultados
1,0
reactivos; material vivo y otros.
Mediante un punteo, se describen pormenorizadamente los procedimientos que
Mtodo
efectivamente se llevaron a cabo durante la investigacin.
Se indican los resultados obtenidos tras la puesta en prctica de los procedimientos.
Discusin Normalmente se debe adjuntar una tabla, un grfico o un esquema, segn corresponda. 4.0
No se deben explicar o analizar los resultados. Slo se describen.
Es la parte ms importante del informe porque bsicamente es el anlisis de los
resultados.
Debe redactarse como si se estuvieran respondiendo las siguientes preguntas:
Cmo se explican los resultados obtenidos?
Conclusiones Los resultados son los esperados de acuerdo a nuestra hiptesis? 4.0
Si lo son: significa que el diseo estuvo perfecto? (rara vez es as)
Si no lo son: a qu se podra deber?
Normalmente al redactar la discusin, se descubren aspectos que deberan incluirse en
el marco terico.
Es la respuesta a la pregunta de investigacin planteada en el objetivo o bien, lo que se
saca como conocimiento objetivo tras la discusin. Por ejemplo, ante el objetivo antes
Cuestionario 3,0
ejemplificado, una conclusin podra ser: el agua contaminada no tendra efectos
significativos en la germinacin de las semillas.
Desarrollo de las preguntas que se encuentran al final de la actividad, las respuestas
Referencias bibliogrficas deberan ser precisas al tema que se desarroll en su momento. Previa investigacin en 4.0
los textos de la bibliografa, biblioteca virtual, internet.

Se refiere a la fuente de informacin que permite elaborar el marco terico y la

discusin. Por ms simple que sea la investigacin, SIEMPRE se requiere contrastar lo
desarrollado en el laboratorio respecto a lo que dicen los cientficos que escriben los
libros.
Bibliogrficas En el caso de referencias bibliogrficas se pueden usar libros, revistas cientficas y
eventualmente, enciclopedias especializadas.
1.0
En cualquiera de estos casos, debe sealarse: ttulo, autor (o editor), editorial, pas y
ao de publicacin. Este ltimo dato es vital, pues publicaciones muy antiguas pueden
tener datos errneos o parciales.
Slo se acepta, si se incluye la direccin completa, el nombre de la pgina y la fecha en
De internet que se visit. Debe tenerse presente que en ciencias, es difcil encontrar sitios de
internet en castellano que no merezcan dudas en su contenido.
 PRCTICA N 1

BIOSEGURIDAD

MATERIALES

- Cartulina blanca, amarilla y roja

- Papeles de colores
- Tijera, goma, cinta engomada
- Lpiz, plumones, borrador.

1. INTRODUCCIN

Se define como bioseguridad al conjunto de combinaciones especficas de trabajo, equipo

de seguridad y facilidades diseadas para minimizar la exposicin de los trabajadores y el
ambiente a los agentes infecciosos; es as que las normas de bioseguridad estn
destinadas a reducir el riesgo de transmisin de microorganismos de fuentes reconocidas o
no reconocidas de infeccin en Servicios de Salud vinculadas a accidentes por exposicin
a sangre y fluidos corporales.

Los objetivos de estas normas son establecer:

1. Las medidas de prevencin de accidentes del personal de salud que est

expuesto a sangre y otros fluidos biolgicos.
2. La conducta a seguir frente a un accidente con exposicin a dichos elementos.

Se debe tener presente que debido al desarrollo cientfico tcnico se deben prever
revisiones peridicas de estas normas a los efectos de asegurar la actualizacin de las
mismas.

A continuacin alistamos una serie de medidas e indicaciones de seguridad que deben

tomarse durante las prcticas de laboratorio.

NORMAS PERSONALES

1. Lea con atencin, antes de cada prctica, las indicaciones de su gua. Siga todas las
instrucciones a menos que el profesor realice alguna modificacin.
2. Cada grupo de prcticas se responsabilizar de su zona de trabajo y de su material. Se
trabajar con cuidado y de manera organizada. As mismo se mantendr cada mesa de
trabajo limpia, seca y ordenada.
3. Es obligatorio la utilizacin de mandil que le cubra brazos, piernas, torso y pies. Estn
prohibidos el uso de sandalias, pantalones cortos, faldas, polos cortos, etc. en el
laboratorio. La persona inapropiadamente vestida para trabajar en el laboratorio le ser
negado el ingreso.
4. No deben llevarse las manos a la boca ni a la cara pues pueden estar contaminadas.
5. Si tienes el pelo largo, es conveniente que lo lleves recogido.
6. Est terminantemente prohibido fumar, tomar bebidas ni comidas.
7. En caso de derrame, accidente o dao avise inmediatamente al profesor.
8. Al trmino de cada prctica limpiar el rea de trabajo y lavar los materiales utilizados
con agua de cao. Lavarse las manos meticulosamente con agua y jabn. Finalmente
cerciorares que las llaves de gas y agua estn cerradas.

REACTIVOS QUIMICOS

1. Usar lentes de seguridad cuando trabaje con reactivos qumicos peligrosos que
puedan salpicar o derramarse.
2. Antes de utilizar un compuesto, asegurarse bien de que es el que se necesita, fijarse
bien el rtulo.
3. Como regla general, no coger ningn producto qumico. El profesor o profesora te lo
proporcionar.
4. Nunca devuelva los sobrantes de los productos a los frascos de origen sin consultar
con el profesor.
5. Es muy importante que cuando los productos qumicos de desecho se viertan en la
pila de desage, aunque estn debidamente neutralizados, debe dejarse que circule
por la misma, abundante agua.
6. No tocar con las manos y menos con la boca, los productos qumicos.
7. No pipetear con la boca. Utilizar una bombilla de succin.
8. Los cidos requieren un cuidado especial. Cuando queramos diluirlos, siempre
echaremos el cido sobre agua.
9. Los productos inflamables (gases, alcohol, ter, etc.) deben estar lejos de fuentes de
calor. Si hay que calentar tubos con estos productos, se har al bao Mara, nunca
directamente a la llama.
10. Manipule con precaucin los solventes voltiles e inflamables como el ter, acetona y
metanol. Nunca evapore estos solventes en una hornilla al abierto. Utilice siempre un
sistema de condensacin eficiente.
11. Si se vierte sobre ti cualquier cido o producto corrosivo, lvate inmediatamente con
mucha agua y avisa al profesor.
12. Al preparar cualquier disolucin se colocar en un frasco limpio y rotulado
convenientemente.
13. Encienda fuego en el laboratorio solo si no existen solventes inflamables en la
vecindad. La persona que encienda el fuego debe primero verificar que no exista otra
persona que este trabajando con solventes inflamables en el laboratorio.
 MATERIAL DE VIDRIO

1. Use material de vidrio limpio y no rajado.

2. El vidrio caliente no se diferencia a simple vista del vidrio fro. Para evitar quemaduras
use guantes o trapos.
3. Si tienes que calentar a la llama el contenido de un tubo de ensayo, observa
cuidadosamente estas dos normas: Ten sumo cuidado y ten en cuenta que la boca del
tubo de ensayo no apunte a ningn compaero. Puede hervir el lquido y salir
disparado, por lo que podras ocasionar un accidente. Calienta por el lateral del tubo de
ensayo, nunca por el fondo; agita suavemente.

EQUIPOS ELCTRICOS

1. Manipule cualquier equipo elctrico con las manos secas y asegrese que el rea de
trabajo tambin este seca.
2. Ningn cordn electrifico debe colgar fuera de la mesa de trabajo.
3. Cuando desconecte algn equipo de tomacorriente, jlelo por el enchufe y no por el
cordn.

UTILIZACION DE BALANZAS

1. Cuando se determinan masas de productos qumicos con balanza, se colocar

papel sobre los platos de la misma y si el producto fuera corrosivo, se utilizar una
luna de reloj.
2. Se debe evitar cualquier perturbacin que conduzca a un error, como vibraciones
debidas a golpes, aparatos en funcionamiento, soplar sobre los platos de la balanza,
etc.

MANIPULACIN DE ESPECMENES

1. Manipule los microorganismos crecidos en una placa petri o tubo de cultivo con
extremo cuidado. Siempre utilice tcnicas de esterilidad (a la llama del mechero,
guantes, palillos estriles, etc.).
2. Nunca llevar a la boca plantas o partes de ellas como semillas, frutos y hojas.

2. AGENTES DE RIESGO

Son todas aquellas sustancias u organismos que pueden causar un dao fsico o una
enfermedad a los operadores de salud e incluso puede ser trasmitido a los pacientes
(familiares, comunidad):

1. AGENTES BIOLGICOS: transmitidos por contacto directo, ingestin, inhalacin o

inoculacin.
2. AGENTES FSICOS Y MECNICOS: temperatura extremas, radiaciones ionizantes,
contactos elctricos defectuosos, vidrios resquebrajados.
3. AGENTES QUMICOS: corrosivos, txicos, teratognicos, inflamables, explosivos
III. NIVELES DE BIOSEGURIDAD

NIVEL 1:
Agentes no patgenos para el hombre. Ejm.:Bacillus subtilis.
Precauciones para el trabajo: uso del guardapolvo o mandil, el cual cumple la funcin de
aislar nuestra ropa del medio y debe ser quitado antes de abandonar la zona de trabajo
para evitar la contaminacin de las reas externas. Uso de guantes para el manipuleo de
animales y material contaminado, y todos los residuos y animales de experimentacin
deben ser descontaminados antes de su eliminacin.

NIVEL 2:
Microorganismos de riesgo moderado y procedimientos de riesgo moderado. Ej.:Hepatitis
B, Salmonella, Influenza.

Acceso a las reas de riesgo restringido. No debe permitirse el acceso a personas con
riesgo aumentado de infeccin, como embarazadas, nios, ancianos e inmunodeprimidas o
inmunosuprimidas. En todos los accesos debern figurar seales de riesgo biolgico, as
como los requerimientos para el ingreso, adems del nombre, telfono y direccin del
responsable del laboratorio.

El personal debe conocer perfectamente el riesgo y estar vacunado; saber la forma de

prevenir y actuar en un posible accidente.

Precauciones para el trabajo: adems de las precauciones tomadas en el nivel anterior,

evitar, hasta donde sea posible, el uso de jeringas y agujas, y de ser imprescindible,
debern descartarse en un recipiente a prueba de pinchazos y luego procederse a su
descontaminacin. Nunca se reenvainarn las agujas ni se doblarn.

Debern evitarse las prcticas que generen aerosoles y cuando stas sean necesarias se
efectuarn con la proteccin adecuada.

Es recomendable que el trabajo se realice en cabinas de flujo laminar de seguridad

biolgica. Por ejemplo, un laboratorio de anlisis clnicos.

NIVEL 3:
Microorganismos que pueden causar la muerte o aquellos de riesgo moderado pero donde
los procedimientos de trabajo incluyen alto riesgo de infeccin (aerosoles).
Ej.: Mycobacterium tuberculosis, Brucella, virus oncognicos, HIV en alta concentracin.

Adems de las precauciones y medidas de seguridad tomadas para un rea de Nivel 2

deberemos considerar lo siguiente:.
Restringir el acceso al personal que no est directamente involucrado en las tareas y
llevar un registro de las visitas y del personal de servicios, as como de los accidentes
ocurridos.
Tomar muestras de suero, iniciales y peridicas, a todo personal para conocer posibles
contaminaciones.
Las superficies de trabajo se limpiarn y desinfectarn al finalizar cada tarea. Pero a
todo esto deben agregarse barreras de contencin fsica, como el trabajo en cabinas de
seguridad, el uso de indumentaria protectora (bata, mscaras, respiradores, guantes,
etc.) y sistemas de proteccin contra los aerosoles con las tapas de seguridad y rotores
sellados en centrfugas, cajas de contencin para el alojamiento de animales infectados
o filtros HEPA (High Efficiency Particulate Air) interpuestos en las lneas de vaco.
NIVEL 4:
Microorganismos exticos y/o altamente peligrosos cuyo manipuleo involucre alto riesgo
para la vida. Ej.: Virus Lassa, Virus Hanta, Antrax, Machupo, Junn.
Finalmente, para el trabajo con microorganismos de alta peligrosidad deber contarse con
laboratorios especiales de mxima seguridad, donde existan barreras de aire con el
exterior, donde es necesario ducharse y cambiarse ntegramente de ropa al ingreso y a la
salida y en los que se trabaja en cabinas de alta seguridad.

La indumentaria del personal deber ser con vestimentas completamente aisladas del
medio, uso de respiradores conectados a tanques de oxgeno e intercomunicadores.
Por otra parte, el pasaje de material limpio y contaminado se realiza a travs de canales
especiales muy controlados y donde puede efectuarse la descontaminacin.

IV. RIESGOS DE INFECCIN

En este caso se considera la ocupacin del personal de salud y va en orden decreciente.

Encontramos tres categoras siendo la de mayor riesgo el grupo I:

GRUPO I: se encuentra el personal con alto riesgo de infeccin; encontramos a los que
laboran en el rea de microbiologa, banco de sangre y derivados, ciruga, hemodilisis.
OBLIGATORIO uso de proteccin de barrera

GRUPO II: encontramos al personal que accidentalmente puede exponerse a la infeccin;

no siendo su labor primaria manipular secreciones, sangre y/o derivados. Encontramos a
las enfermeras, odontlogos, mdicos, personal de anatoma patolgica y personal de
limpieza

GRUPO III: personal cuya tarea no aplica riesgo de exposicin, pese a estar en contacto
con pacientes. Aqu ubicamos al personal de radiologa, camilleros, ascensoristas,
personal de siquiatra o sicologa, administrativo, nutricin.
 ACTIVIDADES

1. Identifique el smbolo de bioseguridad.

2. Identifique letreros sealizadores de bioseguridad.

 GESTIN DE RESIDUOS SLIDOS HOSPITALARIOS

En el Per, la promulgacin de normas legales y de documentos de orientacin ambiental

viene promoviendo el establecimiento de lineamientos y herramientas de gestin
ambiental. Dentro de este marco, los establecimientos de salud tambin se encuentran
trabajando de manera integral en el desarrollo de sistemas de gestin de los residuos para
beneficio de pacientes, trabajadores y poblacin, as como del medio ambiente.

Los residuos hospitalarios pueden dividirse en:

a) Residuos Alimenticios:
Todo material alimenticio que proviene directamente de la clnica, comedor de empleados y
puestos de alimentos dentro de la clnica u hospital.

b) Residuos Comunes: Toda material proveniente de oficinas, salas de espera, salas de

cmputos, biblioteca, jardines, etc. Se incluyen papeles, cenizas, plsticos, residuos del
barrido, residuos de podas, flores, arbustos y similares.

c) Residuos Peligrosos: Todo material que proviene de reas de atencin y diagnstico

de los enfermos y que estn impregnados de sangre o excretas humanas, as como los
residuos de laboratorio de microbiologas y los materiales desechables punzocortantes,
empleados en las salas de ciruga, inyectables y odontologa.

d) Residuos Especiales: Son desechos de material de rayos X, residuos farmacuticos o

qumicos, lquidos inflamables utilizados en el mantenimiento.

MANEJO DE RESIDUOS

Residuos Peligrosos (biocontaminantes) Categora A

Bolsa Roja
Tipo A1: biolgico
Tipo A2: Sangre y hemodilisis
Tipo A3: Quirrgico anatmico patolgico
Tipo A4: Punzo cortantes
Tipo A5: Cadveres de animales contaminados
Tipo A6: Asistencia a pacientes

Residuos Especiales Categora B

Bolsa Amarilla
Tipo B1: radioactivos
Tipo B2: Farmacuticos
Tipo B3: Qumicos

Residuos Comunes Categora C

Bolsa Negra
TRATAMIENTO

Material Punzo cortante

Empleo de recipientes con las siguientes caractersticas:

Recipientes de plstico duro o metal
Abertura tipo alcanca
Capacidad no mayor de dos litros
Rotulados
 Llenar slo hasta sus partes
Desinfeccin qumica: hipoclorito de sodio 10%

Almacenamiento Primario

Almacenamiento en la misma fuente de produccin de los residuos. Al cerrar la bolsa no

exponerse al flujo de aire que se elimina, no presionarlas.Los recipientes deben tener las
siguientes caractersticas:
Hermticos
Resistentes
Tamao adecuado
Superficie lisa
Identificacin con los colores establecidos
Compatibles con desinfectantes
Capacidad adecuada

Almacenamiento Secundario

Ubicado en el servicio, el cual debe contar con un ambiente acondicionado para este
almacenamiento.

El ambiente debe estar ubicado en un rea que no sea transitada por las pacientes y que
facilite la remocin

Los residuos se almacenarn por un perodo no mayos a 10 horas, a fin de evitar

acumulaciones.

Durante la recoleccin interna se debe tener en cuenta:

Horarios para cada tipo de residuo
Evitar la coincidencia con el flujo de personas, ropa,
alimentos y otros materiales
Usar rutas especficas sealizadas
En caso de derrames, limpiar y desinfectar el rea
inmediatamente.

Almacenamiento Terciario

Se da en el depsito temporal final y debe tenerse en cuenta:

Infraestructura
Clasificacin de espacios por tipo de residuo
Existencia del smbolo de bioseguridad
Limpieza y desinfeccin diaria del ambiente.

ACTIVIDADES

1. Identifique las posibles fuentes de generacin de residuos slidos peligrosos y

especiales en el campus universitario.

2. Haga una tabla resumen con la clasificacin de los residuos hospitalarios, en el Per,
que contenga: categora, color, smbolo y una breve definicin.
 CUESTIONARIO

1. Da cuatro ejemplos de cada uno de los agentes de riesgo que pueden causar una
enfermedad o dao fsico en un laboratorio.

2. A qu agentes de riesgo estaras expuesto como futuro profesional de salud?.

Explique Por qu?

3. El virus del nbola ha vuelto a reemerger en Africa, si llegar a Per Qu medidas

tomara y que nivel de bioseguridad le dara?
 PRCTICA N 2

DETERMINACIN DE LA ACIDEZ O ALCALINIDAD DE LAS SUSTANCIAS DE USO COMN

INTRODUCCIN

Un aspecto importante en cualquier reaccin biolgica es la acidez o alcalinidad de las

sustancias o del medio en que se desarrollan, por ejemplo nuestra digestin se desarrolla
principalmente en un medio cido, producto de los jugos gstricos. Unos de los mtodos
ms comunes para determinar esta condicin es el uso del papel tornasol, el cual esta
impregnado de una solucin que cambia o vira de color al estar en presencia de una
muestra cida o alcalina. As tenemos el papel tornasol azul el cual vira a rojo en
presencia de sustancias cidas y el papel tornasol rojo el cual vira a azul en presencia de
sustancias alcalinas o bsicas.

Tenemos muchas sustancias llamadas indicadoras, bases o cidos dbiles que, nos
sirven para determinar la acidez o alcalinidad de las sustancias, como la Fenoftaleina o
instrumentos que nos indican el valor de pH, exacto denominados potencimetros o
determinantes del potencial hidrgeno.

MATERIALES

- Pinza
- Tijera
- Papel tornasol azul y rojo
- Agua destilada
- Goteros
- Muestras:
- 5 cm3 de Leche materna
- 5 cm3 de Bicarbonato de sodio
- 5 cm3 de Detergente
- 5 cm3 de Gaseosa negra
- 5 cm3 de Gaseosa blanca
- 5 cm3 de Gaseosa de color
- 5 cm3 de Jugo de limn
- 5 cm3 de Agua sin gas
- 5 cm3 de Agua con gas
- 5 cm3 de Blanqueador (leja)
- 5 cm3 de Cerveza

PROCEDIMIENTO

Cortar el papel tornasol en tiras pequeas y destinar una seccin de papel tornasol
azul y de rojo para cada muestra, tomarlo con una pinza limpia y seca por uno de
los extremos y sumergirlo en la muestra problema y observar si es que el papel
tornasol vira de color esto quiere decir si hay cambio en la coloracin. Lavar la
pinza con agua destilada cada vez que se cambie de sustancia y de tipo de papel.
Registrar sus resultados.

CUESTIONARIO

1. Mencione qu otras sustancias se pueden emplear para determinar la

acidez o alcalinidad de una muestra.
2. Qu es el potencimetro?
3. En el campo de la salud humana, cul es la importancia de conocer la
acidez o alcalinidad de una muestra?
4 Averiguar el pH de la sangre, saliva, orina, leche materna y semen.

16
 PRCTICA N 3

BIOMOLECULAS EN LOS SERES VIVOS IDENTIFICACION DE

CARBOHIDRATOS, LPIDOS Y PROTENAS

MATERIALES PARA CARBOHIDRATOS

- Tubos de prueba
- Etiquetas o lpiz de cara
- Goteros
- Reactivo de Molish
- Tubrculo de papa
- Pipetas
- Gradillas
- Cocina elctrica o mecheros
- Agua destilada
- Solucin de glucosa al 1%
- Solucin de fructuosa al 1 %
- cido sulfrico concentrado
- Solucin de maltosa al 1%
- Solucin de sacarosa al 1%
- Solucin de almidn al 1%
- Alcohol
- Lugol
- Papa pequea
- Cuchillo o bistur

MATERIALES PARA LPIDOS

- Tubos de ensayo
- Aceite comestible
- Gradillas
- Pipetas

17
- Agua destilada
- Sudn III

MATERIALES PARA PROTENAS

- Solucin de clara de huevo al 10%

- Reactivo de biuret

INTRODUCCIN

Los carbohidratos son compuestos qumicos formados por C, H y O. Pueden

definirse como derivados aldehdos o cetnicos de alcoholes polihidrolados.
Constituyen para los seres vivos por su poder energtico una de las fuentes
energticas de mas importancia. Los vegetales tales como: la caa de azcar,
las frutas, las papas, las yucas, zanahoria, remolacha, etc lo sintetizan por
medio del proceso de fotosntesis, los animales lo reciben en su dieta y
posteriormente lo transforman y lo almacenan o lo oxidan
Los carbohidratos se clasifican en:

1. Monosacridos: Llamados tambin azcares simples, estn formados por

una unidad de polihidroxialdehdo o polihidroxiacetona. Corresponden a la
frmula emprica (CH 2O) n en la que n=3 o ms de 3. los ms importantes
son las pentosas (ribosa) y las hexosas (glucosa, fructosa, galactosa).
Todos son reductores.

2. Disacridos: Estn constituidos por dos monosacridos que se unen

mediante enlace glucosdico: disacridos reductores (maltosa y lactosa);
no reductores (sacarosa).

18
3. Polisacridos: Son compuestos formados por muchos monosacridos
unidos mediante enlaces glucosdicos. Polisacridos estructurales
(celulosa).

Los lpidos son compuestos orgnicos constituidos por C, H, O, pudiendo contener

adems P y N. Comprenden una serie de sustancias qumicas muy heterogneas
con pocas caracterstica comunes, pero que bastan para la formacin de este
grupo.

Estas caractersticas comunes son:

- No ser solubles en agua.
- Ser solubles en disolventes orgnicos, es decir, no polares, como acetona, ter,
el cloroformo, sulfuro de carbono, metanol, etc.

Los Lpidos son importantes como combustibles y porque constituyen parte de la

estructura de la membrana plasmtica.

Las protenas son principios inmediatos de tipo orgnico constitudos bsicamente

por C,H,O y N; suelen contener adems S y, con una frecuencia menor P, Fe, Cu,
Mg, etc; estn formados por polmeros de aminocidos. Estos elementos
constituyen unidades monomericas denominadas aminocidos (20) ordenados en
diversas secuencias o estructuras primaria (lineal), secundaria (transporte),
terciaria y cuaternaria.

El nombre de protenas significa LO PRIMERO, LO MAS IMPORTANTE, con

ello se trata de magnificar el valor biolgico de las protenas y las funciones mas
importantes que cumplen en los organismos vivos, los msculos, la piel;
compuestos de la sangre, los rganos, tendones, huesos; en fin, todas las clulas
contienen protenas, tambin la sntesis de hormonas y enzimas es posible
solamente en presencia de protenas, lo que se resume en la expresin NO HAY

19
VIDA SIN PROTENAS. Son ejemplos de protenas: las enzimas, la hemoglobina,
la albmina, la queratina, el colgeno, etc.

DETERMINACION DE CARBOHIDRATOS

FUNDAMENTO

Por accin deshidratante del cido sulfrico, los glcidos dan derivados del
furfural; posteriormente estos derivados en presencia del alfa naftol del reactivo
de Molish, formarn un compuesto coloreado.

MTODO

Proceder de acuerdo al cuadro siguiente. El cido sulfrico se agrega

lentamente por la pared del tubo y sin agitar, despus de haber vertido todos
los reactivos. Marque o etiquete los tubos para poder identificarlo
posteriormente.

La reaccin positiva se obtiene con la formacin de un anillo color violeta.

TUBO N 1 2 3 4

Glcido 1 ml. Glucosa Fructuosa Sacarosa Almidn

Reactivo de Molish 1 gota 1 gota 1 gota 1 gota

Acido sulfrico Concentrado 1 ml. 1 ml. 1 ml. 1 ml.

RESULTADOS OBTENIDOS

RECONOCIMIENTO DEL ALMIDON POR REACCION DEL LUGOL

La asociacin del almidn con el lugol es caracterstica, y se debe a que la

solucin yodo-yodurada (lugol) puede formar compuestos de absorcin con los

20
enlaces glucosdicos 1,4 presentes en los polisacridos. La coloracin obtenida
depende de la estructura macromolecular del polisacrido y del enlace
glucosdico formado, siendo para el caso del almidn de color azul.

PROCEDIMIENTO

- En un recipiente con agua destilada rallar un tubrculo de papa.

- Colocar en un tubo de prueba 5 ml de esta solucin.
- Aadir gotas de solucin de lugol.
- Observar la aparicin del color caracterstico.

RECONOCIMIENTO DE LPIDOS

- Colocar en un tubo de ensayo 2 mililitros de aceite comestible.

- Agregar 10 gotas de sudan III

- Visualizar el cambio de coloracin de tincin selectiva

RECONOCIMIENTO DE PROTENAS

- Colocar 2 mililitros de solucin de albumina al 10% en un tubo de

ensayo.

- Agregar 1 mililitro del reactivo de Biuret.

- Visualizar la formacin de un complejo de coloracin violceo.

21
 CUESTIONARIO

1. Qu es el reactivo de Mollish?
2. Fundamente la reaccin del almidn con el lugol.
3. Qu otras pruebas o reacciones se pueden utilizar para identificar
monosacridos, disacridos, polisacridos. Explique el fundamento de cada
una de ellas.
4. Explique el fundamento de reaccin del Sudn en los lpidos.
5. De qu manera participan los lpidos en la estructura celular?
6. Por qu los lpidos no se disuelven en el agua?
7. Nombre tres productos protecos comunes.
8. Haga una Tabla donde se clasifique a los aminocidos.

22
 PRCTICA N 4

BIOMOLECULAS EN LOS SERES VIVOS IDENTIFICACION DEL ADN

MATERIALES

- 500ml de jabn lquido

- 500g de sal comn
- Alcohol isoproplico al 70%
- 1 L de agua mineral sin gas
-
- 01 cuchara
- 03 Vasos de precipitacin de 500ml
- 02 baguetas de vidrio

INTRODUCCION

El DNA es un polmero de desoxiribonucletidos, siendo en eucariotes el

componente de la cromatina o material gentico, encontrndose asociado a
protenas tipo histonas, protaminas y en menor proporcin con protenas de tipo
cidas. Estas nucleoprotenas precipitan en soluciones salinas diluidas, pero son
solubles en soluciones salinas concentradas. Las protenas asociadas al DNA
pueden ser extradas con soluciones cidas, pero stas podran daar la
estructura de la hebra de tal suerte que lo que se prefiere es una extraccin
utilizando solventes orgnicos, como el cloroformo, el cual extrae protenas
dejando insoluble al DNA.

El DNA es el material en el cual se almacena la informacin gentica, la cual es

transmitida a travs de las generaciones y puede sufrir cambios en la secuencia
de sus componentes (nucletidos) lo que generan las llamadas mutaciones,
responsables de las enfermedades hereditarias por un lado y de la diversidad
biolgica, por el otro.

23
Desde que Miescher aisl el DNA por primera vez en 1869, se han descrito
diversas tcnicas de extraccin. Sin embargo, todas ellas siguen un mismo
proceso y se diferencian en la forma de homogenizar el tejido (por ejemplo en
el caso de huesos v diente sera la disolucin de los cristales de fosfato de calcio).
La secuencia de extraccin es la siguiente:

1. Liberacin del DNA en forma soluble por medio de la destruccin de los

sistemas membranosos de los tejidos (membrana celular y nuclear).
2. Separacin de los complejos de nucleoprotena por denaturacin de la parte
proteica.
3. Separacin del DNA de Ias otras macromolcuias por solubilidad diferencial.
4. Precipitacin del DNA por insolubilidad en alcoholes.

2. PROCEDIMIENTO

1. Mezclar en el vaso de precipitacin tres cucharadas de la sal con el agua

mineral hasta disolverse.
2. Colocar unos 50ml de la mezcla en otro vaso de precipitacin.
3. Tomar un sorbo y realizar un enjuague bucal con la mezcla.
4. Recuperar el enjuague bucal en el vaso de precipitacin.
5. Colocar 5ml del jabn lquido en el vaso con el enjuague bucal y mezclar con
una bagueta.
6. En otro vaso de precipitacin verter 100l de alcohol isoproplico helado.
7. Agregar 5 gotas de lugol y mezclar con el vaso de precipitacin con el alcohol
isoporplico helado.
8. Verter la mitad de esta ltima mezcla suavemente sobre el vaso de
precipitacin del vaso del Paso 5 con el enjuague bucal y mezclar con la
bagueta suavemente.
9. Esperar 5 minutos hasta que se formen finas hebras de ADN.

24
 CUESTIONARIO

1. Por qu es importante hacer el giro de la bagueta siempre en el mismo

sentido?
2. Qu es lo que aprendi Ud. de las propiedades del DNA durante este
experimento?
3. Qu carga tiene el ADN?
4. Cules son la diferencias entre el ADN y el ARN?
5. Cul es la unidad bsica de los cidos nucleicos?
6. Si se somete a altas temperaturas el ADN, Qu suceder?

25
 PRCTICA N 5

MICROSCOPIA

MATERIALES

- Microscopio compuesto con aumentos de 5X, 10X, 100X

- Aceite de inmersin
- Lminas portaobjetos
- Laminillas
- Papel lente
- Gotero
- Tijeras
- Estilete
- Microscopio compuesto con aumentos de 5X, 10X y 100X.
- Hebras de hilo

INTRODUCCIN

La invencin del microscopio se atribuye a Johannes y Zacharias Jansen (1590) y

el descubrimiento de la estructura celular de los organismos a Robert Hooke
(1665). Posteriormente, en 1683 y con un microscopio muy rudimentario
Leeuwenhoek descubri un universo enmarcado slo por decenas de
micrmetros. Desde aquel entonces, el perfeccionamiento continuo al microscopio
ha permitido a la Ciencia profundizar cada vez ms en el conocimiento de la
ultraestructura celular y de las relaciones intercelulares.

Microscopio compuesto

El microscopio es un instrumento ptico que se compone de una serie de lentes

para conseguir imgenes aumentadas de objetos diminutos que por su extrema
pequeez no son visibles al ojo humano.

El microscopio compuesto est constituido de un SISTEMA OPTICO destinado a

obtener una imagen aumentada del objeto, un SISTEMA MECANICO que sostiene
los distintos elementos pticos y los objetos que se van a examinar y un SISTEMA
DE ILUMINACIN.

CARACTERISTICAS DEL MICROSCOPIO

Dado que la imagen del microscpio no es real sino virtual, se han determinado
algunos trminos de medida microscpica:

En cualquier microscopio el poder de resolucin define su rendimiento ptico,

26
porque es su capacidad para ver como separados dos puntos que realmente lo
estn pero que nuestro ojo slo puede ver como una entidad nica (es decir es su
capacidad de entregar imgenes bien ntidas).

El mximo poder de resolucin del microscopio ptico es de 0,2 micrmetros(0,2

m), debido a que la longitud de onda de la luz utilizada (400-700 m) es un factor
limitante. El ojo humano tiene un poder de resolucin de aproximadamente 100
micrmetros.

El lmite de resolucin puede definirse como la distancia mnima que debe existir
entre dos puntos para que se puedan distinguir como separados.
Recuerda: A menor lmite de resolucin mayor ser el poder de resolucin

Resolucin y magnificacin Mximas:

Instrumento ptico Resolucin Magnificacin
Ojo humano 0,1 mm
Microscopio ptico 0,2 u 2500
Microscopio electrnico 0,1 nm 1000 000

Objetivo

Reconocer las partes del microscopio ptico. -Conocer su utilizacin para la

observacin de distintas muestras biolgicas.

Mtodo

Se reconocern las partes de un microscopio ptico. Sealar las partes del

mismo en el dibujo adjunto.

1. SISTEMA OPTICO. El sistema ptico est constituido por:

Objetivos: sistema de lentes convergentes que acta como una lente que se
encuentran montados en el revolver. Lo usual es que cada microscopio tenga
cuatro objetivos de diferentes aumentos ( 4x, 10x, 40x, 100x) los que se clasifican
en:

Objetivos en seco: en los que el aire se interpone entre la lente y la preparacin.

Objetivos de inmersin: en el cual un lquido ( aceite) se interpone entre la lente

y la preparacin.

Ocular: El ocular es una lente convergente que recoge la imagen intermedia

producida por el objetivo y forma una nueva imagen virtual, derecha, y amplificada

27
un cierto nmero de veces (X veces, segn se indica en el propio ocular). Los
aumentos ms comunes son 10X y 16X.

2. SISTEMA DE ILUMINACIN

Condensador: Sistemas de lentes convergentes que concentra el haz de luz

sobre la preparacin.

Diafragma: Sirve para regular la cantidad de luz que llega a la preparacin.

Fuente de luz: Puede ser natural o artificial (ampolleta).

Portafiltro: Opcional, sirve para colocar filtro de distintos colores para mejorar el
contraste.

3. SISTEMA MECANICO

Tubo ptico: Cilndrico ahuecado destinado a llevar el ocular en su extremo

superior y los objetivos montados en el revlver en su extremo inferior. La longitud
del tubo debe ser siempre precisa.

Revlver: Pieza metlica situada en la parte inferior del tubo que por rotacin
sita los diferentes objetivos en posicin de trabajo.

Platina: Superficie plana con una perforacin central para permitir el paso de la luz
hacia preparacin. Posee un carro que sostiene la preparacin y que puede
desplazarla hacia delante y hacia el lado izquierdo o hacia el lado derecho.

Tornillo Macromtrico: Mecanismo de enfoque de avance rpido.

Tornillo Micromtrico: Mecanismo de enfoque con precisin o ajuste fino.

Base o Pie: Estructura slida y pesada que sostiene y da estabilidad a todo el

instrumento.

Columna: Vstago vertical que se articula con la base y con el tubo del
microscopio y lleva el mecanismo de movimiento del mismo. Manejo del
microscopio ptico.

MTODO

1. Colocar el objetivo de menor aumento en posicin de empleo y bajar la platina

completamente.
2. Colocar un pedazo de hoja de papel con la letra A sobre la platina sujetndola
con las pinzas metlicas.
3. Comenzar la observacin con objetivo de menor aumento e ir aumento.

28
4. Para realizar el enfoque:
a. Acercar al mximo la lente del objetivo a la preparacin, empleando el tornillo
macromtrico. Esto debe hacerse mirando directamente y no a travs del
ocular, ya que se corre el riesgo de incrustar el objetivo en la preparacin
pudindose daar alguno de ellos o ambos.
b. Mirando, ahora s, a travs de los oculares, ir separando lentamente el objetivo
de la preparacin con el macromtrico y, cuando se observe algo ntido la
muestra, girar el micromtrico hasta obtener un enfoque fino.
5. Pasar al siguiente objetivo. La imagen debera estar ya casi enfocada y suele
ser suficiente con mover un poco el micromtrico para lograr el enfoque fino.
6. El empleo del objetivo de inmersin es siempre utilizando aceite de inmersin.
7. Repetir el mismo proceso con hebras de hilo.

CUESTIONARIO

1 Mencione todas las partes del microscopio de la figura:.

29
2. Comparar el microscopio ptico con el microscopio electrnico. Diferencia.
3. Como se forma la imagen en el microscopio ptico?
4. Diga la funcin de:
a) Condensador
b) Diafragma
c) Tornillos macromtrico y micromtrico

30
 PRCTICA N 6

OBSERVACIN Y RECONOCIMIENTO DE CLULAS PROCARIOTES y

EUCARIOTES

MATERIALES PARA CLULAS PROCARIOTAS

- Lminas portaobjetos y cubreobjetos

- 100ml de leche fresca, fresca hervida, y fresca destapada guardada por varios
das.
- 100ml de agua estancada o de florero de varias semanas.
- Microscopio compuesto con aumentos de 10X y 100X
- Bao mara con termostato
- 04 tubos de prueba de 20ml
- 01 vaso de precipitacin de 500ml
- Termmetro
- Papel lente
- Aceite de inmersin
- Papel filtro
- Pinza punta fina
- Estilete
- Azul de metileno
- Lugol
- Piseta con agua destilada
- Guantes
- Papel secante

MATERIALES PARA CLULAS EUCARIOTAS

- Bulbo de cebolla blanca ( A l l i u m c e p a )

- Hojas de Elodea acutica
- Levadura de pan o de cerveza (Saccharomyces cerevisiae)
- Azul de metileno
- Lminas porta y cubreobjetos
- Estiletes
- Bistur con hoja de bistur
- Goteros
- Piseta con agua destilada
- Papel secante

31
INTRODUCCIN

La clula es la unidad bsica de todos los seres vivos. Representa el primer nivel
en el que puede llevarse a cabo la unidad de un sistema vivo completo.

Las bacterias son organismos microscpicos unicelulares que varan en

tamao, sin cloroplastos, ni envoltura nuclear, con pared celular rgida y
adaptadas a vivir en una gran variedad de ambientes. En algunas
circunstancias forman esporas para protegerse del medio. Estos
microorganismos no slo varan en tamao sino tambin en forma. Presentan
formas esfricas, alargadas o espiralasas. Las formas ms comunes son: los
cocos, que son esfricas; los bacilos que tienen forma de bastones rectos o
ligeramente curvados; los vibrios, que presentan forma de coma; los espirilos o
espiroquetas, que tienen forma de espiral o sacacorcho. As mismo la unin de
dos cocos forma un diplococo, la secuencia de cocos en forma de collar origina
lo que se conoce como estreptococo; la agrupacin de cocos en racimo
constituye el estafilococo. De igual modo los bacilos en forma de cadenas como
estreptobacilos.

Figura: Tipos de procariotas.

32
Existen bacterias que son patgenas para el hombre, animales y plantas;
otras son saprfitas (presentes en materia en descomposicin); otras son
inocuas y benficas, tales como las bacterias nitrificantes. Se les encuentra
en diversos medios como el agua, tierra o aire, entre otros.

En 1939, en base a observaciones muy precisas, los alemanes Schleiden y

Schwan, plasmaron la teora celular; que produjo la mayor revolucin del
conocimiento biolgico que se recuerde en la historia de la ciencia.Esta famosa
teora postula que los cuerpos de todos los animales y vegetales estn
formados de clulas y que solo pueden aparecer nuevas clulas por divisin de
las pre-existentes.

De ah que los organismos por muy sencillos que sean, tales como: las
microalgas (microscpicas), bacterias, protozoarios, etc., estn constitudas por
una sola clula; a diferencia de los organismos multicelulares, que estn
formados por una gran cantidad de clulas que se hallan organizadas en
tejidos, rganos y sistemas

A. DEMOSTRACION DE LA EXISTENCIA DE BACTERIAS USANDO UN

INDICADOR OUIMICO (Azul de Metileno)

Las bacterias poseen enzimas reductasas; la accin de una de ellas: La

deshidrogenara, acta sobre el sustrato (leche) liberando hidrgenos que son
captados por el azul de metileno (estado oxidado color azul), reducindose y
pasando a su estado incoloro.

PROCEDIMIENTO

1. Obtener 3 muestras de leche de diferente procedencia (Fresca, fresca

hervida, y fresca destapada guardada por varios das u otro).
2. Vierta 5 ml de leche de cada una de la muestras, en tres tubos diferentes;
etiquete cada tubo indicando la procedencia de la leche.
3. Agregue 5 gotas de azul de metileno a cada tubo.
4. Tape cada uno de los tubos con el tapn de algodn y llvelos a un bao
mara a la temperatura de 37 C por 20 minutos
5. Observe las muestras e interprete, considerando la decoloracin producida
en las muestras.
6. Anote los resultados obtenidos en la tabla siguiente:

33
MUESTRA Tipo de leche RESULTADO
01 Leche fresca
02 Leche fresca hervida
Leche fresca destapada
03
guardada

B. OBSERVACION DE CELULAS VEGETALES (Catfilo o bulbo de cebolla

Allium cepa).

La organizacin de la clula vegetal es bsicamente anloga al de la clula

animal. Sin embargo algunas estructuras son exclusivas de la clula vegetal,
tales como: Pared celular y cloroplastos.

La pared celular es una membrana rgida, de situacin externa a la membrana

plasmtica, est constituda por un retculo de microfibrillas, includas en una
matriz gelatinosa de molculas unidas entre s. Contiene polisacridos
estructurales, tales como la celulosa, que forma la lmina interna; pectina, que
forma la lmina externa; la capa media est constituda por una mezcla de
polisacridos. Los plasmodesmos permiten la comunicacin entre las clulas
adyacentes, la circulacin de lquidos y probablemente permite el intercambio
de sustancias. Proporcionan proteccin y sostn mecnico a la clula y
determina en gran parte la forma de la clula. La pared celular puede sufrir
modificaciones como: la lignificacin, pectinizacin, suberificacin, pueden
cubrirse de una capa de cera, para evitar la excesiva evaporacin.

Figura: Clula epitelial de cebolla teido con azul de metileno.

34
PROCEDIMIENTO

1. Separe una de las capas (Catafilo o bulbo) que forma el bulbo de la cebolla y
con una pinza desprenda la membrana epidrmica que cubre la parte interna
de la cebolla y extindala en el porta objetos.
2. Utilizando el bistur obtenga una porcin de medio centmetro cuadrado,
cbrala con una gota de agua, coloque el cubre objeto y observe. Haga
apuntes grficos de imgenes que capte con ayuda del microscopio.
3. Una vez observado, separe el portaobjeto del microscopio, levante con
cuidado el cubreobjeto y agregue una o dos gotas de azul de metileno,
espere unos minutos. Si hay exceso de colorante elimnelo con papel
secante. Dibuje las imgenes que observa a menor y mayor aumento.

C. OBSERVACION DE CELULAS ANIMALES (Tejidos epiteliales de las

paredes internas de la boca)

La clula eucariota con sus dos elementos fundamentales ncleo y citoplasma,

constituye la unidad biolgica y bsica de los seres vivos. Como elemento
general de las construcciones biolgicas representa el mnimo de estructura
necesaria para que se pueda observarla totalidad de las manifestaciones
caractersticas de la vida incluyendo la reproduccin. Por lo tanto la clula
representa el primer nivel en el que puede llevarse a cabo la unidad de un
sistema vivo completo. De diversa morfologa externa, su anatoma y su modo
de vida, los organismos tienen una uniformidad notable, tanto en el plano
morfolgico como en el fisiolgico, cuando se llega al nivel celular. Examinando
una clula al microscopio esta se observa como llena de un medio transparente
en el cual se identifican diversas organelas.

Figura: Clula epitelial bucal teido con azul de metileno.

35
PROCEDIMIENTO

1. Obtener la muestra con la ayuda de un extremo de una lmina, mediante un

raspado suave del epitelio bucal.
2. Sostenga por un extremo una segunda lmina entre los dedos pulgar e
ndice y forme un ngulo de 45 con la lmina que contiene la muestra.
Luego mueva esta ltima lmina en una sola direccin para que las clulas
queden esparcidas sobre la otra lmina (Frotis).
3. Secar al medio ambiente la lmina que contiene la muestra durante 5 a 10
minutos.
4. Cubrir la muestra con azul de metileno diluido durante 5 minutos.
5. Elimine el exceso de colorante y lave la muestra con agua corriente.
6. Nuevamente secar la lmina al medioambiente.
7. Cuando la lmina est completamente seca, examine con el microscopio el
frotis preparado, primero con el objetivo de menor aumento y posteriormente
con el de mayor aumento. Dibuje las imgenes que observa a menor y mayor
aumento.

D. OBSERVACIN DE LEVADURAS DEL PAN

1. Diluya un poco de levadura de pan (Saccharomyces cerevisiae) en agua.

destilada en un tubo de ensayo.
2. Cubrir la muestra con azul de metileno diluido durante 5 minutos.
3. Observe con el objetivo de mayor aumento.
4. Observe la forma y tamao de estos organismos.

Figura: Clulas de levadura de pan teido con azul de metileno.

36
E. OBSERVACION DE PROTOZOARIOS DE VIDA LIBRE

El reino protista se distingue del reino animal y vegetal por la organizacin

sencilla que presentan, incluyen seres unicelulares y pluricelulares, que
carecen de tejidos que cumplan funciones especializadas. Este reino
comprende a los protozoos y algunos otros que son observados a simple vista.
Los protozoarios son organismos unicelulares. que varan en tamao,
existiendo desde los submicroscpicos hasta los macroscpicos, sin embargo,
son en general organismos pequeos y microscpicos. Habitan diversos
medios y poseen diferentes sistemas de locomocin tales como: flagelos, cilios,
prolongaciones citoplasmticas (pseudpodos).

Figura: Paramecium.
PROCEDIMIENTO

1. Con la pipeta o el gotero, tomar una gota de agua estancada de florero y

colocarla sobre una lmina portaobjetos.
2. Cubrir la gota con una laminilla cubreobjetos.
3. Observar al microscopio.
4. Reconocer protozoarios en movimiento como: Paramecium, Vorticella,
Euglena, etc.
5. Dibujar sus observaciones.

37
 CUESTIONARIO

1. Qu formas de bacterias ha observado?

2. Confeccione un cuadro en el cual se expongan claramente todas las
diferencias existentes entre una clula eucariota y una procariota
(bacteria).
3. Cmo acta un antibitico como la penicilina sobre la bacteria?
4. Haga una lista de cinco bacterias patgenas gram positivas y gram
negativas indicando el nombre de la enfermedad y/o enfermedades que
producen.
5. Haga una lista de cinco protozoarios indicando el nombre de la
enfermedad y/o enfermedades que producen.
6. De acuerdo a tus observaciones y conocimientos qu diferencias
encuentras entre una clula animal y vegetal?
7. En el ncleo qu estructuras pudo distinguir?

38
 PRCTICA N 7

OBSERVACIN DE ORGANELAS CELULARES

MATERIALES
- Hojas de Elodea acutica
- Bulbo de cebolla blanca
- Microscopio compuesto
- Lminas portaobjetos y cubreobjetos
- Goteros
- Estilete
- Hisopos estriles
- Colorante verde de Janus
- Colorante lugol
- Hoja de bistur
- Papel lente
- Pinza punta fina

INTRODUCCIN

Las organelas constituyen los componentes en los cuales se distribuyen las

diversas funciones celulares. El citoplasma se presenta como una sustancia
viscosa, transparente de naturaleza coloidal, compleja. En su masa se puede
observar numerosos corpsculos de naturaleza variada.

Todas las funciones intracelulares (sntesis de protenas, replicacin de DNA y

rutas metablicas en general) son realizadas gracias una compleja organizacin
de las organelas. Una clula eucariota tpica contiene organelas membranosas
(retculo endoplasmtico, aparato de golgi, peroxisomas, mitocondrias, etc.) y
organelas no membranosas (ribosomas, proteosomas, etc.). Todas ellas efectan
una funcin puntual en la clula que le permite su supervivencia y replicacin.

La supervivencia de la clula depende, entre otros factores, de la obtencin de

energa neta. Dicho proceso est a cargo de las mitocondrias y/o de los
cloroplastos. Las mitocondrias se encuentran en mayor nmero en clulas
animales pero tambin pueden presentarse en clulas vegetales, mientras que los
cloroplastos son exclusivos de clulas vegetales y algunas bacterias fotosintticas.
Las mitocondrias oxidan molculas orgnicas utilizando oxgeno del aire como
aceptor de electrones y forman ATP. Los cloroplastos capturan energa de la luz y
la transforman en ATP mediante el proceso denominado fotosntesis.

39
A. OBSERVACIN DE ORGANELAS CELULARES

1. Coloque una gota de agua en el centro de la lmina portaobjetos.

2. Con una pinza desprenda una porcin de la epidermis de la cara interna de un
catfilo de cebolla. Deber ser transparente.
3. Coloque el trozo de epidermis sobre la gota de lugol y cubra suavemente con
la laminilla de manera que no queden bolsas de aire. Cuide que la epidermis
no se arrugue ni se doble.
4. Observe con el objetivo de mayor aumento.

Figura: Clulas epiteliales de cebolla teidos con lugol.

B. OBSERVACIN DE MITOCONDRIAS

1. Obtenga la muestra mediante un raspado suave de la cavidad bucal.

2. Realice el frotis en la forma conocida y dejar secar al ambiente.
3. Cubra la muestra con colorante Verde de Janus durante 5 minutos.
4. Elimine el exceso de colorante y deje secar al medio ambiente.
5. Observe al microscopio, identifique las mitocondrias, describa la forma y
esquematice.

40
 Figura: Clulas epiteliales bucales teidos con azul de metileno.

C. OBSERVACIN DE CLOROPLASTOS
1. Del extremo de una rama en crecimiento de la Elodea, seleccione una hoja
joven.
2. Con la pinza, coloque la hoja sobre una lmina portaobjetos.
3. Agregue una gota de agua.
4. Cubra la muestra con la laminilla.
5. Observe al microscopio, identifique los cloroplastos, describa la forma y
esquematice.

Figura: Clulas epiteliales de cebolla con cloroplastos.

41
 CUESTIONARIO

1. En las clulas epidrmicas de cebolla, Qu estructura observ en el

interior del ncleo? Cul es su funcin?
2. Indique qu organelas son propias de clula vegetal y cules son propias
de clula animal.
3. En las clulas epiteliales bicales Cuntos ncleos y nucleolos observ por
clula?
4. Por qu se utiliza colorantes bsicos para teir material gentico?
5. Qu funcin cumplen los cloroplastos y mitocondrias en las clulas
vegetales y animales, respectivamente?

42
 PRCTICA N 8

PERMEABILIDAD CELULAR

MATERIALES

- Hojas de Elodea
- Lminas porta y cubreobjetos
- Lapicero marcador indelebre fino
- Solucin NaCl al 0,2%; 0,9% (Suero fisiolgico) y 5,0%
- Pinzas finas
- 10 tubos de prueba
- Gradilla para tubos probeta
- Probeta graduada de 20ml
- Estiletes
- 5 Lancetas de puncin hematlogicas estriles
- 3 Goteros
- Piseta con agua destilada
- Papel lente
- Microscopio compuesto
- Papel toalla

INTRODUCCIN

Las clulas tienen una membrana celular que regula el paso de materiales entre
las clulas y su ambiente. El paso de estos materiales es un proceso dinmico. La
membrana celular permite el transporte de sustancias de manera selectiva.
Muchas sustancias, adems del agua, entran a la clula y salen de ella por efecto
de los gradientes de concentracin, aunque slo unas cuantas (CO2 y O2) puedan
hacerlo tan fcilmente como el agua. Si una membrana celular se deja atravesar
por una sustancia, se dice que es permeable a dicha sustancia. El volumen celular
cambia cuando el agua penetra o sale de la clula por un proceso denominado
osmosis. Como la membrana plasmtica es permeable al agua y a ciertos
solutos, la presin osmtica se mantiene por un mecanismo que regula la
concentracin de las sustancias disueltas en el interior de las clulas.

El agua es importante para los seres vivos; la difusin del agua a travs de la
membrana semipermeable recibe el nombre de smosis. Es importante que las
clulas mantengan el equilibro osmtico con respecto a su medio ambiente.
Cuando la clula se encuentra en un lquido con al misma presin osmtica que
en el interior celular (medio isotnico), no hay movimiento neto de molculas de
agua. Si la concentracin de las sustancias disueltas en el lquido circundante es
mayor que la existente dentro de la clula (medio hipertnico) el agua tiende

43
menos sustancias disueltas que la clula (medio hipotnico), el agua tiende a
entrar a la misma, haciendo que se hinche. Una solucin de NaCl al 0,9% (suero
fisiolgico) es isotnica para la clula humana, ya que normalmente el plasma
sanguneo y todos los lquidos del organismo son isotnicos. Por tanto, la osmosis
es un factor importante para numerosas funciones del organismo.

Una de las funciones de la membrana celular consiste en mantener en

equilibrio la presin osmtica del liquido intracelular con la del lquido
intersticial. Cuando las clulas vegetales son colocadas en una solucin cuya
presin osmtica es similar a la del liquido intracelular (Solucin Isotnica), la
membrana permanece adherida a la pared celulsica y no se modifica. Si la
solucin del medio es ms concentrada (Sol. Hipertnica), la clula pierde agua
y le membrana se separa de la pared celular; lo contrario ocurre cuando la
solucin es menos concentrada (Sol. Hipotnica), la clula se hincha.

A. CON CLULAS VEGETALES: ELODEA

PROCEDIMIENTO

1. Haga tres preparaciones con hoja de Elodea. En una de ellas agregue solucin
de NaCl de: 0,2%; 0,9 Y 5%. Marque las preparaciones.
2. Cubra con la laminilla. Observe cuidadosamente y describa sus observaciones.
3. Esquematice todas sus observaciones.

Figura: esquema de clulas de Elodea acutica en diferentes concentraciones de NaCl.

44
B. CON CLULAS ANIMALES: GLBULOS ROJOS

PROCEDIMIENTO

1. Limpie y desinfecte con alcohol

la pulpa del dedo anular.
2. Pinche con la lanceta
hetalolgica estril y coloque en
cada lmina portaobjeto una
gota de sangre.
3. A cada lmina agregue 3 gotas
de NaCl al 0.2, 0.9 y 5%.
4. Agregue 1ml de cada solucin
de NaCl.
5. Marque cada uno de los
preparados.
6. Observe al microscopio.
7. Describa y esquematice sus observaciones

Figura: Esquema de clulas sanguneas en diferentes concentraciones de NaCl

45
 CUESTIONARIO

1. Defina: Turgencia, plasmlisis, crenacin, hemlisis, osmosis, dilisis.

2. Cmo viaja el oxgeno entre las clulas y la sangre?
3. Qu es una solucin isotnica, hipotnica e hipertnica?.
4. Qu sucedera si a un paciente de transfusin de sangre se le inocula glucosa
al 5% Y si se le inocula agua pura?

46
 PRCTICA N 9

DIVISIN CELULAR (MITOSIS)

MATERIALES

- Races de cebolla germinada por 48 a 72 horas.

- Solucin de Orcena acetoclorhidrica 1%
- Lunas de reloj medianas
- Lminas porta y cubreobjetos
- Papel lente
- papel absorbente
- Pinza de madera
- Estiletes y pinzas finas
- Tijera quirrgica fina
- Papel filtro
- Mechero de alcohol
- Pinza con hoja de bistur
- Piseta con suero fisiolgico
- Guantes
- Microscopio

INTRODUCCIN

Las clulas se reproducen mediante la divisin celular, proceso en el cual el

contenido celular se divide entre las dos clulas hijas. En los organismos
pluricelulares, la divisin celular es la forma mediante la cual el organismo crece
desde una clula nica. Es tambin la manera por la cual los tejidos que se
lesionan o deterioran se reparan y se reponen.

La mitosis es un tipo de divisin celular que distribuye los cromosomas replicados

durante la Interfase, de manera que cada clula hija obtenga una dotacin
completa de cromosomas. Este proceso garantiza la continuidad gentica que de
por resultado clulas hijas idnticas a la progenitora.

La mitosis es la duplicacin y distribucin del material nuclear para formar dos

ncleos hijos Idnticos al progenitor. La duplicacin del material nuclear se
efecta antes del primer indicio de divisin celular. En las fases finales de la
formacin de ncleos hijos, se acompaa de una divisin del citoplasma llamada
citocinesis, para dar lugar a la formacin de dos clulas hijas. La divisin mittica
es un proceso continuo, pero por conveniencia ha sido separado en diversas
fases; cada fase es caracterstica por los cambios celulares producidos.

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Las 4 fases de la mitosis son:

PROFASE: Los centriolos se mueven en direccin a los polos opuestos de la

clula. La cromatina comienza a condensarse progresivamente y los cromosomas
comienzan a visualizarse. Los nucleolos se desorganizan, la envoltura nuclear se
rompe y comienza la formacin del huso mittico.
METAFASE: Los cromosomas se observan claramente, el huso mittico ha
terminado de formarse. Los pares de cromtidas se alinean en el ecuador de la
clula.
ANAFASE: Las dos dotaciones de cromosomas recin formados son atradas
hacia polos opuestos de la clula.
TELOFASE: Los cromosomas hijos (Cromtidas) llegan a los polos y comienzan a
descondensarse. El huso mittico desaparece, se reorganiza la membrana
nuclear, reaparecen los nucleolos. Se completa la citocinesis.

Figura: Fases de la mitosis.

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PROCEDIMIENTO

1. Cultive bulbos de cebolla en un frasco de boca ancha que contenga agua, de

modo que el agua toque la base de la cebolla, durante 48 horas a 72 horas y a
semioscuridad. Renueve el agua cada 24 horas.

2. Con la ayuda de una hoja de bistur corte

el extremo distal de las races
(aproximadamente 3 mm de longitud).
3. Transfiera las races a una luna de reloj y
agregue orcena aceto clorhdrica al 1% por
10 minutos.
4. Caliente la preparacin a la llama del
mechero hasta la emisin de vapores
blancos. No debe hervir el colorante.
5. Deje enfran y repita los pasos 3 y 4 dos
veces ms. Repose la muestra por 15
minutos.
6. Coloque una punta de raz en una lmina
portaobjeto.
7. Agregue una gota de solucin fisiolgica
sobre la punta de la raz.
8. Cubra la muestra con la lamina cubreobjeto
y con el dedo pulgar apretar la muestra
suavemente con la yema de los dedos.
describiendo crculos concntricos para
permitir la extensin del tejido
meristemtico (Squash).
9. Elimine el exceso de colorante con papel
absorbente.
10. Observe al microscopio.
11. Identifique, cuantifiquee y esquematice las
clulas en interfase y de todas las fases de
la mitosis encontradas. Compare.

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 CUESTIONARIO

1. Cul es el objetivo primordial de la mitosis?, Qu tipo de divisin celular es la

mitosis?
2. Explique la citocinesis.
3. Cul de las fases de la mitosis se observa con mayor frecuencia?
4. Cules son las caractersticas ms saltantes de la metafase y anafase?
5. Si se tiene que determinar el nmero de cromosomas de una especie, que fase
de la mitosis se escogera?
6. Por qu hemos tomado muestras de la punta de las raices de cebolla y no,
por ejemplo, de una hoja de la cebolla, que habra resultado ms sencillo?
7. Qu otros tipos de divisin celular conoces (tanto en eucariotas como en
procariotas) que no sean el de la mitosis?
8. Qu ocurrira si la mitosis no tuviese un control (no estuviese regulada) y las
clulas estuvieran continuamente dividindose?

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 PRCTICA N 10

DETERMINACIN DE GRUPOS SANGUNEOS

(SISTEMA ABO Y FACTOR Rh)

MATERIALES

- Kit de sueros anti A, anti B y anti D (anti Rh)

- Lanceta hematolgica de puncin
- Palitos mondadientes
- Alcohol yodado
- Algodn
- Lminas de aglutinacin
- Lminas portaobjeto
- Plumn marcador indelebre
- Microscopio compuesto
- Papel absorbente

INTRODUCCIN

Las series de alelos mltiples mejor establecidas en el humano estn asociados

con los diferentes grupos sanguneos, entre ellos, el sistema ABO. Landsteiner en
1901 observ que ocurra aglutinacin de eritrocitos cuando estos se mezclaban.
Tom muestras de sangre y separ los eritrocitos del plasma, y prepar
soluciones salinas de los eritrocitos. Mezcl cada suero (plasma) con cada una de
las soluciones celulares y observ que en algunas mezclas ocurra aglutinacin y
en otras no. Basndose en esas reacciones, Landsteiner dividi la sangre humana
en 3 grupos: A, B y O. El cuarto y ms raro, fue el grupo sanguneo AB,
descubierto en 1902 por sus discpulos Decastelle y Sturli.

Se descubri que los antgenos portados por los eritrocitos de ciertos individuos,
reaccionaban con los anticuerpos que llevan el plasma de otros. Estas protenas
de superficie de membrana de los glbulos rojos, se distribuyen de la siguiente
forma:

Grupo Genotipo Dona a:

A AA, AO A, AB
B BB, BO B, AB
AB AB AB
O O O

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 Figura: Reaccin de aglutinacin positiva y negativa de los grupos sanguneos.

EL SISTEMA Rh

Descubierto en 1940 por Landsteiner y Weiner, utilizando sangre del mono

Macacus Rhesus. Aparentemente la sangre de la mayora de seres humanos
contiene el antgeno Rh, denominado as en honor al mono; este antgeno es
idntico al presentado por el M. rhesus.

Estas protenas de superficie de membrana de los glbulos rojos, se distribuyen

de la siguiente forma:

Grupo Genotipo Dona a:

Rh + ++, +- Rh +
Rh - -- Rh +, Rh -

Los individuos pueden clasificar en Rh positivo o Rh negativo, segn presenten o

no dicho antgeno.

Figura: Reaccin de aglutinacin del grupo sanguneo Rh.

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PROCEDIMIENTO

1. Marque un lmina de aglutinacin con el plumn indelebre.

2. Limpie con alcohol la yema del dedo medio.
3. Realice una puncin utilizando la lanceta.
4. Coloque 3 gotas de sangre separadas a cierta distancia sobre la superficie de
una lmina de aglutinacin.
5. Agregue un gota de suero Anti-A a la primera gota de sangre, suero Anti-B a la
segunda gota de sangre y suero Anti-D (anti D (anti Rh) a la tercera gota de
sangre, cuidando en todo momento que el gotero no toque las gotas de sangre.
6. Con un palito mondadiente, uno por cada gota de sangre, mezcle suavemente.
7. Deje reposar brevemente y haga la lectura identificando el grupo sanguneo a
que pertenece al observar la aglutinacin.
8. Utilice el mtodo de reconocimiento siguiente:

CUESTIONARIO

1. Teniendo en cuenta que son los eritrocitos del dador los que son aglutinados
por los anticuerpos del receptor: Haga un esquema que muestre todas las
posibilidades de donacin y recepcin de sangre en los diversos grupos
sanguneos.

2. Con respecto al grupo sanguneo ABO, determine los genotipos de la siguiente

pareja:
Varn: tipo B; y su madre tipo O
Mujer: tipo A; y su padre tipo B

3. En un caso de disputa de paternidad, el nio es de tipo O mientras que la madre

es de tipo A. Qu tipo sanguneo excluira a un varn de ser el padre del nio?
Probaran otros grupos sanguneos que un varn concreto es el padre?

4. En el caso de una madre gestante con tipo sanguneo Rh-, cuyo segundo hijo
es tipo Rh+. Qu podra pasar con su gestacin, Qu solucin mdica dara?

5. La mayora de los habitantes del Per son de tipo O. Qu otros grupos

sanguneos existen y dond?

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 REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

1. Ayala, F. Gentica Moderna. Ed. Latinoamericana. Nueva York. 1986.

1. Audesirk y Audesirk. 2003. Biologa. Sexta Edicin. Editorial Prentice Hall. Mexico
2. Baldwin, R. Gentica Elemental. 1era. Ed. Ed. Limusa. 1983.
3. Baker. JW Allen. E.G. 1980. Biologa e investigacin cientfica. Ed. Fondo
Educativo Colombia.
4. Bracamonte, O y Toyama, A. Prcticas de Laboratorio de Biologa. Facultad de
Cienias Biolgicas, Universidad Nacional mayor de San Marcos.
5. Bruce. A. 1993. Biologa Molecular de la clula. Ed. Omega-Espaa.
6. Cummings, Michael. Herencia Humana. Interamerica-McGraw-Hill.3era. ed. 1994 y la
5a. Ed. en ingles: Human Heredity, 1999.
7. De Robertis 1992. Biologa Celular y Molecular. Ed. Ateneo Argentina.
8. Descailleaux, Manosalva, Mlaga y Yarlequ. Trabajos Experimentales de Biologa
Celular. Manual de Prcticas. Facultad de Ciencias Biolgicas. Universidad Nacional
Mayor de San Marcos.
9. England, Marjorie. Gran Atlas de la vida antes de nacer. Editorial Ocano. 2da. ed.
Barcelona. 2005.
10. Griffiths, A., Gelbart, W., Miller, J. & Lewontin, R. Gentica Moderna. Ed. McGraw-
Hill. 1era. ed. Madrid. 2000.
11. Goodenough, U. Gentica. Ed. Omega. Barcelona. 1981.
12. Guzar-Vsquez, J. Gentica clnica. Ed. El Manual Moderno. 3era. ed. Mxico.
13. Guyenot, Emile. El origen de las especies. Ed. Per Andino. 1era. ed. Lima. 1988.
14. Jenkins, C. Gentica. Mc Graw-Hill Latinoamericana. Mxico. 1992.
15. Kaplan. W.R. 1982. El origen de la vida y la biogentica. Ed. Alambra Espaa.
16. Kimball. J. 1990. Biologa. Ed. Fondo Edu. Interam. Colombia.
17. Klug & Cummings. 1999. Conceptos de Gentica. Quinta Edicin. Editorial Prentice
Hall. Madrid.
18. Macarulla. J., Goi, F. 1990. Biomolculas. Ed. Reviste.Espaa.
19. Mnsua, Jos Luis. 2003. Gentica, Problemas y ejercicios resueltos. Pearson
Prentice Hall. Madrid.
20. Otto. J.H. Towle A. 1991. Biologa Moderna. Mc. Graw Hill. Mxico.
21. Pierce Benjamn. 2006. Gentica, Un enfoque conceptual. Editorial Mdica
Panamericana
22. Stanfield, William. 1992. Gentica. Tercera Edicin. Ediciones Mc Graw Hill. Mexico.
23. Sherman W.I. 1990. Biologa moderna. Ed. Mc. Graw-Hill. Mxico.
24. Singer, M. y Ruiz A.L. 1993. Genes y Genomas una perspectiva cambiante. Ed.
Omega. Espaa.
25. Solomon, Berg y Martin. 2001. Biologa. Quinta Edicin. Ediciones Mc Graw Hill,
Mexico.
26. Stanfield, W. Teora y problemas de gentica. Ed. McGraw-Hill. 2da. Ed. 1984.
27. Stricberger, M. Gentica. 2da. ed. Ed. Omega. Barcelona. 1978.
28. Ville. C. Salomn y E. Martn C. 1993. Biologa Interamericana. Mc. Graw Hill.
Mxico.

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