TIPIFICACIN BACTERIANA

La tipificacin de las bacterias se basa en el estudio de sus caractersticas mediante tcnicas

que oscilan entre las ms sencillas tinciones y los ms complejos estudios moleculares. Una
tcnica til y de bajo costo consiste en la tincin de Gram y posterior observacin de la muestra
mediante el microscopio de luz para estudiar las bacterias, su forma, tipo de agrupacin y color:
grampositivas o gramnegativas. La mayor parte de las bacterias puede ser ubicada en uno de
estos dos grupos o en un tercero, de acuerdo a la cido-alcohol resistencia que presenten
(Ziehl-Neelsen).

Algunas propiedades genticas y fisiolgicas constituyen herramientas utilizadas para definir

algunas caractersticas de las cepas, como los serotipos y biotipos, determinacin de especies
en algunos grupos de bacterias, produccin de toxinas. Los mtodos ms sensibles se basan
en el anlisis del material gentico. Cabe mencionar que stos han diversificado sus objetivos;
se emplean en la identificacin de subgrupos de genes esenciales para el crecimiento,
colonizacin, adhesin e invasin bacterianos (un ejemplo es el IVET - siglas de "in vivo
expression technology"), desarrollada para seleccionar los genes activos nicamente durante la
infeccin).

MORFOLOGA BACTERIANA

Las bacterias que tienen forma esfrica u ovoide se denominan cocos. Y si se tien de azul
con el Gram, se les llama grampositivos. Cuando los cocos se agrupan en cadenas, se les
denomina estreptococos y cuando lo hacen en racimos, se les llama estafilococos; tambin se
pueden agrupar en pares que reciben el nombre de diplococos. Las bacterias en forma de
bastn reciben el nombre de bacilos. Si al teirlos con el Gram quedan de color rojo, se les
denomina gramnegativos. Los bacilos curvados que presentan espirales se llaman espirilos,
rgidos; algunas bacterias en espiral presentan formas fcilmente reconocibles, como
las espiroquetas, semejantes a un tornillo o sacacorchos, flexibles. Las bacterias que carecen
de pared celular tienen gran plasticidad (micoplasmas) y adoptan una variedad de formas. Las
bacterias esfricas tienen un tamao promedio de 1 micrmetro de dimetro, mientras que los
bacilos miden 1.5 de ancho por 6 micrmetros de largo.

Diferentes formas y agrupamientos que presentan las bacterias.

Imagen: Mariana Ruiz, en Wikimedia Commons. Modificada por Molina J.
Ejemplos de formas y tincin bacterianas:

SEM. Escherichia coli. Bacilos cortos gram

SEM. Staphylococcus aureus. Cocos Gram
negativos no esporulados, flagelados.
positivos. CDC/ Matthew J. Arduino, DRPH
CDC/Janice Haney Carr

SEM. Leptospira interrogans.

Campo oscuro. Treponema pallidum. Se le
Borrelia, Leptospira y Treponema conforman las
ubica dentro de las espiroquetas. CDC
familias de espiroquetas patgenas. CDC

Formas de agrupamiento y divisin bacterianos (cocos):

GENTICA BACTERIANA

El genoma bacteriano consiste en uno o ms cromosomas, que contienen los genes

necesarios y una gran variedades de plsmidos que generalmente codifican para genes no
esenciales. El cromosoma est constituido por una doble hebra de DNA circular. Presenta
dominios de superenrrollamiento debido a que se dobla y tuerce para ser almacenado en la
clula, que en promedio, mide 1 micrmetro. Este genoma mide entre 1 - 6 millones de pares
de bases de DNA (es decir, de 1 - 6 Mb).
El nombre nucleoide sirve para identificar a este DNA no confinado por una membrana.
Cuando la clula se encuentra en fase logartmica (de crecimiento rpido) pueden encontrarse
varias copias cromosmicas, completas o parciales. Las bacterias son microorganismos
organismos haploides y se dividen por fisin binaria, cuyo tiempo de generacin varia desde 20
minutos hasta varias horas. Las bacterias pueden intercambian material gentico mediante tres
mecanismos: transformacin, conjugacin y transduccin.

Plsmidos. Algunas bacterias poseen elementos genticos extracromosomales, llamados

plsmidos, son pequeos fragmentos circulares de doble cadena de DNA que se mantienen en
un nmero estable y contienen los genes necesarios para replicarse y para su transferencia a
otras clulas, as como para sintetizar toxinas, algunas estructuras de superficie (adhesinas) y
para la resistencia a antibiticos (plsmidos R).

Bacterifagos, conocidos tambin como "fagos", son parsitos intracelulares (virus) de

bacterias. Estn constituidos por DNA o RNA y protenas. Si lisan a la bacteria infectada se
habla de una infeccin ltica; si se integran al genoma bacteriano y se encuentran en estado
quiescente (profagos con el potencial de producir fagos) se habla de una bacteria en estado
lisognico. Debe considerarse la abundancia de fagos en el planeta, con una estimacin de
>1031 y el hecho de que fagos y las bacterias hospederas coexisten en prcticamente todos
los ecosistemas. Los encuentros entre ambos llevan a la seleccin de fagos evolucionados que
se adaptan en respuesta a las defensas bacterianas.

Transposones e integrones. Los transposones son segmentos de DNA de gran movilidad,

simples o compuestos; dan lugar a mutaciones, ya sea por insercin o prdida de genes o
diseminacin de los mismos entre clulas. Cabe sealar que en los transposones se
encuentran habitualmente los genes que determinan la sntesis de toxinas, factores de
adhesin, virulencia o resistencia a algunos antibiticos. Mientras que los integrones son
elementos genticos capaces de captar y expresar genes en casetes de resistencia a
antibiticos. Tanto los transposones como los integrones pueden estar integrados en plsmidos
y/o en el cromosoma bacteriano.

Islas de patogenicidad. Las islas de patogenicidad son secuencias de DNA que se

caracterizan por contener genes asociados a virulencia y que pueden estar tanto en plsmidos,
como en el cromosoma bacteriano. Poseen tambin elementos genticos mviles, como
transposasa e integrasas, que les permiten insertarse en ciertos sitios dentro del genoma
bacteriano. Tienen un tamao de entre 10 y 500 kpb (miles de pares de bases). Entre los
genes de virulencia asociados a virulencia asociados a estas islas de patogenicidad tenemos:
adherencia, produccin de toxinas, invasividad, resistencia a antibiticos y formacin de
biopelculas.

ESTRUCTURA BSICA

Citoplasma:
En el citoplasma se encuentran todas las enzimas necesarias para divisin y metabolismo
bacterianos, asimismo, cuenta con ribosomas de menor tamao en relacin a clulas
eucariotas, pero no presenta mitocondrias, retculo endoplsmico ni cuerpo de Golgi; las
enzimas para el transporte de electrones se encuentran en la membrana citoplsmica. Los
pigmentos requeridos por bacterias fotosintticas se localizan en vesculas debajo de la
mencionada membrana. Las reservas se observan como grnulos insolubles (azufre,
glucgeno, fosfatos y otros). La base del citoplasma es parecida a un gel en la que se
identifican vitaminas, iones, agua, nutrimentos, desechos, el nucleoide y plsmidos.
 Estructura general bacteriana
BIODIDAC. Modificada.

Pared celular:
Con la tincin de Gram, una proporcin importante de bacterias puede dividirse en dos
grandes grupos: grampositivas (se observan de color azul - debido al colorante cristal violeta) y
gramnegativas (pierden el cristal violeta y conservan la safranina - se aprecian de color rojo o
rosado). La tcnica se basa en las diferencias fsicas fundamentales de la pared celular y
emplea colorantes catinicos (cristal violeta y safranina), que se combinan con elementos
cargados negativamente.

Las bacterias grampositivas cuentan con tres capas externas: cpsula (en algunos casos),
pared celular gruesa y membrana citoplsmica. Las bacterias gramnegativas presentan
cpsula (algunas), una pared celular delgada, membrana externa (que equivale al
lipopolisacrido) y una membrana interna (citoplasmtica).

La pared celular le da forma a la bacteria y su composicin vara entre bacterias. En bacterias

grampositivas, consiste de varias capas de peptidoglucano (formado por los azcares N-
acetilglucosamina ms N-acetilmurmico y un tetrapptido) que retienen el cristal violeta
utilizado en la tincin de Gram; otros componentes de la pared incluyen redes de cido
teicoico y cido lipoteicoico. Las bacterias gramnegativas cuentan con dos membranas (una
externa y una interna) as como una capa delgada de peptidoglucano entre ambas, en el
llamado espacio periplsmico.
 Esquema. Pared celular bacteria gramnegativa. T. Uribarren
Esquema. Pared celular bacteria grampositiva. T. Uribarren B.
B.

La membrana citoplsmica:
Debajo de la pared celular se encuentra la membrana citoplasmtica, la capa ms interna,
compuesta por protenas y fosfolpidos (bicapa lipdica). Sus funciones son la permeabilidad
selectiva y transporte de solutos (la mayor parte de las molculas que la atraviesan no lo hacen
de forma pasiva), la fosforilacin oxidativa en los organismos aerbicos, la liberacin de
enzimas hidrolticas y el reciclamiento de receptores.

Lipopolisacrido (LPS):
Formado por fosfolpidos y protenas de membrana externa. El LPS est constituido por tres
partes bioqumicamente diferentes: una cadena de azcares, el polisacrido llamado antgeno
somtico u O, se utiliza para tipificar cepas bacterianas, una porcin lipdica, el lpido A, que
est anclado a los lpidos de la membrana) y es txica para el humano y animales. Entre
ambos se encuentra el polisacrido central, llamado core.
Los llamados bacilos cido-alcohol resistente (BAAR) como Mycobacterium, presentan una
pared compuesta de una capa muy delgada de peptidoglucano, una gran cantidad de lpidos
(60%), principalmente cidos miclicos, responsables en parte de la acido-alcohol resistencia,
as como de la hidrofobicidad y de la consistencia "de cera" de estos microorganismos. Los
peptidoglucanos les confieren una forma estable e impiden la smosis ltica. La tcnica que se
utiliza para teir estas bacterias, se denomina de Ziehl-Neelsen y es una mezcla de fucsina
bsica y fenol, calor y contraste con azul de metileno; al finalizar la tcnica, los organismos
cido-alcohol resistentes se aprecian rojos, mientras que el fondo se tie de azul.

Espacio periplsmico:
Este espacio que se ubica entre la membrana interna y la membrana externa presente solo en
las bacterias gramnegativas. Contiene protenas de unin para los sustratos especficos,
enzimas proteolticas y quimiorreceptores. Es una solucin densa, con alta concentracin de
macromolculas, y participa e en la regulacin de la osmolaridad con respecto al medio externo

Cpsula y glicoclix:
Es una cubierta de grosor vartiable formada habitualmente por unidades de polisacridos,
protenas o ambos. Si est bien estructurada y se encuentra bien adherida a la clula, se le
denomina cpsula; si por el contrario, tiene estructura mal definida y su adhesin es dbil, se le
conoce como glicoclix. De acuerdo a su estructura qumica, puede ser flexible o rgida. La
rigidez le confiere la caracterstica de una matriz impermeable. Determina la adhesin a
superficies (biopelculas), constituye una barrera de proteccin contra la fagocitosis y los
anticuerpos e impide la desecacin y la accin de otros agentes. Acta como barrera de
difusin ante algunos antibiticos. Ejemplos de bacterias con cpsula son Streptococcus
pneumoniae y Haemophilus influenzae.
 Bacillus cereus. Flagelos. CDC.

Flagelos:
Son apndices filamentosos y muy finos compuestos por la protena flagelina dispuesta en
fibras helicoidales y con apariencia lisa, anclados a la pared celular. Presentan un gancho, que
une el filamento al cuerpo basal (parte motora). Su funcin es el desplazamiento de la clula
mediante movimientos variables de rotacin. Su distribucin es variable, as como su nmero.
Independientemente del mecanismo de locomocin que desplieguen las bacterias, ste les
permite responder en sentido positivo o negativo a gradientes fisicoqumicos (quimiotropismo,
fototropismo). Son muy antignicos.

Pili y Fimbrias:
Estructuras ms delgadas y cortas que los flagelos. Actan como rganos de fijacin entre
clulas (bacteria - bacteria, bacteria - clula eucariota) Tambin se les relaciona con la
formacin de biopelculas y la conjugacin (pilis sexuales). Factores de relevancia en la
colonizacin. Ejemplo: las fimbrias de Streptococcus pyogenes contienen el principal factor de
virulencia, la protena M.

Espora:
La espora es una estructura formada por algunas especies de bacterias grampositivas, por
ejemplo: Clostridium y Bacillus. Es una estructura altamente diferenciada cuyas caractersticas
le confieren gran resistencia ante el medio ambiente y agentes nocivos. En ambientes hostiles
sufre cambios estructurales y metablicos que dan lugar a una clula interna en reposo, la
endospora, que puede ser liberada como una espora. Son altamente resistentes a la
desecacin, calor, luz ultravioleta y agentes qumicos (bacteriocidas).
Son altamente resistentes a la desecacin, calor, luz ultravioleta y agentes qumicos
bacteriocidas.

CRECIMIENTO Y METABOLISMO

La multiplicacin celular es una consecuencia directa del crecimiento y da lugar, en el caso de

las bacterias, a colonias, mediante un sistema de reproduccin asexual denominado divisin
binaria. Los procesos sintticos involucrados en el crecimiento bacteriano incluyen ms de 2
000 reacciones bioqumicas.
La velocidad de crecimiento es el cambio en nmero de bacterias por unidad de tiempo, y se
expresa como el tiempo de generacin, que es el tiempo necesario para que se duplique una
bacteria o una poblacin de ellas.
En un sistema cerrado o cultivo en medio no renovado se obtiene una curva de
crecimiento tpica que se ha dividido en cuatro fases: fase de latencia, fase exponencial, fase
estacionaria y fase de muerte. La fase de latencia se caracteriza por la adaptacin de los
microorganismos, no se presenta cuando el inoculo es nuevo y si el inoculo proviene de un
cultivo viejo, requiere de este periodo de adaptacin. La mayor parte de las bacterias crece de
forma exponencial, aunque hay una serie de condiciones que influyen (nutrimentos en el
medio, temperatura, factores genticos). En la fase estacionaria no hay una modificacin neta
en el nmero de clulas, existe un frgil equilibrio que desaparece eventualmente cuando an
las bacterias metablicamente activas mueren, debido a productos txicos y falta de
nutrimentos (factores presentes en la fase estacionaria) aunados a enzimas liberadas por la
lisis bacteriana.

Produccin de energa:

En las bacterias, la conservacin intracelular de energa tambin ocurre principalmente por

medio de la sntesis de ATP. Los mtodos usados por las bacterias para generar este ATP son
principalmente:

Respiracin aerbica: Proceso metablico en el que el oxgeno molecular es el aceptor final de

electrones. El oxgeno es reducido a agua. Utilizada por bacterias aerbicas.

Respiracin anaerbica: En este proceso, el aceptor final de electrones son otros compuestos,
tales como nitratos o sulfatos. Utilizada por bacterias anaerobias obligadas, aunque algunas,
sobre todo las de mayor importancia mdica, utilizan la fermentacin. Existen las bacterias
facultativas, que pueden utilizar los dos tipos de respiracin aerbica y anaerbica.

Fermentacin: Aqu un intermediario orgnico derivado de un sustrato capaz de ser

fermentado, es el aceptor final de electrones. Un ejemplo: la fermentacin de glucosa (sustrato)
a cido lctico; un producto intermediario, el piruvato, es el aceptor final de electrones

Vnculos.

Nota: En la mayor parte de los casos, el acceso a las editoriales es directo. Ante un vnculo roto, pueden localizar el artculo
seleccionado mediante el ttulo y/o DOI (Digital Object Identifier). La bsqueda puede realizarse mediante Google (por acuerdo
con la DOI Agency). Los artculos pueden descargarse dentro del campus universitario y fuera de l, a travs de los servicios
de la Biblioteca Mdica Digital y la DGB (Direccin General de Bibliotecas), con su clave personal. Adems, contamos con un
amplio directorio de revistas acadmicas en acceso abierto.

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