Viso Geral da Respirao

Do ponto de vista qumico, a respirao vegetal aerbica pode ser

expressa atravs da seguinte reao:

C H O + 12 O 12 CO + H O
12 22 11 2 2 2

Esta expresso simplificada representa uma reao redox acoplada na

qual a sacarose completamente oxidada a CO , enquanto que o oxignio
2

serve como um aceptor final de eltrons, sendo reduzido a gua.

A completa oxidao de uma molcula de sacarose, em condies de
laboratrio, rende uma energia livre correspondente a 5760 kJ. Parte dessa
energia utilizada no metabolismo celular, para transporte ativo de molculas e
para a biossntese de inmeras molculas essenciais ao processo do
desenvolvimento e produo vegetal. Entretanto, o rendimento energtico
final depende da presena ou no do O nas
2 clulas.
A respirao compreende uma sequncia de inmeras reaes metablicas,
em quatro etapas distintas e agrupadas: gliclise, ciclo de Krebs (ciclo do cido
ctrico ou ciclo dos cidos tricarboxlicos ), rota das pentoses fosfato e cadeia
de transporte de eltrons (Fig. 1).

Figura 1: Viso geral da respirao (Taiz; Zeiger, 2012)

Gliclise
Na gliclise, inicialmente, a glicose, um acar de 6 carbonos, dividida em
dois acares de 3 carbonos, que so oxidados e rearranjados para produzir
duas molculas de piruvato, que sero utilizalizadas no Ciclo de Krebs. Alm
disso, a gliclise produz uma pequena quantidade de energia qumica na forma
de ATP e NADH. Este processo no requer oxignio para converter glicose a
piruvato, e o metabolismo glicoltico pode se tornar o principal modo de
produo de energia em tecidos vegetais em baixos nveis de oxignio, por
exemplo, em razes de solos alagados.
 A gliclise consiste de 10 reaes catalizadas por uma srie de enzimas
solveis localizadas no citosol. De maneira geral nas reaes iniciais da
gliclise, a hexose que entra (glicose ou frutose) fosforilada duas vezes e
ento quebrada, produzindo duas molculas de acar com 3 carbonos
(gliceraldedo-3-fosfato). Esta srie de reaes requer gasto de duas molculas
de ATP por glicose e inclui duas das trs reaes irreversveis da rota glicoltica
que so catalizadas por quinases de hexoses (incluindo quinase da glicose e
quinase da frutose) e fosfofrutoquinase, sendo que as reaes da
fosfofrutoquinase um dos pontos de controle da gliclise.

Uma vez formado o gliceraldedo-3-fosfato, a rota glicoltica pode

comear a extrair energia til. A enzima desidrogenase do gliceraldedo-3-
fosfato catalisa a oxidao do aldedo a cido carboxlico, liberando energia
suficiente para permitir a reduo de NAD em NADH e a fosforilao de
+

gliceraldedo-3-fosfato para produzir 1,3-bifosfoglicerato, o qual forte doador

de grupos fosfatos.
No prximo passo, em um processo catalisado pela quinase do
fosfoglicerato, o fosfato do carbono 1 do 1,3-bifosfoglicerato transferido para
uma molcula de ADP, produzindo ATP e 3-fosfoglicerato. Para cada glicose
que entra, 2 ATPs so gerados por esta reao, sendo um para cada molcula
de 1,3-bifosfoglicerato. Este tipo de sntese de ATP se refere a fosforilao a
nvel de substrato, envolvendo a transferncia direta de um fosfato de uma
molcula de substrato para ADP para formar ATP. Esta fosforilao diferente
do mecanismo de sntese de ATP durante a fosforilao oxidativa que usada
pela cadeia de transporte de eltrons, no estdio final da respirao.

O fosfato do 3-fosfoglicerato transferido para o carbono 2 e uma

molcula de gua removida, produzindo fosfoenolpiruvato (PEP). O grupo
fosfato do PEP tambm tem alta energia livre de hidrlise e esta energia livre
faz com que o PEP se torne um excelente doador de fosfato para formao de
ATP. No passo final que a terceira reao irreversvel da gliclise, produz
duas molculas adicionais de ATP para cada hexose que entra na rota (Fig. 1).
 Figura 1: Esquema geral da gliclise (Taiz & Zeiger, 2012)
Fosforilao da glicose
No primeiro passo a glicose ativada para as reaes subsequentes pela
sua fosforilao no C-6, formando glicose 6-fosfato, que ser o doador de
fosfato para o ATP. Esta reao irreversvel sob as condies intracelulares e
catalisada pela hexoquinase:
As quinases so um subclasse das transferases e catalisam a transferncia do
grupo fosforila terminal do ATP para um receptor nucleoflico qualquer. A
hexoquinase alm de catalisar a fosforilao da D-glicose, tambm catalisa de
outras hexoses comuns, como a D-frutose e a D-manose.

Para a hexoquinase ser ativada necessrio que tenha a presena de

Mg , que mascara as cargas negativas do grupo fosforila do ATP e faz do
2+

tomo de fsforo terminal um alvo mais fcil para o ataque nucleoflico por um
grupo -OH da glicose. A hexoquinase sofre ajuste induzido quando se liga a
molcula de glicose, dessa forma, dois domnios da protena aproximam-se
quando o ATP se liga. Esse movimento leva o ATP ligado mais prximo da
molcula de glicose tambm ligada na enzima e bloqueia o acesso de gua (do
solvente) que poderia entrar no stio ativo e hidrolisar as ligaes fosfoanidrido
do ATP. Essa enzima uma protena citoslica e solvel, que est presente em
todas as clulas de todos os organismos.
Converso da glicose 6-fosfato em frutose 6-fosfato
A enzima isomerase da hexose fosfato catalisa a isomerizao reversvel de
uma aldose, glicose 6-fosfato, em cetose, frutose 6-fosfato:
 Como previsto pela variao relativamente pequena da energia livre-
padro, essa reao processa-se facilmente em qualquer das duas direes.
Esta isomerizao tem um papel crtico na qumica global da via glicoltica, uma
vez que o rearranjo dos grupos carbonila e hidroxila nos C-1 e C-2 uma
condio necessria para os dois passos seguintes.
Fosforilao da frutose 6-fosfato em frutose 1,6 bifosfato
Na segunda das duas reaes de ativao da glicolise, a
fosfofrutoquinase-1 (PFK -I) catalisa a transferncia de um grupo fosfato do
ATP para a frutose 6-fosfato para liberar a frutose 1,6-bifosfato:

A reao da PFK-1 essencialmente irreversvel e o primeiro passo

comprometido da via glicoltica, pois a glicose-6-fosfato e a frutose- 6-fosfato
podem ter outros destinos, mas a frutose-1,6-bifosfato dirigida para a
gliclise. A fosfofrutoquinase-l, como a hexoquinase, uma enzima reguladora,
sendo uma das mais complexas. Ela representa o ponto principal de regulao
da gliclise. A atividade da PFK-l aumentada sempre que o suprimento de
ATP da clula se torna baixo ou quando existe um excesso dos produtos da
hidrlise do ATP, ADP e AMP. Essa enzima inibida sempre que a clula tem
amplo suprimento de ATP e quando ela est bem suprida de outros
combustveis como os cidos graxos. Em alguns organismos, a frutose 2,6-
bifosfato (que no deve ser confundida com a frutose 1,6- bifosfato que o
produto da ao da PFK-l) um potente ativador alostrico da
fosfofrutoquinase-l.
Clivagem da frutose 1,6-bifosfato
A enzima aldolase catalisa a condensao reversvel de grupos aldol. A
frutose 1,6-bifosfato quebrada para liberar duas trioses fosfato diferentes, o
gliceraldeido 3-fosfato, uma aldose, e a diidroxiacetona fosfato, uma cetose:

Interconverso das trioses fosfato

Apenas uma das trioses fosfato formada pela aldolase, o gliceraldedo 3-
fosfato, pode ser diretamente degradada nos passos subsequentes da gliclise.
Entretanto, o outro produto, a diidroxiacetona fosfato, rpida e
reversivelmente convertido em gliceraldedo 3-fosfato pela quinta enzima da
sequncia glicoltica, a isomerase da triose fosfato:

Depois da reao da isomerase da triose fosfato, os tomos do C-1, C-2 e

C-3 da glicose inicial tornam-se indistinguveis de C-6, C-5 e C-4,
respectivamente, o que torna possvel o metabolismo completo dos seis
tomos de carbono da molcula da glicose.Esta reao completa a fase
preparatria da gliclise.

Oxidao do gliceraldeido 3-fosfato em 1,3-bifosfoglicerato

O primeiro passo da fase de pagamento da gliclise a converso do
gliceraldedo 3-fosfato em 1,3-bi-fosfoglicerato, catalisado pela desidrogenase
do gliceraldedo 3-fosfato:
 Essa a primeira das duas reaes conservadoras da energia da
gliclise e que no final levam formao do ATP. O grupo aldedo do
gliceraldedo 3-fosfato desidrogenado, no em um grupo carboxila livre, mas
em um anidrido de cido carboxlico com o cido fosfrico. Esse tipo de
anidrido, chamado um acilfosfato, tem energia livre-padro de hidrlise muito
alta (G = -49,3kJ/mol). A maior parte da energia livre de oxidao do grupo
aldedo do gliceraldedo 3-fosfato conservada pela formao do grupo
acilfosfato em C-I do 1,3-bifosfoglicerato. O gliceraldedo 3-fosfato est ligado
de maneira covalente desidrogenase durante a reao catalisada pela
desidrogenase do gliceradedo 3-fosfato.

Transferncia do fosfato do 1,3-bifosfoglicerato para ADP

A enzima fosfogliceratoquinase transfere o grupo fosfato de alta energia
do grupo carboxila do 1,3-bifosfoglicerato para o ADP, formando ATP e 3-
fosfoglicerato:

Juntos, os passos 6 e 7 da gliclise constituem um processo acoplador de

transferncia de energia no qual o intermedirio comum o 1,3-
bifosfoglicerato, ele formado na primeira reao (que endergnica quando
isolada), e na segunda reao (que fortemente exergnica) seu grupo
acilfosfato transferido ao ADP para formar ATP. A soma das duas reaes
gera um energia G = -l2,5kJ/mol, sendo a reao global exergnica. O passo
7 consome o produto do passo 6 (1,3-bifosfoglicerato) e, assim, no equilbrio
dinmico mantm 1,3-bifosfoglicerato em nveis relativamente baixos. O
resultado do acoplamento dessas duas reaes, ambas reversveis nas
condies celulares, que a energia liberada na oxidao de um aldedo a um
grupo carboxilato, conservada pela formao concomitante de ATP com o
emprego de ADP e Pi, A formao de ATP pela transferncia de um grupo
fosfato de um substrato como o 1,3-bifosfoglicerato referida como fosforilao
ao nivel do substrato, para distinguir seu mecanismo daquele da fosforilao
ligada respirao.
Converso da 3-fosfoglicerato em 2-fosfoglicerato
A enzima mutase do fosfoglicerato catalisa a transferncia reversvel do grupo
fosfato entre C-2 e C-3 do glicerato. O on Mg essencial para essa reao:
2+

A reao ocorre em dois passos, um grupo fosforila, inicialmente ligado a

um resduo de histidina no stio ativo da enzima, transferido para o grupo
hidroxila em C-2 do 3-fosfoglicerato, formando 2,3-bifosfoglicerato. O fosfato
em C-3 do 2,3-bifosfoglicerato ento transferido para o mesmo resduo de
histidina da enzima, produzindo 2-fosfoglicerato e regenerando a enzima
fosforilada. Como a enzima inicialmente fosforilada pela transferncia de
fosfato do 2,3-bifosfoglicerato, esse composto funciona como um co-fator; ele
requerido em pequenas quantidades para iniciar o ciclo cataltico e
continuamente regenerado por esse ciclo.

Desidratao do 2-fosfoglicerato em fosfoenol piruvato

A segunda reao glicoltica que gera um composto com alto potencial de

transferncia do grupo fosforila catalisada pela enolase. Essa enzima
promove a remoo reversvel de uma molcula de gua do 2-fosfoglicerato

para liberar fosfoenolpiruvato (PEP):

A respeito da variao relativamente pequena da energia livre-padro
nessa reao, h uma grande diferena da energia livre-padro de hidrlise do
grupo fosforila do reagente e do mesmo grupo do produto. Aquela do 2-
fosfoglicerato (um ster de fosfato de baixa energia) -17,6kJ/mol, e aquela do
fosfoenol piruvato (um composto fosfato de ener gia superalta), -61,9kJ/mol.
Embora o 2-fosfoglicerato e o fosfoenolpiruvato contenham, cada um, perto da
mesma quantidade total de energia, a sada da molcula de gua do 2-
fosfoglicerato provoca a redistribuio da energia interna da molcula e
aumenta muito a energia livre-padro de hidrlise do grupo fosforila.

Transferncia do grupo fosfato do fosfoenolpiruvato para ADP

O ltimo passo na gliclise a transferncia do grupo fosfato do
fosfoenolpiruvato para o ADP, catalisada pela quinase do piruvato, uma enzima
que requer K e Mg ou Mn .
+ 2+ 2+

Nessa reao, de fosforilao ao nvel do substrato, o produto piruvato

aparece primeiro na sua forma enol que tautomeriza de maneira rpida,
embora no-enzimtica, para a forma ceto do piruvato. A reao total tem uma
variao de energia livre-padro grande e negativa, devido, em grande parte,
converso espontnea da forma enol do piruvato em sua forma ceto. O G de
hidrlise do fosfoenolpiruvato -61,9kJ/mol; cerca de metade dessa energia
conservada na formao da ligao fosfoanidrido do ATP (G = -30,5kJI moI) e
o restante (-31,4kJ/mol) constitui uma grande fora que empurra a reao no
sentido da sntese do ATP. A reao da quinase do piruvato essencialmente
irreversvel sob condies intracelulares e um importante stio de regulao.