1. PRESENTACION.

El Escherichia Coli es un bacilo gramnegativo de tamao intermedio (0,3 a 1 x 1 a 6 m), comensal,

mvil por flagelos peritricos, no forma esporas y es anaerobio facultativo. Tiene unos requerimientos
nutricionales sencillos: fermenta la glucosa, reduce los nitratos, es catalasa positiva y oxidasa
negativo. Es el miembro ms frecuente e importante del gnero Escherichia. Necesaria para el
funcionamiento correcto del proceso digestivo, adems de producir las vitaminas B y K

Este microorganismo se asocia a mltiples enfermedades, incluida la gastroenteritis e infecciones

extraintestinales forma parte de la flora normal del intestino del hombre y los animales de sangre
caliente, constituyendo una de las especies ms abundantes en esta localizacin.

Las cepas de E. coli que provocan gastroenteritis se subdividen en cinco principales grupos
siguientes. E. coli enterotoxigena (ECET), E. coli enterohemorragica (ECEH), E. coli enteroinvasiva
(ECEI), y E. coli enteroagregativa (ECEA). En el presente trabajo revisaremos la E. coli
enterohemorragica.

Las bacterias EHEC son E. coli productoras de toxinas similares al Shiga (STEC) o E. coli
productoras de toxina Vero (VTEC). Sin embargo, slo se denomina EHEC a los cultivos patgenos.

2. OBJETIVOS
Determinar las toxinas que genera el eschericha Coli Enterohemorragico.
Determinar la primera accin inmunitaria del organismo frente al patgeno.
Determinar la accin celular especfica, as como la produccin de molculas que
intervienen en la inmunidad frente al patgeno.
Evidenciar el papel de la respuesta inmune contra E. Coli EH como injuriante para el
organismo.
Conocer las formas de evasin de la ECEH y tipo de respuesta frente a la accin
inmunitaria del organismo.
3. DESARROLLO DEL TEMA

4.1 MECANISMOS DE ENFERMEDAD

a) Toxinas: El Escherichia Coli Enterohemorragico produce potentes citotoxinas codificadas por

bacterifagos llamadas toxinas Shiga (Stx-1 y Stx-2), que estn estructuralmente y funcionalmente
relacionadas con la toxina Shiga sintetizada por Shigella dysenteriae (difieren en un solo
Aminocido). La toxina Stx pertenece a la familia AB5, y consta de una subunidad A unida a un
pentmero de subunidades B. Este pentmero se une al receptor globotriaosilceramida Gb3
presente fundamentalmente en el endotelio de los pequeos vasos del colon, rin y sistema
nervioso central, y en el epitelio tubular renal. Stx se internaliza en los endosomas tempranos y sigue
un transporte retrogrado va el complejo de Golgi, retculo endoplasmatico y la membrana nuclear.
La subunidad A de Stx2 inhibe la sntesis de protenas, se cliva en el aparto de Golgi en dos
fragmentos: A1 y A2. El fragmento A1 activo se trasloca al citoplasma donde acta como una N-
glicosidasa que remueve un residuo especfico de adenina de la unidad ribosomal 28S, lo que resulta
en una inhibicin irreversible de la sntesis de protenas e induccin de apoptosis (2), que da lugar a
disminucin de la absorcin. (1)

En ausencia de la subunidad A, se han descripto otros efectos biolgicos relacionados con las
subunidades B de Stx2 (Stx2B) La unin de Stx2B al receptor Gb3 dispara seales intracelulares
que inducen apoptosis en clulas epiteliales y no epiteliales. Se ha demostrado que Stx2B inhibe la
 absorcin de agua en colon humano in vitro y produce acumulacin de fluido acuoso en fragmentos
de colon ligado de rata, lo cual indicara una contribucin directa de Stx2B a la diarrea acuosa. (2)

El EHEC posee un plsmido de 60 MDa (p0157) implicado en la expresin de una fimbria de

adherencia (fimbria EHEC). Las cepas de EHEC sintetizan adems una protena, intimina,
codificada por un gen cromosomal (eaeA) responsable de la unin ntima de la bacteria al enterocito
y la desorganizacin de las microvellosidades (3)

b) Induccin a la inflamacin: La respuesta inflamatoria ejerce un efecto potenciador sobre la

toxicidad especfica de la Stx2, mientras que, de manera recproca, los mecanismos
antiinflamatorios, representados fundamentalmente por los glucocorticoides, y la enzima xido
ntrico-sintasa constitutiva o endotelial (NOSe) protegen de la toxicidad de la Stx. La toxina, los
Lipopolisacaridos (LPS) y el dao endotelial inducido por el efecto de ambos, activan al sistema
inmune innato desencadenando una fuerte respuesta inflamatoria. Se ha demostrado que los LPS
son capaces de incrementar o disminuir los efectos nefrotoxicos inducidos por Stx2.

Entre los mediadores solubles de inflamacin que se han descrito elevados en el suero u orina de
los pacientes con SUH, y que dan cuenta de las profundas alteraciones que ha sufrido el sistema
homeosttico, podemos mencionar: la interleucina (IL) 6 (IL-6), la IL-88, la IL-10, el factor de necrosis
tumoral (TNF), que induce cambios proinflamatorios en clulas endoteliales, incluyendo produccin
de otras citoquinas, expresin de molculas de adhesin, liberacin de sustancias procoagulantes,
el factor de crecimiento fibroblstico (TGF), el sistema Fas/Fas-ligando11, diversos factores de la
cascada de coagulacin. (4)

c) Enfermedad
Sndrome Hemoltico Urmico. Se caracteriza por anemia hemoltica microangioptica,
plaquetopenia y dao renal. Constituye la primera causa de insuficiencia renal aguda en la edad
peditrica y la segunda de insuficiencia renal crnica. E. Coli productor de STEC es el primer agente
etiolgico de SUH; su principal reservorio es el ganado bovino y la va de transmisin, los alimentos
contaminados. Hasta el presente no existe un tratamiento especfico para disminuir la progresin del
SUH.
Diarrea sanguinolenta afebril. Frecuente en pases desarrollados, en los vasos sanguneos se
produce ulceracin endotelial, con depsito de fibrina; las plaquetas se activan y adhieren a dicho
sitio, generando trombosis y alteracin de la funcin del rgano blanco.

3.2. INMUNIDAD INNATA: El mecanismo sistmico se inicia por la liberacin de Stx-1 y Stx-2; las
subunidades (A-B) de estas toxinas se unen a un glucolipido especfico (globotriaosilceramida,GB 3)
que estn altamente expresados en la clula de las vellosidades intestinales y en las clulas
endoteliales del rin.
La unin de la subunidad B genera una cascada de seales, con expresin de quimosinas y
molculas de adhesin, activacin del complemento, reclutamiento de leucocitos y formacin
de trombos. La subunidad A se une al ARNr e interrumpe la sntesis de protenas.
Las toxinas Stx estimulan la expresin de citocinas inflamatorias (TNF-, Interleucina-6)
Las lesiones en las clulas endoteliales del glomrulo inducen la activacin de plaquetas y
acumulacin de trombina, lo que a su vez da lugar a la disminucin del filtrado capilar e
insuficiencia renal aguda.
Mutaciones en los genes que codifican estas protenas del sistema del complemento
predisponen al desarrollo de SHU.
El SHU se manifiesta con una microangiopatia trombotica glomerular (MAT) con endoteliosis.
En las MAT, el sistema de complemento y la cascada de coagulacin estn estrechamente

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 relacionados. Ambos se componen de proteasas serina. Se ha demostrado que la toxina se une
al factor H activo junto a la superficie de la clula, e inhibe su actividad protectora sobre la
activacin del complemento.
La Stx disminuye la expresin endotelial CD59, glicoprotena anclada a la membrana
citoplasmtica de los tbulo contorneado proximal y endotelio glomerular que se une a los
componentes C8 Y C9 del complemento, limitando a la incorporacin de C9 al complejo de
ataque de membrana; esta regulacin de toxina contribuye a la activacin complemento y a la
destruccin celular.

4.3 INMUNIDAD ESPECIFICA:

Una neutrofilia marcada, leucocitos neutrfilos (PMN) circulantes que se encuentran agotados o
exhaustos, los monocitos diferenciados hacia un fenotipo inflamatorio (menor expresin de CD14
y aumento de CD16), y se encuentra un significativo descenso en los leucocitos que presentan el
receptor (CX3CR1) para la quimioquina Fractalquina (FKN, CX3CL1): los monocitos clsicos y
clulas Natural Killer (NK). Estas clulas tienen un alto potencial citotxico. La FKN se expresa
en endotelio y epitelio renal y ha sido involucrada en los mecanismos patognicos en distintas
nefropatas.
Las cepas de EHEC sintetizan adems una protena, intimina, codificada por un gen cromosomal
(eaeA)6 responsable de la unin ntima de la bacteria al enterocito y la desorganizacin de las
microvellosidades con produccin de la lesin AE (borramiento y anclaje).
La e. coli produce dos tipos de sideroforos:
La aerobactina puede ser ms efectiva que la enterobactina en la competencia por el hierro con
las protenas del husped, no se une a la albmina (le permite a la bacteria obtener el hierro
necesario)
La enterobactina se une a la albmina y es inactivada por ella.
Escherichia coli O157 lipopolisacrido (LPS) anticuerpos especficos, muestra una
sensibilidad del 95%, 88% y 74% y una especificidad del 99%, 99%, y 98% para IgM, IgA e
IgG, respectivamente. Anticuerpos LPS Anti-O157 disminuye por debajo de los niveles de
corte en> 50% de los nios a las 11 (IgM), 5 (IgA), y 11 semanas (IgG) despus de la
aparicin de la diarrea y 10, 4 y 10 semanas, respectivamente, despus de la aparicin del
sndrome urmico hemoltico. Los nios con SUH enteropathic no pueden desarrollar una
respuesta inmune humoral de larga duracin con el antgeno O157. La inmunidad
incompleta a E. coli O157 puede ser seal de un riesgo para las infecciones recurrentes y
tiene implicaciones para los estudios de diagnstico serolgico.
El SUH es producido por la toxina shiga, la cual inhibe la sntesis proteica, liberando el factor
Von Wilebrand (factor de coagulacin VIII), generando trombosis y destruccin eritrocitaria.

4.4 EVASION Y RESISTENCIA

a) Resistencia: La resistencia antibitica es perceptible gracias a la presencia de uno o ms
mecanismos moleculares de resistencia antibitica en la bacteria. Dentro de los tipos de mecanismos
moleculares de resistencia destacan por su relevancia: inactivacin enzimtica, alteraciones en el
sitio blanco y alteraciones de la permeabilidad.

Las enterobacterias a nivel mundial presentan alta resistencia hacia ampicilina (beta-lactmico),
trimetoprim-sulfametoxazol, tetraciclina, cloramfenicol y cido nalidxico por lo que se debe
determinar la prevalencia de los diferentes genes relacionados a nivel molecular.(7)

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Familia de Mecanismo de Accin Mecanismo de Resistencia Genes Implicados
Antibitico
Betalacta- Interfiere en las ltimas fases de la sntesis del
Betalactamasas: Enzimas que Genes que codifican betalactamasas:
micos. peptidoglicano, componente necesario en la hidrolizan el enlace amida del blaTEM, blaSHV, blaCARB, blaOXA,
formacin de la pared bacteriana ncleo betalactmico, inactivando blaCTX-M y blaGES.
el antibitico.
Quinolon- Inhibe la accin de las topoisomerasas y de la Mutaciones que generan el cambio Mutaciones de gyrA (gen que codifica una
as ADN girasa bacterianas de aminocidos en la enzima subunidad de la ADN girasa) y parC (gen
blanco del antibitico que codifica una subunidad de la
Sistemas de expulsin topoisomerasa IV).
Presencia de genes plasmdicos de Familia de genes qnr (A, B, C, D S) que
resistencia antibitica codifican protenas Qnr que impiden
estericamente la unin del antibitico al
blanco.

Tetraciclin Se unen al ribosoma bacteriano, inhibiendo la Presencia de bombas de flujo Genes tetA y tetB que codifican sistemas
a sntesis de protenas especficas para tetraciclinas de eflujo
Cloramfeni Inhibidor de biosntesis de las protenas, Inactivacin enzimtica por Gen cat que codifica a la enzima
-col. previene la elongacin de la cadena de acetilacin cloramfenicol acetiltranferasa
pptidos al unirse al centro de la Exportadores especficos de Genes floR y cmlA
peptidiltranferasa del ribosoma 70S cloramfenicol
Trimetropi Inhibe la sntesis de dihidropteroato sintasa Presencia de genes que codifican Genes sul1 y sul2 (sulfametoxazol) y
n (sulfametoxazol) y de la enzima dihidrofolato formas mutantes de la enzima genes dfr (trimetoprim)
Sulfameto- reductasa (trimetoprim), enzimas necesarias blanco
xazol en la ruta del cido flico.

b) Evasin:
La cpsula bacteriana puede protegerlo del efecto bactericida del suero, adems evita la
opsonizacin por factores del complemento y la eliminacin mediada por anticuerpos.

Las bacterias STEC presentan resistencia a la acidez, facilitando su supervivencia en el

estmago, una vez ingeridos, lo que les permite luego alcanzar el colon y adherirse a los
enterocitos.

Considerando que para desencadenar SUH son necesarias las toxinas Stx y LPS, se ha
demostrado la tolerancia a estos ltimos luego de la inoculacin repetida o durante las infecciones
naturales. Tal fenmeno se refleja en la inhibicin de secrecin de las citocinas proinflamatorias
TNF o IL-1 e IFN, con un aumento de la secrecin de IL10, 1L13, 1L 1ra. Una hiptesis, para
esta tolerancia estara relacionada con la induccin de receptores para glucocorticoides en
macrfagos. Esta tolerancia o refractariedad comienza a revertirse luego de transcurrida una
semana y retorna a su estado inicial al cabo de 2 o 3 semanas.

4.5 Enfermedades causadas por la respuesta inmune: Si bien la Stx es absolutamente

necesaria para el desarrollo de la enfermedad, existen evidencias de que la reaccin inflamatoria
inducida por Stx o por los LPS bacterianos que acompaan a este tipo de infecciones, contribuyen
en el desarrollo pleno del efecto de la Stx, y la evolucin a la forma completa de SUH, convirtindose
altamente injuriante.

La respuesta inflamatoria podra contribuir significativamente al dao endotelial ya que la liberacin

de componentes intracelulares de los PMN (primera lnea de accin), como distintas proteasas o
intermediarios reactivos del oxgeno, que se demuestran en los pacientes con SUH, poseen un alto
potencial citotxico que podran potenciar la injuria original provocada por los efectos directos de la
toxina Shiga.

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 Al analizar el Mo de los pacientes con SUH durante la etapa aguda, encontramos que los mismos
son funcionalmente ms secretores de citoquinas inflamatorias como TNF e IL-1. Paralelamente,
publicaciones recientes han informado que la quimioquina fractalquina (FKN, CX3 CL1) cumple un
papel importante en las patologas renales. La interaccin entre la FKN presente en el endotelio y
epitelio renal activados o daados y su receptor (CX3 CR1) expresado en los Mo y clulas NK, podra
contribuir a que estas clulas vuelquen su contenido enzimtico a los tejidos, generando una
ulceracin y una posterior agregacin plaquetaria. En particular, se describe en estos pacientes un
significativo descenso de las clulas en circulacin que expresan el receptor para fractalquina lo que
sugiere la desaparicin de tipo de clulas de la circulacin como consecuencia de quedar adheridas
a los endotelios (injuria de Stx). Se encontr una correlacin negativa entre el nmero de leucocitos
circulantes que expresan el CX3 CR1 y la severidad del cuadro de SUH, pudiendo potenciar la injuria
por Stx

a) Sndrome Urmico Hemoltico: Microangiopata trombtica que describe la presencia de

trombosis en los pequeos vasos del organismo. Algunos autores adoptan esta denominacin para
referirse en su conjunto a dos enfermedades: El sndrome Urmico hemoltico (SUH) y prpura
trombocitopenica (PTT).

La triada clnica fundamental SUH/PPT:

a) Insuficiencia renal aguda, de gravedad en SUH y moderada en PTT.

Un hallazgo frecuente es la hipertensin arterial grave y a veces maligna, probablemente a causa
de la lesin microvascular y la consiguiente activacin del sistema renina- angiotensina. Puede
presentarse insuficiencia y alteraciones electrocardiogrficas.
b) Anemia hemoltica microangioptica, producida por el traumatismo mecnico que sufren los
hemates al circular por el lecho vascular alterado. Presentndose: hemates fragmentados,
esquistocitos, signos de hemlisis.
c) Trombocitopenia por consumo perifrico muy disminuido en PTT y moderado en SUH. Tambin
se puede presentar prpura cutnea, hemorragias retinianas, gingivales, digestivas, metrorragias,
epistaxis o hexriaturia.

Se han identificado una posible causa de la gravedad de las infecciones de EHEC. La infeccin por
Stx que segrega la bacteria provoca que el organismo produzca anticuerpos que lo atacan en una
reaccin de tipo autoinmune. Esto explicara por qu los pacientes empeoran aunque los sntomas
de la infeccin intestinal empiecen a remitir. Estos anticuerpos daan ciertas estructuras cerebrales
y renales. Combinados con el sndrome urmico hemoltico (HUS, por su acrnimo ingls) que
desarrolla una parte de los pacientes, agrava su estado.

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