Ao de la consolidacin del Mar de Grau 1

15-04-16

ALUMNAS:
Bustinza Damiano, Roco
Gonzales Rosales, Brisayda
Huiza Acosta, Karen Briguit
Lzaro Mendoza, Carmen Janeth
Rocha Yupanqui, Ruth Milagros
DOCENTE:
Alexandra Muoz
MATERIA:
Microbiologa Ambiental
CICLO:
IV

LIMA, 2016
 I. OBJETIVOS
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El objetivo principal del presente informe es aprender a identificar hongos .Los
objetivos especficos con los siguientes:

1. A partir de las muestras obtenidas en diferentes lugares o espacios,

evidenciar la presencia de hongos.
2. Aprender a identificar las estructuras de los hongos.
3. Aprender a diferenciar las morfologas de las colonias de los hongos.
4. Aprender a realizar la tcnica de impronta de hongos y asimismo la
tcnica de antagonismo entre hongos y bacterias.
5. Diferenciar un hongo de un alga, bacteria u otro microorganismo.
6. Aprender a diferenciar la actividad enzimtica de los hongos frente a una
bacteria.
7. interpretar los resultados de las muestras obtenidas en campo u otro
lugar.
II. MATERIALES

Practica 4. Hongos I

Audio y video Azul de lactofenol

Incubadora 2 agares almidon
Microscopios 3 agares PDA
Espectrofotmetro con 2 mL de Pseudomonas o
cubetas Streptomyces x mesa
Pizetas con agua 2 mL de Bacillus x mesa
Set de microcultivo x mesa Cmaras de Neubauer
Cinta adhesiva para impronta
Practica 5. Hongos II y Algas I

Audio y video Beaker 1L x mesa

Incubadora Probetas 100 mL x mesa
Microscopios Balanzas
Espectrofotmetro con cubetas Esptulas
Pizetas con agua Agua destilada 1L x mesa
III. METODOLOGA
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Los hongos trabajados fueron nombrados y codificados como:
HONGOS CDIGO
Hongo negro del techo HNT
Hongo verde del techo HVT

Bacteria Bacillus BB

Hongo rosado del techo HRT

Bacteria Pseudomonas BP

Hongo negro de la ventana HNV

Hongo de arroz vaso 2 HAV2

Hongo de arroz de vaso 1 HAV1

2: Quinta prctica de laboratorio: 4
 IV. RESULTADOS:
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EVALUACION DEL CULTIVO DE HONGOS EN MEDIO DE ARROZ
SEMICOCIDO
Muestras caracterizacin

HAV1 Se observ el crecimiento de hongos de color

verde oscuro posible trichoderma, amarillo,
rosado posible fusarium y negro as como
tambin el crecimiento de micelios que tienen
una forma de tela de araa.
HAV2 Se observ el crecimiento de hongos de color
rosado posible fusarium y gris posible
rhisoctonia, as como tambin el crecimiento
de algo blanquecino que eran bacilos.

EVALUACION DEL CULTIVO DE HONGOS EN MEDIO DE AGAR

MUESTRAS DE HONGOS EN CARACTERISTICAS Y MORFOLOGIA DE

AGAR HONGOS
Agar expuesto en el techo Se observ el crecimiento de diversas colonias de
hongos, ya que estos estaban expuestos al lado de
animales. Los hongos cultivados tenan la forma
circular y esponjosa, de consistencia suave y
pequea expansin. Los colores de los hongos
observados fueron: verde oscuro, verde claro,
negro, amarillo y rozado, as como tambin se
observ la presencia de bacilos.

Agar expuesto en la ventana Se evidencio el crecimiento de tres tipos de colonias

de hongos de color negro, verde militar y verde
oscuro, la forma que tenan los hongos era ovalada
y tenan una gran expansin. En este cultivo
tambin se observ la presencia de bacilos.

Fig.1 Colonia de hongos

Fig.2 Colonia de hongos
proveniente de la ventana
proveniente del techo
 IDENTIFICACION DE HONGOS OBSERVADOS EN EL MICROSCOPIO
6

Fig.3 Es una cepa semejante Fig.4 Es una cepa

a Fusarium. semejante a
Cladosporium

Fig.5 Es una cepa Fig.6 Es una cepa semejante a un

semejante a Trichophyton Curvularia
rubrum

RESULTADOS DE LA PURIFICACION DE MICROCULTIVOS

X1
X2
Color inicial:
Color inicial:
verde oscuro
rosado
Color final:
Color final:
negro
rosado
Y1
anaranjado
Color inicial:
Y2
verde
Color inicial:
amarillento
verde claro
Color final:
Color final:
verde
negro
amarillento
 7
RESULTADOS DEL ANTAGONISMO DESPUES DE UNA SEMANA

HNT vs HVT

Se observ la dominancia del HNT sobre el HVT, esto se

comprob al observar que el HVT haba muerto y el HNT se
expandi, sin dejar crecer al otro.

HNV vs BB

Se determino que el HNV es muy dominante, ya que no dejo

crecer a la colonia de BB, se observo que el HNV se expandio
casi por toda la superficie de la placa petri, a pesar de que solo
sembramos en la mitad.

BB vs BP y al centro HRT

El HRT no se esparcio, ya que las bacterias se lo impedian,

ademas el HRT se torno de un color negro amarillento con un
punto rosado al centro.En cuanto a las bacterias la que mas se
desarrollaron fueron las BP,mostrando una dominancia sobre HRT
y sobre BB.tambien se observo el crecimiento de otro tipo de hongo
de color verde amarillento, esto pudo deberse a la contaminacion
al momento de inocular a los hongos.

RESULTADOS DE LA ACTIVIDAD ENZIMATICA

BB vs HAV2

Se observo que la BB domino al hongo, ya que no se aprecia

algun crecimiento del hongo en el agar, con ello se demuestra
que la colonia de la BB es dominante sobre el HAV2, ya que
es probable que la colonia inhibe las actividades enzimaticas
del HAV2, por lo tanto no permite su desarrollo.
BP vs HAV1
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Se aprecia el crecimiento de la BP, pero no de algun hongo, esto
nos determina que la BP pudieron inhibir el funcionamiento de
algunas actividades enzimaticas como lo es el crecimiento y
desarrolllo de los hongos.Tambien se observa el crecimiento de
BB, esto puede ser debido a que la muestra del vaso dos
contenia bacilos.

V. DISCUSIONES
1. CULTIVO DE HONGOS EN MEDIO DE ARROZ SEMICOCIDO
Con respecto a los resultados obtenidos de los 2 vasitos de arroz colocados en
diferentes lugares y obteniendo distintas muestras de hongos; como bien
sabemos, los hongos son afectados por distintas influencias o factores
ambientales, como son la humedad, el pH, la temperatura, la luz, la cantidad
concentracin de nutrientes y otros, todo ello dependiendo del lugar o tipo de
suelo en el que fue colocado, lo que implica que la morfologa de los hongos
varen unos de otros.
En cuanto al vaso 1 que fue colocado cerca al huerto de tomates de villa
2 cerca al invernadero, con respecto a los resultados encontramos al
hongo malo (fusarium), el cual lo demostramos con lo observado en el
huerto; ya que el lugar donde se coloc el vaso, no haba plantas de
tomate y algunas cerca del lugar donde se coloc el vaso tenan pocos
tomates mientras que el resto si estaba en buenas condiciones. Por otro
lado, se encontr al hongo bueno (Trichoderma), el cual es un enemigo
del fusarium, que se encarga de proteger a la planta, por ello deducimos
que las plantas cercanas no estn siendo muy afectadas gracias a la
accin del trichoderma contra el fusarium.
En cuanto al vaso 2 que fue clocado en villa 1 frente del pabelln de
laboratorio debajo de una palmera, nos muestra la presencia de dos
hongos malos como son el fusarium y rhizoctonia, que estaran afectando
a la palmera, al gras y a las plantas presentes en ese lugar.

2. CULTIVO DE HONGOS EN MEDIO DE AGAR

Con respecto a los resultados obtenidos de los 2 agares, uno de ellos ubicado
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en la ventana de la casa como se pueden observar en los resultados la evidencia
de 3 tipos de hongo, debido a que solo se contamino con el aire y factores
ambientales (temperatura, humedad, luz); mientras que el segundo agar ubicado
en el techo de la casa presenta ms de 5 tipos de hongos, el cual se debe a que
este estuvo expuesto y siendo contaminado no solo por el viento y factores
ambientales(temperatura, luz y humedad), sino por las mascotas (perros y gato)
que viven ah.
3. PURIFICACION DE MICROCULTIVOS
Para la purificacin de los micro cultivos de hongos en nuestra muestra se pudo
distinguir el cambio de coloracin de los hongos como lo observado en los
resultados, lo que fue influido por: no mantener todo el tiempo encendido el
mechero, no inoculamos correctamente las muestres, por la distancia al realizar
el procedimiento y el mechero, al mismo tiempo este mtodo nos facilit la
observacin de las estructuras microscpicas de los hongos filamentosos.
X1: cambio de coloracin de hongo verde oscuro a hongo negro
Con respecto a esta muestra, no debi haber cambio de coloracin pero
lamentablemente si la hubo, debido a que cuando se realizaba dicho
procedimiento, es probable que no inoculamos bien las muestras, o que esta
muestra de hongo verde se vio contaminada con el hongo negro, o tambin por
que no mantuvimos encendido el mechero todo el tiempo del procedimiento.
Y1: no hubo cambio de coloracin del hongo verde amarillento
Durante este procedimiento, se puede notar que se tom las precauciones
correctas y que no hubo error al realizar el procedimiento.
X2: cambio de coloracin de hongo rosado a hongo rosado anaranjado
En cuanto a esta muestra podemos observar que tambin hubo cambio de
coloracin, de tal modo que tambin no debi suceder este cambo de
coloracin, entre nuestras probabilidades a este cambio de color, puede
deberse a que el hongo rosado se contamino con otro hongo, o por no
mantener una buena distancia cercana con el mechero durante el
procedimiento.
Y2: cambio de cloracin de hongo verde claro a hongo negro
 En esta muestra hubo un cambio de coloracin muy fuerte, razn que no
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debi pasar; lo ms probable es que no inoculamos correctamente las
muestras y que hubo contaminacin por el hongo negro.

4. ANTAGONISMO
Como nos dicen Wisniewski y Wilson en 1992: los microorganismos
antagonistas ya sean bacterias, levaduras u hongos, tienen la capacidad de
ejercer un efecto de control biolgico sobre diferentes patgenos de inters y se
han empleado para controlar diversas enfermedades en frutos y vegetales. Para
seleccionar a los microorganismos antagonistas se deben considerar las
siguientes caractersticas generales:
a) capacidad para colonizar rpidamente la superficie de los frutos y de persistir
en ellas de manera efectiva.
b) mayor habilidad que el patgeno para adquirir los nutrientes.
c) capacidad de sobrevivencia bajo diferentes condiciones ambientales.
Por otro lado, Wilson y Wisniewski tambin mencionan en 1999 que estos
microorganismos antagonistas cuentan con otras caractersticas especficas
como son: la estabilidad gentica, la efectividad a bajas concentraciones,
capacidad de sobrevivir a condiciones adversas o extremas que presente el
medio ambiente, efectividad para un amplio rango de microorganismos
patgenos en una variedad de frutos y hortalizas, capacidad de reproducirse en
medios de crecimiento econmicos, que sea fcil de aplicar sin produccin de
metabolitos secundarios que causen daos a la salud humana, resistente a los
fungicidas y compatible con los procedimientos comerciales y no patognico
sobre el hospedero.
Con respecto al hongo negro sobre el hongo verde:
El hongo negro tuvo la capacidad de poder colonizar ms rpido que el hongo
verde, adquiriendo hbilmente sus nutrientes para su alimentacin y rpida
reproduccin y expansin, asimismo adaptarse a este ambiente y facilitar su
adaptacin, dominando al hongo ms dbil (hongo verde), ya que este es ms
lento en cuanto a la habilidad de adquirir su alimentacin.
Con respecto al hongo negro sobre el bacilo:
Se not muy clara la dominancia y fcil expansin de este hongo negro,
considerando que un buen microorganismo antagonista es resistente ante
cualquier condicin ambiental, asi como tambin su rpida reproduccin,
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expansin y habilidad para poder alimentarse y colonizar en el agar dominando
al bacilo.

Bacterias pseudomonas sobre el hongo rozado:

Como se puede observar en las imgenes del resultado, podemos identificar que
esta bacteria se mostr como microorganismo antagonista y poder dominar al
hongo, si bien sabemos las bacterias tiene un gran capacidad de poder
adaptarse ante cualquier cambio y presencia de factores ambientales mostrando
poder y resistencia para su adaptacin y una posterior colonizacin como es al
hongo de color rosado.
5. ACTIVIDAD ENZIMATICA
Bacteria bacillus vs hongo de arroz de vaso 2
Como se observ tanto la bacteria como el hongo se encuentran en el mismo agar,
en cuanto a la actividad enzimtica del HAV2 frente a la BB, podemos decir que el
HAV2 no es un buen catalizador para facilitar su reaccin, ya que su velocidad para
las reacciones qumicas es lenta comparada con la BP, lo que no puede realizar un
proceso de inhibicin contra la BB. Por tal motivo, como se ve en los resultados la
BB tuvo mayor expansin en el agar, indicando que no le afecto la actividad
enzimtica que realizo el HAV2.
Bacteria pseudomonas vs hongo de arroz de vaso 1
Como sabemos tanto bacteria como hongo se encuentran en el mismo agar, pero
En caso del HAV1 tienes una baja velocidad para sus reacciones qumicas ello
hace que no sea un buen catalizador, por ello no puede inhibir el desarrollo y
expansin de la BP. Por tal motivo, como se observ en los resultados la BP se
observ que se reprodujo ms y no tuvo ningn impedimento por parte del
HAV1.

VI. RECOMENDACIONES:
1. En la prctica nmero 4 de cultivo de hongos en diferentes ambientes,
es necesario que el arroz este bien escurrido; ya que ser el medio
donde se proliferarn los hongos, pero si queda con agua aumentar
la probabilidad de contaminarse con bacterias.
2. Es necesario que los vasos con arroz estn bien tapados con la gasa,
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porque estos sern enterrados debajo de la tierra en posicin invertida
durante un lapso de tiempo y podran contaminarse con otros
microorganismos.
3. Anotar en un cuaderno de trabajo las referencias del lugar donde se
enterraron los vasos con arroz para facilitar su ubicacin.
4. Para la obtencin de hongos colocar las placas petri con agar en
lugares por donde transiten personas y animales.
5. Tambin es necesario trabajar con guantes, puesto que estamos
expuestos a contraer muchas enfermedades.
6. Es recomendable esterilizar el bistur, para facilitar el corte del agar en
forma cuadrada que ir en el portaobjeto.
7. Es necesario utilizar una varilla metlica sin asa ayuda a no maltratar
el hongo que se ser impregnado en los extremos del cuadrado de
agar. Y para sembrar bacterias es recomendable usar la varilla con
asa ya que esta ayudar a su mejor dispersin.
VII. BIBLIOGRAFA:
1. (2011). Bacteriologa General: Principios Y Prcticas de Laboratorio.
Google Books. Recuperado de:
https://books.google.com.pe/books?id=vwB0fgirgN0C&pg=PA407&lp
g=PA407&dq=practicas+de+laboratorio+de+antagonismo&source=bl
&ots=xYuew0parj&sig=DGdJNooPkNiZeERZSTCD41OuTzs&hl=es-
419&sa=X&ved=0ahUKEwigiPXa87nMAhXJqR4KHZVUBKkQ6AEIK
DAC#v=onepage&q=practicas%20de%20laboratorio%20de%20antag
onismo&f=false
2. (2012). Enzimas. Bionova. Recuperado de:
http://www.bionova.org.es/biocast/documentos/tema14.pdf
3. (2013). Actividad Enzimtica. Recursostic.educacion. Recuperado de:
http://recursostic.educacion.es/ciencias/biosfera/web/profesor/practic
as/Actividad_enzimatica.pdf
4. Hernndez, A., Bautista, S. and Velsquez, G. (2007). Uso de
Microorganismos Antagonistas en el Control de Enfermedades
Postcosecha en Frutos. Revista Mexicana de FITOPATOLOGIA.
Recuperado de: http://www.redalyc.org/pdf/612/61225109.pdf