UNIVERSIDAD DE GUAYAQUIL

FACULTAD DE CIENCIAS QUMICAS

LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA II

Asignatura: Microbiologa II
Nombre: Roxana Naomi Mina
Romero
Sexto semestre Grupo: 3-B Martes

Profesora: Q.F. Celeste Carrillo PRACTICA # 1

Tema: Diluciones Seriales

OBJETIVO GENERAL:

- Realizar la preparacin de una disolucin en 1:10 , 1:100 y 1:1000

MARCO TERICO:

DILUCIONES

Esta tcnica nos permite un doble objetivo, el aislamiento de colonias y adems

el recuento de los microorganismos que tenemos en el cultivo inicial.
Se trabaja con cinco tubos con suero fisiolgico estril, uno de ellos con 10 ml y
el resto con 9 ml, en el orden que se muestra en la figura. Mediante una pipeta
estril tomar 1 ml del cultivo mixto y depositarlo en el primer tubo. Agitar hasta
conseguir una suspensin homognea. Tomar otra pipeta estril y de este
primer tubo transferir 0,1 ml al segundo tubo, agitar y repetir la operacin
transfiriendo 1ml del segundo al tercer tubo, del tercero al cuarto y del cuarto
al quinto.
Una vez realizado el banco de diluciones procederemos a sembrar de los tres
ltimos tubos (diluciones 104, 105 y 106) 0,1 ml en placas de agar nutritivo,
mediante la tcnica de siembra por extensin (ver video). Se depositan los 100
micro litros en la superficie del agar y se debe extender la muestra en toda la
superficie del mismo, utilizando para ello el asa de vidrio.
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Para esterilizar el asa de vidrio, en primer lugar se introduce en alcohol y se

flamea encendindola con la llama del
mechero bunsen. Dejar que se consuma la
llama y abriendo la placa lo justo para
introducir el asa, extender la muestra
arrastrndola con la base del tringulo por
toda la superficie del medio hasta que ste
absorba toda el agua. Incubar a 37C
durante 24 horas y realizar el recuento de las
colonias calculando la concentracin de
clulas en el tubo inicial mediante la frmula:
ufc / ml = N x D x 10
Dnde:
ufc = unidades formadoras de colonias
D = dilucin
N = n de colonias

CMO SE PREPARAN LAS DILUCIONES SERIADAS?

En general se parte de una solucin concentrada y se preparan series de diluciones al

dcimo (1:10) o al medio (1:2). De esta manera se obtiene una serie de soluciones
relacionadas por ejemplo por un factor de dilucin 10 es decir 1/10; 1/100; 1/1000 y
as sucesivamente. O la otra serie es 1/2; 1/4; 1/8; 1/16; 1/32 etc. Por ejemplo: si
partimos de una solucin de 50mg/ml de una sustancia (Solucin A)

a. Dilucin 1/10: 1ml de la solucin A + 9 ml de agua= una solucin de 5 mg/ml

(dilucin 1:10)

b. Dilucin 1/2: 5 ml de la solucin A + 5 ml de agua= una solucin de 25 mg /ml

(dilucin 1:2)
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PROCEDIMIENTO

BIBLIOGRAFIA

Mara del Rosario Pascual Anderson, 1992. Editorial Daz de Santos, S.A.,
MADRID, Espaa. Microbiologa Alimentaria: Metodologa Analtica para
Alimentos y Bebidas