Professional Documents
Culture Documents
MARCO TEORICO
Son un conjunto heterogneo de clulas sanguneas que son ejecutoras de
la respuesta inmunitaria, interviniendo as en la defensa del organismo contra
sustancias extraas o agentes infecciosos (antgenos). Se originan en la mdula
sea y en el tejido linftico. Los leucocitos son producidos y derivados de unas
clulas multipotenciales en la mdula sea, conocidas como clulas madre
hematopoyticas. Los glbulos blancos se encuentran en todo el organismo,
incluyendo la sangre y el tejido linfoide.1
Los Leucocitos son clulas que tienen como funcin participar activamente en la
defensa del organismo, por lo que constituyen parte importante del sistema
inmunolgico. Al hablar de Leucocitos no nos referimos a una clula sino a un
grupo de clulas blancas que son de varios tipos, inicialmente se clasifican en
Granulocitos, Monocitos y Linfocitos; los Granulocitos a su vez se dividen en
Neutrfilos, Basfilos y Eosinfilos.
Los Leucocitos y sus diversos tipos pueden ser evaluados mediante un estudio de
laboratorio llamado hematologa, normalmente sus valores se encuentran en 5.000
a 10.000 X 103 por mm3, de ellos 40-70% corresponden a los neutrfilos, 20-50%
a los linfocitos, 0-5% a los eosinfilos, 0-2% a los basfilos y 4.8% a los
monocitos. La elevacin de los glbulos blancos es siempre seal de infeccin,
cuando predominan los neutrfilos se trata de una infeccin por bacterias,
mientras que si el aumento es a predominio de linfocitos se trata de una infeccin
viral, las elevaciones de los glbulos blancos muy por encima de sus valores
normales son caractersticas de la enfermedad conocida como Leucemia. Algunas
infecciones por virus como el Dengue son capaces ms bien de producir una
importante disminucin de los glbulos blancos con un predominio de linfocitos.
Caractersticas de cada tipo de leucocitos
Granulocitos/Polimorfonucleares
Agranulocitos/Mononucleares
OBJETIVO
Aprender a hacer recuentos de los distintos tipos de leucocitos, con respecto a su
representacin total por mm3 de sangre.
FUNDAMENTO
Los leucocitos, tambin conocidos como glbulos blancos, son un componente
importante de la sangre y una pieza clave en el sistema inmunolgico del cuerpo.
Hay cinco tipos diferentes de leucocitos, cada uno con funciones especficas. Se
pueden dividir en dos tipos principales: los granulocitos y agranulocitos.
Al microscopio ptico podemos encontrarlos con pequeas variaciones en su
morfologa, segn estn ms o menos activos:
La frmula leucocitaria consiste en la determinacin del porcentaje que representa
cada uno de los tipos de leucocitos vistos, con respecto al total de ellos. Una
mquina especialmente diseada o el especialista, cuenta el nmero de cada tipo
de clula. El examen muestra si el nmero de clulas est en la proporcin
apropiada entre s y si hay ms o menos cantidad de un tipo de clula.
MATERIAL NECESARIO
Microscopio
Lanceta
Capilar anticoagulado
Dos portaobjetos
DESARROLLO DE LA PRCTICA
Preparamos el material necesario y extraemos la muestra de sangre.
Barremos la muestra en busca de leucocitos y vamos anotando cada tipo que nos
encontremos, hasta contar un mximo de 200 unidades. Nosotras contamos 100.
EJERCICIO
Su principal funcin es la de transportar oxgeno hacia todas las partes de nuestro cuerpo y son los
elementos ms numerosos que se encuentran en nuestra sangre. La hemoglobina es una
heteroprotena que resulta ser su componente ms importante y justamente la responsable de
ese transporte de oxgeno que hablbamos.
Los valores de referencia considerados como normales hablan de una cantidad de cuatro millones
y medio por milmetro cbico de sangre en el caso de las mujeres y cinco millones en los hombres.
Cuando hay un exceso de cantidad de glbulos rojos en la sangre se estar ante una policitemia,
mientras tanto, cuando por el contrario existe la escasez de los mismos se estar ante un cuadro
conocido como anemia.
Estos dos escenarios son posibles de establecerse a partir de un anlisis de sangre realizado en un
laboratorio especializado, asimismo, como el control de los valores normales en cada caso.
Como se anot anteriormente el dimetro de la clula roja oscila entre 6.2 - 8.2 micras con un
tamao promedio de 7.2 micras. Cuando patolgicamente se aumenta o disminuye dicho
dimetro el resultado ser:
Macrocitos
Son eritrocitos con dimetro superior a 8.5 micras. La macrocitosis est usualmente acompaada
de un PVC por encima de 100 fL. Su aparicin puede estar asociada a: Deficiencia de vitamina B12
y/o cido flico. Estrs medular cuando hay eritropoysis acelerada. Trastornos hepticos. Es
importante anotar que normalmente los extendidos de sangre perifrica de neonatos se
caracterizan por presentar una macrocitosis significativa.
Microcitos. Recibe este nombre el glbulo rojo que presenta un dimetro inferior a 6.0 micras, la
microcitosis est usualmente acompaada de un PVC por debajo de 75 fL. Se observan microcitos
en entidades que cursan con alteraciones cuantitativas de la hemoglobina como son las anemias
por deficiencia de hierro y las talasemias. Generalmente los microcitos se acompaan de bajo
contenido de hemoglobina por lo cual se denominan microcitos hipocrmicos.
Megalocitos. Son los grandes macrocitos ovales, clulas donde se combina una alteracin del
tamao y de la forma, pueden llegar hasta tener 12 micras de dimetro. Caractersticamente se
observan en anemias megaloblsticas.
Equinocito .
Caractersticamente aparece como una clula dentada que presenta sobre su superficie pequeas
progresiones redondeadas a manera de bombas o vesculas de tamao uniforme y simtricamente
distribuidas que con el MEB, semejan un erizo de mar.
Los equinocitos se observan en pacientes con: Uremia, defectos del metabolismo glicoltico
(deficiencia de Piruvato Kinasa) y en algunos pacientes con anemia microangioptica. Son
comunes en neonatos y se observan transitoriamente despus de transfusiones masivas de sangre
almacenada (lesin de almacenamiento) y caracterizan el agotamiento metablico de la clula roja
senil.
Acantocito.
Al microscopio electrnico esta clula se observa como una estructura densa e irregularmente
contrada. Bajo el microscopio de luz es un hemate con escasas proyecciones espiculadas que no
presentan una distribucin homognea y varan en longitud y nmero. Los acantocitos se generan
cuando las clulas rojas normales se exponen a condiciones que modifican el contenido lipdico de
su membrana, alterando la relacin colesterol libre / fosfolpidos en ciertas zonas de membrana.
Una vez producida esta forma, es irreversible.
. Los acantocitos tambin puede observarse en cirrosis alcohlica con anemia hemoltica, en
algunos casos de deficiencias de Piruvato Kinasa, en hepatitis del recin nacido y despus de la
esplenectoma.
Estomatocito.
En los individuos normales el 3% o menos de las clulas rojas en el extendido de sangre perifrica
son estomatociticas. El estomatocito se define como una clula unicncava que en los extendidos
coloreados con Wright presenta una depresin central elongada con apariencia de boca o estoma
(de all su nombre) que sustituye el rea de palidez central redondeada de los discos bicncavos.
Es un estado transicional en la transformacin discocito-esferocito.
El estomatocito de la estomatocitosis hereditaria se genera por una falla en la bomba de Na+ - K+.
Cuando la entrada de Na+ excede la perdida de K+, la clula roja progresivamente gana cationes,
agua y se hincha. De all el sinnimo de HIDROCITO, fenmeno opuesto a la formacin de
crenocitos o xerocitos acompaados de
deshidratacin.
DEGMACITOS
Tambin llamadas por su aspecto clulas mordidas, son hemates en los que la hemoglobina ha
sido desnaturalizada y precipitada, con lo que las clulas muestran diferentes defectos. Estas
clulas suelen ser eliminadas por el bazo.
Se presentan en:
- anemia inducida por frmacos- deficiencia en glucosa-6-fosfato deshidrogenasa - talasemia
- hemoglobinopatas inestables
Esferocito .
Hemates maduros de un dimetro entre 6.1 y 7 mm, esfricos y uniformemente coloreados.
Tienen un volumen algo ms pequeo que las clulas normales y una concentracin mayor de
hemoglobina
Se presentan en las siguientes condiciones:
- Esferocitosis hereditaria (Enfermedad de Minkowsky-Chauffard)- Anemias inmunohemolticas-
Hiperesplenismo - Quemaduras graves- Hipofosfatemia- Septicemia por Clostridium Welchii
As dentro del grupo de los hemates esfricos se distinguen los siguientes subtipos:
Esferocitos de la Esferocitosis Hereditaria (SH)
Su formacin se asocia con dos defectos moleculares diferentes: deficiencia parcial de espectrina
(SH [Sp+]) y unin defectuosa de espectrina a la protena 4.1 (SH [Sp-4.1]). Este desorden genera
un esqueleto de membrana inadecuado que perturba la conservacin de la biconcavidad y
deformabilidad del glbulo rojo. Los esferocitos hereditarios son selectivamente retenidos en la
pulpa esplnica y despus de sufrir un nmero determinado de estos episodios de manipulacin
esplnica experimentan lisis o fagocitosis en la pulpa roja.
Microesferocitos
Constituyen en realidad, formas preliticas que se originan por recorte simtrico o parcial de la
membrana de hemate. Son clulas con una disminucin significativa de la relacin superficie /
volumen y un aumento de la concentracin media de la hemoglobina corpuscular (PCHC), factores
que como se ha dicho determinan la deformabilidad del hemate. Los microesferocitos, se
observan en anemias hemolticas heredadas como en la SH. Se asocia tambin, con desordenes
que cursan con formacin de Cuerpos de Heinz.
El mecanismo esferognico, en este caso, al igual que en la hemlisis inmune es la fagocitosis
parcial de porciones de la clula que contiene agregados de hemoglobina desnaturalizada y
porciones de membrana sensibilizada respectivamente. La injuria trmica (quemaduras mayores)
y la injuria mecnica induce hemlisis intravascular, fragmentacin celular y formacin de
microesferocitos. La hipofosfatemia severa cursa como una anemia hemoltica caracterizada por
una marcada microesferocitosis.
Dianocito-codocito-Target cell .
La verdadera forma circulante es la de campana, en las extensiones convencionales sufre una
redistribucin anmala de la hemoglobina asumiendo la forma de clula blanco en diana (target
cell). El codocito es la expresin morfolgica resultante del incremento de la relacin superficie /
volumen que bien puede darse por:
Expansin de la superficie, por aumento de los lpidos de membrana, sin cambio en el volumen,
asociado a la enfermedad heptica obstructiva, deficiencia de L.C.A.T. (Lecitin-Colesterol-Acy 1-
Transferasa) y post-esplenectoma. Disminucin de volumen por reduccin cuantitativa de la
hemoglobina intracelular en entidades como talasemia y anemia por deficiencia de hierro. Prdida
selectiva de K+ y agua por defecto de permeabilidad o carencia de ATP (Efecto Gardos). Presencia
de hemoglobinas anormales tales como S, C, D, E.
Con excepcin de las clulas rojas deshidratadas, un incremento en la superficie de membrana,
bien sea relativo o absoluto, tiene poco efecto sobre la deformabilidad o vida media del hemate y
es usualmente inocuo.
Mecnicamente se puede inducir la formacin de dianocitos por aplastamiento excesivo; de ah la
necesidad de observar si la distribucin de estas clulas es uniforme (verdadera) o si por el
contrario se concentra en reas delgadas del extendido.
Eliptocito u ovalocito.
Es bsicamente un disco bicncavo oval con extremos redondeados, su forma vara desde una
simple distorsin ligeramente oval hasta casi cilndrica elongada con polarizacin de la
hemoglobina. En los extendidos de sangre de individuos normales, las clulas elpticas u ovales
usualmente constituyen menos del 1% de los eritrocitos. Proporciones un poco ms altas se
observan en pacientes con anemias, particularmente megaloblsticas y microcticas hipocrmicas.
La presencia de un nmero significativo de clulas elpticas (20% - 75%) en sangre perifrica se
asocia con un desorden clnico y genticamente heterogneo conocido como ELIPTOCITOSIS
HEREDITARIA (EH). El defecto bioqumico de los eliptocitos hereditarios involucra las protenas de
esqueleto de membrana.
Se encuentran las siguientes condiciones:
- eliptocitosis hereditaria- anemia ferropnica-anemia mieloptsica- anemia megaloblstica-
talasemia - anemia sideroblstica - anemia congnita diseritropoytica
Clula falciforme o drepanocito.
Es una clula elongada con extremos puntiagudos o espiculados que semejan una hoz o media
luna. La patologa bsica de la transformacin falciforme est directamente ligada con la
concentracin de hemoglobina S (B6 Glu Val), que tiene la propiedad de polimerizarse en
condiciones de hipoxemia, acidosis, altos niveles de 2-3 DPG y deshidratacin del glbulo rojo.
La polimerizacin de la desoxi-hemoglobina S, es un proceso altamente complejo que resulta de la
formacin de tetrmeros de hemoglobina en solucin. La transformacin sol-gel es el hallazgo que
permite cambios en la viscosidad, distorsin en la morfologa celular e infartacin de rganos que
caracterizan las manifestaciones clnicas de la enfermedad.
Anillos de Cabot. Remanentes nucleares en forma de anillos circulares doblados sobre si mismos o
en figura de ocho. En intoxicacin por plomo, anemia perniciosa y anemias hemolticas. Coloracin
Wright.
Cuerpos de Heinz.
Hemoglobina agregada o desnaturalizada. En pacientes con sndromes talasmicos o de
hemoglobinas inestables, en el estrs oxidante cuando hay deficiencias enzimticas de la va de
pentosas principalmente y pacientes con asplenia. Coloracin azul de cresil brillante.
Siderocitos. Representan hierro no hemoglobnico dentro de los eritrocitos. Se observan
aumentados en pacientes esplenectomizados y en pacientes con infecciones crnicas, anemia
aplstica o en anemias hemolticas.
4. CROMASIA. Variaciones en el contenido de hemoglobina (color).
Los eritrocitos normales tienen un PCH de aproximadamente 30 pg. En frotis teidos, el eritrocito
tiene un rea central de palidez de ms o menos la tercera parte del dimetro de la clula. En
ciertos trastornos las clulas llegan a contener menos hemoglobina de lo normal. El nico
eritrocito que dispone de ms hemoglobina de lo normal en relacin con su volumen es el
esferocito, el que carece de un rea central de palidez y se tie en forma uniformemente densa.
Normocroma. Trmino utilizado para indicar que el eritrocito contiene una cantidad de
hemoglobina igual al nivel normal determinado por la concentracin de hemoglobina corpuscular
media (PCHC).
Hipocroma. Se origina por una sntesis anormal de hemoglobina, asociada a deficiencia de hierro,
anemia sideroblstica, talasemia y anemia de las enfermedades crnicas. Se observa el eritrocito
con una mayor palidez central.
Hipercroma. Trmino que no representa una situacin real y que por lo tanto no se acoge.
Policromatoflia. Los eritrocitos policromatfilos (reticulocitos), suelen ser ms grandes que las
clulas normales en los frotis de sangre teidos con Romanowsky. El tinte azuloso es producido
por la presencia de RNA residual en el citoplasma. Cantidades abundantes de estas clulas se
presentan cuando hay disminucin en la supervivencia del eritrocito o hemorragia, y una mdula
sea hiperplsica eritroide.
Knizocito.
Deriva su nombre de la similitud con una canasta, presenta una distribucin de la hemoglobina a
manera de banda central que deja espacios no coloreados a ambos lados. Se observa asociado a
anemias hemolticas. Su gnesis no es clara.
Se observan en la sangre de los astronautas a los 20-30 das despus del lanzamiento,
desapareciendo hacia los 3 meses.
LEPTOCITOS - LEPTOCITOSIS
Hematis maduros con un rea en la que se concentra una mayor cantidad de hemoglobina en
una zona central clara, lo que les confiere el aspecto de diana. Tambin reciben el nombre de
codocitos o de hematis en diana.
Se presentan en las condiciones seguientes:
- Talasemia (enfermedad de Cooley)- Hepatopatas con dficit de lecintincolesterol-aciltransferasa
- Hemoglobinopatas de tipo C - Postesplenectoma y anemias ferropnicas muy graves