Scientia Agropecuaria 8 (1): 43 55 (2017)

a. Facultad de Ciencias

Scientia Agropecuaria Agropecuarias

Universidad Nacional de
Website: http://revistas.unitru.edu.pe/index.php/scientiaagrop Trujillo

Efecto de la intensidad de diodos electroluminosos y

fotoperiodo en la optimizacin de la produccin de biomasa de
Spirulina (Arthrospira)
Effect of the light emitting diodes intensity and photoperiod in the
optimization of the Spirulina (Arthrospira) biomass production
Vsquez-Villalobos, V.*; Vergaray, D.; Mndez, J.; Barrios, I.; Baquedano,
R.; Caldas, C.; Cruz, J.; Gamboa, J.; Rivera, I.
Universidad Privada Antenor Orrego - Escuela de Ingeniera en Industrias Alimentarias. Av. Amrica Sur 3145
Monserrate. Trujillo, Per.

Received September 15, 2015. Accepted March 11, 2017.

Resumen
Se optimiz la produccin de biomasa () de cultivos batch de Spirulina sp. en fotobiorreactores a escala de
laboratorio (FBL) de 0,2 L, por efecto de X 1: intensidad de diodos electroluminosos (LEDs) entre 1,25 a 41,7
klux y X2: fotoperiodo de12/12 a 24/0, h de luz/h de oscuridad (L/O) utilizando un diseo compuesto central
rotacional (DCCR) y metodologa de superficie de respuesta (MSR). Asimismo, se evaluaron las
caractersticas hidrulicas y el valor de un cultivo batch de Spirulina en un fotobiorreactor de canal bucle
cerrado abierto a la atmsfera (FB-BCAA) por efecto de la iluminacin LED de 8,31,9 klux y fotoperiodos
de 12/12 y 24/0 h L/O. En los FBL se encontr dos zonas ptimas de , ambas con una intensidad LED de
21,5 klux y fotoperiodos 12/12 y 24/0 h L/O, siendo los valores de 1,65 y 1,62 respectivamente. El modelo
matemtico que indic estas zonas fue de segundo orden (p = 0,000396 < 0,05) con una consistencia de
prediccin de R = 0,92. En el FB-BCAA, el cultivo de Spirulina sp. con fotoperiodo de 12/12 h L/O, mostr
un valor de 0,72, una adaptacin ms rpida de = 4,62 h, una mayor velocidad especfica de crecimiento
de max= 0,033 h-1 y menor tiempo de consumo de energa de 74,05 h; comparado con el cultivo desarrollado
con fotoperiodo 24/0 h L/O. Los parmetros hidrulicos del FB-BCAA fueron: volumen de operacin 2,5 L,
velocidad de flujo 0,26 m/s, nmeros de Reynolds (Re) 15488, Froude (Fr) 0,60 y Vedernikov (Ved) 0,90.
Palabras clave: Spirulina; fotobiorreactor; air-lift; hold-up; LED; optimizacin; fotoperiodo.

Abstract
Biomass () production from Spirulina sp. batch cultures was optimized in laboratory scale photobioreactors
(LPB) of 0.2 L, by the effect of X 1: intensity of light emitting diodes (LEDs) and X 2: photoperiod, between
1.25-41.7 klux and 12/12-24/0 hours of light/dark (L/D) respectively using a central composite rotational
design (CCRD) and response surface methodology (RSM). The hydraulic characteristics and value from
Spirulina batch cultures were also evaluated in a closed-loop channel photobioreactor open to the atmosphere
(PB-CLOA) by the effect of the lighting LED of 8.31.9 klux and photoperiod of 12/12 and 24/0 h L/D. Two
optimal zones of in LPB were identified, both with a 21.5 klux LED intensity and photoperiod relationship
of 12/2 and 24/0 h L/D, with values of 1.65 and 1.62 respectively. The mathematical model which indicated
the optimal zones was of 2nd order, which had a high significance (p = 0.000396 < 0.05) achieving a
predictive value of R2 = 0.92. In the PB-CLOA, the cultivation of Spirulina sp. with photoperiod of 12/12 h
L/D, showed a value of 0.72, a more rapid adaptation of = 4.62 h, a higher specific growth rate of
max=0.033 h-1 and reduced time energy consumption of 74.05 h; compared to culture developed with
photoperiod 24/0 h L/D. The PB-CLOA hydraulic parameters were: operation volume 2.5 L, flow velocity
0.26 m/s, numbers of Reynolds (Re) 15488, Froude (Fr) 0.60 and Vedernikov (Ved) 0.90.
Keywords: Spirulina; photobioreactor; air-lift; hold-up; LED; optimization; photoperiod.

---------

* Corresponding author 2017 All rights reserved.

E-mail: vvasquezv@upao.edu.pe (V. Vsquez-Villalobos). DOI: 10.17268/sci.agropecu.2017.01.04

- 43 -
 V. Vsquez-Villalobos et al. / Scientia Agropecuaria 8 (1) 43 55 (2017)
1. Introduccin
La Spirulina es una microalga filamentosa
(Cianobacteria) en forma de espiral que
crece en aguas azul verdosas. Las especies
consideradas seguras para su consumo son
S. platensis, S. maxima y S. fusiformis
(Serbana et al., 2016). Pueden ser
fcilmente separadas de su medio, poseen
alta digestibilidad y llegar a contener hasta
70% de protena de excelente calidad
(Yean-Chang, 2011). Investigaciones han
demostrado su potencial aplicacin en el
rea de alimentos funcionales, con capaci-
dad de desarrollo en segmentos industria-
les como alimentos saludables y terapu-
ticos (Wen-Qing et al., 2016; Raposo y de
Morais, 2015). Por lo que es considerada
de alto valor econmico, conveniente para
cultivos a gran escala (Benelhadj et al.,
2016). Un elevado rendimiento de biomasa
de Spirulina puede obtenerse ajustando
ciertos parmetros, como son la intensidad
de luz, modo de operacin y configuracin
del fotobiorreactor (FBR).
Los cultivos por lote (batch), son los ms
ampliamente aplicados debido a su simpli-
cidad y flexibilidad (da Silva et al., 2016).
Los FBRs pueden aumentar la superficie
expuesta a la luz con una elevada relacin
superficie/volumen (S/V), lo que permite
incrementar la concentracin celular. En
FBRs tubulares cerrados, la luz es
eficientemente capturada por las clulas,
pero sus costos de instalacin son elevados
(Singh y Sharma, 2012) en comparacin
con las piletas convencionales abiertas a la
atmsfera (Rodrigues et al., 2010) que en
forma de canal de bucle cerrado con
recirculacin, constituye la configuracin
ms ampliamente utilizada para la
produccin comercial de Spirulina
(Brennan y Owende, 2010; da Silva et al.,
2016), siendo el mtodo ms barato,
debido a que requieren baja potencia y son
fciles de mantener y limpiar. Pero
presentan desventajas en la disponibilidad
de luz, agitacin, pH, temperatura,
evaporacin, prdida de CO2 cuando
utilizan este tipo de fuente carbono,
acumulacin de oxgeno fotosinttico (O2),
-44-
requerimiento de terreno elevado y suscep-
tibilidad a la contaminacin (Ramrez-
Mrida et al., 2015a,b), por lo que sus
rendimientos son bajos (Brennan y
Owende, 2010).
El agua evaporada puede ser restituida
peridicamente (Handler et al., 2012). Su
mezclado debe ser adecuado para mantener
las clulas en suspensin, evitando la
estratificacin trmica, optimizando la
distribucin de nutrientes, el intercambio
del gas, reduciendo el efecto sombra y la
fotoinhibicin. En los cultivos en canales,
velocidades de 5 cm/s son suficientes y en
FBRs tubulares son usados sistemas de
elevacin por aire (air-lift) (Ugwu et al.,
2008). La intensidad de luz y la longitud
de onda juegan un rol crtico en la
actividad fotosinttica, lo cual es conse-
cuentemente reflejada en su crecimiento,
debido a que los fotosistemas catalizan la
reaccin de conversin de energa
lumnica, capturada por las molculas
excitadas de la clorofila en forma de
energa utilizable (Cheirsilp y Torpee,
2012). En este sentido, varios estudios se
han desarrollado para mejorar la eficiencia
de utilizacin de la luz y reducir los costos
de sistemas de iluminacin artificial.
Cultivos de laboratorio utilizan tubos
fluorescentes, los que consumen alta
energa comparada con los diodos
emisores de luz LEDs (Light Emitting
Diodes), cuyo tiempo de vida e intensidad
(W/m2) son 941% y 500% ms
respectivamente (Carvalho et al., 2011).
Muchos cultivos utilizan solamente energa
solar como fuente de luz. Sin embargo, el
rendimiento de los sistemas al aire libre, es
ms bajo que los realizados en recintos
cerrados (Chen et al., 2011). La irradiacin
de luz en los sistemas con luz artificial
debe proporcionarse con cuidado, ya que el
exceso de esta provoca un fenmeno
llamado fotooxidacin o fotoinhibicin
donde se produce daos del aparato
fotosinttico de la clula (Pedrosa-Bezerra
et al., 2012). Kebede y Ahlgren (1996) han
reportado en Spirulina estudios con
intensidades de luz entre 1,67 a 41,7 klux.
 V. Vsquez-Villalobos et al. / Scientia Agropecuaria 8 (1) 43 55 (2017)
Habiendo logrado condiciones ptimas a
27,5 klux. Existen reportes de tolerancias
de flujo en cultivos de Spirulina platensis
hasta 5000 mol fotn/m2s (417 klux)
cuando se utilizan fuente de LEDs con
flujo de luz discontinuo (Gordon y Polle,
2007). Carvalho et al. (2011) sostienen que
los LEDs poseen una intensidad lumnica
de 14,7 a 55,5 W/m2, con emisin de
energa en la regin de 400 a 500 nm de
0,04 a 0,08% y, que en la regin de 600 a
700 nm la emisin de energa es de 87,6 a
98,3%. Una longitud de onda de 600 a 700
nm es ms eficiente para la fotosntesis e
irradiancias entre 400 y 500 nm pueden
incrementar la tasa de crecimiento. Igual-
mente sostienen que diferentes especies de
microalgas requieren distintos espectros de
luz, dependiendo de los principales
pigmentos presentes en ella, lo que aunado
a la intensidad lumnica constituyen par-
metros importantes para el crecimiento y
metabolismo.
El fotoperiodo es otro factor importante, el
cual est constituido por el tiempo de
exposicin a la luz y oscuridad, lo que
tiene efecto sobre los ciclos de vida y
actividades metablicas de las microalgas.
Rodrguez y Triana (2006) han sostenido
que la Spirulina no puede soportar una
exposicin prolongada de iluminacin, ya
que podra ser destruido por fotlisis,
recomendando la necesidad de mantener la
iluminacin controlada en fotoperiodos
regulados de tiempo 12/12 horas
(da/noche). Aunque Habib et al. (2008)
han reportado que para S. platensis, se ha
encontrado que el fotoperiodo ptimo es
16 horas/da, basado en la evaluacin de la
densidad ptica y contenido de clorofila.
En este sentido en la presente investigacin
se trata de dilucidar los rangos de
intensidad lumnica de LEDs blanco y
fotoperiodo (L/O) en la produccin de
biomasa de Spirulina y la determinacin
los parmetros hidrulicos de importancia
en un fotobiorreactor de canal bucle
cerrado abierto a la atmsfera (FB-BCAA),
evalundose su produccin de biomasa en
un cultivo batch.
-45-
2. Materiales y mtodos
Materiales y equipos
Se cont con cultivos stock de Spirulina
sp. (Laboratorio de Biotecnologa Alimen-
taria de la Universidad Privada Antenor
Orrego de Trujillo UPAO - Per) mante-
nida en medio estndar Zarrouk con una
iluminacin de 5,0 klux. Como medio para
los cultivos experimentales se utiliz (g/L):
0,07 K2HPO4, 0,005 FeSO4, 0,1 NaNO3,
0,1 KNO3, 1,6 NaHCO3, 330 mL/L de agua
de mar filtrada para obtener 1,2% de
salinidad (Vsquez-Villalobos et al.,
2014). Fotobiorreactores de laboratorio
(FBL) de vidrio de 0,2 L de capacidad,
fotobiorreactor de canal bucle cerrado
abierto a la atmsfera (FB-BCAA) de PVC
(policlururo de vinilo) de 2,5 L de
capacidad mxima con un rea de
iluminacin de 867,6 cm2 (construido de
tubera PVC de 2 de dimetro comercial)
(Figura 1). La iluminacin de los cultivos
se realiz con LEDs de color blanco
ECORANGE 6500 k, 12W, 220 V. Para el
control del fotoperiodo (L/O) por ilumi-
nacin de los LED se utiliz un timer
ALION AHC 15A. La intensidad de luz
fue determinada con un medidor de lux
AEMC (mod CA813), se utiliz un
microscopio ptico 40X Leica (mod CME)
para realizar el recuento de clulas con una
cmara Neubauer (1/10 mm deep, brigth
line-Boeco, Germany), el pH se determin
con pHmetro Mettler Toledo con electrodo
inlab 43, para la inyeccin de aire al FB-
BCAA se utiliz un soplador de aire
(blower) de 0,24 kW, 0,32 HP, 3330 min-1.
Metodologa experimental
Optimizacin de la produccin de
biomasa () de cultivos batch de
Spirulina en fotobiorreactores a escala
de laboratorio (FBL)
La produccin de biomasa de Spirulina ()
fue determinada en trminos de log (N/N0),
(N: nmero de clulas/N0: nmero de
clulas iniciales). En los FBL, fue
evaluada en funcin a la intensidad
lumnica (X1) en rangos de 1,25 a 41,7
klux producida por iluminacin LED
blanco y, fotoperiodo (X2) en rangos de
 V. Vsquez-Villalobos et al. / Scientia Agropecuaria 8 (1) 43 55 (2017)
12/12 a 24/0 h de luz/h de oscuridad
respectivamente (L/O); de acuerdo al
planteamiento factorial: 2n+2*n+4 puntos
centrales. La amplitud y los puntos
centrales de las variables X1 y X2 se
determinaron a travs de un diseo
compuesto central rotacional (DCCR) con
un valor = 2, lo que posibilit una
matriz experimental con ocho (08)
tratamientos y cuatro (04) repeticiones en
el punto central, totalizando doce (12)
ensayos (Tabla 1). El recuento celular (N)
obtenido en cada ensayo permiti,
utilizando la ecuacin de Gompertz
(Vsquez-Villalobos et al., 2013) [YA =
exp(-exp(b - c*TA)] donde YA = log
(N/N0) donde : produccin de biomasa,
TA: tiempo (h), b, c: constantes; verificar
la optimizacin de en funcin de X1 y X2
utilizando metodologa de superficie de
respuesta (MSR), obtenindose un modelo
matemtico de segundo orden, el cual fue
analizado estadsticamente a travs del
coeficiente de determinacin (R2) y proba-
bilidad estadstica p < 0,05. Lo que posibi-
lit visualizar la regin ptima en un
grfico tridimensional y una superficie
bidimensional. Los rangos de la intensidad
lumnica de 1,25 y 41,7 klux fueron
tomados de valores reportados por Godoy
et al. (2011); Kebede y Ahlgren (1996)
respectivamente. Los FBL, fueron agitados
con aire proveniente de un blower (0,02
L/s) a los que se les ilumin con luz LED
blanco en los rangos indicados en la Tabla
1, aspecto que se obtuvo colocando las
luminarias a la distancia apropiada para
obtener los lux correspondientes y lo cual
fue controlado con un medidor de lux.
Asimismo, se control el pH, la tempera-
tura y N utilizando una cmara Neubauer.
Pruebas hidrulicas con agua corriente
en fotobiorreactor de canal bucle
cerrado abierto a la atmsfera (FB-
BCAA)
Para determinar los parmetros aplicables
al cultivo de Spirulina, previamente se
hicieron pruebas hidrulicas en el FB-
BCAA identificando los siguientes
parmetros: volumen de operacin, caudal
-46-
de aire suministrado al cultivo, Hold-up
(), Radio hidrulico (RH), Numero de
Reynolds (Re) y Nmero de Froude (Fr).
= (far fab) / far (1)
Donde far: tirante hidrulico aguas arriba; fab:
tirante hidrulico aguas abajo. Los tirantes
hidrulicos fueron determinados en el punto de
medicin central del canal (Figura 1), con
ayuda de un Vernier por el desplazamiento de
la mandbula mvil.
(2)
Donde r: radio de la tubera de PVC (m); f:
tirante hidrulico (m); c: cuerda = [4r2 4(r
f)2]; : ngulo formado entre dos radios (r) y la
cuerda (c) = 2sen-1[4fc/(4f2+c2)].
Re = 4RHV/v (3)
Donde V: velocidad del agua (m/s) (fue deter-
minada por inyeccin de azul de metileno en
un punto fijo aguas arriba y medicin del
recorrido a la aparicin del marcador en una
longitud fija aguas abajo); : viscosidad
cinemtica del agua a la temperatura del
experimento (m2/s).
Fr = V / (g[c(r-f)/2]/c) (4)
Donde g: aceleracin de la gravedad (9,8 m/s2).
Produccin de biomasa () en cultivo
batch de Spirulina en fotobiorreactor de
canal bucle cerrado abierto a la
atmsfera (FB-BCAA)
La produccin de biomasa de Spirulina en
FB-BCAA se realiz en dos fotoperiodos
12/12 y 24/0 h L/O, para lo cual se
instalaron tres focos LEDs separados
entre s 28,9 cm y a una distancia del fondo
en la lnea longitudinal central de 6,76
0,50 cm, que permiti obtener una ilumina-
cin de 21,5 klux y a ambos costados en el
fondo del canal de bucle cerrado del FB-
BCAA, una iluminacin de 8,31,9 klux.
El volumen del cultivo de microalgas fue
de 2,5 L, el cual fue mezclado y agitado en
el canal de bucle cerrado por movimiento
generado por elevacin de aire (air-lift),
producido por la aspersin de burbujas
(Fig. 1). La produccin mxima de bioma-
sa de Spirulina () fue determinada en
trminos de log (N/N0), donde N (clu-
las/mL) fue determinada utilizando cmara
Neubauer. Asimismo, se control el pH, la
temperatura y nivel de evaporacin.
 V. Vsquez-Villalobos et al. / Scientia Agropecuaria 8 (1) 43 55 (2017)

Figura 1. Vista lateral y superior del fotobiorreactor de canal bucle cerrado abierto a la atmsfera
(FB-BCAA) indicando la posicin de los LEDs, ingreso de aire y puntos de medicin de los
tirantes hidrulicos.

3. Resultados y discusin biomasa de Spirulina (), denotndose la

accin limitante de la intensidad lumnica
Optimizacin de la produccin mxima
por encima de 21,5 klux, conjuntamente
de biomasa () de cultivos batch de
con un efecto de alta eficiencia de
Spirulina en fotobiorreactores a escala
produccin de biomasa en dos valores
de laboratorio (FBL)
contrapuestos de fotoperiodo 12/12 y 24/0
En la Tabla 1 se observa el efecto de la
h L/O, con similares resultados de de
intensidad lumnica de los LEDs y del
1,655 y 1,620 respectivamente.
fotoperiodo en la produccin mxima de

Tabla 1
Influencia de la intensidad lumnica y fotoperiodo en la produccin de biomasa () de Spirulina en
FBL
Intensidad Fotoperiodo Produccin Coeficiente
Temperatura
Ensayos lumnica (klux) (horas de luz) de biomasa pH de regresin
(C)
X1 X2 () (R)
1 -1 7,2 -1 13,8 0,611 10,090,09 28,60,7 0,88
2 1 35,8 -1 13,8 0,812 10,290,33 28,80,8 0,91
3 -1 7,2 1 22,2 0,728 10,501,16 28,50,7 0,99
4 1 35,8 1 22,2 1,136 10,250,21 28,80,6 0,99
5 -2 1,25 0 18 0,261 9,20,04 29,61,0 0,82
6 2 41,7 0 18 0,755 10,370,28 29,60,9 0,90
7 0 21,5 -2 12 1,655 10,210,16 27,61,1 0,98
8 0 21,5 2 24 1,620 10,070,15 29,70,9 0,97
9 0 21,5 0 18 0,570 10,340,15 28,71,2 0,93
10 0 21,5 0 18 0,646 10,250,06 28,51,2 0,98
11 0 21,5 0 18 0,591 10,260,07 28,61,2 0,97
12 0 21,5 0 18 0,593 10,270,09 28,71,2 0,98

-47-
 V. Vsquez-Villalobos et al. / Scientia Agropecuaria 8 (1) 43 55 (2017)
Una excesiva intensidad de iluminacin de
41,7 klux puede conducir a la foto-
oxidacin, mientras que bajos niveles
como 1,25 klux son limitadores de
crecimiento de las microalgas. Esto es
concordante con lo sostenido por Carvalho
et al. (2011) y Pedrosa-Bezerra et al.
(2012) quienes adems sostienen, que el
requerimiento de luz es uno de los
parmetros ms importantes para el
desarrollo de los cultivos de microalgas,
por lo que la luz debe ser proveda a una
intensidad, duracin y longitud de onda
adecuadas. La existencia de los valores
contrapuestos de fotoperiodo 12/12 y 24/0
h L/O, con similares resultados de ,
podra estar ligado a la naturaleza de la
fuente de iluminacin y a la fotoaclima-
tacin, ya que ambos cultivos recibieron
iluminacin LED blanco de 21,5 klux. Al
respecto Dubinsky et al. (1995) han
sostenido que debido a los cambios
relativamente rpidos y amplios en la luz
del ambiente al que estn sometidas, las
microalgas tienen una capacidad notable
de fotoaclimatacin, la cual est ligada a
una serie de cambios interrelacionados
fsicos, biofsicos, bioqumicos y en el crecimiento de la microalga.
fisiolgicos que ayudan a las clulas a
optimizar el uso de la luz disponible. Por
lo que los daos por exceso de luz
dependen en cierta medida del estado de
fotoaclimatacin de las clulas. Clulas
aclimatadas a luz relativamente baja
(adaptada a la sombra), previas a la
exposicin a radiacin de alta intensidad
pueden ser daadas, debido a la baja dosis
de irradiacin que aquellas clulas que han
sido aclimatadas a alta iluminacin. En
cultivos batch cultivados al aire libre, es
recomendable aclimatar previamente el
inculo a altos valores de luz. Por otro
lado, cuando el inculo celular es pequeo,
la irradiacin inicial tambin debe ser baja,
de lo contrario dao fotolumnico puede
causar colapso del cultivo (Carvalho et al.,
2011).
Por otro lado, el pH y la temperatura son
aspectos igualmente importantes. Habib et
al. (2008) han reportado que Spirulina
platensis cultivada en medio Zarrouk
-48-
normal, con un pH de 10,5 a 11,0 y a una
temperatura superior a 35 C, produce una
disminucin del crecimiento y del conte-
nido de -caroteno. Este aspecto est
ligado a la intensidad de la luz, un
incremento en la intensidad hasta 10 klux
da lugar a un contenido mayor -caroteno.
Cuando se cultivan con iluminacin de luz
roja, el contenido de -caroteno es ms
alto, y ms bajo con luz azul y blanca.
Wen-Qing et al. (2016) reportan un pH y
temperatura ptimos para el crecimiento de
Spirulina de 9,5-10,0 y 30 C respectiva-
mente, con medio de cultivo especfico y
con mayores concentraciones (g/L) de: 0,6
KH2PO4, 2,0 NaNO3, 1,2 K2SO4, 10,0
NaHCO3, 0,2 MgSO47H2O, en compara-
cin con el medio de cultivo utilizado en la
presente investigacin y sin presencia de
agua de mar. Los valores de pH y
temperatura en los FBL en la presente
investigacin fluctuaron entre 9,82-10,50 y
27,6-29,7 C respectivamente (Tabla 1),
habiendo superado ligeramente los valores
ptimos de pH y con una temperatura
menor a lo recomendado por Wen-Qing et
al. (2016), aspecto que puede influenciar
La optimizacin de la produccin de
biomasa utilizando MSR permiti obtener
un modelo de segundo orden, el cual tuvo
una consistencia de R2 = 0,92, p =
0,000396 < 0,05 y error absoluto medio de
12,5% entre los valores experimentales y
predichos:
= 8,518776 + 0,018157X1 0,000519X12
0,926863X2 + 0,02550X22 + 0,000865X1X2
En este sentido la representacin de la
superficie de respuesta y de contornos
(Figura 2), permite ubicar dos regiones
ptimas en los intervalos 12/12 y 24/0 h
L/O respectivamente, iluminadas con luz
LED blanco.
Los resultados observados en la Figura 2
resaltan el alcance del empleo de la luz
LED, que en la presente investigacin fue
de color blanco, la cual de acuerdo a
Rengifo y Vargas (2012) posee un rango
de emisin de longitudes de onda amplio
entre 400 a 700 nm con dos picos de
emisin azul y verde (462,5 y 545,7 nm).
 V. Vsquez-Villalobos et al. / Scientia Agropecuaria 8 (1) 43 55 (2017)
Carvalho et al. (2011) sostienen que una
longitud de onda de 600 a 700 nm, es ms
eficiente para la fotosntesis e irradiancias
entre 400 y 500 nm pueden incrementar la
tasa de crecimiento. En este sentido, la luz
LED empleada en la presente investigacin
cubre este espectro de longitudes de onda.
Con la peculiaridad sostenida por Carvalho
et al. (2011), quienes sostienen, que cada
tipo de microalga se caracteriza por una
curva especfica, que relaciona su tasa de
crecimiento con la intensidad de luz
incidente a una temperatura y, que cerca de
la mitad del espectro completo de la luz
entre 400 a 700 nm, es fotosintticamente
til; el cual es normalmente utilizado para
el crecimiento de microalgas.
(a)
(b)
Figura 2. Superficie de respuesta (a) y de
contornos (b) de la relacin de intensidad
lumnica (X1) y fotoperiodo (X2) en la
produccin mxima de biomasa () de
Spirulina sp.
-49-
Si bien es cierto que, en la presente
investigacin, se demuestra la capacidad
de la Spirulina a crecer en dos
fotoperiodos de 12/12 y 24/0 h L/O
respectivamente, iluminadas con luz LED
blanco, otros investigadores como Wen-
Qing et al. (2016) han utilizado luz LED
rojo (longitud de onda, 620-630 nm) con
una irradiacin diaria de 18 a 22 h con
6000 lux de intensidad, habiendo obtenido
la mayor produccin de materia seca con
un tiempo de exposicin de 8 h diarias.
Asimismo, combinaron luces LED azul-
rojo, habiendo obtenido an mayor
produccin de biomasa que con luz LED
rojo, por lo que los resultados de los
referidos investigadores deben ser tomados
en cuenta para investigaciones futuras en
modelos escalables.
Pruebas hidrulicas con agua corriente
en fotobiorreactor de canal bucle
cerrado abierto a la atmsfera (FB-
BCAA)
En la Figura 1 se observa los esquemas de
las vistas lateral y superior del FB-BCAA.
En la vista de superior se denota la
direccin de flujo de recirculacin en el
canal de bucle cerrado y en la vista lateral,
se observa la tubera de interconexin entre
los canales aguas arriba y abajo (ar, ab),
as como el posicionamiento del aspersor
en el lado ar, que por el ingreso del aire
posibilita la elevacin del lquido (air-lift)
creando un diferencial en el tirante
hidrulico o hold-up (). La formacin del
en el FB-BCAA, aumenta con el
volumen de operacin y caudal de aire
(Figura 3). Esta tendencia llega a su
mximo a los 2,0 L de volumen, donde se
obtiene el mayor valor de con el caudal
mximo de aire suministrado de 133,6
mL/s. La formacin del produce una
variacin de los tirantes hidrulicos ar y
ab, donde ar > ab (Figura 4), generando
una pendiente en la superficie con el
subsecuente movimiento y generacin de
velocidad, lo que influye en el caso del
cultivo de Spirulina en los niveles de
turbulencia y aprovechamiento de la
energa lumnica.
 V. Vsquez-Villalobos et al. / Scientia Agropecuaria 8 (1) 43 55 (2017)

alto significar en consecuencia, una alta

Figura 3. Variacin del del agua en funcin
al volumen del FB-BCAA y caudal de aire
suministrado.
velocidad del cultivo en el FB-BCAA. La
turbulencia tambin se utiliza como
sinnimo de Re, en muchos trabajos sobre
mezclado de algas, un Re alto corresponde
a flujo turbulento, mientras que un Re bajo
corresponde a flujos laminares. En
estructura laminar la viscosidad amortigua
las inestabilidades de un flujo vortex, los
que tienden a ser suprimidos rpidamente
(Prussi et al., 2014). Por lo que el nivel de
turbulencia, va influir en el mezclado de la
suspensin de microalgas, necesaria para
estar en continuo contacto con el sustrato,
eliminar oxgeno y aprovechar la energa
lumnica para un adecuado desarrollo. En
la Figura 6 se observa un Re superior a
14000, con un valor especfico de 15127,
el cual se logra con un caudal de aire
suministrado de 73,3 mL/s y con el mayor
volumen de lquido de 2,5 L en el FB-
BCAA.

Figura 4. Variacin del tirante hidralico ar y

ab en funcin al caudal de aire suministrado y
volumen de agua del FB-BCAA.

Conforme se observa en la Figura 5, la

velocidad del lquido est influenciada por
el volumen de operacin del BF-BCAA,
con un volumen mximo de operacin de
2,5 L, se alcanza la mayor velocidad en el
agua de 26 cm/s con un caudal de aire Figura 5. Variacin de la velocidad del agua
promedio suministrado de 73,3 mL/s. Con en funcin al caudal de aire suministrado y
un mayor caudal del aire suministrado la volumen del FB-BCAA.
velocidad no se incrementa. Jimnez et al.
(2003) trabajaron en cultivos de Spirulina
con piletas semi industriales de PVC de
1350 L, 13500 L y una 135000 L (450 m2),
con una profundidad de la suspensin de
30 cm, recirculadas mediante rueda de
paletas a una velocidad de 30 cm/s, mayor
que la utilizada en la presente
investigacin. En la literatura, la intensidad
de mezcla se define generalmente por el
nmero de Reynolds (Re) (Richmond y
Hu, 2013): Re alto est asociado con alto Figura 6. Variacin del Re del agua en funcin
nivel de la mezcla y viceversa. Re es al caudal de aire suministrado y volumen del
proporcional a la velocidad de flujo, un Re FB-BCAA.

-50-
 V. Vsquez-Villalobos et al. / Scientia Agropecuaria 8 (1) 43 55 (2017)
Gudin y Chaumont (1991) definieron para
un biorreactor tubular, que un flujo de
cultivo es laminar con un Re < 3500 y
turbulento Re > 3500, sostenan que el Re
= Vd/ depende mayormente de la
velocidad (V) y la viscosidad (), y que un
mezclado significativo del lquido por una
alta velocidad puede producir dao celular.
ptimas condiciones de exposicin a la
luz, por el diseo y funcionamiento del
FBR, requieren elevada velocidad del
lquido el que genera dao celular y por lo
tanto limita la productividad de la biomasa
del sistema de cultivo. Segn sostiene del
lamo (2005) el movimiento de un fluido
en el canal es turbulento para Re mayores
que RebRe2000, habiendo utilizado para
caracterizar el flujo la relacin Re = Vch/
(Re basado en la velocidad de la corriente
libre y en el espesor del flujo) y Reb =
Vbh/ (Re basado en la velocidad media y
el espesor de flujo), donde Vc es la
velocidad en el centro del canal y Vb es la
velocidad media, h es la semialtura en
canales, es la viscosidad cinemtica. Por
otro lado, Zucarelli y Morresi (2015)
sostienen que los nmeros tradicio-
nalmente empleados para el flujo en
canales abiertos son Re y el nmero de
Froude (Fr), con un Re > 3000 el flujo es
turbulento (Re = Vbd/ , donde d es la
profundidad de flujo. El nmero de Froude
(Fr) se utiliza para caracterizar el flujo
subcrtico o supercrtico. Si Fr < 1,0 el
flujo es subcrtico, aspecto que caracteriza
al FB-BCAA conforme se observa en la
Figura 7. Cuyo valor aumenta a mayores
volmenes de trabajo y a mayores valores
de caudal de aire suministrado (73,3 y
133,6 mL/s). Un flujo es estable o
inestable dependiendo de la tendencia de la
perturbacin (onda) a atenuarse o
amplificarse en el tiempo. Para indicar la
condicin de flujo de acuerdo a la
estabilidad de la superficie libre, se utiliza
el nmero de Vedernikov (Ved = Fr/Frs),
donde Frs es el nmero de Fr para la
condicin de flujo neutralmente estable.
Chen (1995) propuso expresiones de Frs
para diferentes nmeros de flujo, que
obedecen a diferentes distribuciones de
-51-
velocidad. Considerando para el presente
experimento un flujo hidrulicamente
turbulento con superficie lisa, Fs =
2/(1+3m), donde m = 1/6. Los valores de
Fr en las condiciones de desarrollo
experimental en el FB-BCAA, fueron del
orden de 0,39 a 0,60, mostrando un Ved de
0,59 a 0,90 (Ved < 1), es decir la celeridad
de la onda cinemtica es menor que la
celeridad de la onda dinmica, por lo que
el flujo se puede considerar estable, donde
la celeridad de la onda dinmica est
influenciada por las fuerzas de presin e
inercia.
Figura 7. Variacin del Fr del lquido en
funcin del volumen del FB-BCAA y caudal
de aire suministrado.
Los aspectos de agitacin y mezclado en el
FB-BCAA es de relevante importancia, por
su utilizacin en cultivo de microalgas. En
relacin a este aspecto, se reporta que
microalgas dinoflageladas son muy
sensibles a las tensiones de cizalla y
fuerzas hidrodinmicas, generadas por la
turbulencia en los FBRs (Garca-Camacho
et al., 2011; Lpez-Rosales et al., 2015).
Gallardo-Rodrguez et al. (2009) observa-
ron influencia de la turbulencia a pequea
escala, asociadas con la agitacin y
aireacin en los bioprocesos, que en el
caso de la presencia de clulas de
Spirulina, si esta es excesiva podra
acarrear algunos inconvenientes. Por otro
lado, Mitsuhashi, et al. (1994) estudiaron
en un experimento de corta duracin, la
naturaleza de la tasa fotosinttica de una
 V. Vsquez-Villalobos et al. / Scientia Agropecuaria 8 (1) 43 55 (2017)
suspensin de Spirulina, sometida a un
flujo hidrodinmico cortante o de cizalla
con luz fluorescente, encontrando que un
flujo cortante incrementa la fotosntesis,
pero simultneamente produce destruccin
celular. En un experimento que los
referidos autores denominan de larga
duracin (100h), encontraron que tanto la
tasa de crecimiento como la morfologa de
la Spirulina, son sensibles a los estmulos
mecnicos del fluido y, que una aplicacin
de 100h de tensin mecnica sobre la
Spirulina, puede llevar a la adaptacin de
la funcin fotosinttica y de su morfologa;
que la tasa de crecimiento depende del
esfuerzo cortante, el cual proporciona a las
microalgas un estmulo fsico. Asimismo,
Ravelonandro et al. (2011) encontraron
que las clulas de Spirulina son frgiles y,
en una columna de burbujas sin mezclado
adicional existe un mejor crecimiento,
confirmando su sensibilidad al esfuerzo
cortante. En este sentido en la presente
investigacin, la alta turbulencia podra
haber estimulado a una adaptacin de la
fotosntesis, adicionalmente a los efectos
lumnicos observados en los fotoperiodos
de 12/12 y 24/0 h L/O. Ravelonandro et al.
(2011) sostienen que la columna de
burbujas, parece ser el sistema ms
adecuado para el estudio del crecimiento
de Spirulina en escala de laboratorio, as
como a gran escala. En este sentido en la
presente investigacin, el flujo del cultivo
estuvo basado en un sistema de columna
de burbujas, que produjo un entre ar y ab
generando turbulencia por el movimiento
del cultivo en el FB-BCAA.
Produccin de biomasa () en cultivo
batch de Spirulina en fotobiorreactor de
canal bucle cerrado abierto a la
atmsfera (FB-BCAA)
En la Figura 8 se observa el cultivo de
biomasa de Spirulina en FB-BCAA
iluminado con luz LED, con un valor de
8,31,9 klux en el canal de bucle cerrado,
cuyo valor fue evaluado en dos
fotoperiodos de 12/12 y 24/0 h L/O
respectivamente.
-52-
Figura 8. Fotobiorreactor de canal bucle
cerrado abierto a la atmsfera (FB-BCAA) con
cultivo de Spirulina y luminarias LED blanco.
En la Tabla 2 se muestra los parmetros de
la cintica de crecimiento para ambos
fotoperiodos, modelados con la ecuacin
de Gompertz (Figura 9 a y b).
Tabla 2
Parmetros de la cintica de crecimiento de
Spirulina sp. en FB-BCAA con 8,31,9 klux de
intensidad lumnica y dos fotoperiodos
Fotoperiodo Fotoperiodo
Parmetros
12 /12 h L/O 24/0 h L/O
Produccin de biomasa ()
0,72 0,85
(log N/N0)
Fase de adaptacin () h 4,62 9,86
Velocidad especfica de
0,033 0,026
crecimiento (max) h-1
Tiempo de generacin (G) h 20,81 27,1
Coeficiente de regresin (R) 0,96 0,94
Debido a la evaporacin, se tuvo que
restituir dos veces agua a los cultivos a
efectos de mantener las condiciones
hidrulicas del FB-BCAA. Se observa que
una produccin de biomasa () de 0,72
(362746.323 clulas netas en una S/V de
0,040 m2/L) y 0,85 (358916.667 clulas
netas en una S/V de 0,048 m2/L) (Tabla 2),
no representan la proporcionalidad de las
clulas netas como biomasa producida. Al
respecto se observa una menor produccin
de clulas netas en el cultivo realizado,
utilizando un fotoperiodo de 24/0 h L/O.
 V. Vsquez-Villalobos et al. / Scientia Agropecuaria 8 (1) 43 55 (2017)
(a)
(b)
Figura 9. Cintica de crecimiento de Spirulina
sp. con 8,31,9 klux en FB-BCAA en: (a)
fotoperiodo 12/12 h L/O y (b) fotoperiodo 24/0
h L/O.
Asimismo, en los dos fotoperiodos se tuvo
una baja relacin S/V, aspecto que limita el
incremento de la concentracin celular
(Singh y Sharma, 2012). Por otro lado, el
cultivo realizado con un fotoperiodo de
12/12 h L/O mostr una adaptacin ()
ms rpida, una mayor velocidad especfi-
ca de crecimiento (max) (Figura 9a), con
mayor pendiente en la fase de crecimiento
logartmico. Variaciones en el desarrollo
de la Spirulina, estuvo influenciado por el
fenmeno de formacin de biopelculas
(fouling) de las clulas en las paredes del
FB-BCAA, por lo que diariamente la
biomasa fue desprendida por accin de un
cepillado. De acuerdo a Fang et al. (2014),
las biopelculas fototrficas son matrices
cerradas de comunidades microbianas
propias de los quimiotrfos y fottrofos
(cianobacterias y microalgas), inducidas
por la energa lumnica. Generalmente las
-53-
fottrofas oxignicas, tales como las
cianobacterias, algas verdes y diatomeas,
tpicamente habitan en la superficie de las
biopelculas fototrficas, las que, utilizan-
do energa lumnica y reduccin de dixido
de carbono, generan oxgeno y sustratos
orgnicos, los que soportan el crecimiento
de los hetertrofos. Estas comunidades
juegan un papel ecolgico importante en el
ciclo del carbono y nutrientes. El
desarrollo de biopelculas fototrficas es
promovida por la excrecin de sustancias
polimricas extracelulares, las cuales
sirven como un agente autoadhesivo,
permitiendo la formacin de una matriz de
biopelcula con incrustacin celular.
Los valores de pH de los cultivos fueron de
9,720,15 y 9,70,2 a temperaturas de
27,90,9 y 27,30,6, mostrando valores
ptimos de pH (9,5-10,0) y menor
temperatura (30 C) (Wen-Qing et al.,
2016). La iluminacin promedio en los
cultivos en el canal de bucle cerrado fue de
8,31,9 klux, pero como se observa en la
Figura 8 esta no fue uniforme, ya que
como sostienen Rengifo y Vargas (2012),
los LEDs blanco poseen un pico de
intensidad mxima, en un ngulo de
emisin = 0 con una espectro lumnico
difuso, debido a la dispersin de la luz,
produciendo un rango de emisin de
aproximadamente 30 con una mayor
intensidad sobre el centro, aunadas a que
en los dos extremos del canal de bucle
cerrado, se producen zonas oscuras durante
el movimiento del cultivo y asimismo, por
el movimiento las clulas de microalgas en
la zona expuesta a la atmosfera, estas
alternan entre la superficie y el fondo,
entre zonas de luz y oscuridad con una
determinada frecuencia, lo cual puede
influenciar en el crecimiento de las
microalgas mejor, que la luz dosificada en
forma continua (Amini-Khoeyi et al.,
2012; Li et al., 2014). Por otro lado, la
intensidad lumnica decrece con el
aumento de la densidad celular durante el
desarrollo del cultivo (Contreras-Flores et
al., 2003; Markou y Georgakakis, 2011).
Al respecto Chen et al. (2016) sostienen
que solo una adecuada intensidad, duracin
 V. Vsquez-Villalobos et al. / Scientia Agropecuaria 8 (1) 43 55 (2017)
y longitud de onda lumnica es apropiada
para el cultivo de microalgas.
Conforme se observa en la Figura 9 los
cultivos de Spirulina en el FB-BCAA,
lograron alcanzar la mayor produccin de
biomasa a las 148,1 y 105,9 horas, con los
fotoperiodos de 12/12 y 24/0 h L/O
respectivamente. En el primer caso con
fotoperiodo 12/12 h L/O se tiene menor
tiempo de 74,05 h de consumo de energa;
comparado con fotoperiodo 24/0 h L/O con
un tiempo de 105,9 h de consumo de
energa. Lo que indica la ventaja del uso de
fotoperiodos de 12/12 h L/O, mxime que
las horas de luz puede ser obtenido de
fuente de iluminacin natural.
4. Conclusiones
Se determin en fotobiorreactor de
laboratorio (FBL) dos zonas ptimas de
produccin de biomasa de Spirulina sp. ()
de 1,65 y 1,62, ambas con una intensidad
de diodos electroluminosos (LEDs) de
21,5 klux y fotoperiodo 12/12 y 24/0 h de
luz/oscuridad (L/O) respectivamente. El
modelo matemtico que indica las zonas
ptimas fue de segundo orden, el cual tuvo
alta significancia (p = 0,000396 < 0,05),
logrando un valor de prediccin R = 0,92,
entre los valores experimentales de y los
predichos.
Los parmetros hidrulicos determinados
con agua corriente en fotobiorreactor de
canal bucle cerrado abierto a la atmsfera
(FB-BCAA) fueron: velocidad de 0,26
m/s, la cual se logr con un volumen del
FB-BCAA de 2,5 L y con un flujo de aire
suministrado de 73,3 mL/s para producir el
air-lift. El nmero de Reynolds (Re) fue de
15127 de naturaleza turbulenta. Asimismo,
los nmeros de Froude (Fr) y Vedernikov
(Ved) mostraron un valor < 1, lo que indic
su naturaleza subcrtica y estable del
fluido.
El cultivo de Spirulina desarrollado en FB-
BCAA con iluminacin LED de 8,31,9
klux y fotoperiodo de 12/12 h L/O, mostr
una produccin de biomasa de 0,72, una
adaptacin ms rpida () de 4,62 h, una
mayor velocidad especfica de crecimiento
(max) (0,033 h-1) y menor tiempo de
-54-
consumo de energa de 74,05 h; compa-
rado con el cultivo de Spirulina
desarrollado con fotoperiodo 24/0 h L/O.
Lo que indica la ventaja del uso de
fotoperiodos de 12/12 h L/O.
Referencias bibliogrficas
Amini-Khoeyi, Z.; Seyfabadi, J.; Ramezanpour, Z. 2012.
Effect of light intensity and photoperiod on biomass
and fatty acid composition of the microalgae Chlorella
vulgaris. Aquaculture International 20(1):41-49.
Benelhadj, S.; Gharsallaoui, A.; Degraeve, P.; Attia, H.;
Ghorbel, D. 2016. Effect of pH on the functional
properties of Arthrospira (Spirulina) platensis protein
isolate. Food Chemistry. 194: 1056-1063.
Brennan, L.; Owende, P. 2010. Biofuels from microalgae: a
review of technologies for production, processing, and
extractions of biofuels and co-products. Renewable
and Sustainable Energy Reviews 14: 557-577.
Carvalho, A.; Silva, S.; Baptista, J.; Malcata, F. 2011.
Light requirements in microalgae photobioreactors: an
overview of biophotonic aspects. Appl Microbiol
Biotechnol 89: 1275-1288.
Cheirsilp, B., Torpee, S., 2012. Enhanced growth and lipid
production of microalgae under mixotrophic culture
condition: effect of light intensity, glucose
concentration and fed-batch cultivation. Bioresource
Technology 110: 510516.
Chen, C. 1995. Free-Surface Stability Criterion as Affected
by Velocity Distribution. Journal of Hydraulic
Engineering 121: 736-743.
Chen, C.; Yeh, K.; Aisyah, R.; Lee, D.; Chang, J. 2011.
Cultivation, photobioreactor design and harvesting of
microalgae for biodiesel production: A critical review.
Bioresource Technology 102: 71-81.
Chen, Z.; Zhang, X.; Jiang, Z.; Chen, X.; He, H.; Zhang, X.
2016. Light/dark cycle of microalgae cells in raceway
ponds: Effects of paddlewheel rotational speeds and
baffles Installation, Bioresource. Technology 219:
387-391.
Contreras-Flores, C.; Pea-Castro, J.; Flores-Cotera, L.;
Caizares-Villanueva, R. 2003. Avances en el diseo
conceptual de fotobiorreactores para el cultivo de
microalgas. Interciencia 28(8): 450-456.
da Silva, M.; Casazza, A.; Ferrari, P.; Perego, P.; Bezerra,
R.; Converti, A.; Porto, A. 2016. A new bioenergetic
and thermodynamic approach to batch photo-
autotrophic growth of Arthrospira (Spirulina) platensis
in different photobioreactors and under different light
conditions. Bioresource Technology 207: 220-228.
del lamo, J. 2005. La organizacin a gran escala de
canales turbulentos. Tesis Escuela Tcnica Superior de
Ingenieros Aeronuticos. Universidad Politcnica de
Madrid. Pp. 120.
Dubinsky, Z.; Matsukawa, R.; Karube, I. 1995.
Photobiological aspects of algal mass culture. Journal
of Marine Biotechnology 2:61-65.
Fang, F.; Lu, W.; Shan, Q.; Cao, J. 2014. Characteristics of
extracellular polymeric substances of phototrophic
biofilms at different aquatic habitats. Carbohidrate
Polymers 106: 1-6.
Gallardo-Rodrguez, J..; Snchez-Mirn, A.; Garca-
Camacho, F.; Cern-Garca, M.; Belarbi, E.; Chisti,
Y.; Molina-Grima, E. 2009. Causes of shear sensitivity
of the toxic dinoflagellate Protoceratium reticulatum.
Biotechnology Progress 25(3): 792-800.
 V. Vsquez-Villalobos et al. / Scientia Agropecuaria 8 (1) 43 55 (2017)
Garca-Camacho, F.; Gallardo-Rodrguez, J.; Snchez-
Mirn, A.; Belarbi, E.; Chisti, Y.; Molina-Grima, E.
2011. Photobioreactor scale-up for a shear-sensitive
dinoflagellate microalga. Process Biochemistry 46:
936-944.
Godoy, E.; Rangel-Yagui, C.; Sato, S.; Monteiro de
Carvalho, J. 2011. Growth and content of Spirulina
platensis biomass chlorophyll cultivated at different
values of light intensity and temperature using
different nitrogen sources. Brazilian Journal of
Microbiology 42(1): 362-373.
Gordon, J.; Polle, J. 2007. Ultrahigh bioproductivity from
algae. Applied Microbiology and Biotechnology 76(5):
969-975.
Gudin, C.; Chaumont, D. 1991. Cell-Fragility The Key
Problem of Microalgae Mass Production in Closed
Photobioreactors. Bioresource Technology 38(2-
3):145-151.
Handler, R.; Canter, C.; Kalnes, T.; Lupton, F.; Kholiqov,
O.; Shonnard, D.; Blowers, P. 2012. Evaluation of
environmental impacts from microalgae cultivation in
open air raceways ponds: Analysis of the prior
literature and investigation of wide variance in
predicted impacts. Algal Research 1(1): 83-92.
Habib, M.; Parvin, M.; Huntington, T.; Hasan, M. 2008. A
review on culture, production and use of Spirulina as
food for humans and feeds for domestic animals and
fish. FAO Fisheries and Aquaculture Circular No.
1034. Rome FAO. 33p.
Jimnez, C.; Cosso, B.; Niell, F. 2003. Relationship
between physicochemical variables and productivity in
open ponds for the production of Spirulina: a
predictive model of algal yield. Aquaculture 221: 331-
345.
Kebede, E.; Ahlgren, G. 1996. Optimum growth conditions
and light utilization efficiency of Spirulina platensis (=
Arthrospira fusiformis) (Cyanophyta) from Lake
Chitu, Ethiopia. Hydrobiologia 332(2): 99-109.
Li, M.; Hu, D.; Liu H. 2014. Photobioreactor with ideal
light-dark cycle designed and built from mathematical
modeling and CFD simulation. Ecological Engineering
73: 162-167.
Lpez-Rosales, L.; Garca-Camacho, F.; Snchez-Mirn,
A.; Contreras-Gmez, A.; Molina-Grima, E. 2015. An
optimisation approach for culturing shear-sensitive
dinoflagellate microalgae in bench-scale bubble
column photobioreactors. Bioresource Technology
197: 375-382.
Markou, G; Georgakakis, D. 2011. Cultivation of
filamentous cyanobacteria (blue-green algae) in agro-
industrial wastes and wastewaters: A review. Applied
Energy 88: 3389-3401.
Mitsuhashi, S.; Fujimoto, M.; Muramatsu, H.; Tanlshita, K.
1994. Effect of simple shear flow on photosynthesis
rate and morphology of micro algae. Acta Astronautica
33: 179-187.
Pedrosa-Bezerra, R.; Chuei-Matsudo, M.; Sato, S.; Perego,
P.; Converti, A.; Monteiro de Carvalho, J. 2012.
Effects of photobioreactor configuration, nitrogen
source and light intensity on the fed-batch cultivation
of Arthrospira (Spirulina) platensis. Bioenergetic
aspects. Biomass and Bioenergy. 37: 309-317.
Prussi, M.; Buffi, M.; Casini, D.; Chiaramonti, D.; Martelli,
F.; Carnevale, M.; Tredici, M.; Rodolfi, L. 2014.
Experimental and numerical investigations of mixing
in raceway ponds for algae cultivation. Biomass and
bioenergy 67: 390-400.
Ramrez-Mrida, L.; Zepka, Q.; Jacob-Lopes, E. 2015a.
Current Status, Future Developments and Recent
Patents on Photobioreactor Technology. Recent
Patents on Engineering 9 (2): 80-90.
Ramrez-Mrida, L.; Zepka, Q.; Jacob-Lopes, E. 2015b.
Why does the Photobioreactors Fail? Journal of
Bioprocessing & Biotechniques 5:7.
Raposo, M.; de Morais, A. 2015. Microalgae for the
prevention of cardiovascular disease and stroke. Life
Sciences 125: 32-41.
Ravelonandro, P.; Ratianarivo, D.; Joannis-Cassand, C.;
Isambertc, A.; Raherimandimby, M. 2011.
Improvement of the growth of Arthrospira (Spirulina)
platensis from Toliara (Madagascar): Effect of
agitation, salinity and CO2 addition. Food and
bioproducts Processing 89: 209-216.
Rengifo. M.A.; Vargas, C. 2012. Caracterizacin ptica de
Diodos emisores de Luz mediante sus espectros de
emisin y patrones de radiacin. Scientia et Technica.
Universidad Tecnolgica de Pereira. 51: 66-70.
Richmond, A.; Hu, Q. 2013. Handbook of Microalgal
Culture: Applied phycology and biotechnology. Wiley
Blackwell. 736 pp.
Rodrigues, M.; Ferreira, L.; Converti, A.; Sato, S.;
Carvalho, J. 2010. Fed-batch cultivation of Arthrospira
(Spirulina) platensis: Potassium nitrate and ammonium
chloride as simultaneous nitrogen sources. Bioresource
Technology 101: 4491-4498.
Rodrguez, A.; Triana, F. 2006. Evaluacin del pH en el
cultivo de Spirulina spp. (=Arthrospira) bajo
condiciones de laboratorio. Tesis Microbilogo
Industrial. Pontificia Universidad Javeriana. Bogot.
Serbana, M.C.; Sahebkarb, A.; Dragan, S.; Stoichescu-
Hogea, G.; Ursoniu, S.; Andrica, F.; Banach, M. 2016.
A systematic review and meta-analysis of the impact
of Spirulina supplementation on plasma lipid
concentrations. Clinical Nutrition. 35 (4): 842-851.
Singh, R.M.; Sharma, S. 2012. Development of suitable
photobioreactor for algae production A review.
Renewable and Sustainable Energy Reviews 16:
2347-2353.
Ugwu, C.; Aoyagi, H.; Uchiyama, H. 2008. Photo-
bioreactors for mass cultivation of algae. Bioresource
Technology 99(10): 4021-4028.
Vsquez-Villalobos, V.; Arteaga, P.; Chanam, K.;
Esquivel, A. 2013. Modelamiento matemtico y por
redes neuronales artificiales del crecimiento de
Spirulina sp. en fotobiorreactor con fuente de luz
fluorescente e iluminacin en estado slido. Scientia
Agropecuaria 4: 199-209.
Vsquez-Villalobos, V.; Vergaray, D.; Suarez, S.;
Valladares, J.; Zamora, A.; Gaspar, K.; Escurra, X.
2014. Influencia de la proporcin de agua de mar y
bicarbonato en la produccin de biomasa de Spirulina
sp. con iluminacin de diodo emisor de luz. Scientia
Agropecuaria 5: 199-209.
Wen-Qing, S; Si-Dong, L.; Gao-Rong, L.; Wen-Hua, W.;
Qing-Xiang, Ch.; Yong-Qiang, L.; Xu-Wei, L. 2016.
Investigation of main factors affecting the growth rate
of Spirulina. Optik International Journal for Light
and Electron Optics 127(16): 6688-6694.
Yean-Chang, Ch. 2011. The effect of shifts in medium
types on the growth and morphology of Spirulina
platensis (Arthrospira platensis). Journal of Marine
Science and Technology 19(5): 565-570.
Zucarelli, G.V.; Morresi, M. del V. 2015. Flujo en canales
abiertos: caracterizacin en cursos de la provincia de
Santa F, Repblica Argentina. Dpto. Hidrologa.
Universidad Nacional de Litoral. Disponible en:
http://www.fceia.unr.edu.ar/curiham/Secciones/Cuader
nos/Pdf-991/zucarelli-morresi.pdf
-55-