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ESCUELA PROFESIONAL
AGRONOMIA TROPICAL
SEMESTRE: sptimo
Satipo - Per
2017
I. INTRODUCCION
Agradecemos al docente del curso quien nos dio las pautas para poder realizar
dicho trabajo exitosamente.
2. OBJETIVOS:
PROVINCIA: Satipo
GRUPO: N.
MATERIALES:
Papel aluminio
Placa Petri
Porta objetos
Cubre objetos
Bureta
Pipeta
Botellas de platico
Papel toalla
Hilo
Tijera
Cuchara
Piseta
Mechero
Muestras:
Huevo sancochado
Tierra negra
Agua de laguna estancada
Material orgnico (papel)
Reactivos:
CaSO4
CaO2
Lugol
cido actico glacial
Safranina
Alcohol
Agua destilada
EQUIPOS:
Microscopio
Balanza
MTODOS
Analtico
Deductivo
De observacin
4. MARCO TERICO:
4.1. MICROORGANISMOS
MICROALGAS
Se conocen como microalgas a los organismos unicelulares eucariotas fotosintticos
capaces de transformar la energa luminosa en energa qumica con una eficiencia
cuatro veces superior a la de las plantas. Su importancia radica en su papel como
productores primarios de la cadena trfica, que las constituyen en las primeras
formadoras de materia orgnica. Por su tamao reducido y variado (550 m en
promedio) son de fcil captura y digestin por multitud de organismos que se
alimentan en forma directa del fitoplancton (Abalde, 2004 citado por Ferrera y Alarcn,
2007).
Estos organismos suelen darse en ambientes que estn cubiertos por la luz solar
suficiente y ricos condiciones terrosas que consiste de 76 tipos de minerales
orgnicos. Tiene un alto valor nutricional, y contiene hasta 65% de protena vegetal.
Estn presentes en todos los cuerpos de agua, como lagos, mares y ros, pero no
estn supeditados solo al agua. Se encuentran presentes en el suelo y la mayora de
los ambientes terrestres incluso en los ms extremos, lo cual permite encontrarlas
ampliamente distribuidas en la bisfera adaptadas a una gran cantidad de condiciones.
as mismo tienen una gran diversidad taxonmica. Para su desarrollo requieren de
CO2, nitrgeno, fsforo, potasio, magnesio y otros nutrientes menores.
PROTOZOARIOS
Los protozoos son seres eucariotas, es decir con un ncleo celular definido,
unicelulares y hetertrofos, que se alimentan de materia orgnica. Suelen ser de vida
libre, aunque existen grupos que son parsitos. Algunos protozoarios actan como
parsitos adaptndose a las condiciones de vida que le provee su husped y son
considerados un subreino del reino Protista y son reconocidos en el phylum Protozoa.
Dentro de las caractersticas generales que poseen se destaca que su tamao oscila
entre 2 - 200 m, Presentan ncleo(s), diversos organelos y citoesqueleto, la mayor
parte son mviles y hetertrofos, el alimento es digerido en vacuolas alimenticias, el
agua excedente es eliminada por medio de vacuolas contrctiles, su reproduccin
puede ser asexual o sexual, y a su vez sta puede ser sencilla, dada por divisin
binaria o compleja, dada por otro mtodos dentro de los cuales se destacan la
esquizogonia, la merogonia, la gametogonia y la esporogonia (Wood, 1989; brandy
1990 citado por Ferrera y Alarcn, 2007 ). (1)
BACTERIAS
Las bacterias son de menos complejidad estructural y los ms pequeos. Carecen de
una membrana nuclear que aisle el material gentico del resto de los componentes
celulares, por lo cual se conoce como procariontes. Son organismos unicelulares con
forma esfrica, cilndrica o en espiral. La composicin qumica de su pared celular
permite clasificar en dos grandes grupos: grampositivas y gramnegativas, de acuerdo
con su capacidad para retener el colorante primario de la tcnica de tincin
desarrollado por Christian Gram. La mayora de bacterias del suelo son
gramnegativas, tienen forma cilndrica o esfrica con dimensiones variables y peso
aproximado de 10-12g (Wood, 1989; brandy 1990 citado por Ferrera y Alarcn, 2007).
(3)
Ecologa
Las bacterias se encuentran adheridas a las partculas de arcilla y humus y raramente
en la solucin suelo. La adhesin puede ser de dos tipos: reversible, mediante fuerzas
de Van der Waals, o irreversible, donde participan polmeros que mantienen a las
bacterias unida a las superficies slidas. En la fase liquida puede encontrarse de
manera aislada, ya sea inmersa a la solucin suelo o la interfase liquida-gaseosa
(Stotzky, 1993). La cantidad y el tipo de bacterias est determinado por el tipo de
suelo, especialmente por su contenido de arcilla, humedad, aireacin, temperatura,
contenido de materia orgnica y pH, as como por cultivo, estacin del ao,
profundidad, abundancia de protozoarios y otros organismos que se alimentan de ella,
etc., aunque dado a su biodiversidad, es posible encontrarlas en ambientes
diametralmente opuestos (Alexander, 1980; England et al1993; Kirchner et al., 1993,
citado por Ferrera y Alarcn, 2007). (3)
ACTINOMICETOS
A nivel cosmopolita, existe un gran grupo de microorganismos relacionados con las
bacterias en sus caractersticas qumicas, pero son ms complejos en su morfogia al
formar filamentos a manera de micelios adems de espora. En la actualidad se conoce
a este grupo como Actinomicetos, debido a la forma radial de sus ramificaciones
(actino = rayo y mikes = hongos) que originan el crecimiento somtico y reproductivo
con semejanza a micelios de hongos primitivos (Cevera y Dounglas, 1990; citado por
Ferrera y Alarcn, 2010).
En los actinimicetos, se incluyen desde organismos unicelulares hasta formas
ramificadas que semejas estructuras miceliares rudimentarias. Los hilos de las hifas
son largos, miden de 0.5 a 2.0 m de dimetro y no presentas transversales como los
Phicomycetos, aunque las hifas de estos ltimos alcanzan 5 m o ms de dimetro
(Dindal, 1990).
Como procariotes, los actinomicetos presentan peptidoglucanas en la pared celular,
sus membranas carecen de esteroles, faltando est a nivel nuclear, sus ribosomas
70S y un cromosoma, adems de plsmidos. En este grupo microbiano existe una
concentracin de 62 a 78.5 % de guanina y citosina, adems metabolitos secundarios
como la geosmina sustancias responsables del olor a suelo mojado (Hunter et al,
1990; citado por Ferrera y Alarcn, 2007).
Ecologa
Ecolgicamente los actinomicetos son muy importables por encontrarse en diferentes
ambientes como: aerobios anaherobios, anaerobios facultativo y microaerofilicos,
mesofilicos y termofilicos. Son saprofitos o bien parasitos y, en ciertos porcentajes,
altamente patgenos de humanos, animales y plantas (Sykes y Skinner, 1973). Son
numerosos y estn distribuidos en ros, fondos de lago y sobre todo en el suelo. Entre
genero ms numeroso pueden citarse: micromonospora Actinosplanes, Nocardias,
Streptomyces Streptosporangium. (Wood, 1989; citado por Ferrera y alarcon, 2007).
Dentro de las reacciones principales que ocurren desde la parte superior hasta la parte
inferior de la columna de Winogradsky se encuentran:
En las dos ltimas capas de la columna, las Cianobacterias producen la fotosntesis
usando el agua como cedente de electrones con liberacin de oxgeno molecular, por
ende, se produce una zona oxignica (Sagardoy, 2004)
2. Se pes 300 gramos de tierra negra para cada columna en una balanza
analtica
3. Se realiz dos pesas de 4 gramos de carbonato de calcio una pesa para cada
columna.
7. Una vez realizada todas las pesas se pas a realizar una mezcla en una
bandeja: 300 gramos de tierra negra ms huevo sancochado, material
orgnico, 4 gramos de carbonato de calcio y 6 gramos de sulfato de calcio, una
bandeja para cada columna.
8. Una vez hecha la mezcla se pas a realizar una maza homognea de modo
que quede uniforme la mezcla.
10. Se coloc 3 portaobjetos sujetos por hilos en la base en contacto con la masa
de tierra y 3 portaobjetos en la parte superior casi el nivel del agua sujetos con
hilos cada uno de los porta objetos.
11. Luego se adiciono 1.5 litros de agua de laguna estancada a cada columna.
12. Se tap el recipiente con papel aluminio sujeto por una liga y se dej por una
semana. La preparacin de Columna de Winogradsky Basados en la gua de
preparacin del curso de Microbiologa de suelos. El procedimiento de
construccin de la columna se simplifica en la Imagen (7).
13. Luego de una semana se sac dos portaobjetos de la parte inferior y dos
portaobjetos de la parte superior.
14. Se limpi cada uno de los portaobjetos adecuadamente solo la parte posterior y
no a la parte que se observ con el microscopio.
15. Una vez lista las muestras se pas a observar en el microscopio cada uno de
las muestras tanto de la parte inferior y superior extrado de la columna de
Winogradsky.
17. En una placa Petri se aade 8 ml. de alcohol y 2 ml. de cido actico glacial
19. Una vez pasado los 5 minutos se enjuaga con agua destilada la muestra
contenido en los portaobjetos.
21. Una vez seca la muestra se aadi 1 gota de safranina y se dej por 5 minutos.
23. Luego se observ en el microscopio cada una de las muestras con objetivos de
4x, 10x, 20x y 40x. Mediante observaciones al microscopio, se registraron las
caractersticas microscpicas, que fueron analizadas bajo el mtodo de tincin.
Dicho procedimiento se simplifica en la Imagen (8).
6. RESULTADOS:
MICROALG
AS
MICROAL
AMEBA AMEBA
3. Observacin del microscopio de la parte inferior
Los resultados obtenidos despus de
observar al microscopio de las muestras
obtenidas de la columna de
Winogradsky de la parte inferior, se
observ, protozoario euglena.
EUGLE
Posteriormente a la coloracin gram
para observar las bacterias garm
negativas y gram positivas.
Se observa las bacterias gram
negativas en la miestra obtenida de la
parte inferior de la columna.
BACTERIAS GRAM
BACTERIAS GRAM
7. DISCUSIONES:
Nuestro resultado contradice lo mencionado por Sagardoy, (2004) quien menciona
que, en las dos ltimas capas de la columna, las Cianobacterias producen la
fotosntesis usando el agua como cedente de electrones con liberacin de oxgeno
molecular, por ende, se produce una zona oxignica, ya que en la muestra extrada de
la parte superior de la columna no se observ cianobacterias, solo se lleg observar
microalgas y protozoarios.
8. CONCLUSIN:
1 2 3
Figura 1: Euglena. figura 2: micelio formado por hifas. figura 3: bacterias del
suelo
5
4
Figura 4: Hongos filamentosos del suelo figura 5: protozoos: amebas
6
Columna de Adicionar a la
winogradsky columna 300
gramos de tierra
negra.
Trozas del
Cubrir la boca papel
con papel
aluminio y
dejar reposar
Despus de 1:30h
V wrw
Enjuagar con En una placa Petri
H2O destilada se aade 8 ml. de
Extraer y cubrir con
los el alcohol y 2 ml. de
portaobjetos tanto
cubreobjetos cido actico
de la parte superior glacial
como inferior de la
columna de
Winogradsky
Dejar secar y Introducir la
observar al muestra contenida
microscopio
en el portaobjeto en
la solucin 5
Columna de
Winogradsky
Identificacin de
bacterias y
enjuaga con agua
hongos.
destilada y dejar
secar por unos min
imagen (8)
Aadir una gota de
safranina y dejar
pasar 5 minutos
MESCLA
COLOCAR EN LADE LOS INSUMOS
BOTELLA MAS
LOS CUBRE OBJETOS
TAPAR CON PAPEL
MESCLA
ALUMINIODE LOS INSUMOS
SACAR DE LA
DEJAR PARTE SUPERIOR
REPOSAR UNA
E INFERDE
SEMANACADA MUESTRA
VISUALIZACION
REALIZACION DEDE
LALOS
MICROORGANISMOS
SOLUCION
VISUALIZACION
VISUALIZACION DE
DE ALGAS
EUGLENA