FACULDADE GUARA / INSTITUTO EDUCACIONAL DE SANTA CATARINA
AULA PRATICA DE DESNATURAO DE PROTENA
ACADEMICAS: BHRUNA KAMILLA DOS SANTOS
GUARA-TO
2014 1
1. Introduo
As protenas so definidas como macromolculas, de elevado peso molecular,
constitudas pela unio de vrios aminocidos, associados entre si atravs de ligaes peptdicas. Portanto, as protenas so polmeros, onde os monmeros so os aminocidos sendo estes a unidade que constitui a protena. Estas so encontradas em todas as partes das clulas, uma vez que so fundamentais sob todos os aspectos da estrutura e funo celular e tambm so as molculas orgnicas mais abundantes e importantes nas clulas. Existem 20 tipos de aminocidos, o ser humano naturalmente produz 12 tipos e os outros oito so adquiridos pela alimentao, e sem os quais o corpo definharia ate a morte. Existem muitas espcies diferentes de protenas, cada uma especializada para uma funo biolgica especifica. Alm disso, a maior parte da informao gentica expressa pelas protenas. Pertencem classe dos peptdeos, pois so formadas por aminocidos ligados entre si por ligaes peptdicas, sendo o radical o fator que diferencia um aminocido de outro. Uma ligao peptdica a unio do grupo amino (-NH 2) de um aminocido com o grupo carboxila (-COOH) de outro aminocido, atravs da formao de uma amida e esta reao de desidratao ocorrendo a liberao de molcula de gua. As organizaes estruturais das protenas possuem complexas estruturas espaciais, que podem ser organizadas em quatro nveis, crescentes em complexidade, as protenas podem ser de estrutura primria, secundria, terciria ou quaternria. As de estrutura primria so caracterizadas pela sequncia de aminocidos e ligaes peptdicas da molcula. o nvel estrutural mais simples e mais importante, pois dele deriva todo o arranjo espacial da molcula. Sua estrutura somente a sequncia dos aminocidos, sem se preocupar com a orientao espacial da molcula. Estruturas Secundrias so dadas pelo arranjo espacial de aminocidos prximos entre si na sequncia primria da protena. o ltimo nvel de organizao das protenas fibrosas, mais simples estruturalmente. Ocorre graas possibilidade de rotao das ligaes entre os carbonos a dos aminocidos e seus grupamentos 2
amina e carboxila. O arranjo secundrio de um polipeptdio pode ocorrer de forma
regular; isso acontece quando os ngulos das ligaes entre carbonos a de seus ligantes so iguais e se repetem ao longo de um segmento da molcula. Na estrutura Terciria o seu arranjo espacial de aminocidos so distantes entre si na sequncia polipeptdica e esta a forma tridimensional como a protena se "enrola". Ocorre nas protenas globulares, mais complexas estrutural e funcionalmente. Cadeias polipeptdicas muito longas podem se organizar em domnios, regies com estruturas tercirias semi-independentes ligadas entre si por segmentos lineares da cadeia polipeptdica. Os domnios so considerados as unidades funcionais e de estrutura tridimensional de uma protena. J as estruturas Quaternrias surgem apenas nas protenas oligomricas que formada pela distribuio espacial de mais de uma cadeia polipeptdica no espao, as subunidades da molcula e estas se mantm unidas por foras covalentes, como pontes de sulfeto, e ligaes no covalentes, como pontes de hidrognio, interaes hidrofbicas, etc. As subunidades podem atuar de forma independente ou cooperativamente no desempenho da funo bioqumica da protena. A importncia das protenas est relacionada com suas funes no organismo, e no com sua quantidade. Mas em geral a uma grande quantidade de protenas em animais, correspondendo a cerca de 80% do peso dos msculos desidratados, cerca de 70% da pele e 90% do sangue seco. Mesmo nos vegetais as protenas esto presentes. Todas as enzimas conhecidas, por exemplo, so protenas; muitas vezes, as enzimas existem em pores muito pequenas. Mesmo assim, elas catalisam todas as reaes metablicas e capacitam aos organismos construo de outras molculas tais como: protenas, cidos nuclicos, carboidratos e lipdios, que so necessrias para a vida. Todas as protenas contm carbono, hidrognio, nitrognio e oxignio, e quase todas contm enxofre. Algumas contm elementos adicionais, particularmente fsforo, ferro, zinco e cobre. As protenas, independentemente de sua funo ou espcie de origem, so construdas a partir de um conjunto bsico de vinte aminocidos, arranjados em vrias sequncias especficas. Estes que so as unidades fundamentais das protenas. So formadas a partir da ligao em sequncia de apenas 20 aminocidos. Existem, alm destes 20 aminocidos principais, alguns aminocidos 3
especiais, que s aparecem em alguns tipos de protenas. Estes possuem
caractersticas estruturais em comum, tais como: A presena de um carbono central, quase sempre assimtrico. Ligados a este carbono central, um grupamento carboxila, um grupamento amina e um tomo de hidrognio. As protenas exercem funes diversas tais como: funo estrutural, veculos de transporte, anti-infecciosas, nutricional, agentes protetores, e funo catalisadora (Catalisador uma substncia que acelera a velocidade de ocorrncia de certa reao qumica). As enzimas catalisam as reaes bioqumicas (reaes intracelulares ou extracelulares importantes que ocorrem nos animais e vegetais). Sem as enzimas, essas reaes no ocorreriam num tempo hbil e a vida acabaria. Por exemplo, a anidrase carbnica que uma enzima que catalisa a reao de formao do cido carbnico que mantm o PH do sangue constante. Por meio dessa enzima, essa reao ocorre cerca de 10 milhes de vezes mais rpido. Outro exemplo de enzimas so as lipases, que transformam os lipdios em suas unidades constituintes, cidos graxos e glicerol. Em sua funo estrutural as protenas participam como matria-prima na construo de estruturas celulares e histolgicas, sendo o constituinte bsico das: fibras musculares, tendo s protenas actina e miosina como atuantes nestas fibras participando do mecanismo da contrao muscular. Os cabelos, ossos, dentes, tendes, cartilagens e pele tambm so estruturados por protenas. A fenilalanina um exemplo disto, pois uma precursora da tirosina, que produz a melanina, molcula responsvel pela cor dos cabelos e da pele. A queratina uma protena impermeabilizante que evita a dessecao e contribui para a adaptao dos animais vida terrestre, ela pode ser encontrada na pele, unhas e cabelos. Outo exemplar a albumina que a protena mais abundante do sangue e esta relacionada com a regulao osmtica e com a viscosidade do plasma. As protenas tambm so reguladoras do metabolismo na funo de estimular ou inibir a atividade de determinados rgos atravs dos hormnios. Um exemplo caracterstico a insulina que uma protena sintetizada em nosso organismo e possui como principal funo o controle dos nveis de glicose sendo lanada no sangue, contribui para a manuteno da taxa de glicemia. Sua carncia um dos fatores que resultam no desenvolvimento do diabetes tipo 1 e 2; 4
A funo nutricional pode ser exercida por qualquer protena, se esta no
apresentar propriedades txicas. Alimentos como as carnes em geral so ricos em protena e fontes naturais de aminocidos indispensveis aos seres vivos para a produo de outras protenas. A albumina do ovo e a casena do leite so tambm exemplo de alimentos ricos em protenas assim como as sementes de algumas plantas armazenam este nutriente para a germinao e crescimento.
Protenas denominadas gamaglobulinas so os anticorpos que atuam
defendendo o corpo contra os organismos invasores identificando seus antgenos e se combinando, quimicamente, com este de maneira a neutralizar seu efeito, destruio celular e fagocitose auxiliada pelo sistema complemento. A reao antgeno-anticorpo altamente especfica, o que significa que um determinado anticorpo neutraliza apenas o antgeno responsvel pela sua formao. Os anticorpos so produzidos por certas clulas do corpo como, por exemplo, os linfcitos, um dos tipos de glbulo branco do sangue. Assim como em ferimentos produzida protenas de coagulao sangunea tais como o fibrinognio e a trombina. Os anticorpos atuam na defesa de venenos de cobras, toxinas de bactrias e protenas vegetais txicas.
Em funo de armazenamento A ferritina um exemplar de uma protena que
tem a incumbncia de armazenar ferro, liberando-o de forma controlada. Embora seja encontrada em todas as clulas do organismo, concentrando-se, em especial, nos hepatcitos. Quando a ferritina encontra-se livre, ou seja, sem estar associada ao on ferro, recebe o nome de apoferritina.
Uma protena atuando como veculo de transporte a hemoglobina que esta
presente nos glbulos vermelhos sendo transportadora de nutrientes e metablitos, ela transporta oxignio dos alvolos para os tecidos e gs carbnico dos tecidos para os pulmes. Contudo, tambm se encontra protenas transportadoras nas membranas plasmticas e intracelulares transportando substncias como glicose, aminocidos, etc. atravs das membranas celulares. Tambm esto presentes no plasma sanguneo, transportando ons ou molculas especficas de um rgo para outro. O LDL e o HDL tambm so protenas transportadoras. 5
Tambm ha Protenas homologas que desempenham a mesma funo em
tecidos ou em espcies diferentes. Estas protenas possuem pequenas diferenas estruturais. Os segmentos com sequncias diferentes de aminocidos em protenas homlogas so chamados "segmentos variveis", e geralmente no participam diretamente da atividade da protena. Os segmentos idnticos das protenas homlogas so chamados "segmentos fixos", e so fundamentais para o funcionamento bioqumico da protena.
Devido s protenas exercerem uma grande variedade de funes na clula,
estas podem ser divididas em dois grandes grupos: as dinmicas atuando no Transporte, defesa, catlise de reaes, controle do metabolismo e contrao. E as estruturais tais como o colgeno e elastina que promovem a sustentao estrutural da clula e dos tecidos.
2. MATERIAIS E MTODOS
Os materiais utilizados na pratica de desnaturao de protenas foram apenas o
tubo de ensaio, a grade de ensaio, e a pipeta. A principio, foi colocado no tubo de ensaio numero cinco, 2 ml de albumina que uma protena presente na clara do ovo e foi acrescentado 10 ml de lcool 70%, Tudo com o auxilio da pipeta. E aps alguns minutos o lcool comeou a desnaturar a ovo albumina.
3. RESULTADOS E DISCURSES
A desnaturao das protenas ocorre quando as suas estruturas secundrias,
tercirias ou quaternrias so modificadas ou destrudas. No aquecimento, a albumina da clara do ovo sofre desnaturao proteica, ficando branca. Quando essas conformaes espaciais so alteradas ou destrudas, dizemos que a protena foi desnaturada, mantendo somente a estrutura primria, que a prpria cadeia peptdica, formada pela sequncia de aminocidos ligados entre si.
Quando no estmago, o bolo alimentar sofre ao do suco gstrico, uma
soluo rica em cido clordrico e enzimas digestivas. O suco gstrico produzido pelas glndulas estomacais que se localizam nas invaginaes da mucosa da parede do estmago. O cido clordrico tem um pH extremamente cido, atuando na 6
desnaturao das protenas (facilitando sua digesto), facilita a absoro de clcio e
ferro pelo organismo e destri milhares de bactrias.
A pepsina a principal enzima que ocorre no suco gstrico, e ela secretada
por clulas na forma de pepsinognio. Quando sofre a ao do cido clordrico, transforma-se em pepsina e comea a atuar, digerindo protenas e quebrando as ligaes peptdicas entre alguns aminocidos.
Mas no s a pepsina que est presente no suco gstrico. A lipase, enzima
que quebra lipdeos; e a renina, que atua na coagulao da casena (protena do leite), tambm estar presente no cido clordrico. A renina produzida em grande quantidade no estmago de bebs e crianas, sendo pouco produzida pelo estmago de adultos. Parte da gua e dos sais, alguns medicamentos e o lcool tambm so absorvidos no estmago. Depois de permanecer no estmago de 2 a 4 horas, o alimento se torna uma massa semilquida e acidificada, que passa a ser chamada de quimo.
Contudo, o efeito do lcool a 70% a desnaturao de protenas e a
dissoluo de gorduras, de forma mais rpida do que do acido clordrico que encontrado no estomago. Mediante este fato foi utilizado na pratica o lcool por seu alto poder de desnaturar protenas.
Os fatores que alteram a estrutura de uma protena podem ser diversificados,
incluindo alterao na temperatura e no PH do meio, ao de solventes orgnicos miscveis com a gua, por exemplo, o lcool e a acetona, tambm agentes oxidantes e redutores, inclusive por certos solutos como a uria e o cloridrato de guanidnio ou por detergentes e at mesmo por uma agitao intensa. Cada um desses agentes desnaturantes representa um tratamento relativamente brando no sentido de que nenhuma ligao covalente na cadeia polipepitdica rompida. Os solventes orgnicos (uria e detergente) agem principalmente de modo a promover o rompimento de interaes hidrofbicas que estabilizam as protenas globulares; os extremos de PH alteram a carga lquida da protena, provocando a repulso eletrosttica e rompimento de algumas ligaes de hidrognio. 7
Outros exemplos de desnaturao de protenas a nata do leite, e quando o
lcool usado como desinfetante penetrando e dissolvendo permanentemente a estrutura proteica de uma bactria.
Por fim as protenas esto permeadas em toda a vida biolgica, estando
presente atem mesmo na molcula de DNA. Por tanto uma alimentao equilibrada e uma boa poro de protenas so essenciais para uma boa sade.
4. REFERENCIAS
Biologia das protenas. Disponvel em:
<http://www.brasilescola.com/biologia/proteinas.htm>. Acesso em: 22 de maio de 2014, s 13 horas e 10 minutos.
Protenas. Disponvel em:
<http://www.enq.ufsc.br/labs/probio/disc_eng_bioq/trabalhos_pos2003/const_microor g/proteinas.htm>. Acesso em: 22 de maio de 2014, s 14 horas e 19 minutos.
Funo das protenas na alimentao. Disponvel em:
<http://www.brasilescola.com/quimica/funcao-das-proteinas-suas-fontes-na- alimentacao.htm>. Acesso em: 22 de maio de 2014, s 14 horas e 40 minutos.
Protenas. Disponvel em:
<http://www.universitario.com.br/celo/topicos/subtopicos/citologia/bioquimica/proteina s.html>. Acesso em: 23 de maio de 2014, s 14 horas.
Composio das protenas. Disponvel em:
<http://descomplica.com.br/biologia/bioquimica-proteinas/bioquimica-proteinas- composicao#>. Acesso em: 23 de maio de 2014, s 15 horas e 10 minutos.