ESPECTROMETRA DE MASAS

PROFESORES:
HOLGER MALDONADO GARCA ENRIQUE GUZMN LEZAMA
Caractersticas principales de un espectro de masas
PARTES DE UN EM
Fuente de Ionizacin: Las molculas se evaporan, se ionizan
y se aceleran.
Analizador de masas: Se separan los iones de diferente
masa de modo que diferentes tipos de iones llegan al
transductor a diferentes tiempos.
Transductor/Detector: Corriente de iones se amplifica
mediante un multiplicador de e-s (FOTOMULTIPLICADOR). Se
produce una seal de salida de corriente de iones frente al
tiempo es impreso como la corriente de iones frente a la
masa.
 Todos los analizadores de masas determinan la
masa de un in.

Todos los analizadores de masas determinan la

relacin m/z.

Todos los analizadores de masas miden los iones

en fase gaseosa.

Todos los analizadores de masas operan a muy

baja presin (vacio)
 VELOCIDAD DE
IONIZACIN BARRIDO RESOLUCIN

SECTOR MAGNETICO (B) CONTINUO LENTO MEDIA Y ALTA

SECTOR ELECTROSTATICO ( E ) CONTINUO RPIDO MEDIA Y ALTA

FILTRO DE MASAS DE
CUADRUPOLO (Q) CONTINUO RPIDO BAJA

TRAMPA DE IONES (IT) PULSO VARIABLE RPIDO BAJA Y ALTA

TIEMPO DE VUELO (TOF) PULSO RPIDO MUY RPIDO BAJA Y ALTA

 LIMITE UTILIDAD PARA MASAS
ANALIZADOR DE MASAS SUPERIOR ELEVADAS TIPO

CUADRUPOLO 500-3000 ESPECIES MULTICARGADAS BAJO

TRAMPA DE IONES (IT) 500-3000 ESPECIES MULTICARGADAS BAJO

TODAS LAS MASAS-NO

TIEMPO DE VUELO (TOF) 500-1000000 LIMITACIONES ALTO

MOLECULAS DE TAMAO
SECTOR 1000-15000 MEDIO MEDIUM

TRANSFORMADA DE MOLECULAS DE TAMAO

FOURIER-MS 1000-10000 MEDIO MEDIUM
 ANALIZADOR DE EXACTITUD DE
MASAS MASAS UTILIDAD TIPO
PESO IDENTIFICADO/MASA
CUADRUPOLO (Q) 0.1u NOMINAL BAJO
PESO IDENTIFICADO/MASA
TRAMPA DE IONES (IT) 0.1u NOMINAL BAJO
FORMULA
TIEMPO DE VUELO EMPIRICA/COMPOSICIN
(TOF) 0.0001 ELEMENTAL ALTO
FORMULA
EMPIRICA/COMPOSICIN
SECTOR 0.0001 ELEMENTAL ALTO
FORMULA
TRANSFORMADA DE EMPIRICA/COMPOSICIN
FOURIER-MS 0.0001 ELEMENTAL ALTO
TEORIA Y PRINCIPIOS BASICOS
1.INTRODUCCION
Aunque est incluida entre las tcnicas espectroscpicas la
espectrometra de masas (EM) no es una de dichas tcnicas pues no
utiliza ninguna radiacin del espectro electromagntico para irradiar
la muestra y observar la absorcin de dicha radiacin.
Al contrario que en aquellas en la EM la muestra es ionizada y por
tanto fraccionadas, usando diversos procedimientos para ello.
La Espectrometra de masas (MS) da nombre a un conjunto de
tcnicas utilizadas para la medida de la masa de los iones y su
abundancia en la fase gaseosa.
Los pasos de la medida de la masa son:
Generacin de las molculas en
la fase gaseosa (y fragmentos
de molculas y tomos).

Su ionizacin.

Su separacin segn su
masa.

La deteccin del pico

del in.
Esquema de la vaporizacin, ionizada y fraccionamiento de la
molcula
 1
2
3
Las tres partes bsicas son:
1.La Fuente de Ionizacin.
2.El analizador, y
3.El transductor / Detector.
 Tipos de Fuente de Ionizacin y muestras para la MS
FUENTES IONICAS MAS
MUESTRA UTILIZADAS EJEMPLOS

Ionizacin electrnica (EI) He, H2, D2, Butano

Especies gaseosas Ionizacin Qumica (CI) Butano

Elementos en disoluciones Plasma acoplado inductivamente Iones metlicos en

acuosas o suspensin (ICP) agua

Espectroscopa de masas de iones Circuitos integrados,

Elementos en muestras secundarios (SIMS) cristal de ventana
slidas Ablacin lser ICP Rocas
Descarga luminiscente (GD) Acero

Ionizacin trmica (TI) Relacin de istopos

Plasma acoplado inductivamente para datar rocas y
Relacin de istopos multicanales-MS metabolismos de
drogas dainas
Vaporizacin trmica-EI Azcares derivados,
Slidos moleculares: Vaporizacin trmica-CI acetoaminfenoles
orgnicos e inorgnicos SIMS, ablacin por lser, pirrlisis Plsticos, elastmeros,
pinturas
Continuacin
MUESTRA Fuentes Inicas EJEMPLOS
ms utilizadas
Molculas/macromolculas solubles Ionizacin de Polipctidos
en agua y en algunos disolventes Electrospray (ESI) Sulfactantes
orgnicos
xido de
polietileno
Macromolculas y polipptidos Desorcin/ionizac Polipptidos
disueltos y secados en determinadas in asistida por Protenas de mas
matrices slidas (p. Ej., 3-metxi-a- lser (MALDI)
de 105 m.w.
cido hidroxicinmico + cido
trifluoroactico) cidos nucleicos.
Molculas/macromolculas solubles Bombardeo por Polipptidos,
en lquidos especficos (glicerol, tomos Proteinas < 5500
tioglicerol, etc.) acelerados (FAB) m.w.
2.ESPECTROS DE MASAS Y SU RELACIN MASA/CARGA (M/Z)

Los espectros de masas muestran las masas de las molculas ionizadas (o

tomos) y cada fragmento producido, as como la abundancia relativa de

cada uno de ellos.

La abundancia relativa es la altura y las reas de los picos.

Lo que siempre se determina es la relacin entre la masa y la carga

elctrica del fragmento.

Por tanto es correcto escribir en el eje horizontal m/z, la relacin

masa/carga.
Representaciones diferentes de un Espectro de Masas de un
compuesto

Un grfico de la corriente inica con cuatro escalas de sensibilidades

diferentes impresas a la vez.
Histrograma computarizado
 Un listado de la
relacin m/z de los
picos y su
abundancia
relativa.
3.ANALISIS DE ESPECTROS DE MASAS DE MOLECULAS ORGANICAS

El proceso de identificacin se lleva a cabo de la siguiente

manera:
1. Identificacin de in molecular.- Medidas exactas de masas tiles
para el clculo de frmulas empricas.
2. Modelo para el estudio de la Distribucin de Istopos.- Deteccin
de abundancias isotpicas de los compuestos que entran a formar
parte de un determinado compuesto.
3. Explicacin del modelo de fragmentacin.- Fragmentacin
controlada para la elucidacin estructural de nuevos compuestos.
 Identificacin del ion molecular

Cuando se asigna un ion molecular a un pico, se debe haber

determinado la masa molecular de la molcula.
Cuando se introduce una molcula en la cmara de ionizacin,
se produce una molcula in-radical:
 Lgicamente, el electrn que se pierde debe ser el que tenga un
menor potencial de ionizacin; as se obtendrn unas estructuras
como las que se muestran:
Entre otras el in molecular debe poseer las siguientes caractersticas:

Debe ser el in con mayor masa de los que aparecen en el

espectro.
Debe contener todos los elementos presentes en sus fragmentos.
Debe corresponder al in con el potencial de ionizacin ms bajo.
Su relacin m/z debe ser par cuando no posee Nitrgeno o posee
un nmero par de el; por la misma razn debe ser impar cuando
posee un nmero impar de tomos de Nitrgeno.
 Las diferencias de masa entre dicho in molecular y los fragmentos
que aparecen en el espectro deben ser qumicamente lgicas.
Su abundancia relativa depende en gran medida de la naturaleza
qumica del producto, as existe una serie que relaciona, de una
manera cualitativa y aproximada, la intensidad de dicho in con el
grupo principal presente en la molcula y de mayor a menor sera:

Compuestos aromticos > olefinas conjugadas > compuestos

alicclicos > sulfuros > hidrocarburos lineales > mercaptanos >
cetonas > aminas > esteres > teres > cidos carboxlicos >
hidrocarburos ramificados > alcoholes
Estudio de la distribucin de los Isotopos
La aparicin de los istopos quiere decir la aparicin de
sucesivos picos con unas determinadas intensidades relativas.
Por ejemplo, los istopos se determina mediante dos
propiedades de las molculas o fragmentos de ellas:
a) Las intensidades de los tomos en las molculas (C, H, N y
dems).
b) El nmero de cada uno de ellos.
 En esta siguiente tabla se muestra la causa de tales diferencias, que no es
otra que la masa exacta de los elementos debido a la distribucin isotpica
de los mismos.

Elemento Peso Atmico Istopos Abundancia relativa (%) Masa atmica

Hidrgeno 1.00794 1H 100 1.00783
2H 0.015 2.01410
Carbono 12.01115 12C 100 12.00000
13C 1.12 13.00336
Nitrgeno 14.0067 14N 100 14.0031
15N 0.366 15.0001
Oxgeno 15.9994 16O 100 15.9949
17O 0.037 16.9991
18O 0.240 17.9992
Fluor 18.9984 19F 100 18.9984
Silicio 28.0855 28Si 100 27.9769
29Si 5.110 28.97.65
30Si 3.38.5 29.9738
Fsforo 30.9738 31P 100 30.9738
Azufre 32.066 32S 100 31.9721
33S 0.789 32.9715
34S 4.438 33.9669
36S 0.018 35.9677
Cloro 35.4527 35Cl 100 34.9689
37Cl 32.399 36.9659
Bromo 79.9094 79Br 100 78.9183
81Br 97.940 80.9163
Iodo 126.9045 127I 100 126.9045
 Se muestran las regiones de los picos moleculares de los compuestos
orgnicos donde intervienen el cloro y el bromo:

M+ 2
M
M M M+ 2

M+ 2
M+ 4
M+ 4
M+ 6
Cl Cl 2 Cl 3

M M+ 2 M+ 2 M+ 2
M+ 2

M M+ 4
M M+ 4
M
M+ 4 M+ 6
M+ 6
M+ 8
Br BrCl BrCl 2 BrCl 3

M+ 2 M+ 2 M+ 4 M+ 4
M+ 2 M+ 2

M M M+ 4
M+ 4 M M+ 6
M
M+ 6
M+ 6
M+ 8 M+ 8
Br2 Br2Cl Br2Cl 2 Br2Cl 3
M+ 2 M+ 4 M+ 4 M+ 4 M+ 4
M+ 2
M+ 2 M+ 6
M+ 6 M+ 2
M+ 6
M M+ 6
M M+ 8
M M+ 8 M

Br3 Br3Cl Br3Cl 2 Br3Cl 3

Pi cos en l as regi ones molecul ares de compuestos con Br y Cl

Exposicin de la secuencia de fragmentacin
En un espectro de masas, hay numerosos picos de m/z menor que la del
pico molecular.

Estos picos aparecen porque algunas molculas se rompen en fragmentos.

El conjunto de fragmentos que aparecen y sus abundancias relativas se

denominan secuencia de fragmentacin.

Esta secuencia depende de la naturaleza qumica de la molcula de partida

y de las tcnicas que se han utilizado para la evaporacin e ionizacin de la
muestra.
 Podemos considerar que existen tres tipos fundamentales de
fragmentaciones del in molecular dependiendo del nmero de
enlaces que se rompen:
1. Roturas de un enlace simple (): Producen siempre un catin y un
radical, se conoce como fragmentacin simple:
2. Rotura simultnea de dos enlaces simples: produce normalmente la
eliminacin de molculas neutras. En este tipo se engloban tambin las
transposiciones o reagrupamientos a travs de estados cclicos como la
retro Diels-Alder y la transposicin de McLafferty:
3. Transposiciones ms complejas que implican transferencias
de radicales hidrgeno y eliminaciones entre tomos no
vecinales.
Dependiendo del tipo de rotura del enlace la fragmentacin simple
puede ser homoltica o heteroltica, siendo en ambos casos el
resultado de la misma la formacin de un radical (que no es detectado
en el espectro de masas) y un catin:
Como caracterstica de dicha fragmentacin simple cabe indicar que si el in
molecular no contiene Nitrgeno (su masa es par) los fragmentos tienen masa
impar. A su vez los cationes formados en esta fragmentacin pueden sufrir
nuevas fragmentaciones bien por va homoltica (produciran radicales e iones
radicales) o heteroltica (produciran molculas neutras y otro catin).
 Un caso algo especial es el de las molculas cclicas, pues
cuando se rompe un enlace del anillo lo que se obtiene es un
nuevo in radical homlogo del in molecular, pero ahora lineal.
 Dichos iones radicales sufren posteriormente nuevas fragmentaciones
y/o transposiciones dando lugar a cationes de masa par o impar
respectivamente:
 A continuacin se incluyen en la siguiente Tabla las masas de los fragmentos ms
caractersticos y frecuentes que aparecen en los espectros de masas, hay que tener
en cuenta que dichos fragmentos son caractersticos de iones pero tambin de
perdidas del in molecular:

MASA DEL IN ASIGNACIN

29 Etilo (C2H5), formilo (CHO)
30 Nitroso (NO)
31 Metoxilo (CH3O), hidroximetilo (CH2OH)

39 Ciclopropenilo (C3H3)
41 Alilo (CH2CH=CH2)
29 Etilo (C2H5), formilo (CHO)
30 Nitroso (NO)
31 Metoxilo (CH3O), hidroximetilo (CH2OH)

39 Ciclopropenilo (C3H3)
41 Alilo (CH2CH=CH2)
Algunos fragmentos neutros perdidos ms comunes
REGLAS DE FRAGMENTACION

Los enlaces Carbono-Carbono se escinden con

1ra REGLA preferencia en los puntos de ramificacin.

La carga positiva quedar sobre el carbocatin ms estable, siendo la

estabilidad de estos: Terciario > Secundario > Primario > Metilo
 Los enlaces dobles o sistemas de dobles enlaces
2da REGLA (entre ellos los aromticos) favorecen la escisin
de los enlaces arlicos y benclicos.

La carga positiva quedar normalmente formando un carbocatin arlico o

benclico. En este ultimo caso debemos hacer notar que no es un catin bencilo
lo que se forma sino que este sufre un reagrupamiento dando lugar a la
formacin del in troplio (C7H7+) que es ms estable que aquel al ser aromtico.
 Un caso especial lo constituye el caso de los cicloalquenos,
pues poseen dos enlaces en posicin allica, sufriendo la
fragmentacin simultnea de ambos enlaces, es lo que se
conoce como reaccin de retro Diels-Alder.
 Los heterotomos, como donadores de electrones,
3ra REGLA favorecen la fragmentacin de los enlaces del tomo
de Carbono que soporta al heterotomo.

Debemos considerar dos casos:

Que el heterotomo est unido al carbono mediante un enlace simple o que lo
est mediante un enlace doble. En el primer caso se podran romper bien el
enlace C-X bien el enlace C-C-X, quedando la carga sobre el fragmento que la
estabilice mejor. Si el enlace que se escinde es el del carbono con el
heterotomo la carga queda preferentemente sobre el tomo de carbono.
 Si se trata de un grupo carbonilo (C=O), el in ms estable
suele ser el in acilo (RCO+).
 Los dobles enlaces y los heterotomos
favorecen, como aceptores de Hidrgeno, la
4ta REGLA
transposicin de un hidrgeno a travs de un
estado cclico de transicin de seis miembros

Se conoce como Transposicin especfica de Hidrgeno o Transposicin de

McLafferty.
 Como caractersticas de dicha transposicin destacan: Suele ponerse en
evidencia por la formacin de iones de masa par a partir de iones
moleculares pares y para que se produzca debe existir un tomo de
Hidrgeno en posicin respecto al doble enlace aceptor de Hidrgeno.
4. PODER DE RESOLUCIN DEL ESPECTRO DE MASAS Y LA
RESOLUCIN DEL ESPECTRO
Se define experimentalmente como M cuando dos picos experimentales
idnticos se solapan un 5% de su altura, pero produciendo una separacin
de 90% entre los picos. Los resultados pueden darse con picos diferentes
solapados.
El trmino Resolucin se refiere a la separacin entre dos picos del
espectro y el trmino poder de resolucin se refiere al instrumento.
5. DETERMINACIN DE MASAS EXACTAS Y FRMULAS
MOLECULARES

Se puede identificar el pico del ion molecular, pero esto no es

suficiente para determinar las frmulas moleculares.

Hace falta evaluar las abundancias isotpicas para poder

determinar las masas exactas y frmulas moleculares.

Elemento Peso Atmico Istopos Abundancia relativa (%) Masa atmica
Hidrgeno 1.00794 1H 100 1.00783
2H 0.015 2.01410
Carbono 12.01115 12C 100 12.00000
13C 1.12 13.00336
Nitrgeno 14.0067 14N 100 14.0031
15N 0.366 15.0001
Oxgeno 15.9994 16O 100 15.9949
17O 0.037 16.9991
18O 0.240 17.9992
Fluor 18.9984 19F 100 18.9984
Silicio 28.0855 28Si 100 27.9769
29Si 5.110 28.97.65
30Si 3.38.5 29.9738
Fsforo 30.9738 31P 100 30.9738
Azufre 32.066 32S 100 31.9721
33S 0.789 32.9715
34S 4.438 33.9669
36S 0.018 35.9677
Cloro 35.4527 35Cl 100 34.9689
37Cl 32.399 36.9659
Bromo 79.9094 79Br 100 78.9183
81Br 97.940 80.9163
Iodo 126.9045 127I 100 126.9045
 Por ejemplo un ion molecular de masa 203 tendr varias posibilidades
de frmulas moleculares.
Un espectro con las abundancias isotpicas

M+

M++1

M++2
 M+

Ampliacin del pico del in

molecular con los istopos
M+ + 1

M+ + 2
 Cuando se obtiene un espectro de masas de alta resolucin (HR-EM)
es posible distinguir entre frmulas de igual masa, debido a que los
elementos tienen un peso atmico que permite distinguir entre
ellas.
En la siguiente tabla se muestran algunas diferencias de masas de
combinaciones atmicas para el pico de masa 43.

Combinacin Masa exacta

atmica
CHNO 43.0058
C2H3O 43.0184
C2H5N 43.0421
C3H7 43.0547
EJEMPLOS PRACTICOS
INTERPRETACIN DE UN ESPECTRO DE MASAS
% 105 , 2
100

77, 1
84, 5
N O
CH3

O N
H

+
-
N
O O

50, 4
23, 2
42, 6 137 , 9
17, 6 194 241
178 , 9
92, 2
120 , 5

299

50 100 150 200 250 300 m/z

Molcula entera sin un electrn
Pico 299 (M)+
+ +
m/z 269
N O
N O CH3
CH3 N O
O N CH3
H
-NO
O N
H O N
H

+
O
-
N
O O O
N -CO +
m/z 299 O

N O
CH3

+N O O N
N O H
CH3 CH3

O N N m/z 241
H +
H

m/z 299
-
+
+ O N
-
N -
O O O O
m/z 194
 CH3
+O
+ C
+
N N+
N O
N O CH3 O
CH3 H
ON+ N
O N -
HO
O m/z 120
H
m/z 179

+ N H
+
+ N + C
N - N
- O O H
O O N O O
CH3 +
m/z 299 O N
H +
-
N +
O O N H
C

N
+ m/z 137 O
CH3 -
O O
+O - Ph
N O
CH3
C
N +
H N H
N N O N+ C
CH3
N
+ O
-
O N O O
+ H O
H
+ N+
-
N +
O C
O O +
m/z 120m/z 105 O
N
-
O O m/z 42
m/z 179

+ N H
+ C
 -
N
O O

m/z 179

+
+
N
N O H
CH3

O N
H +
-
N
O O

N
+ m/z 137
-
O O

N O
CH3

N
H

N O
CH3
+
-
N
O N O O
+ H

+
O
+
N
-
O O
m/z 105
 N
N O +
H
CH3

O N
+
H
+
N
-
O O
- NO 2
+
N
-
O O N
H

m/z 92

- HC CH +
- CO
+
C
m/z 51
+ m/z 77, 1
O
O
CH3
 O
C O
N C CH 2 CH3
 O

H3C C CH3
CH 2 CH 2