Producir Metabolitos Primarios y Secundarios Por Escalado de Biorreactores A Partir de Residuos Agroindustriales en El Sector Azucarer1

Procesos Biotecnolgicos Aplicados a la industria
Ficha: 934230
PRODUCIR METABOLITOS PRIMARIOS Y SECUNDARIOS POR

ESCALADO DE BIORREACTORES A PARTIR DE RESIDUOS
AGROINDUSTRIALES EN EL SECTOR AZUCARERO.
PROYECTO: PRODUCCION 4kg DE PROTEINA UNICELULAR A PARTIR DE

SUSTRATOS
(MELAZA Y VINAZA)
SENA-CENTRO DE BIOTECNOLOGIA INDUSTRIAL

BIOTECNOLOGIA INDUSTRIAL
TEG. EN PROCESOS BIOTECNOLOGICOS APLICADOS A LA INDUSTRIA
PALMIRA, VALLE DEL CAUCA
MAYO DE 2015
Produccin de 4kg protena unicelular a partir de sustratos agroindustriales (Melaza y Vinaza) Pgina1
Ficha: 934230
PRODUCCION DE PROTEINA UNICELULAR A PARTIR DE SUSTRATOS

(MELAZA Y VINAZA)
LUIS EDUARDO AGUDELO

(1113679571)
STEFANNY CANDELO TRIANA
(1114833113)
LUIS FERNANDO GARCIA
(1059985843)
MARIA ALEJANDRA POLANCO
(1113524785)
MILLER ARBEY GAMBOA
(1113674924)
GRUPO 1
FICHA 934230
Ficha: 934230
GESTOR DEL PROYECTO

ING. ERNESTO JOSUE MENDOZA SANCHEZ
SENA-CENTRO DE BIOTECNOLOGIA INDUSTRIAL

BIOTECNOLOGIA INDUSTRIAL
TEG. EN PROCESOS BIOTECNOLOGICOS APLICADOS A LA INDUSTRIA
PALMIRA, VALLE DEL CAUCA
MAYO DE 2015
1. INDICE GENERAL.
3. INTRODUCCION........................................................................................ 7
4. INTRODUCTION........................................................................................ 8
5. OBJETIVOS............................................................................................... 9
OBJETIVO GENERAL:....................................................................................... 9
OBJETIVO ESPECFICO:................................................................................. 10
6. JUSTIFICACIN:...................................................................................... 10
7. RESUMEN:.............................................................................................. 11
8. RESUME................................................................................................. 12
9. QUE SON LAS PROTENAS UNICELULARES.............................................13
9.1 FUENTES POTENCIALES..........................................................................15
9.2 SUSTRATOS............................................................................................. 16
9.3 PARMETROS PARA LA PRODUCCIN DE BIOMASA..................................17
9.4 RENTABILIDAD DE LA PRODUCCIN DE PROTENAS UNICELULARES........17
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9.4 ELECCIN DEL MICROORGANISMO..........................................................18

9.5 DISEO DEL FERMENTADOR PARA LA PRODUCCION DE PROTEINA
UNICELULAR................................................................................................. 18
9.6 USOS....................................................................................................... 19
10. TIPO DE CEPA DEL MICROORGANISMO................................................20
10.1 LEVADURAS:.......................................................................................... 20
Que son levaduras?....................................................................................... 20
10.2 MICROORGANISMOS A UTILIZAR PARA LA PRODUCCION........................20
10.2.1 Saccharomycescerevisiae............................................................................21
10.2.2 Cndida utilis.......................................................................................... 22
10.3 MICRORGANISMOS A UTILIZAR PARA LA PRODUCCION.(IMGENES).....24
10.3.1Saccharomycescerevisiae..................................................................24
10.3.2 Cndida utilis.................................................................................... 25
11. CARACTERSTICAS DE TCNICAS ANALTICAS FSICO-QUMICA DEL
MICROORGANISMO UTILIZAR (CEPA).............................................................26
11.1 CARACTERSTICAS FISICOQUMICAS DE LAS LEVADURAS......................26
11.1.1 Saccharomycescerevisiae.................................................................26
11.1.2 Cndida utilis.................................................................................... 28
12. MATERIAS PRIMAS...............................................................................30
12.1 MELAZA DE CAA................................................................................... 30
12.2 VINAZA................................................................................................... 32
13. CARACTERSTICAS FSICO-QUMICA DE LAS MATERIAS PRIMAS...........33
13.1 MELAZA DE CAA................................................................................... 33
VISCOSIDAD................................................................................................. 33
PH.:............................................................................................................... 33
CALOR ESPECFICO Y CONDUCTIVIDAD TRMICA:........................................34
DENSIDAD:.................................................................................................... 34
13.2 VINAZA................................................................................................... 34
14. ANALISIS FISICOQUIMICO PARA PROTEINA UNICELULAR.....................35
14.1. pH:................................................................................................ 35
14.2. Brix:............................................................................................... 35
14.3. ANL:.............................................................................................. 35
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14.4. Acides Voltil:..................................................................................35

14.5. ATR:.............................................................................................. 35
14.6. AR:................................................................................................ 35
14.7. Peso seco:...................................................................................... 35
14.8. Densidad Picnometria:......................................................................35
14.9. Temperatura:...................................................................................35
14.10. Mtodo de kjeldahl:..........................................................................35
15. PROCESO PROTEINA UNICELULAR......................................................36
16. FORMULACIN DE MEDIO DE CULTIVO................................................37
17. UTILIDAD DE LAS LEVADURAS.............................................................38
18. QUE ES UN BIORREACTOR..................................................................38
18.1 DIAGRAMA DE FLUJO DE PROCESO.......................................................39
18.2 PROPIEDADES QUE SE MIDEN EN UN BIORREACTOR.............................40
Temperatura.......................................................................................... 40
pH....................................................................................................... 40
Flujo de aire.......................................................................................... 40
Presin................................................................................................. 40
Intensidad de agitacin...........................................................................40
Nivel o volumen de medio de cultivo.........................................................40
Espuma................................................................................................ 40
Concentracin de oxgeno disuelto...........................................................40
Concentracin celular............................................................................. 40
Concentracin de sustrato.......................................................................40
Concentracin del producto.....................................................................40
18.3 CARACTERSTICAS DEL BIORREACTOR QUE SE VA A UTILIZAR..............41

18.4 TIPO DE BIORREACTORESQUE VAMOS A UTILIZAR.................................41
18.5 TIPO DE OPERACINES QUE SE VA A UTILIZAR.......................................42
18.5.1 MODO DISCONTINUO O BATCH............................................................43
18.5.2 MODO SEMICONTINUO O FED-BATCH..................................................43
18.6 TIPO DE FERMENTACIN QUE SE VA A UTILIZAR.....................................43
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18.7 VARIABLES DE PROCESO DE LA FERMENTACION...................................43

19. TIPO DE ESTERILIZACION EN EL PROCESO..........................................44
19.1 Definicin:............................................................................................... 44
19.2 MTODO DE ESTERILIZACIN................................................................44
20. CONTROL DE CALIDAD DEL PRODUCTO TERMINADO...........................45
21.1 ANLISIS: MICROBIOLGICO:.................................................................45
21.2 . ANALISIS:FISICO- QUMICO...................................................................46
21. Tipos de microorganismos.......................................................................47
22.1 MICROORGANISMOS PRESENTES EN NUESTRA PROTEINA UNICELULAR
..................................................................................................................... 48
22. CULTIVOS:........................................................................................... 49
23. Determinar: el crecimiento de hongos y levaduras......................................49
24. Agar Chromocult:................................................................................... 50
25. Agar salmonella.................................................................................... 51
26. EMB:.................................................................................................... 51
27. Deteccin: de bacterias gran negativas.....................................................52
28. Anlisis fsico qumico del producto..........................................................53
29. CURVA DE CRECIMIENTO DE LOS MICROORGANISMOS........................58
30. CONTROL DE PROCESO DE FERMENTACIN EN BIORREACTORES......61
31. ANLISIS QUMICOS:............................................................................62
26.1 AZUCARES REDUCTORES (AR)...............................................................62
26.2 AZUCARES REDUCTORES TOTALES (ART)..............................................62
26.3 ACIDEZ VOLTIL..................................................................................... 62
32. PLANTA EN LA QUE SE REALIZARA EL PROCESO DE PROTEINA
UNICELULAR................................................................................................. 63
CONCLUSION................................................................................................ 64
BIBLIOGRAFIA............................................................................................... 65
ANEXOS........................................................................................................ 66
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2. NDICE DE TABLAS.
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3. INTRODUCCION
(PRODUCCIN DE PROTENA UNICELULAR A PARTIR DE
SUBPRODUCTOS INDUSTRIALES MELAZA Y VINAZA)
El trmino protena unicelular ( PUC ) se emplea para referirse a

microorganismos tales como bacterias, levaduras, algas y hongos filamentosos,
que son empleados para alimentacin humana o animal, principalmente por su
alto contenido en protenas. El hombre ha consumido microorganismos
presentes en alimentos fermentados desde hace siglos y ms recientemente
empleo para consumo animal microorganismos derivados de la produccin de
cerveza y de bebidas alcohlicas.
Pero el alto costo de su produccin slo es competitivo en ciertas

circunstancias con respecto de las protenas de origen vegetal. Los
microorganismos crecen rpidamente, lo cual es una de las razones ms
importantes para su inters en su produccin industrial.
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Bacterias de los gneros Methilomonas, Pseudomonas, Bacillus y Aerobacter

tuvieron en los 60 gran inters debido a su alta velocidad de duplicacin y alto
contenido proteico pero el incremento del costo de los sustratos (metano,
metanol, hidrocarburos...) han limitado su aplicacin.
Sin embargo ciertas especies de levaduras, como Candida utilis y

Saccharomyces cerevisiae,han sido aceptadas para alimentacin humana y
producidas continuamente desde la Segunda Guerra Mundial
.
4. INTRODUCTION
the term unicellular protein is used to talk to microorganisms such as bacteria,

yeasts, filamentous fungi and algae which are used for human and animal
nutrition mainly because of its high protein. The man has used microorganisms
in fermented foods for centuries and more recently employment microorganisms
for animal consumption derived from the production of beer and spirits.
But the high cost of production is only competitive in certain circumstances with
regard to vegetable proteins. The microorganisms grow quickly, which is one of
the most important reasons for their interest in industrial production.
the bacteria of the genres Methilomonas, Pseudomonas, Bacillus and

Aerobacter had great interest in the 60s because of its high speed duplication
and high protein content but the increased cost of substrates (methane,
methanol, hydrocarbons ...) have limited its application.
However certain yeast species such as Candida utilis y saccharomyces

cerevisiae have been accepted for human consumption and
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continuously produced since World War II
5. OBJETIVOS
OBJETIVO GENERAL:
1 Producir metabolitos primarios y secundarios por proceso

biotecnolgicos a partir de residuos agroindustriales generados en el
sector azucarero con la aplicacin del escalado de biorreactores.
OBJETIVO ESPECFICO:
2 Conocer las tcnicas y aplicaciones previas para el proceso fermentativo para

la produccin de protena unicelular
3 Reconocer las caractersticas de idenficacion de materia prima, agentes
biolgicos, equipos de planta y laboratorios y operaciones a partir del
desarrollo de ejercicios prcticos
Produccin de 4kg protena unicelular a partir de sustratos agroindustriales (Melaza y Vinaza)

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4 Determinar los mtodos, procedimientos y procesos que permitan la realizacin

y obtencin de esta protena unicelular
6. JUSTIFICACIN:
1 Con la produccin de metabolitos primarios y secundarios vamos a

disminuir los residuos que se producen al producir el azcar y aparte de
eso logramos tener un producto gracias a los procesos biotecnolgicos
2 La protena unicelular ser de gran utilidad para los consumidores ya
que son hechos principalmente de productos naturales y ayudaran a
tener una mejor vida
3 Este producto ayudara a las empresas a que se le denomina un desecho
poderlo utilizar como materia prima para diferentes procesos y obtener
productos biotecnolgicos
4 El impacto de este estudio es producir unos productos que ayuden a
disminuir gran parte de desechos agroindustriales y emplear la
biotecnologa para el mejoramiento del medio ambiente

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7. RESUMEN:
El presente trabajo, consiste en la descripcin y anlisis de producir protena

unicelular a partir de desechos de agroindustriales melaza y vinaza por medio
de microorganismos candidad utilis y saccharomyces cerevisiae.
Gran parte de este trabajo es presentar paso por paso como producir protena
unicelular considerando que esta es de gran impacto ya que estamos
reutilizando lo que antes se consideraba como un desperdicio, por otro lado
est la descripcin de los microorganismos a utilizar, las materias primas y los
equipos para una buena produccin de nuestra protena .
Por ultimo mostraremos las pruebas que le haremos a nuestra protena ya
termina y gracias a esto mostraremos que gracias a la formacin obtenida por
el Sena nos form como tecnlogos de procesos biotecnolgicos aplicada a la
industria y que nuestro proyecto puede ser de gran ayuda para el mejoramiento
de la regin azucarera ya que estamos reutilizando desechos agroindustriales

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8. DESCRIPCION
Nuestro proyecto trata de producir protena unicelular a partir de melaza y

vinaza utilizando las levaduras candidad utilis y chasaromice cereviciae, para
realizar este proyecto necesitamos una gran variedad de equipos que gracias a
ellos se logra la obtencin de protena unicelular, quienes desean lograr este
proyecto deben ser personas con ganas de superarse da a da y desea
obtener mejores conocimientos a travs que va desarrollando todos los pasos a
seguir para la buena elaboracin de protenas.
Para poder lograr este proyecto, contamos con el tiempo de 18 meses, estos
meses cuentan con fases por las cuales se obtendrn conocimiento para asi
poderlo llevar a cabo,
9. QUE SON LAS PROTENAS UNICELULARES

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Figura 1. Protena unicelular
Fuente http://www.nutricionnatural.info/alimentos/proteina-unicelular.html
Las protenas unicelulares (SCP) es un trmino aplicado a un amplio rango de algas

unicelulares y filamentosas, hongos y bacterias los cuales son producidos por
procesos de fermentacin controlada para su uso como alimento animal. Comparada
con las protenas alimenticias convencionales de plantas y animales, estos
microorganismos ofrecen numerosas ventajas como productores de protenas:
1 Su produccin puede ser basada sobre substratos de Carbn natural los cuales
son disponibles en grandes cantidades (hulla, petroqumicos, gas natural) o
sobre subproductos celulsicos de la agricultura, los cuales por el otro lado
causan daos al medio ambiente.
2 La mayora de los microorganismos cultivados poseen altos niveles de
protenas (4080% de protena cruda en base seca, dependiendo de la
especie).
3 Tienen un tiempo de generacin muy corto; bajo condiciones ptimas de cultivo
las bacterias pueden doblar su masa celular en 0.52 horas, las levaduras en
13 horas y las algas en 36 horas.
La fabricacin de PUC se ha llevado a cabo debido a la rpida velocidad de

propagacin de los microorganismos, a la diversidad de sustratos que se
pueden emplear ya que su produccin no depende de las condiciones
climticas. Los microorganismos crecen rpidamente por lo que es una de las
razones ms importantes que determinan el inters en su produccin
industrial.
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Ficha: 934230
Para el proceso de produccin de protenas unicelulares se prefieren especies

aerbicas, y cada grupo microbiano presenta sus ventajas e inconvenientes:
Las bacterias tienen un crecimiento rpido pero son sensibles a los cambios
de pH.
Las levaduras son de crecimiento lento pero pueden desarrollarse en pH,
reduciendo as los riesgos de contaminacin,
Los hongos se recuperan fcilmente del cultivo, pero sufren varios
inconvenientes en el proceso.
9.1 FUENTES POTENCIALES
DEUPC
Bacterias
Levaduras
Hongos
BACTERIAS
Methylomonas,Pseudomonas, Bacillus y Aerobacter son consideradas fuentes

potenciales de PUC debido a que son capaces de duplicarse en un periodo de
20 a 30 min y a su alto contenido de protenas que llega a un 85%
LEVADURASCandida Utilis, Saccharomyces, cerevisiae y
Kluyveromycesfragilis han sido utilizadas en la alimentacin animal y
humanaHONGOS FILAMENTOSOS Y ALGASEstas crecen ms lentamente
que las bacterias y levaduras, se pueden nombrar algunos hongos como
Gliocladiumdeliquescens, Fusarium graminearum.Los microorganismos
utilizados en la produccin de biomasa deben ser inoculados en medios
favorables (esterilizado) como en condiciones nutricionales.
9.2 SUSTRATOS
Los principales sustratos utilizados son alcanos, alcoholes y carbohidratos.
La Candida utilis se obtuvo en ambas guerras mundiales como suplemento

proteico por fermentacin de caldos de sulfito desecho de plantas de celulosa y

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por crecimiento en melazas en Jamaica. Despus tambin en USA y Finlandia

como levadura forrajera pero debido a la superabundancia de protenas
vegetales estos procesos se convirtieron en antieconmicos.
En 1974 en Finlandia se desarrollo el proceso Pekilo para la produccin de

protenas de organismos unicelulares fngicos para alimentacin animal
haciendo crecer Paecilomycesvarioti utilizando como sustrato caldos de sulfito.
La celulosa de fuentes naturales y restos de madera como material de partida

para la produccin de PUC frecuentemente necesita de un pretratamiento
trmico o qumico combinado con la hidrlisis enzimtica.
El suero de leche entera o el desproteizado son una fuente de carbohidratos

que crea problemas de eliminacin, de variaciones estacionales de suministro y
elevado contenido en agua. Aunque la mayora de los organismos no utilizan
lactosa como fuente de carbono, las levaduras Kluyveromycesfragilis crecen
fcilmente en este carbohidrato por lo que se han construido plantas
utilizndolo para la produccin de PUC.
El proceso Symba diseado en Suecia para producir PUC utiliza dos cepas de
levaduras; Saccharomycopsisfibuligera que produce enzimas para la
degradacin del almidn y permite el cocrecimiento de Candida utilis fue
diseado para aprovechar los deshechos del procesado de patata.
9.3 PARMETROS PARA LA PRODUCCIN DE BIOMASA
Los parmetros para la produccin de biomasa o protena unicelular son:

1 Reducir tamao y homogeneizar, de manera que sea fcil para el
microorganismo utilizar la biomasa.
2 Elimina agentes inhibidores de crecimiento microbiano, como toxinas

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3 .Suplemento del medio con nutrientes como sales nitrogenadas y fsforo

para que sirvan de fuente mineral.
4 Ajuste de ph y humedad del substrato para favorecer el crecimiento de
microorganismos involucrados.
5 Tratamientos trmicos para eliminar flora bacteriana patgena de la
matriz. Esta puede ser pasteurizacin en substrato lquido y
esterilizacin en substratos slidos.
9.4 RENTABILIDAD DE LA PRODUCCIN DE PROTENAS UNICELULARES.
La filosofa inicial de ICI y BP era obtener a bajo costo protenas de alto valor a
partir del petrleo, para ser aadidas a los alimentos industriales, como sustitos
de aditivos proteicos importados como la harina de soja. Pero se vio resentida
por el incremento del precio del crudo ( 1973 ) pues el sustrato supona de un
40 a un 60% de los costes totales de fabricacin.
La agricultura principal competidor, tiene una gran capacidad para responder a

las demandas del mercado manteniendo los precios, y los cultivos
convencionales de soja, cacahuetes, semillas de colza, semillas de algodn,
habas...ricos en protenas ganaron el mercado de las protenas unicelulares
destinadas a la alimentacin animal as que RHM y Pure Control Products
dirigieron sus productos hacia el mercado de la alimentacin humana. RHM
produjo sucedneos de carne de alto valor aadido con alto porcentaje en fibra
y un 50% de protenas.
Los principales factores econmicos son productividad, rendimiento y precio de

venta y como el costo del sustrato representa una gran proporcin del costo de
fabricacin de la mayora de los productos de protenas de organismos
unicelulares, es esencial que el rendimiento celular ( peso de clulas producido
por unidad de peso de sustrato ) sea elevado y la formacin de subproductos
sea mnima.
9.4 ELECCIN DEL MICROORGANISMO.

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Ficha: 934230
Se deben tener en cuenta criterios como el sustrato necesario y los posibles

suplementos del mismo, la velocidad de crecimiento, productividad y rendimiento del
sustrato, el PH y la temperatura, la aireacin, morfologa del crecimiento en el
fermentador, seguridad y no patogenicidad, ausencia de productos txicos, facilidad de
recuperacin de las protenas de organismos unicelulares, la composicin proteca, el
contenido de RNA ( indeseable para la utilizacin humana )...
Los hongos tienen la capacidad de degradar un amplio rango de productos

vegetales y son fciles de recuperar por filtracin, pero son difciles de airear en
su morfologa filamentosa que optimiza la velocidad de crecimiento de los
mismos. Por su parte las bacterias crecen muy rpidamente pero exigen de
refrigeracin en el fermentador. Las bacterias y levaduras son ms fciles de
airear pero ms difciles de recuperar que los hongos, exigiendo tcnicas de
sedimentacin y centrifugacin. Adems aunque las bacterias tienen mayor
contenido proteico que los hongos stas tienen un nivel mayo de RNA
indeseable nutricionalmente.
9.5 DISEO DEL FERMENTADOR PARA LA PRODUCCION DE PROTEINA

UNICELULAR.
Econmicamente el proceso debe realizarse en el mnimo de fermentadores posibles a

gran escala. Con objeto de maximizar la productividad es esencial operar en procesos
continuos, manteniendo velocidades de crecimiento microbiano elevadas y
minimizando el tiempo de residencia en el reactor. Un parmetro de vital importancia
es una elevada velocidad de transferencia de oxgeno que implica una elevada
productividad y gran desprendimiento de calor metablico que debe ser refrigerado
eficazmente.

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1 Bioreactor de BP en su plantas de Escocia y Cerdea (1800m 3) agitado

mecnicamente con deflectores con mezcladores de turbina y aireacin
mediante difusores.
2 Con el gas-oil BP utiliza un diseo con tubo de retorno agitado por aire.
3 Fermentador agitado por aire de Kanegufuchi en el que el medio de
fermentacin es conducido por un bucle giratorio externo por la fuerza
del aire.
4 Fermentador piloto de ICI con presurizacin combinacin de reactor
agitado por aire y otro de bucle, es una columna agitada por aire con un
tubo de retorno donde se elimina el calor.
5 El fermentador de produccin del diseo piloto de ICI en cambio no tiene
tubo de retorno externo.
6 Fermentador con dos agitadores con ejes separados funcionando a sus
respectivas velocidades ptimas para optimizar la transferencia de masa
en las fermentaciones de biomasa fngica.
9.6 USOS
A partir de la biomasa microbiana pueden desarrollarse muchos

productos derivados dada su riqueza composicional: carbohidratos,
lpidos, protenas, cidos nucleicos, vitaminas, etc.Productos ms
elaborados que la biomasa cruda pueden obtenerse industrialmente y
ser utilizados como protena suplemental en alimento humano y animal,
ingrediente funcional en alimentos, o sustrato para procesos qumicos o
biotecnolgicos.
10. TIPO DE CEPA DEL MICROORGANISMO.
10.1 LEVADURAS:
Que son levaduras?

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Se denomina levadura a cualquiera de los diversos organismos eucariotas,

clasificados como hongos microscpicos unicelulares, que son importantes por su
capacidad para realizar la descomposicin mediante fermentacin de diversos cuerpos
orgnicos, principalmente los azcares o hidratos de carbono, produciendo distintas
sustancias. Desde una perspectiva microbiolgica se ha denominado levadura a todos
los hongos con predominio de una fase unicelular en su ciclo de vida, incluyendo a los
hongos basidiomicetes. A veces suelen estar unidos entre s formando cadenas.
Producen enzimas capaces de descomponer diversos sustratos, principalmente los
azcares.
Las levaduras tienen una amplia aplicacin en la biotecnologa tradicional y
moderna. Desde la antigedad se han reconocido como protagonistas en la
produccin de alimentos y bebidas por fermentacin y actualmente son
utilizadas como fuentes de obtencin de vitaminas del complejo B, pigmentos,
cofactores, protenas de organismos unicelulares, biomasa y otros productos
con valor aadido.
10.2 MICROORGANISMOS A UTILIZAR PARA LA PRODUCCION.

10.2.1 Saccharomycescerevisiae
Saccharomycescerevisiae es la especie de levaduras utilizada por excelencia

para la obtencin de etanol a nivel industrial debido a que es un microorganismo
de fcil manipulacin y recuperacin, no es exigente en cuanto a su cultivo, no
presenta alto costo, tolera altas concentraciones de etanol, en la fermentacin
produce bajos niveles de subproductos, es osmotolerante, capaz de utilizar
altas concentraciones de azcares, presenta alta viabilidad celular para el
reciclado y caractersticas de floculacin y sedimentacin para el procesamiento
posterior la clasificacin taxonmica de la levadura se observa en la Tabla 1.
Tabla 1. Clasificacin Taxonmica de Saccharomycescerevisiae.

REINO HONGO
DIVISIONAmastogomycota
CLASEAscomycetes
SUBCLASEHemiascomycetidae

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ORDENEndomycetales
FAMILIASacchaomycetaceae
SUBFAMILIASaccharomycetaidae
GENEROSaccharomyces
ESPECIECerevisiae
Fuente: tesis 26 U. Javeriana (microbiologa industrial).
Las levaduras, son organismos eucariticos unicelulares, por lo tanto sus

estructuras se encuentran formadas por pared celular, ncleo diferenciado y
organelos como ribosomas y mitocondrias; la formacin de una cpsula de
polisacaridos, la ausencia o presencia de vacuolas y el desarrollo de las
mitocondrias dependen de las condiciones fisicoqumicas y de la edad del
cultivo. Las caractersiticas generales de las levaduras se resumen en la Tabla
2.
Tabla 2Caractersticas generales de las levaduras.

CARACTERISTICAS LEVADURAS
DIMENSIONES4 - 8 (MICRAS)
TIEMPO DE DUPLICACION1 - 3 (HORAS)
PH4,5 - 5,5 (RANGO OPTIMO)
NITROGENO7,5% - 8,5%
PROTEINA35% - 45%
ACIDOS NUCLEICOS6% - 12%
CARBOHIDRATOS30% - 45%
10.2.2 Cndida utilis

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La Cndida utilises una levadura importante en la industriaalimentaria y

ampliamente estudiada desde que se concibi eluso de biomasa microbiana
para la alimentacin. Tiene la grancaracterstica de degradar diferentes
sustratos orgnicos, enparticular ha llamado la atencin el que
utilice compuestosorgnicos celulsicos como nica fuente de carbono. Otra de
suspropiedades es la produccin extracelular de enzimasimportantes para la
industria, as como el alto contenido degrasas, protena y vitaminas, en
especial de complejo b.la clasificacin taxonmica de la levadura se observa en
la Tabla 3.
Tabla 3. Clasificacin Taxonmica de La Cndida utilis.

REINO HONGO
PHYLUM ASCOMYCOTA
SUBPHYLUM SACCHAROMYCOTINA
CLASE SACCHAROMYCETES
ORDEN SACCHAROMYCETALES
FAMILIA SACCHAROMYCETACEAE
GENERO CANDIDA
ESPECIE C.UTILIS
Fuente:presentacin Paula Mosquera 2012.
A continuacin de mostrara las caractersticas principales de la cndida

utilisTabla 4.
Tabla 4. Caractersticas de la C.utilis.

UTILIS DE LA (Microbiologa) una especie asexual de la levadura usada
CANDIDA industrial en la produccin de protena unicelular para el
alimento y el forraje.
TORULA (Nombre latino: Utilis de la cndida; antes los utilis de
Torulopsis, los utilis de Torula) son especies de levadura.
NOMBRE LATINO Utilis de la cndida.
NOMBRE DE LA Especie de la levadura de los utilis de la cndida.

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Ficha: 934230
ESPECIE
USO Agregar para alimentar o uso del agua, o para la

produccin de ensilaje.
CARACTERISTICAS Las clulas estaban alrededor, oval y cilndrico, la talla 3.5
DE LA TENSION del ~ 13m. del 7 del ~ los 4.5m.
PROPOSITO Su protena y vitamina B que los utilis altos, de Candida de
la levadura puede urea como fuente del nitrgeno, el
media no necesita agregar cualquier factor de crecimiento
puede crecer. Puede utilizar la pentosa y el hexosa puede
utilizar los hidrolizados del melaza, maderas y otro
protena comestible del producto.
LEVADURA DE LA Tambin se conoce como utilis de Candida, una levadura
TORULA alto verstil. Se encuentra por todo el mundo y puede
crecer en la celulosa de madera, la litera de la hoja y los
substratos que son ricos en celulosa. Es un medio de
cultivo til del laboratorio y media del crecimiento con las
aplicaciones de Biotech, farmacuticas e industriales
Fuente: Articulo Determinacin de protena total de cndida utilis y saccharomycecereviciae en bagazo de

caa.
1. MICRORGANISMOS A UTILIZAR PARA LA PRODUCCION.

(IMGENES)
10.3.1Saccharomycescerevisiae
Figura 2.Vista macroscpica de Saccharomycescerevisiae en medio YPG.

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Ficha: 934230
Saccharomycescerevisiae es una levadura cuya colonia es de color crema o

blanco, apariencia hmeda y brillante, de bordes irregulares (Figura 1). La
temperatura ptima de crecimiento es de 25 a 30C. Puede producir ascosporas
cuando hay requerimientos nutricionales adecuados.
Sus dimensiones son: 2.5 10 micras de ancho y 4.5 21 micras de largo.

Microscpicamente se observan redondas y ovoides, elipsoides, a veces
cilndricas y filamentosas. Fermenta glucosa, galactosa, sacarosa y maltosa
yno fermenta lactosa. Asimila galactosa, sacarosa, maltosa y rafinosa. La
aireacin ptima es de 0.6 0.9 vvm.
Pertenece al gnero de las levaduras de la familia Saccharomycetaceae; las
clulas son esferoidales, elipsoidales o cilndricas (Figura 2): La reproduccin
vegetativa ocurre por mecanismos multilaterales.
Figura 3. Vista Microscpica de Saccharomy cescerevisiae.
El crecimiento de Candida in vitro, aparece como colonias grandes, redondas,

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Ficha: 934230
blanco o crema (albicans en latn es blancuzco) en cajas de petri con Agar-

Agar. La Candida Utilis dispone de un sistema ltico capaz de degradar y
resistetizar su pared durante la divisin celular. Se puede agregar a las
galletas, refrescos, sopas, tortillas, como un fortificante porque posee muchas
protenas vegetales.
Es una levadura alto verstil. Se encuentra por todo el mundo y puede crecer
en la celulosa de madera, la litera de la hoja y los substratos que son ricos en
celulosa. Es un medio de cultivo til del laboratorio y media del crecimiento con
las aplicaciones de Biotech, farmacuticas e industriales.
Figura 4. Vista Microscpica de Candida Utilis
Fuente: Bacteriologa U. Valle.
11. CARACTERSTICAS DE TCNICAS ANALTICAS FSICO-QUMICA DEL

MICROORGANISMO UTILIZAR (CEPA).
11.1 CARACTERSTICAS FISICOQUMICAS DE LAS LEVADURAS.
11.1.1 Saccharomycescerevisiae
1 Requerimientos nutricionales
Saccharomycescerevisiaerequiere ciertos nutrientes y condiciones ambientales

para su apropiado crecimiento y reproduccin. Algunos elementos son
bsicamente necesarios como por ejemplo carbono, hidrgeno, oxgeno,
nitrgeno y fsforo El carbono sirve como fuente de energa y como material
constitutivo de la masa celular. El nitrgeno se encuentra en la clula formando
parte esencial de las protenas, aminocidos y cidos nucleicos; el fsforo se
encuentra en los cidos nucleicos, en la lecitina y en diversos compuestos
fosforilados que participan activamente en los procesos de degradacin
oxidativa y de intercambio energtico (ATP, ADP, AMP, NADP). Para que las
fuentes de Nitrgeno, Fsforo y Carbono presentes en el sustrato sean
aprovechados por la levadura se requiere que se encuentren en forma
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Ficha: 934230
asimilable.
2 Requerimientos fsico-qumicos
1 PROTEINAS:
El contenido proteico de la levadura es el elemento nutricional
ms importante y se las ha llamado protenas unicelulares. Tal
vez el nombre ms apropiado seria BIOMASA MICROBIANA. Al
ingerirse las protenas de la levadura se liberan a nivel intestinal
las envolturas celulares por accin de las enzimas digestivas,
siendo hidrolizadas a aminocidos, que luego son reconstituidos
para formar enzimas, hormonas y otros compuestos nitrogenados
necesarios para la vida. En el caso de las levadura hidrolizadas
enzimticamente, las protenas ya han sido hidrolizadas en el
proceso de fabricacin, por lo que sus aminocidos se encuentran
en forma libre o bien formando di-pptidos o tri-pptidos. Estas
molculas se absorben inmediatamente traspasado la pared
intestinal y pasando directamente al torrente sanguneo. El mayor
gasto energtico inducido por la dieta (TID) se produce cuando se
ingieren protenas, ya que su compleja digestin, requiere de
mucha energa. La ingesta de aminocidos libres permite evitar
este costoso proceso digestivo. Las levaduras contienen todos los
aminocidos considerados esenciales por la OMS y la FAO
(Informe 522 de 1973). Del total de las protenas debe tenerse en
cuenta que el 6-8% se halla compuesto por cidos nucleicos. En
el caso de las levaduras hidrolizadas, estos se encuentran en
forma libre, por lo que los nucletidos sern degradados a
nuclesidos por la accin del HCl y posteriormente se
reconvertirn de nuevo en nucletidos; en cambio, en las
levaduras sin hidrolizar, forman parte de la matriz nitrogenada del
producto, por lo tanto, no tienen una accin inmediata en el
organismo, aunque colaboraran activamente en la formacin de
protenas y cidos nucleicos.
2 VITAMINAS :
Las levaduras contienen importantes cantidades de vitaminas
hidrosolubles del complejo B, siendo una fuente indispensable,
pues muchas veces deben ser incorporadas para lograr el normal
desarrollo de las funciones celulares durante el crecimiento y la
reproduccin. El complejo B incluye a las vitaminas B1-B2-B6,
niacina y cido flico, biotina-pantotenato; sus funciones son las
de participar en reacciones enzimticas como co-enzimas (B1,
B6, niacina, biotina, cido flico y pantotenato); en la sntesis de
cidos nucleicos (biotina y cido flico) y como activadores de

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Ficha: 934230
funciones de la respiracin celular (B2 y niacina).

3 MINERALES Y OLIGOELEMENTOS:
Predominan en la levadura de cerveza los FOSFATOS y el
POTASIO. El contenido en elementos bioqumicamente
importantes como azufre, magnesio y calcio es relativamente alto.
Recientes estudios han demostrado que la suplementacin con
levadura seca, subsana total o parcialmente las deficiencias de
hierro, cobre, zinc, cromo, selenio y molibdeno que a veces
presentan ciertas dietas.
La levadura tambin tiene cantidades apreciables de otros
minerales. Especficamente se considera como la mejor fuente de
Cromo, esencial en el metabolismo de las grasas y de los
carbohidratos. Estimula la sntesis de los cidos grasos y del
colesterol, los cuales son esenciales para la funcin cerebral y
otros procesos corporales. El cromo, tambin es importante en el
metabolismo de la insulina. As mismo, tiene cantidades
aproximadas de 18 mg/kg de hierro y otros importantes minerales
como el zinc, imprescindible para cientos de enzimas o el selenio
que puede ayudar al cuerpo a producir protenas especiales,
llamadas enzimas antioxidantes, las cuales juegan un papel en la
prevencin del dao celular.
4 CARBOHIDRATOS: La pared celular de la levadura representa del 15-
30 % del peso seco de la misma. Est compuesta primariamente por 2
capas: Capa externa. Est formada por un complejo de manoprotenas
(aproximadamente 25-50 %) que corresponde a una asociacin de
polisacridos de - D-manosa con protenas (manano-oligosacridos,
MOS). stas se unen a travs de extremos no reductores en forma
directa con los 1-3 -glucanos o, indirectamente, con los 1-6 -glucanos.
Los MOS contienen abundantes polipptidos glucosados (50- 95 %) que
salen como fimbrias fuera de la pared celular, que tienen la capacidad de
aglutinar las micotoxinas presentes en el tracto intestinal animal. As
pues, se las puede utilizar como sustituto de coccidiostticos y/o
antibiticos usados como promotores de crecimiento en las aves y otros
animales, ya que se ha descubierto que su accin central consiste en el
bloqueo competitivo de las lectinas bacterianas debido a que las fimbrias
tipo 1 de la superficie de las bacterias patgenas reconocen
especficamente las glucoprotenas de la pared celular y las aglutinan.
Capa interna. Est constituida por un complejo de glucomananos
(aproximadamente 25-30 %) que son 5 -glucanos asociados a una
pequea cantidad de quitina.

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Ficha: 934230
3 Requerimientos fsico-qumicos
5 CARBONO:
El carbono es el compuesto mayoritario de la clula de levadura:
alrededor del 50% del peso seco; los compuestos carbonados
son utilizados por las levaduras a la vez como fuente de energa y
como fuente de carbono (Fiechter et al. 1981). Segn el tipo de
levadura, la capacidad de utilizar ciertos compuestos carbonados
vara; algunas levaduras pueden utilizar una amplia gama de
compuestos pero otras asimilan solamente un nmero pequeo
de ellos (Harrison & Rose 1983). Entre las fuentes de carbono, los
carbohidratos son los ms frecuentemente utilizados: los
carbohidratos simples como las hexosas, los disacridos y los
trisacridos son metabolizados por un gran nmero de levaduras
(Jones &Greenfields 1984). Durante los ltimos diez aos, se han
realizado trabajos sobre los carbohidratos abundantes y poco
costosos: las pentosas y los polisacridos. S. cerevisiae es
incapaz de utilizar pentosas, pero algunas especies de Cndida,
Metschnikowia y Pichia pueden convertir la D-xilosa en etanol
(Schneider et al. 1998). Adems de los carbohidratos, pueden ser
utilizados otros compuestos carbonados que incluyen alcoholes,
cidos o compuestos menos oxigenados como hidrocarburos. Ha
sido efectuada por Levi et al. (1980) una revisin de las levaduras
que crecen sobre alcanos, entre las cuales se destaca
principalmente el gnero Cndida. Ninguna levadura puede oxidar
metano, pero varias especies pueden utilizar el metanol y han
sido cultivadas como fuente de protena; los principales gneros
involucrados son Cndida, Hansenula, Pichia y Torulopsis (Van
Unden&Buckley 1982).
6 NITRGENO:
El nitrgeno es cuantitativamente el segundo constituyente
aportado por el medio de cultivo. Es utilizado por las clulas en
los aminocidos, los nucletidos y algunas vitaminas. Pueden ser
utilizadas numerosas fuentes de nitrgeno. Todas las levaduras
son capaces de utilizar el nitrgeno en forma de ion amonio; los
iones amonio pueden ser aportados en el medio por el cloruro
amnico, el nitrato amnico, el fosfato amnico y sobre todo el
sulfato amnico, que es el mejor compuesto pues aporta al mismo
tiempo azufre necesario para la sntesis de ciertos aminocidos
(Cooper 1982). Algunas levaduras son capaces de utilizar los
nitratos y los nitritos, en particular las de los gneros Hansenula,
Pachysolen, Citeromyces y ciertas especies de Cndida y de
Trichosporon; esta capacidad se utiliza en taxonoma (Kreger Van
Rij 1984). En los medios de cultivo, los nitritos forman a pH
inferior a seis cido nitroso que es txico para las clulas.
7 FSFORO:
El fsforo se halla incluido en los cidos nucledos y los
nuclesidos di y trifosfato. Se encuentra tambin en forma de
polmeros lineales poli fosfatos que juegan un papel importante en

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Ficha: 934230
la regulacin del metabolismo celular (Kulaev&Vagabov 1983). La

concentracin de iones fosfato (PO4-3) regula la sntesis de
lpidos y carbohidratos. El fsforo es asimilado por la clula en
forma de iones orto fosfato (H2PO4). Las fuentes de fsforo en el
medio de cultivo deben estar constituidas por dihidrogeno fosfato
de potasio (KH2PO4) o por el dihidrogeno fosfato disdico (Na2 H
PO4). En condicin limitante de fsforo en el medio, la clula
sintetiza una fosfatasa a partir de los esteres fosfricos (Schurr&
Y gil 1981).Otros compuestos Pueden aadirse otros
compuestos al medio de cultivo como potasio, magnesio, calcio,
zinc,manganeso, y ciertos iones, las necesidades varan
cuantitativamente y segn las cepas (Beech et al. 1980). Algunos
compuestos son factores de crecimiento como el inositol y el
pantotenato. El inositol juega un papel importante en la sntesis
de los lpidos de las membranas (Henry 1996), pero slo puede
ser utilizada la forma meso (Nikawa et al. 1998).
Normalmente el inositol puede ser sintetizado por las levaduras.
El pantotenato se incorpora a las coenzimas A implicadas en las
reacciones de oxidacin de los cidos cetnicos y en el
metabolismo de los cidos grasos. La vitamina B6 o piridoxina es
trasformada en fosfato de piridoxal y en piridoxamina, coenzimas
implicadas en la desanimacin y la descarboxilacin de los
aminocidos (Stryer 1981); juega igualmente un papel en el
metabolismo de los carbohidratos y de los cidos nucledos
(cantidad necesaria: 6.25 mg.1-1 en forma de piridoxina HCl).
En la formulacin de un medio de cultivo o en un medio industrial
complejo, es necesario tener en cuenta las interacciones entre los
diferentes constituyentes; Nagamune et al. (1991) mostraron por
ejemplo, el efecto de la interaccin de las concentraciones en
(NH4)2SO4y KH2PO4sobre la tasa de crecimiento. Por otro lado,
ciertos elementos, a concentraciones demasiado altas, pueden
llegar a ser txicos.
1 MATERIAS PRIMAS
12.1 MELAZA DE CAA

Las melazas, mieles finales o melazas blackstrap, suelen ser definidas, por
muchos autores como los residuos de la cristalizacin final del azcar de los
cuales no se puede obtener ms azcar por mtodos fsicos.jarabe o lquido
denso y viscoso, separado de la misma masa cocida final y de la cual no es
posible cristalizar ms azcar por mtodos usuales.
La denominacin melaza se aplica al efluente final obtenido en la preparacin

del azcar mediante una cristalizacin repetida. El proceso de evaporacin y
cristalizacin es usualmente repetido tres veces hasta el punto en el cual el

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Ficha: 934230
azcar invertido y la alta viscosidad de las melazas ya no permitan una

cristalizacin adicional de la sacarosa. La melaza es una mezcla compleja que
contiene sacarosa, azcar invertido sales y otros compuestos solubles en lcali
que normalmente estn presentes en el jugo de caa localizado, as como los
formados durante el proceso de manufactura del azcar. Adems de la
sacarosa, glucosa, fructosa y rafinosa los cuales son fermentables, las melazas
tambin contienen sustancias reductoras no fermentables.(Tabla 5)
Tabla 5: Composicin de la melaza de caa de azcar

COMPONENTES CONSTITUYENTES CONTENIDO P/P
(%)
Componentes Materia primas 78
Mayores
Proteinas 3
Sacarosa 60-63
Azucares Reductores 3 ,0-5,0
NO Azucares 4,8
Agua 16
Grasas 0,4
Cenizas 9
Contenido de Calsio 0,74
minerales
Magnesio 0,35
Fosforo 0,8
Potacio 3,67
Contenido de Glisina 0,1
aminoacidos
Leucina 0,01
Lisina 0,01
Treonina 0,06
Valina 0,02
8 Composicin:

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Ficha: 934230
La composicin de las melazas es muy heterognea y puede

variar considerablemente dependiendo de la variedad de caa de
azcar, suelo, clima, perodo de cultivo, eficiencia de la operacin
de la fbrica, sistema de ebullicin del azcar, tipo y capacidad de
los evaporadores, entre otros. Por otro lado, la melaza de caa se
caracteriza por tener grados Brix slidos disueltos de 68- 75% y
un pH de 5.0- 6.1% (Castro, 1993).
12.2 VINAZA
La Vinaza es el subproducto lquido de la destilacin del mosto en

la fermentacin del etanol.
TIPOS DE VINAZA
Por la materia prima que la origina:
1 Melaza (o jugo, mieles o mezclas) de caa de azcar
2 melaza de remolacha
3 melaza de agave
4 Maz
5 Cebada
4 Por la concentracin de slidos totales que contenga:

1 vinaza diluida: 8 a 10% de slidos totales
2 vinaza semiconcentrada: 20 a 30% de slidos totales
3 vinaza concentrada: 55 a 60% de slidos totales
4 vinaza slida: 99 a 99.9 % de slidos totales
COMPOSICIN
Las vinazas, en general, contienen un gran contenido de materia orgnica y nutriente
como nitrgeno, azufre y fsforo. Tambin contienen una gran cantidad de potasio.
Entre los compuestos orgnicos ms importantes, estn los alcoholes, cidos

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Ficha: 934230
orgnicos y aldehdos. Adems, tambin contiene compuestos fenlicos recalcitrantes,

como las melanoidinas. Son cidas (pH entre 3 y 4).
2 CARACTERSTICAS FSICO-QUMICA DE LAS MATERIAS PRIMAS
13.1 MELAZA DE CAA

VISCOSIDAD:
Las relaciones entre concentracin y viscosidad para soluciones de azcarpura
son igualmente vlidas para las melazas. La viscosidad de las soluciones
saturadas de azcar impuro, aumenta rpidamente con el contenido de
impurezas debido al incremento de la concentracin de slidos. El efecto de las
sales minerales sobre la viscosidad de las soluciones de azcar es variable. Un
enriquecimiento de iones Ca2 aumenta la viscosidad.Mientras que un
incremento de iones K, la disminuye.
Los compuestos orgnicos no azcares, tienen un profundo efecto sobre la
viscosidad, pues los componentes de alto peso molecular pueden
incrementarla considerablemente. La aireacin influye marcadamente sobre la
viscosidad aparente de las soluciones de azcar, y si se disminuye el contenido
de aire en las melazas disminuye la viscosidad.
El efecto de las variaciones del pH sobre la viscosidad de las soluciones de
azcar es insignificante, excepto cuando el pH es superior a 11; en este caso,
la viscosidad aumenta. El efecto de la concentracin y la temperatura caso,
sobre la viscosidad de las melazas, tiene importancia prctica en la cantidad de
melaza que fluye por las tuberas y bombas, as como la descarga por
gravedad natural, o el desplazamiento por fuerza centrfuga. Si se considera
que la viscosidad de las melazas decrece a una temperatura dada, con una
disminucin de la concentracin, y tambin cuando la concentracin es
constante y la temperatura aumenta.
PH.:
Las melazas de caa son ligeramente cidas, tienen un pH entre 5.5 y 6.5 un
pH bajo es atribuible a la presencia de cidos alifticos y al bajo pH de la
clarificacin, si es cida.
El pH de las melazas cambia con la temperatura y depende tambin de la
naturaleza y de la cantidad de material estabilizador del pH que posea.
La accin estabilizadora del pH tiene efecto sobre la melaza para resistir la
adicin de cidos o lcalis, sin cambiar su naturaleza cida o bsica. En la
melaza la accin estabilizadora depende del contenido de no azcares y de las
caractersticas de la melaza.
La estabilizacin del pH en las melazas de caa tiene un patrn uniforme, es
decir, no existen variaciones irregulares debidas a relaciones de cambio de
peso entre las sustancias que intervienen, por lo tanto la actividad
estabilizadora se modifica.
CALOR ESPECFICO Y CONDUCTIVIDAD TRMICA:

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Ficha: 934230
En las soluciones de azcar, el calor especfico depende de la temperatura, de

la concentracin y de la composicin. Se ha comprobado, que el calor
especfico disminuye al aumentar la concentracin de las soluciones impuras
de azcar; es necesario, conocer el calor especfico de las melazas para
calcular la transferencia de calor durante el calentamiento o enfriamiento.
DENSIDAD:
En la prctica, la densidad se determina mediante equivalencia con la

concentracin en grados Brix. Adems, para su determinacin se usan tres
instrumentos densimtricos: el hidrmetro, la balanza de Westphal y el
picnmetro, de los cuales el primero es el ms utilizado.
13.2 VINAZA
Tabla 6:Propiedades qumicas de la vinaza concentrada al 60%

COMPUESTOS CONCENTRACIO
N
% m/m kg/m3
Slidos totales 60 -
Materia orgnica 46 598
Carbono oxidable 18 234
Nitrgeno 0,95 12,35
Fsforo (como P2O5) 0,04 0,52
Potasio (como K2O) 4,48 63,44
Calcio (como CaO) 1,31 17,11
Magnesio (como MgO) 0,67 8,71
Sulfatos (como SO4 2,59 33,67
ELEMENTOS 1mg/kg -
MENORES
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Ficha: 934230
Manganeso (Mn) 43 -
Cobre (Cu) 10 -
Zinc (Zn) 19 -
Boro (B) 6 -
Caractersticas -
adicionales
Densidad (kg/m) 1300 -
pH 4,5-5 -
Conductividad Elctrica 17 -
(dS/m)
Viscosidad (cPs) 450 -
Fuente: Laboratorio I & D., Sucromiles S.A. y AgrilabLtda
3 ANALISIS FISICOQUIMICO PARA PROTEINA UNICELULAR
1 pH: medida de acidez o alcalinidad de una disolucin.

2 Brix: Cantidad de sacarosa en 100 ml.
3 ANL: Determina la cantidad de nitrgeno.
4 Acides Voltil: Determina la cantidad de acido actico.
5 ATR: Determina el porcentaje total de azucares reductores
6 AR: Determina el porcentaje de azucares reductores
7 Peso seco: Cantidad de biomasa presente en una muestra como
solido o suspensiones totales.
8 Densidad Picnometria: Permite conocer la densidad o peso
especfico de cualquier fluido.
9 Temperatura: Magnitud referida a las nociones templado o tibio,
medible mediante un termmetro.

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Ficha: 934230
10 Mtodo de kjeldahl: para estimar el contenido de protenas
4 PROCESO PROTEINA UNICELULAR
MATERIA PRIMA
PRETRATAMIENTO
ESTERILZACION
SUSTRATO DE
VINAZA O
AGITACION MELAZA
ESCALADO INVITRO CARACTERIZACION

100ML
ESCALADO INVITRO
ANALISIS INICIALES
500ML
ESCALADO INVITRO 1 TEMPERATUR

ANALISIS
3000ML A
2 PH
Pgina35 3 BRIX
4 ANL
5 ACIDEZ
VOLTIL
Ficha: 934230
1 TEMPERATURA ESCALADO EN PLANTA

2 PH 30L
3 BRIX
4 CONTEO
CELULAR
ESCALADOS EN PLANTA
5 CURVA DE
CRECIMIENTO 100L
ANALISIS FINALES
RECUPERACION
A. CALIDAD SECADO AIRE
PDA
CHROMOCOULT ALIMENTO FINAL
A.
SALMONELLA
EMB 5 FORMULACIN DE MEDIO DE CULTIVO
Tabla 7: Formula en gramos por litro de agua destilada
SUSTRATO CANTIDAD
Agar (fuente carbono, nitrgeno) 15.0g
Dextrosa (fuente azcar) 20.0g
Infuncion de papa (almidn fuente 4.0g

energa)
pH 5.6+-O.2
6 UTILIDAD DE LAS LEVADURAS
Tabla 8:cuadro comparativo de utilidad CANDIDA UTILIS
Protena Lpidos carbohidratos

Huevo 13 11.1 0.0
Leche 3.2 3.7 4.6
Carne 20.7 1 0.5
Candida utilis 52.7 70.0 10.9

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Ficha: 934230
Tabla 9: cuadro comparativo de utilidad
Protena Lpidos carbohidratos

Huevo 13 11.1 0.0
Leche 3.2 3.7 4.6
Carne 20.7 3.7 0.5
SACHAROMICE.S
7 QUE ES UN BIORREACTOR
Los biorreactores son los medios de cultivo optimizados empleados para

la produccin de sustancias a gran escala, los biorreactores son un sistema
que mantiene un ambiente biolgicamente activo, tambin es un recipiente en
el que se lleva a cabo un proceso qumico que involucra organismos o
sustancias bioqumicamente activas derivadas de dichos organismos.
El conjunto biorreactor de cultivo debe cumplir con los siguientes objetivos:
1 Mantener las clulas uniformemente distribuidas en todo el volumen de

cultivo.
2 Mantener constante y homognea la temperatura.
3 Minimizar los gradientes de concentracin de nutrientes.
4 Prevenir la sedimentacin y la floculacin.
5 Permitir la difusin de gases nutrientes a la velocidad requerida por el

cultivo.
6 Mantener el cultivo puro.
7 Mantener un ambiente asptico.
8 Maximizar el rendimiento y la produccin.

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Ficha: 934230
9 Minimizar el gasto y los costos de produccin.
10 Reducir al mximo el tiempo.
Los sistemas con los que trabajan los biorreactores y los fermentadores se
pueden clasificar de dos distintas maneras:
1 Aerbicos
2 Anaerbicos
18.1 DIAGRAMA DE FLUJO DE PROCESO
Figura5.Diagrama de un biorredactor
18.2 PROPIEDADES QUE SE MIDEN EN UN BIORREACTOR
Entre las propiedades que se miden en un BIORREACTOR son:

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Ficha: 934230
1 Temperatura
2 pH
3 Flujo de aire
4 Presin
5 Intensidad de agitacin
6 Nivel o volumen de medio de cultivo
7 Espuma
8 Concentracin de oxgeno disuelto
9 Concentracin celular
10 Concentracin de sustrato
11 Concentracin del producto
18.3 CARACTERSTICAS DEL BIORREACTOR QUE SE VA A UTILIZAR

Los biorreactores comnmente tienen las siguientes caractersticas:
3 El diseo de los biorreactores es cilndrico
4 Los birreactores varan de tamaos milimtricos hasta llegar a los

metros cbicos
5 La mayora de los birreactores son de acero inoxidable.
6 Los birreactores mantienen condiciones ambientales en un mismo

estado
7 Mantienen las clulas de un cultivo uniformemente distribuidas

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Ficha: 934230
8 Los birreactores previenen la sedimentacin y la floculacin
18.4 TIPO DE BIORREACTORESQUE VAMOS A UTILIZAR
1 Biorreactor de agitado
2 18.4.1 AGITADO.
Figura 6.Agitado
Este es el empleado en todas las escalas de produccin, dependiendo de

tamao del reactor el motor se puede colocar en la tapa superior o inferior. La
aireacin se hace a travs de tubos perforados efectuando la dispersin del
aire.

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Ficha: 934230
18.5 TIPO DE OPERACINES QUE SE VA A UTILIZAR
1 Discontinuo o batch
2 Semicontinuo o fed-batch
3 Continuo
18.5.1 MODO DISCONTINUO O BATCH
El crecimiento de microorganismos en batch se refiere a que las clulas se

cultivan en un recipiente con una concentracin inicial, sin que esta sea
alterada por nutrientes o el lavado, por lo que el volumen permanece constante
y solo las condiciones ambientales del medio (pH, temperatura, la velocidad de
agitacin, etc.) son controladas por el operador.
18.5.2 MODO SEMICONTINUO O FED-BATCH
En un cultivo semicontinuo o fed- batch, los nutrientes son alimentados en el

biorreactor de forma continua o semicontinua, mientras no hay efluente en el
sistema. Segn sea el objetivo de la operacin.
18.6 TIPO DE FERMENTACIN QUE SE VA A UTILIZAR
levadura para panificacin, levadura para alimentacin humana y animal:

adictivos para piensos, extractos e hidrolizados de levadura, fuente de enzima,
vitamina y cidos nucleicos. Adems es el sustrato utilizado en la produccin
de protena unicelular.
Grasas de levadura, alcohol etlico y productos colorantes de fermentacin

alcohlica

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Ficha: 934230
18.7 VARIABLES DE PROCESO DE LA FERMENTACION
Los procesos de cultivo y propagacin, entre los cuales se encuentra la

Fermentacin, requieren un control exhaustivo de las condiciones higinicas y
las variables del Proceso. Cualquier agente incontrolado puede suponer la
prdida de las horas, o incluso los das necesarios para obtener un lote de
producto.
Los procesos de fermentacin implican frecuentemente tiempos de fabricacin

considerables, desde unas pocas horas hasta varios das en funcin del
producto y el lote a procesar. Este factor crtico de la programacin de la
produccin unido a que, a menudo, los productos en el interior de los tanques
de fermentacin son excelentes caldos de cultivo para cualquier
microorganismo, hace que las condiciones de diseo y la operativa del sistema
de control cobren especial importancia.
8 TIPO DE ESTERILIZACION EN EL PROCESO
19.1 Definicin:
Esterilizacin.
Eliminacin de toda forma de vida de un medio o un material, que se lleva a

cabo generalmente por medio fsico, por ejemplo, filtracin, o por muerte de los
organismos por calor, productos qumicos u otra va.
Esta definicin excluye por lo tanto cualquier tcnica que resulte solamente en
u dao a los microorganismos o atenuacin de la actividad de cualquier tipo.
19.2 MTODO DE ESTERILIZACIN
Pueden ser de tres tipos.
1 Por destruccin total de microorganismos: -Por destruccin total se

entiende, un proceso muy violento, que casi siempre implica apreciable
del material
2 Por muerte o inactivacin:Eliminacin de microorganismos sin que

exista necesariamente desintegracin de las clulas. Se puede efectuar
por calentamiento, seco o hmedo por radiacin o por agentes qumicos.

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Ficha: 934230
1 nutritiva previamente esterilizada que sale.
2 En el segundo intercambiador de calor, se calienta indirectamente con

vapor a 140 C.esta temperatura se mantiene durante 30-120 segundos
en una tubera de mantenimiento antes de que antes de que sea
colocada en el primer intercambiador mediante enfriamiento premilina.
3 Posteriormente en un tercer cambiador para la refrigeracin a la

temperatura del fermentador. La fase de enfriamiento es solo de 20-30
9 CONTROL DE CALIDAD DEL PRODUCTO TERMINADO.
21.1 ANLISIS: MICROBIOLGICO:

1 PRINCIPIOS DE GARANTA DE LA CALIDAD MICROBIOLGICA DE UN
PRODUCTO
El anlisis microbiolgico de alimentos es una inspeccin que permite valorar la carga
microbiana. esto significa que el alimento o producto no tengo bacterias o
microorganismo que causen enfermedad al hombre al momento de ingerirlos:
1 HETEROGENEIDAD:
2 La presencia de microorganismos en los alimentos: El factor ms importante en
el anlisis es el muestreo, que incluye:
1 Evaluacin de la muestra necesaria para evitar la distorsin producida
por el microorganismo que se encuentran en diferentes partes de las
superficies, por ejemplo de las canales o de las mquinas, sistemas de
alimentos heterogneos (ensaladas, platos congelados, etc.);
2 Determinacin del modo ptimo de remocin del microorganismo de la
muestra o lugar de muestreo y
3 La evitacin de la contaminacin ambiental durante la toma o transporte

deMuchos de los alimentos que se llevan a la mesa pueden estar
contaminados y ser un riesgo para nuestra salud y para la de nuestras
familias, por esta razn, es indispensable que realicen anlisis
microbiolgicos a la mercanca.
EL ANLISIS MICROBIOLGICO no mejora la calidad del alimento, sino que

permite valorar la carga microbiana, sealando los posibles puntos de riesgo de
contaminacin o multiplicacin microbiana, pero en que beneficia un anlisis
microbiolgico a los alimentos?

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Ficha: 934230
Los anlisis microbiolgicos principalmente se usan para:
1 Seguridad higinica del producto o alimento
2 Ejecucin de prcticas adecuadas de produccin
3 Generar calidad comercial y mantenerla en los productos
4 Establecer la utilidad del alimento o producto para un propsito

determinado
21.2 . ANALISIS:FISICO- QUMICO

Lo que describes es un anlisis completo de GARANTIA DE CALIDAD DE UN
PRODUCTO ALIMENTICIO.
FISICOQUIMICO:
1 Cantidad de protenas.
2 Cantidad de grasas
3 Colesterol
4 Fibra
5 Hidrocarburos
6 Porcentaje de humedad
7 Sodio
8 Equivalente de sal
9 Vitaminas
10 Minerales
Anlisis del empaque, respecto a los parmetros que vera un consumidor:

colores, facilidad de abrir, calidad del empaque, aspecto del producto al tocarlo,
y comerlo.
Biomasa de vinaza a partir de Candidautilis:
Tabla 7:Caractersticas fsico qumicas
caractersticasContenidos %

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Ficha: 934230
Materia seca3.82%
Protena cruda7.64%
Extracto etreo0.13%
Cenizas32.84%
Extracto libre de nitrgeno51.56%
Biomasa de melasaapartir de candidautilis:

Caractersticas fsico qumica de la biomasa final de melaza
apartir de candidautilis.
Tabla 8:Caractersticas fsico qumicas
caractersticasContenido %
Protenas49.95%
Carbohidratos10.88%
Lpidos 7.0%
Humedad77.83%
Fibra cruda0.55%
10 Tipos de microorganismos
Bacterias Mohos y levadurasVirusProtozoos
Figura 13

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Ficha: 934230
22.1 MICROORGANISMOS PRESENTES EN NUESTRA PROTEINA

UNICELULAR
Mohos y levaduras
coliformes totales
Escherichia coli
Salmonella
Bacterias gram (-)

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Ficha: 934230
Tabla 9:Microorganismos
Microorganismos Tcnicas Medios utilizados. Aspecto de las
patgenos. Colonias
Staphylococcus aureus. Determinacin de Agar Baird Parker. Negras y brillantes

Staphylococcus aureus. con bordes
reducidos blancos,
rodeados de zonas
claras que
contrastan con el
medio.
Bacillus cereus. Determinacin de Bacillus Agar Mossel. Rosadas (manitol

cereus. negativo) halo
denso (lecitina
positiva) sobre un
fondo rojo violeta
Coliformes Totales Recuento de Coliformes Agar Chromocult Colonias fucsias

Totales.
Coliformes Fecales Recuento de Coliformes Agar Chromocult Colonias violetas

Fecales.
Clostridium perfringens. D. Esporas sulfito Agar SPS Colonias negras

reductor. reductoras de
sulfito
Salmonella spp. D. Salmonella spp. Agua Pept. Tamponada. Colonias

traslucidas de
Caldo MKTTn y RVS. bordes irregulares
con punto negro.
XLD, HE, SS.
Listeria monocytogenes D. Listeria Caldo Fraser. Colonias blancas/

monocytogenes. beis puntiformes
Agar Palcam y Oxford. con un halo denso
negro.
Mohos y Levaduras Recuento de Mohos y Agar Sabouraud Colonias de

Levaduras diferentes
aspectos
11 CULTIVOS:
Se realizara pruebas de calidad en los siguientes cultivos:
El agar de patata y dextrosa (APD):

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Ficha: 934230
Medio ms comn de cultivo microbiolgico que se preparan a partir de

infusin de patata y dextrosa. El agar de patata y dextrosa es el medio ms
utilizado para el crecimiento de hongos y levaduras.
El agar de patata y dextrosa puede ser suplementado con antibiticos o cidos
para inhibir el crecimiento bacteriano. Este medio es recomendado para
realizar el recuento colonial. Tambin puede ser utilizado para promover el
crecimiento de hongos y levaduras de importancia clnica. La base del medio
es altamente nutritiva y permite la esporulacin y la produccin de pigmentos
en algunos dermatofitos. Algunos procedimientos sealan bajar el pH del medio
a 3.5 0.1 con cido tartrico al 10 %, para inhibir el crecimiento bacteriano. La
infusin de patata promueve un crecimiento abundante de los hongos y
levaduras y el agar es adicionado como agente solidificaste.
12 Determinar: el crecimiento de hongos y levaduras
FIGURA 14: APD
Tabla 10: composicin del APD

Gramos Ingredientes
1000 Agua destilada
200 Patatas
(cortadas en rodajas sin pelar)
20 Dextrosa
20 Agar en polvo

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Ficha: 934230
13 Agar Chromocult:
Establece como base para el nuevo estndar de la ISO para la enumeracin

de las muestras en agua de E. coli y coliformes
Determinar el crecimiento de coliformes totales y de la escherichia coli.
Figura 15: cultivo para coliformes totales y escherichia coli.
14 Agar salmonella
Para la deteccin de la salmonella
Figura 16: medio de cultivo de la salmonella

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Ficha: 934230
Es una bacteria patgena para el hombre y muchos animales, produce una

enfermedad de origen alimentario conocida como salmonelosis.
15 EMB:
Agar EMB (Eosina-Azul de Metileno)
Este medio (tambin denominado E.A.M.) es utilizado para el aislamiento

selectivo de bacilos Gram negativos de rpido desarrollo y escasas exigencias
nutricionales. Permite el desarrollo de todas las especies de la familia
Enterobacteriaceae.
Figura 17: cultivo EMB.

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Ficha: 934230
16 Deteccin: de bacterias gran negativas
Frmula (en gramos por litro) Instrucciones
Peptona 10.0 Suspender 36 g del polvo en un litro de

agua destilada. Reposar 5 minutos;
mezclar, calentando a ebullicin durante 1
Lactosa 5.0 o 2 minutos hasta su disolucin. Esterilizar
en autoclave a no ms de 121C durante
15 minutos. Enfriar a 45C y distribuir
Sacarosa 5.0 agitando suavemente.
Fosfato dipotsico 2.0
Agar 13.5
Eosina 0.4
Azul de metileno 0.065
pH final: 7.2 0.2
17 Anlisis fsico qumico del producto

Anlisis fsico qumico

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Ficha: 934230
Para determinar las propiedades de esta protena unicelular se va a utilizar los

siguientes mtodos.
PESO SECO CANTIDAD TOTAL DE BIOMASA
METODO KARL FISCHER HUMEDAD
METODO DE KJENDAHL PROTEINA Y NITOGENO
MUFLA CENISAS
CRISOL CON FILTRO FIBRA CRUDA
METODO DE SOXHLET LIPIDOS
EXTRACTO LIBRE DE NITROGENO
Mediante estos mtodos se puede analizar la propiedad fsica qumicas de esta

protena unicelular (biomasa proteica).
Mtodo del kjendahl
Figura 18
El mtodo Kjeldahl es un mtodo para determinar el contenido de protena y

nitrgeno de substancias orgnicas e inorgnicas.
Estas determinaciones se hacen en alimentos, bebidas, carnes, granos, aguas

residuales, suelo y en muchas otras muestras.

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Ficha: 934230
Los "digestores de bloques", disponibles de 4 25 unidades, son usados a

menudo en conjuncin con unidades de destilacin con generadores de vapor
para disminuir el tiempo de destilacin
Mtodo Karl Fischer:
Figura 19
La Balanza de Humedad est diseada para la determinacin rpida y

automtica del contenido de humedad en slidos o lquidos utilizando una
fuente de calor infrarroja. La Balanza es programable para varios niveles de
temperatura y para distintos periodos de tiempo. Una balanza integrada pesa la
muestra antes y despus de la prueba. El clculo de la prdida de humedad (y
contenido de humedad) es automtico.
Figura 20
De las tcnicas para determinar contenido de humedad, la titulacin Karl

Fischer es la metodologa ms exacta, pues cuenta, entre otras, con las
siguientes caractersticas:

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Ficha: 934230
- Es una tcnica selectiva para agua (las tcnicas de prdida de peso por
secado determinan el total de voltiles a la temperatura de secado y consumen
mucho tiempo).
- Fcilmente monitoreadle y sencilla de realizar
El mtodo se basa en una titulacin con un reactivo especialmente formulado

llamado "Karl Fischer"; en el procedimiento de anlisis, la muestra se
acondiciona en un solvente apropiado, y el punto final se determina con un
electrodo que indica ausencia de agua. Este mtodo es cada vez ms comn
en los laboratorios, y de acuerdo con la muestra a analizar, existen dos tipos
diferentes de metodologa: la tcnica coulumtrica y la tcnica volumtrica.
Determinacin de fibra:
Figura 21
Determinacin de la Fibra Cruda: Una muestra de alimento seco y libre de

grasa se digiere primero con cido dbil y luego con lcali. El residuo orgnico
que queda se recoge en un crisol con filtro y se seca y pesa, la prdida de peso
despus de quemar la muestra se denomina Fibra Cruda.
Compuesto de 6 plazas y condensadores fabricados en acero inoxidable con

controles individuales de 350 W en cada unidad
Mtodo de calcinacin:

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Ficha: 934230
Determinacin de la ceniza: El alimento es incinerado a 600C para quemar

todo el material orgnico, el material inorgnico no destruido se llama ceniza y
el destruido es la Materia Orgnica (MO).
Se Refiere a la determinacin de las cenizas en una mufla a temperaturas que

oscilan entre 500 y 600 C. El agua y sustancias voltiles son evaporadas,
mientras que las sustancias orgnicas son incineradas en presencia del
oxigeno del aire para producir CO2 y xido de nitrgeno. La mayora de los
minerales son convertidos a xidos, sulfato, fosfato, cloruro y silicato. Los
elementos tales como: Fe, Se, Pb y As, pueden volatilizarse parcialmente con
este procedimiento, es por ello que otros mtodos se deben usar como paso
preliminar para anlisis elemental especfico.
Las ventajas de este mtodo son:
Es un mtodo seguro y no requiere adicin de reactivos y sustancias del

blanco.
Se requiere de una pequea atencin slo para evitar la formacin de

llamas y ello se logra subiendo la temperatura lentamente hasta
aproximadamente 200 C. Despus que se ha quemado la materia orgnica, se
continua subiendo la temperatura hasta aproximadamente 500 C.
Usualmente se pueden manipular varios crisoles a la vez y las cenizas

resultantes se pueden utilizar para muchos anlisis como: determinacin, de
elementos qumicos, cenizas insolubles en cido y solubles e insolubles en
agua.
Figura 22
Determinacin de lpidos:

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Ficha: 934230
Mtodo de Soxhlet Es una extraccin semicontinua con disolvente donde una

cantidad de disolvente rodea la muestra y se calienta a ebullicin, una vez que
dentro del Soxhlet (ver Fig. 3) el liquido condensado llega a cierto nivel es
sifoneado de regreso al matraz de ebullicin, la grasa se mide por perdida de
peso de la muestra o por cantidad de muestra removida.
La extraccin directa del producto seco con ter de petrleo en un agotador de

Soxhlet u otro similar, slo es completa en productos muy finamente
pulverizados, no cocidos, ni adicionados-de leche. Adems, la aplicacin
prolongada del calor en la extraccin puede provocar una descomposicin del
lpido; de especial importancia, si se desea estudiar posteriormente la
composicin de sus cidos grasos por cromatografa gaseosa. Depende por lo
tanto del material, la tcnica que se elegir para la determinacin de los lpidos.
Figura 23
Determinacin de carbohidratos:
Extracto libre de nitrgeno (ElN )Clculo del Extracto libre de Nitrgeno: El ELN
de un alimento se determina por diferencia entre el peso de la muestra y la
suma de los porcentajes de Grasa, Fibra Cruda, Protena Cruda y Ceniza.
Mediante estos anlisis podemos determinar la calidad de esta protena

unicelular (biomasa)
18 CURVA DE CRECIMIENTO DE LOS MICROORGANISMOS.

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Ficha: 934230
El concepto asociado al Crecimiento Microbiano, corresponde al aumento

poblacional de una especie microbiana en un medio de cultivo provisto de
todas las necesidades del microorganismo (Cantidad de Nutrientes,
Temperatura, Grado de Humedad, Gases y pH).
Las curvas de Crecimiento Microbiano constan de 4 etapas bien definidas,

aunque el tiempo de duracin de cada una de estas etapas, puede variar segn
el tipo de microorganismo, la familia a la cual este pertenece, entre otras
caractersticas.
Fase de Latencia: Corresponde a un perodo de transicin para los

microorganismos cuando son transferidos a una nueva condicin. En esta fase
no hay incremento en el nmero de clulas, aunque s una gran actividad en el
metabolismo.
Fase de Crecimiento Exponencial: Perodo en que el crecimiento del

microorganismo ocurre de forma exponencial, es decir, cada vez que pasa un
determinado tiempo la poblacin se duplica.
Fase Estacionaria: Perodo en que ocurren las limitaciones del crecimiento, ya

sea por agotamiento de algn nutriente esencial, por acumulacin de productos
txicos o por una combinacin de las causas anteriores.
Fase de Muerte: Luego que culmine la fase estacionaria, comienza una

progresiva disminucin en el nmero de celulas viables, cuando esto ocurre se
dice que la poblacin ha entrado en fase de muerte.
25.1 TIPOS DE CURVAS DE CRECIMIENTO MICROBIANO
Figura 24.Cultivo

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Ficha: 934230
La fase de crecimiento microbiano dura 20 minutos y sta es logartmica se

expresa mediante la siguiente frmula:
Figura 25. Formula de crecimiento microbiano
Colonia: son el conjunto de microorganismos de una misma especie que

provienen de una sola clula y esta se conoce como Unidades Formadoras de
Colonias, ufc.
Las caractersticas coloniales presentan deferentes aspectos en cuanto a

forma, borde, paso de la luz, color, etc. En cuanto a forma pueden ser
circulares, puntiformes, fusiformes, irregulares. En cuanto al borde pueden ser
lisos, ondulados. En cuanto al color se pueden tener colonias blancas, marfil,
amarillas, naranjas, verdes, negras, etc. Su aspecto puede variar de lisas como
en el caso de las bacterias, a butirosas como en las levaduras y algodonosas o
aterciopeladas como en el caso de los mohos.

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Ficha: 934230
Solucin isotnica.
Permite mantener presin osmtica adecuada para ,que los organismos no

mueran y se puedan realizar las diluciones correspondientes del anlisis
microbiolgico.
19 CONTROL DE PROCESO DE FERMENTACIN EN BIORREACTORES
El control es sobre los siguientes variables pH, velocidad de agitacin,
formacin de espuma. Adems se mide e porcentaje de oxgeno disuelto. Los
pasos que hay que seguir para iniciar una fermentacin son:
Primero hay que calibrar el medidor del pH, ya que el valor medido por el
electrodo y el medidor de pH puede llegar a variar con el tiempo. La calibracin
se logra con sustancias llamadas buffers que tienen un valor constante de pH,
que se toma como referencia para hacer los pequeos ajustes en el medidor. El
medidor de oxgeno disuelto es tambin calibrado antes de iniciar la
fermentacin.
Se coloca en el fermentador la fuente de nitrgeno. Adems se agregan los
electrodos para medir el porcentaje del oxgeno disuelto, el pH y el sensor de
espuma. Tambin se colocan las mangueras que servirn para la adiccin de
cido base y antiespumante; as como las mangueras que sirven para la toma
de muestras y las que servirn para la entrada y salida de oxgeno.
10.1 ANALISIS MICROBIOLOGICO

El anlisis microbiolgico se realiza para determinar microorganismos,
bacterias, agentes patgenos que se han contaminantes etc. Se hace un
conteo celular para saber cmo est el microorganismo
VIABILIDAD CELULAR (CRECIMIENTO CELULAR)
Se realiza el crecimiento en cmara de Neubauer
20 ANLISIS QUMICOS:
26.1 AZUCARES REDUCTORES (AR)

Son aquellos que poseen grupo de carbonillo intacto y que a travs del mismo
pueden reaccionar como reductores con otras molculas.
26.2 AZUCARES REDUCTORES TOTALES (ART)
Son las azucares totales que pueden ser fermentables

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Ficha: 934230
26.3 ACIDEZ VOLTIL

Est constituido por los cidos grasos pertenecientes a la serie acticos que se
encuentran en los productos alimenticios resultantes del proceso de
fermentacin
26.4 pH
La temperatura ptima de crecimiento de las levaduras especialmente de
saccharomyces cerevisiae es de 30 a 35 grados centgrados. La temperatura
afecta el crecimiento de manera notable, principalmente por que los
microorganismos de una especie dada solo pueden crecer en un rango
restringido de temperaturas, esto afecta de manera importante el crecimiento
microbiano.
21 PLANTA EN LA QUE SE REALIZARA EL PROCESO DE PROTEINA

UNICELULAR
Figura 26
CONCLUSION
Llegamos a la conclusin que para nuestro proyecto produciremos 4kg de

protena unicelular en polvo para consumo animal, mediante el escalado in vitro

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Ficha: 934230
y en planta utilizando como sustratos principales la melaza de caa de azcar y

la vinaza, y como microorganismos de crecimiento las levaduras por medio de
alimentacin continua de ellas haciendo un anlisis de crecimiento y llevando
nuestro producto terminado a un empacado y etiquetado.
BIBLIOGRAFIA

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Ficha: 934230
ANEXOS
Anexo 1
Para el desarrollo de este proyecto se tendrn en cuenta las siguientes
competencias del proceso
CODIGO COMPETENCIAS
290802045 PLANEAR LOS PROCESOS DE PRODUCCION

BIOTECNOLOGICA DE ACUERDO CON EL PROGRAMA DE
PRODUCCION Y LA LEGISLACION AMBIENTAL VIGENTE.
290802043 OPERAR EQUIPOS DE FERMENTACION EN PLANTA DE
ACUERDO CON EL PLAN DE TRABAJO.
290804046 SUPERVISAS LAS CONDICIONES DEL PROCESO DE
FERMENTACION Y PROPAGACION DE LOS
MICROOORGANISMOS DE ACUERSO CON LOS RECULTADOS

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Ficha: 934230
OBTENIDOS Y LASEFICIENCIAS ESPERADAS.

291201019 ANALIZAR MUESTRAS SEGN PROCEDIMIENTOS
IMPLEMENTADOS POR EL LABORATORIO.
240201024 APOYAR ACTIVIDADES QUE CONDUZCAN A LA
IMPLEMENTACION, DE LOS SISTEMAS DE GESTION,DE
FORMA INDICIDUAL O INTEGRADA; DE ACUERDO A
PLANIFICACION ESTABLECIDA POR LA EMPRESA.
240201500 PROMOVER LA INTERACCION IDONEA CONSIGO MISMO,
CON LOS DEMAS Y CON LA NATURALEZA EN LOS
CONTEXTOS LABORAL Y SOCIAL.
240201501 COMPRENDER TEXTOS EN INGLES EN FORMA ESCRITA Y
AUDITIVA
240201502 PRODUCIR TEXTOS EN INGLES EN FORMA ESCRITA Y ORAL
ANEXO 2
CODIGO RESULTADO DE APRENDIZAJE
29080204501 IDENTIFICAR LOS PROGRAMAS DE PRODUCCION
BIOTECNOLOGICA SEGN PROCEDIMIENTOS Y
PROTOCOLOS ESTABLECIDOS.
29080204502 INTERPRETAR LOS BALANCES DE MATERIA Y ENERGIA
SEGN EL PLAN DE PRODUCCION.
29080204503 PROGRAMAR LOS INSUMOS DE ACUERDO A LAS
NECESIDADES ESTABLECIDAS EN EL BALANCE DE MATERIA
Y ENERGIA
29080204504 VERIFICAR LA CALIDAD DE LA MATERIA PRIMA SEGN LOS
PROCEDIMIENTOS ESTABLECIDOS EN LA EMPRESA
29080204505 AJUSTAR LOS RESULTADOS DEL BALANCE SEGN
PARAMETROS ESTABLECIDOS POR EL CLIENTE Y LA
LEGISLACION AMBIENTAL.
29080204301 ALISTAR LOS EQUIPO,MAQUINAARIA,MATERIA PRIMA E
INSUMOS SEGN PARAMETROS ESTABLECIDOS POR LA
EMPRESA.

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Ficha: 934230
29080204302 MULTIPLICAR LOS MICROORGANISMOS DE ACUERDO CON

LAS NECESIDADES DE PRODUCCION
29080204303 REALIZAR EL PROCESO DE FERMENTACION EN EQUIPOS A
ESCALA DE LABORATORIO O INDUSTRIAL SEGN
PROCEDIMIENTOS ESTABLECIDOS EN LA EMPRESA.
29080204304 VERFICAR LAS VARIABLES DE PROCESO DE
FERMENTACION, SEGN PARAMETROS ESTABLECIDOS
POR LA EMPRESA.
29080205001 ORGANIZAR LOS EQUIPOS,MATERIALES E INSUMOS
NECESARIOS SEGN PROTOCOLOS ESTABLECIDOS.
2980205002 CARACTERIZAR LOS RESIDUOS Y SUBPRODUCTOS DE
ACUERDO A LA LEGISLACION Y NORMATIVIDAD AMBIENTAL
VIGENTE.
29080205004 EJECUTAR EL METODO DE REMEDIACION SEGN EL
TRATAMIENTO PRESENTE Y POLITICA AMBIENTAL DE LA
EMPRESA
2912001901 REPORTAR LOS RESIDUOS TECNICOS OPTENIDOS SEGN
LA POLITICA AMBIENTAL DE LA EMPRESA
2912001902 SELECCIONAR MATERIALES, INSUMOS Y EQUIPOS DE
ACUERDO CON LA ESPECIFICACIONES DEL ENSAYO
2912001902 VERIFICAR LAS CONDICIONES GENERALES DE LOS
ANALISIS SEGN EL PROTOCOLO ESTABLECIDO
2912001903 INTERPRETAR LOS RESULTADOS DE LOS ANALISIS SEGN
PROCEDIMIENTOS ESTABLECIDOS POR EL LABORATORIO.
ANEXO 3
Figura 27

Pgina64
Ficha: 934230
ANEXO 4

Pgina65
Ficha: 934230
Figura 28

Pgina66

Producir Metabolitos Primarios y Secundarios Por Escalado de Biorreactores A Partir de Residuos Agroindustriales en El Sector Azucarer1

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Producir Metabolitos Primarios y Secundarios Por Escalado de Biorreactores A Partir de Residuos Agroindustriales en El Sector Azucarer1

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Procesos Biotecnolgicos Aplicados a la industria

PRODUCIR METABOLITOS PRIMARIOS Y SECUNDARIOS POR

PROYECTO: PRODUCCION 4kg DE PROTEINA UNICELULAR A PARTIR DE

SENA-CENTRO DE BIOTECNOLOGIA INDUSTRIAL

PRODUCCION DE PROTEINA UNICELULAR A PARTIR DE SUSTRATOS

LUIS EDUARDO AGUDELO

GESTOR DEL PROYECTO

SENA-CENTRO DE BIOTECNOLOGIA INDUSTRIAL

9.4 ELECCIN DEL MICROORGANISMO..........................................................18

14.4. Acides Voltil:..................................................................................35

Nivel o volumen de medio de cultivo.........................................................40

Concentracin de oxgeno disuelto...........................................................40

Concentracin del producto.....................................................................40

18.3 CARACTERSTICAS DEL BIORREACTOR QUE SE VA A UTILIZAR..............41

18.7 VARIABLES DE PROCESO DE LA FERMENTACION...................................43

El trmino protena unicelular ( PUC ) se emplea para referirse a

Pero el alto costo de su produccin slo es competitivo en ciertas

Bacterias de los gneros Methilomonas, Pseudomonas, Bacillus y Aerobacter

Sin embargo ciertas especies de levaduras, como Candida utilis y

the term unicellular protein is used to talk to microorganisms such as bacteria,

the bacteria of the genres Methilomonas, Pseudomonas, Bacillus and

However certain yeast species such as Candida utilis y saccharomyces

continuously produced since World War II

1 Producir metabolitos primarios y secundarios por proceso

2 Conocer las tcnicas y aplicaciones previas para el proceso fermentativo para

Produccin de 4kg protena unicelular a partir de sustratos agroindustriales (Melaza y Vinaza)

4 Determinar los mtodos, procedimientos y procesos que permitan la realizacin

1 Con la produccin de metabolitos primarios y secundarios vamos a

Produccin de 4kg protena unicelular a partir de sustratos agroindustriales (Melaza y Vinaza)

El presente trabajo, consiste en la descripcin y anlisis de producir protena

Produccin de 4kg protena unicelular a partir de sustratos agroindustriales (Melaza y Vinaza)

Nuestro proyecto trata de producir protena unicelular a partir de melaza y

9. QUE SON LAS PROTENAS UNICELULARES

Produccin de 4kg protena unicelular a partir de sustratos agroindustriales (Melaza y Vinaza)

Figura 1. Protena unicelular

Las protenas unicelulares (SCP) es un trmino aplicado a un amplio rango de algas

La fabricacin de PUC se ha llevado a cabo debido a la rpida velocidad de

Para el proceso de produccin de protenas unicelulares se prefieren especies

Methylomonas,Pseudomonas, Bacillus y Aerobacter son consideradas fuentes

Los principales sustratos utilizados son alcanos, alcoholes y carbohidratos.

La Candida utilis se obtuvo en ambas guerras mundiales como suplemento

Produccin de 4kg protena unicelular a partir de sustratos agroindustriales (Melaza y Vinaza)

por crecimiento en melazas en Jamaica. Despus tambin en USA y Finlandia

En 1974 en Finlandia se desarrollo el proceso Pekilo para la produccin de

La celulosa de fuentes naturales y restos de madera como material de partida

El suero de leche entera o el desproteizado son una fuente de carbohidratos

9.3 PARMETROS PARA LA PRODUCCIN DE BIOMASA

Los parmetros para la produccin de biomasa o protena unicelular son:

Produccin de 4kg protena unicelular a partir de sustratos agroindustriales (Melaza y Vinaza)

3 .Suplemento del medio con nutrientes como sales nitrogenadas y fsforo

9.4 RENTABILIDAD DE LA PRODUCCIN DE PROTENAS UNICELULARES.

La agricultura principal competidor, tiene una gran capacidad para responder a

Los principales factores econmicos son productividad, rendimiento y precio de

9.4 ELECCIN DEL MICROORGANISMO.

Produccin de 4kg protena unicelular a partir de sustratos agroindustriales (Melaza y Vinaza)

Se deben tener en cuenta criterios como el sustrato necesario y los posibles

Los hongos tienen la capacidad de degradar un amplio rango de productos

9.5 DISEO DEL FERMENTADOR PARA LA PRODUCCION DE PROTEINA

Econmicamente el proceso debe realizarse en el mnimo de fermentadores posibles a

Produccin de 4kg protena unicelular a partir de sustratos agroindustriales (Melaza y Vinaza)

1 Bioreactor de BP en su plantas de Escocia y Cerdea (1800m 3) agitado

A partir de la biomasa microbiana pueden desarrollarse muchos

10. TIPO DE CEPA DEL MICROORGANISMO.