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Carreras del rea de Salud

BIOLOGA CELULAR CCB1103

LABORATORIO N5

PERMEABILIDAD DE MEMBRANAS

LA MEMBRANA PLASMTICA: Una estructura de una capacidad selectiva admirable.

La membrana plasmtica regula el paso de materiales hacia y desde el interior de la

clula. Demostrar su presencia con tcnicas de microscopa corriente es muy difcil; sin
embargo, su existencia se puede inferir si se demuestran algunas de sus propiedades
fisiolgicas. Para ello entonces, se hace necesario conocer los factores que condicionan la
permeabilidad de las membranas.

PERMEABILIDAD DE MEMBRANAS.

Dos son los factores que condicionan el comportamiento de los distintos tipos de
membranas artificiales frente a las soluciones, a saber:
1.- el tamao de los poros de la membrana en consideracin y,
2.- el tamao de las partculas que constituyen una solucin, las cuales pueden corresponder
al nivel inico, molecular o acmulos moleculares.

Considerando los factores anteriormente sealados, las membranas pueden

comportarse de distintas maneras y de acuerdo con esto, existen los siguientes tipos:
1. Membranas IMPERMEABLES: son aquellas que no permiten el paso de ningn
componente de la solucin (solvente o soluto) por ejemplo, el polietileno.
2. Membranas SEMIPERMEABLES: son aquellas que permiten el paso de uno de los
componentes (el solvente).
3. Membranas PERMEABLES: son aquellas que permiten el pasaje de los dos componentes
de una solucin.

Hay varios tipos de membranas que pueden comportarse como permeables o

semipermeables a la vez, de acuerdo con el tamao de las partculas del soluto; entre ellas
podemos citar el celofn, que por su comportamiento remeda muy bien a las membranas
vivas.

PRESIN OSMTICA Y SOLUCIONES FISIOLGICAS. Una de las funciones de la membrana

plasmtica consiste en mantener en equilibrio la presin osmtica del lquido intracelular
con la del lquido intersticial. La presin osmtica juega un papel relevante en la vida
celular. Se ha observado que soluciones de mayor o menor concentracin que 0,951% de
NaCl provoca destruccin de los eritrocitos humanos. El fenmeno que sufren estas clulas
se conoce como hemlisis cuando se colocan en soluciones de una menor concentracin
que la indicada y, crenacin cuando la concentracin del medio en que se encuentra es
mayor que 0,951 %.

De Vries, distingui y dio nombre a los siguientes tipos de soluciones biolgicas:

1) Isotnicas: son las que tienen igual presin osmtica que las clulas de mamferos, la que
equivale a una solucin de NaCl de 0,951 %. Se denominan tambin soluciones fisiolgicas.
2) Hipotnicas: son las de menor presin osmtica o concentracin salina.
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3) Hipertnicas: son las de mayor presin osmtica o concentracin salina.

En clulas vegetales, el fenmeno es similar, pero se presenta un tanto diferente al ser
observado al microscopio; en soluciones hipotnicas la clula se hincha, pues la penetracin
de agua est limitada por la resistencia que le opone la pared celular, evitando de esta forma
su rotura. Este fenmeno recibe el nombre de turgescencia o turgencia. En soluciones
hipertnicas, la clula se retrae en el interior de la cubierta de celulosa, hay salida de agua
del citoplasma hacia el exterior, el fenmeno se denomina ahora plasmlisis y puede ser
reversible si la clula vuelve a ser colocada en un medio con una concentracin salina ms
baja que, a la cual fue sometida inicialmente.

PERMEABILIDAD CELULAR.

Los fenmenos fsicos que tienen importancia fundamental en la permeabilidad de

membranas artificiales se cumplen en la membrana plasmtica, pero debemos recordar que
dicha membrana forma parte de una estructura viva y por ende, pone en juego otros
mecanismos de intercambio que le son propios.
El estudio de la permeabilidad se ha de basar en la composicin qumica, y la
organizacin molecular de la membrana plasmtica. Por otro lado, la presencia de una
membrana establece una clara diferencia entre el lquido intracelular y extracelular, en el
cual la clula est inmersa. En los organismos unicelulares que crecen en lagunas o el mar, el
lquido extracelular es el agua dulce o salada, respectivamente. En los organismos
pluricelulares existe un lquido interno representado por la sangre, la linfa y, en especial, el
lquido intersticial, que se halla en contacto con la superficie externa de la membrana
celular.

En relacin a la composicin y organizacin de las membranas celulares, stas se

comportan ms bien como un lquido, que como una capa de subunidades rgidamente
conectadas. La base de este comportamiento parece ser una bicapa de fosfolpidos, los
cuales se asocian, a travs de uniones no covalentes a otros lpidos y a una cantidad
sustancial de protenas.

Las sustancias pueden entrar a la clula mediante diferentes mecanismos: 1) por

simple difusin a travs de la membrana; 2) por difusin facilitada, en que un
transportador, se combina con la sustancia de un lado de la membrana y la libera en el otro;
y 3) por transporte activo, el cual tambin emplea transportadores, pero acopla el
transporte con la utilizacin de energa. Este ltimo mecanismo permite la acumulacin
citoplasmtica de un sustrato libre, a niveles mucho mayores que su concentracin externa.
Tanto la difusin facilitada como el transporte activo muestran una especificidad
considerable.

La membrana celular, mantiene un balance entre la presin osmtica de los lquidos

intracelular e intersticial, los cuales poseen concentraciones inicas diferentes. En el ltimo,
el Na+ y el Cl- son elevados y el K+ es bajo. Dentro de la clula hay mucho K+, el Na+ y el Cl-
son bajos, pero existe gran cantidad de aniones orgnicos (A-) que no atraviesan la
membrana celular. En todas las clulas se detecta un potencial de membrana de 20 a 100
milivoltios.

La difusin de sustancias en forma pasiva se produce cuando existe un gradiente de

concentracin, y ocurre desde el lugar de mayor a menor concentracin. La difusin de
molculas a travs de la membrana est en funcin del tamao molecular y de su
solubilidad en lpidos. La difusin de iones depende de su concentracin y de la existencia
de gradientes elctricos a travs de la membrana.
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Muchas sustancias ingresan al citoplasma, o son expulsadas de l por una

combinacin reversible con molculas especficas, designadas para facilitar el transporte a
travs de la membrana. Una vez al otro, lado la sustancia transportadora abandona su
transportador el cual queda libre para ayudar en el pasaje de la siguiente molcula. El
proceso si no requiere energa, se denomina difusin facilitada y, si la requiere, transporte
activo.

El pasaje ayudado por transportadores muestra una selectividad muy alta, de tal
manera que una molcula puede entrar, en tanto que otra idntica es totalmente excluida.
Esta capacidad para hacer distinciones extremadamente finas entre molculas muy
relacionadas, est asociada, en general, con los sitios de unin de enzimas y algunas otras
protenas, dado que solo stas tienen la variedad molecular y la flexibilidad necesarias para
suministrar una amplia variedad de especificidades. De acuerdo con esto, el transporte de
algunas molculas se ha atribuido a un tipo de protenas denominadas permeasas, si bien
debe sealarse que no todos los transportadores de membranas son protenas. En las clulas
se encuentran presentes una serie de permeasas diferentes, cada tipo ayuda en el
transporte de una clase distinta de sustancias. El sufijo asa, asociado normalmente con
enzimas, se utiliza para recalcar la similitud entre las molculas transportadoras y las
enzimas verdaderas: 1) las permeasas aceleran el transporte; 2) le confieren una gran
selectividad; 3) resultan inalteradas por el proceso, cumpliendo un ciclo despus de ayudar
en cada entrada y salida. En otras palabras, las permeasas parecen catalizar la entrada o la
salida de otras molculas.

La analoga entre permeasas y enzimas parece interrumpirse en un punto muy

importante; las enzimas como catalizadores verdaderos, no cambian la posicin de equilibrio
de una reaccin sino solamente la velocidad a la cual se acerca a dicho equilibrio; las
permeasas, pueden alterar mucho el equilibrio. Se podra esperar que la entrada de una
sustancia, ayudada o no, fuera posible solo mientras la concentracin externa de la sustancia
fuera mayor que la concentracin interna. Pero en realidad, muchas sustancias pueden
acumularse hasta niveles internos varias veces mayores que la concentracin en el medio
que lo rodea, an cuando las sustancias no pueden ser metabolizadas o alteradas
qumicamente de manera alguna. Este fenmeno (transporte activo) comprende el
acoplamiento (mediante permeasas) del transporte de una reaccin ms favorable, tal como
la hidrlisis de ATP, del mismo modo como una enzima puede acoplar dos reacciones.

ACTIVIDADES PRCTICAS

Materiales: Soluciones:

1. Tubos de ensayo
2.- Gradillas 1.- NaCl 10%, 0.9% y 0.2%
4.- Portaobjetos
6.- Agua destilada
7.- Microscopio
8.- Gotarios
9.- Hilo
10.-Cubreobjetos
12.-Vasos de precipitado
14.-Cultivo de levaduras
15.-Catfilo de cebolla
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I. Paso de solvente a travs de la membrana plasmtica en vegetales:

Coloque catfilos de cebolla, con unas doce horas de anticipacin, en vasos de precipitado
que contengan soluciones de NaCl en concentraciones de: 0.9% , 0.2% y 10%.
Posteriormente extraiga algunos trozos de la epidermis del catfilo y colquela sobre
portaobjetos previamente rotulados con letras A= 0.9%, B= 0.2% y C= 10 %. Luego coloque
un cubreobjeto para la observacin bajo el microscopio. Elabore un esquema de cada
preparacin.

A B C

La observacin en el microscopio muestra que en:

A:
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B:
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_______________________________________________________

C:
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II. Permeabilidad selectiva de la membrana plasmtica:

Adems del agua, hay otras sustancias que entran o salen de la clula para mantener su
vitalidad. Estas transferencias son consecuencia de la permeabilidad selectiva de la
membrana celular viva y representan una barrera que impide el libre trnsito de partculas o
solutos a travs de ella. Efecte el siguiente experimento que le entregar evidencia acerca
de la naturaleza reguladora de la membrana plasmtica viva.

Tome una gota de un cultivo de levadura y colquelo en un portaobjetos. Observe al

microscopio y vea si hay yemacin (si la hay el cultivo est vivo).

Coloque volmenes iguales de suspensin de levaduras (unos 2 ml) en dos tubos de

ensayo (A y B). Someta a ebullicin el contenido de uno de los tubos (B) por unos minutos.
Agregue varias gotas de colorante rojo congo a cada suspensin. Agite el contenido de los
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tubos y realice una preparacin colocando una gota en cada caso. Observe al microscopio y
describa lo que ocurre en ambos casos. Cmo puede explicar las diferencias?

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Elabore un esquema de cada preparacin, resaltando la ubicacin y distribucin del

colorante:

Con calor Sin calor

Cuestionario:

1.- Qu diferencia puede sealar entre difusin y osmosis?

2.- De sus observaciones realizadas en la actividad I: a) Por qu hay movimiento de

molculas de agua hacia dentro de la pipeta? Explquelo en trminos de difusin.
Qu nombre reciben las soluciones de NaCl empleadas?

3.- Cul es la presin osmtica adecuada para que una clula mantenga su forma normal?

4.- Explica la hemlisis en funcin de las propiedades de la membrana.

5.- Teniendo en cuenta lo anterior qu precauciones cree Ud. se deben tener cuando se
desea colectar sangre para transfusiones?

6.- La membrana de las clulas ms que semipermeable es selectivamente permeable.

Explique la diferencia y diga en funcin de ella, si la clula puede considerarse un
osmmetro?