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POTENCIAL DE LA MEMBRANA

EN REPOSO

1
2
3
ext
Vm = Vint - Vext

int
Neurona -70 mV

M. Cardaco -80 mV

M.Esqueltico -80 mV

M.Liso -55 mV

Glob.Rojo -11 mV
4
Metodos de medicin del potencial de reposo

- Tecnicas electrofisiologicas
Por medio de microelectrodos intracelulares
Patch Clamp

5
Pero, cual es el origen de dicha diferencia

de potencial entre los medios intracelular

y extracelular?

6
Para poder responder a esta pregunta:

Que caractersticas tiene la membrana plasmtica a


travs de la cual se forma este potencial?

Pensemos que caractersticas tiene la membrana


plasmtica respecto a su permeabilidad a los iones.

Como es la distribucin de iones a ambos lados de


la membrana?
7
A ambos de la membrana plasmtica hay una distribucin
8
asimtrica de componentes, includos iones.
La bicapa lipdica es impermeable a iones.
Hay protenas integrales que permiten el pasaje de iones.

9
En la movilizacion de los iones intervienen dos fuerzas

+
C V
+
- +
+
+
+
+
+
+

10
Obedeciendo a estas furezas .
Los iones pueden atravesar la membrana por protenas especficas, pero slo si la
membrana lo permite.. => permeabilidad selectiva

11
. u oponindose a dichas fuerzas, los iones pueden pasar
activamente por bombas, como por ejemplo la Na/K ATPasa

12
V

TRANSPORTE PASIVO
A FAVOR DE GRADIENTE

ESTOS FLUJOS SE COMPENSAN


MANTENIENDO UN ESTADO ESTACIONARIO

TRANSPORTE ACTIVO
CONTRAGRADIENTE
13
Asimetra (estacionaria) en la composicin inica

Concentracin de iones dentro y fuera de la clula (en mM):

... y entonces, como se genera el potencial de membrana?


[Na+] 10 144
[K+] 140 4
[Ca+] 0,00001 2
[Cl-] 10 144
[A-] 140 6

Pero los lquidos extra e intracelulares son soluciones electroliticas


que cumplen desde el punto de vista macroscpico con el principio
de electroneutralidad de las soluciones.
14
Para contestar a esta pregunta tenemos que evaluar
que fenmenos electricos pueden ocurrir cuando
difunde un electrolito a favor de su gradiente como
consecuencia de una distribucin asimtrica de iones.

Vamos a ver tres casos:

15
1er caso: Potencial tipo Nernst
Vi - Ve = 58 mV * log ([K]e / [K]i)
(Equilibrio!!!)

PK>0; PCl=0
- +
- +
- +
K+ K+ - +
K+
- +
- +
K+ - +
- +
- +
- +
Cl- - + Cl-
- +
- +
- +
Cl- Cl- -
-
+
+
- +
- +
i e i - +
e16
Equilibrio termodinnico en la distribucin de un soluto
no cargado cargado

+
V
+
+
+ -
+ + +
+
Ci +
+ +
Ce +
+
+
+

Ce > Ci
Ce = Ci Vi > Ve

i-e= RT ln(Ci/Ce) = 0 i-e= RT ln(Ci/Ce) + zF(Vi - Ve) = 0

17
Potencial Electroqumico: Energa libre de Gibbs (G) por mol de soluto

= RT lnC + zFV Ve Vi
i-e = RTlnCi + ZFVi RTlnCe -ZFVe C+e C+i

i-e = RT ln(Ci/Ce) + zF(Vi-Ve)


i-e = RT ln(Ci/Ce) + zF(Vi-Ve) < 0
Ci < Ce Vi < Ve
En el equilibrio ..

i-e = RT ln(Ci/Ce) + zF(Vi-Ve) = 0


Ci = Ce Vi = Ve
Ci < Ce Vi > Ve de modo que se anulen .

i-e = 0 RT ln(Ci/Ce) = - zF(Vi-Ve)


18
Potencial de equilibrio
i-e= 0 RT ln(Ci/Ce) = - zF(Vi-Ve)
- RT ln(Ci/Ce) = (Vi-Ve)
zF
Ecuacin de Nernst

Potencial en el cual el flujo neto del ion es nulo


Vi Ve = - RT/zF * ln (Ci / Ce) = RT/zF * ln (Ce / Ci)

R = 8.314 volts.coul/T.mol; F= 9.648 x 104 coul/mol; T : temp absoluta; z (n cargas y polaridad)

Temperatura 25C y ion monovalente


Vi - Vext = 58 mV * log ([C]e / [C]i)
CONVENCIN
Potencial de membrana (Vm) es medido como la diferencia de potencial entre el
interior menos el exterior (Vint -Vext). 19
Podemos imaginar lo mismo con una membrana que posee canales
permeables solamente a K+

Cl-
K+

58 mV Ce
V Vi Ve log
z 20 Ci
Existira una separacion de cargas a nivel microscpico

D
I
E
L
E
C
T
R
I
C
O

V Q/C

Q = carga neta acumulada en las placas. C = constante del capacitor o Capacitancia 21


V = diferencia de potencial entre las placas
Potencial de Injuria

22
TEORIA DE BERNSTEIN

Na+

K+ Ke
V Vi Ve 58 mV log
Ki

Cl-
23
Potencial de equilibrio

En una clula en reposo podramos pensar esto como

el gradiente qumico impulsa


un flujo hacia afuera

[K+] 140 4

(-) (+)

el flujo instala un potencial


elctrico; el potencial se opone
24
al flujo
Por que ocurre esto?

Potencial de membrana vs [K]o (en semilog) en axn


gigante de calamar. La lnea recta representa la relacin
predicha por la ecuacin de Nernst. Debido a que la
membrana es tambien permeable a sodio los puntos
experimentales se desvan de Nernst especialmente a
bajo [K]o.

25
La membrana es permeable a varios iones

(K, Na, Cl). Adems en el citosol hay un

importante contenido de aniones impermeables.

26
2do caso: Potencial tipo Donnan K1/K2 = Cl2/Cl1
(Equilibrio!!!) 58 mV [ K ]1
V V2 V1 log
Influencia de los iones no permeantes z [ K ]2
Membrana permeable al agua y a los solutos pero no al anin orgnico.

1 2
+ - + -
+ - + - + -
+ - + - + -
K+ K+ + - K+ + -
+
+
-
-
+
+
-
-
K+ K+
K+ +
+
-
-
K+ +
+
-
-
K+ +
+
-
-
+ - + - + -
+ - + - + -
+ - + - + -
+ + + -
+
+
-
-
+
+
-
-
Cl- + -
Cl-

Cl- Cl- + -
Cl- + -
+
+
-
-
Pr - +
+
-
-
Pr - +
+
-
-
Pr - +
+
-
-
27Pr -
+ - + - + -
+ -
Podemos hacerlo equivaler a una clula
donde no funcionen las bombas y el
+ -
+ -
sistema tienda al equilibrio
+ -
K+
+ -
K+
+ - presin osmtica: I > E
+ -
+ -
+ - KE/KI = ClI/ClE
+ -
Cl- + -
Cl-
[ K ]e
+ - V Vi Ve 58 mV log
+ - [ K ]i
+ -
+ - Pr -
+ -
+ - V < 0 y Osm (lisis celular)
E I
28
Pero el potencial tipo Donnan slo explica
una pequea fraccin del potencial de
membrana.

Donnan predominara en una clula sin


bombas que distribuyan los iones fuera del
equilibrio. Por ejemplo con la Na/K ATPasa
inhibida. Lleva a la lisis celular.

En una clula viva la distribucin inica


entre ambos lados de la membrana
plasmtica NO est en Equilibrio!!! 29
3er caso: Potencial de difusin (No Equilibrio)

C + C+
(mayor movilidad)

A-
A-
(menor movilidad)

C+ C+

-
- +
A-
A
30
Este sistema NO est en equilibrio

El V perdurar hasta que se homogenice


el sistema (llegando al equilibrio)

Como hacer para que este tipo de potencial


se mantenga en el tiempo?

Rta: necesitamos trabajo externo !!!

31
Podemos imaginar un fenmeno similar si tenemos
dos compartimientos divididos por una membrana
con permeabilidades diferentes para cada in.

+
+
C+

C+
+
A-
+
A-
+
+
W que mantiene
C+ y A- +
Estado Estacionario
+
+ 32
AHORA TRATEMOS DE
APROXIMARNOS A LO QUE
OCURRE EN UNA CELULA

33
+ -
+ -
La + al K- es la que domina
Permeabilidad
+ -
el Potencial
+ de -Membrana
+ -

K+ = 2.5 mM K+= 140 mM


+ -
+
Na = 120 mM Na+ = 10 mM
+ -
+ -
Cl- Cl-
+ -
Prot-
+ -
+ -
Extra + - Intra34
El estado estacionario es mantenido por la bomba Na/K
35
Resumiendo:

para el establecimiento del potencial de reposo necesitamos:

1) una distribucin inica fuera del equilibrio que servir de


fuerza impulsora para el proceso de difusin (mantenida
en estado estacionario por un sistema de bombeo
contragradiente).

2) permeabilidades diferentes para cada uno de esos iones.

El potencial es definido fundamentalmente por el in ms


permeable: en reposo el K.
36
Estos conceptos se resumen en la ecuacin de Goldman,
Hodgkin y Katz
RT PK .[ K ]e PNa . [ Na]e PCl . [Cl ]i
Vm= Vi Ve ln
F PK .[ K ]i PNa .[ Na]i PCl .[Cl ]e

En reposo: PK= 1; PNa= 0.04; PCl= 0.045

Lo que se hace es relativizar las P absolutas respecto de la del K


[K+]o + (PNa/PK) [Na+]o + (PCl/PK) l [Cl-]i
Vm = 58 log =
[K+]i + (PNa/PK) [Na+]i + (PCl/PK) [Cl-]o

En las clulas en las que el Cl- est en equilibrio


no influye en el potencial de membrana, por lo tanto:
RT PK .[ K ]e PNa . [ Na]e
Vm= Vi Ve ln
F PK .[ K ]i PNa .[ Na]i 37
Si asumisemos que PNa = P Cl = 0, entonces tenemos Nernst
para K (Bernstein)
RT PK .[ K ]e PNa . [ Na]e PCl . [Cl ]i
Vi Ve ln
F PK .[ K ]i PNa .[ Na]i PCl .[Cl ]e

Por lo tanto la desviacin del comportamiento nernstiano es


generada por la existencia de permeabilidades a otros iones.

En la realidad tenemos situaciones intermedias en donde


prevalece un in (en reposo: K+).

RT PK .[ K ]e PNa . [ Na]e PCl . [Cl ]i


Vi Ve ln
F PK .[ K ]i PNa .[ Na]i PCl .[Cl ]e

38
Ante un Pot. Accin: PNa ~ 20 PK
39
Cambios en el potencial de membrana debido
a diferentes soluciones extracelulares.
RT PK .[ K ]e PNa . [ Na]e PCl . [Cl ]i
Vi Ve ln
F PK .[ K ]i PNa .[ Na]i PCl .[Cl ]e

Normal : K=2.5; Test: K=10; osmolaridad y fuerza ionica constante


40
ANALOGO ELECTRICO

41
Tenemos:

Una batera (representada por los gradientes inicos)


Una resistencia (representada por la permisividad que tiene
la membrana al paso de los iones).

Un capacitor (representado por la bicapa lipdica) 42


43
En realidad la membrana puede ser permeable a muchos iones ............

Intracelular

gK gNa

Vm
- +

+ -

Extracelular

........ y dependiendo de las circunstancias una conductancia prevalecer sobre


44
otra
(ejemplo: gK en reposo)
Y como se pueden cuantificar las corrientes
que pasan por las conductancias (gK y gNa) ?

?
Segn la ley de Ohm, para calcular una corriente debemos conocer:

1. La fueza impulsora que impulsa la corriente (V)

2. La resistencia o conductancia por la que deben pasar los iones.

Como es la fuerza impulsora expresada en unidades de potencial en


un sistema electroqumico como la clula?
45
Pese a que la mayora de los iones estn lejos del equilibrio termodinmico, se puede
calcular el potencial terico que necesitaramos para que cada in se encuentre en
equilibrio.
58 mV [ I ]e
V Vi Ve log
z [ I ]i
Extracel(mM) Intracel(mM) V eq (mV)

Na+ 145 15 +60


Cl- 100 5 -80 *
K+ 4.5 150 -94
Ca2+ 1.8 0.0001 +180

*Consideremos que se distribuye pasivamente y por lo tanto se encuentra


en equilibrio termodinmico.

Cuanto ms lejos se encuentre el in del equilibrio, mayor ser la


tendencia que tenga de entrar o salir de la clula.

Fuerza impulsora que moviliza al in i = Vm Vi


46
Vm: potencial de membrana; Vi: potencial de equilibrio de i
Fuerza electromotriz (driving force)
En una clula en reposo

60 mV ENa

-80 mV Vm ECl

-94 mV EK

Ii = gi (Vm - Ei) 47
Corrientes Inicas

Ii = gi (Vm - Ei)
Los iones se mueven independientemente unos de otros

IK = gK (Vm - EK)
INa = gNa (Vm - ENa)
ICl = gCl (Vm - ECl)

En Estado Estacionario I = 0

IK + INa + ICl = 0

48
CONVENCION

Corriente de membrana (I) es positiva cuando los iones


positivos (cationes) fluyen desde el interior al exterior de la
clula.

Para cationes,

la corriente saliente es positiva y la entrante es negativa

+ +

Para aniones al revs.


49
Planteando ahora la ecuacin
Para el Na: Vm-VNa = -80 mV (+60 mV) = - 140 mV
INa = GNa (Vm-VNa) < 0
Por lo tanto tiende a entrar

Para el K: Vm-VK = -80 mV (-94 mV) = + 14 mV


IK = GK (Vm-VK) > 0
Por lo tanto tiende a salir

Para el Ca: Vm-VCa = -80 mV (+150 mV) = - 230 mV


ICa = GCa (Vm-VCa) < 0
Por lo tanto tiende a entrar

50
Fuerza electromotriz
(driving force)

Ii = -gi (Vm - Ei)

50 mV ENa
Vm

-75 mV
ECl
-90 mV
EK

En una clula que ha sido excitada y ha aumentado su PNa 51


PROPIEDADES ELECTRICAS PASIVAS

DE LA MEMBRANA PLASMATICA

52
Constante de Tiempo

53
Como recordaremos la membrana plasmtica acta
como un capacitor.

Entonces:

Que pasa cuando aplicamos un pulso cuadrado


de corriente a travs de una membrana celular?

?
54
I

Q ___ ___

V
++ + + + +

V Q/C

Vt = V (1 e-t/) Vt = V e-t/
V
V = CONSTANTE TEMPORAL

TIEMPO
55
Circuito RC V
V (t) = Er + I0 * R (1-e-t/RC)

I
er
V Vmax = Er + I0R

= RC 0.64 Vmax
e-1 = 0.37 I0 R
1- e-1 = 0.64
Er
t

constante de tiempo
56
Tpicas en neuronas y clulas musculares: 1-20 ms
Las neuronas como cable
QUE PASA SI APLICAMOS UNA CORRIENTE EN UN SECTOR DE UN
AXN Y MEDIMOS LOS CAMBIOS DE POTENCIAL A UNA DADA
DISTANCIA?

LA CONSTANTE DE TIEMPO SOLA NO NOS EXPLICAR LO QUE


OCURRE

HAY UNA DEPENDENCIA CON LA DISTANCIA

57
Conduccin pasiva o electrotnica

(SUBUMBRAL)

(del orden de milimetros)

58
Por qu la conduccin electrotnica no alcanza grandes
distancias? ...tratemos de imaginarnos un axn como un cable
coaxil
Conductor externo ~ medio extracelular
Conductor Interno ~ medio intracelular

aislante

cond ext

cond int

Pero para un axn la resistencia del medio intracelular (axoplasma) es muy alta, y la
membrana celular es un aislante pobre
rm: resistencia de la membrana
rm Ifuga Ifuga Ifuga (por unidad de longitud)
ri: resistencia del axoplasma
ri (por unidad de longitud)
59
Un cable coaxil puede transmitir una diferencia de
potencial por una distancia considerable porque
posee conductores metlicos y la resistencia entre
ellos es muy alta.

pero no es el caso de un axn.

Las neuronas transmiten seales elctricas a lo largo


de sus proyecciones, pero la amplitud de la seal
decae a medida que avanza en el espacio. 60
Una inyeccin de corriente aplicada en un lugar del axn generar
una diferencia de potencial que no llegar muy lejos ya que se ir
disipando como corriente elctrica a travs de la membrana.

El voltaje que tenemos en diferentes porciones del axn entre el medio


intra y extracelular se puede calcular por la ley de Ohm: V = I x R61
El potencial decae segn:
Vx=Vo e-x/
siendo la constante espacial (1-3 mm).

62
- disminuir con la resistencia especfica del axoplasma
(por lo tanto aumentar con el radio del axn)

- aumentar con la resistencia de membrana

rm: resistencia de la membrana


rm (por unidad de longitud)
ri: resistencia del axoplasma
ri (por unidad de longitud)

es prop. (rm/ri)1/2
63
Estrategias de los invertebrados y de los vertebrados
para mejorar propagacin

Axon Gigante de Calamar


0.8 mm ( radio axon y ri)

Nervio con Axones Mielinizados


de Mamfero ( rm)

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