"Ao de la Diversificacin Productiva y del Fortalecimiento de la Educacin"

Instituto de Educacin Superior Tecnolgico Privado Daniel Alcides

Carrin

INFORME DE LABORATORIO N1
MATERIALES, BIOSEGURIDAD EN EL LABORATORIO
MICROBIOLOGICO, LIMPIEZA Y DESINFECCION

Carrera Profesional: Tcnico en Nutricin y

Diettica

Nombre del Curso: Microbiologa

Docente: Dr. Hobuel Venegas Romero

Integrante: Martel Vilca, Esther Amalia

2015
 INTRODUCCION

En microbiologa es necesario e importante el poder reconocer los

materiales de laboratorio y su uso adecuado. Tambin es importante para
poder tener conocimiento de todas las medidas de bioseguridad que se
debe realizar en todas las prcticas.
A travs de este trabajo realizado, se da a conocer informacin elemental
sobre lo aprendido durante la prctica de laboratorio as como tambin
profundizamos y damos explicaciones sencillas y de gran importancia
sobre cada proceso que se lleva a cabo en el laboratorio de microbiologa
con cada de uno de los instrumentos y equipos.

Conceptos Breves:

*Bioseguridad: es la aplicacin de conocimientos, tcnicas y

equipamientos para prevenir a personas, laboratorios, reas hospitalarias
y medio ambiente de la exposicin a agentes potencialmente infecciosos o
considerados de riesgo biolgico.

*Limpieza: Es un proceso en el que la suciedad se disuelve o suspende,

generalmente en agua ayudada de detergentes.

*Materiales: se est haciendo referencia por lo general al conjunto de

elementos que son necesarios para actividades o tareas especficas.

*Esterilizacin: proceso validado por medio del cual se obtiene un

producto libre de microorganismos viables.

*Desinfeccin: Eliminacin de los grmenes que infectan o que pueden

provocar una infeccin en un cuerpo o un lugar.
 MARCO TEORICO
INSTRUMENTOS FORMA FUNCION IMAGEN

Matraz de un frasco
transparente de
forma es til para
realizar mezclas por
Enlermey forma cnica con agitacin y para la
una abertura en el evaporacin
er extremo angosto, controlada de
generalmente lquidos; su abertura
estrecha permite la
prolongado con un
utilizacin de
cuello cilndrico,
tapones
suele incluir algunas
marcas.

Placas Recipiente redondo,

de cristal o plstico,
Cultivo de bacterias
y otros
petri con una cubierta de
la misma forma que
microorganismos,
solindose cubrir el
la placa, pero algo fondo con distintos
ms grande de medios de cultivo
dimetro, para que segn el
se pueda colocar microorganismo que
encima y cerrar el se quiera cultivar.
recipiente.
Cmara un instrumento
utilizado en medicina
Para contar las
clulas se observa el
de y biologa para
realizar el recuento
retculo al
microscopio con el
neubauer de clulas en un aumento adecuado y
medio lquido se cuentan las
clulas

Baos Son recipientes que

contienen agua y un
Se utilizan para
atemperar medios
termostt sistema de de cultivo o incluso
regulacin de la para incubar cultivos
icos: temperatura. de microorganismos.
Probeta Tubo generalmente
transparente de unos
Generalmente miden
volmenes de 25 50
centmetros de ml, pero existen
dimetro, y tiene una probetas de distintos
indicando distintos tamaos; incluso
volmenes . En la algunas que pueden
parte inferior est medir un volumen
cerrado y posee una hasta de 2000 ml.
base que sirve de
apoyo, mientras que la
superior est abierta y
suele tener un pico
(permite verter el
lquido medido).

Microscopi Basado en lentes

pticos
.Se utilizan
especialmente para
o ptico examinar objetos
transparentes, o
cortados en lminas
tan finas que se
transparentan.

-Estufa de Es una cmara de

temperatura
Se utiliza para facilitar
el desarrollo de los
incubacin controlada para cultivo microorganismos a su
de microorganismos. temperatura ptima de
crecimiento
(generalmente 35-
37).

Recipiente de vidrio
Jarras de en forma de baso
que tiene un reloj
Se usan
para conseguir una
anaerobios : en la parte superior
atmsfera libre de
oxgeno para el cultivo
de microorganismos
anaerobios.
Tubos de Un pequeo tubo Para calentar
de vidrio con una durante
ensayo punta abierta y intervalos cortos
la otra cerrado y a llama directa
redondeado, que puede
se utiliza en los sostenerse el
laboratorios para tubo con la
contener mano mediante
pequeas su parte
muestras superior.
lquidas.
Pipetas carecer de depsito y medir volmenes de
se utilizan lquidos con gran
Automaticas principalmente para precisin y exactitud.
medir o transvasar
pequeos volmenes
de lquido de un
recipiente a otro con
gran exactitud.

Vasos de Para preparar o

calentar sustancias y
Son cilndricos con un
precipitado fondo plano; se les
traspasar lquidos.

s encuentra de varias
capacidades, desde
1 ml hasta de
varios litros.
Normalmente son
de vidrio, de metal o
de un plstico en
especial
 Se utilizan para
Asas de Pueden ser metlicas
sembrar.
o de plstico, curvas o
siembra: rectas (para la siembra
por picadura).

Contador Es un aparato que

mediante la
nos permite observar
con mayor nitidez las
de colonias iluminacin de la placa colonias y por tanto
y una lupa facilita su recuento.

Bao Mara Conferir temperatura

uniforme a una
Implica el
calentamiento
sustancia lquida o indirecto, por
slida o para conveccin trmica
calentarla lentamente, del medio agua.
sumergiendo el
recipiente que la
contiene en otro mayor
con agua que se lleva
a o est en ebullicin.

Gradillas ste se encuentra

hecho de madera,
Funcin es facilitar el
manejo de los tubos
plstico o metal; pero de ensayo.
las ms comunes son Normalmente es
las de madera utilizado para sostener
y almacenar este
material.
Pipetas Formado por un tubo
hueco transparente permite medir
Graduadas que termina en una de alcuotas de lquido
sus puntas de forma con bastante
cnica, y tiene una precisin.
graduacin (una serie
de marcas grabadas)
indicando distintos
volmenes.

Laminas son lminas de vidrio

de cerca de 1 mm. de
Facilita el examen de
lquidos.
portaobjet espesor sobre las
cuales los objetos
os pueden ser
observados
microscpicamente
bajo una cubierta de
vidrio.

Frigorficos Cmara refrigerada

para conservar
Se utilizan para
conservar tanto
reactivos, materiales (medios de
microorganismo, etc. cultivo, reactivos)
como
microorganismos.
Generalmente estn a
una temperatura fija
de 4C.
Centrifuga Aparato que aplica
sobre los tubos una
permite la separacin
de los distintos
fuerza centrfuga lo componentes de la
muestra mediante la
precipitacin en el
fondo del tubo de las
partculas en
suspensin.

Horno de Debido a su poca

capacidad de
Acta principalmente
Pasteur penetracin se usa para
esterilizar vidrio desnaturalizando las
protenas y
secundariamente
oxidando los
compuestos celulares.

2-Bioseguridad y normas en el laboratorio de

microbiologia
Bioseguridad:
Es el conjunto de medidas
preventivas que tienen como objetivo
proteger la salud y la seguridad del
personal, de los pacientes y de la
comunidad frente a diferentes riesgos
producidos por agentes biolgicos,
fsicos, qumicos y mecnicos.

Normas de Bioseguridad
1. Mantenga ventilado el laboratorio.
2. Identifique la ubicacin de extintor, botiquines, alarmas
contra incendios, duchas para ojos, zonas de seguridad y
salidas de emergencia.
3. Nunca absorba o pipetee lquidos con la boca.
4. No huela directamente los reactivos.
5. Lea detenidamente la etiquetas de peligrosidad de los
reactivos.
6. Si trabaja con lquidos inflamables no coloque cerca una
fuente de calor.
7. Cuando caliente un tubo de ensayo, no dirija la boca del tubo
hacia una persona o a si misma.
8. En caso de producirse fuego use el extintor.
9. En prcticas con material biolgico, las superficies de trabajo
deben limpiarse con solucin desinfectante al inicio y al final de
la prctica.
10. Coloque el material punzocortante usado, en los recipientes
nunca vuelva a colocar el protector o funda a jeringas, agujas o
lancetas.

3-limpieza y desinfeccin durante la preparacin de

alimentos

En laboratorio vimos el proceso de limpieza de la superficie del rea

donde bamos a trabajar, desinfectndolo para su uso.
Y relacionndolo con nuestra carrera:
Para qu es importante la limpieza y la desinfeccin durante la
preparacin de un alimento?
*Minimiza los riesgos de
contaminacin de los alimentos
durante las etapas de proceso.
*Aumenta la vida til y eciencia del
equipo.
*Reduce la infestacin por plagas.
*Extiende la vida de til del
producto.
*Reduce el riesgo de presencia de
microorganismos causantes de
enfermedades alimentarias.
*Crea buenas costumbres de limpieza en el personal.
*Es un requisito de las Buenas Prcticas de Manufactura.
*Se requieren para cumplir con el sistema de control de peligros/
HACCP.
*Mejora la imagen del local frente a la clientela.
*Aumenta la confianza de la persona consumidora.
*Es lo ms sano para todos (as)!

4-Metodo de esterilizacion ( concepto y metodos)

Comprende todos los procedimientos fsicos, mecnicos y preferentemente
qumicos, que se emplean para destruir grmenes patgenos. A travs de esta, los
materiales quirrgicos y la piel del enfermo alcanzan un estado de desinfeccin que
evita la contaminacin operatoria

Metodos quimicos:
Estos mtodos provocan la perdida de viabilidad de los microorganismos.

Con oxido de etileno: Es un agente alquilante que se une a compuestos con

hidrgenos lbiles como los que tienen grupos carboxilos, amino, sulfhidrilos,
hidroxilos, etc.
Es utilizado en la esterilizacin gaseosa, generalmente en la industria farmacutica.
Destruye todos los microorganismos incluso virus. Sirve para esterilizar material
termosensibles como el descartable (goma, plastico, papel, etc.), equipos
electrnicos, bombas cardiorrespiratorias, metal, etc..

Con aldehdos:Son agentes alquilantes que actan sobre las protenas,

provocando una modificacin irreversible en enzimas e inhiben la actividad
enzimtica. Estos compuestos destruyen las esporas.
Glutaraldehdo: Consiste en preparar una solucin alcalina al 2% y sumergir el
material a esterilizar de 20 a 30 minutos, y luego un enjuague de 10 minutos.
Este mtodo tiene la ventaja de ser rpido y ser el nico esterilizante efectivo fro.
Puede esterilizar plstico, goma, vidrio, metal, etc.

Formaldehdo:Se utilizan las pastillas de paraformaldehido, las cuales pueden

disponerse en el fondo de una caja envueltas en gasa o algodn, que despus
pueden ser expuesta al calor para un rpida esterilizacin (accin del gas
formaldehdo).
Las pastillas de formalina a temperatura ambiente esterilizan en 36 hs.

Metodos fisicos:
Calor
La utilizacin de este mtodo y su eficacia depende de dos factores: el tiempo de
exposicin y la temperatura.
Todos los microorganismos son susceptibles, en distinto grado, a la accin del calor.
El calor provoca desnaturalizacin de protenas, fusin y desorganizacin de las
membranas y/o procesos oxidantes irreversibles en los microorganismos.

Calor Hmedo:
El calor hmedo produce desnaturalizacin y coagulacin de protenas. Estos
efectos se debe principalmente a dos razones:
El agua es una especie qumica muy reactiva y muchas estructuras biolgicas son
producidas por reacciones que eliminan agua.
El vapor de agua posee un coeficiente de transferencia de calor mucho ms elevado
que el aire.

Autoclave
Se realiza la esterilizacin por el vapor de agua a presin. El modelo ms usado es
el de Chamberland.
Equipo:
Consta de una caldera de cobre, sostenida por una camisa externa metlica, que en
la parte inferior recibe calor por combustin de gas o por una resistencia elctrica,
esta se cierra en la parte superior por una tapa de bronce..
Funcionamiento:
Se coloca agua en la caldera, procurando que su nivel no alcance a los objetos que
se disponen sobre una rejilla de metal. Se cierra asegurando la tapa, sin ajustar los
bulones y se da calor, dejando abierta la vlvula de escape hasta que todo el aire se
desaloje y comience la salid9de vapor en forma de chorro continuo y abundante.
Filtracin
Se usan membranas filtrantes con poros de un tamao determinado. El tamao del
poro depender del uso al que se va a someter la muestra. Los filtros que se utilizan
no retienen virus ni micoplasmas, estos ltimos estn en el lmite de separacin
segn el dimetro de poro que se utilice.
La filtracin se utiliza para emulsiones oleosas o soluciones termolbiles. Su usa
para esterilizar aceites, algunos tipos de pomadas, soluciones oftlmicas, soluciones
intravenosas, drogas diagnsticas, radiofrmacos, medios para cultivos celulares, y
soluciones de antibiticos y vitaminas.
Existen tres tipos bsicos de filtros:

Filtros profundos o Filtros de profundidad:

Consisten de un material fibroso o granular prensado, plegado, activado, o pegado
dentro de los canales de flujo.
Membranas filtrantes:
Tienen una estructura continua, y la retencin se debe principalmente al tamao de
la partcula..

Filtros de huella de nucleacin (Nucleoporo):

Son pelculas muy delgadas de policarbonato que son perforadas por un tratamiento
conjunto con radiacin y sustancias qumicas. Funcionan como tamices, evitando el
paso de toda partcula con un tamao mayor al del poro.

Agentes esterelizantes:
Antispticos Desinfectantes y/o Esterilizantes
-Alcoholes,organo mercuriales -Cloro y Compuestos clorados
-Iodo, colorantes -Aldehdos, Compuestos Fenlicos
-Agentes Cationicos -Oxido de Etileno, Acidos y Alcalis

OBJETIVOS
Conocer la importancia de la higiene, limpieza y desinfeccin durante la
preparacin de productos alimenticios

METODO
Preparacin de materiales para el uso en microbiologa aplicada a la
nutricin.
 MATERIALES Y EQUIPOS:
*Materiales e indumentaria utilizada por el alumno:
-guardapolvo
-zapatos cerrados
-Mascarilla
-gorro cobertor
-guantes descartables

*Equipos y Materiales
-pipeta graduada de 5ml
-placa Petri 15x100 trs

*Reactivos :
.pisceta con desinfectante

*Materiales externos
-pabilo
-papel kraft

PROCEDIMIENTO:

A. Limpieza y desinfeccin de superficies:

-Enseara los alumnos el procedimiento de limpieza en las superficies de trabajo del
area de microbiologia. Ademas el uso de los desinfectantes mas comunes.
Relacionar con la contaminacion microbiana durante la preparacion de alimentos.
Uso del desinfectante.

B. Preparacin de los materiales para esterilizarlos:

-Preparar los materiales usados en microbiologa, desde el lavado secado,
acondicionamiento del material para la esterilizacin, de acuerdo al tipo de material y
esterilizacin en calor seco y hmedo.

RECOMENDACIONES:

No debe trabajar nunca una persona sola en el laboratorio y muy especialmente en

el caso de realizarlo fuera de horas habituales, por la noche o realizando
operaciones con riesgo.
Cuando se realicen operaciones con riesgo, las personas que no intervengan en
ellas deben estar perfectamente informadas de las mismas.
Tambin debe comprobarse la ventilacin general del laboratorio (trabajo en
depresin, renovacin suficiente, etc.).
Deben efectuarse a menudo inventarios del almacn para controlar el stock
dereactivos y su envejecimiento. Los reactivos almacenados en el laboratorio deben
preservarse del sol, no guardarse en estanteras altas, cuidar su etiquetado,
mantenerlos en las cantidades imprescindibles, etc.
Nunca debe estar permitido fumar ni comer en el laboratorio.
Debe regularse adecuadamente la eliminacin de residuos. Tener especial cuidado
en no eliminar por el desage, aunque sea en pequeas cantidades productos tales
como: los que reaccionan violentamente con el agua, Muy txicos (incluyendo
metales pesados), inflamables,pestilentes, lacrimgenos, no biodegradables y
cancergenos.

REFERENCIAS
-Curso de manipulacin de alimentos (INA)- Capitulo 7 : limpieza y
desinfeccin
-Armas, Carlos (1996). ciencias qumica-conceptos Fundamentales`` 1a
Edicin. , Editorial Libertad. Trujillo-Per.
-UNPRG (2008). Anatoma, Biologa y Qumica`` 4a Edicin. , Editorial
Impresiones Chiclayo-Per.

http://es.wikipedia.org/wiki/Placa_de_Petri
http://www.femto.es/instrumentos/Balanza-digital.html

http://blog.acequilabs.com/incubadora-de-laboratorio-usos-y-funcionamiento

http://www.marienfeld-superior.com/2007/espanol/portaobjetos.htm

http://www.plagasydesinfeccion.com/desinfeccion/generador-de-ozono-para-
desinfeccion.html

http://es.wikipedia.org/wiki/Autoclave_de_laboratorio

http://britanialab.com.ar/esp/productos/b02/maconkeyagar.htm

IMGENES
 MATERIALES UTILIZADOS EN LABORATORIO

MATERIALES DADOS POR EL MISMO LABORATORIO

 PRODUCTO FINAL

MATERALES Y PROCEDIMIENTOS CONCLUIDOS