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UNIVERSIDAD DEL ATLNTICO

FACULTAD DE QUMICA Y FARMACIA

ASIGNATURA: BIOQUMICA-LABORATORIO- SEMESTRE III


Profesor: Dra. Carmia L. Vargas Z.

PRACTIVA 1. TALLER TEORICO PRCTICO DE BIOSEGURIDAD

SEMINARIO TALLER BIOSEGURIDAD: SALUD OCUPACIONAL Y SEGURIDAD

Definicin de salud ocupacional y seguridad


Historia
Objetivo.
Falla de seguridad en el laboratorio,
Accidentes de trabajo o enfermedades profesionales: Causas
Antecedentes Histricos de la salud ocupacional y seguridad en lugares de trabajo y en
laboratorio,
Qu periodos de la historia de la bioseguridad se distinguen
Marco Legal en Colombia, acuerdos o leyes sobre la seguridad en los trabajos
Agentes de riesgos: Definicin, causas, clasificacin
Hablar de cada uno de los agentes de riesgos de seguridad en el laboratorio o del trabajo
Qumicos: definicin, clasificacin, vas de absorcin, forma de actuacin.
Biolgicos: definicin, clasificacin, vas de absorcin, forma de actuacin
Fsicos: definicin, clasificacin, vas de absorcin, forma de actuacin
Ergonmicos: definicin, clasificacin, forma de actuacin, consecuencias de mal
elaboracin o uso.
Sicosociales: definicin, clasificacin, vas de absorcin, forma de actuacin
Normas generales de seguridad en el laboratorio: segn la Organizacin Mundial de la
salud.
PRACTICA 2. ESPECTROFOTOMETRIA
REACTIVOS:
- Solucin rojo fenol o azul de metileno o de otra solucin coloreada, agua destilada.
MATERIALES (por grupo): 7 tubos de ensayos de aprox. 15ml, pipetas pasteur plsticas,
espectrofotmetro, 1-gradilla
Otros materiales: 2 beakers de 250 ml, 1 litro de agua destilada, 1- frasco lavador

PROCEDIMIENTO:
A)- Determinar el espectro de absorcin del rojo fenol:
1- Colocar 2 ml. de la solucin diluida de rojo fenol o azul de metileno o de otra solucin coloreada en la cubeta
y medir la absorbancia en las siguientes longitudes de onda 415, 445, 460, 490, 520, 535, 550, 580, 610, 640
nm, previamente el equipo calibrado con agua destilada. Luego haga un grfico de las lecturas de las absorbancia
vs. longitud de onda y determine la longitud de onda de mayor absorcin.

Tambin se puede realizar directamente en el espectrofotmetro que contiene esa opcin

B) Construccin de una curva patrn:


1- Seguir el protocolo abajo utilizando la solucin de rojo fenol o de azul de metileno uo otra solucin

TUBO SOL. ROJO FENOL 0,01 mg/ml Agua destilada Absorvancia Concentracin
(ml) (------ nm)
B - 5,0
1 1,0 4,0
2 2,0 3,0
3 3,0 2,0
4 4,0 1,0
5 5,0 -

2- Leer las absorbencias de cada tubo en la longitud de onda seleccionada, utilizando el agua destilada
como blanco de reaccin. Calibrar antes el espectrofotmetro.
3- Hacer el grfico absorbancia Vs. Concentracin de la solucin utilizada y analizar los resultados
4- Determinacin del factor de la curva

C) Determinacin de la concentracin de una solucin problema o muestra


1- A una solucin problema o muestra dada por la profesora determine la absorbancia en la longitud de
onda seleccionada y determine la concentracin de la muestra empleando el factor de la curva:

Absorbancia de la muestra X factor de la curva = concentracin de la solucin problema o muestra.

GUIA DEL SEMINARIO INVESTIGATIVO

-Definicin de espectrofotometra, radiacin electromagntica, espectro electromagntico, clases de


espectrofotometra, definicin, caractersticas, usos, funciones de cada una. Espectrofotmetro, definicin,
Componentes de un espectrotmetro (fotocolormetro), definicin, funciones y usos de cada componente,
definicin de absorbancia y transmitancia, Ley de Lamber Beer, en que se basaba Lamber y Beer.
Determinacin de un espectro de absorcin, determinacin de una curva patrn, determinacin de la
concentracin de una solucin problema.
Procedimiento para realizar una curva patrn, interpretacin de la misma,
Cmo se determina una concentracin de una solucin desconocida?
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PRACTICA 3. EXTRACCION DE SANGRE VENOSA Y SEPARACIN DE SUERO Y PLASMA

REACTIVOS:
- Alcohol antisptico; -Solucin de EDTA 10%;
MATERIALES (por grupo)
2-Jeringas desechables, torniquete, 1 tubos de ensayos para colecta de sangre de tapa roja de aprox. 5
ml y uno de tapa color violeta, 2 tubos de ensayos medianos o grandes de aprox. 10 ml, pipetas pasteur
plsticas, algodn, torniquete, centrfuga, 1 gradilla
Otros materiales: 2 beakers de 250 ml, 1 litro de agua destilada, 1- frasco lavador

PROCEDIMIENTO

1- Extraer aproximadamente 5 ml sangre de la vena del brazo por medio de la jeringa, quitar la
aguja y colocar la mitad de la sangre extrada cuidadosamente en el tubo de colecta de sangre de
tapa roja y la otra mitad en el tubo de tapa color violeta que contiene 50 microlitros (L) de
EDTA, homogenizar.
2- Homogenizar cuidadosamente el tubo con anticoagulante.
3- Dejar el tubo sin anticoagulante en reposo esperar formarse el coagulo despus
4- Centrifugar los tubos por 5 minutos, separar el suero y el plasma respectivamente en tubos de
ensayos por separado, anotar las observaciones

GUIA PARA EL SEMINARIO INVESTIGATIVO


Qu es la sangre?, funciones, constitucin, composicin qumica, estructura, funciones de cada
componente
Factores de coagulacin, mecanismo de coagulacin, va intrseca y va extrnseca
Tiempo de coagulacin,
Anticoagulantes, definicin, clases, funciones, usos, los anticoagulantes ms usados para
determinaciones bioqumicas en plasma.
Diferencia entre suero y plasma
Mecanismo de extraccin de sangre venosa. Que otros tipos de extracciones de sangre hay?
Cuidados que se deben tener durante la extraccin de sangre.
Procedimiento para obtener el suero y el plasma de una muestra de sangre
Problemas relacionados con la extraccin de la sangre en pacientes especializados.
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PRACTICA 4. DETERMINACION DEL HEMATCRITO Y HEMOGLOBINA

REACTIVOS:
- Alcohol antisptico; -solucin patrn de hemoglobina; reactivo de trabajo para determinar
hemoglobina ( Brabkin)
MATERIALES (por grupo)
2-Jeringas desechables, torniquete, tubo de ensayo para colecta de sangre con tapa violeta, 2 tubos de
ensayos medianos o grandes, pipetas pasteur plsticas, algodn, torniquete, pedazo de alambre delgado
de aprox. 15 cm. Hemocentrifuga, espectrofotmetro., 1 gradilla
Otros materiales: 2 beakers de 250 ml, 1 litro de agua destilada, 1- frasco lavador

PROCEDIMIENTO
1- Extraer 3 ml. sangre de la vena del brazo por medio de la jeringa, quitar la aguja y colocarla
cuidadosamente en el tubo colector de sangre de tapa violeta conteniendo EDTA, homogenizar.
2- Llenar homogneamente 2 capilares, limpiar la superficie externa del capilar con papel
higinico y sellar los capilares con plastilina blanca.
3- Homogenizar la sangre y alcuotar por duplicado 10 microlitros (L) de sangre total, colocar
en tubos de ensayos limpio y seco separadamente.

DETERMINACIN DEL HEMATCRITO


1- Centrifugar los capilares en la hemocentrifuga manteniendo el equilibrio.
2- Medir la longitud del plasma y de los glbulos rojos
3- Calcular el % del hematcrito.
DETERMINACION DE LA HEMOGLOBINA
1- Alcuotar tambin, 10L de la solucin patrn de hemoglobina en un tubo de ensayo limpio y
seco.
2- Aadir a las alcuotas (10L) de sangre total y patrn, 2,5 ml de reactivo de trabajo,
homogenizar bien y reposar por 5 minutos.
3- Leer absorbancia en todos los tubos a 540nm, calibrando el equipo con el blanco reactivo
(reactivo de color).
4- Calcular la concentracin de hemoglobina en todas las muestras. Discuta todos los resultados.

GUIA PARA EL SEMINARIO INVESTIGATIVO


Que es la hemoglobina?, estructura, funciones, propiedades fisicoqumicas, mecanismo de accin, clases de
hemoglobina, Importancia clnica de la determinacin de hemoglobina, valores normales segn la edad y sexo.
Mtodos utilizados para determinacin de hemoglobina
Qu es el hematocrito?, importancia clnica de la determinacin del hematocrito y de la hemoglobina,
procedimiento de determinacin, qu contiene el reactivo de trabajo para la determinacin de hemoglobina,
fundamento del procedimiento, valores normales de los valores de hemoglobina en hombres, mujeres y nios.
Valores normales del hematocrito en hombres, mujeres y nios. Enfermedades relacionadas con las alteraciones
tanto altos como bajos de los valores de hemoglobina, as como del hematocrito, hablar de cada alteracin o
enfermedad.
Con respecto a la anemia: Definicin, clasificacin, causa de cada clase, sntomas, diagnstico y tratamiento,
consecuencias, profundizar en la anemia por deficiencia de hierro (ferropriva).
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PRACTICA 5. DETERMINACION DE ENZIMAS EN SUERO


REACTIVOS:
- Alcohol antisptico; - reactivo de trabajo presente en el kit para la determinacin de la enzima

MATERIALES (por grupo)


2-Jeringas desechables, torniquete, 1- tubo de ensayo colector de sangre con tapa roja, 2 tubos de
ensayos medianos o grandes, pipetas pasteur plsticas, algodn, torniquete, cronmetro,
espectrofotmetro, 1 gradilla
Otros materiales: 2 beakers de 250 ml, 1 litro de agua destilada, 1- frasco lavador

PROCEDIMIENTO

1- Extraer 3 ml sangre de la vena del brazo por medio de la jeringa, quitar la aguja y colocar en el
tubo colector de sangre tapa roja, reposar para coagular-
2- Centrifugar los tubos por 5 minutos,
3- Separar cuidadosamente el suero
4- Tener cuidado tener todos los reactivos de trabajo a temperatura ambiente
5- Pipetar en una cubeta 2 ml del reactivo de trabajo y 100 l de suero, mezclar e insertar la cubeta
en el fotmetro, poner el cronmetro en marcha.
6- Al minuto medir la absorbancia, anotar la absorbancia inicial, continua anotando la absorbancia
a los 2 minutos y a los 3 minutos.
7- Calcular el incremento de absorbancia por minuto promedio
8- Calcular la concentracin de la enzima en la muestra.

NOTA: Las reacciones enzimticas se harn en orden, grupo por grupo. No mezclar los reactivos hasta
cuando llegue el turno del grupo

GUIA PARA EL SEMINARIO INVESTIGATIVO

Enzimas: definicin, estructura, funciones, factores que influyen en su accin, clasificacin,


enzimas de importancia clnica, funciones y uso.
Cmo se expresa la concentracin de una enzima?.
Qu es la aspartato aminotransferasa y la alanin-aminotransferrasa?, Cmo se determina en
suero?. Valores normales en hombres, mujeres y nios. Enfermedades o alteraciones metablicas
que se encuentran implicadas estas enzimas, como influye la concentracin srica en estas
alteraciones. Hablar de cada alteracin o enfermedad
Cirrosis heptica: definicin, clasificacin, causa, diagnostico, sntomas, tratamiento, consecuencias
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PRACTICA 6. DETERMINACION DE GLUCOSA EN SUERO

REACTIVOS:- Alcohol antisptico; - reactivo de trabajo presente en el kit para la determinacin de la


glucosa en suero

MATERIALES (por grupo)


2-Jeringas desechables, torniquete, 1- tubo de ensayo colector de sangre con tapa roja, 2 tubos de
ensayos medianos o grandes, pipetas pasteur plsticas, algodn, torniquete, Cronmetro,
espectrofotmetro, 1 gradilla
Otros materiales: 2 beakers de 250 ml, 1 litro de agua destilada, 1- frasco lavador

PROCEDIMIENTO

1- Extraer 3 ml sangre de la vena del brazo por medio de la jeringa, quitar la aguja y colocar en un
tubo pequeo limpio y seco, reposar para coagular-
2- Centrifugar los tubos por 5 minutos,
3- Despus de centrifugado tener cuidado de no agitar para no mezclar el suero con coagulo
4- Tener cuidado que todos los reactivos de trabajo estn a temperatura ambiente
5- Marcar dos tubos de ensayo con la muestra de suero y colocar 20 microlitros de suero.
6- Otro tubo marcar como patrn (solo el grupo responsable) y colocar 20 microlitros de la
solucin patrn presente en el kit
7- A todos los tubos colocar 2 ml de reactivo de trabajo, agitar bien los tubos y dejar reposando los
tubos a temperatura ambiente por 15 minutos.
8- Calibrar el espectrofotmetro a 500 nm con el blanco reactivo (reactivo de trabajo del kit) y leer
absorvancia en los tubos (muestras y patrn).
9- Determinar la concentracin de glucosa en las muestras

GUIA PARA EL SEMINARIO INVESTIGATIVO


Qu son los carbohidratos?, clasificacin Qu es la glucosa?, estructura, caracterstica
fisicoqumicas, funciones, reacciones metablicas implicadas
Importancia de la determinacin de glucosa en sangre.
Mtodos utilizados para la determinacin cualitativa y cuantitativa de glucosa en materiales biolgicos,
fundamento de cada mtodo
Fundamento del mtodo utilizado en la prctica.
Valores normales de referencia en hombres, mujeres y nios.
Qu es la curva de tolerancia a la glucosa?, que se puede diagnosticar con esta prueba, importancia
que tiene.
Implicaciones metablicas relacionadas con concentraciones altas y baja de la glicemia. Hablar de esas
alteraciones o enfermedades.
Diabetes Mellitus: Definicin, clasificacin, causa, diagnostico, sntomas, tratamiento, consecuencias
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PRACTICA 7. DETERMINACION DE COLESTEROL

REACTIVOS:- Alcohol antisptico; - reactivoS de trabajo presente en el kit para la determinacin deL glucosa
en suero
MATERIALES (por grupo)
2-Jeringas desechables, torniquete, 1- tubo de ensayo colector de sangre con tapa roja , 2 tubos de ensayos
medianos o grandes, pipetas pasteur plsticas, algodn, torniquete, Cronmetro, espectrofotmetro, 1 gradilla
Otros materiales: 2 beakers de 250 ml, 1 litro de agua destilada, 1- frasco lavador

PROCEDIMIENTO
1. Extraer 3 ml sangre de la vena del brazo por medio de la jeringa, quitar la aguja y colocarla en
el tubo de ensayo colector de sangre con tapa roja, reposar para coagular-
2. Remover el coagulo mediante la varilla de alambre
3. Centrifugar los tubos por 5 minutos,
4. Despus de centrifugado tener cuidado de no agitar para no mezclar el suero
5. Separar el suero con cuidado y con ayuda de la pipeta pasteur, colocarlo en otro tubo cnico
limpio y seco
6. Tener cuidado que todos los reactivos de trabajo estn a temperatura ambiente
7. Marcar dos tubos de ensayo con la muestra de suero para colesterol total y colocar 20
microlitros de suero.
8. Otro tubo marcar como patrn (solo el grupo responsable) y colocar 20 microlitros de la
solucin patrn presente en el kit
9. A todos los tubos colocar 2 ml de reactivo de trabajo ( para colesterol total), agitar bien los
tubos y dejar reposando los tubos a temperatura ambiente por 15 minutos.
10. Calibrar el espectrofotmetro a 500 nm con el blanco reactivo (reactivo de trabajo del kit) y leer
absorvancia en los tubos (muestras y patrn).
11. Determinar la concentracin de colesterol total en suero en las muestras, mediante la siguiente
reaccin: Absorbancia de la muestra x concentracin del patrn
Absorbancia del patrn
12. Repetir el mismo procedimiento en otros tubos desde el item 6 para determinar Colesterol HDL

GUIA DE ESTUDIO Y PARA EL INFORME


Qu es el colesterol?, caracterstica, funciones, transporte en la sangre, que son las lipoprotenas, qu
es el colesterol HDL?, reacciones metablicas implicadas del colesterol en el organismo
Importancia de la determinacin de la concentracin del colesterol total y HDL en sangre.
Mtodos utilizados para la determinacin cualitativa y cuantitativa del colesterol en materiales
biolgicos. Fundamento del mtodo utilizado en la prctica. Valores normales de colesterol total y de
HDL en hombres, mujeres y nios. Que se puede diagnosticar con esta prueba, importancia que tiene.
Implicaciones metablicas relacionadas con concentraciones altas y baja de colesterol, hablar de esas
alteraciones o enfermedades.
Aterosclerosis: Definicin, clasificacin, causas, diagnostico, sntomas, consecuencias, tratamiento
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PRACTICA 8. DETERMINACION DE TRIGLICRIDOS

REACTIVOS:- Alcohol antisptico; - reactivoS de trabajo presente en el kit para la determinacin deL
glucosa en suero
MATERIALES (por grupo)
2-Jeringas desechables, torniquete, 1- tubo de ensayo colector de sangre con tapa roja, 2 tubos de
ensayos medianos o grandes, pipetas pasteur plsticas, algodn, torniquete,. Cronmetro,
espectrofotmetro, 1 gradilla
Otros materiales: 2 beakers de 250 ml, 1 litro de agua destilada, 1- frasco lavador

PROCEDIMIENTO
1. Extraer 3 ml sangre de la vena del brazo por medio de la jeringa, quitar la aguja y colocarla en
el tubo de ensayo colector de sangre con tapa roja, dejar coagular.
2. Remover el coagulo mediante la varilla de alambre
3. Centrifugar los tubos por 5 minutos,
4. Despus de centrifugado tener cuidado de no agitar para no mezclar el suero
5. Separar el suero con cuidado y con ayuda de la pipeta pasteur, colocarlo en otro tubo cnico
limpio y seco
6. Tener cuidado que todos los reactivos de trabajo estn a temperatura ambiente
7. Marcar dos tubos de ensayo con la muestra de suero y colocar 20 microlitros de suero.
8. Otro tubo marcar como patrn (solo el grupo responsable) y colocar 20 microlitros de la
solucin patrn presente en el kit
9. A todos los tubos colocar 2 ml de reactivo de trabajo ( para triglicridos), agitar bien los tubos y
dejar reposando los tubos a temperatura ambiente por 15 minutos.
10. Calibrar el espectrofotmetro a 500 nm con el blanco reactivo (reactivo de trabajo del kit) y leer
absorvancia en los tubos (muestras y patrn).
11. Determinar la concentracin de colesterol total en suero en las muestras, mediante la siguiente
reaccin: Absorbancia de la muestra x concentracin del patrn
Absorbancia del patrn

GUIA DE ESTUDIO Y PARA EL INFORME


Qu son los lpidos?, clasificacin, funciones, clasificacin
Qu son los triglicridos?, caracterstica, funciones, estructura, reacciones metablicas implicadas
Importancia de la determinacin de la concentracin de triglicridos en sangre.
Mtodos utilizados para la determinacin cualitativa y cuantitativa de triglicridos en materiales
biolgicos. Fundamento del mtodo utilizado en la prctica. Valores normales de referencia en
hombres, mujeres y nios. Que se puede diagnosticar con esta prueba, importancia que tiene.
Implicaciones metablicas relacionadas con concentraciones altas y baja de triglicridos. Hablar de
esas alteraciones o enfermedades.
Lipoproteinemias: Definicin, clasificacin, causas, sntomas, diagnsticos, tratamiento, consecuencias
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PRACTICA 9. DETERMINACION DE PROTENAS TOTALES EN SUERO

REACTIVOS:- Alcohol antisptico; - reactivo de Biuret, patrn de protena.


MATERIALES (por grupo)
2-Jeringas desechables, torniquete, 1- tubo de ensayo colector de sangre con tapa roja, 2 tubos de
ensayos medianos o grandes, pipetas pasteur plsticas, algodn, torniquete. Cronmetro,
espectrofotmetro, 1 gradilla
Otros materiales: 2 beakers de 250 ml, 1 litro de agua destilada, 1- frasco lavador

PROCEDIMIENTO
1. Extraer 5 ml sangre de la vena del brazo por medio de la jeringa, quitar la aguja y colocarla en
el tubo de ensayo colector de sangre con tapa roja, reposar para coagular-
2. Centrifugar los tubos por 5 minutos,
3. Despus de centrifugado con cuidado separar el suero en otro tubo limpio y seco.
4. Tener cuidado que todos los reactivos de trabajo estn a temperatura ambiente
5. Marcar dos tubos de ensayo con la muestra y colocar 30 microlitros de suero.
6. Realizar la curva patrn (solo el grupo responsable) por duplicado colocar 5, 10, 20, 30 y 40
microlitros de la solucin patrn de protenas, a cada tubo colocar el reactivo de Biuret teniendo
cuidado que todos los tubos alcance a 2030 microlitros de volumen total.
7. A los tubos muestras colocar 2 ml de reactivo de Biuret mezclar homogneamente los tubos
y dejar reposando los tubos a temperatura ambiente por 10 minutos.
8. Calibrar el espectrofotmetro a 545 nm con el blanco reactivo (Biuret) y leer absorbancia en los
tubos (muestras y curva patrn).
9. Determinar el factor de la curva patrn (concentracin en cada duplicado expresadas en g o mg
dividido por la media de las absorbancia) y de esta relacin de cada duplicado determinar la
media total (factor de la curva)
10. Determinar la concentracin en cada muestra multiplicando
Absorbancia de la muestra x factor de la curva; expresando los valores en g/dl muestra

GUIA DE ESTUDIO PARA PREPARACION DEL SEMINARIO Y PARA EL QUIS


Qu son las protenas?, propiedades, caractersticas, funciones, estructura, constitucin, clasificacin,
protenas que se encuentran en el organismos, clasificacin de las protenas plasmticas, funciones que
ejercen
Mtodos que se utilizan para cuantificar las protenas, fundamento de cada mtodo, cual es el mas
usado, importancia de determinar la concentracin de protenas en el suero o plasma, valores normales
en hombres, mujeres y nios. Que alteraciones metablicas estn relacionados con valores altos o
bajos de las concentraciones de protenas en suero o plasma.
Desnutricin: Definicin, clasificacin, causas, diagnstico, sntomas, tratamiento, consecuencias.
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PRACTICA 10. DETERMINACION DE REA EN SUERO

REACTIVOS:- Alcohol antisptico; - , patrn de Urea, reactivos de trabajo para Urea A y B.

MATERIALES (por grupo)


2-Jeringas desechables, torniquete, 1- tubo de ensayo colector de sangre con tapa roja, 2 tubos de
ensayos medianos o grandes, pipetas pasteur plsticas, algodn, torniquete. Cronmetro,
espectrofotmetro, 1-gradilla
Otros materiales: 2 beakers de 250 ml, 1 litro de agua destilada, 1- frasco lavador

PROCEDIMIENTO
1- Extraer 5 ml sangre de la vena del brazo por medio de la jeringa, quitar la aguja y colocar en el
tubo cnico limpio y seco, reposar para coagular-
2- Remover el coagulo mediante la varilla de alambre
3- Centrifugar los tubos por 5 minutos,
4- Despus de centrifugado con cuidado separar el suero en otro tubo limpio y seco.
5- Tener cuidado que todos los reactivos de trabajo estn a temperatura ambiente
6- Marcar dos tubos de ensayo como muestra.
7- Colocar 2.0 ml de reactivo A de trabajo
8- Adicione 20 microlitros de suero de la muestra, homogenizar y dejar reposar por 10 minutos.
9- Adicione 2.0 ml de reactivo B de trabajo, homogenizar y dejar reposar por 10 minutos
10- Leer absorvancia a 600mn frente al blanco reativo
11- Hacer el mismo procedimiento para el patrn (solo el grupo rsponsable)
12- Hacer los clculos como indica el inserto de la prctica (tcnica de Biosystems)
13- Hacer el mismo procedimiento para la muestra patrn (solo el grupo responsable)

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Definicin de la rea, estructura, propiedades, funciones, sntesis en el organismo, metabolismo


Importancia clnica, valores de referencia en hombres, mujeres y nios,
Alteraciones metablicas en la sntesis de la urea.
Alteraciones metablica relacionados con los valores altos o bajos en suero.
Mtodos de cuantificacin, fundamento del mtodo utilizado en el laboratorio.
Deficiencias de las enzimas del ciclo de la rea: Ornitina transcarbamoilasa, argininosuccinato sintetasa
y liasa, deficiencia de arginasa.
Definicin, causa, sntomas, diagnostico, tratamiento, consecuencias de cada una
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PRACTICA 11. DETERMINACION DE CREATININA EN SUERO Y ORINA

REACTIVOS:- Alcohol antisptico; - , patrn de creatinina; reactivo de trabajo para creatinina

MATERIALES (por grupo)


2-Jeringas desechables, torniquete, 1- tubo de ensayo colector de sangre con tapa roja, 2 tubos de
ensayos medianos o grandes, pipetas pasteur plsticas, algodn, torniquete. Cronmetro,
espectrofotmetro, 1-gradilla
Otros materiales: 2 beakers de 250 ml, 1 litro de agua destilada, 1- frasco lavador

PROCEDIMIENTO
1- Extraer 2,5 ml sangre de la vena del brazo por medio de la jeringa, quitar la aguja y colocarla
en el tubo de ensayo colector de sangre con tapa roja, reposar para coagular-
2- Centrifugar los tubos por 5 minutos,
3- Despus de centrifugado con cuidado separar el suero en otro tubo limpio y seco.
4- Tener cuidado que todos los reactivos de trabajo estn a temperatura ambiente
5- Marcar dos tubos de ensayo como muestra.
6- Colocar 2.0 ml de reactivo de trabajo
7- Adicione 20 microlitros de suero de la muestra.
8- Leer absorvancia a 30 segundos y a 90 segundos
9- Hacer el mismo procedimiento para patrn (solo el grupo responsable)
10- Reste Absorbancia 2- absorvancia 1
11- Hacer los clculos como indica el inserto de la prctica (tcnica de Biosystems)
12- Hacer el mismo procedimiento para la muestra patrn (solo el grupo responsable)

GUIA DE ESTUDIO PARA PREPARACION DEL SEMINARIO Y PARA EL QUIS

Definicin de creatinina, estructura, propiedades, funciones, sntesis en el organismo, metabolismo


Importancia clnica, valores de referencia en hombres, mujeres y nios, alteraciones metablicas en
valores altos o bajos en el laboratorio. Mtodos de cuantificacin, fundamento del mtodo utilizado en
el laboratorio.
Investigar sobre la funcin renal: Que es el rin, estructura macroscpica y microscpica, funcin,
enfermedades relacionada con la excrecin de la creatinina, como se diagnostica, causas, tratamiento,
consecuencias
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PRACTICA 12. DETERMINACION DE ACIDO URICO EN SUERO

REACTIVOS:- Alcohol antisptico; - , patrn de cido rico; reactivo de trabajo para cido rico.
MATERIALES (por grupo)
2-Jeringas desechables, torniquete, 1- tubo de ensayo colector de sangre con tapa roja, 2 tubos de
ensayos medianos o grandes, pipetas pasteur plsticas, algodn, torniquete. Cronmetro,
espectrofotmetro, 1-gradilla
Otros materiales: 2 beakers de 250 ml, 1 litro de agua destilada, 1- frasco lavador

PROCEDIMIENTO
1- Extraer 2,5 ml sangre de la vena del brazo por medio de la jeringa, quitar la aguja y colocarla
en el tubo de ensayo colector de sangre con tapa roja, reposar para coagular-
2- Centrifugar los tubos por 5 minutos,
3- Despus de centrifugado con cuidado separar el suero en otro tubo limpio y seco.
4- Tener cuidado que todos los reactivos de trabajo estn a temperatura ambiente
5- Marcar dos tubos de ensayo como muestra.
6- Colocar 2.0 ml de reactivo de trabajo
7- Adicione 20 microlitros de suero de la muestra.
8- Leer absorbancia a 30 segundos y a 90 segundos
9- Reste medias de las absorbancia 2- media de las absorbancia 1
10- Hacer el mismo procedimiento para el patrn (solo el grupo responsable)
11- Hacer los clculos como indica el inserto de la prctica (tcnica de Biosystems)
12- Hacer el mismo procedimiento para la muestra patrn (solo el grupo responsable)

GUIA DE ESTUDIO PARA PREPARACION DEL SEMINARIO Y PARA EL QUIS

Definicin del cido rico, estructura, propiedades, funciones, sntesis en el organismo, metabolismo
Importancia clnica, valores de referencia en hombres, mujeres y nios, alteraciones metablicas en
valores altos o bajos en el laboratorio. Mtodos de cuantificacin, fundamento del mtodo utilizado en
el laboratorio.
Gota: Definicin, clasificacin, causas, sntomas, diagnostico, tratamiento, consecuencias.

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