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El cristal violeta (colorante catinico) penetra en todas las clulas bacterianas (tanto gram
positivas como gram negativas) a travs de la pared bacteriana. El lugol es un compuesto
formado por I2 (yodo) en equilibrio con KI (yoduro de potasio) y Sl (Siulterio), los cuales estn
presente para solubilizar el yodo, y actan de mordiente, haciendo que el cristal violeta se fije
con mayor intensidad a la pared de la clula bacteriana. El I2 entra en las clulas y forma un
complejo insoluble en solucin acuosa con el cristal violeta.
a microscopia directa tiene una clara utilidad en el diagnostico de las micosis, aunque
puede obtener resultados falsos negativos y falsos positivos. La microscopa dispone de
una sensibilidad menor que los cultivos, y la obtencin de resultados negativos no
descarta la existencia de una micosis. Los abordajes ms utilizados son el reactivo
fluorescente blanco calcoflor o la tincin de frotis y las preparaciones con tinciones Gram
y de Giemsa.
La Tincin Gram tie la mayor parte de levaduras y las hifas presentes en las mismas.
Casi todos los hongos son grampositivos, aunque algunos muestran un patrn motado o
aparecen como gramnegativos como el Cryptococcus neoformans.
I: Edad de la bacteria.
A pesar de la gran utilidad del la tincin de Gram, este mtodo debe ser valorado con
precaucin, ya que la reaccin puede variar segn la edad de las clulas y la tcnica
empleada, por ella junto a la muestra deben teirse controles con grampositivas y
gramnegativas.
Colores que no son reemplazables:
Atendiendo a la fuente de obtencin, los colorantes se clasifican en naturales y
sintticos.
ndigo: Se obtiene de diversas especie de plantas del genero indigfera que contiene
indican, el cual se fermenta para producir el colorante.
Carmn: Se produce, mediante el tratamiento con alumbre y otras sales metlicas a
hembras del insecto cochinilla "Coccus castis".
Orcena y Tornasol: Se obtiene mediante el procesamiento industrial de lquenes de
los gneros: Le canora tinctoria y Rosella tinctoria.
Hematoxilina: Este colorante se extrae con ter de la madera de un rbol oriundo de
Mxico y de algunos paises suramericanos denominados Hematoxilium
campechianum.
Colorantes sintticos. Se obtiene de la anilina, o es mas exactamente del alquitrn de
hulla siendo todos derivados del benceno.
Clasificacin
Los colorantes se clasifican, teniendo en cuenta si la propiedad tintorial se encuentra
en el anin o el catin de su estructura qumica. Sobre esta base se pueden dividir en
tres grupos: bsicos, cidos y neutros.
Colorantes bsicos: La accin colorante est a cargo del catin, mientras que el anin
no tiene esa propiedad, por ejemplo: - cloruro de azul de metileno+.
Colorante cido: Sucede todo lo contrario, la sustancia colorante esta a cargo del
anin, mientras que el catin no tiene propiedad, por ejemplo: eosinato- de sodio+
Colorantes neutros: Estn formados simultneamente por soluciones acuosas de
colorantes cido y bsicos, donde el precipitado resultante, soluble exclusivamente en
alcohol, constituye el colorante neutro, que tiene la propiedad tintorial de sus
componentes cidos y bsicos, por ejemplo: la giemsa.