Regulacin de la sntesis de ADN y transcripcin

CICLO CELULAR
Fases del ciclo

G1 crecimiento rpido, gran actividad metablica como sntesis de ARN y protenas

S sntesis de ADN
G2 crecimiento celular, el contenido nuclear ya esta duplicado y hay mxima
actividad de enzimas reparadoras del ADN.
M mitosis y citocinesis
G0 subfase en la cual consiste en un estado de reposo, en donde la clula permanece
metablicamente activa, sin proliferar, a no ser que sean requeridas.

Control del ciclo celular: los componentes de este sistema de control son los miembros de una
familia de protenas quinasas llamadas quinasas dependientes de ciclina CDK. Su actividad
est regulada por protenas llamadas ciclina. Esto quiere decir que, si las Cdk. no se
encuentran unidas a sus ciclinas no tendrn actividad de protena quinasa.

La funcin de las Cdk. consiste en evitar que el ciclo prosiga sin haber completado la fase
anterior. Diversas ciclinas se activan durante las fases del ciclo celular. La ciclina D se expresa
en la fase media de G1 e interacta con Cdk4 la cual, una vez activada por fosforilacin
mediada por CAK, fosforila a otras protenas como pRb. La ciclina E se expresa en fase tarda
de G1, se une a Cdk. 2 la cual es fosforilada por CAK, permitiendo que esta fosforile entonces a
la pRb. Quin es pRb? Es un blanco para la transicin G1 S, cuando pRb se encuentra
desfosforilada se puede unir a factores de transcripcin que suprimen el crecimiento, y por lo
tanto impidiendo el pasaje a fase S.

1 punto de control FPS: Ciclina G1 + Cdk2. Controla el pasaje G1 S

2 punto de control FPM: Ciclina mittica + Cadk1. Controla el pasaje de G2 M

3punto de control: APC (control de entrada a anafase). Se activa por FPM.

Factor de crecimiento: factores que estimulan la mitosis por interaccin con receptores de
membrana. Ejemplos: FGF. Modifican la actividad de enzimas por acciones de fosfo-
desfosforilacin. Una vez que estos se unen a su receptor generan la fosforilacin de ste, en
residuos de tirosina, generando luego una cascada de eventos que dan lugar a la regulacin
del complejo enzimtico de las ciclinas. La ausencia de factores de crecimiento, genera que la
clula pase de G1 a G0.
DUPLICACIN DEL ADN
Es llevada a cabo por enzimas conocidas como polimerasas, las cuales se clasifican, en el caso
de organismo eucariotas, en alfa, delta y psilon. Las polimerasas leen nicamente de 3 a 5,
sintetizando o polimerizando entonces de 5 a 3. No son capaces de comenzar la sntesis de
ADN por ellas mismas, sino que requieren de un primer que ya se encuentre unido a la hebra
molde.

Debido al anti paralelismo entre las dos hebras de ADN y puesto que el sentido de la
replicacin es el mismo, existir una hebra molde, de 3 a 5 la cual no resulta un problema
para la ADN Pol, pero del otro lado nos encontramos con la hebra de 5 a 3 la cual no podr
ser replicada normalmente por la ADN Pol. Por tanto, la hebra de 5 a 3 se sintetizar a partir
de pequeas piezas discontinuas de ADN que se sintetizan al revs, llamadas fragmentos de
Okazaki.

Las ADN polimerasas poseen 3 actividades catalticas: de polimerasa 5 a 3 (accin de

sntesis), exonucleasa de 3 a 5 (actividad correctora, mientras sintetiza chequea que los
nucletidos que puso estn colocados correctamente); exonucleasa de 5 a 3 (elimina los
primer de ARN de los fragmentos de Okazaki).

ADN polimerasa alfa: forma un complejo con la primasa y funciona junto a ella para
sintetizar fragmentos cortos durante la sntesis de la hebra tarda y en los orgenes de
replicacin
ADN polimerasa delta y psilon: principales polimerasas que se ocuparan de la
sntesis de las hebras conductoras y tardas respectivamente.

Cmo se lleva a cabo la sntesis?

La sntesis de ADN, se inicia en los ori, es bidireccional, semiconservativa y discontinua.

Ciertas protenas como la ARS u ORC reconocen los sitios de iniciacin de la sntesis de ADN
generando luego la apertura de la cadena. Los orgenes de replicacin (horquillas) se van
activando por los complejos Cdk. La enzima helicasa actuara separando las hebras del ADN;
otras protenas conocidas como SSB impiden que las hebras se vuelvan a unir; y por otro lado
las enzimas topoisomerasas II se ubicarn del lado del ADN enrollado para luego, durante la
sntesis relajar el ADN que an no se encuentra separado, y as evitar el superenrrollamiento
del ADN. El siguiente paso constituye la sntesis de los primer por accin de primasas, dando
origen a la polimerizacin. Por accin de las polimerasas comenzar a sintetizarse la nueva
hebra de ADN, siempre teniendo en cuenta que una hebra es conductora y otra tarda. Una vez
que finaliza, se pasa a eliminar los cebadores mediante la sustitucin de los mismo por ADN, y
luego se realiza la unin de todos los fragmentos sueltos gracias a la ADN ligasa.
TRANSCRIPCIN
Es la formacin de ARN a partir de una molcula de ADN. Se lleva a cabo por enzimas
conocidas como ARN polimerasas, que catalizan la polimerizacin de ribonucletido 5-
trifosfato dirigida por un molde de ADN. Sintetiza de 5 a 3 (lee la cadena de 3 a 5). Estas
enzimas, a comparacin con las ADN Pol no requieren de un primer para iniciar la sntesis de
ARN.

Existen 3 tipos de ARN polimerasas:

ARN polimerasa I: cataliza la transcripcin del ARN ribosomal

ARN polimerasa II: formar el ARN mensajero
ARN polimerasa III: formar los ARNt y pequeos y los ARN ribosomales que codifican
para la subunidad pequea del ribosoma.

Proceso de transcripcin: La secuencia de ADN a la cual se une la ARN polimerasa para iniciar
la transcripcin se denomina PROMOTOR. Estas secuencias promotoras son la CAAT o TATA
box. A medida que avanza la replicacin, la polimerasa desenrolla el molde de ADN que tiene
por delante y vuelve a enrollar el ADN que queda por detrs. La sntesis de ARN continuar
hasta que la polimerasa encuentre una seal de terminacin, la cual har que finalice la
transcripcin, se separe el ARN y la polimerasa se disocie del molde de ADN.

Para que se inicie la transcripcin es necesario la presencia de factores de transcripcin los

cuales actuarn sobre la ARN polimerasa. Para que comience la transcripcin se necesita de la
formacin de un complejo de transcripcin. La regin promotora, para agregar, contiene sitios
de reconocimiento para factores de transcripcin. Estas son secuencias especficas en el ADN
que unen protenas. Estos sitios pueden activar o reprimir la transcripcin.
Maduracin del ARNm: el primer paso en la maduracin es la modificacin del extremo
5 por adicin del CAP de 7 metil guanosina; le permite el reconocimiento con el ARNr en la
traduccin. El extremo 3 se forma por corte del transcripto primario y adicin de cola de poli
A (poliadenilacin). La cola poli A regula la traduccin y estabilidad del ARNm; tambin se la
requiere para que el ARNm se exporte al citosol. Luego se genera la eliminacin de intrones
por procedimiento de corte y empalme o splicing. Los intrones son secuencias no codificantes
que son escindidas de forma precisa del ARNm maduro.

Splicing: Corte de intrones a travs de endonucleasas en donde luego pasar a unirse los
exones por accin de ligasas. El intron es escindido como una estructura en forma de lazo que
es posteriormente degradada en el ncleo. El splicing se da dentro de complejos, conocidos
como espliceosomas.

El splicing puede ser alternativo en el cual del mismo transcripto se puedan empalmar exones
transcriptos no necesariamente contiguos. Esto trae como consecuencia que de una sola
transcripcin se puedan sintetizar protenas diferentes, con funciones diferentes.
MUTACIN
Una mutacin es cualquier cambio en el par de bases normal del ADN.

Mutacin genmica: altera el numero de cromosomas

Mutacin cromosomal: alteracin en la estructura del cromosoma
Mutacin gentica: altera la estructura de un gen codificante

Tenemos dos tipos de genes:

Genes constitutivos: no estan sujetos a ninguna regulacin y se expresan

continuamente.
Genes regulables: estan sujetos a regulacin. Estan vinculados al control de la
proliferacin y diferenciacin celular como factores de crecimiento, receptores de
factores de crecimiento, transductores de seales y factores de transcripcin. Estos
genes regulables, toman el nombre de PROTO-ONCOGENES.
En el caso de que los proto-oncogenes perdieran su regulacin, pasaran a ser
ONCOGENES que son responsables de patologa. Los oncogenes actan acelerando la
velocidad de crecimiento celular en la fase G1 lo que podra llegar a dar una mitosis en
vez de plantarse en G0. Los GENES SUPRESORES DE TUMORES podran actuar como
frenos del ciclo celular.

Terapia con genes: se trata de la introduccin de genes en clulas y estos pueden realizarse
por mtodos qumicos, fsicos o por virus (transduccionales). En las qumicas se crea una
solucin la cual desestabiliza la membrana de la clula blanca, generando que el ADN penetre
en las clulas. En los fsicos consisten en micro inyeccin con una micro pipeta. La
transduccin por virus toma ventaja de los mismos por la capacidad de penetrar una clula e
incorporarse a su genoma. Se utilizan retrovirus, los cuales son capaces de convertir ARN en
ADN gracias a la transcriptasa reversa

CNCER
Ocurre cuando se produce una secuencia de alteraciones (mutacin) en algn gen que
distorsiona este control en una clula individual, produciendo el crecimiento exacerbado y
que, de no ser controlado por los propios mecanismos de defensa podr dar lugar a una
invasin.

Los genes supresores y los proto-oncogenes actan en armona regulando el crecimiento y la

divisin celular. Las protenas que son producto de sus genes, inhiben el crecimiento a travs
de una serie de mecanismos particulares. Ejemplo de genes supresores son el p53 y Rb. Si una
de las copias de un gen supresor se altera, esto generar la divisin descontrolada de la clula.

La protena p53 es el resultado de un gen supresor de tumor y tiene dos funciones. Una de
ellas consiste en la apoptosis de la clula evitando que el dao no reparado, no se herede. Otra
de ellas es la detencin del ciclo en G1, esto lo hace gracias a que este acta como factor de
transcripcin del gen p21, y ser la p21 el inhibidor del FPS.
Para que un gen supresor de tumor no pueda generar estas protenas (p53) se requiere que
ambas copias de este gen estn mutadas.

Los protooncogenes codifican para protenas involucradas en la estimulacin de la

reproduccin celular. Por mutacin dan lugar a la aparicin de oncogenes. Es suficiente si
muta una sola de las copias del protooncogen para transformar la clula en una cancerosa.

CITOSTTICOS
Frmacos anti cancergenos. Cito=clula, estticos = esttico. Son diversos pero la funcin
principal es detener el crecimiento y proliferacin celular, dependiendo siempre en donde
acten.

Pese a que encontramos muchos nombres podemos contar alguna de sus funciones

Interferencia con la transcripcin y replicacin

Inhibicin de la sntesis de ADN y ARN. Accin sobre la topoisomerasa II
Intervencin sobre la ARN polimerasa II y topoisomerasa II
Inhibicin de la ribonucletido reductasa
Inhibicin de la enzima dihidrofolato reductasa