Cmo entran los virus en las clulas

animales
Alicia E. Smith y Ari Helenius

Los virus se replican dentro de las clulas vivas y usan la maquinaria

celular para la sntesis de su genoma y otros componentes. Para
acceder, se han desarrollado una variedad de mecanismos que
permiten la entrada de sus genes y protenas accesorias al husped.
Muchos virus animales aprovechan la va endoctica que les permite
la entrada mediante un programa complejo. En la interaccin entre la
clula y el intruso, la clula proporciona seales crticas que permiten
sufrir transformaciones moleculares que conducen a una
internalizacin exitosa y un transporte efectivo del virus.

Aunque es extremadamente simple en su estructura y composicin, los

virus son maestros del camuflaje y el engao. Desprovisto de cualquier
medio de independiente locomocin, que difunden mediante la explotacin
clulas y organismos. Con la ayuda de los roedores, insectos y aves
migratorias, y pasado a lo largo por el comercio mundial y los viajes, que se
mueven en torno el mundo a una velocidad sorprendente. Una vez que
entran el cuerpo de un husped potencial, pueden penetrar capas, se
mueven a travs del torrente sanguneo, y se dispersan con la ayuda de
clulas mviles y vas neuronales. Un momento crtico se produce cuando
un virus partcula alcanza un potencial de la clula husped y agregados
asimismo a la superficie. Ahora debe entregar sus accesorios de la cpside y
las protenas de las clulas en una forma de replicacin competente,
idealmente con un dao mnimo a la clula y dejando poca evidencia de su
entrada para la deteccin de las defensas inmunes. Este no es un problema
trivial porque las membranas celulares son impermeables a las
macromolculas.
Informacin general: La entrada de virus
Las partculas virales median en la transferencia del genoma y accesorios
proteicos virales de una clula husped infectada a una clula husped no
infectada. La tarea consiste en empaquetar el genoma viral (ARN o ADN) y
protenas accesorias, liberando el paquete de la clula infectad adems de
la proteccin de los componentes esenciales durante transmisin
extracelular, y la entrega de en una nueva clula husped. Muchos virus con
un genoma de ADN deben entrar en el ncleo, mientras que los virus de
ARN, con algunas excepciones, se replican en el citosol. En general, los
virus utilizan una estrategia de "caballo de Troya" en el que la vctima asiste
al intruso. Para extraer la asistencia de la clula husped, los virus utilizan
la detallada "Informacin privilegiada" que han adquirido durante millones
de aos de coevolucin con sus anfitriones. En una partcula tpica de virus
animal, el viral ARN o ADN se condensa en icosadrica o nucleoprotena
complejos helicoidales llamados cpsides.
En los virus con envoltura, las cpsides son rodeadas por una bicapa lipdica
que contiene glucoprotenas en punta virales. Adems, algunos virus
contienen transcriptasas inversas, ARN polimerasas, quinasas, y otras
protenas que son importantes durante la no capa, la replicacin, u otras
etapas tempranas intracelulares. Para infectar una clula diana, una
partcula de virus procede a travs de un proceso de entrada de mltiples
etapas, durante donde cada paso es pre-programado y estrechamente
regulada en el tiempo y el espacio. La figura 1 muestra micrografas
electrnicas de algunos escalones de entrada de virus: la unin a la clula,
la endocitosis, y nuclear importar. Otro paso crtico en la infeccin es un
proceso, durante el cual el lpido debe ser derramado y las cpsides debe
ser al menos parcialmente desmontada para exponer una competente para
la replicacin del genoma. Una vez que la capa se ha producido, la
movilidad del genoma dentro de la clula se restringe. El progreso a travs
de la entrada y no capa programa depende de "seales" que la clula
proporciona. Incluyen la interaccin con la superficie celular receptores, la
exposicin a un pH bajo, y reinmersin en un ambiente reductor. Dichas
seales activan cambios conformacionales pre programados y disociacin
eventos en la partcula del virus. Para responder a las seales, las partculas
de virus o algunas de sus protenas componentes (tales como la
glucoprotenas en punta) se presentan en meta estable y fcilmente
modificado estados conformacionales. Cuando desencadenada por una
seal, el estado metaestable puede ser relajado para permitir cambios
marcados en viral propiedades sin el aporte de energa externa. A
continuacin, describimos varios ejemplos de este proceso.
Los receptores y factores de fijacin:
Para infectar, un virus debe unirse primero a la superficie de una clula. Las
molculas a las que se los virus se unen constituir una coleccin diversa de
protenas celulares, carbohidratos y lpidos. Ellos difieren de un virus a otro,
y que van desde abundante y ubicuo a lo raro y celular especfica. Algunos
de ellos simplemente sirven como factores de unin que se concentran los
virus en la superficie de la clula. Otros son verdaderos receptores en que
no slo se unen los virus sino que tambin son responsables de guiar el
lmite virus en vas endoctica y para la transmisin de seales al
citoplasma. Los receptores tambin pueden servir como seales que
inducen cambios conformacionales que conducen a la membrana fusin y
penetracin. La identidad y la distribucin de factores de unin y receptores
determina en gran medida que los tipos de clulas, tejidos y organismos un
virus puede infectar. Algunos virus utilizan mltiples factores de unin y los
receptores en paralelo o en sucesin. En el caso de virus de la
inmunodeficiencia humana (VIH) - 1, por ejemplo, contactos iniciales
implican a menudo clula factores de unin de superficie tales como
manosa miembros de la familia del receptor de lectina de tipo C de unin, la
adhesin intercelular especfica de clulas dendrticas molcula (ICAM) -3-
agarrando nonintegrin (DCSIGN), o el hgado y los ganglios linfticos
especfica ICAM-3-agarrando nonintegrin (L-SIGN) (1, 2). Estas interacciones
iniciales no inducen conformacional cambios en la glicoprotena. Cuando el
glicoprotena 120 (gp120) de la subunidad del virus envolvente se une a la
inmunoglobulina ms externa G dominio de CD4, se somete a un
conformacional cambio que permite que el virus de asociar con sus co-
receptores, los receptores de quimioquinas CXCR4 o CCR5 (3). La
interaccin entre gp120 y CCR5 o CXCR4 desencadena la conversin de la
subunidad gp41 sobre la fusin-competente conformacin (4, 5). Una
situacin similar se observa para alphaherpes virus, para los que heperan
proteoglicanos de sulfato de servir como factores de unin iniciales para una
de las glicoprotenas (GC). Membrana fusin es inducida por otras
glicoprotenas virales despus de interactuar con receptores adicionales,
tales como la entrada del virus del herpes mediador (HVE), nectins, o
integrinas (6). La interaccin individual entre un virus y un nico factor de
unin o receptor puede ser dbil con una constante de unin tan bajo como
milimolar (7, 8). Sin embargo, cuando se multiplica ms numerosos
contactos, la avidez hace unin virus prcticamente irreversible. Envuelto
virus tales como myxo- y paramixovirus que se unen a grupos de cido
silico tienen pico glicoprotenas con actividad de la neuraminidasa. Ellos
sirven como factores de receptores de destruir que la liberacin de los virus
con destino si stos partculas virales no pueden proceder de su entrada
programa (9).
Las protenas de unin al receptor:
En virus envueltos, son las glucoprotenas en punta que se unen a los
receptores. A menudo son protenas multifuncionales que sirven
adicionalmente como factores de fusin de membranas y / o
receptordestroying enzimas. Datos estructurales sobre la espiga existen
interacciones glicoprotena-receptor para varios virus con envoltura
incluyendo hemaglutinina (HA) del virus de la influenza con cota cido
silico (7), para gp120 del VIH-1 con CD4 unida (10), para la glicoprotena D
de herpes virus simplex 1 (HSV-1) con lmite HVEA (11), para gp42 del virus
de Epstein-Barr con el antgeno del linfocito humano unido (HLA) DR (12), y
para la enfermedad de Newcastle protena HN de virus con el anmero beta
de cido silico (13). En los virus no envueltos, las estructuras de los
receptores se unen con proyecciones o muescas en la superficie de la
cpside. Los adenovirus tienen fibras con prominentes homotrimeric perillas
globulares que se proyectan desde cada uno de los 12 vrtices. La
estructura cristalina de rayos X del adenovirus 12 mando, junto con el N-
terminal Dominio de la Coxsackie y adenovirus receptor (CAR), muestra un
gran contacto rea en el lado lateral de cada subunidad en el pomo (14). La
base pentn de muchos adenovirus subfamilias contiene un RGD expuesta
secuencia que asocia con las integrinas (15). En rinovirus y enterovirus,
incluyendo polio, los receptores se unen en una hendidura en el la superficie
de la cpside llamado el "can" (16). Para algunos virus, la unin puede
causar la desestabilizacin de la partcula de virus, una primera etapa hacia
la no capa.
Encuadernacin de virus:
Interacciones de carbohidratos / protenas tienen larga data, se sabe que
juega un papel importante en viral la invasin (17). Algunos virus se unen
especficamente a los grupos que contienen cido silico, y otros unirse a
glicosaminoglicanos o glicolpidos. sulfato de heparn se ha identificado
como una factor de unin de los virus del herpes, adenoasociados los virus,
el virus del dengue, transmitida por garrapatas virus de la encefalitis, virus
del papiloma, paramixovirus 3, y el virus de Sindbis (6, 18 23). Para algunos
de estos, el grado de sulfatacin del heparn sulfato o la presencia de
grupos generados por sulfotransferasas especficos es importante (6, 24).
En la mayora de los casos, los hidratos de carbono sirven como factores de
unin que no desencadenan cambios conformacionales. Virus Simian 40
(SV40) y el virus del polioma uso de ganglisidos (GM1, GD1a, y GT1b)
durante la unin (25, 26). En polioma virus, el cido silico disacrido? 2,3-
galactosa presente en estos ganglisidos se une a un bolsillo poco profundo
en la cpside mayor protenas, VP1 (8). En algunos sistemas de virus, la
lectina se encuentra en la superficie celular y el ligando de carbohidratos se
encuentra en el virus. Sindbis VIH-1, virus, el virus de Dengue,
citomegalovirus humanos, virus de la hepatitis C, y el virus del bola se
unen todos a lectinas de la superficie celular, tales como DC-SIGN y L-SIGN,
a travs de alta glicanos N-ligados manosa en su envoltura glicoprotenas
(27-32).
Endocitosis:
Muchos virus animales confian en la endoctica de la clula maquinaria para
la infeccin roductiva. Figura 2 muestra esquemticamente la endoctica
vas de entrada de tres virus que replican en el ncleo: denovirus 2,
influenza A, y SV40. Una de las ventajas de entrada endoctica es que los
virus son dado un "viaje gratis" de profundidad en el citoplasma. Esto se
debe a endoctica vesculas estn diseados para atravesar el barreras
impuestas por el citoesqueleto cortical y el citoplasma altamente
estructurado. Dependiente sobre el virus, partculas de virus entrantes
pueden ver entrar estructuras endosomal, lisosomas, el retculo
endoplasmtico (ER), y en ocasiones, el complejo de Golgi (33, 34). Una
ventaja adicional de la endocitosis es que virus entrantes estn expuestos a
compartimental ambientes que difieren de la extracelular medio. Para
muchos virus, el ligeramente pH cido en los endosomas proporciona una
cue esencial que desencadena la penetracin y no capa (35-37).
Penetracin de intracelular vacuolas tambin tiene la ventaja de dejar no
hay glicoprotenas virales expuestas en la celda superficie para la deteccin
inmunolgica. Por ltimo, si la penetracin es ltico, como es el caso de los
adenovirus-endosomal lisis de la membrana es probable a ser menos
perjudicial para la clula que la lisis de la membrana plasmtica. Uno de los
riesgos durante la endocitosis es posible la entrega al lisosoma, un
compartimiento de degradacin y un callejn sin salida para la mayora de
los virus. Esto es por qu los virus han ajustado cuidadosamente el umbral
pH de activacin para que coincida con la de principios (pH 6 a 6,5) o
endosomas tardos (pH 5-6) (38, 39). Que los endosomas tempranos y
tardos constituyen distinta sitios de entrada ha sido confirmado
recientemente con mutantes dominantes negativos de asociados-endosoma
pequeas guanosina trifosfatasa (GTPasas) (40). Un mutante
constitutivamente inactivo de rab5 (endosoma temprano) bloqueado la
entrada de ambos virus Semliki Forest (pH 6,2) y la influenza virus (pH 5,4),
mientras que el correspondiente mutante Rab7 (endosomas tardos)
solamente la entrada del virus de la gripe bloqueado. El progreso de las
partculas de virus individuales a travs endoctica compartimentos pueden
ser rastreados con microscopia de vdeo en tiempo real (41 a 44). Individual
partculas de virus fluorescentes se pueden observar para unirse a la
superficie celular, a lo largo de difundir la membrana, se quedan atrapados
en hoyos revestidos o caveolas, entrar por endocitosis, moverse a lo largo
microtbulos, y as sucesivamente. Con el uso de tintes fluorescentes
especficos, la acidificacin de partculas de virus y la fusin de la viral sobre
con las membranas celulares puede ser supervisado.
Balsa de Lpidos-Endocitosis media de los virus:
SV40 y algunos otros virus eligen endoctica vas que pasan por alto la
endocitosis mediada por clatrina. Uno de ellos consiste en caveolas, en
forma de botella indentaciones de la membrana de plasma enriquecido en
colesterol y esfingolpidos, caveolinas, y la sealizacin factores (45-48).
Aunque en general inmvil, caveolas son conocidos para apoyar la
internalizacin de ciertos ligandos fisiolgicos (49-51). Despus de la unin
al ganglisido GM1, SV40 mueve lateralmente a lo largo de la membrana
plasmtica hasta atrapado en un caveolae (42, 52) (Fig. 2). Entrada procede
a travs de una vescula caveolar, la caveosome, y luego el buen ER.
Penetracin en el citosol se cree que ocurre en el ER, despus de la cual el
virus entra en el ncleo a travs de la complejos de poro nuclear (CPN). Esta
va tiene muchas caractersticas interesantes e inesperadas [Para
revisiones, vase (53-56)]. Caveolas son tambin utilizados por el virus del
polioma en algunos tipos de clulas, virus del papiloma, virus y Echo 1 (57-
60). Adems de la caveolae, es evidente que clulas tienen otras vas
clathrin independiente de endocitosis (55, 61). Estos noncaveolar, balsa vas
dependientes de los lpidos son todava mal caracterizados. Pueden servir
como una primaria ruta de entrada en busca de virus tales como
poliomavirus (59, 62) y como una va de entrada alternativa para SV40 en
clulas que carecen de caveolae (63). La presencia de mltiples vas y
previamente no observadas retos orgnulos endoctica los supuestos
establecidos sobre la entrada de muchos virus. Los procesos celulares
pueden ser ms compleja de lo previsto, que se ilustra porla reciente
observacin de que el virus de influenza, que fue pensado para entrar por
revestidas de clatrina endocitosis hoyo, puede infectar clulas en las que
revestidas de clatrina el transporte de vesculas se bloquea (64).
Penetracin:
La penetracin de los virus con envoltura se produce por fusin de
membrana catalizada por protenas de fusin en la envoltura viral. La
maquinaria involucrada es bastante simple, al menos si se compara al
aparato necesario para intracelular eventos de membrana de fusin. Una
razn de la simplicidad es que se utilizan los factores de fusin viral slo
una vez. La actividad de fusin se desencadena por seales en forma de
unin al receptor o baja pH (como se mencion anteriormente). Inducen,
como una regla general, los cambios conformacionales irreversibles.
Factores de fusin virales son actualmente divididos en dos clases
principales. Factores de tipo I consisten de glucoprotenas en punta en la
que homotrimrica las subunidades se unen mediante bobinas largo
enrollado. Ellos son protenas de membrana que se sintetizan como
protenas precursoras, plegadas, ensambladas y en oligmeros en la sala de
emergencias. En trnsito a travs de la va secretora, se someten escisiones
proteolticas postsynthetic que hacen ellos conformacionalmente
metaestable y fusin competente (4, 65). Su estado metaestable permite la
conversin de cooperacin en una menor conformacin de energa. Cuando
se activa, la resultante conformacin expone hidrfobo secuencias de fusin
que se insertan en el objetivo membrana. Se utiliza la energa libre liberada
para obligar a las membranas ms cerca juntos en una sitio focal, lo que
resulta en la fusin. HA de la gripe es la mejor estudiados en esta clase.
Para ms informacin sobre este proceso bien estudiado, vase comentarios
recientes (5, 7, 66, 67). Tipo II protenas de fusin se producen en flavivirus
y en los virus alfa (68, 69). Ellos tener secuencias de fusin interna y se
sintetizan y montados de manera heterodmeros con otra protena de la
membrana. Cuando se expone a pH bajo, se produce un cambio en el
cuaternario estructura; las subunidades de fusin. Los virus no envueltos
tambin implican cooperativa cambios en partculas de virus
desencadenados por pH de unin del receptor o baja (16, 72, 73). Los los
virus se vuelven ms hidrfobo e interactan con las membranas
directamente. En los adenovirus, se convierte en la base Penton ltico a pH
bajo, y el virus se libera de endosomas rotos intactas con el resto de
contenido endosomal (74, 75). Una variacin de el mismo tema es utilizado
por reovirus, en que un pptido hidrfobo en protena de la cpside? 1 se
expone, por lo que la ltica de la cpside (76). En el caso de virus picorna,
receptor la unin a la can conduce a la prdida de la protena VP4 y la
exposicin de la grupo cido mirstico en el trmino N de VP1. El virus es
pensado para hundirse en la bicapa y la forma un "canal" protena forrado a
travs del cual el ARN viral puede entrar el citosol (72).
Transporte intracelular:
Despus de la penetracin, el genoma de la mayora de los virus deben ser
transportados ya sea para el ncleo o para citoslica especfica membranas.
Difusin en el abarrotado y muy estructurado citosol no es eficiente dadas
las grandes dimensiones de la mayora de cpsides y las largas distancias
deben viajar (77, 78). Para moverse en el interior la clula, virus entrantes
menudo explotar el citoesqueleto y celular protenas motoras. Como se ha
revisado recientemente (77), hay dos formas principales de hacerlo; los
virus puede permitir que las vesculas de endocitosis para transportar a
ellos como luminal de carga pasiva, o la cpside penetrado s puede
interactuar con los motores correspondientes. En el ltimo caso, una
protena de la cpside se une y interacta con los factores celulares. El
transporte a ncleo, generalmente implica el menos-enddirected
dependiente de microtbulos dinena motor y su adaptador de protenas,
dynactin. Actina tambin puede jugar un papel en la entrada del virus.
Debido a que es rico en filamentos de actina, la cortical citoesqueleto
plantea una barrera contra la movimiento hacia dentro de las cpsides y
virus que entrar directamente a travs de la membrana plasmtica (79).
Para superar la barrera, algunos virus, tales como SV40, activar la tirosina
quinasa cascadas de sealizacin inducidas que llevan a la disociacin local
de la actina filamentosa (52). La actina tambin se ha encontrado para
promover vescula gemacin en la superficie celular y para propulsar virus
que contiene vesculas de endocitosis a travs el citoplasma (44, 52). La
liberacin de baculovirus desde los endosomas induce la polimerizacin de
actina a un extremo de la cpside baculovirus, que promueve el movimiento
de la cpside hacia el ncleo (80). Una de las protenas de la cpside (p78 /
83) tiene homologa con la de los mamferos Wilkott-Aldrich la protena del
sndrome (WASP) y es por lo tanto probable que interactuar con Arp2 / 3, un
complejo protena implicada en el montaje de actina (81).
Sealizacin durante la entrada de virus:
En los ltimos aos, tiene quedado claro que la el intercambio de
informacin entre los virus entrantes y la clula husped no se limita a las
seales dado al virus por la clula. Para muchos virus, toma la forma de un
dilogo bidireccional en la que el virus se ventaja de la celda de propia
transduccin de seales sistemas para transmitir seales a la clula (82,
83). Estas seales inducen a cambios que facilitan la entrada, preparan a la
clula para la invasin, y neutralizan las defensas del husped. Las seales
son generalmente generada en el superficie de la clula a travs de la la
unin a receptores virus que son en s mismos molculas de sealizacin o
moduladores (Por ejemplo, receptores de factores de crecimiento,
receptores de quimioquinas, integrinas, y ganglisidos) y se puede activado
por el virus de la agrupacin de unin o inducida por el virus. Miembros de
la familia de SV40 y adenovirus C basar su estrategia de entrada totalmente
de sealizacin (Figura 2). Mediante la activacin de tirosina quinasas en las
caveolas, SV40 provoca la normalmente latente, ligandinducible va
endocitosis caveolar. Un segundo la seal se induce en el caveosome de
inducir el transporte caveosome-a ER (55). Al agrupar sus receptores
principales, adenovirus 2 activa una variedad de protenas quinasas,
fosfatidilinositol-3-OH quinasa, y pequeas GTPasas (82-84). Los principales
cambios se producen en la superficie celular dinmica, y en el transporte de
microtbulos mediada, que promuevan la internalizacin, la penetracin, y
el trfico intracelular del virus entrante. citomegalovirus humano, un virus
del herpes, activa varias vas de sealizacin a travs de la interaccin
entre glicoprotena de envoltura B y el receptor del factor de crecimiento
epidrmico (85).
Importacin Nuclear:
El ncleo proporciona excelentes funciones de "servicio" para la replicacin
del virus, que van desde DNA y polimerasas de ARN a ARN de empalme y
-modifying enzimas. Sin embargo, el ncleo es difcil de entrar y salir, y los
virus debe de nuevo confiar en mecanismos celulares [para revisiones,
vase (56, 86, 87)].
En las clulas en interfase, la importacin de virus y cpsides virales se
produce a travs de los NPC (Fig. 3). Para la orientacin, los virus utilizan la
localizacin nuclear seales y receptores de importacin citoslica. VIH-1 y
se unen a adenovirus importin 7 y humana virus del papiloma 11 y 45, virus
de la hepatitis B cpsidas, y nucleoprotenas del virus de la influenza, y (88-
92). Estudios recientes muestran que el lmite superior de dimetro de
partcula para el transporte a travs de la NPC es de 39 nm (93). Los virus
ms pequeos y cpsides, as como cpsidas helicoidales en extendida la
forma, por lo tanto, pueden ser importados en el ncleo sin desmontar o
deformacin. Entre las partculas icosadrica, parvovirus (Dimetro de 18 a
24 nm) y las cpsidas de virus de la hepatitis B (dimetro de 36 nm) son
probablemente importados intactos (94). Las cpsidas de virus de la
hepatitis B no tienen cubierta en la cesta en el lado nuclear del complejo de
poros (95). Virus y cpsides de mayor tamao deben ser deforme ni se
desmontan para permitir que el genoma para pasar a travs de la APN.
Adenovirus 2 se une a NUP214 / CAN, una protena localizada en la base de
los filamentos que se extienden en el citosol del poro nuclear (94) (Fig. 2).
Interaccin del virus unido con la histona H1 y importins y 7 induce
desmontaje del virus cpside. El ADN viral liberado as ha sido importado en
el nucleoplasma. Las cpsidas HSV-1 (Dimetro 120 nm) tambin se unen a
la CPN de una manera dependiente de importin, pero el se libera ADN a
travs de una de las icosadrica vrtices de la cpside sin ms desmontaje
cpside (96, 97). La cpside vaca permanece unido al complejo del poro por
horas despus de que el ADN ha sido expulsado (98). Con la excepcin de
los lentivirus, tales como VIH-1, los retrovirus no utilice el CPN para entrada
en el ncleo. Complejos de pre-integracin slo puede entrar en el ncleo
durante la mitosis cuando el nucleares sobre est temporalmente ausente,
lo que limita su infectividad de las clulas en divisin. La base molecular
para la captacin nuclear de lentivirus preintegration complejos no es del
todo clara, pero no hay pruebas que tres protenas virales son importantes:
la protena de la matriz, la enzima integrasa, y el vpr pequea protena
accesoria. Adems, es informado de que un pequeo solape de triple
cadena en el ADN provirus puede ser esencial al menos en algunas clulas.
Para una discusin ms detallada de este tema, vase (87, 99, 100).
Transferencia de clula a clula y sin infeccin de virus:
Por ltimo, la infeccin se puede transmitir directamente de clula a clula.
Los virus como el sarampin, la cual expresar en las protenas de la
envoltura de la membrana plasmtica que son fusognico a pH neutro, a
menudo inducir la fusin de clulas infectadas con infectada las clulas
vecinas. Por lo tanto, los genes virales pasan directamente de clula a
clula, se produce y la infeccin sin la participacin de las partculas virales.
En una estrategia alternativa para la clula a clula transferencia, las
partculas del virus vaccinia extracelular estn prcticamente empujado en
una clula adyacente por polimerizacin de actina localizada en el interior
de la clula infectada (101). La polimerizacin de actina se desencadena por
una protena viral que recluta a la membrana plasmtica WASP, Arp2 /3, y
otros factores celulares que promueven la polimerizacin de actina. La
observacin de que el VIH-1 y otros lentivirus en algunos tipos de clulas
brote en endosoma-como vacuolas ha planteado la posibilidad que las
partculas del virus pueden ser liberados por el clula infectada de manera
polarizada por los medios de secrecin regulada (102). VIH-1 partculas
pueden, en este caso, ser directamente transmitida desde un macrfago a
una clula T como parte de la interaccin normal de clula a clula. Tambin
hay evidencia de que dendrtica clulas, sin ser infectado, pueden
concentrarse VIH-1 en las regiones de contacto de clula a clula y por lo
tanto promover la infeccin (103, 104).
Perspectivas:
Los virus siguen representando una grave amenaza para la vida y el
bienestar de los seres humanos, animales, y otros organismos. En el
pasado, la bsqueda para los medicamentos antivirales se centr
principalmente en replicasas y otras enzimas virales. Esa entrada y
uncoating pueden servir como un objetivo de antivirales ha sido
recientemente demostrado por nuevos inhibidores contra la gripe
neuraminidasa y la protena de fusin de VIH-1 (105, 106). Con nuestra
informacin rpidamente alcanzar el nivel molecular, puede ser posible
desarrollar nuevos enfoques para bloquear la entrada de virus
.Aprovechando su capacidad para entrar clulas y expresar sus genes, los
virus se utilizan como vectores para la expresin de protenas
recombinantes en las clulas y para la produccin de protenas. En la
terapia gnica, los virus se utilizan para entregar genes a las clulas y
tejidos. Aunque todava hay muchos problemas con este tipo de terapia,
ms informacin sobre los receptores de virus y los mecanismos de entrada
ayudar a que los virus ms seguro y ms tiles como herramientas
teraputicas. Anlisis de virus tiene tradicionalmente proporcionado
informacin sobre los principios bsicos de la expresin gnica, la biologa
molecular, y cncer. Hoy en da, los virus siguen siendo de gran alcance
herramientas en muchas reas de investigacin, incluyendo biologa celular,
biologa molecular e inmunologa. El anlisis cuidadoso de virus-clula
temprano es probable que se extienda an nuestra
interaccionescomprensin incompleta de la membrana plasmtica dinmica,
la fusin de membranas, endoctica vas, y muchos otros aspectos de la
funcin celular.
Fig. 1. Micrografa electrnica
de la entrada del virus. virus
(A) Semliki Forest, una toga
envoltura sencilla (alfa) virus,
se une a la superficie del beb
de rin de hmster (BHK-21)
clulas en grandes
cantidades. Algunos de los
virus estn asociados con las
microvellosidades, mientras
que otros se localizan en
hendiduras que corresponden
a depresiones revestidas de
clatrina (flechas). [Cortesa: J.
Heuser y A. Helenius] (B)
partculas de virus Semliki
Forest en clathrincoated vesculas. [Cortesa: J. Kartenbeck y A. Helenius] (C)
de SV40 partculas (puntas de flecha) son internalizados por vesculas
caveolar ajustados y transportados a caveosomes que contienen mltiples
virus. [Cortesa: J. Kartenbeck y A. Helenius] (D) Las cpsides de humanos
virus de la hepatitis B (puntas de flecha) pasar a travs de los NPC en
trnsito desde el citoplasma al nucleoplasma. En el experimento se ilustra
en la esta micrografa, partculas de cpside recombinantes de tipo eran
micro-inyectados en ovocitos de Xenopus, y su interaccin con los poros
nucleares visualizado en secciones micrografa electrnica. Filas de cpsides
alineados dentro de los NPC (flechas). [Cortesa: N. Pante y M. Kann].

Fig. 2. La entrada de adenovirus, virus de la gripe, y SV40 en sus clulas

husped. (A) La inclusin de adenovirus 2. Los adenovirus son virus no
 envueltos de ADN con una
cpside icosadrica
compuesta por hexn
protenas, complejos de
base pentona, y fibras
homotrimrica. El proceso
de inscripcin incluye la
siguiente pasos (82-84): (1)
Las fibras se unen a la
Repblica Centroafricana.
(2) Las fibras se disocian, y
los pentones exponen RGD
secuencias que se unen a
integrinas. (3) La
agrupacin de las
integrinas se activa la
fosfatidilinositol-3-OH
quinasa, Rac y Cdc42, lo que resulta en reordenamientos del citoesqueleto.
(4) El complejo virus-integrina interioriza en las vesculas revestidas de
clatrina. (5) El virus se transporta a los endosomas tempranos. (6) A un pH
de 6, la base pentn sufre un cambio conformacional y el virus se escapa en
el citosol por lisis endosomal. (7) Las partculas de virus se unen dinena y
son transportados a lo largo de los microtbulos a la APN. (8) cpsides
muelle en la protena de la APN CAN / NUP214, desmontar, y (9) liberar el
virus ADN para el transporte a travs del poro. (B) Entrada del virus de la
influenza tipo A. A es una envoltura virus de ARN de cadena negativa.
Entrada procede a travs de endosomas por medio de los siguientes pasos
(37, 85, 108, 109): (1) Viral HA se une a las glicoprotenas que contienen
cido silico o glicolpidos. (2) Los virus internalizados por clathrin revestido
se transportan por medio de los endosomas tempranos a la endosomas
tardos. (3) pH bajo se activa el canal de iones de protena M2 en la
membrana viral, lo que permite la cpside interna que se acidific. (4)
fusin HA-mediada se produce entre la envoltura viral y la membrana
endosomal provocada por un pH bajo (5,5). (5) ribonucleoprotenas virales
(RNPs) separar una de la otra, se unen importin, y moverse a travs de la
APN y (6) en el ncleo. (C) Entrada de SV40. SV40 es un virus sin envoltura
de ADN que se replica en el ncleo. Sus escalones de entrada deben
parcialmente conocidos e incluyen los siguientes (53-56): (1) SV40 se une a
ganglisidos en el plasma membrana, y (2) se incluye en las balsas de
lpidos. (3) Despus de secuestro en las caveolas, la activacin de tirosina
quinasas induce la fosforilacin local que resulta en la disociacin, la
acumulacin de actina F-actina alrededor del caveolas, dynamin 2
reclutamiento y la activacin de la endocitosis caveolar. (4) caveolas que
contiene el virus se interiorizan y se entrega al caveosomes. (5) Los virus
induce formacin de vesculas sin caveolina y (6) se transporta por la
dinena por medio de los microtbulos a el RE liso. (7) El virus penetra en el
citosol de la ER, y (8) se produce la importacin nuclear a travs de CPN.
 Fig. 3. La importacin de virus y en el
cpsides ncleo. Cuatro formas
diferentes se muestran por que los virus
utilizan los NPC para la importacin.
(Izquierda) El genoma del virus de la
influenza est contenido dentro de los
ocho ARN subgenmicos que son
individualmente empaquetado en
complejos de ribonucleoprotenas. Una
vez que estos se liberan en el citosol despus de la fusin de la membrana
viral, que interactan con importin y se importan en el ncleo. Ellos son lo
suficientemente pequeos para pasar a travs de la NPC. (Izquierda Medio)
Las cpsides de HSV-1 se unen a la cara citoslica del poro, un vrtice en se
abre la cpside, y el ADN pasa a travs del poro dejando atrs una intacta
cpside vaca. (Oriente derecha) Los adenovirus tambin se unen a los
poros pero luego someterse desmontaje. Las partculas virales muelle con el
NPC protena CAN / NUP214 y desmontar con la ayuda de la histona H1. El
ADN viral con terminales de las protenas con enlaces covalentes se libera y
entra en el ncleo. (Derecha) Los parvovirus y las cpsides de virus de la
hepatitis B son lo suficientemente pequeos para pasar a travs del poro en
forma intacta. Uncoating ocurre en el ncleo.

La invasin bacteriana: los paradigmas

de Enteroinvasiva Patgenos
Pascale Cossart1 * y Philippe J. Sansonetti2 *
Las bacterias invasoras inducen activamente su propia absorcin por la
fagocitosis en clulas que normalmente no fagocticas y luego o bien
establecen un nicho protegido dentro de las que sobrevivir y replicarse, o
difunden de clula a clula por medio de un proceso basada en la motilidad
actina. Los mecanismos de entrada subyacente bacteriana, fagosoma
maduracin, y difusin revelan las estrategias comunes, as como las
tcticas nicas desarrolladas por especies individuales para establecer la
infeccin.
Establecer y mantener una infeccin exitosa, microbios patgenos han
desarrollado una va- riedad de estrategias para invadir el anfitrin, evitar o
resistir la respuesta inmune innata, daar las clulas y multiplicarse en
regiones especficas y estriles Mally nor-. Sobre la base de su capacidad
para hacer frente a estos problemas crticos, las bacterias se pueden
agrupar en diferentes categoras. Aqu se revisan los llamados bacterias
invasivas, es decir, bacterias que son capaces de inducir su propia
fagocitosis en clulas que normalmente no fagocticas. Nos centramos en
las tcticas utilizadas por las bacterias enteropatgenas para desencadenar
su absorcin por las clulas epiteliales y discutir sus estilos de vida
intracelular. Los mecanismos de gens entryandlife-
stylesofotherintracellularpatho- han sido revisados en otras partes (1-4).
Durante la fagocitosis por los fagocitos, las bacterias desempean un papel
pasivo. Por el contrario, durante la fagocitosis inducida por bacterias, la
Mycobacterium bacteriemia es el jugador clave y activo en la compleja
interaccin entre el microbio invasor y la clula husped (5). Otro
importante componente es el citoesqueleto, cuya plasticidad es crtica y
explotados de manera ptima. Despus de la internalizacin, algunas
bacterias permanecen en una vacuola, en el que se replican. Impiden la
maduracin normal y la trata del fagosoma y entorpece sus actividades
normales bacteriolgicas. Otras bacterias escapar de la vacuola y se
replican en el citosol. En algunos casos, tambin se mueven y difundir por
medio de un proceso basada en la motilidad actina.
Cmo la clula detecta los intrusos bacterianos y ajusta sus programas de
transcripcin y traduccin a su nueva vida con un parsito es un tema
importante. La apoptosis y la apoptosis anti-, as como ciclo-celular y vas de
sealizacin relacionadas infor--matorios, son reprogramado despus de la
infeccin para ayudar a la clula para sobrevivir a la tensin inducida por la
infeccin. El xito de una infeccin depende de los mensajes que los dos
jugadores-la bacteria y la clula se envan entre s. En cada paso del
proceso infeccioso, la bacteria explota la maquinaria de la clula husped
para su propio beneficio.
Mecanismos de entrada entre en las clulas no fagocticas tales como
clulas epiteliales intestinal, algunos patgenos microbianos expresan una
protena de superficie capaz de unirse a receptores de la superficie eukary-
ticas menudo involucrados en la matriz de clula o la adhesin clula-
clula. La expresin de esta protena conduce a la formacin de un ole vacu-
que envuelve a la bacteria a travs de un proceso de "Pering zip-" en el que
relativamente modestos reordenamientos del citoesqueleto y las
extensiones de la membrana se producen en respuesta al acoplamiento del
receptor. Las interacciones iniciales entre la protena bacteriana y su
receptor desencadenan una cascada de seales, incluyendo fosforilaciones
de protenas y / o reclutamiento de res adaptaciones y los efectores, y la
activacin de los componentes Eton cytoskel- que culminan en el cierre de
taza ic phagocyt- y la internalizacin bacteriana . Otros patgenos han
ideado mecanismos para unir una protena que puede en s mismo actuar
como un puente entre la bacteria y un receptor transmembrana, que luego
media la entrada proceso pro-. Por ltimo, los patgenos tambin pueden
pasar por alto la primera etapa de la adhesin y de interactuar directamente
con la maquinaria celular que regula la dinmica del citoesqueleto de actina
mediante la inyeccin de fectors zos a travs de un sistema secretor
dedicado. Las molculas efectoras causan cambios toskeletal ci- masivas
que desencadenan la formacin de un bolsillo macropinocytic, dbilmente
unido al cuerpo bacteriana.
El Mecanismo de cremallera de entrada Yersinia pseudotuberculosis y
Listeria monocytogenes ambas protenas de adhesin celular
transmembrana del arns como receptores para la entrada en las clulas de
mamferos (Figs. 1A y 2A). La entrada se puede dividir en tres etapas
sucesivas: (i) de contacto y adherencia. Este paso es independiente del
citoesqueleto de actina y slo implica el ligando y su receptor bacteriano.
Conduce al receptor de la agrupacin. (Ii) la formacin de taza fagocticas.
Este paso se desencadenado por las seales transitorias que se producen
despus de la formacin de los primeros complejos ligando-receptor y que
se propagan alrededor del microbio vading in-. Estas seales inducen la
polimerizacin de actina y la extensin de la membrana. (Iii) el cierre de
taza de fagocitosis y retraccin, y despolimerizacin de la actina. La
protena de membrana externa Yersinia in- Vasin une a los receptores que
tienen la cadena? 1 y, normalmente, estn implicados en ad- herence de las
clulas a la matriz extracelular (6) de la integrina. Invasina no posee el
motivo RGD presente en la fibronectina, pero ambas protenas interacten
con las integrinas por un dominio estructuralmente similares. Invasina tiene
una mayor afinidad por tegrins entrada y puede oligomerizar, la induccin
de la agrupacin sonrisa integracin y eficiente naling seal aguas abajo. La
cola citoplasmtica de la cadena? 1, que normalmente interacta con el
citoesqueleto en los complejos de coordinacin de placas de adhesin, es
crtico para la entrada, pero, sorprendentemente, las alteraciones de este
dominio que deterioran la interaccin con el citoesqueleto aumento
internalizacin cin. Por lo tanto, una menor afinidad de la integrina para el
citoesqueleto podra permitir una mayor movilidad de los receptores en la
membrana. La activacin de las integrinas conduce a la fosforilacin de la
tirosina eventos necesarios para la entrada. La tirosina quinasa FAK
(adhesin focal nase Ki) es el candidato ms atractivo para transmitir una
seal de integrinas agrupados al citoesqueleto, debido a que la cadena 1?
Cy dominio toplasmic se une a FAK, y las mutaciones Nant-inhibidor
dominacin en FAK perjudicar fuertemente la absorcin de invasina mediada
(7). Src, fosfoinostido 3-quinasa (PI 3-quinasa).