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MICROBIOLOGA GENERAL
ROGER VALLE
JORGE ARBOLEDA
ANTONIO INSIGNARES
ROBERTO JOS GARCIA-ALZATE
CONTENIDO
Pgina
INTRODUCCIN 4
NORMAS DE CONDUCTA EN EL LABORATORIO 5
PRECAUCIONES PARA EL USO DEL MICROSCOPIO 5
EVALUACION 7
PLAN DE TRABAJO 8
LISTA DE MATERIALES (POR GRUPO) 8
LABORATORIO No. 1 9
DISTRIBUCION Y UBICUIDAD DE LOS MICROORGANISMOS 9
LABORATORIO No. 2 12
TCNICAS DE CULTIVO Y AISLAMIENTO DE BACTERIAS 12
LABORATORIO No. 3 21
TCNICAS DE COLORACIN BACTERIANA (TENCIN SIMPLE) 21
LABORATORIO No. 4 28
TCNICAS DE COLORACIN BACTERIANA (TENCIN DIFERENCIAL) 28
LABORATORIO No. 5- 7 32
METABOLISMO BACTERIANO 32
LABORATORIO No.8-9 38
METODO PARA EL RECUENTO TOTAL DE MICROORGANISMOS VIABLES EN UNA MUESTRA 38
LABORATORIO No.9. 42
ESTIMACIN DEL NMERO DE BACTERIAS POR MTODOS INDIRECTOS (TURDIMETRA) 42
LABORATORIO No.10 45
SENBILIDAD BACTERIANA 45
LABORATORIO No.11 47
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HONGOS 47
LABORATORIO No.12. 49
ALGUNOS PARASITOS DE IMPORTANCIA HUMANA 49
LABORATORIO No.13. Error! Marcador no definido.
VIRUS Error! Marcador no definido.
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INTRODUCCIN
EVALUACION
Resumen: Debe contener la informacin necesaria para darle al lector una idea
precisa de la actividad realizada, la metodologa, los resultados obtenidos y las
conclusiones (Mximo 250 caracteres).
Introduccin: Debe responder al porqu y para qu se realiz esta actividad.
Debe contener el contexto terico en el cual se ubica el tema, por ello requiere de
una revisin bibliogrfica previa sobre la temtica a tratar (Mximo 250 palabra).
Objetivos: Debe responder al que de la prctica realizada. Se recomienda
formular un solo objetivo general, coherente con el laboratorio llevado a cabo, y los
objetivos especficos necesarios para lograr el objetivo general.
Metodologa: Describe en forma organizada y precisa, el cmo se alcanz cada
uno de los objetivos propuestos. Deben detallarse los materiales y equipos
utilizados durante la prctica, as como los procedimientos realizados, tcnicas,
actividades y dems estrategias metodolgicas que se requirieron (Mximo 250
palabra).
Resultados: Se detallan los logros obtenidos con los procedimientos realizados.
Se puede recurrir a esquemas, tablas, grficos o dibujos para demostrar el
conocimiento adquirido.
Conclusiones: Permiten evidenciar, de modo concreto, claro y preciso el logro de
los objetivos sealados, y debe estar apoyadas y relacionadas con el
conocimiento terico.
Bibliografa: Anotar las tres referencias principales en los cuales se apoy.
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PLAN DE TRABAJO
Cada grupo de trabajo estar conformado por 3-4 estudiantes, los cuales
realizarn durante todo el semestre las prcticas de laboratorio. Cada grupo debe
tener los siguientes materiales:
1. Bata de laboratorio (cada estudiantes)
2. Un Marcador (Sharpie)
3. Un encendedor
4. Una botella de jabn lquido
5. Dos rollos de cinta de enmascarar (1 cm y 2 cm)
6. Un paquete de papel de arroz
7. Un tapa bocas y gorro
Adems de los implementos que debe tener cada grupo de trabajo, el curso debe
entregar los siguientes materiales al monitor asignado:
1. Una botella de alcohol antisptico
2. Una bolsa de detergente en polvo (2, 5 kg)
3. Un par de guantes para lavado
4. Dos rollos de papel absorbente (papel toalla)
5. Una bolsa de algodn (para torundas)
6. Dos rollos de papel aluminio (3 metros)
7. Tres caja de portaobjetos (50 lminas)
8. Una caja de cubreobjetos
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LABORATORIO No. 1
DISTRIBUCION Y UBICUIDAD DE LOS MICROORGANISMOS
INTRODUCCIN
Los microorganismos se encuentran en muchos ambientes naturales. Pueden estar
localizados en suelo, agua, aire, alimentos, tracto intestinal, piel y otros rganos de
animales, el hombre y otros seres vivos. Solo unos pocos lugares en Ia naturaleza como
crteres de volcanes activos y tejidos sanos de rganos internos del hombre y animales
estn libres de ellos.
Su amplia distribucin puede ser demostrada exponiendo medios estriles al contacto con
el medio ambiente y diferentes superficies.
OBJETIVOS
1. Conocer algunas de las tcnicas utilizadas para demostrar Ia existencia de
microorganismos en un ambiente determinado.
2. Distinguir las diferentes formas de crecimiento de estos microorganismos en los
medios de cultivo.
MATERIALES
PROCEDIMIENTO
Muestras de Ia poblacin bacteriana ambiental: Coloque una caja de Petri
sobre cualquier Iugar del laboratorio, destpela y djela expuesta al medio
ambiente durante 15 minutes. Despus de este periodo tpela y mrquela
adecuadamente. lncube dejando Ia caja invertida a 37 C de 24 a 48 horas.
RESULTADOS
Despus del perodo de incubacin, observe cada una de las cajas inoculadas. Note las
diferencias entre las colonias de acuerdo a las siguientes caractersticas:
1. Color
2. Forma
3. Tamao
4. Cantidad de crecimiento (escaso, moderado, abundante)
CONSULTAR SOBRE
Distintos tipos de medios de cultivo.
Preparacin y esterilizacin de medios de cultivo.
Mtodos de esterilizacin
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LABORATORIO No. 2
TCNICAS DE CULTIVO Y AISLAMIENTO DE BACTERIAS
INTRODUCCIN
En Ia naturaleza, las bacterias hacen parte de los diferentes ecosistemas. Como los
dems seres vivos, para su crecimiento necesitan nutrientes apropiados y condiciones
ambientales optimas, tales como pH, presin osmtica, oxgeno, temperatura y humedad
entre otros.
Para el cultivo, aislamiento, identificacin y determinacin de las actividades metablicas
de las bacterias en el laboratorio se utilizan medios adecuados, los cuales segn su
consistencia pueden ser slidos, semi-slidos y lquidos; esta consistencia se obtiene por
Ia adicin de un polisacrido denominado agar-agar extrado de algas marinas del genero
Gellidium, su concentracin en el medio slido es de 1,5% a 2%, en el semi-solido de
0,5% y los medios lquidos son sin agar.
Los medios simples se preparan con agua, extracto de carne, peptona, extracto de
levadura, sales inorgnicas y carbohidratos. A algunos medios se les adicionan
sustancias como: Lquido asctico, vitaminas, antibiticos, colorantes, sales biliares,
sangre y suero o glicerina, obtenindose de esta forma, medios enriquecidos, de
enriquecimiento, diferenciales, selectivos y de transporte
OBJETIVOS
1. Conocer los mtodos ms utilizados para el aislamiento y cultivo de bacterias a
partir de diferentes muestras.
2. Conocer Ia composicin y el uso de los diferentes medios de cultivo utilizados en
el laboratorio.
3. Diferenciar las caractersticas de crecimiento de las bacterias, segn el medio de
cultivo utilizado.
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MATERIALES Y REACTIVOS
PROCEDIMIENTO
b. Introduzca el asa en el tubo sin tocar las paredes y tome un poco del
cultivo, flamee nuevamente la boca del tubo, tpelo y djelo en una gradilla.
c. Tome el tubo de caldo nutritivo estril en el cual va a colocar la muestra,
destpelo, flameando la boca el tubo con el mechero e introduzca el asa
con la muestra obtenida. Realice movimientos de rotacin con el asa para
emulsionar con el caldo las paredes del tubo. Retire el asa, flamee la boca
del tubo y tape.
d. Esterilice el asa en el mechero despus de usarla.
e. Incube los tubos a 37C por 24 horas. Observar el crecimiento obtenido
RESULTADOS
Despus del perodo de incubacin, observe cada una de las cajas y tubos inoculados.
Recopilar la informacin de la caracterizacin colonial de cada cepa. De acuerdo a sus
observaciones identifique las especies presentes en la muestra problema.
Crecimiento
cultivo en Tubos con caldo
Crecimiento:
color:
CONSULTAR SOBRE
LABORATORIO No. 3
TCNICAS DE COLORACIN BACTERIANA (TENCIN SIMPLE)
INTRODUCCIN
La observacin microscpica de las bacterias nos permite diferenciar tres de las formas
ms tpicas que son: cocos, bacilos y espirales entre otras. Los cocos son clulas
esfricas que se pueden agrupar en parejas (Diplococos), racimos (Estafilococos),
cadenas (Estreptococos), de a cuatro (Ttradas) en cubos (Sarcinas). Estas formas de
agrupacin estn determinadas genticamente.
Los bacilos son clulas en forma de bastn o varilla que pueden presentarse
individualmente o agrupadas al asar, formando cadenas, empalizadas o estacas.
Las espirales son clulas que presentan forma helicoidal y generalmente no se agrupan.
Las anteriores formas bacterianas se pueden observar per medio de los siguientes
mtodos:
La carga del ion coloreado, puede ser un Anin o un Catin, segn el caso, los colorantes
se denominan:
Colorante cido: Son aquellos en los que el cromgeno al ser ionizado toma una carga
negativa presentando una fuerte afinidad por constituyentes celulares con carga positiva.
Ejemplo: Anin coloreado EO- y catin incoloro Na+: Eosinato de Sodio (EO- Na+)
Colorante Bsico: Son aquellos en los que el cromgeno al ser ionizado toma una carga
positiva presentando una fuerte afinidad por constituyentes celulares con carga negativa
Ejemplo: Cation coloreado AM+ y anin incoloro Cl-: Clorhidrato de Azul de Metileno (Cl-
AM+)
En la actualidad son muchas las tcnicas de tincin que se encuentran disponibles para
visualizacin, diferenciacin y separacin de microorganismos en trminos de sus
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3 Fijacin al calor: Para evitar que los microorganismos sean barridos o prdida de la
muestra durante los procesos de lavado durante la tincin, la muestra debe fijarse o
adherirse a la lmina mediante calor, que hace que las protenas se coagulen. La
fijacin se obtiene pasando rpidamente dos a tres veces el frotis sobre la llama del
mechero.
OBJETIVOS
1 Conocer algunos de los mtodos de observacin de las bacterias.
2 Diferenciar las formas de accin de los colorantes, sobre Ia clula, de acuerdo al
carcter qumico de stos (cidos o bsicos).
3 Diferenciar las caractersticas morfolgicas, de agrupacin y de tincin de las
bacterias observadas al microscopio
MATERIALES Y REACTIVOS:
PROCEDIMIENTO
2. Preparaciones coloreadas
a. Con colorantes bsicos. (Coloracin simple o directa).
Los colorantes bsicos mas empleados son: azul de metileno, cristal violeta,
safranina, carbofucsina y verde de malaquita.
RESULTADOS.
CONSULTAR SOBRE
Por qu los colorantes bsicos son ms efectivos para las tinciones bacterianas
que los tintes cidos?
Una tincin simple puede ser usada para identificar algo mas que las
caracteristicas morfologicas de un microorganismo? Explique.
Si se te olvidara fijar la muestra durante la aplicacin del procedimiento de tincin
simple, Qu diferencias crees que encontrarias al mirar tu muestra en
comparacin con unca correctamente fijada?
Si durante una charla de amigos uno de ellos derrama caf sobre tu camiseta y
luego de varias labadas no puedes recuperar su color original; podemos decir
que el caf es un verdadero tinte biologco o es solo una sustancia capaz de
impartir color? Explica tu razonamiento.
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LABORATORIO No. 4
TCNICAS DE COLORACIN BACTERIANA (TENCIN DIFERENCIAL)
INTRODUCCIN
Las tinciones diferenciales son aquellas que se usan para diferenciar de manera ms
explcita los microorganismos. Las tinciones diferenciales ms importantes que se
empleanen bacteriologa son las de Gram y la tincin cido-resistente. Ambas tinciones se
utilizan para obtener informacin acerca de la composicin de las capas de la pared
celular de las clulas bacterianas.
Las bacterias Gram negativas, poseen una delgada capa de peptidoglicano pero rica en
lpidos como el lipopolisacarido o LPS que son disueltos y se permite la salida del
complejo colorante-mordiente (cristal violeta-yodo), perdiendo el color purpura propio del
cristal violeta y deben ser coloreadas nuevamente con el colorante secundario o de
contraste como .la safranina, que es un colorante de contraste de color rojo, dicho
colorante da un color rojo claro a las clulas decoloradas.
Tincin de Ziehl-Neels: Esta coloracin fue desarrollada inicialmente por Paul Ehrlich
para demostrar la presencia de los bacilos causantes de tuberculosois en muestras
clnicas de pacientes. La tcnica es capaz de diferenciar dos grandes grupos de bacterias:
bacilos cido alcohol resistentes (BAAR) positivas y BAAR negativas.
OBJETIVOS
MATERIALES
Portaobjetos
Papel absorbente
Puente de coloracin
Mechero de alcohol
Aceite de inmersin
Reactivos requeridos para Ia coloracion de Gram: Cristal violeta, Safranina, Lugol y
alcohol acetona.
Asas bacteriolgicas
Microscopio
Cultivos de estreptococos, estafilococos, bacilos Gram (+) y Gram (-)
PROCEDIMIENTO
RESULTADOS.
CONSULTAR SOBRE
LABORATORIO No. 5- 7
METABOLISMO BACTERIANO
INTRODUCCIN
El nmero y Ia clase de enzimas bacterianas son diferentes, debido a que cada enzima
est fabricada bajo un control gentico, per lo cual se dan variaciones en Ia utilizacin de
los sustratos. Estas variaciones se utilizan a su vez para ayudar a determinar los
diferentes gneros y especies bacterianas.
Prueba del citrato: Determina si una bacteria es capaz de utilizar el citrato como fuente
de carbono. Se utiliza el agar citrato de Simmons inclinado, el cual contiene como
principal componente citrato de sodio como nica fuente de carbono y azul de bromotimol
como indicador de pH. Las bacterias que lo utilizan alcalinizan el medio, lo cual se
manifiesta con un cambio del color verde a azul.
2 Prueba del lndol: Seala Ia capacidad de las bacterias para oxidar el triptfano. La
accin enzimtica de Ia triptofanasa produce varios metabolitos entre los cuales
esta el lndol.
Triptofano Triptofanasa lndol + cido pirvico + Amonaco
Desaminacin
.
El indol producido se detecta adicionndole al cultivo dos o tres gotas del reactivo
de Kovacs (P-Dimetilaminobenzaldehido)
.
lndol +(Kovacs) anillo (color rojo violaceo) l
OBJETIVOS
MATERIALES
Papel absorbente
Mechero de alcohol
Asas bacteriolgicas
2 cajas con agar almidn
2 tubos con campana de Durham y 5mL de cada uno de los siguientes medios:
glucosa rojo de fenol, lactosa rojo de fenol, sacarosa rojo de fenol y manitol-rojo de
fenol.
2 tubos con 7mLde medio SIM (Sulfuro, Indl, Motilidad)
2 tubos con 7mL de medio TSI (triple azcar hierro) o Klinger (dos azucares,
hierro) solidificados en forma inclinada
2 tubos con 7mL medio de citrato de Simmons solidificados en forma inclinada
2 tubos con 7mL de caldo urea
Portaobjetos
H202 (Perxido de hidrgeno)
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CURSO: Microbiologa General
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PROCEDIMIENTO
El profesor proporcionar los cultivos puros de Bacillus sp, E. coli, Klebslella sp. o
Stafilococcus sp. a cada uno de los equipos. Adems de un cultivo problema.
Todos los tubos y cajas deben etiquetarse e inocularse de acuerdo a las
siguientes instrucciones:
Nota: Adems de estas pruebas, existen actualmente otras sofisticadas y rpidas que
permiten una determinacin bastante confiable de las diferentes especies de bacterias,
ejemplo, el sistema API y Micro-ID.
RESULTADOS.
Prueba para Ia catalasa: Diferencia entre especies de bacterias que utilizan el oxigeno.
La catalasa es una enzima que esta relacionada con Ia capacidad de un organismo para
utilizar el oxigeno. Esta enzima cataliza Ia degradacin del agua oxigenada en agua y
oxigeno, no se encuentra en los organismos anaerobios, lo cual produce en stos Ia
muerte cuando se encuentran en presencia de oxigeno. Para esta prueba, proceda de Ia
siguiente manera:
1. Esterilice el asa.
1. Tome varias colonias de un cultivo de Staphylococcus spp. y colquelas sobre un
portaobjetos limpio.
2. Agregue sobre las colonias una gota de H202 al 30%.
3. Observe Ia produccin de pequeas burbujas, lo que indica Ia presencia de Ia
catalasa en las bacterias. Repita el proceso con una cepa problema.
exoenzima elaborada par Ia mayora de los Staphylococcus aureus invierte Ia accin del
anticoagulante (en este caso el citrato de sodio). Cuando a este plasma se le inocula Ia
cepa patgena del S. aureus, Ia coagulacin se realiza tal como si no se hubiera aadido
citrato. Para esta prueba, proceda as:
1. Esterilice el asa.
2. Agregue 0,5 ml de plasma citratado a cada tubo de ensayo (2 tubos)
3. Tome una asada de colonias de S. aureus (coagulasa positiva) e introduzca en
uno de los tubos con plasma.
4. Proceda de igual forma con el tubo problema.
5. Observe por una o dos horas, revisando cada media hora. cuando el plasma ya
no fluya como al principio, Ia prueba es positiva, en caso contrario es negativa.
KLIGLER IMVIC
Ureasa
Carbox
Motilid
Lisina
ilasa
Fondo Inclinacin Indol Rojo Voges Citro 2
ad
de
Familia Enterobacteriaceae HS
de Simmo
Metilo ns
+ +
1 Escherichia coli A A + + - - - V - V
2 Shigella spp A K V + - - - - - -
- +/- 1
3 Klebsiella spp A A V V + + - - V +
4 Enterobacter A A - - + + - + - +
aergenes
d
5 Serratia marcescens A K - V + + - + V +
6 Salmonella spp A K - + - V + + - +
2 - + d
7 Citrobacter freundii A V V + - + V + V -
8 Proteus vulgaris A K V + - + + + + -
9 Pseudomonadaceae
10 Pseudomona aerugin K K - - - + - + V -
A-cido
A- cido-gas
A- cido con produccin lenta de gas
K- Alcalino
V- Variable
-
V Variable
1
-Lento
2
-Puede ser retardado
9: No es Enterobacteria
LABORATORIO No.8-9
METODO PARA EL RECUENTO TOTAL DE MICROORGANISMOS VIABLES
EN UNA MUESTRA
INTRODUCCIN
Los estudios que involucran el anlisis de materiales como alimentos, agua, leche y en
algunos casos aire, requiere la cuantificacin de los microorganismos presentes en dicha
sustancia y se han diseados muchos mtodos para conseguir esto, incluyendo conteo
directo al microscopio, uso de contadores electrnicos de clulas, mtodos qumicos para
la estimacin de la masa celular o de constituyentes celulares, medida turbidimtrica y el
mtodo de diluciones seriadas-conteo en caja. A continuacin describiremos de modo
general cada uno de ellos:
OBJETIVOS
MATERIALES
PROCEDIMIENTO
1. Funda los tubos con agar y mantngalos a 45C en el bao Mara con
termostato
2. Rotule el cultivo de E. coli como tubo nmero 1 y los tubos con 9mL de
agua destilada con los nmeros del 2 al 8. Rotule las cajas de Petri como
1A, 1B, 2A, 2B, 3A y 3B.
3. Agite el tubo 1 para asegurarse que las clulas bacterianas estn bien
homogneas y dispersas en el cultivo.
4. Con una pipeta estril y aspticamente, transfiera 1mL del tubo 1 al tubo 2.
Descarte la pipeta en solucin desinfectante.
5. Mezcle bien el tubo 2 y con una nueva pipeta trasfiera 1mL del tubo 2 al
tubo 3. Descarte la pipeta en la solucin desinfectante.
6. Contine haciendo las diluciones de cada tubo transfiriendo con una nueva
pipeta 1mL del tubo hasta llegar al tubo 8. Descarte la pipeta en la solucin
desinfectante.
7. Adicione a cada uno de las cajas de Petri, los volmenes de muestra como
se indica a continuacin.
8. Asegrese que el agar este fundido y a 45C. Seque la parte externa de los
tubos con un papel toalla. Usando tcnicas aspticas, vierta un tubo de
agar dentro del tubo 1A y mezcle por rotacin suave para asegurar una
distribucin uniforme de las clulas en el medio.
9. Repita el paso el paso anterior con las dems cajas.
10. Una vez el agar se halla solidificado incube las cajas en posicin invertida a
37C durante 24 horas.
OBSERVACIONES Y RESULTADOS
1. Observe todas las colonias sobre las cajas. Las cajas que contengas ms de 300
colonias no deben ser contados y sern reportados como muy numerosos para
contar (MNPC). Cajas con menos de 30 colonias sern reportados como muy
pocas para contar (MPPC). Cuente y reporte slo las cajas que contengas entre
30 y 300 colonias.
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Ejemplo:
Colonias contadas = 50
Dilucin = 10-6
Volumen aadido = 1mL
Clulas/mL = 50 x 1.000.000 x 1
Clulas/mL = 50.000.000 o 5,0X107cel/mL
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LABORATORIO No.9.
ESTIMACIN DEL CRECIMIENTO Y EL NMERO DE BACTERIAS POR
MTODOS INDIRECTOS (TURBIDIMETRA)
INTRODUCCIN
Es importante tener en cuenta para visualizar los primeros puntos o trazas de turbidez de
haber ms de un milln de clulas bacterianas por mililitro de muestra y se precisan de 10
a 100 millones de bacterias por mililitro para que la suspensin se vuelvo lo bastante
turbia como para ser leda en un espectrofotmetro. Por lo tanto, la turbidemetra no es un
mtodo til para medir contaminacin de lquidos con un nmero relativamente pequeo
de bacterias.
OBJETIVOS
Conocer y estimar el crecimiento bacteriano mediante una curva de cintica de la
biomasa celular.
MATERIALES
45 mL de caldo nutritivo
Espectrofotmetro
Gradillas
Mecheros
Pipetas estriles de 5mL
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CURSO: Microbiologa General
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Propipeteador
Solucin desinfectante
Marcador
Cultivo de 24-48 horas de E. coli en caldo nutritivo (50 mL).
PROCEDIMIENTO
OBSERVACIONES Y RESULTADOS
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LABORATORIO No.10
SENBILIDAD BACTERIANA (CONTROL MICROBIOLGICO)
INTRODUCCIN
Es importante destacar que segn sus caractersticas, los agentes que se utilizan para el
controlar los microorganismos, ocasionan diferentes efectos sobre su estructuras, entre
las que podemos mencionar: daos en Ia pared, Ia membrana celular, los cidos
nuclecos, el citoplasma o en los ribosomas, as como Ia inhibicin de Ia actividad
metablica.
OBJETIVOS
Conocer y. evaluar Ia accin de los antibiticos sobre los microorganismos
utilizando el mtodo del antibiograma, el cual consiste en discos de papel filtro
impregnados con distintos antibiticos.
MATERIALES
PROCEDIMIENTO
OBSERVACIONES Y RESULTADOS
Con la ayuda de una regleta mida el dimetro del halo de inhibicin por el fondo de
la caja, la cual se ilumina con la luz reflejada y clasifique las cepas en trminos de
resistente (R), intermedio (I) o sensible (S), dependiendo del dimetro del halo de
inhibicin.
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LABORATORIO No.11
HONGOS
INTRODUCCIN
Los hongos son organismos eucariticos, porque poseen un verdadero ncleo delimitado
y definido. Se encuentran ampliamente distribuidos en el suelo, en el aire, en el agua y
como parsitos de plantas, animales y el hombre. Tambin como contaminantes de
alimentos y otras sustancias.
Muchas especies de hongos descomponen Ia materia orgnica para que pueda ser
utilizada por las plantas; otras especies se utilizan en procesos industriales como en Ia
produccin de cidos, alcoholes y antibiticos, y unos pocos causan enfermedades en los
seres vivos, especialmente en las plantas.
Los hongos se presentan en dos formas: Como Mohos cuando sus estructuras son de
forma filamentosa y crecen en los cultivos en forma algodonosa o como Levaduras
cuando son unicelulares y su crecimiento en los medios de cultivo es parecido al de las
bacterias.
Los hongos se clasifican en cuatro clases atendiendo a Ia forma como se reproducen, as:
Zygomicetos, los que poseen esporangiosporas para Ia reproduccin asexual y
zigosporas para Ia sexual.
Ascomicetos, los que poseen ascosporas para Ia reproduccin sexual y
conidiosporas para Ia asexual.
Basidiomicetos, los que poseen basidiosporas para Ia reproduccin sexual y
oidiosporas o artrosporas para Ia asexual.
Deuteromicetos, los que solamente se les conoce reproduccin asexual por media
de micro o macroconidias.
Para la clasificacin de los hongos se utiliza una serie de herramientas, tales como las
caractersticas morfolgicas microscpicas y macroscpicas entre otras, para su inclusin
en un grupo taxonmico, igualmente para darle una denominacin definitiva
(nomenclatura) se requiere adems, identificar sus estructuras de reproduccin y evaluar
su fisiologa.
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OBJETIVOS
MATERIALES
Estiletes o asas de aguja
Cubre y portaobjetos
Solucin salina al 0,85%
Lugol
Azul de lactofenol
Cultivo de Levadura (Candida spp) en medio Sabouraud o Mycosel.
Cultivo de Mohos (Rhizopus sp, Penecillium sp, Aspergiflus sp.)-
PROCEDIMIENTO
Observacin de Mohos
1. Examine las colonias de hongos presentes en las cajas con Agar Sabouraud
y/o Mycosel. Describa su color, su contextura, su forma, etc.
2. Prepare una placa tomando con el asa estril, una muestra del cultivo;
depostela en un portaobjeto y adicinele una gota de azul de lactofenol; luego
pngale una laminilla y observe al microscopio con objetivo 1 OX y 43X. Haga
esquemas del tipo de hifa y rganos de reproduccin e identifique el gnero del
moho observado.
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INTRODUCCIN
Para la clasificacin de los parsitos se utiliza una serie de herramientas, tales como las
caractersticas morfolgicas microscpicas y macroscpicas, as como su modo de
infestacin.
Para la observacin de los parsitos tisulares como los hemoparsitos, la tcnica para su
diagnstico es la gota gruesa y se realiza de la siguiente manera: En el centro de una
placa coloque una gota de sangre y extindala en zig-zag en una superficie de un
centmetro aproximadamente. Posteriormente, deje secar la preparacin utilizando una
estufa a 37C por 1 2 horas, o temperatura ambiente y por ltimo coloree con Wright o
Giemsa
Otros parsitos de importancia mdica son los ectopsitos como el Pthirus pubis,
Pedculos humanus, o Sarcoptes scabiei que afectan a la piel de los animales de dos
formas: ectodrmica (sobre la piel) o contraindica (dentro de la piel).
OBJETIVOS
Conocer las principales caractersticas morfolgicas de algunos parsitos de
importancia en humanos.
Adquirir destreza en el manejo de las tcnicas ms utilizadas en el diagnstico de
estos parasitos.
MATERIALES
Guantes
Placas de demostracin
Especmenes conservados en formol
Solucin salina
Cubre y portaobjetos
Solucin salina al 0,85%
Lugol
Palillo de madera para hisopos
Muestra problema (materia fecal)
PROCEDIMIENTO