Coleta de sangue: técnicas para diagnóstico de DST, HIV e hepatites

COLETA DE SANGUE
Diagnstico e monitoramento das DST, Aids e Hepatites Virais
Ministrio da Sade
Secretaria de Vigilncia em Sade
Departamento de DST, Aids e Hepatites Virais
MINISTRIO DA SADE
MINISTRO DE ESTADO DA SADE

Jos Gomes Temporo
SECRETARIA DE VIGILNCIA EM SADE

Gerson Oliveira Penna
DEPARTAMENTO DE DST, Aids e Hepatites Virais

Dirceu Bartolomeu Greco
UNIDADE DE LABORATRIO - ULAB

Lilian Amaral Inocncio
COORDENAO DO TELELAB - ULAB

Nvea Orm de Oliveira Guedes
Nbia Gonalves Dias
COORDENAO DE PRODUO DO PROJETO TELELAB 2009/2010

Maria Luiza Bazzo UFSC
AUTORES:
Elaine Sanae Sumikawa
Elizabeth Martins Hermes
Flvia Martinello
Leonardo Rapone da Motta
Lilian Amaral Inocncio
Luiz Alberto Peregrino Ferreira
Maria Luiza Bazzo
Miriam Franchini
REVISO TCNICA
Roberto Ferreira de Melo
PROJETO GRFICO, EDIO E DIAGRAMAO

Virtual Publicidade Ltda
DESIGN INSTRUCIONAL
Luciane Sato
ILUSTRAES E FOTOS INDITAS

Maurcio Muniz
FOTOS DOS VDEOS

Projeto Telelab 2009/2010
TIRAGEM: Tiragem: 1 edio 2010 6000 exemplares
permitida a reproduo parcial ou total desde que citada a fonte.
PRODUO, DISTRIBUIO E INFORMAES:

Ministrio da Sade
Secretaria de Vigilncia em Sade
Departamento de DST, Aids e Hepatites Virais
Coordenao Geral de Sangue e Hemoderivados
0800 61 24 36
www.aids.gov.br/telelab
telelab@aids.gov.br ou telelab.sangue@aids.gov.br
Coleta de sangue: Diagnstico e monitoramento das DST, Aids e Hepatites Virais: Braslia, Ministrio da Sade, Departamento de DST, Aids e
Hepatites Virais. 2010, 98 p. (Srie TELELAB).
Apresentao
Seja bem-vindo (a) ao Sistema de Educao a Distncia TELELAB.

Os cursos foram elaborados dentro de uma abordagem que favorece a
aquisio de conhecimentos e o repensar da prtica profissional.
Para o sucesso da aprendizagem e a garantia de um excelente
aproveitamento, alm de assistir ao vdeo, leia esse manual e releia as
informaes sempre que tiver dvidas em sua prtica diria.
Neste Manual de Coleta de Sangue so apresentadas as tcnicas
para a coleta de amostras destinadas realizao de exames sorolgicos
para sfilis, HIV e hepatites virais, contagem de clulas T CD4+/CD8+ e
de quantificao da carga viral do HIV-1. So apresentadas as tcnicas
de puno venosa, com a utilizao de seringa e sistema a vcuo, de
puno da polpa digital e da coleta de amostras de sangue em papel-
filtro.
Desejamos que este curso seja um incentivo para repensar e
aperfeioar a sua prtica. Releia os contedos deste manual e assista ao
vdeo sempre que precisar.
Bons estudos!
TELELAB | Coleta de Sangue 3

O sistema TELELAB de ensino a distncia foi criado em 1997 e
produziu, ao longo do tempo, 23 cursos com ttulos dedicados ao
diagnstico laboratorial das DST, Aids, hepatites virais e nas atividades
hemoterpicas.
A evoluo tecnolgica e as novas polticas para ampliao do
acesso dos usurios aos servios de sade tornam necessrias as
atualizaes de seus contedos.
Este novo curso Coleta de Sangue: Diagnstico e Monitoramento
das DST, Aids e Hepatites Virais da srie TELELAB reconhece o trabalho
dos autores que trabalharam na produo dos cursos que agora esto
sendo revisados e reformulados:
Autores de Tcnicas para coleta de sangue
Claudia Renata Fernandes Martins (in memorian)
Jos Antonio Pinto S Ferreira
Luiz Alberto Peregrino Ferreira
Luiz Fernado de Ges Siqueira (in memorian)
Maria Luiza Bazzo
Miriam Franchini
Oscar Jorge Berro
Silvio Valle
Consultoria pedaggica: Maria Lcia Ribinick e Maristela Arantes

Marteleto.
4 TELELAB | Coleta de Sangue

Consideraes gerais
Agora voc faz parte do Sistema de Educao a Distncia TELELAB

para profissionais da sade envolvidos no diagnstico laboratorial das doenas
sexualmente transmissveis, da infeco pelo HIV/Aids e das hepatites virais.
O projeto TELELAB foi criado para levar at voc informaes
indispensveis para que o seu trabalho seja realizado nos padres de
qualidade estabelecidos pelo Ministrio da Sade.
Guarde este Manual para consultar sempre que necessrio.
Ele seu, use-o!
Funcionamento do seu curso TELELAB:
Inscrio e Pr-teste:
Agora que voc j fez a inscrio e o pr-teste, pode comear o seu
curso! Voc tem 1 ms para conclu-lo.
Vdeo e Manual:
Assista ao vdeo quantas vezes voc precisar. No Manual esto todos
os contedos para o seu estudo. Aproveite!
Ps-teste e avaliao do curso:

Faa o ps-teste para avaliar o quanto voc aprendeu. Depois,
responda ao questionrio de avaliao do curso. Suas opinies nesse
questionrio so fundamentais para a melhoria do TELELAB.
Certificado:
Para obter o certificado, voc dever acertar no mnimo 80% do
ps-teste.

Ao final do curso Coleta de Sangue Diagnstico e Monitoramento
das DST, Aids e Hepatites virais, voc ser capaz de:
Identificar as tcnicas e os procedimentos recomendados para
a identificao, coleta, preparo, armazenamento e transporte de
amostras de sangue;
Executar os procedimentos para a coleta de sangue com sistema
a vcuo, com seringa e agulha, por puno digital e em papel-
filtro;
Seguir os critrios de controle de qualidade e os cuidados de
biossegurana recomendados para a coleta e para o transporte
de amostras de sangue.
Para esclarecimento de dvidas e sempre que precisar, comunique-se diretamente com:

TELELAB
Por telefone: 0800-61-2436
Por e-mail: telelab@aids.gov.br

Sumrio
Introduo .................................................................................................................................... 9
Captulo 1: Ambiente de coleta e mobilirios .................................................. 11
Infraestrutura para a coleta de amostras por puno venosa .............13
Mobilirios e acessrios para a coleta de amostras de sangue...........14
Captulo 2: Materiais para a coleta de amostras ............................................. 15
Materiais necessrios para a coleta insumos.........................................................17
Normas e regulamentaes para agulhas e tubos .........................................19
Armazenamento de agulhas e tubos .................................................................24
Captulo 3: Orientaes e cadastro do usurio................................................ 25
Pr-coleta: orientaes ao usurio ........................................................................27
Cadastramento do usurio.........................................................................................29
Comprovante de atendimento ...............................................................................30
Captulo 4: Preparao do profissional.................................................................. 31
Equipamentos de Proteo Individual EPI ...................................................33
Higienizao das mos .................................................................................................35
Captulo 5: Preparao para a coleta cuidados gerais ............................ 37
Identificao da amostra .............................................................................................39
Cuidados para calar as luvas ...................................................................................39
Cuidados para retirar as luvas ...................................................................................40
Antissepsia do local da puno...............................................................................41
Captulo 6: Coleta de sangue por puno venosa preparao ........ 43
A escolha do local para fazer a puno venosa ............................................45
Cuidados com o usurio antes da coleta ..........................................................47
Visualizao da veia ........................................................................................................47
Utilizao do garrote no brao ................................................................................48

Captulo 7: Coleta de sangue por puno venosa passo a passo............49
Passo a passo da coleta pelo sistema a vcuo ...............................................51
Passo a passo da coleta com seringa e agulha..............................................55
Problemas que podem ocorrer na coleta de sangue................................59
Como obter o soro e o plasma ................................................................................62
Cuidados na centrifugao de amostras .........................................................65
Captulo 8: Hematomas, hemlise e lipemias: como evit-las ............. 67
A formao de hematomas .......................................................................................69
Hemlise ................................................................................................................................69
Lipemia ..................................................................................................................................70
Captulo 9: Coleta de sangue para testes rpidos e coleta em papel
filtro por puno digital ............................................................................................... 71
Coleta de sangue para testes rpidos .................................................................73
Coleta de sangue em papel-filtro .........................................................................73
Passo a passo da coleta em papel-filtro por puno digital..................75
Captulo 10: Amostras para quantificao de carga viral e para
contagem de linfcitos T CD4+/CD8+ ................................................................... 83
Amostras para Quantificao de Carga Viral RNA viral .........................85
Amostras para contagem de linfcitos T CD4 +/CD8 + ..........................87
Captulo 11: Transporte de amostras ...................................................................... 89
Orientaes para transporte de sangue, soro ou plasma .......................91
Homenagem e agradecimentos ................................................................................ 93
Glossrio ...................................................................................................................................... 95
Referncias Bibliogrficas ............................................................................................... 97

Introduo
Os exames laboratoriais so realizados por solicitao mdica, com o

objetivo de diagnosticar, monitorar ou acompanhar o tratamento de uma
doena.
O resultado de todo exame laboratorial deve ter qualidade e isso s
ser possvel se houver padronizao dos processos e controle de qualidade,
desde a aquisio dos insumos e reagentes at a emisso do resultado.
O diagnstico laboratorial envolve trs etapas: a pr-analtica, a
analtica e a ps-analtica. Qualquer falha nessas etapas afetar o resultado
dos testes.
A etapa pr-analtica abrange a recepo, a identificao, a
preparao do usurio, a coleta, o armazenamento e o transporte das
amostras at o laboratrio. desta etapa que trata este manual.
Um dos principais objetivos do Departamento de DST, Aids e
Hepatites Virais no diagnstico e no monitoramento da infeco pelo HIV,
da sfilis e das hepatites virais garantir o acesso dos usurios a exames de
qualidade.
Lembre-se
Tudo comea com a orientao correta e a coleta adequada das
amostras.

Captulo 1
Ambiente de coleta
e mobilirios
Ambiente de coleta
e mobilirios
O ambiente onde realizada a coleta de amostras o espao fsico, os mobilirios e os acessrios

importante para receber e acolher o usurio e auxiliar no bom desempenho do profissional. Neste captulo
voc conhecer as normas, os padres e as recomendaes definidas para o ambiente de coleta.
Infraestrutura para a coleta de amostras por

puno venosa
Demanda de at 15 usurios por hora: o espao fsico para a
coleta pode ser constitudo por uma nica sala com rea mnima
de 3,6 m e um lavatrio.
Demanda superior a 15 usurios por hora: sero necessrios
boxes adicionais de coleta com rea mnima de 1,5 m cada um.
Lembre-se: deve existir um lavatrio para cada 6 (seis) boxes,
conforme a RDC n 50/2002 Projetos Fsicos G 1.
Recomenda-se que o local de coleta tenha as seguintes caractersticas:
Pisos impermeveis, lavveis e resistentes s solues desinfetantes;
Paredes lisas, resistentes e com divisrias constitudas de materiais
lisos, durveis, impermeveis, lavveis e resistentes s solues
desinfetantes;
Ambiente de coleta com ventilao natural ou artificial, com
temperatura variando entre 20 e 26C para o conforto do usurio
e dos profissionais de sade;
Iluminao que permita a perfeita visualizao do ambiente, do
usurio e dos materiais usados na coleta;
Janelas protegidas por telas para evitar a entrada de insetos;
Local com dimenses que permitam a passagem de macas e o livre
trnsito dos portadores de necessidades especiais.
1 Glossrio

Mobilirios e acessrios para a coleta de amostras
de sangue
Alm do espao fsico para a coleta de amostras de sangue so
necessrios os seguintes mobilirios e acessrios:
Bancada com cantos arredondados e materiais de baixa ou
nenhuma porosidade;
Cadeira com braadeira regulvel ou suporte para brao.
Recomenda-se que a cadeira tenha apoio lateral para os braos,
pois se o usurio desmaiar sua queda ser evitada;
Maca, em local acessvel e prximo da sala de coleta;
Lixeira para lixo comum;
Lixeira para material potencialmente infectante.
Figura 1 Mobilirios e acessrios para coleta de amostras.
Ateno
No existem normas sobre a rea fsica para coleta de sangue
por puno digital, pois esse tipo de coleta pode ser realizado
em qualquer local, desde que observados os cuidados de
biossegurana tanto para o usurio quanto para o profissional e
o meio ambiente (descarte seguro de material perfurocortante e
potencialmente infectante).

Captulo 2
Materiais para a coleta
de amostras
Materiais para a coleta
de amostras
Alm do ambiente adequado fundamental ter cuidado com os materiais que sero utilizados.
Neste captulo voc conhecer a lista de todos os materiais necessrios, as normas e as
regulamentaes especficas para tubos e agulhas.
Materiais necessrios para coleta insumos
Materiais necessrios para todos os tipos de coleta de sangue
1. Gaze ou algodo hidrfilo;

2. lcool etlico a 70% peso/
2 peso (p/p);
5
9
3. Etiquetas para identificao
de amostras;
6
4. Caneta esferogrfica;
4 5. Estantes para os tubos;
1
6. Recipiente de paredes rgidas
7 e prprio para desprezar
material perfurocortante.
3 8 7. Garrote;
Figura 2 Materiais para coleta de sangue. 8. Luvas descartveis;
9. Curativos.
Alm dos materiais listados acima, apresentamos, nas tabelas a

seguir, os materiais especficos que sero necessrios para os diferentes
tipos de coleta.

Materiais para coletas com sistema a vcuo
1 2 1. Garrote.
3
2. Curativo adesivo.
3. Escalpe descartvel com
dispositivo de segurana.
4 4. Agulha descartvel com
dispositivo de segurana.
6 5 5. Adaptador para agulha.
6. Tubos a vcuo.
Figura 3 Materiais para coleta a vcuo.
Materiais para coletas com seringa e agulha
1 2 3 1. Garrote.
2. Curativo adesivo.
3. Seringa.
4
4. Agulha.
5. Escalpe descartvel com
6 5 dispositivo de segurana.
6. Tubos.
Figura 4 Materiais para coleta com seringa e agulha.
Materiais para coletas por puno digital
3
1. Carto de coleta com crculos
2
demarcados em papel-filtro
e rea para identificao da
amostra.
1
2. Lanceta.
3. Suporte para secagem do
papel-filtro.
Figura 5 Materiais para coleta por puno digital.

Normas e regulamentaes para agulhas e tubos
Caractersticas das Agulhas
Quanto ao tipo: vrios tipos de agulhas podem ser utilizados para
a coleta de amostras de sangue. Elas podem ter o bisel bifacetado
ou trifacetado e, ainda, serem tratadas com silicones.
Quanto unidade de medida: no sistema brasileiro de medidas, os
comprimentos e dimetros das agulhas so expressos em milmetros
(mm). Por exemplo, uma agulha de 32 x 0,8 mm corresponde a 32
mm de comprimento e 0,8 mm de dimetro ou de calibre.
Obs.: nas embalagens os dimetros so apresentados em
milmetros e em Gauge (G), que uma unidade inglesa.
A seguir so apresentados dois exemplos da relao entre o calibre
nas unidades Gauge (G) e em milmetros, assim como a indicao de uso
das agulhas:
Agulhas 21G Agulhas 22G
Possuem 0,8 mm de dimetro Possuem 0,7 mm de dimetro
So utilizadas para as coletas So utilizadas para as coletas

em usurios que possuem veias em usurios que possuem
com grosso calibre e facilmente veias com mdio calibre (difcil
visualizadas. acesso venoso).
Ateno
As coletas com escalpe so indicadas para usurios com difcil
acesso venoso.
As agulhas e os escalpes para coleta de sangue devem ter um
dispositivo de segurana, conforme definido pela NR 32/2005
e regulamentada pela portaria GM n 939, de 18 de novembro de
2008, Ministrio do Trabalho e Emprego.

Agulhas para coletas a vcuo
As agulhas para coleta a vcuo tm caractersticas adicionais, alm
das descritas anteriormente.
Em uma das extremidades est o bisel que ir penetrar na veia;
Na outra extremidade, coberto por uma manga de borracha, est o
local onde ser encaixado o tubo e uma rosca para encaixe da agulha
em um adaptador. A funo da manga de borracha evitar o vazamento
de sangue para dentro do adaptador durante a puno.
Figura 6 Agulha para coleta a vcuo. Figura 7 Escalpe.
Caractersticas dos tubos:
Tubos para coleta com seringa e agulha:

A escolha dos tubos utilizados na coleta de amostras com seringa e
agulha deve respeitar as seguintes recomendaes:
Podem ser de vidro ou plstico;
As tampas devem ser seguras para que:
no se desprendam durante a homogeneizao ou centrifugao
da amostra;
permitam a completa vedao do contedo; e
possam ser removidas manualmente ou por mtodos mecnicos.
Importante
Sempre deve ser respeitada a proporo entre volume de sangue
e anticoagulante.

Proporo de EDTA recomendada para cada mL de sangue:
EDTA mg/mL de sangue
EDTA dissdico (EDTA Na2 2H2O) 1,4 a 2,0
EDTA dipotssico (EDTA K2 2H2O) 1,5 a 2,2
EDTA tripotssico (EDTA K3) 1,5 a 2,2
Fonte de referncia: NCCLS. Tubes and Additives for Venous Blood Specimen Collection; Approved Standard
Fifth Edition. NCCLS document H1-A5 (ISBN 1-56238-519-4). NCCLS, 940 West Valley Road, Suite 1400, Wayne,
Pennsylvania 19087-1898 USA, 2003.
Tubos para coleta a vcuo:

Os tubos para coleta de sangue a vcuo podem ser de plstico ou
de vidro e possuem tampas com cores diferentes, que so padronizadas
internacionalmente pela Norma ISO 6710:1995. No rtulo de cada tubo
tambm h uma indicao do volume de amostra que deve ser coletada.
A Norma ISO 6710:1995 determina que os tubos devem:
ser fabricados com material que apresente transparncia suficiente
para permitir a clara viso do seu contedo e as caractersticas da
superfcie interna;
ser estreis, para segurana da amostra e do usurio;
ter espao suficiente para homogeneizao mecnica ou manual
da amostra;
ter tampas seguras para que:
no se desprendam durante a homogeneizao ou centrifugao
da amostra;
permitam a vedao; e
possam ser removidas manualmente ou por mtodos mecnicos.
Ateno
No recomendada a reutilizao dos tubos. Alm de resduos do
sabo utilizado em sua limpeza, outros resduos podem permanecer
no seu interior, interferindo ou alterando o resultado dos exames.

As cores das tampas dos tubos a vcuo:
As cores indicam o tipo de anticoagulante ou de tratamento que o
tubo recebeu. Veja na tabela abaixo:
Mecanismo Amostra Principais

Cores Aditivo
de ao obtida aplicaes
Sangue total Exames de

Citrato Liga clcio
ou plasma coagulao
Com ou sem Exames

O ativador
ativador de sorolgicos,
acelera a Soro
cogulo e sem bioqumicos e
coagulao
gel separador hormonais
O gel
Com ativador separador Exames
Obs.: alguns
de cogulo e mantm sorolgicos,
fabricantes utilizam Soro
com separado bioqumicos e
apenas um circulo
gel separador o soro do hormonais.
amarelo na parte
cogulo
superior da tampa
vermelha para indicar
a presena do gel.
Inibe Sangue total Exames

Heparina
trombina ou plasma bioqumicos
Exames de
hematologia,
Sangue total
EDTA Liga clcio CD4+ /CD8+,
ou plasma
carga viral e de
genotipagem
Inibe a Exames de
Fluoreto/EDTA degradao Plasma glicose e
da glicose lactato

Qual a funo do gel separador?
O gel atua como uma barreira fsica entre as partes slida e lquida
do sangue aps a centrifugao. Assim, possvel utilizar o prprio
tubo de coleta o tubo primrio nos equipamentos para a realizao
dos exames.
O seu uso evita a transferncia da amostra para outro tubo, de
modo que:
elimina os riscos de troca de amostras que poderiam ocorrer
durante a separao da amostra de soro para outro tubo;
otimiza o trabalho tcnico;
reduz o risco de acidentes de trabalho.
Ateno
No congele amostras dentro de tubos contendo o gel separador,
pois sofrero hemlise.
Ordem de utilizao de tubos plsticos na coleta de sangue:
Figura 8 Sequncia de utilizao pelas cores.
Inicie colhendo as amostras para testes de coagulao que utilizam

tubos com citrato de sdio (tampa azul);
Na sequncia, os tubos para obteno de soro, ou seja, sem
anticoagulante somente (tampa vermelha) ou contendo gel

separador com ativador de cogulo (tampa amarela ou vermelha
com anel amarelo).
Em seguida, se voc for colher amostras em tubos plsticos que
contm outros anticoagulantes, inicie pelo tubo que contm heparina
(tampa verde) e, na sequncia, o tubo com EDTA (tampa roxa) e por
ltimo o tubo com fluoreto de sdio/EDTA (tampa cinza).
IMPORTANTE:
A sequncia da coleta de sangue para exames sorolgicos, contagem
de CD4 +/CD8 + e quantificao de carga viral:
Inicie com o tubo de tampa vermelha/amarela ou vermelha com anel
amarelo para obter soro para os exames sorolgicos.
Em seguida, colete amostra em trs tubos de tampa roxa. Um para
obter o sangue total para a contagem de linfcitos T CD4+/CD8 + e
dois para obter o plasma para a quantificao de carga viral.
Figura 9 Sequncia de cores exames sorolgicos, contagem

de CD4 +/CD8 + e quantificao de carga viral.
Armazenamento de agulhas e tubos

Siga rigorosamente as instrues determinadas pelo fabricante para
a conservao e para a armazenagem de tubos e agulhas;
Esses materiais devem ser armazenados ao abrigo da luz, em locais
secos e arejados;
Os tubos devem ser armazenados entre 4 C e 25C;
Nunca utilize tubos ou produtos com prazo de validade vencido ou que
apresentem alteraes em sua cor, forma ou caractersticas originais.

Captulo 3
Orientaes e cadastro
do usurio
Orientaes e cadastro
do usurio
Neste captulo voc ir conhecer as orientaes que devem ser fornecidas ao usurio para prepar-
lo para a coleta, assim como as informaes necessrias para o seu correto cadastramento.
Essa etapa fundamental para que as demais etapas, pr-analiticas e analticas, sejam bem
sucedidas.
Pr-coleta: orientaes ao usurio

Antes de realizar o exame, o usurio deve receber instrues escritas
e verbais, em linguagem acessvel, sobre os cuidados necessrios que
antecedem a coleta da amostra.
Deve-se informar ao usurio:
necessidade e tempo de jejum requeridos para os exames;
cuidados com a alimentao caso no seja exigido jejum;
obrigatoriedade de apresentar um documento de identificao
com foto;
horrio de funcionamento da coleta.
Veja no quadro a seguir algumas orientaes importantes que devem
ser informadas ao usurio:

Perodo de jejum:
O tempo de jejum varia de acordo com o exame laboratorial. Existem
dosagens para as quais a necessidade de jejum varia entre 4 e 12 horas.
Veja abaixo algumas situaes e as orientaes para cada uma delas
com relao ao perodo de jejum:
Situao Orientao para a coleta
Exames sorolgicos para o diagnstico
Recomenda-se jejum de 4 horas para evitar
da infeco pelo HIV, da sfilis e das
a presena de lipemia G .
hepatites virais.
No h necessidade de jejum se a coleta
Contagem de clulas T CD4+/CD8+
de sangue for exclusivamente para estes
ou quantificao da carga viral.
exames.
Em situaes de emergncia, como Deve-se realizar a coleta do sangue
no caso de acidentes com materiais independentemente do usurio estar ou
perfurocortantes. no em jejum.
Em bebs. Deve-se realizar a coleta entre as mamadas.
Outros fatores de Interferncia

Exames sorolgicos,
Fator contagem T CD4+/CD8+ e Outros exames laboratoriais
quantificao da carga viral
Atividades Podem interferir em alguns casos,
No interferem.
fsicas tal como na dosagem de colesterol.
Fumo No interfere. Pode interferir.
Ingesto de caf No interfere. Pode interferir.
A ingesto de um copo, ou menos, de gua no interfere na
Ingesto de gua
qualidade da amostra.
Horrio da Coleta
Tipo de exame Orientao
Devem ser colhidos preferencialmente no
Exames de sangue, como hemograma e
perodo da manh, pois h variao no
contagem de clulas T CD4+/CD8+.
nmero de leuccitos ao longo do dia.
Exames sorolgicos e quantificao da Podem ser colhidos a qualquer hora do
carga viral. dia.

Lembre-se
Verifique as recomendaes de coleta para cada exame
laboratorial e informe ao usurio.
Cadastramento do usurio
O cadastramento do usurio deve ser a primeira atividade a ser
realizada. fundamental para garantir a rastreabilidade em todas as
G
etapas que se seguiro.

Inicie solicitando um documento de identidade com fotografia e
registre as seguintes informaes no cadastro:
Nmero do registro que identifica o usurio;
Nome completo do usurio sem abreviao;
Nome social G , quando solicitado pelo usurio;
Idade e data de nascimento;
Sexo;
Nome completo da me;
Telefone e endereo;
Nome, contato e documento de identidade do responsvel em
caso de menor de idade ou incapacitado;
Exames solicitados de acordo com a requisio mdica;
Nome de quem solicitou o exame e nmero do registro no conselho
profissional;
Quando necessrio, solicite informaes adicionais, como por
exemplo, tempo de jejum, uso de medicamentos, indicao ou
observao clnica;
Indicao de urgncia na realizao do exame, se aplicvel;
Data, horrio e responsvel pelo cadastramento.
Observaes:
Os dados referentes idade e data de nascimento do usurio e
ao nome completo da me no so exigncias da RCD 302:2005,

porm, se o sistema utilizado no servio em que voc atua permitir,
inclua-os pois so teis para solucionar nos casos de problemas
com homnimos G .
O nmero de registro no conselho profissional de quem solicitou
o exame tambm no uma exigncia da RCD 302:2005, porm,
bastante til nos casos de disputas judiciais.
No caso de perda ou roubo de documento de identidade, o Boletim
de Ocorrncia registrado por autoridade competente deve ser
solicitado.
Para os exames de quantificao da carga viral, contagem de clulas
T CD4 +/CD8 + e de genotipagem, feitos na rede do Ministrio da
Sade, deve-se utilizar formulrio definido pelo Departamento de
DST, Aids e Hepatites Virais, que exige outras informaes (Boletim
de Produo Ambulatorial Individualizado BPA-I, com carimbo
mdico e assinatura).
Ateno
Cada laboratrio tem autonomia para estabelecer seu prprio
sistema de registro das informaes, desde que fique assegurada
a rastreabilidade G em todas as etapas do processo fases pr-
analtica, analtica e ps-analtica.
Comprovante de atendimento
O comprovante de atendimento entregue aps a coleta e deve
conter:
dados da instituio onde o usurio foi atendido;
nmero de registro;
nome do usurio;
data do atendimento;
data prevista para a entrega do laudo
relao de exames solicitados;
informaes para contato com o laboratrio.

Captulo 4
Preparao do profissional
Preparao do profissional
Alm de atender bem ao usurio fundamental que o profissional tambm tome os cuidados
para se proteger. Veja neste captulo as importantes orientaes sobre os equipamentos de
proteo individual e a higienizao das mos.
Equipamentos de Proteo Individual EPI

No momento da coleta de sangue, o profissional de sade dever
utilizar equipamentos de proteo individual (EPI), pois em todos os
locais onde se faz a coleta de sangue ou h manipulao de materiais
biolgicos existe o risco de contaminao com agentes infecciosos.
Transmisso de agentes infecciosos

A transmisso de agentes infecciosos durante a coleta de amostras
de sangue ocorre:
Por contato direto com material contaminado.
Esse contato pode ser resultante:
de transmisso direta:
em acidentes com objetos perfurocortantes;
pelo respingo de sangue diretamente na pele ou mucosas;
inalao de aerossis.
de transmisso indireta, pelo contato da pele ferida ou mucosas

com superfcies, mos e/ou luvas contaminadas.

Assim sendo, imprescindvel a utilizao de:
Avental ou jaleco de comprimento abaixo dos joelhos, com mangas
longas, sistema de fechamento nos punhos por elstico ou sanfona
e fechamento at a altura do pescoo;
Luvas descartveis;
culos ou protetor facial.
Alm disso, obrigatrio o uso de roupas e calados que cubram
completamente pernas e ps.
Figura 10 EPI de uso freqente na coleta de sangue.
Saiba mais
Leia a NR 32 de 2005.
No site do Ministrio do Trabalho e Emprego
http://www.mte.gov.br
clique no link Legislao Normas regulamentadoras

Higienizao das mos
A medida individual mais simples e menos dispendiosa para prevenir a
propagao das infeces relacionadas assistncia sade a higienizao
das mos (termo mais amplo que substituiu lavagem das mos).
As mos constituem a principal via de transmisso de microrganismos
durante o atendimento aos usurios.
A higienizao das mos pode ser simples ou antissptica:
Higienizao simples: so utilizados gua e sabo comum.
Esses sabes possuem atividade detergente, removem gorduras,
sujeiras e substncias orgnicas das mos. Tm pouca ou nenhuma
atividade antimicrobiana, porm seu uso remove mecanicamente
muito dos microrganismos.
Higienizao antissptica: so utilizados gua e sabo contendo
antissptico ou somente antisspticos. Os antisspticos mais
utilizados so alcois, clorexidina, compostos de iodo, iodforos
e triclosan. So mais eficientes na eliminao de microrganismos
patognicos das mos.
Antissptico: toda substncia capaz de eliminar parcialmente

microrganismos de tecidos vivos.
Desinfetante: toda substncia capaz de eliminar parcialmente
microrganismos em materiais inanimados.
Quando necessrio higienizar as mos
Higienizao simples:
Ao chegar e sair do seu local de trabalho.
Antes e aps ir ao banheiro.
Antes e depois das refeies ou preparo de alimentos.
Aps retirar as luvas utilizadas para coletar as amostras de cada
usurio.
Antes de utilizar um antissptico.

Higienizao antissptica:
Antes e aps o contato com o usurio.
Aps risco de exposio a sangue e outros fluidos corporais.
Cuidados no local de trabalho:

Na rea de coleta deve existir uma pia com sabo, papel toalha e
antissptico disponveis para higienizao das mos.
Use sabo lquido, sempre que possvel, com a adio de emolientes G
para evitar ressecamentos da pele ou dermatites.
Saiba mais
Acesse o site http://www.anvisa.gov.br/hotsite/higienizacao_
maos/index.htm da Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria
ANVISA e leia o Manual de Higienizao das Mos em Servios
de Sade.

Captulo 5
Preparao para a coleta
cuidados gerais
Preparao para a coleta
cuidados gerais
Neste capitulo sero abordados os cuidados e os procedimentos que so executados nas coletas
por puno venosa e por puno digital.
Identificao da amostra
Figura 11 Etiqueta com os dados necessrios.
Cuidados para calar as luvas

Calce as luvas aps confirmar os dados do usurio e colar as etiquetas
nos tubos. Para isso:
Verifique se suas mos esto limpas e secas;
Calce as luvas devagar, ajustando cuidadosamente cada dedo, para
evitar que rasguem. Tome cuidado, pois podem ocorrer rasgos
imperceptveis que comprometem a proteo da sua mo.
Lembre-se
As mangas do jaleco devem ficar sempre presas sob as luvas.

Cuidados para retirar as luvas
1. Pegue na parte externa da luva e puxe

em direo aos dedos para retirar.
2. Feche a outra mo com a luva retirada.

3. Com a mo sem luva pegue na parte
interna da luva e puxe em direo aos
dedos para retirar.
4. Jogue a luva em recipiente para

material infectante.
Figura 12 Orientaes para retirar as luvas.
Antissepsia do local da puno

Para fazer a antissepsia do local que ser puncionado, utilize gaze
ou algodo embebidos em uma soluo de lcool etlico a 70% peso/peso
(p/p) ou outro antissptico.
Antissepsia: utilizada para reduzir o risco de contaminao da

amostra e para evitar infeco do local da puno.
Aps escolher o local para puncionar, a antissepsia pode ser feita de

duas formas:

OPO 1: com um nico movimento
circular a partir do local escolhido em
direo periferia.
Figura 13 Antissepsia- movimento circular.
OPO 2: com um nico movimento

do algodo ou gaze no sentido do
punho para o cotovelo.
Figura 14 Antissepsia- movimento reto.
Preste ateno:
Em qualquer um dos modos, a antissepsia pode ser repetida, desde
que voc utilize um novo algodo ou gaze embebidos no lcool.
Aguarde a completa secagem da rea (cerca de 30 segundos), para
evitar hemlise G da amostra e tambm a ardncia no local quando
o brao do usurio for puncionado;
No assopre, no abane e no toque no local aps a antissepsia
para no haver recontaminao na rea.
Saiba mais
Como proceder em caso de acidente com material perfurocortante
Leia as normas regulamentadoras do Ministrio do Trabalho
e Emprego NR 32, NR 7 e NR 5, disponveis em http://www.
mte.gov.br, no link LEGISLAO.

Captulo 6
Coleta de sangue por
puno venosa preparao
puno venosa preparao
Uma das formas mais comuns de obteno da amostra de sangue a puno venosa. Conhea,
a seguir, os procedimentos para a escolha e preparao do local a ser puncionado e o passo a
passo da coleta de sangue, tanto com o sistema a vcuo quanto com seringa e agulha.
A escolha do local para fazer a puno venosa
Condies da veia
Em princpio, qualquer veia dos membros superiores pode ser
puncionada, desde que apresente boas condies como:
bom calibre;
flexibilidade; e
integridade.
Veias mais comumente utilizadas

As veias mais utilizadas so a cubital mediana e a ceflica, ambas
localizadas na parte anterior do brao, prximo dobra do cotovelo,
conforme figura 15-A.
A puno na veia cubital mediana costuma ser a melhor opo, pois
na puno da veia ceflica existe maior risco de formao de hematomas.
As veias do dorso da mo tambm podem ser puncionadas. Nessa
regio, recomenda-se a veia do arco venoso dorsal, conforme figura 15-B,
por possuir maior calibre.
A outra veia destacada na figura veia dorsal do metacarpo tambm
poder ser puncionada, porm a coleta ser mais dolorosa.

Veia ceflica acessria
Veia ceflica Veia baslica

Veia cubital mediana Veia baslica mediana
Veia baslica
Figura 15- A veias dos membros superiores
Veia Veia ceflica

baslica Arco venoso dorsal
Veia dorsal Veia dorsal superficial
metacarpal
Veia dorsal digital
Figura 15-B Veias do dorso da mo.
reas que NO devem ser puncionadas:

reas com terapia ou hidratao intravenosa de qualquer espcie;
Locais com cicatrizes de queimadura;
Membro superior prximo ao local onde foi realizada mastectomia,
cateterismo ou qualquer outro procedimento cirrgico;
reas com hematomas;
reas da pele com ferimentos, abscessos e outras leses;
Veias que j sofreram trombose porque so pouco flexveis, com
paredes endurecidas;
Veias com mltiplas punes recentes.

Cuidados com o usurio antes da coleta
Posicione o brao do usurio, mantendo-o levemente inclinado
para baixo;
O brao deve estar apoiado firmemente pelo descanso e o cotovelo
no deve estar dobrado.
Visualizao da veia
Para visualizar a veia voc pode executar os procedimentos indicados
a seguir:
Solicite que o usurio abra e feche a mo em movimentos
suaves;
Caso no consiga visualizar uma veia, solicite que abaixe o brao e
novamente abra e feche a mo em movimentos suaves;
Caso ainda no consiga visualizar, massageie delicadamente o brao
do usurio, no sentido do punho para o cotovelo;
Outra opo garrotear o brao para facilitar a visualizao da
veia. Lembre-se: aps localizar a veia utilizando o garroteamento,
afrouxe o garrote. Aguarde no mnimo 2 minutos antes de garrotear
novamente para fazer a puno.
Ateno
No bata na veia com os dedos, no momento da seleo venosa.
Este tipo de procedimento pode provocar hemlise G capilar.
Utilizao do garrote no brao

Como utilizar corretamente o garrote
Posicione o garrote com o lao ou fecho para cima, cerca de 10 cm
do local que ser puncionado, a fim de evitar a contaminao da
rea de puno;

No aperte intensamente o garrote, pois o fluxo arterial no deve ser
interrompido. Lembre-se que o pulso do usurio deve permanecer
palpvel;
No use o garrote por mais de 1 minuto. O resultado de alguns exames
laboratoriais pode sofrer alteraes, pois, com o garroteamento
ocorre aumento da presso nas veias e artrias, facilitando a sada
de lquido e de molculas pequenas para o espao intersticial
entre as clulas , gerando uma variao na concentrao dos
elementos do sangue.
Recomendaes:
Utilize somente garrotes limpos;
Caso o garrote seja de ltex, deve-se perguntar ao usurio se tem
alergia a este componente. Se relatar alergia, forre com papel toalha
a parte do brao que entrar em contato com o ltex.
Figura 16 Posicionamento correto do garrote.
Ateno
Lembre-se de orientar o usurio a no movimentar o brao
durante o ato da coleta.

Captulo 7
puno venosa passo a passo
puno venosa passo a passo
Passo a passo da coleta pelo sistema a vcuo
Preparao do material e do profissional

1. Confira se voc dispe de todos os materiais que ir utilizar;
2. Higienize suas mos;
Recepo do usurio
3. Chame o usurio pelo nome completo. Trate-o sempre com
respeito, cumprimentando-o de modo simptico e cordial;
4. Pea que se acomode confortavelmente na cadeira de coleta;
Identificao do usurio e dos materiais

5. Solicite ao usurio um documento de identidade com foto;
6. Verifique se os dados do documento so os mesmos registrados
na requisio e nas etiquetas e devolva o documento a ele;
7. Informe ao usurio como ser o procedimento de coleta;
8. Ordene o material que ser usado na coleta;
9. Pea ao usurio que confirme seus dados na etiqueta;
10. Cole as etiquetas nos tubos;
Preparao da coleta
11. Calce as luvas;
12. Posicione o brao do usurio;
13. Verifique se a manga est prendendo a circulao e atuando
como um garrote. Caso isso acontea desdobre a manga;

14. Analise os possveis locais para a puno venosa e escolha o
calibre da agulha;
15. Mostre ao usurio a embalagem lacrada da agulha de coleta e
abra-a, expondo apenas a parte que ser colocada no adaptador;
16. Rosqueie a agulha no adaptador;
17. Faa a antissepsia do local escolhido para a puno;
18. Garroteie o brao do usurio e solicite que ele feche a mo;
Coleta
19. Retire a capa da agulha e imediatamente faa a puno com o
bisel da agulha virado para cima;
Ateno
Caso exista flacidez no local da coleta, estique a pele
com os dedos para fixar a veia.
20. Insira o tubo no adaptador e pressione-o at perfurar a tampa

do tubo;
21. Quando o sangue comear a fluir solte o garrote e pea ao usurio
que abra a mo;
22. Troque o tubo quando o sangue parar de fluir para seu interior;
23. Enquanto o tubo seguinte est sendo completado, homogeneze
o tubo anterior, invertendo-o suavemente entre 5 e 10 vezes;
24. Coloque a amostra colhida em estante para tubos, de modo que
fique na posio vertical;
25. Repita o procedimento anterior, sucessivamente, at ter colhido
todos os tubos necessrios;
Finalizao da coleta
26. Retire o ltimo tubo;
27. Remova a agulha da veia e solicite que o usurio faa presso sobre
o local da puno com o auxlio de uma gaze ou algodo seco;
28. Acione imediatamente o dispositivo de segurana da agulha;

29. Oriente o usurio para que mantenha o brao esticado e o
local da puno pressionado, sem esfregar, por no mnimo trs
minutos;
30. Descarte imediatamente a agulha em recipiente apropriado
para materiais perfurocortantes, adotando todos os cuidados de
biossegurana;
31. Verifique se o local da puno parou de sangrar. Caso continue
o sangramento troque o algodo ou a gaze e oriente para que
o usurio continue pressionando o local da puno at parar o
sangramento;
32. Cubra o local da puno com curativo oclusivo e oriente ao
usurio para mant-lo por, no mnimo, 15 minutos;
33. Retire as luvas e descarte em recipiente prprio;
34. Quando o usurio estiver usando roupa de manga longa, verifique
se a manga est prendendo a circulao e atuando como um
garrote. Caso isto acontea desdobre a manga;
Orientaes e encaminhamentos finais

35. Oriente o usurio a no dobrar o brao e no carregar qualquer peso
no brao no qual foi feita a puno por, no mnimo, uma hora;
36. Certifique-se que o usurio est se sentindo bem e em condies
de se locomover sozinho;
37. Entregue a ele o comprovante de coleta;
38. Identifique na requisio a data, o horrio e o responsvel pela
coleta;
39. Encaminhe as amostras o mais rpido possvel para o setor de
processamento de amostras.
Ateno
Colete o volume de sangue indicado para cada tubo.
Tubos com volume de sangue insuficiente ou em
excesso alteram a proporo de sangue/anticoagulante,
podendo levar hemlise ou coagulao da amostra.

Preparao dos Identificao Orientaes e
Preparao Finalizao
materiais e do Recepo do usurio e do Coleta encaminhamentos
para a coleta da coleta
profissional material finais
1. Confira os 3. Chame o usurio 5. Solicite 11.Calce as luvas 19.Retire a capa da 26. Retire o ltimo 35. Oriente o usurio a
materiais documento de agulha e faa a tubo no dobrar o brao
4. Acomode-o na identidade com 12.Posicione o brao puno nem carregar peso
2. Higienize as cadeira foto do usurio 27. Retire a agulha por 1 hora
mos 20.Insira o tubo e solicite que o
6. Verifique os 13. Verifique a no adaptador e usurio pressione 36.Certifique-se

dados na requisio manga perfure a tampa o local que est bem e
e etiquetas e em condies de
confirme com o 14. Analise possveis 21.Solte o garrote 28.Acione o locomover-se
documento locais de puno quando o sangue dispositivo de
e escolha calibre fluir e pea para segurana da 37.Entregue o
7. Informe os da agulha abrir a mo agulha comprovante de
procedimentos da coleta
15. Mostre 22.Troque o tubo 29. Oriente que o
coleta
embalagem lacrada quando o sangue usurio mantenha 38.Identifique
e abra-a parar de fluir o brao esticado, data, horrio e
8. Ordene o
material sem esfregar o responsvel pela
16. Rosqueie local por 3 minutos
23.Homogeneze coleta
9. Pea que a agulha no
adaptador o tubo cheio 30.Descarte a
confirme retirado, com 39. Encaminhe as
os dados da agulha no
17. Faa antissepsia inverso de 5 a 10 amostras o mais
etiqueta recipiente
do local vezes rpido possvel
apropriado
10.Cole as etiquetas
18. Garroteie o brao 24.Coloque a 31.Verifique se o local
nos tubos
e solicite que amostra colhida parou de sangrar
feche a mo na estante para
tubos 32.Cubra o local com
curativo oclusivo
25.Repita o
Diagrama passo a passo da coleta pelo sistema a vcuo
procedimento 33.Retire as luvas e

na quantidade de descarte
tubos necessria
34.Verifique
a manga e
desdobre-a se for
necessrio
Passo a passo da coleta de sangue com seringa e
agulha
Leia com ateno o passo a passo para a coleta de sangue com
seringa e agulha:
Preparao do material e do profissional

1. Confira se voc dispe de todos os materiais que ir utilizar;
2. Higienize suas mos;
Recepo do usurio
3. Chame o usurio pelo nome completo. Trate-o sempre com
respeito, cumprimentando-o de modo simptico e cordial;
4. Pea que se acomode confortavelmente na cadeira de coleta;
Identificao do usurio e dos materiais

5. Solicite ao usurio um documento de identidade com foto;
6. Verifique se os dados do documento so os mesmos registrados
na requisio e nas etiquetas e devolva o documento a ele;
7. Informe ao usurio como ser o procedimento de coleta;
8. Ordene o material que ser usado na coleta;
9. Pea ao usurio que confirme seus dados na etiqueta;
10. Cole as etiquetas nos tubos;
Preparao da coleta
11. Calce as luvas;
12. Utilize seringas e agulhas descartveis;
13. Mostre ao usurio as embalagens lacradas da agulha e da seringa;
14. Posicione o brao do usurio;
15. Verifique se a manga est prendendo a circulao e atuando
como um garrote. Caso isso acontea desdobre a manga;

16. Analise os possveis locais para a puno venosa e escolha o calibre
da agulha;
17. Abra e retire a seringa do envelope. Empurre o mbolo para
garantir o seu deslizamento sem dificuldade;
18. Abra a embalagem contendo a agulha e encaixe-a na seringa;
19. Faa a antissepsia do local escolhido para a puno;
20. Garroteie o brao do usurio e solicite que ele feche a mo;
Coleta
21. Retire a capa da agulha e faa a puno imediatamente, com o
bisel da agulha virado para cima;
22. Quando o sangue comear a fluir, solte o garrote e pea ao
usurio que abra a mo;
23. Aspire o sangue em volume suficiente para as anlises desejadas;
24. Evite a formao de bolhas e espuma, aspirando lentamente o
sangue da veia;
25. Execute o procedimento com a maior agilidade possvel, pois o
processo de coagulao do sangue ativado desde o incio da puno
e, se a coleta demorar, o sangue pode se coagular dentro da seringa;
Finalizao da coleta
26. Remova a agulha da veia e solicite que o usurio faa presso
sobre o local da puno com o auxlio de gaze ou algodo seco;
27. Acione imediatamente o dispositivo de segurana da agulha;
28. Oriente o usurio para que mantenha o local pressionado, sem
esfregar por, no mnimo, trs minutos;
29. Descarte imediatamente a agulha em recipiente apropriado
para materiais perfurocortantes, adotando todos os cuidados de
biossegurana;
30. Abra a tampa do tubo e transfira o sangue da seringa, tomando
o cuidado de deixar o sangue escorrer lentamente pelas paredes
do tubo, evitando a hemlise;

Ateno
Caso a amostra venha a ser transferida para tubo
contendo anticoagulante, respeite a proporo
sangue/anticoagulante. Para EDTA consulte a relao
na pgina 21.
31. Feche corretamente o tubo e homogeneze o contedo

suavemente por inverso entre 5 e 10 vezes;
32. Coloque a amostra colhida em estante para tubos de modo que
fique na posio vertical;
33. Descarte a seringa em recipiente para materiais contaminados;
34. Verifique se o local da puno parou de sangrar. Caso continue
o sangramento troque o algodo ou a gaze e oriente para que
o usurio continue pressionando o local da puno at parar o
sangramento;
35. Cubra o local da puno com curativo oclusivo e oriente ao
usurio para mant-lo por, no mnimo, 15 minutos;
36. Retire as luvas e descarte em recipiente prprio;
37. Quando o usurio estiver usando roupa de manga longa, verifique
se a manga est prendendo a circulao e atuando como um
garrote. Caso isto acontea desdobre a manga;
Orientaes e encaminhamentos finais

38. Oriente o usurio a no dobrar o brao e no carregar qualquer peso
no brao no qual foi feita a puno por, no mnimo, uma hora;
39. Certifique-se que o usurio est se sentindo bem e em condies
de se locomover sozinho;
40. Entregue a ele o comprovante de coleta;
41. Identifique data, horrio e responsvel pela coleta.
42. Encaminhe as amostras o mais rpido possvel para o setor de
processamento de amostras.

Preparao dos Identificao Orientaes e
Preparao Finalizao
materiais e do Recepo do usurio e do Coleta encaminhamentos
profissional material finais
1. Confira os 3. Chame o usurio 5. Solicite documento 11. Calce as luvas 21. Retire a capa da 26. Retire a agulha e 38. Oriente o usurio a
materiais de identidade com agulha e faa a solicite que o usurio no dobrar o brao
4. Acomode-o na foto 12. Utilize seringas puno pressione o local nem carregar peso
2. Higienize as mos cadeira e agulhas por 1 hora
6. Verifique os dados descartveis 22. Solte o garrote 27. Acione o
na requisio e quando o sangue dispositivo de 39. Certifique-se
etiquetas e confirme 13. Mostre as fluir e pea para segurana da agulha que est bem e
com o documento em condies de

embalagens abrir a mo
28. Oriente que o usurio locomover-se
lacradas
7. Informe os mantenha o brao
23. Aspire o sangue
procedimentos da esticado, sem esfregar 40. Entregue o
14. Posicione o brao em volume
coleta o local por 3 minutos comprovante de
do usurio suficiente
coleta
29. Descarte a agulha no
8. Ordene o material 15. Verifique a manga 24. Evite formao de recipiente apropriado
bolhas e espuma 41. Identifique
9. Pea que confirme 16. Analise possveis 30. Abra a tampa do data, horrio e
os dados da locais de puno 25. Execute o tubo e transfira o responsvel pela
etiqueta e escolha calibre procedimento sangue da seringa coleta
da agulha o mais rpido
10. Cole as etiquetas possvel 31. Feche o tubo e
nos tubos 42. Encaminhe as
17. Abra e retire homogeneze por
amostras o mais
a seringa do 24. Coloque a amostra inverso entre 5 e
rpido possvel
envelope colhida na estante 10 vezes
para tubos
18. Abra e retire 32. Coloque a amostra
a agulha da 25. Repita o colhida em estante
embalagem e procedimento para tubos
encaixe-a na na quantidade de
seringa tubos necessria 33. Descarte a seringa em
recipiente apropriado
19. Faa antissepsia
34. Verifique se o local
do local
parou de sangrar
20. Garroteie o brao 35. Cubra o local com
e solicite que feche curativo oclusivo
a mo
36. Retire as luvas e
descarte
37. Verifique a manga

e desdobre-a se for
Diagrama passo a passo da coleta de sangue com seringa e agulha
necessrio
Ateno
Caso voc tenha um acidente com material perfurocortante,
informe a ocorrncia sua chefia, para que sejam adotadas
imediatamente as medidas de profilaxia e o acidente seja
notificado.
Problemas que podem ocorrer na coleta de sangue
Ateno
Ao verificar algum problema mantenha-se calmo e tranquilize
o usurio. Analise a situao e adote a conduta cabvel.
Veja abaixo alguns problemas que podem ocorrer durante a coleta

de sangue e como resolv-los:
O que pode ter

Problema O que fazer para resolver
acontecido
Transfixao G da Retroceda um pouco a agulha para

Voc puncionou veia. Veja na figura 17. que ela volte para dentro da veia.
a veia e o sangue
no fluiu para o Erro na direo da
tubo. Localize a veia com a sua mo livre e
agulha. Veja na figura
redirecione a agulha.
18.

O que pode ter
Problema O que fazer para resolver
acontecido
Transfixao da veia. Retroceda um pouco a agulha para

Veja na figura 17. que ela volte para dentro da veia.
possvel que Retroceda um pouco a agulha e gire

a agulha esteja sutilmente o adaptador ou a seringa
encostada na parede para permitir o restabelecimento do
da veia. fluxo.
Retire o garrote para permitir o

restabelecimento da circulao.
Tente virar lentamente o adaptador
Voc puncionou
ou a seringa para que o bisel
a veia e o fluxo
seja desobstrudo e permita a
sanguneo foi Estenose G ou recomposio da veia.
interrompido. colabamento da veia. Se o tubo perder o vcuo, troque
Veja na figura 19. de tubo e lembre-se de identific-
lo ao final do procedimento. Se o
problema no for resolvido, retire a
agulha e faa uma nova puno em
outro local.
O bisel est Aumente o ngulo da agulha em

encostando na parede relao ao brao e depois avance
superior da veia. Veja a agulha no interior da veia para
na figura 20. permitir o fluxo sanguneo.
Corrija o problema introduzindo a

Sangramento O bisel penetrou agulha corretamente na veia. Se o
externo contnuo apenas parcialmente a tubo perder o vcuo, troque de tubo
no local da puno. veia. Veja na figura 21. e lembre-se de identific-lo ao final
do procedimento.
A veia rompeu
Formao de
ou ocorreu Interrompa imediatamente a coleta.
edema ou
extravasamento de Comprima o local e aplique uma
hematoma G aps
sangue sob a pele. compressa de gelo.
a puno.
Veja na figura 22.
Interrompa imediatamente a coleta

O sangue flui de Uma artria foi e comprima o local ao menos por 5
forma pulstil. puncionada. minutos. Em seguida cubra o local
puncionado com curativo oclusivo.

Figura 17 Transfixao da veia. Figura 18 Erro na direo da agulha.
Figura 19 Estenose da veia. Figura 20 Bisel encostado na parte

superior da veia.
Figura 21 Bisel parcialmente Figura 22 Veia rompida.

penetrado na veia.
Em qualquer um dos casos, se o problema no for resolvido, retire

a agulha, cubra o local puncionado com algodo e pressione. Escolha um
novo local, faa a antissepsia e realize nova puno.

Como obter o soro e o plasma
Sangue, soro e plasma

O sangue circula atravs do corao, artrias, capilares e veias.
Tem como funes o transporte de oxignio, gs carbnico, hormnios,
nutrientes e tambm o transporte dos resduos do metabolismo at os
rgos de excreo.
Alm disso, tem papel regulador na distribuio de calor, do
equilbrio cido-bsico e do equilbrio osmtico. formado por uma fase
slida e outra lquida:
A fase slida contm os glbulos brancos (neutrfilos, eosinfilos,
basfilos, linfcitos e moncitos), os glbulos vermelhos
(hemcias) e tambm as plaquetas.
Curiosidade: o volume total de sangue em um homem de

70 Kg cerca de 5,5 litros.
A fase lquida do sangue o plasma, no qual a fase slida est

suspensa. O plasma um lquido de cor amarelada que compe
cerca de 55% do volume total do sangue. Contm gua, sdio,
gases, nutrientes, hormnios, enzimas e protenas tais como
fibrinognio, globulinas e albumina. obtido aps coleta do
sangue em tubo contendo anticoagulante.
O soro a parte lquida obtida aps a coagulao do sangue
coletado em tubo sem anticoagulante. Na formao do cogulo
o fibrinognio consumido.
Veja a tabela abaixo:
Soro Plasma
Obtido a partir da coleta de sangue em Obtido a partir da coleta de sangue em tubo
tubo sem anticoagulante contendo algum tipo de anticoagulante
No contm fibrinognio Contm fibrinognio

Como obter o Plasma
Para obter o plasma voc dever utilizar um tubo contendo anticoagulante
como, por exemplo, o de tampa roxa ou lils contendo EDTA. O plasma tambm
pode ser obtido em tubos com heparina (tampa verde), com citrato de sdio
(tampa azul) e com fluoreto de sdio/EDTA (tampa cinza). A escolha do tubo
depender do tipo de exame que ser realizado com o plasma.
Figura 23 Obteno do plasma.
Passo a passo
1. Colha o sangue em tubo contendo anticoagulante.
2. Homogeneze a amostra por inverso, entre 5 e 10 vezes.
3. Centrifugue por 10 minutos entre 2.500 e 3.500 rpm.
4. O plasma a parte lquida amarela que fica na parte superior do
tubo.
Como obter o Soro

Para obter soro, voc dever utilizar um tubo sem anticoagulante,
com ou sem gel separador (tampa vermelha ou amarela) e, ainda, com ou
sem acelerador de cogulo.

Passo a passo
1. Colha o sangue em tubo sem anticoagulante.
2. Se utilizar o tubo com gel separador, homogeneze a amostra
por inverso, entre 5 e 10 vezes.
3. Deixe em temperatura ambiente, em repouso, at a total retrao
do cogulo. Veja no quadro a seguir os tempos recomendados.
4. Centrifugue por 10 minutos entre 2.500 a 3.500 rpm. A
centrifugao deve ocorrer dentro de, no mximo, 2 horas aps
a coleta;
5. O soro a parte lquida superior amarela que fica na parte
superior do tubo.
O ativador de cogulo
O ativador de cogulo acelera o processo de coagulao. Veja
a tabela abaixo com os tempos recomendados para que ocorra a
coagulao do sangue, segundo as cores das tampas dos tubos de coleta
a vcuo utilizados para coletar a amostra, segundo a ISO 6710:1995:
Tipo de tubo Tempo de coagulao

Sem ativador de cogulo (tampa vermelha) 60 minutos
Com ativador de cogulo (tampa vermelha) 30 minutos
Com ativador de cogulo e gel separador (tampa amarela) 30 minutos
Observao:
Amostras de sangue de usurios que esto utilizando anticoagulante
ou que so portadores de alguma coagulopatia demoram mais
tempo para coagular.
Cuidados na centrifugao de amostras

Certifique-se de que as centrfugas do seu laboratrio tenham
passado por manuteno preventiva e que a calibrao e as condies
metrolgicas estejam corretas para garantir seu correto funcionamento

(Faa o curso Equipamentos Utilizao e Monitoramento em
Unidades Hemoterpicas e Laboratrios de Sade Pblica do
sistema TELELAB);
Utilize sempre rotores e caapas apropriados ao tamanho dos
tubos que sero centrifugados. Caapas muito grandes ou muito
pequenas podem causar a quebra, o deslocamento dos tubos ou
a separao inadequada da amostra;
Os tubos devem ser centrifugados com tampa para evitar
evaporao, a formao de aerossis e a contaminao da amostra,
do equipamento e do tcnico;
Assegure-se que os tubos estejam corretamente encaixados na
caapa da centrfuga. Um encaixe incompleto pode fazer com que a
tampa de proteo do tubo se desprenda, ou o tubo seja quebrado
durante a centrifugao;
Sempre equilibre os tubos para no quebr-los durante a centrfuga
ou danificar o eixo do rotor da centrfuga. Tubos de mesmo peso
devem ser colocados em locais opostos no rotor;
Aguarde at que a centrfuga pare completamente antes de abrir
a tampa para retirar os tubos;
No use o freio da centrfuga com o intuito de interromper a
centrifugao dos tubos; esta brusca interrupo, alm de causar
hemlise, pode deslocar o gel separador;
Retire os tubos da centrfuga com o auxlio de uma pina.

Clculo das Rotaes Por Minuto na centrfuga
muito importante que voc observe o tempo e a velocidade da
sua centrfuga durante o procedimento de centrifugao.
Para trabalhar com segurana, veja no quadro a seguir como fazer
o clculo das Rotaes Por Minuto rpm, para a centrfuga que voc
possui no seu laboratrio.
Clculo de RPM
Tubos com gel separador de 1300 a 2000 g* Rcf = 1,118 x 10-5, sendo R: distncia em cm; N: RPM
Raio (cm)
rcf (g) 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25
900 3391 3172 2991 2837 2705 2590 2488 2398 2317 2243 2176 2115 2058 2006 1958 1913 1871 1831 1794
950 3484 3259 3073 2915 2779 2661 2557 2464 2380 2305 2236 2173 2115 2061 2012 1965 1922 1882 1844
1000 3575 3344 3153 2991 2852 2730 2623 2528 2442 2364 2294 2229 2170 2115 2064 2016 1972 1931 1892
1050 3663 3426 3230 3065 2922 2798 2688 2590 2502 2423 2350 2284 2223 2167 2115 2066 2021 1978 1938
1100 3749 3507 3306 3137 2991 2663 2751 2651 2561 2480 2406 2338 2276 2218 2165 2118 2068 2025 1964
1150 3833 3586 3381 3207 3058 2926 2813 2711 2619 2536 2460 2391 2327 2268 2213 2162 2115 2070 2028
1200 3916 3663 3453 3276 3124 2991 2873 2769 2675 2590 2513 2442 2377 2317 2261 2209 2160 2115 2072
1250 3997 3738 3525 3344 3188 3052 2933 2826 2730 2643 2565 2492 2426 2364 2307 2254 2205 2158 2115
1300 4076 3812 3594 3410 3251 3113 2991 2882 2794 2696 2615 2542 2474 2411 2353 2299 2248 2201 2157
1350 4153 3885 3663 3475 3313 3172 3048 2937 2837 2747 2665 2590 2521 2457 2398 2343 2291 2243 2196
1400 4230 3958 3730 3539 3374 3230 3104 2991 2889 2798 2714 2638 2567 2502 2442 2386 2333 2284 2238
1500 4378 4095 3861 3663 3492 3344 3213 3096 2991 2896 2809 2730 3657 2590 2528 2470 2415 2364 2317
1600 4522 4230 3988 3783 3607 3453 3318 3197 3089 2991 2901 2820 2744 2675 2811 2551 2494 2442 2393
1700 4661 4360 4110 3899 3718 3560 3420 3296 3184 3083 2991 2906 2829 2757 2691 2629 2571 2517 2466
1800 4796 4486 4230 4013 3826 3663 3500
3519 3391 3276 3172 3077 2991 2911 2837 2769 2705 2646 2590 2538
1900 4927 4609 4345 4122 3931 3763 3616 3484 3366 3259 3162 3073 2991 2915 2845 2779 2718 2661 2607
2000 5055 4729 4458 4230 4033 3861 3710 3675 3453 3344 3244 3153 3068 2991 2919 2852 2789 2730 2675
2100 5160 4646 4568 4334 4132 3956 3601 3663 3539 3426 3324 3230 3144 3065 2991 2912 2656 2796 2741
2200 5302 4960 4676 4436 4230 4049 3891 3749 3622 3502 3402 3306 3218 3137 3061 2991 2925 2863 2806
2300 5421 5071 4781 4536 4325 4140 3978 3883 3703 3586 3479 3381 3291 3207 3130 3058 2991 2928 2869
2400 5538 5180 4884 4633 4418 4230 4064 3916 3783 3663 3554 3453 3361 3276 3197 3124 3055 2991 2930
2500 5652 5267 4965 4729 4509 4317 4147 3997 3661 3738 3627 3525 3431 3344 3263 3168 3116 3052 2991
2600 5764 5392 5083 4822 4598 4402 4230 4076 3937 3812 3699 3594 3499 3410 3328 3251 3180 3113 3050
2700 5874 5494 5180 4914 4686 4486 4310 4153 4013 3885 3769 3663 3565 3475 3391 3313 3240 3172 3108
2800 5981 5595 5275 5004 4772 4568 4389 4230 4086 3956 3838 3730 3631 3539 3453 3374 3300 3230 3165
2900 6087 5694 5369 5093 4856 4649 4467 4304 4158 4026 3906 3796 3695 3601 3515 3434 3358 3288 3221
*Consulte o fornecedor sobre as recomendaes de centrifugao.
No exemplo acima, 3500 rpm/10min

Captulo 8
Hematomas, hemlise
e lipemias: como evit-las
Hematomas, hemlise e
lipemias: como evit-las
Este captulo trata das interferncias mais comuns na coleta de sangue formao de hematomas,
hemlise e lipemia e os cuidados que o profissional deve ter para evit-las.
A formao de hematomas
O hematoma G o extravasamento do sangue para o tecido adjacente
ao vaso e a sua formao bastante comum. Veja a seguir as situaes nas
quais isso ocorre:
Quando as veias so mais finas do que a agulha;
Nas tentativas mal sucedidas como, por exemplo, uma segunda
coleta na mesma veia ou mltiplas tentativas de encontrar a veia
redirecionando a agulha;
Quando a agulha for retirada da veia antes de soltar o garrote;
Quando a manga da blusa do usurio estiver apertando o brao
como um garrote;
Quando, aps a puno, a presso no local for mantida por tempo
inferior a 3 minutos e/ou o local for esfregado;
Dobrar o brao ou carregar peso aps a coleta de sangue.
Grande parte dessas situaes pode ser evitada seguindo-se
corretamente as orientaes deste manual.
Hemlise
A Hemlise o resultado do rompimento da membrana da hemcia,
causando liberao de hemoglobina. a principal causa para rejeio de
amostras nos laboratrios. Pode ser identificada a olho nu, pela observao
do aspecto avermelhado presente no soro ou plasma.

Veja a seguir alguns cuidados que voc dever ter aps a coleta de
sangue para evitar a hemlise:
Quando coletar com seringa, retire a agulha antes de transferir o material
coletado, dispensando-a suavemente pelas paredes dos tubos;
Aps a coleta, sempre homogeneze o tubo suavemente por inverso;
Sempre que possvel, faa os exames a partir do tubo primrio (o
que foi identificado na presena do usurio e no qual o sangue foi
colhido) evitando a transferncia de um tubo para outro. Pode haver
ressuspenso das hemcias, causando hemlise pela ruptura das
hemcias que permanecem junto com o soro transferido;
Transporte os tubos sempre na posio vertical. Essa posio permite
a completa formao do cogulo e reduz a agitao no interior do
tubo durante o transporte;
Proteja a amostra de sangue total da exposio a temperaturas muito
elevadas ou baixas. Mantenha a temperatura entre 20 e 26C;
No interrompa bruscamente a centrifugao.
Ateno
Nunca coloque o sangue total em contato direto com o gelo,
pois baixas temperaturas podem provocar hemlise!
Lipemia
A lipemia causada pela presena de grande quantidade de lipdios
(gordura) no sangue. Pode ser identificada a olho nu pela observao do
aspecto turvo (leitoso) do soro ou plasma.
Alguns usurios em tratamento com antiretrovirais para a infeco
pelo HIV ou com outras enfermidades podem apresentar lipemia
permanente. Outros podem apresentar a lipemia transitria, comum
aps a ingesto de alimentos gordurosos.
Para prevenir a lipemia nos exames sorolgicos deve-se seguir as
recomendaes de jejum, definidas para cada tipo de exame, e evitar
coletar amostras quando o usurio tiver ingerido alimentos gordurosos a
menos de quatro horas.

Captulo 9
Coleta de sangue para testes rpidos e
coleta em papel-filtro por puno digital
Coleta de sangue para testes rpidos e
coleta em papel-filtro por puno digital
Coleta de sangue para testes rpidos

Os testes rpidos (TR) vm sendo cada vez mais utilizados para
o diagnstico da infeo pelo HIV e da sfilis porque possuem qualidade
similar aos testes j utilizados na rotina laboratorial, com a vantagem de
apresentarem resultado em no mximo 30 minutos, e leitura a olho nu, sem
a necessidade de equipamentos especiais.
Os testes rpidos e outras metodologias so indicados pela PORTARIA
SVS/MS N 151, DE 14 DE OUTUBRO DE 2009. Podem ser utilizados para
o diagnstico da infeco pelo HIV em indivduos com idade acima de 18
meses, na etapa de triagem ou em situaes especiais.
Para realizao de TR pode ser utilizado sangue total, colhido
por puno da polpa digital ou por puno venosa, ou soro ou plasma,
dependendo das especificaes do fabricante do produto.
Para saber mais sobre a coleta de sangue para Testes Rpidos,
recomendamos o curso TELELAB HIV Estratgias de Utilizao de
Testes Rpidos no Brasil, no qual voc ter oportunidade de aprender
como fazer os testes, interpretar os resultados e conhecer a poltica de
utilizao recomendada pelo Ministrio da Sade.
Coleta de Sangue em Papel-Filtro

A coleta de sangue em papel filtro utilizada h muitos anos nos
estudos de triagem neonatal de doenas metablicas congnitas e bem
sucedida na triagem de vrias infeces como, por exemplo, a infeco pelo
HIV.
As amostras de sangue coletadas em papel-filtro vm sendo cada
vez mais utilizadas no diagnstico laboratorial em virtude da facilidade da
coleta, do transporte, da estocagem e do processamento.

As amostras coletadas em papel-filtro so conhecidas como DBS.
Esta uma sigla que em ingls significa Dried Blood Spot ou seja
amostra de sangue seco.
Vantagens da coleta em papel-filtro

A coleta de amostras de sangue em papel-filtro apresenta vantagens
nicas para programas de triagem de doenas infecciosas e anlises
epidemiolgicas de grande escala.
Uma pequena quantidade de sangue, obtida facilmente atravs
de uma picada no dedo, suficiente para a realizao de vrios
exames.
As amostras secas em papel-filtro no exigem refrigerao, podem ser
encaminhadas, inclusive pelos Correios, reduzindo significativamente
os custos do transporte.
Caractersticas do papel-filtro
Para a coleta de amostras em papel-filtro somente podem ser
utilizados os papis com fibras com 100% de algodo, com pH entre
5,7 e 7,5, que possuam a gramatura e uma malha especial que atenda a
especificaes definidas pelo fabricante do conjunto diagnstico que ser
utilizado para fazer o exame. A gramatura e a malha adequadas permitem a
absoro dos volumes de sangue necessrios realizao de vrios exames,
inclusive exames sorolgicos e de biologia molecular.
Esses papis so diferentes de outros comumente utilizados nas
filtragens feitas em laboratrio.
Ateno
Os profissionais que realizam coleta e manipulao de DBS esto
sob os mesmos riscos biolgicos da coleta de sangue.
Siga as mesmas precaues de biossegurana utilizadas para
outros mtodos de coleta de sangue.

Passo a passo da coleta em papel-filtro por puno
digital
Preparao dos materiais
1. Confira se voc dispe de todos os materiais que ir utilizar:
Carto de coleta com crculos demarcados em papel-filtro e
rea para identificao da amostra;
Luvas;
Gaze ou algodo hidrfilo;
lcool etlico 70 % (p/p);
Lanceta;
Recipiente com paredes rgidas para descarte de material
perfurocortante;
Caneta esferogrfica;
Suporte para secagem.
Figura 24 Carto de coleta com crculos demarcados em papel filtro.
Identificao do usurio e do material

2. Confira os dados do usurio, verificando essas informaes em
um documento de identidade que contenha foto;
3. Identifque o carto;
4. Informe ao usurio como ser o procedimento;
5. Pea ao usurio que confira os seus dados no carto de coleta;

Preparao para coleta
6. Higienize suas mos e calce as luvas;
7. Antes de iniciar a coleta, sempre que possvel, pea para o usurio
que higienize as mos;
8. Observe os dedos do usurio e escolha preferencialmente a
ponta do dedo mdio, anelar ou indicador ou o dedo que tiver
menos calosidade;
Dedo mnimo
Dedo anelar
Dedo mdio
Dedo indicador
Polegar
Figura 25 Nomes dos dedos da mo.
9. Se a mo do usurio estiver muito fria, o fluxo de sangue estar

diminudo, dificultando a coleta. Aquea a mo do usurio
massageando-a ativamente ou, ainda, caso esteja disponvel,
utilize uma toalha umedecida em gua quente;
10. Posicione-se em frente ao usurio;
11. Segure a mo do usurio com o lado da palma para cima, numa
altura abaixo do cotovelo. Pressione levemente a mo na direo
do punho para o dedo no qual ser realizada a coleta;
12. Faa a antissepsia no local de coleta do dedo com gaze ou
algodo embebidos em lcool 70% (p/p) ;
13. Deixe o lcool secar espontaneamente;
14. Posicione a lanceta na parte lateral da ponta do dedo;
Figura 26 Lanceta.

Coleta
15. Pressione firmemente a lanceta contra o dedo e perfure a pele;
16. Despreze a lanceta em recipiente para descarte de material
perfurocortante;
17. Pressione o dedo do usurio prximo ao local da puno para
promover a formao da gota de sangue;
18. Mantenha a mo do usurio levemente inclinada para evitar que
a gota escorra;
Figura 27 Coleta em papel filtro com a mo inclinada.
19. Coloque o carto de coleta prximo rea puncionada, sem

tocar no dedo. Faa uma leve presso na base do dedo at que se
forme uma grande gota;
20. Deixe pingar uma gota dentro do primeiro crculo impresso no
carto de coleta. No encoste o papel na gota. Voc pode pingar
mais uma gota caso o crculo no tenha sido totalmente preenchido.
Recomendao: Aplique o sangue apenas em um lado do papel-
filtro o que contm o crculo impresso;
21. Repita a leve presso no dedo e aplique uma gota no segundo
crculo, impresso no carto;
22. Preencha todos os crculos repetindo o procedimento acima: leve
presso no dedo at a formao da gota e colocao no crculo
no papel-filtro;
Finalizao da coleta
23. Aps preencher todos os crculos, cubra com gaze ou algodo o local
puncionado no dedo e solicite que o usurio faa presso no local;
24. Verifique se o fluxo de sangue cessou. Caso contrrio, solicite que
o usurio mantenha a presso por mais tempo.

Preparao dos Identificao
Preparao Finalizao
materiais e do do usurio e do Coleta
profissional material
1. Confira os 2. Confira os dados 5. Higienize suas 14.Pressione 22. Cubra o local com
materiais do usurio em mos. Calce as firmemente o gaze e solicite que
documento com luvas dedo e perfure a faa presso
foto pele
em papel-filtro
6. Pea para o 23.Verifique se o
Ateno
3. Identifique o usurio higienizar 15.Descarte a fluxo cessou
aps o uso.

carto as mos lanceta em
recipiente 24.Cessado o fluxo,
4. Pea que 7. Observe os apropriado descarte a gaze
confirme os dedos do usurio em recipiente
dados no carto e escolha um 16.Pressione o dedo para materiais
de coleta deles para puno prximo ao local biolgicos
para formao da
8. Aquea a mo gota de sangue
do usurio, se
necessrio 17.Mantenha a
mo levemente
9. Posicione-se em inclinada para o
frente ao usurio sangue escorrer
10.Segure a mo e 18.Coloque o carto

pressione-a na prximo ao local,
direo do punho sem toc-lo
para o dedo
19.Deixe pingar a
11.Faa antissepsia gota no 1 circulo
descarte no recipiente para material biolgico.
do local do carto
12.Deixe o lcool 20.Repita a presso

secar e preencha o 2
crculo do carto
13.Posicione a
lanceta na lateral 21.Repita o
do dedo procedimento
Diagrama passo a passo da coleta de sangue por puno digital
at preencher
No toque na rea dentro do crculo antes e aps a coleta de sangue.
produtos entrem em contato com o carto de coleta antes ou

No permita que gua, antisspticos, talco das luvas ou outros
todos os crculos
25. Cessado o fluxo, retire o algodo ou a gaze do dedo do usurio e
Coleta por puno venosa e aplicao em papel-filtro
Pode ser realizada coleta com seringa e agulha ou com sistema a
vcuo. Siga os seguintes passos:
Colete sangue total em tubo contendo o anticoagulante EDTA.
Homogeneze cada tubo entre 5 e 10 vezes; e
Pipete 50L de sangue total no centro de cada crculo do carto. Cuide
para que a rea do carto contendo o sangue no toque em nada.
Validao da amostra em papel-filtro

Tenha certeza de que todo o crculo est preenchido e com bordas
regulares.
Observe se os limites do sangue coletado coincidem com os limites
dos crculos impressos no papel-filtro. Respeite este limite, pois
importante evitar o excesso de sangue no papel.
Caso haja qualquer dvida quanto qualidade da amostra coletada,
repita o procedimento de coleta em um novo carto de coleta.
Secagem das amostras colhidas em papel-filtro

As amostras de sangue colhidas em papel-filtro devem secar em
temperatura ambiente. Os cartes de coleta devem ser colocados em
posio horizontal, suspensos e separados um do outro.
Alguns cartes contm uma extremidade que pode ser dobrada
e permite que as amostras fiquem suspensas sem tocar na superfcie de
secagem.
Ateno
As partes do carto que contm as amostras no podem ser
tocadas. O carto deve ficar suspenso em local ventilado at a
secagem completa da amostra.

Figura 28 Secagem das amostras de sangue.
Deixe o papel-filtro com a amostra pelo menos 3 horas em

temperatura ambiente, em local arejado, distante de fontes de calor e da
luz solar. Esse tempo varia de acordo com a temperatura e umidade do local
de secagem.
Em regies midas a completa secagem pode levar at 24 horas.
Ateno
No utilize qualquer equipamento para apressar a secagem,
como, por exemplo, estufa ou secador de cabelo.
Acondicionamento das amostras de papel filtro

Depois de secas, as amostras devem ser acondicionadas
individualmente em um envelope de plstico ou de alumnio, contendo
um sach dessecante de slica gel. Utilize envelope com fecho do tipo zip
lock.
Para vedar o envelope, pressione a embalagem de forma a retirar a
maior quantidade possvel de ar de dentro e ento feche corretamente a
embalagem.
Quando o envio de vrios cartes em um mesmo envelope no puder
ser evitado, existem trs maneiras de proceder, para evitar a contaminao
cruzada entre as amostras:

Pegue dois cartes, gire 180, de
modo que as amostras nos crculos
fiquem em posies opostas, como
indicado na foto ao lado.
Coloque entre os cartes de coleta,

uma folha de papel-vegetal, ou
papel-manteiga, de modo que uma
amostra no encoste na outra.
No caso de carto com extremidade

dobrvel, a dobra j permite que a
amostra de um carto no contamine
a de outro.
Figura 29 Formas de acondicionar vrios cartes em um envelope.

Armazenamento das amostras em papel-filtro
Amostras secas e bem acondicionadas podem ser armazenadas
em temperatura ambiente, desde que fiquem longe de fonte de luz solar
direta e em baixa umidade. Para reduzir a umidade, coloque no interior do
envelope um ou mais sachs dessecantes.
Para armazenar por perodos de at dois anos, as amostras devem
permanecer em geladeira.
O armazenamento por tempo superior a dois anos pode ser realizado
caso a amostra permanea a -20C.
Condies inadequadas de armazenamento podem comprometer
a integridade da amostra.
Ateno
O sach dessecante no deve ser reutilizado, pois pode estar
contaminado por uma amostra.
Ao manipular o sach dessecante j utilizado use EPI, pois um
material potencialmente infectante.
Transporte das amostras em papel-filtro

As amostras devem ser transportadas em temperatura ambiente.
Envelopes contendo amostras estocadas em geladeira ou a -20C
devem permanecer fechados e colocados em temperatura ambiente.
Quando atingirem a temperatura ambiente, devem ser abertos e o sach
dessecante substitudo antes do seu envio.
O envelope contendo os cartes deve ser acondicionado em outro
envelope mais espesso, endereado e selado com cola de boa qualidade e
remetido para o laboratrio que ir realizar as anlises.
Ateno
Comunique ao laboratrio o envio das amostras.

Captulo 10
Amostras para quantificao de
carga viral e contagem de linfcitos
Amostras para quantificao de
carga viral e contagem de linfcitos
Uma das respostas do sistema imune a infeces realizada por clulas

sanguneas como, por exemplo, os linfcitos T que possuem receptores do
tipo CD4+ e CD8+. O HIV se multiplica no interior dos linfcitos T CD4+/
CD8+ causando sua destruio. Com o aumento da replicao dos vrus,
ocorre uma reduo da quantidade de linfcitos T CD4+/CD8+, por isso
importante quantificar estas clulas e os vrus circulantes (quantificao do
RNA viral ou carga viral).
Com essas medidas possvel fazer a avaliao da progresso da
infeco, definindo o momento no qual se deve iniciar o tratamento e, ainda,
permitindo o monitoramento da resposta ao tratamento instaurado.
Amostras para Quantificao de Carga Viral RNA

viral
Amostra utilizada
Plasma, obtido a partir de sangue total colhido com o anticoagulante
EDTA.
Quantidade: em crianas e adultos colha sempre dois tubos.
Cada um deve conter entre 3 e 5 mL de sangue.

Em algumas situaes como, por exemplo, no caso de recm-
nascidos o volume pode ser menor desde que coletado em tubos para
coletas peditricas, com volume de 2 mL cada.

Preparo da amosta
Opo 1: aps a coleta, o mais rpido possvel, centrifugue o sangue
total entre 2.500 e 3.500 rpm, durante 15 minutos, para obter o
plasma;
Opo 2: o sangue coletado pode permanecer em temperatura entre
18C e 25 C por um perodo mximo de 6 horas. Neste perodo a
amostra deve ser centrifugada para obteno do plasma;
Ateno
No submeta o plasma a processos de filtrao ou centrifugao
adicionais com o intuito de diminuir a turbidez.
Em seguida, com auxlio de uma ponteira estril, sem ressuspender

as clulas, transfira pelo menos 1 mL do plasma para tubos estreis
livres de enzimas que degradam o RNA (RNAses) e o DNA (DNAses).
Esses tubos devem estar previamente identificados.
Observao:
Se a separao do plasma no for feita no local de coleta, os tubos
com sangue total devem ser enviados, em, no MXIMO, quatro (4) horas
ao laboratrio.
Esse tempo deve ser rigorosamente respeitado, pois o plasma
tem que ser obtido em at 6 horas aps a coleta do sangue total. Se o
sangue total for transportado para separao no laboratrio de carga viral,
reserve duas horas para que o transporte at o laboratrio, a recepo
das amostras, a conferncia das BPA-I (Boletim de Produo Ambulatorial
individualizado) e a separao do plasma ocorram dentro do tempo limite
(6 horas) estabelecido para que a amostra tenha a qualidade necessria
para o exame de quantificao da carga viral.

Armazenamento da amostra
Caso o teste no seja realizado imediatamente, fracione o plasma
em alquotas e faa seu congelamento. Utilize somente tubos estreis de
polipropileno, livres de RNAses e DNAses, com tampas tipo flap ou de rosca.
Com relao ao tempo, o plasma pode ser armazenado:
Por no mximo 72 horas a menos 20C;
Por perodos mais longos, o plasma deve ser conservado em
temperatura entre menos 70C e menos 80C.
Quanto ao volume de cada alquota, estas devem conter a quantidade
necessria para a realizao de um teste. Leia as instrues do fabricante do
kit ou consulte o laboratrio que vai realizar os testes para saber o volume
adequado.
Transporte das amostras

Caso as amostras sejam analisadas em outro local, as alquotas
de plasma devem ser transportadas congeladas em caixas apropriadas
contendo gelo seco em quantidade suficiente para manter a temperatura
adequada durante todo o tempo do transporte.
Amostras para contagem de linfcitos T CD4 +/CD8 +
Amostra utilizada
Sangue total: de crianas e de adultos colha sempre um tubo
de 3 a 5 mL de sangue com o anticoagulante EDTA. Em algumas
situaes como, por exemplo, no caso de recm-nascido o volume
pode ser menor desde que coletado em tubo para coleta peditrica
com volume de 2 mL cada.
Cuidados com a amostra

O sangue total coletado para a contagem de clulas T CD4+/CD8+ no
pode ser colocado em geladeira ou congelador, pois baixas temperaturas
causam ruptura das clulas e consequentemente hemlise.

Transporte de amostras
As amostras podem ser transportadas at outro local desde que o
perodo entre a coleta e a realizao da contagem no ultrapasse 48 horas.
A temperatura das amostras deve permanecer entre 20 e 25C.
Devem estar escritos na etiqueta de cada tubo os dados de identificao
da amostra e a data e horrio em que foi feita a coleta, para possibilitar a
avaliao de viabilidade da amostra.
Ateno
No envie amostras nos finais de semana ou feriados no local
de destino.
Antes do envio das amostras, faa contato com o laboratrio
que ir realizar a contagem de linfcitos T CD4+/CD8+ para
saber se pode enviar ou para informar o envio do material.
Lembre-se
As amostras para a contagem de linfcitos T CD4+/CD8+ e para
a quantificao da carga viral so infectantes, pois pertencem a
usurios sabidamente infectados pelo HIV.
Use sempre os Equipamentos de Proteo Individual EPI como
medida de biossegurana e para evitar a contaminao das amostras
com Rnases ou Dnases. Essas enzimas esto presentes nas mos,
pele ou cabelos provenientes de clulas rompidas destes tecidos.

Captulo 11
Orientaes para transporte de sangue, soro ou

plasma
As Diretrizes para o Transporte Seguro de Substncias Infecciosas
e Espcimes para Diagnstico da Organizao das Naes Unidas
ONU orientam que a embalagem para o transporte seguro composta
por trs camadas:
Recipiente primrio: composto pelo tubo com a amostra, com
tampa que permita a completa vedao do contedo. Deve ser
de material resistente a impactos, sem rachaduras ou trincas e
devidamente identificado. Ao ser transportado deve ser envolvido
em material que tenha capacidade de absorver todo o seu contedo
em caso de quebra.
Recipiente secundrio: deve ser de material rgido, impermevel e
prova de vazamentos para proteger o(s) recipiente(s) primrio(s).
Recipiente tercirio ou embalagem externa: acondiciona o
recipiente secundrio e protege o seu contedo de fatores do
ambiente, tais como, batidas, amassados, chuva, etc. durante seu
transporte. Alm disso, deve conter informaes da identificao
do contedo, dados do destinatrio e do remetente.
Figura 30 Cuidados no transporte.

Amostras biolgicas como substncias infectantes.
As amostras biolgicas G como sangue, soro ou plasma so
classificadas como de risco 2. So assim classificadas porque podem
conter agente biolgico capaz de provocar infeco ou doena
em pessoas ou animais, com risco limitado de disseminao e com
disponibilidade de tratamento e profilaxia.
O que define o Risco Biolgico a probabilidade da exposio
a agentes biolgicos G que podem estar presentes em amostras
biolgicas.
Para os fins de transporte, entende-se por substncias infectantes
as que se sabe ou se suspeita que contenham agentes patgenos que
podem causar enfermidades nos animais e nos seres humanos.
Saiba mais
Sobre detalhes das normas vigentes para o transporte de amostras
biolgicas, consulte:
Resolues 420/2004 e 701/2004 Transporte de Produtos
Perigosos da Agncia Nacional de Transportes Terrestres
ANTT e sua atualizao.
No site http://www.antt.gov.br clique em Legislao
Transporte de Cargas/Produtos Perigosos/Nacional.
Portaria 472, de 09 de maro de 2009, Resoluo GMC
N 50/08 do Ministrio da Sade. Regulamento Tcnico
Mercosul para Transporte de Substncias Infecciosas e
amostras biolgicas entre os Estados Partes do Mercosul.
No site http://portal.saude.gov.br/saude/

Homenagem e agradecimentos
Existem companheiros cuja dedicao, profissionalismo e amizade

so to presentes em nosso trabalho, que no so capazes de se dissipar
com a ausncia que os desgnios da vida podem s vezes nos impor.
Desde a concepo do projeto TELELAB, at a presente srie, dois
desses seres maiores, Cludia Renata Fernandes Martins e Luiz Fernando
de Ges Siqueira, nos deixaram.
Suas contribuies, no entanto, permanecem. Permanecem como
uma boa memria, uma inspirao que maior que a saudade.
A eles fica a homenagem e o registro de que fizeram e sempre faro
parte dessa equipe, desse projeto.
Finalmente, nossos agradecimentos aos:
Laboratrio Municipal de Curitiba LMC;
Laboratrio de Sade Pblica do Distrito Federal LACEN/DF
Laboratrio de Sade Pblica de Santa Catarina LACEN/SC
Universidade Federal de Santa Catarina UFSC
Universidade de Caxias do Sul UCS.
Por terem cedido os profissionais que elaboraram essa que a quarta
srie do Sistema de Ensino Distncia para Profissionais de Laboratrio
TELELAB.

Glossrio
Agentes biolgicos: so bactrias, vrus, ricketsias, fungos e

protozorios, geneticamente modificados ou no, as culturas de
clulas, as toxinas e os prons.
Amostras biolgicas: so produtos obtidos diretamente de seres
humanos ou animais como, por exemplo, sangue e seus componentes,
secrees, excrees, tecidos, clulas, fluidos orgnicos e restos
mortais transportados com fins de estudo, diagnstico, investigao,
tratamento e/ou preveno de enfermidades, controle de qualidade
e outros. Amostras biolgicas coletadas em laboratrio podem
conter substncias infectantes.
Emolientes: so combinaes de gua, leos e gorduras destinadas
a ajudar a hidratar a pele e restaurar a oleosidade perdida devido
ao ressecamento.
Estase venosa: situaes em que h diminuio da velocidade da
circulao do sangue.
Estenose: um estreitamento anormal de um vaso sanguneo ou
outro rgo do corpo.
Fase pr-analtica: fase que se inicia com a solicitao da anlise,
passando pela obteno da amostra e finda ao se iniciar a anlise
propriamente dita.
Fibrina: um agregamento das plaquetas na regio onde houve
rompimento dos vasos sanguneos, essa protena produz uma rede
que estanca o sangue, pois forma o cogulo composto por hemceas,
leuccitos e plaquetas, que ficam presos na rede de fibrina.
Hematoma: o acmulo de sangue em um rgo ou um tecido,
geralmente bem localizado e que pode ser decorrncia de traumatismo,
alteraes hematolgicas ou outras causas.
Hemlise: o resultado do rompimento da membrana da hemcia
causando liberao de hemoglobina. Pode ser visualizado pelo
aspecto avermelhado do soro ou plasma.

Homnimos: quem tem o mesmo nome que outra pessoa.
Lavatrio: pea sanitria destinada exclusivamente lavagem das
mos (RDC ANVISA 50/2002).
Lipemia: a presena de grande quantidade de lipdios (gordura)
no sangue causando turvao da amostra. Pode ser visualizado
pelo aspecto turvo do soro ou plasma.
Materiais Biolgicos: lquidos, secrees, excrees, e fragmentos
de tecidos obtidos do corpo humano ou de outros animais.
Nome social: o nome pelo qual pessoas preferem ser chamadas
cotidianamente, em contraste com o nome oficialmente registrado
que no reflete sua identidade de gnero.
Norma ISO 6710.2: uma norma internacional que padroniza os
requisitos e metodologias para a produo de tubos de coleta de
sangue a vcuo.
RDC 50/2002: resoluo n 50, de 21 de fevereiro de 2002, que dispe
sobre o Regulamento Tcnico para planejamento, programao,
elaborao e avaliao de projetos fsicos de estabelecimentos
assistenciais de sade. Para obter o documento na ntegra, acesse
o site da Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria (ANVISA)
http://www.anvisa.gov.br e clique no link LEGISLAO.
Rastreabilidade: a capacidade de recuperao do histrico, da
aplicao ou da localizao daquilo que est sendo considerado,
por meio de identificaes registradas. Ela importante porque
possibilita acompanhar os processos, encontrar possveis erros,
identificar a sua origem, a sua causa, corrigi-lo e evitar sua repetio.
(Fonte: RDC/ANVISA n 302 de 13 de outubro de 2005).
Substncias infectantes: para os fins de transporte, entende-se por
substncias infectantes as que se sabe ou se suspeita que contenham
agentes patgenos tais como bactrias, vrus, ricketsias, parasitas
e fungos ou outros agentes tais como prons, que podem causar
enfermidades nos animais e nos seres humanos.
Transfixao: quando h perfuramento do vaso sanguneo ou
outro rgo, atravessando de lado a lado.

Referncias Bibliogrficas
ANDRIOLO, A; BALLARATI, C.A.; BARBOSA, I.V.; MARTINS, A.R.; MELO, M.R.;

MENDES, M.E.; ROMANO, P.; SUMITA, N.M.; TRINDADE, P.A. Recomendaes
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para coleta de sangue venoso 2. ed. So Paulo: Minha Editora, 2010.
BRASIL. Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria. Higienizao das mos
em servios de sade/Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria. Braslia:
Anvisa, 2007.
HENRY, J. B. Diagnsticos clnicos e tratamento por mtodos
laboratoriais. 20. ed. So Paulo (SP): Manole, 2008. xvii,1734p. ISBN
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JANICE L. FULS; NANCY, D. RODGERS; GEORGE, E. FISCHLER; JEANNE M.
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of Antimicrobial and Nonantimicrobial Soaps under Different Test
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2008, p. 37393744 Vol. 74, n. 12.
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www.who.int. Acesso em: 20 de julho de 2010.

Coleta de sangue: técnicas para diagnóstico de DST, HIV e hepatites

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COLETA DE SANGUE

Diagnstico e monitoramento das DST, Aids e Hepatites Virais

MINISTRO DE ESTADO DA SADE

SECRETARIA DE VIGILNCIA EM SADE

DEPARTAMENTO DE DST, Aids e Hepatites Virais

UNIDADE DE LABORATRIO - ULAB

COORDENAO DO TELELAB - ULAB

COORDENAO DE PRODUO DO PROJETO TELELAB 2009/2010

PROJETO GRFICO, EDIO E DIAGRAMAO

ILUSTRAES E FOTOS INDITAS

FOTOS DOS VDEOS

PRODUO, DISTRIBUIO E INFORMAES:

Seja bem-vindo (a) ao Sistema de Educao a Distncia TELELAB.

TELELAB | Coleta de Sangue 3

Consultoria pedaggica: Maria Lcia Ribinick e Maristela Arantes

4 TELELAB | Coleta de Sangue

Agora voc faz parte do Sistema de Educao a Distncia TELELAB

Funcionamento do seu curso TELELAB:

Ps-teste e avaliao do curso:

TELELAB | Coleta de Sangue 5

Para esclarecimento de dvidas e sempre que precisar, comunique-se diretamente com:

6 TELELAB | Coleta de Sangue

TELELAB | Coleta de Sangue 7

8 TELELAB | Coleta de Sangue

Os exames laboratoriais so realizados por solicitao mdica, com o

TELELAB | Coleta de Sangue 9

O ambiente onde realizada a coleta de amostras o espao fsico, os mobilirios e os acessrios

Infraestrutura para a coleta de amostras por

TELELAB | Coleta de Sangue 13

Figura 1 Mobilirios e acessrios para coleta de amostras.

14 TELELAB | Coleta de Sangue

Materiais necessrios para coleta insumos

Materiais necessrios para todos os tipos de coleta de sangue

1. Gaze ou algodo hidrfilo;

Alm dos materiais listados acima, apresentamos, nas tabelas a

TELELAB | Coleta de Sangue 17

Materiais para coletas com seringa e agulha

Materiais para coletas por puno digital

Figura 5 Materiais para coleta por puno digital.

18 TELELAB | Coleta de Sangue

Agulhas 21G Agulhas 22G

Possuem 0,8 mm de dimetro Possuem 0,7 mm de dimetro

So utilizadas para as coletas So utilizadas para as coletas

TELELAB | Coleta de Sangue 19

Figura 6 Agulha para coleta a vcuo. Figura 7 Escalpe.

Caractersticas dos tubos:

Tubos para coleta com seringa e agulha:

possam ser removidas manualmente ou por mtodos mecnicos.

20 TELELAB | Coleta de Sangue

Tubos para coleta a vcuo:

possam ser removidas manualmente ou por mtodos mecnicos.

TELELAB | Coleta de Sangue 21

Mecanismo Amostra Principais

Sangue total Exames de

Com ou sem Exames

Inibe Sangue total Exames

22 TELELAB | Coleta de Sangue

Ordem de utilizao de tubos plsticos na coleta de sangue:

Figura 8 Sequncia de utilizao pelas cores.

Inicie colhendo as amostras para testes de coagulao que utilizam

TELELAB | Coleta de Sangue 23

Figura 9 Sequncia de cores exames sorolgicos, contagem

Armazenamento de agulhas e tubos