Clase Prctica 1

Evaluacin de la Inmunidad Innata

 PROBLEMA
PROBLEMA 11

Uso de probiticos en la produccin animal

En la bsqueda de potenciales agentes probiticos para
mejorar la produccin de salmones, se decidi evaluar si la
suplementacin dietaria con Lactobacillus plantarum tena
efectos beneficiosos sobre los salmones.
En un primer momento, se abord el estudio de posibles
efectos sobre la respuesta inmune innata.

Butprom S, y col. (2013), Scient World J 2013:392523

 PROBLEMA
PROBLEMA 11
Probiticos en peces

Cmo se puede evaluar

la actividad fagoctica in
vitro?

Grupo control
Grupo suplementado con
probitico (107 CFU/g dieta)

A) Expliquen cmo se llev a cabo el experimento y cul puede haber

sido la muestra empleada
B) Interpreten los resultados que se muestran
 PROBLEMA
PROBLEMA 11
Probiticos en peces
Qu se evala en este
otro grfico? Describan
brevemente la tcnica
A1 empleada

Grupo control (n=20)

Grupo suplementado con
probitico (n=20)

Qu otras maneras/tcnicas
podramos emplear para evaluar
la funcionalidad de fagocitos ?
Diapositiva 4

A1 Esta parte del ejercicio si hace falta se puede sacar, para ganar tiempo para el problema de shock
Astrid; 13/04/2015
 PROBLEMA
PROBLEMA 11
Probiticos en peces

Luego, se llev a cabo una experiencia de desafo de salmones

con Aeromonas hydrophila, para evaluar si el consumo de la
dieta suplementada con el probitico modificaba los el nivel de
sobrevida de los salmones desafiados con este patgeno, que
afecta muy comnmente esta produccin.
Mortalidad comparada de los salmones infectados
con A. hydrophila segn consumo de dieta
suplementada a o no con probitico

C T
(20 C + 20 T) (10/20) (0/20)
(20 C + 20 T) (10/20) (0/20)
(20 C + 20 T) (10/20) (0/20)
 EVALUACIN DE ACTIVIDAD
FAGOCTICA

QUIMIOTAXIS

INGESTIN
ESTALLIDO
O2 RESPIRATORIO
L-arginina
IROs
PRODUCCIN
IRNs
DE XIDO
NITRICO

ACTIVACIN
CELULAR
VIABILIDAD MICROBIANA
 MUESTRA
fagocitos del paciente
INGESTIN
Microrganismo
patrn

Cubreobjetos

TINCIN

- % clulas fagocitantes
- Indice Fagoctico (IF)

IF= % clulas infectadas x N microorganismos promedio/ clula

 ESTALLIDO RESPIRATORIO

Microorganismo
patrn

NBT
FORMAZN
Amarillo y soluble
Azul e insoluble
IROs
> intensidad de azul
> nivel de estallido
> valor de densidad
ptica
Capacidad microbicida
- neutrfilos de canino macho, 2 aos, sano. (control)
- neutrfilos de canino macho, 2 1/2 aos, c/sospecha clnica de
inmunodeficiencia (paciente)
 PROBLEMA
PROBLEMA 22
La Peritonitis pleuritis infecciosa felina (PPIF) es una infeccin de
etiologa viral caracterizada por una respuesta inflamatoria PIF y AGP en felinos
intensa inmunomediada. Se ha descripto que muchos gatos con esta patologa
presentan un aumento importante de algunas protenas de fase aguda, como la
alfaglicoprotena cida (AGP) y la haptoglobina (Hp). Analicen las imgenes que
se muestran a continuacin y respondan:
A B
Albmina 2 +

1
1

a) Qu tcnica se emple en este caso? Cules son las fracciones en

las que puede separarse un suero? Las protenas relacionadas con la
respuesta inmune que conocen, en qu fraccin/es esperaran
encontrarlas?
b) Teniendo en cuenta estos resultados, qu paciente sospecha que
puede estar afectado de PPIF? A travs de qu mecanismo
explicaran el incremento de AGP detectado en esta patologa?
Electroforesis en Acetato de Celulosa
 ELECTROFORESIS de SUERO
Suero normal canino

Fraccin Valor Rango de

proteica Relativo referencia
(%) (%)
Albmina 45.0 40-48
1 5.3 4-6
2 11.2 8-15
27.5 19-29
9.0 6-10
Proteinemia = 6.90 g/dl
Relacin A / G = 0.81
 PROBLEMA
PROBLEMA 33
Biomarcadores en bovinos

En el marco de un estudio de biomarcadores en bovinos, se

midieron los niveles de haptoglobina srica en los animales que
presentaban alguna patologa infecciosa (neumona, mastitis)
subclnica (n=95) y en un nmero semejante de animales del
mismo rodeo pero sin manifestacin alguna de enfermedad
(n=92).

Antes de ver los resultados:

A. Qu es la haptoglobina? Qu funciones puede cumplir en
la respuesta inmune?
B. Qu entienden por el trmino biomarcador?

Humblet M y col. (2004), Res Vet Sci 77: 4147

 Los resultados obtenidos se muestran en los PROBLEMA
PROBLEMA 33
siguientes grficos: Biomarcadores en bovinos
C. Qu tipo de grficos se
muestran?

D. Teniendo en cuenta los

grficos y el pie de figura, qu
conclusiones se pueden extraer
sobre la posibilidad de usar la
haptoglobina como
biomarcador en bovinos?

E. Les parece entonces

correcta la afirmacin la Hp
sirve para detectar la mastitis
subclnica?
a) Concentracin de Hp en los bovinos enfermos (n=95). El mayor valor
obtenido fue de 878,6 mg/L. b) Concentracin de Hp en bovinos sanos
(n=92). Slo 3 animales presentaron valores por encima de 50 mg/L. n = n
de bovinos. De los bovinos sanos, el 97,5% tuvo concentraciones de Hp 25
mg/L; de los infectados, slo el 12% registr valores inferiores a 25 mg/L.
Material de consulta
Probiticos: posibles mecanismo
de accin