Sealizacin Protena Kinasa D:

Mltiples Funciones Biolgicas en

Salud y Enfermedad
La protena quinasa D (PKD) es una familia de protenas quinasas conservada
evolutivamente con Propiedades estructurales, enzimolgicas y reguladoras
diferentes de la PKC miembros de la familia. Sealizacin a travs de PKD es
inducida por un notable nmero de Estmulos, incluyendo agonistas de
receptores acoplados a protena G y polipptido Factores de crecimiento. PKD1,
el miembro ms estudiado de la familia, es cada vez ms Implicados en la
regulacin de un conjunto complejo de Incluyendo transduccin de seales,
proliferacin y diferenciacin celular, Trfico de membranas, secrecin,
regulacin inmune, hipertrofia cardaca y Contraccin, angiognesis y cncer.
PKD media un conjunto tan diverso de Funciones biolgicas normales y
anormales a travs de cambios dinmicos en su Y la localizacin temporal,
combinada con su especificidad de sustrato distinta. Estudios sobre PKD hasta
ahora indican una sorprendente diversidad tanto de su generacin de seal Y
la distribucin y su potencial para interacciones reguladoras complejas Con
mltiples vas descendentes, regulando a menudo la localizacin subcelular de
sus objetivos.

Regulacin de la sealizacin PKD

Un gran nmero de seales externas involucradas en Comunicacin,
incluyendo hormonas, neurotransmisores, Crecimiento y factores de desarrollo,
Citoquinas y lpidos bioactivos, se unen a los receptores Que promueven la
estimulacin de las isoformas del Fosfolipasa C (PLC) y catalizar la hidrlisis De
fosfatidilinositol 4,5-bifosfato a Producen dos segundos mensajeros: Ins (1,4,5)
P3, Que desencadena la liberacin de Ca2? Desde interno Almacenes, y DAG,
que provoca respuestas celulares a travs de isoformas clsicas (\ alpha, \
beta, \ beta) y novedosas (\ alpha, \ varepsilon, \ gamma, \ gamma) De PKC
(revisado en la Ref. 78). Los mecanismos Por el cual las seales mediadas por
PKC se propagan a Crticos siguen siendo incompletos. entendido. La protena
quinasa D1 (PKD1), la Y el miembro ms estudiado de una nueva protena
Quinasa dentro del grupo CAMK (que comprende PKD1, PKD2 y PKD3) y
separadas de la Los PKCs (revisados en la Ref. 78) estn atrayendo atencin.
PKD1 (96), antes llamada PKC? (41), Ha sido ampliamente estudiado in vitro,
con respecto a Identificar las funciones de sus dominios y las Efecto de la
sealizacin celular en su actividad y subcelular localizacin. En las clulas no
estimuladas, PKD1 est en una Estado de baja actividad cataltica (quinasa)
mantenida Por autoinhibicin mediada por el terminal NH2 Dominio, una regin
que contiene una repeticin de cysteinerich Cinc-dedo y una homologa de
pleckstrin Dominio (Ref. 33, 34, 78, 101, ratn PKD1 Dominios en la Figura 1).
PKD1 podra ser estimulado Por micelas de fosfatidilserina que contienen DAG o
steres de forbol en preparaciones libres de clulas (97). Estos primeros

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estudios implicaron que PKD1 representa Un nuevo componente de la
transduccin de seales Vas iniciadas por DAG en clulas diana. Estudios
posteriores, destinados a definir la regulacin PKD1 Dentro de las clulas
intactas, elucid un mecanismo De la activacin de PKD1 distinta de la
estimulacin directa De actividad enzimtica por DAG / ster de forbol Ms
fosfolpidos obtenidos in vitro. Especficamente, Tratamiento celular con steres
de forbol o anlogos de DAG Indujo una dramtica interconversin de PKD1 de
Una forma inactiva a una activa, tal como se muestra por in vitro Quinasa
realizados en ausencia de lpidos Co-activadores. En todos estos casos, la
activacin de PKD1 Fue bloqueado potentemente por tratamiento previo con
PKC Inhibidores que no inhiben directamente la actividad cataltica PKD1
Actividad (116), lo que sugiere que la activacin rpida de PKD1 Dentro de las
clulas intactas es mediada PKCs. De hecho, la cotransfeccin de PKD1 con
Formas mutantes de PKC "novedosas" (PKC \ alpha, \ varepsilon, \ beta, \ alpha
y \ beta) Result en la robusta activacin de PKD1 en ausencia De la
estimulacin celular. Estudios con mltiples receptores Agonistas (vase la
Figura 1), mutantes PKD1 y purificados PKD1 condujo a un modelo que prev
la fosforilacin De PKD1 en los residuos del bucle de activacin Ser744 y
Ser748 (el nmero de residuos corresponde a El ratn PKD1; FIGURA 1) como
un "encendido / apagado" directo, Para la actividad cataltica (revisado en la
referencia 78). Estudios ms recientes demostraron que el PKC-dependiente
PKD1 activacin es seguido por un Fase de activacin cataltica sostenida,
independiente de PKC Y fosforilacin inducida por estimulacin Con agonistas
de receptores acoplados a Gq, incluyendo Bombesina y vasopresina (38, 82).
Estos estudios Tambin revel que PKD1 proporciona un ejemplo de Protena
quinasa en la que cada residuo de la activacin Bucle est regulado por
diferentes mecanismos aguas arriba, La transfosforilacin para Ser744 Y
autofosforilacin para Ser748 (38, 82). As PKD1 es un punto de convergencia e
integracin de Mltiples estmulos que se activan rpidamente PKC y
persistentemente a travs de PKC-dependientes o PKC-vas independientes.
Estudios adicionales mostraron que los miembros de la familia PKD Las
redistribuciones rpidas en respuesta a la estmulo. PKD1 y PKD2 se trasladan
de la Cytosol a microambientes que contienen DAG en La membrana
plasmtica (75) seguida por PKC Translocacin inversa de PKD desde la De la
membrana plasmtica al citosol y Acumulacin en el ncleo (74). A diferencia
de, PKD3 es continuamente shuttling entre el citoplasma Y el ncleo (73).
Piscinas de la familia PKD Los miembros tambin localizan en el complejo de
Golgi (53, 108) y las mitocondrias (12). Adems, PKD1 y Los PKD2 contienen
motivos de unin a PDZ cortos Trmino COOH: VSIL en PKD1 e ISVL en PKD2.
Recientemente, el Na \ alpha / H \ Factor regulador del intercambiador 1
(NHERF - 1), una protena que contiene dominio PDZ, Ha demostrado
interactuar con estas secuencias de PKD1 y PKD2, lo que implica que PKD
puede formar complejos Con NHERF - 1 (46). As, PKD puede regular Objetivos
en una variedad de ubicaciones subcelulares y Por lo tanto, controlan mltiples
actividades celulares. Por consiguiente, PKD ha estado implicada en el
reglamento de una notable variedad de biolgicos fundamentales Procesos que
incluyen proliferacin celular, Polaridad, migracin y diferenciacin, membrana

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Trfico, transmisin del dolor, inflamacin, angiognesis, Contractilidad
cardaca, hipertrofia y cncer. La regulacin de la fosforilacin multi-sitio PKD,
Translocacin y actividad cataltica Ha sido revisado previamente (78). Esta
revisin se centra Sobre la funcin de la sealizacin PKD en la regla De
mltiples procesos biolgicos (FIGURA 2) Y destaca conceptos novedosos que
surgen de estos Estudios recientes (FIGURA 3).

FIGURA 1. Activacin de PKDs por estmulos mltiples

Hormonas, factores de crecimiento, neurotransmisores, quimiocinas, lpidos
bioactivos, proteasas y estrs oxidativo inducen La hidrlisis mediada por PLC
del fosfatidilinositol 4,5-bifosfato (PIP2) para producir DAG en la membrana
plasmtica, Que a su vez media la translocacin de PKD inactivos desde el
citosol hasta ese compartimento celular. DAG tambin Recluta, y
simultneamente activa, nuevas PKCs a la membrana plasmtica, que media la
transfosforilacin de PKD1 en Ser744 (en ratn PKD1). El DAG y la
transfosforilacin mediada por PKC de PKD actan sinrgicamente para
promover PKD activacin cataltica y autophosphorylation en Ser748. La
estructura modular de PKD (ratn PKD1) se ilustra Como un ejemplo de la

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familia PKD. PKD1 es el miembro ms estudiado de la familia, y su knockout
induce Letalidad embrionaria. Ms detalles se proporcionan en el texto.

Sealizacin PKD en proliferacin celular Y Diferenciacin

Proliferacin Celular de Fibroblastos y la Eje PKD / RIN1
En los fibroblastos, PKD1 puede ser activado por mltiples Agonistas de GPCR
que promueven el crecimiento (FIGURA 1) que Actan a travs de Gq, G12 y Gi
(112-114, 117), sugiriendo Que PKD funciones en la mediacin de sealizacin
mitognica (78). De hecho, la sobreexpresin de PKD1 O PKD2 potenci la
sntesis de ADN y la proliferacin celular Inducida por agonistas de receptores
acoplados a Gq En fibroblastos 3T3 suizos (82 - 84, 115). Recprocamente,
Agotamiento de PKD1 por transfeccin de estas clulas Con siRNAs PKD1
objetivo marcadamente atenuado Mitognesis inducida por GPCR (82). Estos
resultados Que la activacin cataltica de PKD1 juega un papel crtico Y el papel
selectivo en GPCR sealizacin mitognica. Una va clave implicada en la
sealizacin mitognica Inducido por los GPCR es el extracelular-regulado
Protena quinasa (ERK) en cascada (77). La duracin Y la intensidad de la
activacin MEK / ERK / RSK son de Importancia crtica para la determinacin de
La proliferacin y la diferenciacin. El efecto potenciador de la PKD sobre la
GPCR inducida Proliferacin celular se ha relacionado con Capacidad para
aumentar la duracin de la MEK / ERK / RSK conduciendo a la acumulacin de
Productos gnicos (por ejemplo, c-Fos) que estimulan clulas (82, 83). Aunque
los objetivos de la PKD Transmisin de su seal mitognica no han sido
Totalmente identificados, sustratos putativos estn comenzando para emerger.
Una serie de andamiaje protenas y Inhibidores endgenos se han implicado en
la Regulacin de la intensidad y duracin del ERK camino. Modelando la
activacin de la va ERKIndica que los andamios regulan su intensidad,
Mientras que los inhibidores modulan su duracin (17). Los Actividad y
localizacin de andamios e inhibidores Las protenas son reguladas por
fosforilacin, Ofreciendo as nuevos mecanismos para controlar La va MEK /
ERK / RSK. PKD1 ha sido Demostrado fosforilar Ras y Rab interactor 1 (RIN1,
vase la Tabla 1 para la secuencia cannica que rodea El sitio de fosforilacin
PKD1), un dominio multidominio Protena que en su forma no fosforilada Inhibe
la interaccin Ras / Raf y, por lo tanto, impide Activacin ERK (103). La
fosforilacin de RIN1 En Ser351 por PKD induce la unin de protenas 14-3-3
Que restringe RIN1 al citosol, por lo tanto Anulando su capacidad de bloquear
la interaccin Ras / Raf-1 En la membrana plasmtica (Ref. 103, Figura 3).
Curiosamente, la fase sostenida de la activacin de ERK Inducida por agonistas
del receptor acoplado a Gq en Las clulas 3T3 que sobreexpresan PKD
requieren clulas epidrmicasActividad del receptor del factor de crecimiento
(EGFR) tirosina quinasa (82). Es concebible que el GPCR inducido La
transactivacin del EGFR es necesaria para la generacin De Ras-GTP (77), el
socio de Raf. PKD La activacin facilita la interaccin Ras / Raf por fosforilacin
RIN1, que luego se secuestra en la Citosol en un complejo con protenas 14-3-3

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(Figura 3). Las protenas Sprouty (Spry) tambin actan como inhibidores de La
va Ras / ERK aguas abajo del receptor Tirosina quinasas. Curiosamente, Spry2
ha sido Interaccin con PKC? Y prevenir la PKD Activacin (10), proporcionando
otro eslabn en las vas Conectando PKD con activacin de ERK. El mdulo de
sealizacin de sntesis PKD / ERK / DNA No se limita a los fibroblastos sino que
opera Variedad de tipos de clulas, incluidas las clulas cancerosas Ras
mutaciones. Por ejemplo, el agonista de GPCR La neurotensina induce la
activacin de PKD dependiente de PKC (25) y acta como potente factor de
crecimiento para Cncer de pncreas clulas PANC-1 (44). Sobreexpresin
PKD1 En estas clulas aumenta la sntesis de ADN, Proliferacin celular y
proliferacin independiente del anclaje Y potencia la neurotensina estimulada
Sntesis de ADN, al menos en parte, mediante la Sealizacin ERK (45). Las
clulas cancerosas pancreticas expresan RIN1, y la neurotensina promueve la
formacin de complejos Entre RIN1 y 14-3-3 protenas a travs de PKD en Estas
clulas (Sinnett-Smith J, Guha S, Rozengurt E, Observaciones no publicadas).
Ejemplos adicionales, Discutido a continuacin, muestran que el PKD / ERK /
DNA Sntesis funciona en otros tipos de clulas, incluyendo Clulas epiteliales y
endoteliales, y Otros mecanismos mediante los cuales la PKD puede Participar
en la regulacin celular.

FIGURA 2. La sealizacin de PKD regula mltiples anomalas biolgicas

normales y anormales. procesos
La PKD activa fosforila una diversidad de dianas celulares en sitios especficos,
regulando as Su localizacin subcelular (como en la FIGURA 3) o actividad

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(vase la Tabla 1 para ejemplos De sustratos y de la secuencia consenso
fosforilada por PKD). Las lneas continuas indican Fosforilacin directa de
sustratos (en azul claro). Las lneas rotas representan procesos En la que PKD
est implicado, pero la secuencia de eventos moleculares no ha sido Elucidado
Ms detalles estn en el texto..

Proliferacin de clulas de queratinocitos epidrmicos Y diferenciacin

reversible
Regulacin del crecimiento y diferenciacin de clulas epidrmicas Ha sido
ampliamente estudiado en Cultivos de queratinocitos de ratn mediante
modulacin De Ca2 extracelular? Niveles. PKD es prominente Expresado en
proliferacin de queratinocitos primarios y Downregulated durante la
diferenciacin de estas clulas, Lo que sugiere que la PKD desempea un papel
pro-mitognico y / o Anti-diferenciacin papel en estas clulas (20].
Diferenciado Queratinocitos, generados por cultivo en Medio que contiene
Ca2 \ alpha milimolar, mantener Potencial regenerativo. Bajando Ca2? (A
micromolar) Estimula la reiniciacin de la sntesis de ADN Y la proliferacin
celular en cultivos primarios de ratones Queratinocitos (39). PKD1 ha sido
identificado como un Principal regulador de esta respuesta proliferativa
Mediante la activacin sostenida de la va ERK (39). Curiosamente, la
activacin de PKD1 fue mediada Por una va independiente de la PKC que
implica la autofosforilacin En Ser748, similar al mecanismo De la activacin de
PKD1 recientemente aclarada en Otros tipos de clulas (38, 82). Estos
resultados corroboran Un papel de la PKD en la regeneracin epidrmica y
cicatrizacin de la herida.

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FIGURA 3. Representacin esquemtica del mecanismo por el que PKD
modula Localizacin intracelular de sus sustratos
En muchos casos, la fosforilacin de sustratos de PKD induce la unin de
protenas 14-3-3 Que los secuestran al citosol, impidindoles de esta manera
actuar en el (Por ejemplo, RIN1, Par-1, DLC1) o en el ncleo (por ejemplo,
HDACS 5 y HDACS 7). Un tema emergente es que la sealizacin PKD regula la
funcin celular alterando La localizacin subcelular de sus sustratos.

El eje PKD / HDAC y la clula endotelial Proliferacin

Los factores de crecimiento endotelial vascular (VEGFs) y Sus receptores
endoteliales de tirosina quinasa juegan Papel central en la regulacin de la
sangre y los Desarrollo de los buques y son esenciales Angiognesis normal y
anormal. Sealizacin PKD Es necesario para la expresin de VEGF por clulas
tumorales (2, 66) y la activacin ERK, la expresin gnica y el ADN Sntesis en
clulas endoteliales estimuladas con VEGF (105). La acetilacin / desacetilacin
de las histonas es un Mecanismo para el control de la expresin gnica. Las
histona desacetilasas de clase II (es decir, las HDAC 4, 5, 7, y 9) regulan la
estructura de la cromatina interactuando Con varios factores de transcripcin
para reprimir Su actividad. PKD fosforila residuos especficos En la clase II
HDACS (vase el Cuadro 1) Su asociacin con 14-3-3 protenas en endoteliales
Clulas y otros tipos de clulas (como Esquemticamente en la figura 3).

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Secuestro de HDACs en el citoplasma va formacin de complejo 14-3-3 Alivia
los genes objetivo en el ncleo de Las acciones represivas de la HDAC,
facilitando la expresion genica. HDAC7 ha sido implicado en la regulacin de
Morfologa de las clulas endoteliales, migracin y capacidad Para formar
estructuras tubulares capilares in vitro (62). VEGF indujo la salida de HDAC7
desde el ncleo Mediante la fosforilacin mediada por PKD de Serinas (Tabla 1)
que compleja con 14-3-3, promoviendo Exportacin nuclear de HDAC7 y la
activacin de VEGF genes de respuesta en las clulas endoteliales (27, 62).
Expresin de un mutante HDAC7 resistente a la seal Protenas en estas
clulas inhiba la proliferacin yMigracin en respuesta al VEGF (102). HDAC5
tambin ha sido identificado como negativo Regulador de la angiognesis (95).
Adems de HDAC7, VEGF estimula la fosforilacin dependiente de PKD De
HDAC5 en Ser259 / 498 (Tabla 1),Que conduce a la exclusin nuclear y la
transcripcin HDAC5 Activacin (28, 102). Colectivamente, estos Estudios
implican que el complejo programa de genes Expresin y migracin
desencadenada por VEGF en Se orquestan las clulas endoteliales que
conducen a la angiognesis, Al menos en parte, por fosforilacin mediada por
PKD Tanto de HADC5 como de HDAC7, lo que Su extrusin nuclear en estas
clulas. En consecuencia, PKD ha surgido como un blanco atractivo para la
lucha antiangiognica terapia.

Diferenciacin de Osteoblastos y la Eje PKD / HDAC /

Runx
Las protenas morfogenticas seas (BMPs) son multifuncionales Factores de
crecimiento que pertenecen Transformando la superfamilia del factor de
crecimiento beta (TGF - \ beta). Contribuyen a la formacin de hueso Y los
tejidos conectivos induciendo la diferenciacin De las clulas mesenquimales
en la formacin de hueso Clulas. Estudios recientes demostraron que BMP-2
Induce la activacin de PKD a travs de un PKC independiente Durante la
progresin del linaje osteoblstico (51) y que se requiere PKD para los efectos
De la BMP-2 sobre la diferenciacin osteoblstica (8). BMP-2 induce la
exportacin de HDAC7 desde el ncleo En clulas mesenquimales asociadas
Con aumento de fosforilacin HDAC7 y 14- 3-3 unin (40). HDAC7 reprime la
actividad de Runx2, un regulador transcripcional maestro del esqueleto
biologa. PKD induce la exportacin nuclear de HDAC7 Y por lo tanto alivia la
represin de Runx2-mediada Transcripcin (40). Aunque otros caminos Pueden
estar involucrados, estos resultados Mecanismo por el cual la sealizacin BMP-
2 regula La actividad de Runx2 mediante la inhibicin dependiente de PKD de
HDAC7 represin transcripcional.

Funcin PKD en el Reglamento de Cell Vesicle

Trfico, Secrecin, Y Polaridad
Adems de estar situado en la membrana plasmtica, Citoplasma y ncleo, un
grupo de PKD1 y PKD2 se encuentra en el complejo de Golgi, donde Regula el
brote de vesculas secretoras de La red trans-Golgi (53, 108). Inactivacin de

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PKD (por ejemplo, mediante la expresin de mutantes deficientes en quinasa
De PKD) bloquea la fisin de la red trans-Golgi (TGN) transportadores,
induciendo la aparicin De largos tbulos llenos de carga. En el TGN, activo
PKD1 y PKD2 phosphorylate Golgi-localizado Sustratos (23, 30, 65), incluyendo
fosfatidilinositol 4-quinasa IIIb (PI4KIIIb), se requiere un jugador clave Para la
fisin de portadores de membrana de TGN a plasma (30). PI4KIIIb se recluta en
la membrana TGN Por la pequea GTPasa ARF y activado por PKDmediated
Fosforilacin para generar PI (4) P, Que luego recluta la maquinaria que se
requiere Para la fisin del portador (24). La seal precisa que Estimula la
activacin de la PKD en los restos de Golgi poco claro. Recientes informes
propuestos intracelulares Ca2? De los almacenes internos en respuesta a Los
agonistas de los receptores acoplados a G _ {2} (47) o los receptores directos
Translocacin de ?? Subunidades del plasma Membrana hasta el Golgi (35, 79).
De acuerdo con un papel en la regulacin de Golgi Funcin, la PKD ha sido
implicada en la secrecin. Por ejemplo, la PKD estimula la secrecin de
neurotensina Desde las clulas endcrinas humanas BON va El sustrato de
protena PKD Kidins220, [quinasa D de interaccin de 220 kDa (6, 32); Tabla 1]
(52). PKD tambin juega un papel crtico en la regulacin Cortisol inducido por
angiotensina II y secrecin de aldosterona A partir de clulas H295R, una
adrenocortical humana Lnea celular (76). Estudios recientes revelaron una
novela p38 \ alpha - PKD que regula la secrecin de insulina y Supervivencia
del pncreas? Clulas, lo que sugiere una Papel de la PKD en el desarrollo de la
diabetes Mellitus (94). Adems de la secrecin, la regulacin de Golgi Carga a
la membrana plasmtica ha sido En la locomocin de los fibroblastos,
localizada Rac1-dependiente Actividad de borde de ataque (72), e integrina
Reclutamiento a adherencias focales recin formadas (106). DLC1 (eliminado
en cncer de hgado), un regulador negativo De Rho, es un gen supresor de
tumores suprimido casi Tan frecuentemente como p53 en cnceres comunes,
incluyendo Mama, colon y pulmn. Activacin de PKC / PKD Inducida por la
asociacin de DLC1 con 14-3-3 protenas (80) por fosforilacin de Ser327 y
Ser431 (Tabla 1). A su vez, la activacin de Rho conduce a la activacin de PKD
(113). Aunque estos estudios implican un papel PKD en la motilidad celular,
otros estudios mostraron que PKD Regula la fosforilacin de la cofilina (18, 71)
Y cortactina (19), lo que conduce a la motilidad celular reducida. Aunque la PKD
contribuye a la motilidad celular y la actina Dinmica, su papel parece
complejo, dependiendo de El contexto celular y la exposicin a estmulos
especficos.

Tabla 1. Sustratos identificados de la familia PDK

sustrato de PKD residuo Secuencia de residuo

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NOTA. Obsrvese que, en la mayora de los casos, PKD fosforila una serina
rodeada por una secuencia caracterizada por L / V / I en Posicin 5 y R / K en
posicin 3. Se observan requisitos menos estrictos en otras posiciones.

Polaridad celular neuronal y epitelial

Establecer y mantener la polaridad celular es de Importancia fundamental para
las funciones de una De tipos de clulas, incluyendo neuronas y epiteliales
Clulas. Las neuronas tempranas desarrollan polaridad inicial Mecanismos
anlogos a los utilizados por los Clulas. En consonancia con esta nocin, las
PKD se han Demostrado desempear un papel en el trfico de protenas
neuronales. En estas clulas, PKD1 y PKD2 regulan TGNderived Clasificacin de
protenas dendrticas y axn Y por lo tanto tienen un papel en el
establecimiento de neuronas Polaridad (4, 109). PKD ha sido tambin implicado
En el mantenimiento de la arborizacin dendrtica (14).En las clulas epiteliales
polarizadas, PKD1 y PKD2, peroNo PKD3, regulan especficamente la
produccin de TGN portadores destinados a la membrana basolateralEn lugar
de a la membrana apical, y En consecuencia, los miembros de la familia PKD
pueden Papel importante en la generacin de polaridad epitelial (108). Otro
importante mecanismo Establecer la polaridad de la clula est mediada por la
PAR evolucionaria conservada (particin defectuosa) Genes, incluyendo Par-1.
Tratamiento de clulas con 13-acetato de forbol-12-miristato-13 (PMA) inducida
La fosforilacin mediada por PKD de Par-1 sobre un residuo (Ser400, Tabla 1)
que promueve la unin de Par 1 A 14-3-3, promoviendo as su disociacin de
Lateral de la membrana plasmtica e inhibe su actividad (Ref. 104, Figura 3).
Estos resultados sugieren que PKD puede desempear un papel en la
regulacin de la polaridad celular a travs de Fosforilacin de Par-1.
Experimentos adicionales Utilizando estmulos fisiolgicos en lugar de PMA son
Necesaria para fundamentar esta importante hiptesis. Curiosamente, las

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isoformas PKD regulan el aprendizaje Y comportamiento en Caenorhabditis
elegans, integrando Informacin externa en neuronal e intestinal de clulas
epiteliales (22).

PKD Sealizacin y Regulacin de Funcin

inmune
Se ha demostrado un eje prominente PKC / PKD En linfocitos B y T (78). La PKD
es citoslica En las clulas T no estimuladas (56), pero rpidamente Polariza a
la sinapsis inmunolgica en respuesta A las clulas presentadoras de antgeno /
antgeno. PKD El reposicionamiento es impulsado por la acumulacin de DAG
en la sinapsis inmunolgica (87). Como en Otros tipos de clulas, PKD en
linfocitos fosforilados Y regula HDAC de clase II (15, 57, 70). PKD Tambin ha
sido implicada en la regulacin de la De las integrinas \ alpha _ {1} en clulas
T a travs de Rap1 (59) y IL-2 en respuesta a la estimulacin TCR (36). La
activacin de la PKD por los receptores de antgeno es una Respuesta
sostenida asociada con cambios Localizacin intracelular de PKD. La funcin de
la PKD en Estas diferentes ubicaciones se ha probado en una Vivo utilizando
mutantes de PKD activos dirigidos a Ya sea la membrana plasmtica o el citosol
de Clulas pre-T de ratones transgnicos (55). Estudios de estos Los ratones
han demostrado que la PKD puede sustituir a la Receptor de clulas pre-T e
inducir tanto la proliferacin Y diferenciacin de progenitores de clulas T en el
timo. Adems, la localizacin celular de la PKD Un timocito es crtico; Dirigido a
la membrana y Citoslica PKD control diferentes facetas de clulas pre-T
Diferenciacin (55). Estudios posteriores Rho requisitos para las acciones de
constitutivamente Los mutantes activos de PKD localizados en la membrana
plasmtica O el citosol en clulas pre-T de clulas transgnicas ratones.
Regulacin de PKD localizada en membrana de Pre-T diferenciacin de las
clulas se demostr ser Rhodependent, Pero las acciones de citosol-localizada
PKD no fueron (63). Estos estudios demostraron Que la relacin entre PKD y
Rho se determina Por la localizacin celular de PKD en linfocitos T. Los
receptores Toll-like (TLR) han sido identificados como Receptores inmunes
innatos primarios. TLRs distinguen Entre diferentes patrones de patgenos y
Activar una respuesta inmune innata rpida. Reciente Resultados implicados
PKD en TLR 2, 5, y 9 funcin En diferentes tipos de clulas (37, 69).
Especficamente, PKD es un Downstream en TLR9 sealizacin en los
macrfagos (69) y TLR2 en la mdula sea del ratn Mastocitos (64). La
interaccin TLR Factor de diferenciacin mieloide de protena 88 (MyD88) Ha
sido sugerido para desempear un papel en TLR-inducida Activacin de PKD
(68). A su vez, la fosforilacin mediada por PKD De TLR5 en Ser805 (Tabla 1)
aparece Necesaria para la respuesta de TLR5 a su ligando, flagelina. La
fosforilacin de TLR5 contribuye a la activacin de p38MAPK Y produccin de
citocinas inflamatorias En clulas epiteliales (37). Aunque el papel PKD en TLR
funcin sigue siendo incompleta, Estos estudios proporcionan evidencia que
indica Que la PKD desempea un papel en la regulacin de la Respuesta
inmune mediada por esta clase de patrn Receptores de reconocimiento.

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Sealizacin PKD en la enfermedad: Respuestas
inflamatorias, cardacas Hipertrofia y Cncer
PKD, Inflamacin y Estrs Oxidativo
NF - kB es un factor clave de transcripcin que se activa Por mltiples
receptores y regula la expresin De una amplia variedad de protenas que
controlan las Inmunidad adaptativa. Varios estudios indican que Que la PKD es
un mediador de NF- Induccin B en una Variedad de clulas expuestas a
agonistas de GPCR o (9, 60, 86, 89, 90, 92). En vista de Creciente
reconocimiento de la interaccin entre la inflamacin Y desarrollo del cncer,
una posible Papel de PKD en la vinculacin de estos procesos es de
importancia. Sin embargo, los mecanismos moleculares precisos Siguen siendo
incompletos. Estimulacin del epitelio colnico humano NCM460 Clulas con el
agonista de GPCR y el lpido bioactivo lisofosfatdico cido (LPA) condujo a una
rpida y llamativa Activacin de PKD2, la principal isoforma del PKD expresada
por estas clulas (9). LPA estimulado La produccin de interleucina 8 (IL-8), una
Potente quimiocina pro-inflamatoria y estimulada NF k B activacin.
Silenciamiento del gen PKD2 dramticamente Reducido LPA-estimulado NF-
Promotor B Actividad y produccin de IL-8. Estos resultados implican Que la
PKD2 media la secrecin de IL-8 estimulada por LPA En clulas NCM460 a
travs de un NF- B dependiente camino. PKD2 tambin ha sido implicado en la
mediacin NF -kB activacin por Bcr-Abl en mieloides Clulas de leucemia (60).
Las prostaglandinas (por ejemplo, PGE2) Produccin de COX-2 desempean un
papel Desarrollo del cncer de colon y miofibroblastos del colon Son los
principales contribuyentes a su generacin. Los resultados recientes
demostraron que la La PKD1 en estas clulas impidi el aumento sinrgico En
la expresin de la COX-2 inducida por el proinflamatorio Mediadores
bradiquinina y tumor Factor de necrosis (TNF) -? (110). As, estas novelas Los
resultados plantean la atractiva posibilidad de que PKD Desempea un papel
crtico en la mediacin de la expresin de COX-2 En respuesta a potentes
mediadores pro-inflamatorios En miofibroblastos de colon humano. NF - kB
tambin juega un papel crtico en la inflamacin Y las respuestas de muerte
celular durante la pancreatitis aguda. La PKC isoformas PKC? Y son los
principales reguladores de NF -kB inducida por la colecistoquinina-8 (CCK-8), un
agonista que induce pancreatitis cuando Administrado a roedores a dosis
supra-mximas. Se demostr que la PKD funcionaba aguas abajo de PKC? Y
PKC en clulas acinares pancreticas estimuladas por CCK - 8.
Especficamente, la PKD era necesaria para NF- segundo La activacin inducida
por estos agonistas de GPCR en el pncreas Clulas (111). Estos resultados
identifican la PKD como una Elemento novedoso en las vas de sealizacin que
NF -kB en la pancreatitis aguda. PKD tiene Ha sido tambin identificado como
uno de los factores El desarrollo de la neumonitis de hipersensibilidad Causada
por agentes microbianos (43). Inhibicin de La activacin de PKD1 podra ser
una forma eficaz de controlar Condiciones inflamatorias agudas en rganos
Desde el hallazgo original de que el estrs oxidativo Induce la activacin de

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PKD, en parte a travs de la mediada por PKC Fosforilacin de lazo de
activacin y parcialmente La fosforilacin de tirosina PKD mediada por Src
(100), Una serie de informes confirm que PKD es un sensor Del estrs
oxidativo (16, 86, 89-92, 94, 99). Oxidativo El estrs induce la fosforilacin del
bucle de activacin de PKD1 En Ser744 y Ser748, dando lugar a Activacin
(16). Varios estudios han demostrado Que la PKD1 se opone a los efectos
apoptticos de la Estrs en una variedad de clulas (81, 85, 86, 88, 91, 94). Un
estudio reciente que us clulas pancreticas \ alpha demostr Que las seales
de estrs son marcadamente inducidas TNFAIP3 / A20, una sustancia que
contiene Respuesta temprana con potentes propiedades antiapoptticas y
Funciones antiinflamatorias (50). De hecho, A20 es Una NF- kB que responde
gen que codifica un La protena de edicin de ubiquitina que participa en la
Regulacin de retroalimentacin negativa de NF- Sealizacin B (11).
Curiosamente, otros estudios demostraron que La PKD induce la actividad del
promotor A20 (54). Es plausible Que la PKD inicia no slo una inflamacin
Respuesta va NF- B pero tambin estimula la expresin De los antiapoptticos
y anti-inflamatorios A20 como Un mecanismo de retroalimentacin que protege
las clulas sometidas A las seales de estrs, incluyendo el estrs oxidativo. La
PKD tambin ha sido implicada en la transmisin del dolor, Una respuesta
tpica durante la inflamacin. Los El receptor vanilloide tipo 1 (VR1 o TRPV1) es
un receptor vanilloide- Canal de cationes no selectivo que pertenece Al
potencial receptor transitorio (TRP) Canal superfamilia, que se regula por la
fosforilacin Por varias protenas quinasas, incluyendo PKC y PKD1 (tabla 1).
As, PKD1 es un modulador De la actividad VR1 que contribuye a la alodinia Y el
desarrollo de hiperalgesia.

Hipertrofia y Contraccin Cardaca

Varios aos despus de su identificacin, la familia PKD Miembros se
expresaron y regulado En miocitos ventriculares (31). Tratamiento de Estas
clulas con PMA o un 1-adrenrgico Receptor (AR) indujo la activacin rpida
de PKD A travs de PKC (31). Estudios posteriores demostraron Que la PKD est
implicada como mediadora de Hipertrofia cardiaca, una afeccin asociada con
Elevado riesgo de desarrollar insuficiencia cardaca, Y aclar el mecanismo por
el cual PKD ejerce Profunda influencia en el corazn (ver Ref. 1 para revisin).
Como se mencion anteriormente, la PKD fosforila directamente Clase II
HDAC5, una enzima que suprime Hipertrofia cardiaca (98). Fosforilacin
mediada por PKD De HDCA5 neutraliza su capacidad de suprimir Hipertrofia
cardiaca provocando la exportacin nuclear (93, 98). La protena de anclaje de
A-quinasa (AKAP) - Lbc, que es upregulated en cardiomiocitos hipertrficos, Ha
sido propuesto para acoplar PKD Con la fosforilacin-dependiente Exportacin
nuclear de HDAC5 (7). A su vez, otros estudios Demostraron que la PKD
miocrdica aumentada Actividad induce la troponina cardiaca I (TNNI)
fosforilacin En Ser24 (Tabla 1) y la unin de miosina cardaca Protena C
(MYBPC3) fosforilacin en Ser304 (Tabla 1), que reduce miofilamento Ca2?
Sensibilidad Y aumenta la velocidad del ciclo de puente cruzado, lo que Que
alter los impactos de la actividad PKD en los Funcin (3, 13). Ratones con
delecin especfica cardiaca De PKD1 fueron viables y mostraron disminucin

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Hipertrofia, fibrosis y activacin gnica fetal como Funcin cardiaca mejorada
en respuesta a Sobrecarga de presin o adrenrgicos crnicos o angiotensina II
(21). La protena de unin al elemento de respuesta de AMPc (CREB) se
fosforila en Ser133 por varios Quinasas aguas arriba. PKD ha sido identificado
como un CREB-Ser133 quinasa (Tabla 1) que contribuye a Remodelacin
cardiaca (67). Colectivamente, estos estudios Indican que la PKD transduce
estmulos de estrs Involucrados en la remodelacin cardiaca patolgica y
Sugieren que podra ser un nuevo objetivo en el corazn enfermedad.

Cncer
Dado el papel generalizado de PKDs en la transduccin de la seal, Migracin,
secrecin, expresin gnica, diferenciacin, Y la proliferacin, no es
sorprendente Que la sealizacin PKD ha sido implicada en una variedad De las
clulas cancerosas, incluidas las originadas Pncreas, hgado, tracto
gastrointestinal, mama, prstata, Y pulmn. Recientemente, dos artculos de
revisin Discuti papeles aparentemente contrastantes de la PKD Familia en
clulas cancerosas de diferentes tejidos (26, 49). Por consiguiente, el papel de
la PKD en el cncer no es Revisado aqu en detalle. Sin embargo, vale la pena
Que, adems de promover directamente las clulas cancerosas Proliferacin, la
PKD ha estado implicada en la Varios aspectos del microambiente tumoral,
Microambiente Incluyendo angiognesis, inflamacin y induccin de COX-2.
Adems, un estudio reciente Una mutacin recurrente de PRKD1 en humanos
Mama y colon (42). Por consiguiente, La PKD es un objetivo potencial para la
terapia, al Ciertos cnceres de algunos tejidos, incluyendo el pncreas Y la
prstata (Ref. 26, 45, 49, 107, pero vea rbitro. 5 para una vista diferente).

Observaciones finales
Se han hecho grandes progresos en la comprensin Los mecanismos
reguladores de la activacin Y localizacin subcelular de PKDs y el papel de
Nuevas PKCs en la mediacin de la fosforilacin rpida de la familia PKD En el
bucle de activacin. Como en otros Cascadas de fosforilacin, activacin
inducible La fosforilacin en bucle proporciona un mecanismo de Integracin y
amplificacin de seales. Curiosamente, Nuevos resultados revelaron que la
regulacin de La activacin de la fosforilacin de la PKD es Complejo de lo que
se pensaba, con la participacin De diferente mecanismo en diferentes
momentos, Especialmente en clulas estimuladas por el receptor acoplado a
Gq Agonistas (82). Los avances recientes demuestran De las PKDs en una serie
de Procesos, incluyendo proliferacin celular, motilidad, polaridad, MAP quinasa
vas, hipertrofia cardaca, Inflamacin y cncer (FIGURA 2). La participacin De
PKDs en la mediacin de una matriz tan diversa Actividades biolgicas
normales y anormales en diferentes Compartimentos subcelulares es probable
que dependa Sobre los cambios dinmicos en sus dimensiones espaciales y
Localizacin, combinado con su distinto sustrato Especificidad (ver Tabla 1).
Parece que un Variedad de respuestas biolgicas atribuidas originalmente A
PKCs son de hecho ejecutados por PKDs. Selectivo Inhibidores de la PKD (29,
48, 61) y modelos animales usando Transgnicos PKD o knockout especficos

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de tejido son Emergentes y deberan servir para aclarar Funcin (es) de las
isoformas de PKD in vivo. En este contexto, Es importante sealar que la
eliminacin mundial de PKD1 induce la letalidad embrionaria en ratones, con
Penetrancia incompleta (21). Ratones deficientes en Actividad enzimtica de
PKD1, a travs de expresin homocigtica De PKD1 (S744A / S748A) "knock-in"
alelos, Tambin indujo la letalidad embrionaria (58). Estos resultados
Demostraron la importancia de la fosforilacin De los residuos del bucle de
activacin Ser744 Y Ser748 en la regulacin de PKD1 in vivo. En vista de las
funciones multifuncionales de la PKD, la La bsqueda de sustratos fisiolgicos
se est reuniendo Ritmo, y ya un nmero considerable de Molculas
interesantes se han identificado como PKD (Ejemplos en la Tabla 1). Como se
desarrolla en este Artculo, un tema emergente es que PKD modula Mltiples
aspectos de la funcin celular alterando Localizacin subcelular de sus
sustratos, interferencia Con su membrana o su localizacin nuclear, Como se
muestra esquemticamente en la Figura 3. En conclusin, los estudios sobre
PKD hasta el momento indican una Notable diversidad tanto de su generacin
de seal Y la distribucin y su potencial para la regulacin compleja
Interacciones con mltiples aguas abajo Vas Cada vez es ms evidente que la
Miembros de la subfamilia PKD son actores clave La regulacin de la
sealizacin celular, la organizacin, la migracin, Inflamacin normal y
anormal proliferacin celular. PKD surge como un objetivo valioso Para el
desarrollo de nuevos enfoques teraputicos En enfermedades comunes,
incluyendo hipertrofia cardiaca Y el cncer. ?
La ayuda que James Sinnett-Smith proporcion en la preparacin De este
artculo es muy apreciada. Se apoyan los estudios del laboratorio de E.
Rozengurt En parte por los Institutos Nacionales de Salud Subvenciones R01
DK-55003, R01 DK - 56930, R21 CA - 137292 y P30 DK - 41301. E. Rozengurt
Sostiene la silla de Hirshberg del cncer pancretico Investigacin. No se
declaran conflictos de intereses, financieros o de otro tipo por el (los) autor
(es).

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