EVALUACIN DE DIFERENTES MTODOS DE ESTERILIZACIN

1. INTRODUCCIN

La limpieza, la desinfeccin y la esterilizacin, son procesos que ayudan a la realizacin

de labores en las que se expone directa o indirectamente la salud humana, o se requiera
de un estudio especializado en el que se requiere de un ambiente totalmente libre y
desinfectado.

Este tipo de mtodos de eliminacin de la flora bacteriana que incluye, en general

grmenes patgenos, no patgenos y esporulados, son parte esencial e importante en la
produccin y tratamiento de los alimentos; y sus adecuados usos y aplicaciones influyen
tambin en la calidad final de los productos.

Todos estos mtodos implican la aplicabilidad de diversos principios que actan de tal
manera que son pieza clave en una ptima eliminacin de la flora. Es as como la
utilizacin de mtodos fsicos y qumicos nos ayudan a determinar la eficacia del mtodo
utilizado en los procesos de desinfeccin y esterilizacin.

Por otro lado, los mtodos de .limpieza, desinfeccin y esterilizacin, son procesos que
guardan una estrecha relacin entre s y la obtencin de un ambiente libre y totalmente
desinfectado implica que sean aplicados estos mtodos para su resultado.
 2. OBJETIVOS

2.1. OBJETIVO GENERAL

Evaluar los diferentes mtodos de desinfeccin y esterilizacin, a travs de un

control microbiolgico.

2.2. OBJETIVOS ESPECFICOS

Controlar microbiolgicamente la esterilidad de los mesones y del medio ambiente,

mediante la presencia o ausencia de mohos, levaduras y bacterias.
Determinar el poder bactericida de sustancias como el NaOCl 6%, Alcohol 70%,
Fenol 5% e isodine.
Comprobar el poder esterilizante del calor hmedo y su efectividad.
 3. MARCO CONCEPTUAL

Exposicin
 4. PROCEDIMIENTO

4.1. EVALUACION DE LA ESTERILIDAD DEL MEDIO AMBIENTE

4.1.1. Presencia de Mohos y levaduras 4.1.2. Presencia de Bacterias

Abrir una Agar Abrir una Agar

caja de petri Saboreaud caja de petri nutritivo

Exponerla 5, 10, 15, 20, Exponerla 5, 10, 15, 20,

al medio 25, 30 min. al medio 25, 30 min.

Incubacin 37C Incubacin 37C

72 96h 24 48h

4.2. EVALUACION DE DESINFECCION DE MESONES

4.2.1. Mesn sucio 4.2.2. Mesn con NaOCl 6% y Alcohol 70%

Humedecer Estril Mesn NaOCL6%

escobilln Desinfectado Alcohol 70%

Frotar el Frotar el Escobilln

mesn mesn estril

Agar Agar
Sembrar Sembrar Nutritivo
Nutritivo

Incubar 37C Incubar 37C

24 - 48h 24 - 48h

4.3. EVALUACION DEL PODER ANTISPTICO DEL FENOL 5%

4.3.1. Cultivo Puro 4.3.2. Cultivo con Fenol 5%

Humedecer Cepa Humedecer Cepa

escobilln respectiva respectiva
escobilln
Medio Fenol 5%
Sembrar respectivo Remojar 10 minutos

Medio
Incubar 37C Sembrar respectivo
24 - 48h

Incubar 37C
24 - 48h

4.4. EVALUACIN DE LA EFECTIVIDAD DE LA ESTERILIZACIN

Humedecer Cepa
respectiva CEPASMEDIOS DE CULTIVOShigella sp.Agar
escobilln
MacConkeyProteus sp.Agar Endo
Fenol 5% CStaphylococcusAgar Braid
Remojar 10 minutos
ParkerPseudomonas sp.Agar Cetrimite
Medio
Sembrar respectivo

Incubar 37C
24 - 48h
4.5. EVALUACIN DEL ISODINE COMO ANTISEPTICO EN LA PIEL

4.5.1. Piel Sucia 4.5.2. Piel Desinfectada con Isodine

Humedecer Estril Humedecer Estril

escobilln escobilln

Frotar el Frotar la Desinfectada

mesn Piel con Isodine

Agar Agar
Sembrar Sangre Sembrar Sangre

Incubar 37C Incubar 37C

24 - 48h 24 - 48h

4.6. EVALUAR LA CONTAMINACION ORAL

Abrir la caja Agar

De Petri Sangre

3 minutos
Expirar

Incubar 37C
24 - 48h
 5. RESULTADOS

5.1. EVALUACION DE LA ESTERILIDAD DEL MEDIO AMBIENTE

5.1.1. Presencia de Mohos y levaduras. Al dejar al aire libre el agar saboreaud, en los
tiempos respectivos se present el crecimiento de colonias aterciopeladas, en la mayora
de los casos de color blanco, con un color negro en el fondo, y ruptura del medio, con
algunas colonias de color amarillentas o anaranjadas, algunas umbeliformes, otras de
formes enteros, lobulados, otras muy grandes o muy pequeas(Anexo A). Los resultados
obtenidos se observan segn la siguiente tabla.
Tabla 1. Agar Saboreaud.
TIEMPO DE EXPOSICIN UFC
5 minutos 6
10 minutos 5
15 minutos 7
20 minutos 6
25 minutos 11
30 minutos 12

5.1.2. Presencia de Bacterias. Al exponer por los tiempos respectivos el agar nutritivo,
crecieron colonias blancas, puntiformes, otras irregulares, pero la elevacin de las
colonias era directamente proporcional a la exposicin de las colonias, es decir, en 5
minutos le elevacin que presentaban era plana y a 30 minutos se observaron colonias de
elevacin convexa y monticular. (Anexo A). Los resultados en UFC de cada una de las
cajas de petri eran aproximadamente 150 300 UFC, debido a que era muy difcil
contarlas, pero en algunas se presentaban colonias mucho ms grandes, cuyas
caractersticas son las que se mencionan anteriormente.

5.2. EVALUACION DE DESINFECCION DE MESONES

5.2.1. Mesn sucio. Se observ el crecimiento de 4 UFC de color morado oscuro, de

borde lobular, convexas y fusiformes.
5.2.2. Mesn con NaOCl al 6%. Se observ crecimiento de 5 UFC de color blanco
uniforme y algunas amarillentas, con elevacin convexa de borde entero y lobular.

5.2.3. Mesn con Alcohol al 70%. Se observ crecimiento de colonias muy pequeas,
de forma rasposa, de color amarillo, como especies de puntillas y palitos.

5.3. EVALUACION DEL PODER ANTISPTICO DEL FENOL 5%

5.3.1. Cultivo Puro. Se present crecimiento de los diferentes microorganismos en sus

respectivos medios de cultivo que se ilustran en el Anexo B.
Tabla 2. Crecimiento bacteriano de los cultivos puros
Medio Microorganismo Observaciones
Mc Conkey Shigella sp. Formacin de colonias de color vino y fucsia, de
forma puntiforme esparcidas por la lnea de
siembra con cambio en la coloracin del medio a
caf.
Endo C Proteus sp. Colonias de color marrn de forma irregular con
borde entero y esparcidas por la lnea de siembra
con cambio en la coloracin del medio a claro.
Braid Parker Staphylococcus Colonias de color negro, de forma puntiforme y
circular con borde entero y elevacin convexa.
Centrimide Pseudomona sp. Colonias esparcidas por todo el medio de color
blanco y forma puntiforme.

5.3.2. Cultivo con Fenol 5%. (Anexo B)

Tabla 3. Crecimiento bacteriano de los cultivos en fenol al 5%
Medio Microorganismo Observaciones
Mc Conkey Shigella sp. Formacin de una mnima cantidad de colonias de
forma puntiforme esparcidas por todo el medio.
Endo C Proteus sp. No se present crecimiento.
Braid Parker Staphylococcus No se present crecimiento.
Centrimide Pseudomona sp. No se present crecimiento.

5.4. EVALUACIN DE LA EFECTIVIDAD DE LA ESTERILIZACIN

Los resultados obtenidos de la esterilizacin de todos los medios de cultivos y su posterior
siembra indican que no hubo crecimiento en ninguno de los medios. (Anexo B y C)
5.5. EVALUACIN DEL ISODINE COMO ANTISEPTICO EN LA PIEL

5.5.1. Piel Sucia. Se observ un exuberante crecimiento de colonias negras de forma

irregular y elevacin convexa, esparcidas por la lnea de siembra; y colonias amarillas y
blancas, de forma circular y elevacin convexa esparcidas por todo el medio. (Anexo C).

5.5.2. Piel Desinfectada con Isodine. Se present muy poco crecimiento de colonias
amarillas y blancas con relacin a las de la piel sucia. (Anexo C)

5.6. EVALUAR LA CONTAMINACION ORAL

Se present crecimiento de colonias blancas, anaranjadas y amarillas, esparcidas por
todo el medio.
 6. ANLISIS DE RESULTADOS

6.1. EVALUACION DE LA ESTERILIDAD DEL MEDIO AMBIENTE

Segn los resultados obtenidos, en el ambiente del laboratorio de microbiologa hay
presencia de mohos, levaduras y bacterias. Las condiciones ambientales favorecen al
crecimiento de mohos y bacterias, lo cual nos indica que el medio ambiente no es estril.

6.2. EVALUACION DE DESINFECCION DE MESONES

El uso de desinfectantes, el NaOCl y el alcohol destruyen una gran cantidad de
microorganismos pero no todos, presentando un mayor rendimiento segn datos
experimentales en el alcohol, en el cual se presentaban colonias menores.

6.3. EVALUACION DEL PODER ANTISPTICO DEL FENOL 5%

Segn los datos obtenidos experimentalmente, se puede deducir que el fenol tiene un alto
poder desinfectante debido a que destruy los microorganismos, impidiendo observar el
crecimiento de Proteus sp. Staphylococcus y Pseudomonas.

6.4. EVALUACIN DE LA EFECTIVIDAD DE LA ESTERILIZACIN

La esterilizacin empleada experimentalmente tanto a 60C durante 30 min. como a 90C
durante10 min. fue efectiva debido a que no se present el crecimiento de ningn
microorganismo en sus respectivos medios ya que mata sin distincin a todo
microorganismo patgeno, no patgeno y esporulado.

6.5. EVALUACIN DEL ISODINE COMO ANTISEPTICO EN LA PIEL

De acuerdo con los datos obtenidos, el Isodine es un buen antisptico, ya que al ser
usado en la piel, disminuy considerablemente el nmero de microorganismos contenidos
en la piel sucia.
6.6. EVALUAR LA CONTAMINACION ORAL
La cavidad oral es una fuente de microorganismos, por lo cual debe asearse
adecuadamente para disminuir la contaminacin bacteriana y evitar la contaminacin
cruzada a la hora de un proceso alimenticio.
 7. PREGUNTAS COMPLEMENTARIAS

7.1. Como acta, desde el punto de vista qumico, cada mtodo de esterilizacin y
desinfeccin.

7.2. Que tipo de desinfectante utilizara en las empresas alimentarias, sustente su

respuesta.
RTA//: En una industria alimentaria los mejores desinfectantes son los iodforos, debido a
que estos no son corrosivos, tienen alto poder desinfectante, el yodo libre que liberan
estos compuestos matan sin distincin a todo tipo de microorganismos, mientras que para
el caso de los pisos de una industria, se puede usar para su desinfeccin los hipocloritos.
 8. CONCLUSIONES

En el laboratorio de microbiologa, el ambiente contiene una gran cantidad de mohos y

levaduras, y una cantidad considerable de bacterias, por lo tanto no presenta una
esterilidad.

Los mtodos de esterilizacin eliminan todas las formas patgenas, no patgenas y

esporuladas; mientras que la desinfeccin mata solo algunos microorganismos no
deseados. Las sustancias utilizadas para la desinfeccin dependen del tipo de
material que se desea desinfectar, los fines y calidad de la desinfeccin.
 BIBLIOGRAFA

HAYES, P. Higiene y microbiologa de los alimentos. Ed. Acribia, S.A. Zaragoza

(Espaa). 1993.

MERCHANT, D. V. M. Bacteriologa y virologa veterinarias. Ed. Acribia, S.A. 3ra

Edicin. Zaragoza (Espaa). 1970.

COLLINS, C.H. Mtodos microbilogicos. Ed. Acribia, S.A. Zaragoza (Espaa).1989.

http://www.sadi.org.ar/esterilizacion.htm

http://www.monografias.com/desinfeccionyesterilizacion.htm
 ANEXO A.
RESULTADOS

1. EVALUACIN DE LA ESTERILIDAD DEL MEDIO AMBIENTE

1.1. PRESENCIA DE MOHOS Y LEVADURAS (AGAR SABOUREAUD)

5 minutos 10 minutos 15 minutos 20 minutos 25 minutos 25 minutos

1.2. PRESENCIA DE BACTERIAS (AGAR NUTRITIVO)

5 minutos 10 minutos 15 minutos 20 minutos 25 minutos 25 minutos

2. EVALUACION DE DESINFECCIN DE MESONES (Agar nutritivo)

2.1. MESON SUCIO 2.2. M. CON NaOCL 6% 2.3. M. CON ALCOHOL 70%
 ANEXO B
RESULTADOS

3. EVALUACIN DEL PODER ANTISEPTICO DEL FENOL 5%

3.1. CULTIVO PURO

Shigella sp. Proteus sp. Staphylococcus Pseudomona

A. MacConkey A. Endo - C A. Braid Parker sp.
A. Cetrimite

3.2 CULTIVO CON FENOL 5%

Shigella sp. Proteus sp. Staphylococcus Pseudomona

A. MacConkey A. Endo - C A. Braid Parker sp.
A. Cetrimite

4. EVALUACION DE LA EFICIENCIA DE LA ESTERILIZACIN

4.1. ESTERILIZACIN (62C 30min)

Shigella sp. Proteus sp. Staphylococcus Pseudomona

A. MacConkey A. Endo - C A. Braid Parker sp.
A. Cetrimite
 ANEXO C
RESULTADOS

4.2. ESTERILIZACIN (90C 10min)

Shigella sp. Proteus sp. Staphylococcus Pseudomona

A. MacConkey A. Endo - C A. Braid Parker sp.
A. Cetrimite

5. EVALUACIN DEL ISODINE COMO ANTISEPTICO EN LA PIEL (Agar Sangre)

5.1. PIEL SUCIA 5.2. PIEL CON ISODINE

6. EVALUACIN DE LA CONTAMINACIN ORAL (Agar Sangre)