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SUELOS
CONTAMINADOS.
TRABAJO DE
LABORATORIO
AUTOR: PABLO JOS MOROS GARCA
Master en Ingeniera Medioambiental y Gestin del Agua 2007/2008
ndice
1. INTRODUCCIN........................................................................................................................3
9. BIBLIOGRAFA..37
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: Quedan reservados todos los derechos. (Ley de Propiedad Intelectual del 17 de noviembre de 1987 y Reales
Decretos). Documentacin elaborada por el autor/a para EOI.
Prohibida la reproduccin total o parcial sin autorizacin escrita de EOI.
Master en Ingeniera Medioambiental y Gestin del Agua 2007/2008
1. INTRODUCCIN.
La investigacin de un determinado problema analtico, implica:
- Una sustancia o elemento natural cuya concentracin supera niveles normales debido a
la intervencin humana (caso del amonio o del fsforo total).
- Muestras de agua.
- Muestras de biota.
- Muestras de residuos.
- Muestras de suelos.
La eleccin de la tcnica y del mtodo de anlisis ms adecuados depender no slo del tipo de analito
y de matriz sino de lo que establezca la legislacin a aplicar. En lneas generales, en nuestro pas la
evaluacin rutinaria de la contaminacin viene sujeta al cumplimiento de una Normativa ambiental.
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Como cualquier problema analtico, el estudio en el laboratorio de la contaminacin del suelo y de las
aguas subterrneas implica, por tanto, conocer:
En la actualidad, las normativas relacionadas directamente con la contaminacin del suelo y de las
aguas subterrneas, con aplicacin a todo el territorio nacional(1), son:
Suelos:
Real Decreto 9/2005, por el que se establece la relacin de actividades po-
tencialmente contaminantes del suelo y los criterios y estndares para la
declaracin de suelos contaminados.
Aguas subterrneas:
Cabra esperar que estas legislaciones suministrasen toda la informacin necesaria para abordar el
trabajo de laboratorio en la investigacin de la contaminacin de suelos y aguas subterrneas, pero
como veremos a continuacin, en la prctica esto no resulta exactamente as.
(1) La Comunidad Autnoma del Pas Vasco dispone de una reciente y muy completa legislacin centrada en aspectos eminen-
temente prcticos del estudio del suelo (Decreto 199/2006, de 10 de octubre, por el que se establece el sistema de acreditacin
de entidades de investigacin y recuperacin del suelo y se determina el contenido y alcance de las investigaciones de la calidad
del suelo a realizar por dichas entidades).
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Los criterios para la identificacin de suelos que requieran valoracin de riesgos, recogi-
dos en el Anexo IV.
- Indicadores de contaminacin del suelo: los Hidrocarburos totales del petrleo (tal como
se indica en el anexo IV).
- Compuestos orgnicos especficos, descritos en los anexos V y VI. Abarcan unas 60 sus-
tancias pertenecientes a distintos grupos: compuestos orgnicos voltiles no halogena-
dos, compuestos halogenados, plaguicidas, hidrocarburos policclos aromticos (PAHs),
y bifenil policlorados (PCBs).
Conviene sealar, que este Real Decreto proporciona unas listas de actividades potencialmente con-
taminantes, y de sustancias contaminantes que en ningn caso considera cerradas ni exhaustivas, de-
jando a la autoridad ambiental competente (la Administracin Autnoma) la potestad para ampliarlos.
Subrayar tambin que la estrategia de investigacin de la contaminacin del suelo, que se desprende
de esta Norma, contempla una primera etapa en la que se debe confeccionar un informe preliminar del
emplazamiento presuntamente contaminado. Ese informe incluye un estudio documental sobre la
naturaleza e intensidad de los usos que se le dieron.
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A partir de la evaluacin de los informes preliminares se abrira una segunda fase en la que se deter-
minara la presencia y concentracin de los contaminantes ms caractersticos generados en tales usos.
Para ello se deberan realizar campaas de toma de muestras para su posterior anlisis en el laborato-
rio. Nada dice el Real Decreto sobre que hacer cuando no se dispone de informacin previa sobre el
emplazamiento.
En la vertiente que al laboratorio de anlisis concierne con respecto a los parmetros de estudio del
suelo, esta Norma omite varios aspectos importantes:
La indefinicin sobre los TPHs crea una cierta confusin, mxime cuando su determinacin es con-
templada como criterio para establecer si un suelo requiere o no valoracin de riesgos; e incluso puede
llegar a aceptarse para considerar un suelos como contaminado.
Los Aceites minerales C10-C40 seran aquellos compuestos extrables con Triclorotrifluoretano, que
no son retenidos por el silicato de magnesio o el xido de aluminio, que absorben entre 2925 y 3030
cm-1 en el espectro infrarrojo, y tiempos de retencin, en cromatografa de gases, entre el n-decano
(C10H22) y el tetracontano (C40 H82).
Los Hidrocarburos segn mtodo USEPA 8015. Esta metodologa se refiere a la determinacin
mediante cromatografa de gases con detector de ionizacin de llama (CG-FID) de una amplia gama
de compuestos orgnicos no halogenados. Dentro de esa gama estaran los compuestos orgnicos del
rango de las gasolinas (Gasolin Range Organic, GRO); y los compuestos orgnicos del rango del
disel (Diesel Range Organic, DRO). Ambos son alcanos, en el primer caso de 6 a 10 tomos de car-
bono, con puntos de ebullicin de 60 a 170C; y en el segundo, de 10 a 28 tomos de carbono, con
puntos de ebullicin de 170 a 430C.
Como es lgico, los valores que se obtengan de analizar un tipo de TPHs (aceites minerales) u otro
(USEPA 8015) no resultan comparables.
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El anlisis de suelos es una prctica laboratorial muy antigua. Una de las primeras aplicaciones de la
qumica fue la de investigar los componentes de un suelo con objeto de conocer su idoneidad para su
explotacin agrcola. Hace dcadas que se establecieron cuales son los parmetros fsicos y qumicos
que deben determinarse en el suelo para saber si puede sustentar un tipo u otro de cultivo, o si es nece-
sario modificar su composicin para mejorar o para posibilitar su explotacin. En la siguiente tabla se
muestran algunos de estos parmetros:
Algo similar puede decirse del anlisis de las aguas subterrneas. Si bien los usos del agua son muy
diversos, su mayor demanda se encuentra en el sector agrcola. Hasta hace pocos aos, los pozos eran
de titularidad privada, y lo ms corriente, al menos en nuestro pas, era que sus agua fuesen empleadas
en el riego de las fincas bajo las que se encontraban. Esta vinculacin atvica entre suelo y agua
subterrnea dio lugar a que la caracterizacin qumica de sta estuviese orientada a determinar su
aptitud para el uso agrcola. La tabla siguiente recoge algunos de los parmetros ms habituales en la
caracterizacin agrolgica de un agua:
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Dado el enorme incremento del negocio inmobiliario y de la construccin en la ltima dcada, con
abundantes recalificaciones del suelo de uso industrial o rural a urbanizable, no es de extraar que
muchas empresas de ingeniera y consultora hayan demandado investigaciones sobre posible conta-
minacin de terrenos.
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Este tipo de investigacin ha estado muy vinculada a zonas que acogieron depsitos de combustibles.
En tales casos se manejaban, y an hoy se manejan, una serie de compuestos, para conocer la tipologa
de la contaminacin y su antigedad: se trata de los Compuestos orgnicos del rango de las gasoli-
nas o GRO, los Compuestos orgnicos del rango del diesel o DRO, el metil terbutil ter (MTBE), y
el etil terbutil ter (ETBE). Los GRO comprenden una serie de hidrocarburos ligeros presentes en las
gasolinas, los DRO hidrocarburos pesados abundantes en los gasleos, y el ETBE y MTBE, aditivos
antidetonantes presentes en las gasolinas y que vinieron a sustituir a los compuestos de plomo. El R.D.
9/2005 no hace mencin explicita alguna a tales sustancias.
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- Contenido en NITRATOS.
- Contenido en PLAGUICIDAS.
No indica de que plaguicidas se trata, remitiendo para ello a dos directivas: la 91/414/CEE, relativa a
la comercializacin de productos fitosanitarios; y a la 98/8/CE, relativa a la comercializacin de bio-
cidas. Ambas no resultan tampoco muy tiles pues no ofrecen un listado de compuestos. Los plaguici-
das que normalmente se controlan en las campaas de evolucin de las aguas subterrneas son los
presentes en otras directivas relacionadas con la de Sustancias Peligrosas:
Hexaclorobenceno
Hexaclorciclohexano
Plaguicidas organoclorados Aldrin, Isodrin, Dieldrin, Endrin
Endosulfan
DDT, DDE, DDD
Heptaclor, Heptaclor epxido
Trifluralina
Diazinon
Metil paration
Fenitrotion
Plaguicidas organofosoforados Malation
Clorpirifos
Paration
Etion
Etil azinfos
Molinato
Simazina
Atrazina
Triazinas Desetilatrazina
Propazina
Terbutilazina
Terbutrin
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Amonio.
Cloruros.
Sulfatos.
Tricloroetileno.
Tetracloroetileno.
Conductividad.
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Como se mencion con anterioridad, los tanto los metales pesados que merezcan la consideracin de
contaminantes del suelo como sus NGRs, se establecen por cada Comunidad Autnoma. Por ejemplo,
en la Comunidad de Madrid, los NGRs son:
En lo que respecta a los contaminantes no contemplados por el R.D. 9/2005, no existen valores indica-
tivos al no disponerse de sus NGRs.
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Entre los parmetros para los que se establecen valores lmites de concentracin tenemos:
NITRATOS: 50 mg/l.
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La toxicologa tiene por objeto el estudio de los efectos de las sustancias qumicas con los seres vivos
en sus circunstancias particulares. De sus diferentes ramas, la que aqu resulta de inters es la toxico-
loga ambiental o ecotoxicologa cuyo mbito de aplicacin son los contaminantes ambientales y su
influencia sobre los ecosistemas. Para abordar este estudio se puede partir de dos enfoques relaciona-
dos con diferentes niveles de organizacin biolgica:
- El nivel de los organismos individuales; en cuyo caso se evalan los efectos sobre indivi-
duos aislados, extrapolndose los efectos a especies de similares caractersticas.
- El nivel de los ecosistemas; en dnde se pretende evaluar el impacto de los txicos sobre las
biocenosis a partir de los diferentes niveles trficos. El criterio para considerar un suelo como
contaminado cuando se considera prioritaria la proteccin de los ecosistemas, recogido por el
R.D. 9/2005, emplea este tipo de ensayos, denominados ecotoxicolgicos.
Tradicionalmente, la respuesta biolgica que se evala es la muerte del individuo. Ello da lugar al
concepto de Concentracin Letal 50 o LC 50, definido como la concentracin de sustancia txica que
produce la muerte del 50% de la poblacin de estudio en unas condiciones de experimentacin dadas.
Cuando la respuesta biolgica no es la muerte, sino, por ejemplo, la inhibicin del movimiento, o los
cambios en una determinada actividad enzimtica, la LC es reemplazada por la EC o concentracin
efectiva.
Generalmente se distinguen dos formas de toxicidad en funcin del tiempo de exposicin: aguda y
crnica. La primera corresponde a tiempos cortos (48 96 horas), y la segunda a tiempos ms prolon-
gados (semanas, meses, o aos). Para un estudio completo de la posible toxicidad de un compuesto es
necesario realizar ensayos de toxicidad agudos y crnicos, puesto que ciertos efectos biolgicos, como
la aparicin de tumores, slo pueden apreciarse tras largos periodos de exposicin.
La evaluacin del impacto de los txicos sobre los ecosistemas mediante ensayos de laboratorio se
enfrenta con la dificultad que tiene reproducir in vitro, y de manera controlada, la complejidad de un
ecosistema, y la ampla variedad de stos. Necesariamente se debe acudir a simplificaciones, mucho
ms factibles en lo que se refiere a ecosistemas dulceacucolas que a ecosistemas marinos y terrestres.
En general el inters de los investigadores se centra sobre organismos abundantes y caractersticos de
cada uno de los principales niveles trficos. Los ensayos pueden realizarse sobre microcosmos (eco-
sistemas simplificados y miniaturizados a escala de laboratorio) o sobre poblaciones de organismos de
niveles trficos concretos. Son estos ltimos los que mayor aplicacin prctica tienen, y as se refleja
en el R.D. 9/2005. Esta norma distingue entre:
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Ensayos indicados:
Criterio para considera un suelo como contaminado: CL (E) 50 sea < 10 mg suelo contamina-
do/g de suelo.
Criterio para considera un suelo como contaminado: CL (E)50 sea < 10ml de lixiviado/litro de
agua.
Como se dijo anteriormente, el suelo es una matriz compleja, por lo que la mayora de los ensayos, ya
sean qumicos o ecotoxicolgicos, que se quieran realizar sobre ella van a requerir un tratamiento
previo de la muestra. Las pruebas que sirven para investigar la toxicidad producida por el suelo direc-
tamente, contemplan, en sus correspondientes mtodos, el tratamiento previo de la muestra. En el caso
de la investigacin de la toxicidad producida por el lixiviado del suelo, ese tratamiento es el ensayo de
lixiviacin.
El ensayo de lixiviacin DIN 38414 consta, de forma sinttica, de las siguientes partes:
A modo de ejemplo, de entre todos los ensayos de ecotoxicidad sobre el lixiviado del suelo que indica
el R.D. 9/2005, pasamos a describir, someramente, uno de los ms extendidos, el de inhibicin de la
movilidad en el microcrustceo Daphnia magna.:
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- Agua de calidad.
- Alimentacin controlada.
- Suministro permanente y regular de aire.
- Temperatura regular.
- Foto-periodo de 12 horas.
Por agua de calidad se entiende un agua con una dureza adecuada, que permita al microcrustceo
elaborar su exoesqueleto a medida que crece, y que este exenta de microcontaminantes. Este ltimo
aspecto es fundamental, ya que un agua con concentraciones subletales de txicos puede terminar por
producir fenmenos tanto de bioacumulacin como de resistencia que a la larga conduzcan a respues-
tas falsas del ensayo frente a sustancias problema. Esta agua debe reponerse, en funcin de la pobla-
cin de Daphnia, cada 24-48 horas.
El agua de cra estar aireada mediante un sistema de inyeccin de aire filtrado, y regulado a un cau-
dal tal que no produzca turbulencias.
Todos estos factores, junto con la temperatura regular, y el foto-periodo tienen como objetivo mante-
ner una poblacin genticamente estable, de manera que tengamos unas ciertas garantas de que todos
los individuos se comportaran de la misma manera ante un posible txico aprovechando el peculiar
ciclo biolgico de Daphnia, que alterna etapas de diploida y haploida segn las circunstancias. Las
condiciones ambientales ptimas para las poblaciones de Daphnia hacen que stas se reproduzcan
permanentemente mediante partenognesis, lo que significa que todos los individuos van a ser hem-
bras diploides, y que al no producirse meiosis no va a haber recombinacin del material gentico. Si
las condiciones ambientales se hacen cambiantes, las hembras diploides dejan de producir hembras
diploides para dar lugar a quistes de resistencia, haploides. Cuando las condiciones ambientales sean
de nuevo las adecuadas, los quistes producirn individuos machos y hembras, que se reproducirn
para dar una generacin diploide.
Para realizar el ensayo de inhibicin se toman, con la ayuda de una pipeta individuos recin nacidos y
se les deposita dentro de frascos apropiados conteniendo un agua exenta de contaminantes y de dureza
adecuada, sin aireacin forzada ni alimentacin, a razn de 10 ejemplares por frasco. Uno de los fras-
cos se reserva como blanco, y en el resto (cuyo nmero variar en funcin de la dilucin de la muestra
que se desee) se aaden diferentes diluciones de la sustancia problema (el lixiviado del suelo) . Como
respuesta biolgica se observa la movilidad de los individuos. El ensayo agudo dura 48 horas, al cabo
de las cuales se cuentan los individuos inmovilizados y se calcula la correspondiente EC 50 a partir de
una grafica dosis/respuesta.
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La ventaja de los mtodos recomendados por IHOBE es que se basan en el estudio de normas UNE,
ISO, AFNOR, DIN, USEPA, y en los mtodos del MAPA. La exposicin que sigue ha tomado, en
buena medida, como referencia dicha metodologa.
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Establecer los posibles riesgos para el personal del laboratorio derivados de la manipula-
cin de las muestras que se reciban.
De entre todas las etapas de investigacin de un suelo contaminado, las relativas a los trabajos de
campo y de laboratorio son de las que guardan una ms estrecha relacin. El cuadro siguiente trata de
resumir esta relacin:
A la vista del cuadro, es obvio que debe existir una estrecha colaboracin y coordinacin entre el
trabajo de campo y el de laboratorio. Sin embargo, en la prctica diaria es frecuente que esa relacin
se limite al mero envo de muestras sin contarse con el laboratorio en ninguna otra tarea que no sea la
estrictamente analtica.
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Para los suelos los envases ms adecuados suelen ser los frascos de vidrio topacio y boca ancha dota-
dos de cierre hermtico, y con una capacidad no inferior a los 500 g.
Para las aguas, el recipiente ms adecuado suele ser tambin el vidrio topacio, aunque, segn el par-
metro a analizar, tambin pueden emplearse envases de plstico (PET) de boca ancha con tapn ros-
cado tipo estrella.
Como regla general, cuando se deseen investigar parmetros orgnicos debern emplearse recipientes
de vidrio (los compuestos orgnicos tienden a adsorberse en las paredes de los recipientes de plstico);
y cuando lo que se quiere es investigar compuestos inorgnicos pueden usarse envases de PET.
Mencin especial merece los recipientes que vayan a contener muestra para la determinacin de com-
puestos orgnicos voltiles. En estos casos es recomendable emplear viales de vidrio con tapn recu-
bierto de tefln en su interior, cierre hermtico, y compatibles con el equipo de anlisis.
pH
Materia orgnica
Arcilla
Cianuros
tano)
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Con objeto de eliminar la materia en suspensin que pudiese haber cado en la muestra durante el
sondeo, es necesario proceder a la filtracin de las mismas en campo, a travs de filtros de 0,45 micras
de poro. Esta prctica puede acarrear problemas en aguas con una elevada contaminacin por sustan-
cias lipfilas, que forman una pelcula en la superficie.
A la hora de rellenar los envases, la primera fraccin se emplear en enjuagar el recipiente. El llenado
debe hacerse evitando la formacin de burbujas.
Las muestras pueden preservarse mediante refrigeracin (entre 2 y 5C) y en la oscuridad, y/o me-
diante la adicin de reactivos qumicos como conservantes. La cantidad de conservante a aadir no
debe superar nunca el 1% del volumen total de la muestra. Los conservantes ms habituales son el
cido ntrico, el cido sulfrico, y el hidrxido sdico. Subrayar que la calidad de los mismos debe ser
lo suficientemente alta como para que no interfieran en las posteriores determinaciones. Por supuesto
deber informarse al laboratorio de si las muestras contienen o no conservantes, y de la naturaleza de
stos.
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1) Descripcin de la muestra.
2) Secado.
4) Tamizado.
5) Submuestreo.
6) Molienda.
En estufa: igual que en la opcin anterior, slo que la muestra se seca en una estufa a 40C.
Mediante liofilizacin.
Manual (cuarteo): se extiende la muestra, bien mezclada con un mezclador mecnico, sobre
una bandeja, se divide en cuatro porciones iguales y se combinan dos de las cuatro porciones
diagonales rechazndose las otras dos. Se repite la operacin hasta alcanzar el tamao ade-
cuado de muestra.
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- Agitacin.
Agitacin trata de lograr la separacin del analito de la muestra de suelo mediante medios mecnicos.
Su variante ms sencilla es el empleo de barras agitadoras magnticas, o de agitadores tipo orbital o de
vaivn, en los que se introduce la muestra junto con el disolvente adecuado en un recipiente sometin-
dolo a agitacin. La solubilizacin puede acelerarse calentando la mezcla.
Ultrasonidos, se basa en el empleo de vibraciones sonoras superiores al nivel auditivo humano. Los
ultrasonidos agitan la disolucin mediante la formacin de burbujas microscpicas que se dilatan y
contraen. Existe un punto en el que la burbuja se dilata tanto que explota, momento en el que, por un
brevsimo instante, se generan, puntualmente, elevadas presiones y temperaturas. Como consecuencia
de la agitacin de la disolucin, y de las pequeas explosiones, los slidos de la mezcla se agrietan y
fragmenta, facilitndose el paso de los analitos a la disolucin. La aplicacin de ultrasonidos suele
hacerse mediante sondas, que se introducen en la disolucin, o ms usualmente mediante baos relle-
no con agua en los que se sumerge el recipiente conteniendo la mezcla a tratar.
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Digestin en vaso abierto consiste en disolver la muestra con ayuda de soluciones cidas. El tipo de
solucin, y su concentracin depender del analito que deseemos desprender del slido. El proceso
est acompaado de agitacin y calefaccin.
Digestin asistida por microondas aprovecha el efecto que produce este tipo de radiacin sobre las
disoluciones. Las microondas son ondas electromagnticas cuya frecuencia esta entre 3.10 8 y 3.1011
Hz. Esta radiacin provoca la rotacin de las molculas de agua, la migracin de los iones, y el movi-
miento de los electrones de los metales. Las molculas de agua ven frenada su rotacin al chocar con
molculas circundantes lo que provoca la transformacin de esa energa cintica en trmica, calentn-
dose la disolucin. Los electrones de los metales ven tambin frenado su movimiento lo que provoca
un rpido calentamiento de los componentes metlicos. La aplicacin de esta modalidad de digestin
se realiza mediante hornos de microondas dotados de vasos de tefln PFA (perfluoroalkoexitileno), un
tipo de tefln con elevado punto de ebullicin (306C). La muestra se introduce en los vasos de tefln,
generalmente junto con una mezcla de cidos adecuada a cada caso. Los vasos van provistos de senso-
res de temperatura y de presin que detienen la digestin si se superan los valores de seguridad esta-
blecidos.
La extraccin en fase slida (solid phase extraction, o SPE) es un procedimiento que consiste en
hacer pasar una porcin de muestra lquida, que contiene el analito, a travs de un material sorbente
(extractante slido) por el que el analito posee mayor afinidad que por el disolvente en que se encuen-
tra, y sobre el que queda adsorbido. Tras la adsorcin, los analitos se eluyen con una pequea cantidad
de otro disolvente extractor con el que interacciona con mayor fuerza que con el sorbente.
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La SPE no slo consigue un cambio de matriz, sino que reduce el volumen de la muestra. Se realiza
mediante pequeas columnas abiertas de plstico (entre 3 y 20 ml de capacidad), con una abertura de
entrada de mayor dimetro, y otra de salida ms pequea. El sorbente se coloca en el fondo de la co-
lumna y suele consistir en slice modificada con diferentes grupos qumicos.
La extraccin slido-slido consiste en mezclar una pequea cantidad de muestra slida con una
cantidad similar de extractante, tambin slido, y homogeneizar. El homogeneizado se introduce en un
cartucho especial por el que se hace pasar un disolvente adecuado a la especie qumica que queremos
determinar, con lo que sta quedar en disolucin.
La extraccin slido-lquido consiste en poner en contacto la muestra slida con un lquido extrac-
tante y someter a la mezcla a una serie de operaciones que permitan que la mayor parte posible del
analito a determinar pase de la muestra al disolvente. Entre estas operaciones las ms usuales son la
agitacin mecnica (manual o mediante ultrasonidos) y la extraccin con calentamiento mediante
dispositivos tipos Soxhlet.
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Materia orgnica
El mtodo ms usual es el de oxidacin y posterior valoracin con Sal de Mhr (sulfato ferroso am-
nico 0,5 N).
La muestra se oxida con dicromato potsico en medio cido. El exceso de oxidante se valora con
sulfato ferroso amnico, y la cantidad de carbono oxidado se deduce a partir de la cantidad de dicro-
mato reducido. Para ello se toman entre 0,2 g y 1 g de suelo secado, triturado y tamizado a 250 micras,
se mezclan en un matraz con dicromato potsico, y despus con cido sulfrico concentrado. Se deje
en reposo 30 minutos transcurridos los cuales se detiene la reaccin con agua destilada y cido fosf-
rico concentrado. Se valora con sal de Mhr usando como indicador difenilamina: la coloracin vira
de rojo burdeos a verde brillante.
Textura
La textura de un suelo se refiere al porcentaje de las distintas fracciones minerales que las componen.
De acuerdo con el sistema internacional se distinguen cuatro fracciones: arena gruesa (de 2 a 0,2 mm),
arena fina (de 0,2 a 0,02 mm), limo (de 0,02 a 0,002 mm), y arcilla (< 0,002 mm). Las fraccio-nes ms
gruesas pueden separarse mediante tamizado, pero no as la fraccin correspondiente a las arcillas.
Para determinar el contenido en arcillas se emplean dos mtodos: el del densmetro de Bo-youcos, y el
de la pipeta. Ambos se basan en la ecuacin de Stokes que relaciona el tamao de las partculas (x)
con el tiempo de cada (t) en una solucin acuosa:
X = / (t)1/2
Dnde:
En la que:
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En el mtodo del densmetro, se prepara una suspensin acuosa de suelo en la que el metafosfato
sdico se emplea como agente dispersante de los agregados del suelo. Se mide la densidad de la sus-
pensin a diferentes tiempos. Los resultados se comparan con una tabla que relaciona porcentaje acu-
mulado de partculas a diferentes tiempos con dimetro de partcula.
En el mtodo de la pipeta la suspensin acuosa con dispersante se deja sedimentar durante 12 horas.
Pasado ese tiempo, y en funcin de la temperatura de la suspensin, se pipetea una alcuota a una
determinada profundidad (existe tablas que relacionan temperatura con profundidad de pipeteo). El
volumen pipeteado se coloca en una cpsula tarada y se deja desecar a 105C. El porcentaje de arcillo
viene dado por la siguiente ecuacin:
Dnde:
Para el anlisis de los metales pesados presente en un suelo es preciso lograr su solubilizacin median-
te tcnicas de pretratamiento, de las cuales la que se ha mostrado ms efectiva y rpida es la digestin
en horno de microondas. Existe no obstante una cierta controversia al respecto, debido a que muchas
normas no incluyen este tipo de tratamiento, reemplazndolo por el de la digestin en vaso abierto,
sistema ms engorroso desde el punto de vista operativo, menos reproducibles y ms lento.
En el caso de las aguas subterrneas, el nico pretratamiento al que se somete la muestra es la filtra-
cin. En este caso la digestin implicara incrementar la concentracin en metales de la muestra al
incluir los presentes en la materia en suspensin.
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El nebulizador.
El atomizador.
La fuente de radiacin.
El monocromador.
El detector.
El nebulizador es un dispositivo que convierte la muestra lquida en un aerosol que pasa luego al
atomizador. Los dos principales tipos de nebulizadores son los nebulizadores neumticos y los nebuli-
zadores ultrasnicos.
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El atomizador de llama consiste en un quemador alimentado por una mezcla de combustible y oxidan-
te, capaz de alcanzar temperaturas de entre 1700 y 3100 C.
El rango de temperatura a aplicar depender de los elementos que se quieran analizar: as los metales
pesados necesitan temperaturas de excitacin ms elevadas que los dems. La temperatura depender
de la composicin de la mezcla de gases que se quemen: la mezcla gas natural/aire suministra tempe-
raturas ms bajas, y la de acetileno/xido nitroso las ms elevadas.
La muestra nebulizada es inyectada por la base de la llama, en cuyo seno se produce la evaporacin de
la matriz y la separacin y excitacin de los tomos de analito.
Puesto que la espectroscopia de absorcin sigue la ley de Lambert-Beer, la mayor longitud del paso
ptico aumenta la sensibilidad, motivo por el cual se suelen emplear quemadores denominados de
ranura o de flujo laminar, que suministran llamas de una gran longitud.
Los atomizadores electrotrmicos, tambin llamados cmaras u hornos de grafito, consisten en pe-
queos cilindros de grafito (de 1 cm de dimetro), abiertos por los extremos, y con un orificio para la
introduccin de la muestra. En los extremos del tubo existen unos contactos elctricos por lo que se
suministra durante un corto espacio de tiempo una corriente de alta intensidad. Como consecuencia
del calentamiento as inducido, la muestra se atomiza.
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La fuente de radiacin proporciona la radiacin que atraviesa la muestra atomizada. Se suelen empe-
lar dos tipos de fuentes: las lmparas de ctodo hueco, y las lmparas de descarga sin electrodo.
Una lmpara de ctodo hueco consiste en un cilindro de vidrio, en uno de cuyos extremos se disponen
dos alambres de volframio. Uno de ello acta como ando, y el otro como ctodo. Este ltimo se une
por su extremo a un cilindro hueco de metal, recubierto por el metal que se desea determinar. La lm-
para esta llena de helio o de argn. Cuando se hace pasar corriente el gas se ioniza, y sus partculas
bombardean el ctodo, excitando a los tomos metlicos. Cuando stos se relajan lo hacen emitiendo
radiacin en una longitud de onda caracterstica.
Las lmparas de descarga sin electrodo, son lmparas de cuarzo llenas de argn y de una sal del ele-
mento que se quiere analizar. La fuente de energa para ionizar el gas no proviene de electrodo alguno,
sino de un intenso campo electromagntico de radiofrecuencias o de microondas.
El monocromador consiste en un dispositivo que selecciona la longitud de onda del elemento que
queremos determinar.
Existen dos variantes de la absorcin atmica de inters en qumica ambiental. Se trata de la absorcin
atmica de vapor fro y de la absorcin atmica con generador de hidruros.
En la generacin de hidruros se aprovecha el hecho de que los hidruros de algunos elementos (Ars-
nico, Bismuto, Germanio, Plomo, Antimonio, Selenio, Estao, Teluro) son ms voltiles que el ele-
mento mismo, lo que permite una mejor atomizacin. La obtencin del hidruro correspondiente se
logra mezclando borohidruro sdico en medio bsico con una disolucin cida del metal.
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- Est basada en que cada elemento presente en una muestra va a emitir, una vez excitado,
radiacin a una longitud de onda especfica.
Un plasma es un gas ionizado. Cuando se induce en un flujo de un gas, generalmente argn, recibe el
nombre de induced coupled plasma o ICP. Las antorchas de ICP consisten en tubos de cuarzo por
los que circula una corriente de argn. El gas se ioniza por efecto de una corriente elctrica, y los
iones generados son obligados a circular por un espacio anular cerrado dentro de un campo magntico
de radiofrecuencia. La resistencia a su circulacin provoca un calentamiento del gas que da lugar a
una nueva ionizacin, pasando as a estado de plasma, alcanzndose temperaturas de hasta 10000 K.
La muestra es introducida dentro del plasma por una corriente de argn, producindose en su seno la
atomizacin y consecuente excitacin.
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Destacar que en el caso de los compuestos orgnicos voltiles no se debe realizar secado de la mues-
tra, y conviene que la manipulacin de la misma sea mnima. Por ello se recomienda emplaear, para su
recogida en campo, viales de vidrio con tapn teflonado compatibles con sistemas de inyeccin cro-
matogrfica. De entre estos sistemas hay que mencionar el espacio en cabeza (head space) y el de
purga y trampa. El primero consiste en introducir la muestra en un vial que se coloca en un recpt-
culo termostatizado que se calienta a una temperatura tal que permite la volatizacin de los compues-
tos orgncios de la muestra, los cuales, en estado gaseoso, son conducidos al sistema de inyeccin de
la columna cromatogrfica. La purga y trampa es algo ms sofisticada. En ella, se mejora el rendi-
miento del espacio en cabeza mediante la inyeccin en el vial de un gas inerte que empuja a los com-
puestos voltiles hacia un compartimiento en el que los analitos quedan adsorbidos.
- La fase estacionaria; se trata del material inmvil sobre el que se produce la separacin
de los analitos.
- La fase mvil, que es el fluido que arrastra a la muestra a travs de la fase estacionaria.
- Detector, aparato que registra una propiedad fsico-qumica del analito que va saliendo
(eluyendo) de la fase estacionaria.
Las caractersticas de cada uno de estos componentes varan segn el tipo de tcnica. Existe un gran
nmero de tcnicas cromatogrficas, de entre ellas las ms utilizadas en la determinacin de compues-
tos orgnicos son:
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Se trata de una variante de cromatografa lquida (LC) en la que la fase mvil y la muestra se hacen
pasar a travs de la columna mediante una bomba de alta presin, y en los que la muestra se inyecta de
modo tal que el flujo no se ve interrumpido. Todo ello para lograr que los analitos de la muestra inter-
acciones con una fase estacionaria formada por partculas alteamente empaquetadas, lo que propor-
ciona una mayor eficiencia del proceso cromatogrfico.
La bomba de impulsin.
El sistema de inyeccin.
La columna.
Detector.
La bomba de impulsin debe ser capaz de suministrar una presin de varias atmsferas. Las modali-
dades ms utilizadas son las bombas de desplazamiento positivo, o de jeringa; y las bombas de pistn
con movimiento de vaivn. Las primeras deben ser rellenadas cada vez que se vacan, mientras que las
segundas pueden mantener el flujo por tiempo indefinido.
El sistema de inyeccin introduce la muestra en la corriente de fase mvil que fluye de la bomba a la
columna, sin producir una interrupcin del flujo ni alterar la presin. Puede ser manual o automtico.
Los detectores ms usuales en HPLC son el de absorcin UV-VIS, y el de fluorescencia. Entre los
detectores de UV-VIS los ms frecuentes son los de longitud de onda variable, y los de diodo array. En
los primeros se selecciona la longitud de onda a la que se desea medir mediante una red de difrac-cin.
En los segundos, el detector suministra el espectro de absorcin de UV-VIS del material eluido.
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En la GC los analitos, en estado gaseoso, se reparten entre una fase mvil gaseosa, y una fase estacio-
naria slida o lquida.
Regulador de flujo.
Inyectores.
Columnas.
Detectores.
El depsito de gas portador suele consistir en una bala de gas comprimido. Su misin es doble, por
un lado desplazar a los analitos por el interior de la columna, y por otro suministrar una matriz ade-
cuada al detector. Para ello debe cumplir tres requisitos: ser inerte, poder obtenerse con una elevada
pureza, y no representar un gasto econmico importante. Como gases portadores suelen utilizarse el
nitrgeno, el helio, el hidrgeno, y el argon.
El regulador del flujo del gas, consiste en un dispositivo electrnico que permite controlar la veloci-
dad de la fase mvil.
Los inyectores, son las partes del sistema por donde se introduce la muestra, mediante microjeringas;
bien manualmente, o preferiblemente, por medio de un inyector automtico. Adems de ser el punto
de entrada en la columna cromatogrfica, es el sitio donde se produce la volatizacin y mezcla de las
sustancias a determinar, por lo que la temperatura de esta parte del equipo tiene que estar muy bien
controlada.
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Las columnas, que contienen la fase estacionaria, pueden ser de dos clases: empaquetadas y capilares.
Ambas se diferencian en su longitud, dimetro interior, y naturaleza.
Las columnas empaquetadas tienen entre 1 y 2 m de largo, su dimetro interior es de 1 a 2 mm, y estn
fabricadas en acero inoxidable.
Las columnas capilares alcanzan los 10 m de longitud, y estn hechas de slice fundida.
ANALITOS TCNICA CG
El FID responde a casi todos los analitos con independencia de su estructura qumica, lo nico que se
necesita para que de seal es que el analito contenga carbonos orgnicos. Este detector consta de una
llama de hidrgeno/aire, un colector de iones, y un amplificador de corriente. El gas portador (N 2 o
He), procedente de la columna cromatogrfica, pasa a travs de la llama y no genera seal alguna.
Cuando aparece un compuesto con carbonos orgnicos, stos se pirolizan en la llama y forman catio-
nes. Mediante un campo elctrico son conducidos al colector, lo que genera una corriente elctrica que
es amplificada.
El ECD responde a los analitos electronegativos (compuestos halogenados, nitrilos, nitratos, com-
puestos organometlicos), debido a que su funcionamiento se basa precisamente en la afinidad de los
compuestos hacia los electrones. El detector consta de una cavidad con dos electrodos y una fuente
radiactiva de partculas beta (electrones) que suele ser 63Ni . Cuando el gas portador entra en la cavi-
dad sufre el bombardeo de partculas beta transformndose en un plasma de electrones. Los electrones
del plasma son atrados por el nodo formndose una corriente elctrica que es registrada. Cuando el
gas portador arrastra hacia el interior de la cavidad un analito electronegativo, ste captura electrones
del plasma, lo que produce una disminucin de la corriente elctrica.
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El EM permite identificar el analito de modo altamente especfico, puesto que mide la relacin ma-
sa/carga del mismo. Un espectrmetro de masas consta de tres elementos bsicos: la fuente de ioniza-
cin, el analizador, y el detector de iones.
El detector recibe a los iones a diferentes tiempos, generndose en l una corriente que luego ser
amplificada. El ms habitual es los detectores del tipo multiplicador de electrones, unos dispositivos
electroemisores que generan una cascada de electrones cuando sobre ellos impacta un in.
El espectro de masas va a representar la abundancia relativa de cada especie inica frente a su masa.
La complejidad de un espectro de masas es tanto mayor cuanto mayor es el peso molecular y la estruc-
tura del analito.
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Evaluacin Documentacin
Procedimientos de tratamiento de la informacin
Para controlar los resultados del laboratorio se hace necesario introducir una serie de controles de
calidad, entre los cuales los ms habituales son:
Muestras duplicadas.
Muestras cebadas.
Muestras de contraste.
Blancos.
Los duplicados consisten en analizar la misma muestra dos veces, y comprobar que la diferencia entre
ambos resultados no supera unos determinados mrgenes de aceptacin.
Las muestras cebadas consisten en muestras a las que se les aade una determinada cantidad de analito
conocido. El empleo de este tipo de muestras resulta til para comprobar el porcentaje de recuperacin
en las extracciones de compuestos orgnicos.
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Las muestras de contraste son muestras idnticas entre s que se analizan por laboratorios diferentes
utilizando el mismo mtodo de ensayo.
Los blancos son muestras sin analito, o con concentraciones inapreciables de ste. Existen diferentes
tipos de blancos:
- Blancos de campo. Se diferencian de los anteriores en que, una vez en el lugar de mues-
treo, se abren y manipulan del mismo modo que una muestra normal, pero antes de reco-
ger las muestras reales. Tiene por objeto detectar posibles contaminaciones de los equi-
pos de muestreo.
- Blancos de reactivos. Iguales que en el caso anterior, con la diferencia de que aqu la
muestra de agua destilada sufre el mismo tratamiento que las muestra de suelo. Su finali-
dad es determinar si existe contaminacin en el material o en los reactivos empleados.
BIBLIOGRAFA.
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