UNIVERSIDAD NACIONAL PEDRO

RUIZ GALLO
FACULTAD DE CIENCIAS BIOLOGICAS
ESCUELA PROFESIONAL DE BIOLOGIA

INFORMES
DE
LABORATORIO
INTEGRANTES:
CURSO:

Cajusol Veliz Maris

MICOLOGIA GENERAL

PROFESORA:
GIANINA LLONTOP
BARANDIARAN

Estrada Romero Jean

Antony
Gutierrez Armijos Leydi
Pacheco Chinchay Denis
Marx
Requejo Sanchez Liseth
Tenorio Pizarro Anthony

PRACTICA # 1
RECONOCIMENTO Y MANEJO DEL MATERIAL DEL
LABORATORIO DE MICOLOGIA

I.

INTRODUCCION

El equipamiento

de

laboratorio es

el

conjunto

de

las

diferentes

herramientas, instrumentos y equipos utilizados por los cientficos que trabajan

en un laboratorio.

Estos incluyen herramientas tales como mecheros Bunsen, y microscopios, as

como equipos especiales. Otro tipo importante de equipos de laboratorio es
el material de vidrio.

El equipamiento de laboratorio se utiliza generalmente para la realizacin de

experimentos o bien para realizar mediciones y obtener datos.

Los

equipos

ms

grandes

ms

sofisticados

generalmente

son

llamados instrumentos cientficos.

Los equipos de laboratorio en general se utiliza tanto para realizar una

manipulacin, o experiencia, o para llevar a cabo medidas y recoger datos.

II.

OBJETIVOS:

Aprender a reconocer y utilizar el principal material de laboratorio

requerido para el desarrollo del curso.

III.

FUNDAMENTO TEORICO
MATERIAL DE LABORATORIO

MATERIAL DE VIDRIO

TUBOS DE DILUCION
Ideal para realizar los cultivos, aislamientos
primarios, secundarios (para ampliarla zona de
extension).

VASO DE PRECIPITACION
Es un recipiente cilndrico de vidrio fino
que se utiliza para preparar o calentar
sustancias y traspasar lquidos.
Son cilndricos con un fondo plano; se
les encuentra de varias capacidades,
desde 1 mL hasta de varios litros.
Tienen componentes de tefln u otros
materiales resistentes a la corrosin.
Suelen estar graduados, pero esta
graduacin es inexacta por la misma naturaleza del artefacto; su forma regular
facilita que pequeas variaciones en la temperatura o incluso en el vertido
pasen desapercibidas en la graduacin

PLACA DE PETRI
La placa de Petri es un recipiente redondo, de vidrio o
plstico, con una cubierta de la misma forma que la
placa, pero algo ms grande de dimetro, para que se
pueda colocar encima y cerrar el recipiente.

PROBETAS:
La probeta o cilindro graduable es un
instrumento, que permite medir volmenes
superiores y ms rpidamente que las
pipetas, aunque con menor precisin. Sirve
para contener liquidos.

EQUIPO DE MICROCULTIVO
Consta de:
Placa Petri
Varilla de vidrio solido doblado
Lamina portaobjetos y laminilla cubre objetos.
Sirve para la identificacin de hongos

MATRACES
Recipiente de cristal donde se mezclan las soluciones
qumicas, generalmente de forma esfrica y con un
cuello recto y estrecho, que se usa para contener
lquidos; se usa en los laboratorios.

PIPETAS
La pipeta es un instrumento de laboratorio
que permite medir lquido con bastante
precisin. Est formado por un tubo
transparente que termina en una de sus
puntas de forma cnica, y tiene una
graduacin (una serie de marcas
grabadas) indicando distintos volmenes.

EQUIPOS

MICROSCOPIO

Es un instrumento que permite observar objetos

que son demasiado pequeos para ser vistos a
simple vista. Se trata de un instrumento optico
que contiene una o varias lentes que permiten
obtener una imagen aumentada del objeto y que
funciona por refraccin.

MECHERO BUNSEN:
Un mechero o quemador Bunsen es un instrumento de laboratorio
utilizado en laboratorios cientficos para calentar o esterilizar muestras o
reactivos qumicos

ASAS MICOLOGICAS
Se emplea para transportar o arrastrar o trasvasar
inoculodesde la solucin de trabajo tambin llamada
solucin madre al medio de cultivo (slido) o de un
medio a otro
(resiembra)

BALANZA ANALITICA
La balanza analtica es uno de los instrumentos de
medida ms usados en laboratorio y de la cual
dependen bsicamente todos los resultados
analticos.

ESTUFA
Se utiliza para secado de sustancias y
esterilizacin. Alcanza temperaturas ente 250 y
300 C.

IV.

CONCLUSIONES:
Se aprendi sobre reconocimiento y utilizacin del principal
material de laboratorio usado para el desarrollo del curso
Aprendimos el procedimiento para
la preparacin de las
principales soluciones requeridas en el laboratorio de micologa

V.

LINKOGRAFIA:

http://www.innovar.gob.ar/blog/home/noticias/la-clonacion-en-el-reinovegetal
http://www.coprevasaic.com.ar/productos.asp
http://es.wikipedia.org/wiki/Vaso_de_precipitados
http://www.monografias.com/trabajos38/laboratoriosmicrobiologia/laborat
orios-microbiologia.shtml
http://es.wikipedia.org/wiki/Equipamiento_de_laboratorio

PRACTICA # 2
MEDIO DE CULTIVO

I.

INTRODUCCIN

Un medio de cultivo son sustratos que semejan el nicho ecolgico de los

hongos y que tienen la siguiente finalidad:
Permite observarlos a travs de la formacin de colonias
Permitir su aislamiento
macroscpicas y microscpicas
Permite tenerlo en cultivo puro cepa
Deben tener fuente de carbono proveniente de glucosa
Deben tener fuente de nitrgeno proveniente de peptona
De igual manera un pH (ligeramente cido) y una temperatura adecuada en un
medio de cultivo son extremadamente importantes para el crecimiento de los
hongos.
Un medio de cultivo adecuado es aquel que contenga los elementos nutricios
esenciales en concentraciones adecuadas, la cantidad necesaria de sal y el
adecuado volumen de agua, se encuentra exento de sustancias inhibitorias del
organismo que se va a cultivar, que tenga la consistencia deseada, el pH
conveniente para el metabolismo del cultivo, y ser estril. Los medios de cultivo
deben siempre almacenarse en atmsfera fra y hmeda (refrigeracin) para
evitar su deterioro y su deshidratacin

II.

OBJETIVO
El objetivo de la presente prctica es aprender a preparar
correctamente los principales de medios de cultivo que se utilizan en
el laboratorio de micologa

III.

FUNDAMENTO TERICO

Uno de los sistemas ms importantes para la identificacin de microorganismos es

observar su crecimiento en sustancias alimenticias artificiales preparadas en el
laboratorio. El material alimenticio en el que crecen los microorganismos es el Medio
de Cultivo
El desarrollo adecuado de los microorganismos en un medio de cultivo se ve afectado
por una serie de factores de gran importancia y que, en algunos casos, son ajenos por
completo al propio medio.

CONDICIONES PARA UN MEDIO DE CULTIVO:

Deben tener una fuente de carbono (suministrado por la glucosa) y una fuente de
nitrgeno (suministrado por la neopeptona)

La temperatura oscila entre 26- 28 C, pero la mayor temperatura para hongos es

de 37 C

El pH es 6,5(ligeramente acido)

Con una humedad adecuada

LOS MEDIOS MS UTILIZADOS SON:

AGAR SABOURAUB GLUCOSADO (SAB):

El agar Sabouraud, modificado por Emmons, contiene un 2% de glucosa y es

ligeramente cido (pH=6.9), se considera el medio estndar para recuperar y
mantener una amplia variedad de hongos que pueden aislarse en el laboratorio de
micologa clnica. Es el medio estndar para observar la morfologa tpica de los
hongos, pero no es el medio ideal de crecimiento o para estudiar la esporulacin.
Este medio permite el crecimiento de actinomicetos aerobios, pero el SAB original (4%
de glucosa), dificulta la recuperacin de algunos hongos, sobre todo
de Blastomycesdermatitidis.
Se utiliza indistintamente en tubo o en placa.

COMPONENTES:

Glucosa (2,0g)

Neopeptona (1,0g)

Agar(1,5g)

Agua destilada( 100ml)

AGAR PAPA DEXTROSA (PDA):

Se prepara con pulpa de papa como base y, al ser un medio muy pobre, se utiliza para
estimular el desarrollo in vitro de las estructuras de reproduccin sexual de la mayor
parte de los hongos. Tambin estimula la produccin de pigmentos en hongos como
por ejemplo, T. rubrum. Se puede aadir zanahoria y bilis (para favorecer la obtencin
de
clamidosporas
de Candida
albicans)
o
glucosa/dextrosa
(para
diferenciarTrichophytonrubrum)
COMPONENTES:

Papa (20g)

Glucosa (2g)

Agar (2g)

Agua destilada (100ml)

IV.

REACTIVOS Y MATERIALES:
1) REACTIVOS:

PARA OBSERVACIN MICROSCPICA:

ACLARANTES:

KOH al 10%
Lactofenol

Azul de algodn 1%(en sol. Acuosa)

COLORANTES:

MONTAJE (CONSERVACIN):

Azul de algodn
Lactofenol( azul de amamm)
1ml lact + 2ml de azul de algodn al 1%

2) EQUIPO DE MICROCULTIVO:
Placa de petri
Varilla de vidrio acodada (A. de vidrio)
Laminas portaobjetos
Laminillas envueltas en un papel (que permitir el
aislamiento de los hongos y para la obs. Microscpica)
Tubos de dilucin
Microscopios

V.

PROCEDIMIENTO:
PREPARACIN DE AGRAR PAPA
Ponemos a hervir el agua y tapamos con una placa (a 20 oC)
Pesamos 40g de papa y la agregamos al agua
Se pesa el agar y glucosa, y los colocamos en una botella
Luego completamos en una probeta los 200ml (se deja enfriar) y se vaca
a la botella que contiene la glucosa, despus se homogeniza
Se taponea y se manda a autoclave

PREPARACIN DE LAFTOFENOL
Fenol: 20g
Acido lctico: 20g
Glicerina: 20g
Agua destilada: 40ml

VI.

CONCLUSIONES:
Se aprendi a preparar correctamente el medio de agar papa dextrosa
para hongos

Se logro preparar tambin reactivos como el lactofenol

PRACTICA N 03
MONTAJE MICROSCOPICO

I.

INTRODUCCIN:

Es una tcnica muy importante que requiere de destreza o paciencia para hacerlo
porque a travs del examen directo se puede llegar a la identificacin del hongo.

Por su tamao microscpico, los hongos no pueden observarse a simple vista,

a excepcin de los hongos macroscpicos que por su propio tamao pueden
ser observados superficialmente sin equipos, siempre y cuando no se requiera
estudiar detalles de las esporas. Para su observacin al microscopio
compuesto, los hongos requieren ser preparados y montados en portaobjetos.
En estudios preliminares o de rutina se hacen preparaciones temporales
desechables, pero si se desea preservar especmenes por largo tiempo es
necesario elaborar montajes permanentes, los que de hacerse correctamente
duran uno o varios aos en buenas condiciones
Los hongos pertenecen a los organismos eucariotas, producen esporas,
carecen de clorofila y su nutricin por absorcin; generalmente presentan
reproduccin sexual y asexual; el cuerpo consiste generalmente de filamentos
ramificados con pared celular quitinosa.
Los hongos constituyen uno de los grupos de organismos ms importantes
para la vida del hombre, debido a que son los responsables de gran parte de la
descomposicin de la materia orgnica aumentando su disponibilidad en el
suelo; pueden ser comestibles, venenosos o psicotrpicos; muchos son
patgenos; otros, producen ciertas sustancias beneficiosas o intervienen en
procesos de elaboracin de algunos comestibles.
Uno de las ms sencillas para poder identificar hongos es por medio del
examen directo. El examen directo es una tcnica gracias a la cual se puede

distinguir entre las diferentes estructuras de los hongos y as poder

identificarlos
Este examen se puede realizar a partir de una muestra o de una colonia
(cultivo).

II.

OBJETIVOS:
Realizar montaje en fresco
Familiarizarse con las estructuras microscpicas de los hongos

III.

MATERIALES:

IV.

Liquido de montaje (KOH 10%), para hongos oscuros

Colorante Azul de algodn, para hongos claros
Lminas y laminillas
Ansa micolgica
Material biolgico enmohecido
Microscopios

PROCEDIMIENTO:
Colocar una gota de lquido de montaje en el centro de la lmina
porta objetos, Con el aza micolgica tomar una porcin de micelio y
depositarla en el lquido para montar, finalmente cubrir con una
laminilla y observar al microscopio con objetivo de 40x

Agregar el respectivo
lquido de montar

Observar en el
microscopio a 40x

V.

RESULTADOS:

Sacar la muestra de un durazno

enmohecido luego agregar la muestra en
el que contiene lquido de montar

VI.

CONCLUSIONES:
Seaprendi a dominar la tcnica de examen directo de los hongos a
partir de las muestras utilizadas.
Se encontr los gneros Rizopus,.

PRACTICA N 4
HONGOS CONTAMINANTES DEL AMBIENTE
I.

INTRODUCCIN
Los hongos ambientales son safrofticos, a estos hongos se les encuentra
en el aire, en el suelo y en el agua, ya que en ellos estos hongos
encuentran los nutrientes necesarios para su metabolismo. Hongos
filamentosos pueden producir toxinas que se han implicado en diversas
enfermedades y sndromes clnicos en el ser humano y animales. Son
metabolitos nicticos secundarios que originan enfermedades, conocida
de forma global como micotoxicosis, tras la ingestin, inhalacin o el
contacto directo con la toxina. Los hongos contaminantes resultan un
grave problema para el hombre. Dentro de las setas cabe mencionar las
que parasitan y pudren la madera, como Coniophara o las comnmente
denominadas "orejas". Sin embargo, el mayor perjuicio se obtiene de los
hongos microscpicos, sobresaliendo los mohos que pueden atacar y
degradar.

II.

OBJETIVOS:
Determinar la presencia de los hongos de aire en el ambiente de trabajo
III.
MATERIALES:
Placa petri con agar saboroud glucosado
Laminas, laminillas
Liquido de montaje
Microscopios
Mecheros
IV.

FUNDAMENTO TERICO:
El moho es un hongo que se encuentra tanto al aire libre como en
interiores. Nadie sabe cuntas especies de hongos existen, pero se
calcula que puede haber desde decenas de miles hasta quiz
trescientas mil o ms. El moho crece mejor en condiciones clidas,
mojadas y hmedas, y se propaga y reproduce mediante esporas. Las
esporas del moho pueden sobrevivir en condiciones ambientales, como
la resequedad, que no favorecen el crecimiento normal del moho.

Los mohos se encuentran virtualmente en cada ambiente y pueden ser

detectados, tanto en interiores como al aire libre, durante todo el ao.
Las condiciones hmedas y clidas favorecen el crecimiento del moho.
Al aire libre pueden encontrarse en reas o lugares hmedos
sombreados donde hay descomposicin de hojas o de otro tipo de
vegetacin. En los interiores pueden encontrarse en lugares donde los
niveles de humedad son altos como los stanos o las duchas.
Las personas sensibles deben evitar reas que tienen ms probabilidad
de tener moho como los lugares donde se apila el abono, el prado
cortado y las zonas boscosas. Al interior de las casas, el crecimiento del
moho puede disminuirse manteniendo los niveles de humedad por
debajo del 50% y ventilando las duchas y los lugares donde se cocina.
Los crecimientos de moho pueden eliminarse de las superficies duras
con productos comerciales, agua y jabn, o con una solucin de
blanqueador1 preparada con una mezcla de no ms de 1 taza de cloro y
1 galn de agua. Las personas sensibles deben ponerse una mscara
ajustada en la cara en los casos en que no pueda evitarse la exposicin
al moho.
Hongos del ambiente
Mucor spp, Rhizopus spp, Aerobasidium spp, Paecilomyces,
Curvularia spp, Trichoderma spp, estados telomorfos de Aspergillus
y Penicillium, levaduras (Candida spp, Rhodotorula spp).
Asociados a enfermedad alrgica y oportunista
Contaminacin de materiales

V. PROCEDIMIENTO
Recolectar 10 ml de agua estancada y sembrarla en una placa de agar con
una torunda estril por estra e incubar una semana a temperatura
ambiente.

VI.

RESULTADOS:
Se sirvi el medio en la placa, se dejo enfriar y luego la placa fue
expuesta al aire libre, despus se empaqueto y fue llevada a incubar
para hacer la lectura despus de pasados los 5 das correspondientes.

Despus de incubar la placa durante el

lapso

de

das

se

procedi

seleccionar una colonia y realizar la siembra en un tubo con medio de

cultivo para luego poder hacer un examen directo y describir lo
observado.

DESCRIPCIN DE LA COLONIA:
Se describi una colonia con las siguientes caractersticas:
a) CARACTERSTICAS MACROSCPICAS:
Aspecto: algodonosa
Color: Blanco
b) CARACTERSTICAS MICROSCPICAS:
Micelio: Tabicado y cenoctico

VII.

CONCLUSIONES:
Se logro determinar la presencia de distintas clases de hongos
presentes en el ambiente de donde fue recolectada el agua.

PRACTICA N5
CULTIVO PURO

I.

INTRODUCCION:

Los cultivos puros se obtienen habitualmente de cultivos mixtos (que contienen

varias especies), por mtodos que separan las clulas de modo que, cuando se
multiplican, cada una formar una colonia distinta, que luego puede usarse
para establecer nuevos cultivos con la seguridad de que tendrn slo un tipo de
organismo. Los cultivos puros se obtienen ms fcilmente si el medio de
crecimiento empleado para el cultivo mixto original favorece el desarrollo de un
organismo con exclusin de otros.

II.
OBJETIVO:
Lograr un cultivo puro a partir de un aislamiento primario

III.

IV.

MATERIAL
Cultivo fngico obtenido en un aislamiento primario
Agar saoburoud en tubo solidificado en plano inclinado
Asa micolgica
Mechero
Porta
Cubre
Liquido de montaje
Microscopio
PROCEDIMIENTO
Elegir la colonia adecuada
Tomar el inculo con el asa esterilizada
Depositarlo sobre la superficie inclinado del medio
Incubar a 26 a 28 C durante siete das

V.

RESULTADOS

Evaluar las caractersticas macroscpicas y microscpicas

Caractersticas macroscpicas:

Dvila: acuminada, verde petrleo

Valderrama: verde opaco, algodonoso
Uceda: verde grisceo con elevacin y en centro algodonoso

Caractersticas microscpicas:
Cladosporium
Color oscuro (de matiaso)
Espora limnoniforme, pequeas
Micelio tabicado
Esporas
Cilndricas en cadena

VI.

CONCLUSIN

La muestra colocada en el medio tiene las mismas caractersticas macroscpicas y

microscpicas que el aislamiento primario.

PRACTICA N6
TCNICA DE MICROCULTIVO
I.

INTRODUCCIN

La tcnica de microcultivo es muy importante puesto que supera a la del

examen directo, facilita la observacin del hongo en todas sus estructuras
permitiendo su identificacin

II.

OBJETIVO
Realizacin del microcultivo con la finalidad de observar estructuras
completas del hongo

III. FUNDAMENTO TEORICO

Esta tcnica se utiliza en micologa para el estudio de estructuras de los
hongos (conidias, ascas, hifas, conidioforos, entre otras) que son muy frgiles y
se deterioran fcilmente, al ser obtenidas para su observacin a partir de un
macrocultivo
comn
y
corriente.
La tcnica consiste en colocar en el interior de una caja de Petri estril unas
varillas de vidrio estril y sobre ellas una lmina portaobjetos.
Las varillas evitan que la lmina portaobjetos haga contacto con el fondo de la
caja de Petri. Luego sobre el portaobjetos se coloca el medio de cultivo
slido. Con un asa previamente flameada se siembra el hongo a analizar en el
medio de cultivo, despus se cubre con la laminilla cubreobjetos, y se adiciona
en el fondo de la caja de Petri agua destilada estril para mantener una
atmsfera hmeda. Despus se procede a la incubacin a la temperatura
requerida y por el tiempo necesario.
Luego de incubado se retira con cuidado la laminilla cubreobjetos teniendo en
cuenta que en ella se encuentra adherido el hongo. Se monta la laminilla con el
hongo a estudiar sobre un portaobjeto y se procede a su observacin en fresco,
o se prepara un frotis con una preparacin permanente.

IV. MATERIALES

Cepa en estudio

Equipo de microcultivo

Liquido de montaje

Ansa micolgica

Mechero

Microscopio

Agua destilada estril

Agar saboraud glucosado en cuadraditos de 1cm de lado

Pinzas y esptula estriles

V. PROCEDIMIENTO

Colocar un cuadrado de agar saboraud glucosado en el centro del porta

objetos del equipo de microcultivo

Con el ansa micolgica tomar una pequea muestra de micelio y

depositarlo en la parte central y superficial en uno de los lados del
cuadrado de agar

Repetir la accin en los 3 lados restantes, cubrir con laminilla y depositar

una lamina de agua

Incubar a temperatura del laboratorio durante 5 das

VI. RESULTADOS
CARACTERSTICAS MACROSCPICAS:

Aspecto: algodonosa

Color: Blanco

CARACTERSTICAS MICROSCPICAS:
Miscelio: Tabicado y cenoctico

VII.

CONCLUSIN
Se aprendi la tcnica para el microcultivo de hongos y con esto se pudo
observar sus estructuras que coinciden con las caractersticas que se
haban definido.

PRACTICA N 7
TCNICA DEL MONTAJE
I.

INTRODUCCIN
El procedimiento se lleva a cabo con el ansa de gancho o con una aguja
montada sobre un trozo de varilla, se procede tomando una pequea
porcin de la colonia a estudiar (a veces es necesario ayudarse con otra
ansa). La muestra debe tomarse de un sitio intermedio entre el centro y
la periferia de la colonia. Este pequeo fragmento de colonia se
transfiere a una gota de lacto fenol azul de algodn en un portaobjeto y
se cubre con un cubre objeto. Se presiona suavemente directamente
sobre el fragmento de la colonia para deprimir las hifas y otras
estructuras y permitir un mejor examen microscpico.
.

MTODO
Montaje hmedo

VENTAJAS
- Preparacin rpida
-

DESVENTAJAS
Dificultad para

y fcil

Conservar la

Es suficiente para

continuidad entre las

la identificacin de

esporas, estructuras

muchos hongos

con frutos e hifas debido

al riguroso
tratamiento.

II.

OBJETIVO
Observar al hongo con todas sus estructuras y lograr un montaje
semipermanente.

III.

MATERIALES
Microcultivo
Lamina porta objetos
Liquido de montaje
Microscopio
Pinzas

IV.

PROCEDIMIENTO

 Colocar una gota de lquido de montaje en el centro del porta,

remover la laminilla con una pinza del microcultivo y llevarla a la gota
de liquido de montaje
Sellar con esmalte de uas transparente
Observar al microscopio

V.

RESULTADOS

VI.

CONCLUSIN
Se logro observar las estructuras del hongo y se logro hacer un buen
empleo de la tcnica de montaje. Los cultivos con el montaje una vez
solidificados pueden conservarse por mucho tiempo.

PRACTICA N 8
AISLAMIENTO DE Saprolegnia

I.

INTRODUCCIN

Divisin Mastigomicotina: incluye a todos los hongos que producen esporas

flageladas, llmese zoosporas y que por lo tanto van a requerir de agua
algn estado de su vida.

Clases:

 Chitridiomycetes.- Hongos parsitos de plantas y animales acuticos as

como de rboles
Oomydetes.-

II.

Orden Peronosporales.- Son eminentemente terrestres, pero en

algn momento van a requerir de agua para cumplir una de sus
etapas de su ciclo de vida.

Orden Saprolegniales.- Son acuticos, pero algn momento van a

requerir de tierra firme para cumplir una de sus etapas de su ciclo de
vida.
Saprolegniaspp, esta especie vive en el agua en forma saproftica
sobre detritus planta y animales acuticos muertos, sobre los
cuales se desarrolla con un abundante micelio hialino.
OBJETIVO

Aislamiento de Saprolegnia

III.

MATERIALES

Muestra de agua marina, estancada o de ro obtenido en frascos

estriles
Anzuelo
Moscas u otros insectos muertos

IV.

PROCEDIMIENTO

En la muestra de agua colocar el anzuelo sobre su superficie

previamente desinfectado sumergindolo rpidamente en agua hirviendo
Incubar por 3 a 4 das a temperatura de laboratorio

V.

RESULTADOS

Los aislamientos positivos se caracterizan por el desarrollo de una masa

abundante y hialina que constituye el micelio alrededor del anzuelo

VI.

CONCLUSIN

Se logr observar hongos geofilicos (christocecio)

PRACTICA N 09
AISLAMIENTO DE ASCOMYCETES
I.

INTRODUCCION

Los ascomicetos constituyen el grupo de hongos ms extenso, diverso y

econmicamente
importante.
Las levaduras, algunos hongos de humedad, hongos de copa y trufas, son
parte de este phylum, dentro del cual se incluyen algunos hongos responsables
de que la comida se dae y obtenga mal sabor.
La mayor parte de los ascomicetos son saprofitos que viven en materia vegetal
muerta, algunos son parsitos de plantas y muchos estn adaptados a hbitats
terrestres.

Se encuentran nutrindose de estructuras queratinizadas (pelos, cabellos,

uas, etc) que caen en la tierra.

II.

OBJETIVOS

Aislamiento de Nannesia incuvatum.

III.

MATERIALES

MUESTRA: Tierra de jardn de una profundidad de 10 15 cm.

Placa petri estril.
Pinza.
Agua destilada estril.

IV.

FUNDAMENTO

Nannezia incuvatum (reproduccin sexual)es la fase perfecta de Microsporium

gypseum (reproduccin asexual, fase imperfecta).
Nannezia incuvatum se reproduce formando esporas sexuales llamada
ascosporas los cuales estn dentro de una estructura llamada Asca en nmero
de 8 y estas Ascas estn dentro de cuerpos de fructificacin llamados
cleistotecio (ascocarpo cerrado).

V.
-

PROCEDIMIENTO
Depositar la muestra en una placa petri, agregar con ayuda de una pinza
porciones de cerda de cabello estril, mezclar con la muestra y agregar
agua destilada estril pero sin producir lodo.
Incubar a temperatura ambiente durante 2 a 3 semanas.

VI.
-

RESULTADOS
Al tiempo de incubacin se pueden observar pleistotecio (blancos y
redondos).

VII.

CONCLUSIONES

En condiciones ambientales favorables, Nannezia incuvatum se reproduce

formando esporas sexuales contenidas en el pleistotecio.

PRACTICA N10
AISLAMIENTO DE PHITHOPHTORA

I.

INTRODUCCIN

Divisin Mastigomycota
Producen clulas flageladas, al menos zoosporas, presentan divisin nuclear
cntrica (con centriolos), su nutricin es por absorcin, producen un micelio
cenoctico en su mayora, su talo es unicelular o filamentoso y la reproduccin
es asexual por zoosporas.
Clase Chitridiomycetes

Producen zoosporas y planogamentos con un flagelo liso y posterior, el talo es

cenoctico esferoidal, hifa simple alargada o micelio. El cigoto se transforma
en una espora de resistencia o reposo, o un esporangio de resistencia. La
pared celular fundamentalmente de quitina, a veces tambin de celulosa, el
hbitat es acutico fundamentalmente o en el suelo, saprfitos o parsitos.
Clase Oomycetes
Orden Saprolegniales
Saprolegnia se encuentra en el orden Saprolegniales y pertenece finalmente
a la Familia Saprolegniaceae la cual tiene como caractersticas generales un
miceliocenoctico muy ramificado, una pared celular principalmente de
glucanos, tambin de celulosa en la cual aparecen septos para separar los
rganos reproductores. Los zoosporangios son largos y cilndricos,
terminales, de dimetro algo mayor que la hifa que los origina.
El gnero Saprolegnia se presenta formando una estructura algodonosa, y
un micelio poco organizado. En el micelio aparecen zoosporocistos que
presentan un tabique, y en el interior se organizan multitud de zoosporas
biflageladas que buscan activamente otro husped.
Orden Peronosporales
El orden engloba dos familias: Peronosporaceae y Albuginaceae, que
engloban a su vez un total de 8 gneros, 7 en el primero y 1 en el segundo,
segn el Global Biodiversity Information Facility que recoge la informacin
del Catalogue of life: species 2000. Segn dicho catlogo esto supone que el
orden engloba un total de 120 especies catalogadas. Los Peronosporales en
general engloban especies que producen enfermedades en plantas, siendo
las ms caractersticas las royasblancas y los mildius.

Phytophthoraes principalmente uno de los patgenos de dicotiledneas y son

relativamente especficas de las plantas que parasitan. Varias especies son
patgenas de plantas de considerable importancia econmica. Phytophthora
infestans fue el agente causante del tizn tardo de la patata que provoc la
gran hambruna de Irlanda entre 1845 y 1849 y que origin la extraordinaria
emigracin de irlandeses a Estados Unidos. Las enfermedades en las plantas
originadas por este gnero son difciles de controlar qumicamente, por eso
como estrategia contra ellas se est extendiendo el cultivo de variedades
resistentes.

Phytophthora es referido algunas veces como un organismo fngico pero est

clasificado entre los protistas en el grupo denominado Oomicetes). Este es un
buen ejemplo de la evolucin convergente: Phytophthora es morfolgicamente
muy parecido a los hongos verdaderos (Fungi) aunque su evolucin biolgica
es diferente. En contraste con los hongos verdaderos, los Oomicetes estn
ms relacionados con las plantas que con los animales. Mientras las paredes
celulares de los hongos estn principalmente compuestas de quitina, las
paredes celulares de los Oomicetes lo estn de celulosa.

Ciclo biolgico de Phytophthora

II.

OBJETIVOS
Aislamiento de hongos Phytophtora

III.

MATERIALES
Tierra de cultivo

infestans

IV.

Manzana en buen estado

Saca bocados
Agua destilada estril
Cinta adhesiva
Algodn y alcohol
PROCEDIMIENTO

Practicar 1 agujero en el mesocarpo de la manzana y en forma

perpendicular de 1.5cm de dimetro, el agujero no debe atravesar la
manzana.
Depositar la muestra en el cilindro dejando un vacio de 2cm,
completar con agua destilada estril, sellar con papel celofn estril.
Incubar durante 5 a 6 das a temperatura ambiente.

V.

RESULTADOS

VI.

CONCLUSIN
Se aprendi el aislamiento e identificacin de hongos patgenos
como Phytophtora infenstans,a pesar que no se logro aislar el
mencionado patgeno
Es probable que la tierra utilizada en el laboratorio no presente el
hongo mencionado.

PRACTICA N 11
ESTRUCTURAS DE REPRODUCCION

I.

INTRODUCCION

Las estructuras de reproduccin son aquellas que van a continuar la especie,

son los gametos que vienen contenidos en los gametangios. Estos gametos
pueden ser en organismos ms evolucionados los gametangios son muchos
ms evolucionados y complejos. Ejemplo: el oogonio, que es el gametangio y
la oosfera.

A veces existen simples esporas mtiles (mviles) y entonces toman el nombre

de planogametos.

II.

OBJETIVOS

Reconocer las principales estructuras de reproduccin de los hongos.

III.

MATERIALES

Muestras fijadas.

IV.

Microscopio.

FUNDAMENTO

Reproduccin asexual:
A)
B)
-

Esporangiosporas: Encerradas
Zoosporas (con mov.) : zoosporangio
Aplanosporas (sin mov): Rhizopus Circinella.
Conidias: Se encuentran libres
Tlicas: Se forman a partir del propio talo.
Por hinchamiento del talo: Clamidosporas (grandes, redondas,
doble pared). Fusarium.
Por fragmentacin del talo: Artrospora, Oidium.

Blsticas: Estn sobre algo. Aspergillus, Penicillium, Curvularia.

Reproduccin sexual:

Ascosporas en:

A) Ascas en peritecio.
V.
PROCEDIMIENTO

B) Basidiosporas.

- Observar a menor y mayor aumento.

VI.

RESULTADOS

Rhizopus

400X

Circinella

400X

Aspergillus

400X

Septoria alternaria
400
X

400
X

Artrospora
Basidiospora
400X
400

Zooesporang
io
400
X

Penicillium

400X

Fusarium

400X

Zinema

400X

Basidiospor
a
400
X

Coremia

100X

Peritecio

100X

Peritecio

100X

VII.

CONCLUSIONES

Logramos reconocer las principales estructuras de reproduccin de los hongos.

PRACTICA N 12
AISLAMIENTO DE FITOPATOGENOS

I.

INTRODUCCIN

En Fusarium solani (Podredumbre del pie del tomate), los sntomas se

manifiestan principalmente en plantas que han alcanzado la fructificacin.
Se observa una lesin necrtica de color pardo en el tejido cortical de la

base que asciende en forma unilateral a lo largo del tallo, con la

consecuente defoliacin. En estados avanzados de la enfermedad se
produce la destruccin de la corteza en la zona basal y una constriccin del
tallo a lo largo de la mancha. Ocurre una podredumbre en las races
secundarias. En corte longitudinal de los tallos se evidencia en la macula
una podredumbre seca de aspecto corchoso que supera en longitud a
la mancha externa.Adems de Fusarium oxysporum f. sp. Lycopersici y F.
oxysporum f. sp. radicis-lycopersici, detectados a nivel mundial causando
enfermedades en tomate, tambin se ha descrito a Fusarium solani como
un importante patgeno de este cultivo en distintos lugares del mundo
La chupadera fungosa es una enfermedad producida por Fusarium solani,
en la cual la infeccin puede ser preemergente (no permite que germine la
semilla) y postemergente( emerge la planta contaminada)

Fusarium
solani

II.

OBJETIVO

Aprendizaje de la tcnica de aislamiento de hongos Fitopatgenos.

III.

MATERIALES

 Muestra: plntulas

Placas con agar papa dextrosa

Papel estril ( papel graff)

Pinzas esteriles

Alcohol

Leja al 1 y 10 %

Agitadores estriles

Agitadores estriles

Tijeras

Mechero.

IV.

PROCEDIMIENTO

Limpiar la zona de trabajo con leja al 10%

Lavar las plntulas, cortar en trozos cuadrados de 1cm incluyendo

tallo y raz
Lavar trozos al 1% con movimiento rotatorio usando agitador
Secar los trozos en las servilletas, extrayndolos con pinzas estriles
Al azar coger cinco trozos y colocarlos en el agar papa dextrosa
Incubar de 5- 6 das a temperatura ambiente

V.

RESULTADOS

VI.

CONCLUSIN:
Se logr aprender la tcnica de aislamiento de hongos
Fitopatgenos.