Anlisis fsico - qumico y bacteriolgico de aguas

Agua Potable:
Significa que debe estar libre de microorganismos patgenos, de minerales y sustancias
orgnicas que puedan producir efectos fisiolgicos adversos. Debe ser estticamente aceptable
y, por lo tanto, debe estar exenta de turbidez, color, olor y sabor desagradable. Puede ser
ingerida o utilizada en el procesamiento de alimentos en cualquier cantidad, sin temor por
efectos adversos sobre la salud (Borchardt and Walton, 1971).
Segn el Art. 982 CAA (modificado por Resoluc. 494/94). Con las denominaciones de Agua
potable de suministro pblico y agua potable de uso domiciliario, se entiende la que es apta
para la alimentacin y uso domstico: no deber contener sustancias o cuerpos extraos de
origen biolgico, orgnico, inorgnico o radiactivo en tenores tales que la hagan peligrosa para
la salud.
Deber presentar sabor agradable y ser prcticamente incolora, inodora, lmpida y
transparente.
El agua potable de uso domiciliario es el agua proveniente de un suministro pblico, de un
pozo o de otra fuente, ubicada en los reservorios o depsitos domiciliarios. Ambas debern
cumplir con las caractersticas fsicas, qumicas y microbiolgicas que cita el Art. 982 CAA.
Anlisis fsico - qumico

Volumen de agua a extraer:

No es posible fijar de una manera general el volumen de agua a extraer para el anlisis
qumico, pues variara segn las determinaciones a efectuar entre 1 a 5 litros.
Examen fsico

Color:

El color de las aguas naturales se debe a la presencia de sustancias orgnicas disueltas o

coloidales, de origen vegetal y, a veces, sustancias minerales (sales de hierro, manganeso,
etc.). Como el color se aprecia sobre agua filtrada, el dato analtico no corresponde a la
coloracin comunicada por cierta materia en suspensin.

El color de las aguas se determina por comparacin con una escala de patrones preparada con
una solucin de cloruro de platino y cloruro de cobalto. El nmero que expresa el color de un
agua es igual al nmero de miligramos de platino que contiene un litro patrn cuyo color es
igual al del agua examinada.
Se acepta como mnimo 0,2 y como mximo 12 mg de platino por litro de agua.

Olor:

Est dado por diversas causas. Sin embargo los casos ms frecuentes son:

debido al desarrollo de microorganismos,

a la descomposicin de restos vegetales,

olor debido a contaminacin con lquidos cloacales industriales,

olor debido a la formacin de compuestos resultantes del tratamiento qumico del agua.

Las aguas destinadas a la bebida no deben tener olor perceptible.

Se entiende por valor umbral de olor a la dilucin mxima que es necesario efectuar con agua
libre de olor para que el olor del agua original sea apenas perceptible.
Se aceptan como valores mximos para un agua optima 2 a 10 unidades.

Sabor:

Est dado por sales disueltas en ella. Los sulfatos de hierro y manganeso dan sabor amargo.
En las calificaciones de un agua desempea un papel importante, pudiendo ser agradable u
objetable.

Determinacin de pH:

El pH ptimo de las aguas debe estar entre 6,5 y 8,5, es decir, entre neutra y ligeramente
alcalina, el mximo aceptado es 9. Las aguas de pH menor de 6,5, son corrosivas, por el
anhdrido carbnico, cidos o sales cidas que tienen en disolucin. Para determinarlo usamos

mtodos colorimtricos o potenciomtricos.

Para poder decidir sobre la potabilidad del agua se requiere el control de un nmero elevado
de parmetros qumicos y determinados parmetros bacteriolgicos. Dentro de los primeros
cobra especial importancia el amonio, los nitratos y nitritos, indicadores de contaminacin por
excelencia.

Amonio :

Este ion tiene escasa accin txica por s mismo, pero su existencia an en bajas
concentraciones, puede significar contenido aumentado de bacterias fecales, patgenos etc.,
en el agua. La formacin del amonio se debe a la descomposicin bacteriana de urea y
protenas, siendo la primera etapa inorgnica del proceso.

Nitritos:

Estos representan la forma intermedia, metaestable y txica del nitrgeno inorgnico en el

agua. Dada la secuencia de oxidacin bacteriana: protenas - amonio - nitritos-- nitratos, los
nitritos se convierten en importante indicador de contaminacin, advirtiendo sobre
una nitrificacin incompleta.

Nitratos:

La existencia de stos en aguas superficiales no contaminadas y sin aporte de aguas

industriales y comunales , se debe a la descomposicin de materia orgnica (tanto vegetal
como animal) y al aporte de agua de lluvia ( 0,4 y 8 ppm ).

Cloruros:

Todas las aguas contienen cloruros. Una gran cantidad puede ser ndice de contaminacin ya
que las materias residuales de origen animal siempre tienen considerables cantidades de estas
sales. Un agua con alto tenor de oxidabilidad, amonaco, nitrato, nitrito, caracteriza una
contaminacin y por lo tanto los cloruros tienen ese origen. Pero si estas sustancias faltan ese
alto tenor se debe a que el agua atraviesa terrenos ricos en cloruros. Los cloruros son inocuos
de por s, pero en cantidades altas dan sabor desagradable.

Valor mximo aceptable: 350 mg/l.

Mtodo de Mohr

Generalidades:

Si se agregan iones de plata a una solucin de pH entre 7 y 9 que contenga cloruros y

cromato, la precipitacin del cloruro de plata est prcticamente terminada cuando se
comienza a precipitar el cromato de plata. Este hecho permite considerar la aparicin de un
precipitado rojo de cromato de plata, como indicador del punto final.

Reactivos:

Solucin 0,00282 N de nitrato de plata

Cromato de potasio 5 %

Tcnica:

Se filtra el agua si contiene materias en suspensin. Se toman 100 ml de la muestra (si el pH

es inferior a 7 se aade 1 gramo de bicarbonato), se agrega 1 ml de cromato de potasio y se
valora aadiendo gota a gota la solucin de nitrato de plata hasta coloracin apenas rojiza. Se
resta 0,2 al nmero de ml empleados ( gasto correspondiente al ensayo en blanco).

Clculo:

n= es el nmero de ml de la solucin de nitrato de plata usada en la valoracin

V= volumen de muestra original

Determinacin de Cloro Libre en aguas:

La ortotoluidina en medio clorhdrico y en presencia de cloro libre se oxida, dando un

compuesto de coloracin amarilla. Como la intensidad de la coloracin aumenta por
concentraciones crecientes de cloro libre se puede determinar por colorimetra, utilizando una
serie de patrones de concentracin conocida.

Reactivo:

Solucin de ortotoluidina.

Tcnica:

Se utilizan tubos de ensayo donde se enfrentan 10 ml de agua y 0,2 ml de reactivo se deja en

reposo 5 o 10 minutos, en oscuridad. Se compara la coloracin obtenida con los patrones

permanentes.
Valor mnimo aceptable de cloro activo residual: 0,2 mg/l.

Residuos por evaporacin (Slidos Disueltos)

Se denomina as al peso de las sustancias disueltas en 1 litro de agua, no voltiles a 105 C.

Se consideran disueltas aquellas que no son retenidas por filtracin.

Tcnica:

Se tara una cpsula de porcelana que se coloca sobre Bao Mara, se miden 100 ml de agua y
se vierte sobre la cpsula hasta evaporacin. Se coloca luego en estufa a 105 C y se deja
durante 2 horas. Se retira, se deja enfriar en desecador sulfrico y se pesa. El aumento de
peso es el residuo por evaporacin correspondiente al volumen de agua tomado. Los
resultados se expresan en mg/l.
Valor mximo aceptable: 1.500 mg/l.

Dureza:

Se habla de aguas duras o blandas para determinar calidad de las mismas. Las primeras tienen
alto tenor de sales de calcio y magnesio disueltas. Las blandas son pobres en estas sales.

Bicarbonato de calcio y magnesio: Dureza Temporal

Sulfato y cloruro de calcio y magnesio: Dureza Permanente

Puede haber tambin nitratos, fosfatos, silicatos, etc. (dureza permanente). El agua debe
tener una dureza comprendida entre 60 y 100 mg/l. no siendo conveniente aguas de dureza
inferiores a 40 mg/l, por su accin corrosiva.
valor mximo aceptable de Dureza Total (CaCO3) 400 mg/l.
Alcalinidad:
Esta representada por sus contenidos en carbonatos y bicarbonatos. Eventualmente se puede
deber a hidrxidos, boratos, silicatos, fosfatos. Las soluciones acuosas de boratos tienen un pH
8,3 y las de cido carbnico 4,3. Por estas razones se toman estos pH como puntos finales.
Como indicadores de estos puntos se utilizan fenolftaleina (pH 8,3) y heliantina (pH 4,2).

Reactivos:

cido sulfrico 0,02 N

Fenolftaleina 0,5 %
Heliantina 0,05 %

Tcnica:

Se aade 0,2 ml de fenolftaleina a 100 ml de agua. Coloracin rosada indica presencia de

carbonato, en este caso se agrega gota a gota solucin de cido sulfrico 0,02 N hasta
desaparicin de color. Se designa como F la cantidad de ml gastados. A la misma muestra se le
agregan 2 gotas de heliantina y se aade gota a gota cido sulfrico 0,02 N hasta color
salmn. Se designa por H la cantidad de ml usados en esta ultima determinacin.

Expresin de resultados:

Alcalinidad de carbonatos en mg/l= 2 x F x 10

Alcalinidad de bicarbonatos en mg/l= (H - F) x 10

Anlisis Bacteriolgico de aguas

Generalidades:
Existe un grupo de enfermedades conocidas como enfermedades hdricas, pues su va de
transmisin se debe a la ingestin de agua contaminada. Es entonces conveniente determinar
la potabilidad desde el punto de vista bacteriolgico.
Buscar grmenes como Salmonella, Shigella, trae inconvenientes, pues normalmente aparecen
en escasa cantidad. Por otra parte su supervivencia en este medio desfavorable y la carencia
de mtodos sencillos y rpidos, llevan a que su investigacin no sea satisfactoria, mxime
cuando se hallen en nmero reducido.
En vista de estos inconvenientes se ha buscado un mtodo mas seguro para establecer la
calidad higinica de las aguas, mtodo que se basa en la investigacin de bacterias coliformes
como indicadores de contaminacin fecal.
El agua que contenga bacterias de ese grupo se considera potencialmente peligrosa, pues en
cualquier momento puede llegar a vehiculizar bacterias patgenas, provenientes de portadores
sanos, individuos enfermos o animales.
Principales enfermedades de origen hdrico y sus agentes responsables

Enfermedad

Agente

Origen bacteriano

Fiebres tifoideas y paratifoideas Salmonella typhi

Salmonella
Paratyphi A y B

Disentera bacilar Shigella

Clera Vibrio cholerae

Gastroenteritis agudas y diarreas Escherichia coli ET

Campylobacter jejuni
Campylobacter coli
Yersinia enterocolitica
Salmonella sp
Shigella sp

Origen viral

Hepatitis A y E Virus de la hepatitis A y E

Poliomielitis Virus de la polio

Gastroenteritis agudas y diarreas Virus Nortwalk

Rotavirus
Astrovirus
Calicivirus
Enterovirus
Adenovirus
Reovirus

Origen parasitario

Disentera amebiana Entamoeba histolytica

Giardia lambia
Cristosporidium

Toma de muestra:

La muestra para anlisis bacteriolgico debe efectuarse con el mayor cuidado

Envase:

Se deben utilizar frascos esterilizados y con envoltura externa. La capacidad debe ser de 200 a
250 cc.

Envo de muestras:

Debe transcurrir el menor tiempo entre la extraccin y la llegada al laboratorio, y que durante
ese tiempo se mantenga entre 4 y 10 C. De lo contrario se producen modificaciones cuali cuantitativas de la flora bacteriana.

Toma de muestra de un grifo en una caera de agua corriente:

1.

Se elige un grifo que este conectado directamente con una caera de distribucin, es
decir, que el ramal del grifo no este comunicado con tanques domiciliarios, filtros,
ablandadores u otros artefactos similares. Tampoco conviene extraer muestras de grifos
colocados en puntos muertos de la caera.

2.

Estas precauciones no se tienen en cuenta cuando se desea conocer la calidad del agua
que suministra un determinado grifo, en lugar de la que conduce la caera principal.

3.

Se quitan del grifo los dispositivos destinados a evitar salpicado. Luego se limpia la
boca del grifo, cuidando de eliminar la suciedad que a veces se acumula en la parte
interna del orificio. Despus se deja salir agua en forma abundante durante 2 o 3
minutos y se cierra perfectamente el grifo para esterilizarlo.

4.

Se esteriliza el grifo calentndolo durante un par de minutos con un hisopo embebido

en alcohol.

5.

Se abre con cuidado y se deja salir agua durante medio minuto en forma tal que el
chorro no sea intenso y se llene el envase.
Anlisis bacteriolgico

Caractersticas microbiolgicas segn Art. 982 del C.A.A. (modificado por resolucin 494/94)
Limites permisibles para aguas de consumo
1.

Bacterias mesfilas viables: en agar Plate Count 24 hs. a 37C, no mas de 500 UFC/ml

2.

Bacterias coliformes: NMP a 37C 48 hs. (Caldo Mc Conckey o Lauril Sulfato), en 100
ml; igual o menor a 3.

3.

Ausencia de Escherichia coli: en 100 ml

4.

Ausencia de Pseudomona aeruginosa: por 100 ml de muestra

Determinacin del nmero de bacterias aerobias mesfilas por el Mtodo de recuento en

placa

Generalidades:

El agua contiene bacterias cuyas necesidades nutritivas y de temperatura ptima de desarrollo

son variables.
Ordinariamente esta determinacin se efecta sembrando en medio slido un volumen
conocido de la muestra de agua. Se incuba durante un tiempo y a determinadas temperaturas
y se cuenta el nmero de colonias que se obtienen.
El medio utilizado es agar nutritivo o agar Plate Count (aproximadamente 15 ml por placa).

Diluyentes:

Es importante usar un lquido de dilucin desprovisto de accin bactericida. En la mayora de

los casos puede utilizarse agua corriente, agua destilada o solucin fisiolgica o agua
peptonada 0,1 % con pH ajustado a 7.

Preparacin de las diluciones:

Se preparan tubos estriles con 9 ml de diluyente. Para hacer las diluciones se agita, repetidas
veces, la muestra. Luego se flamea la boca del frasco, se destapa, se vuelca un poco de
contenido y, tapado nuevamente, se agita 10 - 15 veces para asegurar la distribucin uniforme
de las bacterias del lquido.
Luego mediante una pipeta esterilizada, se toma 1 ml de muestra que se pasa a un tubo con 9
ml de diluyente. Se tiene as la muestra diluida 10 veces. Se agita esta aspirando y expeliendo
el liquido de la pipeta repetidas veces, y luego, mediante otra pipeta esterilizada, se toma 1 ml
del liquido diluido, el cual se pasa a un nuevo tubo con solucin diluyente, esta operacin se
repite hasta que se estime conveniente. Segn la naturaleza del agua se sembrar

directamente o diluida. Las muestras de aguas superficiales purificadas o profundas se

sembraran directamente y diluidas 1/10, para las aguas superficiales no purificadas se
emplearan diluciones 1/10, 1/100, 1/1000.

Incubacin:

Luego se incuban las muestras a 32 - 35 C durante 24 horas. Se realiza la siembra en

profundidad.
Recuento de colonias en placas:

Seleccionar dos placas correspondientes a una dilucin que contenga entre 30 y 300
colonias.

Tomar la media aritmtica de los 2 recuentos y multiplicar por el factor de dilucin

(recproco de la dilucin utilizada). Informar segn el caso, el resultado como nmero
de microorganismos aerobios mesfilos por ml gramo .

Ejemplo: dilucin 1/100.

Placa 1: 72 colonias x 100 = 7200
Placa 2: 77 colonias x 100 = 7700
Se promedia = (7200 + 7700) = 7450
2
Se informa: 7.450 UFC/ ml
En la evaluacin de la potabilidad del agua ubicada en reservorios de almacenamiento
domiciliario deber incluirse entre los parmetros microbiolgicos a controlar el recuento de
bacterias mesfilas en agar (APC 24 hs. a 37 C); en el caso de que el recuento supere las
500 UFC/ml y se cumplan el resto de los parmetros indicados, slo se deber exigir la
higienizacin del reservorio y un nuevo recuento.
2.

Determinacin del Nmero Ms Probable(NMP) / 100 ml de bacterias de coliformes

totales (Mtodo de Wilson)

Bacterias coliformes:
Son bacterias aerobias o anaerobias facultativas, Gram negativas, no esporuladas, que
fermentan la lactosa con produccin de cido y gas.
A) Ensayo presuntivo:

Siembra:

Se puede hacer por triplicado en tubos que tengan caldo Mc Conckey o Lactosa bilis verde
brillante (LBVB), con la Campana de Durham.
De la muestra de agua se sembrarn:

3 tubos de caldo Mc Conckey o LBVB 2% doble concentracin: 10 ml

3 tubos de caldo Mc Conckey o LBVB simple concentracin: 1 ml

3 tubos de caldo Mc Conckey o LBVB simple concentracin: 0,1 ml

Incubar los tubos a 32 - 35 C durante 48 horas.

Determinar con los tubos positivos (cido y gas) el NMP utilizando la tabla de Hoskins. La
formacin de gas a las 48 horas se considera evidencia suficiente de la presencia de
coliformes.

B) Ensayo confirmativo: Diferenciacin de bacterias coliformes.

1.

Pasadas las 48 horas, de los tubos positivos de la prueba presuntiva se siembran con
ansa, en tubos con caldo Mc Conckey o LBVB de simple concentracin, y en tubos con
caldo Triptonado (para realizar la prueba del Indol), que se incuban durante 48 horas en
un bao de agua regulado a 44,5 C 0,5 C Test de Eikman). Sembrar a su vez en
tubos con medio Citrato de Koser o Simmons que se incuban a 32 C durante 48 horas.
Esta ltima siembra se realiza mediante el alambre recto, con el objeto de no llevar a

los tubos con citrato el material nutritivo del cultivo original. Se consideran positivos los
tubos que dieron turbiedad en Citrato Koser o cambio de color en Citrato de Simmons,
lo que es originado por el desarrollo de bacterias I.A.C.. En casos dudosos se puede
dilucidar agregando gotas del indicador Azul de Bromotimol al medio Citrato de Koser,
que carece del mismo. El lquido permanece verde claro si no ha habido desarrollo,
virando al azulado si el citrato ha sido utilizando por las bacterias. Simultneamente
con el desarrollo se produce cambio de pH.
2.

Confirmar con los tubos de caldo Mc Conckey o LBVB seleccionados que son positivos
de organismos coliformes, sembrando por estras una ansada de ellos en agar Endo o
Eosina azul de metileno (EMB). Incubar las placas invertidas a 32 - 35 C examinarlas a
las 24 - 48 horas. Observar en estos medios slidos de confirmacin si existen colonias
tpicas de coliformes. La formacin en el agar EMB de colonias negras o con el centro
negro, con la periferia transparente incolora o la formacin en el agar Endo de colonias
rojas rodeadas de un halo rojo, confirma la presencia de coliformes.
Tabla de Hoskins

Nmero de tubos positivos del total de:

3 tubos de 10 ml

3 tubos de 1 ml

3 tubos 0,1 ml

ndice del NMP/100 ml

11

11

14

15

20

21

28

23

39

64

43

75

120

93

150

210

240

460

1100

C) Prueba de identificacin de organismos coliformes mediante los ensayos del IMVIC (indol,
rojo de metilo, Voges Proscauer, citrato).
3.

Investigacin de Escherichia coli

1.

Escoger tubos gas positivos del caldo Mc Conkey o Lactosa bilis verde brillante (Brila)
procedentes del recuento de bacterias coliformes (NMP/100ml).

2.

Inocular una ansada de caldo de los cultivos seleccionados positivos en tubos de:

1.

Caldo Mc Conkey o Brila.

2.

Una ansada a caldo de peptona.

3.

Incubar los tubos de caldo Mc Conckey o Brila a 44,5 C 0,5 C y ver si son positivos
de formacin de gas a las 24 hs. y a las 48 hs.

4.

Los tubos de caldo Mc Conckey o Brila que presenten gas son positivos tambin de
organismos coliformes fecales ya que a esta temperatura solo el bacilo coli fecal
produce cido y gas.

5.

Despus de 24 hs. de incubacin de los tubos de agua de peptona aadir 0,2 0,3 ml
del reactivo del Indol. Agitar los tubos y dejarlos en reposo 10 minutos. La prueba
positiva de produccin de Indol se manifiesta por una coloracin rojo oscura, en la
prueba negativa se conserva el color original del reactivo.

Los cultivos gas positivos en Mc Conckey o Brila a 44,5 C 0,5 C, y que produzcan indol en
agua de peptona, pueden considerarse como positivos de coliformes fecales.

3.

Aislamiento e Identificacin de Pseudomona aeruginosa

La muestra de agua se siembra en caldo triptena soya - tripticasa soya o caldo nutritivo. Se
incuba a 37 C por 24 horas.
Transcurridas las mismas se repica con ansa al medio de Levine. Las colonias asiladas se
repican al medio agar Cetridime, en pico de flauta o en placa, incubndose 24 a 48 horas a
37C.
Si el aislamiento se realiza a partir de tubos de Mc Conckey (utilizados en el aislamiento de
coliformes) con desarrollo de velo en superficie, se repica tambin a agar Cetrimide. ya sea si
se observa desarrollo y/o pigmentacin se procede a efectuar las siguientes pruebas:
1.

Prueba de oxidasa

2.

Prueba de reduccin de nitrato

3.

Prueba de licuefaccin de la gelatina

4.

Prueba de gluconato

5.

Prueba de Citrato

Pseudomona aeruginosa es un bacilo Gram negativo, oxidasa positivo, mvil, produce dos tipos
de pigmentos (piocianina y fluorescena), aunque existen clases no pigmentadas, reduce
nitratos a nitrito y produce gas (esto ltimo no siempre es positivo), lica la gelatina en forma
rpida, reduce el gluconato.

Pseudomona
aeruginosa

Gram

Oxidasa

Nitrato

Gluconato

Gelatina

Exmenes para determinar organismos patgenos

Si bien la bsqueda directa de bacterias patgenas especficas no forma parte de los exmenes
bacteriolgicos habituales a los que se someten las muestras de agua, habr casos en que ser
necesario efectuar exmenes para la determinacin de grmenes patgenos intestinales; por
ejemplo, durante una epidemia o cuando se est evaluando una nueva fuente. Las
posibilidades de obtener buenos resultados sern entonces mayores si se analizan volmenes
grandes de agua y si se usan medios selectivos para determinados grmenes patgenos
intestinales. Los anlisis incluirn algunas, sino todas, de las etapas siguientes: concentracin
de los microorganismos en la muestra, inoculacin en un caldo de abono; subcultivos en
medios de agar selectivos, y anlisis bioqumicos y serolgicos de las colonias sospechosas. En
vez de basarse en un mtodo nico, conviene utilizar el mayor nmero posible de mtodos a
fin de que no se pierda ninguna oportunidad de detectar a un germen patgeno. Esto es
especialmente vlido para la deteccin de Salmonella, puesto que no existe un solo mtodo
que se adapte a todos los serotipos.

Concentracin de las muestras

La tcnica que se emplee depender en gran parte de la cantidad de partculas presentes en el
agua. En las aguas de baja turbiedad, la muestra puede pasarse a travs de filtros de
membrana. Debido a que la turbiedad aumenta en las aguas naturales, se puede recurrir a la
filtracin a travs de tierras diatomceas o con filtros de cartucho o vela, con lo cual se
incrementar la filtracin y podrn tratarse volmenes de muestras ms grandes. Como
alternativa, se puede utilizar la tcnica de la almohadilla de gasa, especialmente cuando el
nmero de grmenes patgenos son pocos o su presencia no es permanente.
Salmonella
Es probable que los concentrados de muestras necesiten ser enriquecidos previamente en agua
de peptona amortiguada, para luego ser enriquecidos en caldo que contenga ya sea
tetrationato, selenito, cloruro de magnesio o verde de malaquita. Estos, a su vez, pueden ser
sometidos a subcultivo en medios como el verde brillante, sulfito de bismuto, agar de
desoxicolata xilosa-lisina (DXL), citrato de desoxicolata o agar de MacConkey, examinndose
luego las colonias sospechosas tanto bioqumica como serolgicamente. Entre las pruebas de
depuracin bioqumica se deber incluir: agar triple de azcar y hierro, produccin de indol,
decarbosilasa y actividad de -galactosidasa. En las pruebas serolgicas se incluir la
aglutinacin con sueros polivalentes anti-o, anti-H y anti-Vi. Es imprescindible la eliminacin
previa de cepas autoaglutinables. Cuando el anlisis se realiza para detectar las S. typhi , el
medio de cultivo aconsejado es la selenita F. El procedimiento de los tubos mltiples se
utilizar para calcular el nmero de Salmonella presentes en el agua.
Shigella
Debido a que las bacterias coliformes y la mayora de cepas de Proteus vulgaris son
antagnicas a la Shigella, es aconsejable elegir medios enriquecidos selectivos que reduzcan al
mnimo las acumulaciones de compuestos voltiles y de los subproductos obtenidos a partir de
estos microorganismos antagnicos. Se puede usar caldo nutriente con un pH ajustado de 8,0
(es el nivel de pH que menos favorece el crecimiento de bacterias coliformes). Tambin es
posible obtener un buen enriquecimiento de Shigella con un medio de cultivo autocitotxico
con base en caldo de tripticasa de soja conteniendo 1 mmol/litro de 4-cloro- 2-ciclopentilfenil
-D-galactopiranosida, 2,5 g/litro de lactosa y sustancia amortiguadora de citrato a un pH de
6,2. La incubacin debe hacerse durante 6-18 horas, a una temperatura de 35C. Estrense las
culturas en agar DXL cuando hayan transcurrido 6 y 18 horas. Somtanse las colonias

sospechosas a pruebas de seleccin bioqumica y confrmese las colonias sospechosas con

antisueros de Shigella (sueros polivalentes y de tipo especfico).
Vibriones del clera y de otro tipo
Como forma de enriquecimiento primario se utiliza principalmente el agua alcalina de peptona
y el agua de taurocolato telurita de peptona, los subcultivos se harn utilizando como medios
selectivos un agar de tiosulfato, citrato, bilis, sal y sucrosa o un agar de gelatina de taurocolato
y telurito. Los cultivos que sean sospechosos se inocularn en agar de hierro Kligler. Despus
de 18 horas de incubacin, los V. cholerae producen un caracterstico color amarillo, sin
ninguna produccin de gas. Estos cultivos se depurarn despus para determinar la actividad
de ureasa y oxidasa; las cepas que demuestren ser negativas respecto a rea y positivas en
cuanto a oxidasa debern ser remitidas a un laboratorio de referencia para que se realicen
otras pruebas bioqumicas y de agrupamiento serolgico.
Coli enteropatgenos
En este caso se utilizan las tcnicas para la deteccin de bacterias coliformes fecales en el
agua. Las colonias se confirmarn como E. coli y si la evidencia epidemiolgica as lo garantiza,
los subcultivos pueden ser remitidos a un laboratorio de referencia para agrupamiento
serolgico y, en caso necesario, para realizar las pruebas que determinan la
enterotoxigenicidad.
Yersinia enterocolitica
Se ha encontrado que el agar M-Endo es el medio de cultivo ms conveniente y de mltiple
utilidad debido a las distintas caractersticas morfolgicas de las colonias cuando se incuban
tanto a 25 como a 35C. Despus de transcurridas 72 horas de incubacin, las colonias
aparecern bien definidas y con una coloracin roja oscura. Tambin da buenos resultados
para el desarrollo bacteriano utilizar agar de MacConkey, siempre que la incubacin se haga a
25C. Todos los grupos aislados que resulten sospechosos debern ser depurados
bioqumicamente a 25C y 35C utilizando ramnosa, rafinosa y melibiosa. Si existe evidencia
epidemiolgica que lo garantice, debern enviarse los subcultivos a un laboratorio de
referencia para formar los grupos serolgicos y efectuar las pruebas de susceptibilidad a los
antibiticos.
Campylobacter fetus

Existe una tcnica de membrana filtrante que ha dado buenos resultados para aislar este
germen patgeno, y en la cual se emplea un agar sanguneo que contiene vancomicn,
polimixin y trimetoprim. Los cultivos se incuban a 42-43C, bajo tensin reducida de oxgeno,
en una jarra anaerbica durante 3 das e inspeccionadas diariamente para detectar las colonias
mucoideas grises no hemolticas (con dimetro de 1-2 mm). Las colonias sospechosas son
teidas con Gram para detectar las formas tpicamente curvas y en S, y sometidas a prueba
para determinar la reaccin positiva a la oxidasa y la catalasa, la motilidad y la incapacidad
para desarrollarse aerbicamente a una temperatura de 36C. Los subcultivos deben ser
remitidos a un laboratorio de referencia para mayores pruebas de tipo bioqumico. No sera
prctico que los elementos aislados de brotes espordicos fueran serotipificados, debido a la
heterogeneidad de este organismo; por ahora, tampoco resulta prctico el uso de un antgeno
comn o de un conjunto de serotipos diferenciales.

Bibliografa

http://www.vet.unicen.edu.ar/prodyserv/labaacui.htm
http://edicion-micro.usal.es/web/educativo/m_especial/29ctexto3.htm

Leccin 17. Parmetros fisicoqumicos del agua potable

Las sustancias disueltas en el agua le confieren una serie de propiedades de tipo
fsico, qumico y biolgico, que califican y caracterizan el agua (Herrero Carlos.
Gestin de recursos hidrulicos)
Los parmetros fsicos son:

Propiedades organolpticas, como color aparente (con materia disuelta o en

suspensin), color real (una vez filtrada el agua), olor (indica materia orgnica en
descomposicin) y sabor (slo si no est contaminada).
Turbidez, capacidad de absorber o dispersar la luz.
Temperatura, influye en la solubilidad de sales y gases y en los procesos de
depuracin natural (degradacin de materia orgnica)
Conductividad elctrica, determina el contenido en
proporcional) y la capacidad para conducir energa elctrica.

sales

totales

(es

Slidos Totales (ST), residuo seco en mg/l despus de evaporacin y de someter

a 105C. Segn atraviesen o no un tamiz de 1m (10 -3mm) se tienen los slidos
disueltos (SD). Los slidos en suspensin (coloides) (SS) se dividen en slidos
sedimentables (sedimentan tras una hora) y no sedimentables.
Los parmetros qumicos son:
pH, indica si el agua procede de material calizo (pH bsico) o silceo (pH cido), si
contiene residuos industriales (generalmente a pH cidos) y la posible disociacin
de compuestos con metales pesados.
Compuestos no contaminantes, iones del agua natural, como: Mg 2+, Na+, Ca2+,
K+, Cl- SO2-4, CO2=3, HCO=3, dureza, carbonato slido residual, relacin de
absorcin de sodio.
Compuestos contaminantes, inorgnicos (como: zinc, cobre, mercurio, nquel,
entre otros) y orgnicos (como: DBO 5, DQO, fenoles, plaguicidas, detergentes,
hidrocarburos, entre otros)
Los parmetros microbiolgicos son:
Coliformes, morfologa bacilar (bacilos), tienen forma de bastoncillo. Ej.
Escherichia coli, con las siguientes caractersticas:
1. Gran negativas (se tien de rojo)
2. Aerobias y anaerobias facultativas
3. Fermentan la lactosa produciendo cido a 37C en 48 horas

Figura 7. Escherichia coli

Fuente: Dennis Kunkel Microscopy, Inc 2007

Estreptococos fecales, morfologa esfrica (cocos), tienen forma de esfera con

las siguientes caractersticas:
1. Gran positivas (se tien de violeta)
2. Pueden ser aerobias o anaerobias facultativas
3. Fermentan la glucosa a 37C produciendo cido en 48 horas

Figura 8. Cultivo de estreptococos fecales

Fuente: IPROMA laboratorio y asesora 2010

Salmonella, morfologa bacilar (bacilos), tienen forma de bastoncillo con las

siguientes caractersticas:
1. Gran negativas (se tien de rojo)
2. Aerobias y anaerobias facultativas
3. Fermentan la glucosa y no la lactosa

Clostridios sulfito reductores, morfologa bacilar (bacilos), tienen forma de

bastoncillo con las siguientes caractersticas:
1. Gran positivas (se tien de color violeta)
2. Aerobias estrictas
3. En un medio que contiene sulfito sdico, sal de hierro y glucosa, se forma
sulfuro ferroso por redaccin de sulfito

Principal

[ Principal ] [ Coagulacion-Floculacion ] [ Decantacion-Flotacin ] [ Filtracion ] [ Tratamiento de ol

ores y sabores ] [ Preoxidacion-Desinfeccion ] [ Acondicionamiento ]

TRATA

FRQ

MIENTO DEL AGUA

Search

ANTECEDENTES
HISTORICOS .

Una de las mayores preocupaciones en la historia de la humanidad ha sido el procurarse

agua lo ms pura y limpia posible. El tratamiento del agua originalmente se centraba en
mejorar las cualidades estticas de esta. La historia del agua potable es muy remota. En
Siria y Babilonia se construyeron conducciones de albailera y acueductos para acercar el

agua desde sus fuentes a lugares prximos a las viviendas. Los antiguos pueblos orientales
usaban arena y barro poroso para filtrar el agua, tambin en Europa los romanos
construyeron una red de acueductos y estanques, podan traer agua desde distancias
prximas a los 90 km., instalaron filtros para obtener agua de mayor calidad, llegaban a
separar el agua de buena calidad que usaban para beber y cocinar del agua de peor calidad,
obtenida de otras fuentes, que utilizaban para riegos y limpiezas, hecho que hoy da en la
mayor parte de las ciudades an no se separa y la misma agua que se emplea para beber se
emplea para usos tales como la limpieza de inodoros. Hay registrados mtodos para mejorar
el sabor y el olor del agua 4.000 aos antes de Cristo. Escritos griegos recomendaban
mtodos de tratamiento tales como filtracin a travs de carbn, exposicin a los rayos
solares y ebullicin. En el antiguo Egipto dejaban reposar el agua en vasijas de barro
durante varios meses para dejar precipitar las partculas e impurezas, y mediante un sifn
extraan el agua de la parte superior (decantacin), en otras ocasiones incorporaban ciertas
sustancias minerales y vegetales para facilitar la precipitacin de partculas y clarificar el
agua (coagulacin). En los comienzos del 1500 antes de Cristo, se tiene referencias de que
los egipcios usaban ya un producto, que hoy se emplea para el mismo fin, el alumbre para
lograr precipitaras partculas suspendidas en el agua.

( Sedimentacin

Fuente: H

y decantacin- 1450 Antes de Cristo

O'C Biblioteca de Ingeniera de John T. O`Connor y Tom

El primer sistema de suministro de agua potable a toda una ciudad, fu

llevado a cabo por John Gibb, en 1804, quien logr abastecer de agua filtrada a la ciudad de
Glasgow, Escocia
En 1806 se pone en funcionamiento en Paris una gran planta de tratamiento de agua, en esta
planta se dejaba sedimentar el agua durante 12 horas y a continuacin se proceda a su
filtracin mediante filtros de arena y carbn y en 1827 James Simpln construye en
Inglaterra un filtro de arena para tratar y el agua potable.
Ya en el siglo XX de nuestra poca se estableci la filtracin como un efectivo medio para
eliminar partculas del agua aunque el grado de claridad conseguido no era medible en esta
poca. Al comienzo del siglo XX en Europa se estableci de forma ms regular la filtracin
lenta sobre arena. Durante la segunda mitad de este siglo XX los cientficos alcanzaron
grandes conocimientos sobre las fuentes y efectos de los contaminantes del agua potable
( en 1855 se prob que el clera era una enfermedad de transmisin hdrica al relacionarse
con un brote surgido en Londres a consecuencia de la contaminacin de un pozo pblico
por aguas residuales). En 1880 Pasteur explic cmo organismos microscpicos podian
transmitir enfermedades a travs del agua. En el siglo XX se descubri que la turbiedad del
agua no era solo un problema esttico; las partculas en las fuentes del agua tales como la

materia fecal, podra servir de refugio a los patgenos.

As como la filtracin se mostr como un mtodo de tratamiento efectivo
para reducir la turbiedad, desinfectantes como el cloro jugaron un gran papel en la
reduccin del nmero de brotes epidmicos en los comienzos del siglo XX. En 1908 se
emple el cloro por primera vez como un desinfectante primario del agua potable de New
Jersey. Otro desinfectante como el ozono, tambin empez a emplearse por estas fechas en
Europa. A continuacin aparecieron otras sustancias qumicas procedentes de vertidos,
generalmente industriales, contaminando las aguas objeto de abastecimiento publico
(mayoritariamente aguas superficiales) y causando un gran impacto negativo y obligando a
la implantacin de tcnicas de tratamiento del agua cada vez mas efectivas y complejas
(coagulacin, floculacin , adsorcin con carbn activo, etc.) y a veces no han sido lo
efectivas que se esperaban para eliminar algunos de los nuevos y emergentes
contaminantes.
En 1972 un estudio encontr 36 sustancias qumicas en el agua tratada en Louisiana (U.S)
que fue tomada del ro Missisipi. Como consecuencia de estas nuevas y mayores
contaminaciones, hubo necesidad de aplicar nuevas legislaciones y requerimientos
tcnicos para salvaguardar la salud de los consumidores. Posteriores avances en la
desinfeccin han puesto a punto nuevas tcnicas y sustancias en el proceso de
desinfeccin del agua como son principalmente el empleo de ozono, dixido de cloro,
cloraminas y radiacin ultravioleta.
La filtracin y la desinfeccin con cloro del agua potable han sido responsables de gran
parte del 50% de aumento de la expectativa de vida en los pases desarrollados durante el
siglo XX. Este hecho motiv a la revista Life a citar recientemente a la filtracin y la
cloracin del agua potable como probablemente el ms significativo avance en salud
pblica del milenio. Antes de la llegada de la cloracin para el tratamiento de agua
potable, aproximadamente 25 de cada 100.000 personas moran anualmente los Estados
Unidos a causa de la fiebre tifoidea.
Los sistemas de abastecimiento de agua potable sin tratar, o con un tratamiento
inadecuado, siguen siendo la mayor amenaza para la salud pblica, especialmente en los
pases en desarrollo, donde casi la mitad de la poblacin consume agua contaminada. En
estos pases, enfermedades como el clera, la tifoidea y la disentera crnica son endmicas
y matan a nios y a adultos. En 1990 ms de tres millones de nios menores de cinco aos
murieron por enfermedades diarreicas. Los ms recientes avances en el tratamiento del
agua han sido las mejoras alcanzadas en el desarrollo de membranas para osmosis inversa
y otras tcnicas como la ozonizacin y otras relativas a la eliminacin de los cada vez mayor
nmero y cantidad de contaminantes encontrados en el agua potable.

Se denomina agua prepotable, al agua antes de ser sometida a los

correspondientes tratamientos potabilizadores, agua potable al agua apta para el consumo
humano, una vez que ha pasado por el correspondiente tratamiento potabilizador. El agua
que es un compuesto natural, para ser consumida requiere hoy da una serie de operaciones
que nos aseguren su vuelta a una calidad aceptable desde el punto de vista sanitario. No

llega de forma casual y simple al domicilio de los usuarios.

Hoy en da, en las estaciones de tratamiento de agua potable (ETAP) se realizan los
procesos necesarios para que el agua natural procedente de los embalses y otras
captaciones se transforme en agua apta para el consumo humano.

PROCESO DE TRATAMIENTO DEL AGUA

El desarrollo de la sociedad reclama cada vez ms agua, pero no solo a veces escasea el
agua sino que su calidad en los puntos donde se encuentra y capta, desgraciadamente se
ha ido deteriorando da a da con el propio desarrollo, esto obliga a un tratamiento cada vez
amplio y complejo tcnicamente. La eliminacin de materias en suspensin y en disolucin
que deterioran las caractersticas fsico- qumicas y organolpticas as como la eliminacin
de de bacterias y otros microorganismos que pueden alterar gravemente nuestra salud son
los objetivos perseguidos y conseguidos en la estaciones de tratamiento a lo largo de todo
un proceso que al final logra suministrar un agua transparente y de una calidad sanitaria
garantizada. El tratamiento del agua es el proceso de naturaleza fsico-qumica y biolgica,
mediante el cual se eliminan una serie de sustancias y microorganismos que implican
riesgo para el consumo o le comunican un aspecto o cualidad organolptica indeseable y la
transforma en un agua apta para consumir. Todo sistema de abastecimiento de aguas que
no este provisto de medios de potabilizacin, no merece el calificativo sanitario de
abastecimiento de aguas. En la potabilizacin del agua se debe recurrir a mtodos
adecuados a la calidad del agua origen a tratar. Estacin de Tratamiento de Agua Potable
(ETAP) es la instalacin donde se lleva a cabo el conjunto de procesos de tratamiento de

potabilizacin situados antes de la red de distribucin y/o depsito, que contenga ms

unidades de tratamiento.

TIPOS DE TRATAMIENTO
Los tratamientos para potabilizar el agua, se pueden clasificar de
acuerdo con: 1) Los componentes o impurezas a eliminar. 2) Parmetros de calidad. 3) Grados
de tratamientos de agua
Segn los anteriores puntos , los procesos unitarios necesarios para la
potabilizacin del agua en funcin de sus componentes sera la siguiente:
Procesos a llevar a cabo en funcin de los contaminantes presentes.

TIPO DE CONTAMINANTE
OPERACIN UNITARIA
Slidos
gruesos

Desbaste

coloidales

Partculas
Coagulacin+Floculacin+Decantacin

suspensin

Filtracin

Slidos en

Orgnica

Materia
Afino con Carbn Activo
Amoniaco
Cloracin al Breakpoint
Grmenes

Patgenos

Desinfeccin
Metales no deseados (Fe,

Mn)

Precipitacin por Oxidacin

Slidos disueltos (Cl-, Na+, K+ )

Osmosis Inversa
Fuente: Calidad y tratamiento del Agua,
2002. American Water Works Association

Parametros de calidad

Las aguas superficiales destinadas al consumo humano se clasifican

segn el grado de tratamiento al que se deben someter para su potabilizacin, en los grupos
siguientes:
TIPO A1: Tratamiento fsico simple y desinfeccin
TIPO A2: Tratamiento fsico normal, tratamiento qumico y
desinfeccin
TIPO A3: Tratamiento fsico y qumico intensivo, afino y desinfeccin

Los procesos unitarios que corresponde a cada grado de tratamiento

sern los siguientes:
Grado de tratamiento

GRADO DE TRATAMIENTO
TRATAMIENTO

TIPO A1
Fsico simple

COMPOSICIN DEL

DESCRIPCIN

Tratamiento

Filtracin rpida
+

Desinfeccin

+ Desinfeccin

TIPO A2
Fsico normal

Tratamiento

Precloracin

+ Tratamiento

Qumico

+ Coagulacin / Floculacin

+ Decantacin

+ Filtracin

+ Desinfeccin

TIPO A3
y

Tratamiento Fsico

Cloracin al Breakpoint

Qumico
intensos

+ Coagulacin / Floculacin

+ Decantacin

+ Filtracin

+ Afino con Carbn activo

+
Desinfeccin

Fuente: Pre-Treatment
Field Guide: American Water Works Association. 2007.

Considerando un agua superficial, de ro, embalse, o subterrnea, con unos problemas de

calidad que estimamos como convencionales, el proceso o lnea de tratamiento,
considerado tambin convencional, consta de una serie de etapas ms o menos complejas
en funcin de la calidad del agua bruta objeto del tratamiento y se recogen en las siguientes

secuencias:

- Preoxidacin y desinfeccin inicial con cloro, dixido de cloro u ozono,

o permanganato potsico.

- Coagulacin-Floculacin, con sales de aluminio o de hierro y

coadyuvantes de la floculacin (polielectrolitos,

polidadadmas) coagulacin con cal, sosa, o carbonato sdico.

- Decantacin, en diversos tipos de decantadores.

- Filtracin sobre arena, o sobre lecho mixto (arena y antracita) y en

determinados casos sobre lecho de carbn en grano.

- Acondicionamiento, correccin del pH por simple neutralizacin o por

remineralizacin con cal y gas carbnico.

- Desinfeccin final con cloro, cloraminas, dixido de cloro u ozono.

Las instalaciones de tratamiento se completan, a veces, con la adicin de carbn activo en

polvo, para la eliminacin de sustancias que provocan la aparicin de olores y sabores, la
adicin de permanganato potsico para la eliminacin de hierro y manganeso y en casos
ms conflictivos y constantes de presencia de sustancias orgnicas as como otras que
pueden originar olores y sabores, se llega a la instalacin de filtros de carbn activo en
grano tras los filtros de arena. Hoy en da el tratamiento no solo tiene que seguir y mejorar el

tratamiento convencional, sino que deber abordar las nuevas causas de contaminacin
que no puedan eliminarse con los mtodos convencionales, recurriendo a otros mtodos e
incluso empleando otros reactivos complementarios. El tratamiento del agua y en especial
la desinfeccin ( hasta ahora generalmente con cloro) ha sido responsable en gran medida
del 50% de aumento de las expectativas de vida en los paises desarrollados a lo largo del
siglo XX. La eficacia del tratamiento del agua en la reduccin de las enfermedades que esta
transmite depende de la calidad del agua en origen y del proceso seguido en el sistema de
tratamiento. Los agentes patgenos transmitidos por el agua, que pueden causar
enfermedades, provienen generalmente de sistemas hdricos con inadecuado tratamiento,
especialmente desinfeccin y filtracin. En el esquema siguiente se representan las fases
del proceso de tratamiento convencional.

Los reactivos son incorporados en las siguientes etapas:

- Cloro/Dioxido de Cloro/Ozono/Permanganato potsico , empleados como
oxidantes y en la desinfeccin inicial o primaria, se incorporan a la entrada de la cmara de mezcla.
- Coagulante , se incorpora en la cmara de mezcla .
- Cal, u otro alcali o cido para corregir pH , se pueden incorporar tanto en
fase de mezcla y coagulacin , como al agua ya filtrada.
- Coadyuvantes de la floculacin como los polielectrolitos , se dosifican
generalmente tras la fase de coagulacin y antes de la
la decantacin.
- Carbn activo en polvo, para la adsorcin de sustancias orgnicas, en la fase
de mezcla y en cualquier caso , antes de la
decantacin.
- Cloro/Dioxido de cloro/Ozono/Cloraminas ,empleados en la desinfeccin final,
se incorporan al agua filtrada.
En cuanto al control de calidad del agua en una ETAP hay que considerar en
primer lugar que el agua que entra en una estacin o
planta de tratamiento (agua bruta o agua cruda) se somete a una serie de
ensayos y anlisis fsicos, qumicos y bacteriolgicos que
nos determinan el estado y caractersticas de esta agua y por tanto las pautas
del tratamiento a seguir. Igualmente es necesario
realizar distintos anlisis a lo largo de las diversas fases del tratamiento con
objeto de comprobar la eficacia de cada una de estas
operaciones y finalmente se realizan los correspondiente anlisis y controles al
agua una vez completado el proceso de tratamiento y
as conocer las caractersticas finales del agua tratada.

Reduccin de microorganismos patgenos en los

distintos procesos de tratamiento (fuente ENOHSA)
Sedimentacin
0 - 99 %
Coagulacin
Significativo

Filtracin
0 - 99 %
Coagulacin, sedimentacin y filtracin
rpida

60 - 100 %
Coagulacin, filtracin en 2 medios (arena y C.A)

> 99%
Filtros lentos de
40 - 100 %

arena

Filtros de carbn activado

0 - 60 %

granular

Osmosis
Inversa

90 - 100 %
Ultrafiltracin

90 - 100%
Cloracin
99 %
Esquema de los procesos ms habituales para el tratamiento del agua
(Fuente: Canal Isabel II)
En los esquemas siguientes se muestran dos Estaciones de Tratamiento de
gran capacidad, la primera de ellas
consta de decantadores estticos , con una superficie total de
decantacin de 38.400 metros cuadrados , distribuidos en 6
decantadores horizontales con 4 plantas o pisos por decantador. La
superficie de filtracin es de 8.000 m2 ,con velocidad de filtracin
constante (7m/h.) y nivel de filtracin constante. Lacapacidad de
tratamiento es de 16 m3/seg.. Utiliza cloro y dioxido de cloro en
preoxidacin y desinfeccin inicial y inicial y cloraminas en la desinfeccin
residual final.
El segundo esquema pertenece a una estacin de tratamiento con decantadores
de recirculacin de fangos y filtros de nivel

de filtracin variable