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UNIVERSIDAD NACIONAL DE SAN AGUSTIN

FACULTAD DE INGENIERIA DE PROCESOS


ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERIA QUIMICA

Curso:

Hidrocarburos

Trabajo: BIOREMEDIACION
Horario:

Turno B

Alumnos:
- Quispe huamani, Elmer
CUI: 20123612

Contenido
BIORREMEDIACIN DE SUELOS CONTAMINADOS POR
HIDROCARBUROS........................................................................................ 3
1.

BIORREMEDIACIN.........................................................................3

1.1. FUNDAMENTACIN BIOQUMICA DE LA BIODEGRADACIN.....3


1.2. FACTORES QUE CONDICIONAN LA BIORREMEDIACIN DE UN
SUELO........................................................................................................ 4
1.3. VENTAJAS Y DESVENTAJAS DE LA BIORREMEDIACIN..............4
1.3.1. Ventajas..................................................................................... 4
1.3.2. Desventajas.............................................................................. 5
2.

APLICACIONES DE BIORREMEDIACIN........................................5

2.1. BIORREMEDIACIN DE SUELOS CON CONSORCIO


BACTERIANO, COMPOSTAJE Y FERTILIZACIN.....................................5
2.1.1..CAPACIDAD BIODEGRADADORA DE LAS CEPAS BACTERIANAS
5
2.1.2................................................................................PRUEBA PILOTO
6
2.1.3....................................................................ANLISIS ESTADSTICO
6
2.1.4..............................................................RESULTADOS Y DISCUSIN
6
2.1.4.1. AISLAMIENTO DE CEPAS BACTERIANAS ENDGENAS.....6
2.1.4.2. CAPACIDAD BIODEGRADADORA DE LAS CEPAS
BACTERIANAS........................................................................................ 6
2.1.5.................................................................................CONCLUSIONES
7
2.2. LODOS ESTABILIZADOS Y CEPAS BACTERIANAS EN LA
BIORREMEDIACIN DE SUELOS CONTAMINADOS CON
HIDROCARBUROS..................................................................................... 8
2.2.1...............................................................ENSAYO DE FACTIBILIDAD
8
2.2.2....................................................................ANLISIS ESTADSTICO
10
2.2.3..............................................................RESULTADOS Y DISCUSIN
10
2.2.3.1. Ensayo de factibilidad........................................................11
2.2.3.2. Ensayo de tratabilidad.......................................................11

2.2.4.................................................................................CONCLUSIONES
15
3.

NORMATIVIDAD............................................................................. 16

3.1. SECRETARIA DE MEDIO AMBIENTE Y RECURSOS NATURALES


16

BIORREMEDIACIN DE SUELOS
CONTAMINADOS POR HIDROCARBUROS
1. BIORREMEDIACIN
La biorremediacin es una tecnologa que utiliza el potencial metablico de
los microorganismos (fundamentalmente bacterias, pero tambin hongos y
levaduras) para transformar contaminantes orgnicos en compuestos ms
simples poco o nada contaminantes, y, por tanto, se puede utilizar para
limpiar terrenos o aguas contaminadas
Su mbito de aplicabilidad es muy amplio, pudiendo considerarse como
objeto cada uno de los estados de la materia: Slido. Con aplicaciones sobre
medios contaminados como suelos o sedimentos, o bien directamente en
lodos, residuos, etc. Lquido. Aguas superficiales y subterrneas, aguas
residuales. Gases. Emisiones industriales, as como productos derivados del
tratamiento de aguas o suelos.
Tambin se puede realizar una clasificacin en funcin de los contaminantes
con los que se puede trabajar: Hidrocarburos de todo tipo (alifticos,
aromticos, BTEX, PAHs,...). Hidrocarburos clorados (PCBs, TCE, PCE,
pesticidas, herbicidas,...). Compuestos nitroaromticos (TNT y otros).
Metales pesados. Estos no se metabolizan por los microorganismos de
manera apreciable, pero pueden ser inmovilizados o precipitados.
Otros contaminantes. Compuestos organofosforados, cianuros, fenoles, etc.
Los microorganismos transforman y metabolizan aerbicamente los
hidrocarburos y otros compuestos orgnicos hasta dixido de carbono, agua
y fuentes de alimento para sustentar su crecimiento y reproduccin, es
decir, la biodegradacin ocurre naturalmente. Es conocido que los
microorganismos indgenas tienen la capacidad de adaptarse y
eventualmente degradar cualquier compuesto orgnico natural sin
asistencia del hombre; sin embargo, esta adaptacin requiere la presencia
de condiciones ambientales apropiadas tales como el pH, temperatura, el
aceptor final de electrones (que en procesos aerbicos es el oxgeno),

concentraciones de contaminante no txicas para los microorganismos y


adecuadas condiciones de humedad y conductividad del medio, entre las
mas importantes. La ausencia de alguna o varias de las anteriores
condiciones puede limitar parcial o totalmente la actividad biolgica y es
cuando la mano del hombre juega un papel fundamental en la optimizacin
del proceso, ya sea mejorando estas condiciones para aumentar la
poblacin de microorganismos (bioaumentacin) y/o manipulando
genticamente los microorganismos para la degradacin especfica de
algunos compuestos qumicos.

1.1. FUNDAMENTACIN BIOQUMICA DE LA


BIODEGRADACIN
El fundamento bioqumico de la biorremediacin se basa, principalmente, en
la serie de reacciones de xido-reduccin (cuyo fin es la obtencin de
energa) que se producen en la cadena respiratoria, o transportadora de
electrones de las clulas. La cadena la inicia un sustrato orgnico
(compuestos hidrocarburados) que es externo a la clula y que acta como
dador de electrones, de modo que la actividad metablica de la clula acaba
degradando y consumiendo dicha sustancia (Maroto Arroyo, articulo
internet).
Los aceptores ms comnmente utilizados por los microorganismos son el
oxgeno, los nitratos, el hierro (III), los sulfatos y el dixido de carbono.
Cuando el oxgeno es utilizado como aceptor de electrones la respiracin
microbiana se produce en condiciones aerobias, y los procesos de
biodegradacin sern de tipo aerobio; sin embargo, si utiliza los sulfatos o el
dixido de carbono se produce en condiciones
reductoras o anaerobias, y los procesos de biodegradacin sern de tipo
anaerobio
(Figura.)

1.2. FACTORES QUE CONDICIONAN LA BIORREMEDIACIN


DE UN SUELO
La biodegradabilidad de una mezcla de hidrocarburos presente en un suelo
contaminado depende de diversos factores, los cuales como pueden
clasificarse en cuatro grupos:

Medio ambientales.

Fsicos.

Qumicos.

Microbiolgicos

1.3. VENTAJAS Y DESVENTAJAS DE LA BIORREMEDIACIN


1.3.1.

Ventajas

Mientras que los tratamientos fsicos y buena parte de los qumicos estn
basados en transferir la contaminacin entre medios gaseoso, lquido y
slido, en la biorremediacin se transfiere poca contaminacin de un medio
a otro.
Es una tecnologa poco invasiva y generalmente no requiere componentes
estructurales o mecnicos que signifiquen una amenaza para el medio.
Comparativamente, es econmica viable y al tratarse de un proceso natural,
suele tener aceptacin por parte de la opinin pblica.

1.3.2.

Desventajas

La biodegradacin incompleta puede generar intermediarios metablicos


inaceptables, con un poder contaminante similar o incluso superior al
producto de partida y algunos compuestos contaminantes son tan
resistentes que pueden incluso inhibir a biorremediacin.

Es difcil predecir el tiempo de requerido para un proceso adecuado y el


seguimiento y control de la velocidad y/o extensin del proceso es
dispendioso.

2. APLICACIONES DE BIORREMEDIACIN

2.1. BIORREMEDIACIN DE SUELOS CON CONSORCIO


BACTERIANO, COMPOSTAJE Y FERTILIZACIN
Se aislaron cepas bacterianas autctonas de suelos contaminados con
hidrocarburos, y stas se sometieron a una prueba de eficiencia para la remocin
de gasoil (fuente de carbono). Se realizaron contajes bacterianos de hetertrofos
mesfilos, las cepas 16, 14, 11, 18 y 1 presentaron los mayores porcentajes de
remocin de hidrocarburos totales, 90, 63, 56, 49 y 45% respectivamente; se

seleccionaron para su utilizacin como cultivos mixtos en la prueba piloto. Se


realiz una prueba piloto aplicando los tratamientos: cultivo mixto, compostaje y
fertilizacin en unidades experimentales que contenan suelo contaminado. Se
analizaron los hidrocarburos totales (HT), saturados, aromticos, resinas y
asfaltenos (SARA), y metales totales (Cd, Cr, Ni, Zn). La correlacin entre los
hetertrofos mesfilos con los hidrocarburos totales, nitr geno y fsforo, result
negativa y altamente significativa (p<0,001), lo que establece que el aumento de
los hetertrofos mesfilos provoca la disminucin de los hidrocarburos totales, del
nitrgeno y del fsforo. la prueba de Tukey, estableci que los tratamientos con
cultivo mixto+fertilizacin (CM+N/P), compostaje+fertilizacin (Comp+N/P),
compostaje +cultivo mixto+fertilizacin (Comp+CM+N/P) y compostaje+cultivo
mixto (Comp+CM) no mostraron diferencias significativas (p<0,05) entre ellos y en
los cuales se obtuvo una remocin de los hidrocarburos totaales del 95, 94, 93 y
86% respectivamente, durante los tres meses del estudio. la aplicacin simultnea
de la tcnica de compostaje, fertilizacin y consorcio bacteriano demostr ser una
buena alternativa para la recuperacin de suelos contaminados con hidrocarburos.

2.1.1.
CAPACIDAD BIODEGRADADORA DE LAS CEPAS
BACTERIANAS
Se aplic un ensayo de factibilidad, y para ello se prepararon fiolas de 250 mL,
conteniendo 93% de medio mnimo mineral (pH 7), modificado por Jobson y
Westlake (1972), adicionando 5% del inculo y 2% de gasoil, como nica fuente de
carbono, por duplicado. El ensayo se incub a temperatura ambiente (30-35C)
durante 20 das con agitacin constante en una incubadora marca Incubator
Shaker, modelo 625, a 120 rpm.
Se obtuvo un ttulo bacteriano de cada cepa (contaje de hetertrofos mesfilos)
cada cinco das, mediante la tcnica de contaje en placa vertida, y se determin la
cantidad de hidrocarburos totales al inicio y al final del ensayo APHA et al. (1998).

2.1.2.

PRUEBA PILOTO

Se utiliz la metodologa establecida en APHA et al. (1998), y se determinaron los


parmetros: hetertrofos mesfilos, a travs de la tcnica de contaje en placa
vertida (9215-B), hidrocarburos totales, por el mtodo gravimtrico (5520-F),
nitrgeno total Kjeldahl, por el mtodo volumtrico (4500-NH3), fsforo total, por
el mtodo del cido ascrbico (4500-C), los metales cadmio, cromo, nquel, zinc,
mediante la tcnica de absorcin atmica (3500-B), y siguiendo la metodologa
establecida en la ASTM (1992) se determinaron las fracciones de hidrocarburos
(SARA), por el mtodo gravimtrico (D2007- 75), mientras que la temperatura, pH
y humedad, se midieron con electrodos selectivos APHA et al. (1998).

2.1.3.

ANLISIS ESTADSTICO

Se aplic un anlisis de la varianza, el coeficiente de correlacin de Pearson y la


prueba de Tukey a los resultados obtenidos en la prueba piloto (Daniel 1998).

2.1.4.

RESULTADOS Y DISCUSIN

2.1.4.1. AISLAMIENTO DE CEPAS BACTERIANAS ENDGENAS


Se aislaron 20 cepas bacterianas distintas de los suelos contaminados, las cuales
presentaron forma de bacilos, cocos y cocobacilos Gram negativos. Frankenberger
(1988), aisl cepas bacterianas autctonas de sitios contaminados con
hidrocarburos del norte de
Arizona, Estados Unidos, para la realizacin de un ensayo de factibilidad, siguiendo
la metodologa descrita.

2.1.4.2. CAPACIDAD BIODEGRADADORA DE LAS CEPAS


BACTERIANAS
El crecimiento de las cepas bacterianas oscil entre 0,01106 y 490106 UFC/mL
(Tabla 2). Las cepas 14, 12, 4, 10 y 8 presentaron el mayor crecimiento,
alcanzando densidades poblacionales de 490106, 390106, 300106, 184106 y
184106 UFC/Ml respectivamente.

El porcentaje de remocin de hidrocarburos totales vari entre 15 y 90% (Fig. 1).


Las cepas 16, 14, 11, 18 y 1 mostraron los mayores porcentajes de remocin del
gasoil presente: 90, 63, 56, 49 y 45% respectivamente; y se seleccionaron para
constituir el cultivo mixto a emplearse en el estudio de tratabilidad.
Se demostr que las cepas bacterianas, aisladas de suelos contaminados con
hidrocarburos, son eficientes para la degradacin de compuestos derivados como el
gasoil y se podran utilizar en el saneamiento de ambientes contaminados, como lo
sugieren Frankenberger (1988), Whyte et al. (1998), Kanaly et al. (2000), Mishra
et al. (2001), Margesin y Schinder (2001), Farrel y Quilty (2002), Yerushalmi
(2003).

2.1.5.

CONCLUSIONES

El proceso de biorremediacin de suelos contaminados con ripios de perforacin se


optimiz con la adicin del cultivo mixto, y las tcnicas de compostaje y
fertilizacin, consiguindose los mejores resultados con la aplicacin simultnea de
estas tecnologas
(CM+N/P, Comp+N/P, Comp+CM+N/P y Comp+CM). Esta investigacin representa
una posible alternativa viable para conseguir la restitucin de las condiciones
deseadas en los ecosistemas, favoreciendo la conservacin de los diferentes
recursos naturales del pas.

2.2. LODOS ESTABILIZADOS Y CEPAS BACTERIANAS EN LA


BIORREMEDIACIN DE SUELOS CONTAMINADOS CON
HIDROCARBUROS
La utilizacin de cepas bacterianas autctonas y la aplicacin de lodo estabilizado
en la biorremediacin de un suelo contaminado con hidrocarburo fue estudiada en
suelo contaminado con petrleo del Campo Moga del Estado Zulia, Venezuela.
Cepas bacterianas aisladas del suelo fueron probadas en su capacidad para
degradar gasoil (factibilidad). Las cuatro cepas ms eficientes integraron el cultivo
mixto en un estudio de tratabilidad, donde se aplic la tcnica de compostaje
utilizando lodos estabilizados de un sistema de lagunas como esponjante, en el
suelo contaminado con petrleo y nitrgeno y fsforo como fertilizante durante
150 das. Se analizaron hidrocarburos totales (HCT), fracciones de hidrocarburos
saturados, aromticos, resinas y asfaltenos (SARA), nitrgeno total Kjeldahl, fsforo
total, y metales pesados totales, hetertrofos mesfilos, conductividad elctrica,
temperatura y pH. El lodo, suelo y lixiviado generados presentaron rangos
permisibles de metales pesados totales, segn la normativa ambiental vigente. Se
presentaron diferencias significativas (P<0,05) en los tratamientos para las
variables hetertrofos mesfilos y remocin de HCT, obteniendo los mejores
promedios (Tukey) en los tratamientos que contenan, adems del lodo, 15 y 10%
de cultivo mixto con densidad poblacional de 27 y 19109 UFC/ml y una remocin
de HCT de 90 y 74%, respectivamente. Los tratamientos con lodo ms 15 y 10% de
cultivo mixto evidenciaron correlacin positiva altamente significativa (P<0,001)
entre la degradacin de los HCT y el crecimiento bacteriano con el esponjante.
Estos tratamientos presentaron la mayor remocin de las fracciones de SARA,
demostrando la eficiencia de la tecnologa empleada en la biorremediacin de
suelos contaminados con petrleo.

2.2.1.

ENSAYO DE FACTIBILIDAD

Las cepas bacterianas aisladas y activadas fueron transferidas a un medio


de cultivo fresco de Tripticasa Soya (TSB; Himedia M290). El TSB es un
medio estandarizado, enriquecido (en g/l) con hidrolizados enzimticos de
casena de soya (17), carne (3), NaCl (5), K2HPO4 (2,5) y dextrosa (2,5), e
incubadas hasta alcanzar una densidad poblacional de 1108
UFC/mL (Kerr, 1981; APHA, 1998). Los cultivos fueron amplificados por
transferencia a volmenes mayores. Cada cepa bacteriana fue inoculada en
un matraz de 250ml, con 97% de medio mnimo mineral (MMM) compuesto
(en g/l) por NH4Cl (1), KNO3 (2), CaCl2.6H2O (0,0005), Na2SO4 (2), MgSO4
(1), K2HPO4 (0,5), FeSO4.7H2O (0,001) propuesto por Jobson (1975), 2% v/v
de gasoil y 1% v/v del inculo bacteriano con su respectivo testigo no
inoculado. La fuente de carbono fue suministrada por el gasoil. Los matraces
se colocaron en una incubadora New Brunswick, modelo 625, donde se
mantuvieron a 37C y en incubacin a 120rpm por 5 semanas, perodo
durante el cual se realizaron los anlisis microbiolgicos y fisicoqumicos
determinando los hetertrofos mesfilos mediante la tcnica de placa
vertida (APHA, 1998) y la cantidad de hidrocarburos totales presentes (HCT)
por el mtodo 5520-F (APHA, 1998). Estos parmetros permitieron
seleccionar las cepas ms eficientes en la degradacin de hidrocarburos del
gasoil (Araujo et al., 2004). Se tomaron porciones equivalentes de cada

cepa bacteriana seleccionada y se agregaron en un matraz para formar el


cultivo mixto.
Ensayo de tratabilidad Se establecieron 16 unidades experimentales, cada
una conformada por un recipiente plstico de 50 litros de capacidad,
perforado en el fondo, con una capa de grava y colocado sobre otro
recipiente donde se recolectaba el material lixiviado, el cual fue considerado
en el clculo de la remocin de los parmetros.
Cada unidad contena un total de 20kg de la mezcla a la cual se le aplic el
tratamiento con lodo estabilizado y cultivo mixto en tres concentraciones.
Se establecieron dos unidades experimentales para cada tratamiento. Se
aplic riego cada 3 das, para mantener el porcentaje de humedad requerido
de 40-60%, determinado por el mtodo
2540-B (APHA, 1998). Se mantuvo el contenido de O2 en las unidades
experimentales mediante la mezcla mecnica y continua del suelo de forma
manual (Eweis et al., 1999).
Las caractersticas del tratamiento en cada unidad experimental se
muestran en la Tabla
I. Por ejemplo, la composicin de LCM5%, fue de suelo contaminado con
petrleo + lodo estabilizado + 5% de cultivo mixto, y a los testigos (SP y
SPL) no le fue aadido cultivo. Se realiz una caracterizacin fisicoqumica
del suelo contaminado con petrleo y de la mezcla del mismo con el lodo
estabilizado, as como del lixiviado generado. Los parmetros fisicoqumicos
y biolgicos y los mtodos utilizados se presentan en la Tabla II (APHA,
1998). Los hetertrofos mesfilos, HCT, pH, temperatura y conductividad
elctrica se determinaron cada 30

das, desde el inicio (t1) y durante un tiempo de 150 das (t6). Las
determinaciones de las fracciones de saturados, aromticos, resinas y
asfaltenos (SARA) se evaluaron al inicio (t1) a los sesenta das (t3) y al final
del ensayo (t6). Los cloruros, N total y P total se evaluaron al inicio y al final
del ensayo, mientras que la evaluacin de los metales pesados totales se
realiz solo al inicio del ensayo (APHA, 1998).

2.2.2.

ANLISIS ESTADSTICO

Para el anlisis estadstico de los resultados se sigui la metodologa


establecida en SAS
(2002). Se evaluaron 2 modelos estadsticos; en el caso del ensayo de
factibilidad, el diseo experimental fue en bloques al azar con arreglo de
tratamiento en parcelas subdivididas en el tiempo, y el modelo estadstico
en el ensayo de tratabilidad fue un diseo experimental de bloques al azar
con arreglo factorial en parcelas divididas en el tiempo. Debido a los costos
de la investigacin, se realizaron 2 rplicas o repeticiones. Segn Kuelh
(2001) el costo de la conduccin de un ensayo es un factor primordial para
la determinacin del nmero de rplicas. Se realiz el anlisis de varianza
(ANOVA), las pruebas de medias segn Tukey y el coeficiente de correlacin
de Pearson para el grado de asociacin entre las variables estudiadas.
En el diseo experimental se calcul la estadstica descriptiva a los valores
obtenidos en las variables estudiadas, entre las que destacan las pruebas
de normalidad o prueba analtica, se verific los supuestos del anlisis de
varianza. Las pruebas
(SAS, 2002) de Kurtosis y Skewness (simetra), Shapiro- Wilk, KolmogorovSmirnov (normalidad - prueba de hiptesis), evaluaron la distribucin de las
observaciones, coeficientes de variacin, la distribucin normal, pruebas de
hiptesis, y pruebas de ploteo o probabilidad normal.

2.2.3.

RESULTADOS Y DISCUSIN

Aislamiento y caracterizacin de las cepas Se obtuvieron 28 cepas


bacterianas aisladas, las cepas mas eficientes en la degradacin del gasoil
fueron seleccionadas para conformar el cultivo mixto.

Un total de siete cepas fueron seleccionadas y se denominaron MI-4, MI-6,


MI-10, MI- 23, MI-33, MI-36 y MI-38, cuyas caractersticas macromorfolgicas
y micromorfolgicas se presentan en la Tabla III. Esta nomenclatura se bas
en las siglas del Laboratorio de Microbiologa Industrial del Centro de
Investigacin del Agua de la Universidad del Zulia.

2.2.3.1. Ensayo de factibilidad


Los valores de hetertrofos mesfilos mximos y mnimos alcanzados por
las cepas bacterianas al inicio del ensayo (t1) estuvieron entre 1,1108 y
2,1106 UFC/ml, respectivamente. Los mayores ttulos de crecimiento
fueron alcanzados por las cepas MI-10, MI-23, MI-33 y MI-38. Todas las cepas
disminuyeron gradualmente su densidad poblacional a medida que avanz
el ensayo, posiblemente debido al agotamiento progresivo de la fuente de
carbono (gasoil); disminucin de nutrientes (N, P). Resultados similares
fueron obtenidos por Araujo et al. (2004), indica que fueron las ms
eficientes en la degradacin del gasoil. La remocin se correlacion
mediante el coeficiente de Pearson (P<0,001) de manera directamente
proporcional con el crecimiento bacteriano, ya que estas cepas presentaron
los mayores promedios de UFC/ml. Las cepas: MI-4, MI- 6 y MI-36
presentaron los menores porcentajes de remocin, con 19, 26 y 29%,
respectivamente, lo cual fue proporcional a los valores de crecimiento
alcanzados por las mismas cepas. Estos resultados concuerdan con los
obtenidos por Araujo et quienes evaluaron cepas bacterianas en ensayos de
factibilidad, obteniendo diferencias significativas en las cepas evaluadas,
con promedios de crecimiento al final del ensayo de 1106 UFC/ml.
Durante los primeros siete das de la evaluacin se observ una ligera
disminucin del contenido de los hidrocarburos totales (HCT); fue el perodo
de adaptacin de las cepas al sustrato (gasoil), y luego disminuy de
manera significativa (Figura 1). A los 35 das las cepas MI-38, MI-23, MI-10 y
MI-33 lograron una disminucin en los promedios de HCT de 11137, 13693,
14521 y 15292mg/kg, con un porcentaje de remocin de 79, 51, 39 y 38%,
respectivamente; mientras que las cepas MI-4, MI-6, MI- 36 y el tratamiento
testigo presentaron mayores promedios de HCT (17086, 16558, 15781 y
18522mg/kg, con remocin de 19, 26, 29 y 1%, respectivamente) indicando
que estas cepas degradaron menor cantidad de HCT (Tabla IV). Se realiz el
anlisis de varianza, obteniendo diferencias altamente significativas
(P<0,001) entre las cepas evaluadas. El anlisis de varianza agrupa las
cepas de la siguiente manera: MI-38 difiere significativamente (P<0,05) del
resto de las cepas; por su parte MI-10, MI-23 y MI-33, as como MI-4, MI-6 y
MI-36 presentan diferencias significativas (P<0,05) en relacin a las otras
cepas.
La Figura 2 muestra el porcentaje de remocin de HCT durante los 35 das
de evaluacin, mostrando diferencias significativas (P<0,05). Las cepas MI38, MI-23, MI-10 y MI-33 produjeron la mayor remocin, con valores de 79,
51, 39 y 38%, respectivamente, lo que al. (2004), quienes reportaron
porcentajes de remocin de hidrocarburos totales en pruebas de factibilidad
llevadas a cabo en perodos de 20 y 120 das de incubacin, obteniendo
porcentajes de remocin de 90 y 89%, respectivamente. Con base en estos

resultados se seleccionaron las cepas ms eficientes, MI-38, MI-23, MI-10 y


MI-33, para conformar el cultivo mixto.

2.2.3.2. Ensayo de tratabilidad


Caracterizacin fisicoqumica del suelo y lodo estabilizado. La Tabla V
muestra los resultados obtenidos en el anlisis fisicoqumico del suelo
utilizado.
El suelo posee textura franca con predominancia de arenas, con buena
permeabilidad y bien estructurado, con pH ligeramente cido, y contenidos
bajos de materia orgnica y, por ende, bajos contenidos de N y P. Tambin
se observ bajo contenido de Al. El suelo present una conductividad
elctrica baja, indicativo de bajos contenidos de sales. La mezcla suelo-lodo
estabilizado present un pH cercano a la neutralidad, ligeramente cido, con
altos contenidos de materia orgnica, factor importante para el
mejoramiento de la estructura del suelo, y para el suministro de nutrientes
por el alto contenido N y P.
Las Tablas VI y VII muestran el contenido de metales totales en el suelo
contaminado con hidrocarburo, en la mezcla suelo contaminado con lodo
estabilizado y en los lixiviados en el tiempo inicial. Los valores obtenidos, al
ser comparados con la normativa ambiental venezolana (Gaceta Oficial,
1998) se encontraron dentro de los rangos mximos permitidos conforme al
Artculo 53 de la misma; por lo tanto, se puede decir que los
microorganismos no se vieron afectados por el contenido de metales, lo que
se comprueba por el crecimiento que alcanzaron los mismos en el
transcurso del ensayo.

El contenido de hidrocarburos totales para suelo contaminado y lixiviados


estuvo por debajo del 10%, valor estipulado en el Art. 53 del Decreto 2635
(Gaceta Oficial, 1998) para dar comienzo a un biotratamiento. Por encima
de este valor, el hidrocarburo puede causar la lisis o ruptura de la
membrana celular, ocasionando la muerte de los microorganismos (Levin y
Gealt, 1997; Eweis et al., 1999).
Hetertrofos mesfilos. En la Figura 3 se observa el comportamiento de las
curvas de crecimiento en todos los tratamientos evaluados. Se aprecia que
el grupo de los tratamientos con lodo estabilizado en su composicin
(LCM15%, LCM10%, LCM5%) siempre estuvieron por encima del grupo sin
lodo en su composicin (CM15%, CM10%, CM5%) y de los tratamientos sin
cultivo mixto (SPL y SP). Al inicio del ensayo la mayora de los tratamientos
tuvieron valores de densidad poblacional cercanos a 1108 UFC/ml, y al
final del ensayo, transcurridos 150 das, los ttulos bacterianos se
incrementaron alcanzando valores mximos y mnimos de 151011 y
2109 UFC/ml. Wrenn (1994) utiliz un cultivo mixto conformado por cepas
degradadoras de hidrocarburos, probaron su eficiencia en la degradacin de
crudo liviano en un medio acutico y cuantificaron poblaciones hasta de
1108 UFC/ml al final del ensayo. As mismo, Ijah (2003) report valores
entre 14105 y 4106 UFC/ml en poblaciones microbianas utilizadas en la
recuperacin de suelos contaminados con aceites.

El anlisis de varianza mostr para los hetertrofos mesfilos diferencias


altamente significativas (P<0,001) entre los tratamientos evaluados. Los
mayores promedios de crecimiento de hetertrofos mesfilos se

encontraron en los tratamientos LCM15% y LCM10%, con lodo y cultivo


mixto en proporciones de 15 y 10% respectivamente, con valores de
27109 y 19109 UFC/ml, respectivamente (Tabla VIII). Segn la prueba de
medias de Tukey, dichos valores difieren significativamente (P<0,05) con el
resto de los tratamientos. El tratamiento LCM5%, present un promedio de
densidad poblacional de 8109 UFC/ml, inferior a los promedios de los
tratamientos LCM15% y LCM10%, pero superior a los promedios de los
tratamientos CM5%, CM10% y CM15%, de: 1; 3; y 3109 UFC/ml,
respectivamente.
Estos tratamientos, a pesar de tener cultivo mixto en proporciones 5, 10 y
15% v/p respectivamente, no tenan el lodo estabilizado, factor que en el
caso del primer grupo de tratamientos produjo un efecto positivo en el
crecimiento bacteriano.
Los tratamientos SP y SPL, sin inculo bacteriano, presentaron los menores
promedios de crecimiento, con densidades poblacionales promedio de 2 y
4107 UFC/ml.
Segn el coeficiente de Pearson, existe una correlacin positiva altamente
significativa (P<0,001) entre el contenido de lodo estabilizado, el
crecimiento bacteriano y el porcentaje de cultivo mixto aplicado a los
tratamientos, demostrando que el incremento de los valores de crecimiento
bacteriano estn asociados al contenido de lodos y al porcentaje de cultivo
mixto aplicado.
Hidrocarburos totales. La Figura 4 muestra la degradacin de los HCT en las
unidades experimentales evaluadas. Se aprecia que en los primeros 30 das
la pendiente fue ms pronunciada en la mayora de los tratamientos, debido
a que inicialmente ocurre la degradacin de las fracciones menos
complejas, y ms fciles de degradar; posteriormente ocurre la degradacin
de las fracciones ms recalcitrantes.
Los tratamientos LCM15% y LCM10% presentaron los menores contenidos
de HCT a los 150 das, de 3865 y 8441mg/ kg respectivamente, valores que
se encuentran dentro de lo exigido por la normativa ambiental (Gaceta
Oficial, 1998).
Al realizar el anlisis de varianza para esta variable se encontraron
diferencias altamente significativas (P<0,001) entre los tratamientos
evaluados. Los resultados de los HCT obtenidos muestran diferencias
significativas (P<0,05) segn la prueba de medias de Tukey, logrndose el
mayor porcentaje de remocin de HCT en el tratamiento

El contenido de materia orgnica que los lodos poseen y la actividad


metablica de las bacterias ocasionan acidificacin del medio, por la
produccin de cidos orgnicos y de
CO2. Estos resultados coinciden con los de La Grega et al. (1996), quienes
sealan que la accin de los microorganismos puede alterar los valores de
pH, disminuyndolo. As mismo, Margesin y Schinder (2001) observaron
disminucin del pH de 8 a 7 en el transcurso de 22 das de evaluacin; sin
embargo, se obtuvieron valores de remocin de hidrocarburos del 70%.
Acosta e Infante (1995) utilizaron lodo estabilizado para mejorar las
caractersticas de suelos y observaron disminucin del pH de 8,9 a 8,5; sin
embargo, esto no afect significativamente el crecimiento bacteriano ni la
remocin de hidrocarburos.

2.2.4.

CONCLUSIONES

Las cepas bacterianas MI10, MI23, MI33 y MI38 fueron las ms eficientes en
la degradacin del gasoil con una remocin mxima de 79% en 35 das. Esto
sugiere que las bacterias utilizan el carbono como fuente de energa. Los
tratamientos donde se utiliz el lodo ofrecieron una mayor eficiencia en la
degradacin de los hidrocarburos que aquellos sin lodo, debido a que su
presencia favoreci la actividad bacteriana, logrndose remociones de 90%
de los hidrocarburos presentes en el tratamiento LCM15% en 150 das.
Esta tecnologa de biorremediacin puede ser una alternativa de eleccin
para el saneamiento de suelos impactados con petrleo u otros
contaminantes.

3. NORMATIVIDAD
3.1. SECRETARIA DE MEDIO AMBIENTE Y RECURSOS
NATURALES
NORMA Oficial Mexicana de Emergencia NOM-EM-138-ECOL-2002,
Que establece los lmites mximos permisibles de contaminacin en
suelos afectados por hidrocarburos, la caracterizacin del sitio y
procedimientos b
Al margen un sello con el Escudo Nacional, que dice: Estados
Unidos Mexicanos.- Secretara de Medio Ambiente y Recursos
Naturales.
CASSIO LUISELLI FERNANDEZ, Subsecretario de Fomento y Normatividad Ambiental, y Presidente
del Comit Consultivo Nacional de Normalizacin para la Proteccin Ambiental, con fundamento en lo
dispuesto en los artculos 32 Bis fracciones I, II, IV y V de la Ley Orgnica de la Administracin Pblica
Federal; 5 fracciones V, VI, XI, XVI, 98 fraccin V, 134 fraccin V, 139, 140, 150, 151 Bis y 152 Bis de la
Ley General del Equilibrio Ecolgico y la Proteccin al Ambiente; 40 fraccin X, 41 y 48 de la Ley Federal
sobre Metrologa y Normalizacin; 86 fraccin VI, 96, 119, 120, 121, 122 y 123 de la Ley de Aguas
Nacionales;
28
y
34
del Reglamento de la Ley Federal sobre Metrologa y Normalizacin; 4, 5, 6, 8 fracciones II y VI, y 42 del
Reglamento a la Ley General del Equilibrio Ecolgico y la Proteccin al Ambiente en Materia de Residuos

Peligrosos; y 6 fraccin VIII y 24 fracciones I y IV del Reglamento Interior de la Secretara de Medio


Ambiente y Recursos Naturales.
CONSIDERANDO
Que el Programa Nacional de Medio Ambiente y Recursos Naturales 2001-2006, tiene como primer
objetivo el de detener y revertir la contaminacin de los recursos agua, aire y suelo, con el propsito de
garantizar su conservacin para las generaciones futuras.
Que no se cuenta con un marco normativo suficiente y transparente que precise los lmites mximos
permisibles de contaminacin en suelos, la metodologa para caracterizar los sitios contaminados, ni los
procedimientos que se deben llevar a cabo cuando se produce una emergencia por derrame de
hidrocarburos y/o en las acciones de restauracin de suelos contaminados por stos o sus derivados.
Que la fraccin XVI del artculo 3o. de la Ley General del Equilibrio Ecolgico y la Proteccin al
Ambiente, define como Emergencia ecolgica: Situacin derivada de actividades humanas o fenmenos
naturales que al afectar severamente a sus elementos, pone en peligro a uno o varios ecosistemas.
Que las principales sustancias involucradas en los derrames de hidrocarburos son: petrleo crudo,
combustleo, diesel, gasolina y turbosina.
Que los derrames de hidrocarburos, por las sustancias que involucran, se consideran como
emergencias ambientales debido a que pueden poner en peligro en los lugares donde se producen, la
integridad de los ecosistemas, as como la preservacin de los recursos naturales.
Que un derrame de hidrocarburos, cuando permanece sin ser atendido, causa daos constantes y
crecientes al suelo y a otros recursos naturales.
Que aun cuando en el pas se cuenta con un nmero suficiente de empresas especializadas en la
atencin de emergencias ambientales y la restauracin de suelos, quienes contratan sus servicios no
tienen elementos de certidumbre sobre la efectividad de los resultados y sobre si stos sern finalmente
aceptados por la autoridad.
Que la falta de procedimientos estandarizados para la restauracin de suelos contaminados por
derrames de hidrocarburos constituye uno de los principales factores de dicha incertidumbre.
Que en el documento Procedimiento para Atencin de Emergencias Ambientales Asociadas con
Sustancias Qumicas, Caracterizacin y Restauracin de Suelos, elaborado por el Grupo Interno de
Trabajo de la SEMARNAT y la PROFEPA, se establecen criterios de limpieza de suelos contaminados por
sustancias provenientes de la industria petrolera, pero que stos no tienen el carcter jurdico de una
Norma
Oficial Mexicana.
Que dada la urgente necesidad de atender las emergencias ambientales provocadas por derrame de
hidrocarburos para evitar el riesgo que implican al medio ambiente, y para dar certidumbre en sus
acciones de restauracin, a quienes causen los derrames o a quienes sean contratados con el propsito
de restaurar los sitios afectados, he tenido a bien expedir la siguiente:
NORMA OFICIAL MEXICANA DE EMERGENCIA NOM-EM-138-ECOL-2002, QUE
ESTABLECE LOS LIMITES MAXIMOS PERMISIBLES DE CONTAMINACION EN SUELOS
AFECTADOS POR HIDROCARBUROS, LA CARACTERIZACION DEL SITIO Y
PROCEDIMIENTOS
PARA LA RESTAURACION
INDICE
1.

Objetivo

2.

Campo de aplicacin

3.

Referencias

4.

Definiciones

5.

Abreviaturas

6.

Lmites mximos permisibles

7.

Caracterizacin del sitio

8.

Procedimientos para la restauracin de suelo

9.

Evaluacin de la conformidad

10.

Grado de concordancia con normas internacionales

11.

Bibliografa

12.

Observancia de esta Norma

1. Objetivo
El objetivo de esta Norma Oficial Mexicana es establecer los lmites mximos permisibles de
contaminacin en suelos afectados por hidrocarburos, la caracterizacin del sitio y los procedimientos
para la restauracin.
2. Campo de aplicacin
Esta Norma Oficial Mexicana es de observancia obligatoria en todo el territorio nacional para quienes
lleven a cabo actividades en cuyo desarrollo se produzcan derrames de hidrocarburos, sus mezclas y/o
sustancias derivadas de los mismos.
3. Referencias
No existen al momento de elaboracin de la presente Norma Oficial Mexicana de Emergencia.
4. Definiciones
Para los efectos de esta Norma Oficial Mexicana se consideran las definiciones contenidas en la
Ley General del Equilibrio Ecolgico y la Proteccin al Ambiente, la Ley Federal sobre Metrologa y
Normalizacin, y las que a continuacin se mencionan:
4.1 Agente qumico oxidante
Es toda sustancia que produce una reaccin de oxidacin. El agente debe 1) proveer el oxgeno a la
sustancia para ser oxidada (en este caso el agente deber ser un oxgeno o contenerlo), o 2) recibir los
electrones que estn siendo transferidos a partir de la sustancia que est siendo oxidada.
4.2 Agente tensoactivo o surfactante
Compuesto qumico que reduce la tensin superficial de un lquido o la tensin interfacial de dos
lquidos o de un lquido y un slido, aumentando el contacto entre una fase orgnica hidrofbica y una
fase acuosa.
4.3 Cadena de custodia
Registro de las muestras, su transportacin y movimientos, desde su recoleccin hasta su ingreso
al laboratorio.
4.4 Caracterizacin del sitio
Determinacin cualitativa y cuantitativa de la distribucin de un parmetro. Cuando se refiere al suelo
se deber interpretar como la determinacin cualitativa y cuantitativa de la distribucin de una sustancia
en el mismo, expresada en trminos de la concentracin de la sustancia medida por un mtodo aprobado.
La determinacin puede ser completada con la determinacin de una o ms caractersticas de inters, las
cuales a manera enunciativa, mas no limitativa, pueden ser geolgicas, hidrogeolgicas, biolgicas y
qumicas.
4.5 Contingencia ambiental
Situacin de riesgo, derivada de actividades humanas o fenmenos naturales, que puede poner en
peligro la integridad de uno o varios ecosistemas.
4.6 Derrame
Cualquier descarga, liberacin, rebose, achique o vaciamiento de hidrocarburos u otras sustancias
peligrosas, en estado lquido, que se presenten en tierra y/o cuerpos de agua.
4.7 Dilucin de suelo contaminado
Accin de adicin de un material que se agrega especficamente para reducir la concentracin de uno
o ms contaminantes.
4.8 Efluentes
Descarga de contaminantes al ambiente, parcial o totalmente tratados o en su estado natural; este
trmino es generalmente usado para la descarga de aguas residuales a ros, lagos o cuerpos de agua
en general.
4.9 Emergencia ambiental

Evento o circunstancia indeseado, que ocurre repentinamente y que resulta en la liberacin no


controlada, incendio o explosin de una o varias sustancias peligrosas para el ambiente y/o la salud
humana, de manera inmediata o a largo plazo.
4.10 Entidades de acreditacin
La Entidad Mexicana de Acreditacin, A.C.
4.11 Hidrocarburos
Compuestos qumicos, constituidos principalmente por tomos de carbono e hidrgeno.
4.12 Laboratorio de Pruebas
El laboratorio de pruebas acreditado y aprobado conforme lo establece la Ley Federal sobre
Metrologa
y Normalizacin.
4.13 Ley
La Ley Federal sobre Metrologa y Normalizacin.
4.14 Lixiviado
Lquido proveniente de residuos, el cual se forma por reaccin, arrastre o percolacin y que contiene,
disueltos o en suspensin, componentes que se encuentran en los mismos residuos.
4.15 Mtodos Analticos
Los mtodos propuestos en el inciso 6 de esta Norma, mediante los cuales se harn los anlisis para
la caracterizacin de las muestras de los sitios contaminados por hidrocarburos.
4.16 Muestreo dirigido
Tipo de muestreo casustico que se lleva a cabo sobre determinados puntos, cuando se cuenta con
informacin previa del sitio, se conoce el producto derramado (normalmente uno solo) y se puede
determinar la extensin de la afectacin y el tiempo transcurrido desde el derrame.
4.17 Muestreo estadstico
Muestreo realizado conforme los mtodos matemticos establecidos, cuya funcin es dar certidumbre
a travs de observaciones determinadas, sobre diferentes parmetros para el total del universo.
4.18 Pasivo ambiental
Suelo, subsuelo, mantos freticos y/o cuerpos de agua, que fueron contaminados mediante un
proceso prolongado, cuya restauracin no se ha efectuado, debido a una o varias de las siguientes
condiciones: las dimensiones, las caractersticas especficas de la(s) sustancia(s) involucrada(s), el
elevado costo y/o la complejidad; pero que implican una obligacin de correccin de acuerdo al marco
legal vigente.
4.19 Residuos aceitosos
Mezclas de hidrocarburos o residuos de hidrocarburos de cadena larga. En esta clasificacin
encontramos entre otros, al petrleo crudo, combustleo, emulsiones y asfalto.
4.20 Restauracin
Es el conjunto de actividades tendientes a la recuperacin y reestablecimiento de las condiciones que
propician la evolucin y continuidad de los procesos naturales. En relacin con el suelo, se entiende como
el conjunto de acciones necesarias para recuperar y restablecer sus condiciones, con el propsito de que
ste pueda ser destinado a alguna de las actividades previstas en el programa de desarrollo urbano o de
ordenamiento ecolgico que resulte aplicable para el predio o zona respectiva. Para los propsitos de
esta Norma, se utiliza el trmino restauracin como sinnimo de remediacin, reversin, saneamiento,
limpieza, rehabilitacin y regeneracin.
4.21 Riesgo ambiental
La probabilidad de que las personas fsicas o morales, a travs de sus actividades, procesos
o accidentes durante los mismos, afecten adversamente a los ecosistemas, o el bienestar, integridad y
salud de la poblacin.
4.22 Sitio
Lugar, espacio, cuerpo de agua, instalacin o cualquier combinacin de stos, relacionados con
suelos contaminados por materiales y residuos peligrosos.
4.23 Suelo

Material no consolidado compuesto por partculas inorgnicas, materia orgnica, agua, aire y
organismos, que comprende desde la capa superior de la superficie terrestre hasta diferentes niveles de
profundidad.
4.24 Suelo contaminado
Aqul en el que se encuentran presentes uno o ms materiales o residuos peligrosos y que puede
constituir un riesgo para el ambiente y la salud.
4.25 Unidad de verificacin
La persona fsica o moral acreditada y aprobada conforme a la Ley, que realiza actos de verificacin.
4.26 Uso de suelo
Adaptacin ms o menos racional de la gestin de un territorio a las necesidades humanas.
4.27 Uso de suelo predominante
Uso de suelo o actividad cuyo desarrollo es congruente con las caractersticas y diagnstico ambiental
(aptitud territorial); responde a la estrategia de desarrollo definida por los planes de desarrollo de
ordenamiento territorial, para esa porcin del territorio; se pretende incentivar en funcin de las metas
estratgicas regionales o tiene un mayor grado de ocupacin de la unidad territorial.
4.28 Verificacin
La constatacin ocular o comprobacin mediante medicin y pruebas que se realizan para evaluar la
conformidad con esta Norma Oficial Mexicana.
5. Abreviaturas
5.1 BTEX
Benceno, tolueno, etilbenceno y xileno.
5.2 COATEA
Centro de Orientacin para la Atencin de Emergencias Ambientales.
5.3 DGMIC
Direccin General de Manejo Integral de Contaminantes de la SEMARNAT.
5.4 EMA
Entidad Mexicana de Acreditacin, A.C.
5.5 EPA (siglas en ingls)
Agencia de Proteccin al Medio Ambiente de los Estados Unidos de Norteamrica.
5.6 HTP
Hidrocarburos totales del petrleo.
5.7 HAP
Hidrocarburos aromticos polinucleares.
5.8 p.p.m.
Partculas por milln.
5.9 PROFEPA
Procuradura Federal de Proteccin al Ambiente.
5.10 SEMARNAT
Secretara de Medio Ambiente y Recursos Naturales.
6. Lmites mximos permisibles
6.1 Los productos asociados a los derrames de hidrocarburos para los que se establecen lmites
mximos permisibles de contaminacin en suelos se enlistan en la Tabla 1.
Tabla 1. Parmetros a analizar asociados a los hidrocarburos para los que se establecen lmites
mximos permisibles de contaminacin en suelos
Parmetro
Productos

HTP
Fraccin de
productos
aceitosos

HTP
Fraccin de
diesel

HTP
Fraccin de
gasolina

BTEX

HAP

Petrleo crudo
Combustleo
Emulsiones
Asfalto
Parafinas
Diesel
Turbosina
Keroseno
Aceites lubricantes
Vaselinas
Aceites combustibles
ligeros
Gasavin
Gasolvente
Gasolina magna
Gasolina premium
Gas nafta
Eter de petrleo
Ligroina
Thiner
Producto alquilado
Aromina

X
X
X
X
X

X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X

X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X

X
X
X
X
X
X
X
X
X
X

6.2 Los lmites mximos permisibles de contaminacin en suelos por hidrocarburos, medidos en mg/kg
(ppm), se presentan en la Tabla 2.
Tabla 2. Lmites mximos permisibles de contaminacin en suelos (valores referidos a base seca)
mg/kg (ppm)
Contaminantes

Gasolina
HTP
Benceno
Tolueno
Xilenos
Diesel
HTP
Benzo[a]pireno
Benzo[a]antraceno
Benzo[b]fluoranteno
Benzo[k]fluoranteno
Criseno
Productos aceitosos
HTP
Benzo[a]pireno
Benzo[a]antraceno
Benzo[b]fluoranteno
Benzo[k]fluoranteno
Criseno

Uso de suelo predominante1


Agrcola, forestal,
Residencial
Industrial
recreativo y de
comercial
conservacin

Mtodo
analtico (EPA)

200.00
20.00
40.00
40.00

200.00
20.00
40.00
40.00

500.00
50.00
100.00
100.00

8015B
8240*, 8260*
8240*, 8260*
8240*, 8260*

1,000.00
0.08
0.80
0.80
8.00
80.00

1,000.00
0.08
0.80
0.80
8.00
80.00

2,000.00
0.80
8.00
8.00
80.00
800.00

8015B
8310*, 8270*
8310*, 8270*
8310*, 8270*
8310*, 8270*
8310*, 8270*

1,000.00
0.08
0.80
0.80
8.00
80.00

1,000.00
0.08
0.80
0.80
8.00
80.00

2,000.00
0.75
7.50
7.50
75.00
750.00

418.1
8310*, 8270*
8310*, 8270*
8310*, 8270*
8310*, 8270*
8310*, 8270*

* Mtodos analticos alternativos


1

Para usos de suelo mixto, deber aplicarse la especificacin al menor valor de los usos de suelo involucrados.

7. Caracterizacin del sitio


7.1 Elementos de la caracterizacin
7.1.1 La caracterizacin del sitio deber contener los siguientes elementos:
a)

Estudios de campo del sitio.

b)

Muestreo y caracterizacin del sitio.

c)

Seleccin del equipo de muestreo apropiado.

d)

Seleccin del recipiente apropiado y conservacin de las muestras.

e)

Nmero de muestras.

f)

Responsabilidades de la empresa muestreadora.

g)

Identificacin de las muestras.

h)

Registro de la informacin del muestreo.

7.1.2 Estudios de campo del sitio


7.1.2.1 Deber verificarse la documentacin disponible acerca del sitio y del contaminante, a travs
del propietario del predio, de entrevistas a los vecinos sobre las actividades desarrolladas en el terreno,
de reportes geolgicos existentes, de planos geohidrolgicos y de informacin municipal existente del
sitio.
7.1.2.1 Con base en la revisin documental citada en el punto anterior, se debern realizar estudios
directos de estratigrafa y edafologa para determinar las condiciones reales del sitio a fin de poder
realizar estimaciones correctas y apropiadas sobre el posible comportamiento del contaminante en el sitio
afectado.
7.1.2.2 Estos estudios debern ser entregados a la PROFEPA para que cuente con elementos
tcnicos de anlisis.
7.1.2.3 Una vez conjuntada, revisada y evaluada dicha informacin, el responsable de la
contaminacin proceder a establecer la estrategia de muestreo.
7.1.3 Muestreo y caracterizacin del sitio
7.1.3.1 En el caso de eventos notificados como emergencias ambientales a PROFEPA, en los que se
conoce el producto derramado (normalmente uno solo), y se puede determinar la extensin de la
afectacin y el tiempo transcurrido desde la ocurrencia del evento, se podr aplicar el mtodo de
muestreo dirigido.
7.1.3.2 En el caso de sitios abandonados o pasivos ambientales, en los cuales se desconoce la
extensin y la profundidad de la afectacin, generalmente se tiene una mezcla de contaminantes y ha
transcurrido un lapso prolongado desde que se depositaron los contaminantes, se aplicar el muestreo
estadstico.
7.1.3.3 La metodologa debe incluir los puntos seleccionados de muestreo, la profundidad y el nmero,
volumen y tipos de muestras que habrn de tomarse.
7.1.4 Seleccin del equipo de muestreo apropiado
7.1.4.1 En la Tabla 3 se presenta una lista de equipo que se recomienda utilizar para la toma de
muestras slidas.
Tabla 3. Equipo para toma de muestras
Tipo de muestreador
Aplicacin
Cuchara o
Se podr aplicar este tipo de
cucharones
dispositivos
para
el
muestreo
de suelos hasta 0.3 metros de
profundidad o cuando se deba
realizar la toma de muestras en fondo
de fosas o paredes de fosas.

Observacin
Este tipo de dispositivo de muestreo,
solamente se deber aplicar en
muestreos someros o como elemento
auxiliar en la coleccin de muestras
extradas con barrenas.

Barrenas (auger) de Unicamente se podr utilizar este


cualquier tipo
equipo cuando las condiciones
particulares del sitio (por ejemplo,
manto rocoso cercano a la superficie)
impidan el uso de los nucleadores.
Por ello, se debe realizar la
descontaminacin de la barrena antes
de la toma de muestra y esta muestra
no podr ser utilizada para la
determinacin
de
compuestos
orgnicos voltiles (htp fraccin
gasolina y BTEX).
Nucleadores
Uso general.
Penetrmetros

Podrn ser utilizados para el


muestreo de cualquier tipo de
contaminante, pero previo a su uso se
debern descontaminar.

Tubo Shelby

Podrn ser utilizados para el


muestreo de cualquier tipo de
contaminante, pero previo a su uso se
debern descontaminar.

Nucleadores por
empuje directo

Uso general.

No existe restriccin en cuanto al tipo de


suelo y profundidad, solamente se
restringe su uso en funcin del
compuesto que se muestra.

Los nucleadores podrn ser utilizados


con tubos (liners) y tapas de tefln.
El transvasado de la muestra de suelo al
recipiente se deber realizar con
guantes de ltex o equivalentes. Cuando
se utilice para gasolina y compuestos
orgnicos voltiles, la operacin deber
realizarse inmediatamente.
El trasvase de la muestra de suelo al
recipiente se deber realizar con
guantes de ltex o equivalentes. Cuando
se utilice para gasolina y compuestos
orgnicos voltiles, la operacin deber
realizarse inmediatamente.
Los nucleadores debern ser utilizados
con tubos (liners) y tapas de tefln.

2. Las muestras de suelo no podrn ser recolectadas de las barras o extensiones de la barrena, ya sea helicoidal
(slida o hueca), extensiones slidas o de las uniones de las extensiones; es decir, solamente podrn ser tomadas de
la seccin de corte de la barrena.

7.1.5 Seleccin del recipiente apropiado y conservacin de las muestras


7.1.5.1 Para la seleccin del recipiente apropiado y la preservacin de las muestras deben observarse
las especificaciones contenidas en la Tabla 4; estos recipientes debern ser nuevos o bien debern haber
sido aprobados por el laboratorio responsable del anlisis.
Tabla 4. Recipientes para las muestras, conservacin y tiempo mximo de retencin por tipo
de parmetro
Parmetro
Http
Fraccin aceites
BTEX
HTP
Fraccin Gasolina
Http
Fraccin Diesel
HAP

Tipo de recipiente
Frasco de vidrio boca ancha,
con tapa y sello de tefln.
Vial de vidrio, con tapa y sello
de tefln.
Liner de tefln (sumistro
original del fabricante del
equipo de muestreo, si se
emplea nucleador) con tapas
de tefln.
Plstico o vidrio

Temperatura de
preservacin
Enfriar a 4C

Tiempo mximo de
retencin2
14 das

Enfriar a 4C
Enfriar a 4C

7 das
14 das

Enfriar a 4C

14 das

Enfriar a 4C

14 das

Potencial de
No aplica
Anlisis de inmediato
hidrgeno
2 El tiempo mximo de retencin o tiempo mximo de almacenamiento se refiere al lapso que no
deber ser excedido desde que se toma la muestra hasta que se realiza la extraccin del analito de
inters.
7.1.6 Nmero de muestras
7.1.6.1 El nmero de muestras para garantizar la cobertura fsica, en extensin y profundidad, del
suelo contaminado se determinar de acuerdo con los siguientes lineamientos:
7.1.6.1.1 Se deber tomar una muestra simple (no compuesta) de suelo superficial (intervalo de
profundidad 0.00 a 0.15 m) por cada 100 m2 de rea afectada. La toma de una muestra de suelo

superficial por cada 100 m2 no es limitativa, por lo que podr tomarse ms de una muestra superficial por
cada 100 m2.
7.1.6.1.2 Adems de las muestras superficiales, se debern tomar en cada uno de los puntos en los
que se hayan tomado cada una de las muestras superficiales, una muestra simple por cada metro de
profundidad que abarque desde los 0.15 m inmediatos anteriores a cada metro, hasta llegar a puntos
donde el suelo est por debajo del lmite mximo permisible establecido.
7.1.6.1.3 En los casos en que por las particulares circunstancias del sitio afectado, la extensin, los
intervalos de profundidad o la cantidad de muestras anteriormente sealadas sean modificados, se
deber justificar tal situacin en el cuerpo de la propuesta de caracterizacin, con elementos tcnicos
verificables.
7.1.6.1.4 Como un procedimiento de aseguramiento de calidad, se tomar una muestra duplicada por
cada cinco muestras tomadas.
7.1.6.1.5 Cuando se observe en la inspeccin que la afectacin involucra lquidos que por su
viscosidad tengan apariencia de slidos, o cuando se trate de slidos que no estn percolndose o
infiltrndose, slo se tomarn muestras superficiales.
7.1.6.1.6 Para disminuir la posibilidad de contaminacin cruzada, el equipo de toma de muestras
deber ser cambiado por uno limpio o lavado con un detergente adecuado despus de que la muestra
haya
sido tomada.
7.2 Responsabilidades de la empresa restauradora
7.2.1 Seleccionar los equipos y trajes individuales de proteccin personal contra los riesgos de origen
qumico, biolgico y fsico que puedan presentarse durante el muestreo.
7.2.2 Proporcionarlos a todos los participantes, y
7.2.3 Verificar su correcto uso, mantenerlos, manejarlos y, en su caso, descontaminarlos, debiendo
contar con registros de dichas operaciones.
7.3 Identificacin de las muestras
7.3.1 Cada muestra deber ser etiquetada y sellada apropiada e inmediatamente despus de ser
tomada. En la etiqueta debe incluirse la profundidad a la que corresponden las muestras, el nmero de
muestra, fecha y hora de recoleccin, punto de muestreo y nombre del tcnico que lo realiz. Los sellos
con papel adhesivo debern estar debidamente firmados por quienes intervienen en la diligencia.
7.4 Registro de la informacin del muestreo
7.4.1 Toda la informacin pertinente con respecto al muestreo deber quedar asentada en una
bitcora foliada, la cual ser resguardada por cinco aos para cualquier aclaracin posterior. Deber
registrarse como mnimo la siguiente informacin:
a)

Descripcin y localizacin del sitio contaminado.

b)

Localizacin de los puntos de muestreo.

c)

Observaciones en campo.

d)

Tipo de contaminante presente.

e)

Nmero y volumen de las muestras tomadas.

f)

Fecha y hora de recoleccin.

g)

Nmero de identificacin de la muestra.

h)

Distribucin de la muestra.

i)

Mediciones realizadas en campo.

j)

Croquis con referencias de los puntos de muestreo.

7.4.2 En cualquier caso se debe anotar la informacin necesaria y suficiente para que otra persona
pueda reconstruir la situacin de muestreo.
7.5 Llenado y registro de la cadena de custodia
7.5.1 Para documentar formalmente la transportacin y movimientos de las muestras desde el
momento de su recoleccin hasta su ingreso al laboratorio, se debe llevar un registro de cadena de
custodia, mismo que tendr que acompaar a las muestras.

7.5.2 La cadena de custodia debe apegarse a los procedimientos autorizados a los laboratorios
acreditados para realizar pruebas conforme a los mtodos analticos establecidos en el numeral 6.2
de esta Norma.
7.6 Envo de las muestras al laboratorio
7.6.1 Cuando se enve una muestra al laboratorio, deber ser empacada de acuerdo a lo establecido
en la Tabla 4 y se deber verificar que llegue ntegra y con la temperatura establecida en la misma tabla.
7.6.2 Todos los paquetes debern estar acompaados por la cadena de custodia de anlisis y el
registro de la cadena de custodia, las cuales deben ser legibles en cada uno de los paquetes,
adicionalmente deber contener la direccin completa de la persona que manda el envo y la direccin del
laboratorio
que
recibe
las muestras.
8. Procedimientos para la restauracin de suelos en caso de emergencias ambientales.
8.1 Notificacin
8.1.1 Las emergencias ambientales se notificarn a la PROFEPA de inmediato, y se ratificarn dentro
de los tres das siguientes al da en que haya ocurrido el siniestro.
8.1.2 El Centro de Orientacin para la Atencin de Emergencias Ambientales (COATEA),
perteneciente a la PROFEPA, est facultado para proporcionar informacin sobre las caractersticas de
riesgo y las medidas a considerar sobre la(s) sustancia(s) involucrada(s) en el evento.
8.1.3 La PROFEPA verificar en el lugar de la emergencia las primeras acciones para su control.
8.1.4 La PROFEPA levantar un acta de inspeccin a efecto de circunstanciar los hechos u omisiones
detectados en el sitio.
8.2 Muestreo y caracterizacin del sitio
8.2.1 El muestreo para la caracterizacin del sitio se llevar a cabo conforme qued establecido en los
numerales 7.1.3 a 7.1.6 y 7.3 a 7.6 de esta Norma.
8.2.2 Se deber dar aviso por escrito a la PROFEPA del inicio de los trabajos de caracterizacin con
cinco das de anticipacin.
8.2.3 Los anlisis de las muestras debern ser efectuados por un laboratorio acreditado para realizar
pruebas de acuerdo a los mtodos analticos establecidos en el numeral 6.2 de esta Norma.
8.2.4 Para determinar si se requiere de la restauracin de un suelo contaminado por hidrocarburos se
debern considerar los lmites mximos permisibles de contaminacin de suelos establecidos en el
numeral 6.2 de esta Norma.
8.2.5 En el caso de que las pruebas de laboratorio indiquen que existe contaminacin de agua
(superficial y/o subterrnea) la CNA proceder a la aplicacin de los procedimientos establecidos en el
Manual de Atencin de Emergencias Hidroecolgicas Relacionadas con las Aguas Nacionales
Continentales.
8.2.6 En el caso de que los resultados de los anlisis de las muestras tomadas en la caracterizacin
se encuentren niveles de contaminacin iguales o menores a los lmites mximos permisibles de
contaminacin en suelos, establecidos en el numeral 6.1 de esta Norma, no sern necesarios los trabajos
de restauracin; sin embargo, la PROFEPA podr solicitar la restitucin de vegetacin o la reparacin de
algn otro dao ocasionado a los recursos naturales.
8.3 Restauracin del sitio
8.3.1 En el caso de que los resultados del laboratorio se encuentren por arriba de los lmites mximos
permisibles de contaminacin en suelos, establecidos en el numeral 6.1 de esta Norma, el responsable de
la contaminacin, deber presentar a la Direccin General de Manejo Integral de Contaminantes de
la SEMARNAT, una propuesta de restauracin de suelo en la que se indiquen, entre otras cosas, la
metodologa por seguir y el tiempo en que se llevar a cabo.
8.3.2 Las observaciones sobre la propuesta de restauracin a que se refiere el numeral 8.3.1 de esta
Norma, que, en su caso, formule la DGMIC, deber comunicarlas al responsable de la contaminacin
durante las 24 horas siguientes cuando se trate de una emergencia ambiental, o en los 10 das
posteriores
en otros casos.
8.3.3 En la propuesta de restauracin se debern tomar en cuenta los siguientes criterios:

8.3.3.1 Considerar el control o tratamiento de emisiones y efluentes, en caso de que los


contaminantes se puedan transferir de una matriz a otra.
8.3.3.2 No generar mayores disturbios ambientales que los producidos por el derrame. Queda
prohibida la dilucin de suelo contaminado, entendiendo por ello la mezcla de suelo contaminado con
suelo limpio o menos contaminado.
8.3.3.3 Cuando se utilicen en el lavado de suelos frmulas comerciales, agentes tensoactivos u otros
compuestos como sustratos, se deber cuidar que los productos resultantes de las reacciones no
representan un riesgo mayor al ambiente y a la preservacin del hbitat natural de las especies de flora y
fauna. No debern utilizarse agentes qumicos oxidantes como sustitutos de procesos de carcter
biolgico. Cuando las actividades de limpieza impliquen la construccin de obra civil o hidrulica adicional
a la existente se deber presentar una manifestacin de impacto ambiental.
8.3.4 Solamente en aquellos sitios en los que el responsable de la contaminacin demuestre mediante
testimonios documentales que no es factible cumplir con los lmites mximos permisibles de
contaminacin en suelos, establecidos en los numerales 6.1 y 6.2 de esta Norma, y que los niveles
alcanzados no representan riesgo al medio ambiente y/o a la preservacin del hbitat natural de las
especies de flora y fauna, la DGMIC podr autorizar por excepcin, niveles de limpieza diferentes.
8.3.5 El responsable de la contaminacin comunicar a la PROFEPA, con 10 das hbiles de
anticipacin, el trmino de los trabajos de restauracin del suelo, para que el personal de sta asista al
sitio en un plazo no mayor de 10 das hbiles a fin de supervisar la toma de muestras en los puntos que,
bajo los criterios tcnicos establecidos en esta Norma, seleccionen los inspectores de la PROFEPA. Las
muestras debern enviarse a un laboratorio acreditado ante una entidad mexicana de acreditacin para
realizar pruebas de acuerdo a los mtodos analticos establecidos en el numeral 6.2 de esta Norma.
8.4 Liberacin del sitio
8.4.1 Una vez recibidos en la PROFEPA los resultados de los anlisis de las muestras del suelo de
acuerdo a lo establecido en el numeral 8.2.1 de esta Norma, sta analizar dicha informacin y
determinar lo conducente, en un plazo no mayor a diez das hbiles, pudiendo dar por concluidos los
trabajos de restauracin, siempre y cuando no haya contaminacin de agua superficial, subterrnea o
sedimentos, en cuyo caso, la PROFEPA se deber coordinar con la Comisin Nacional del Agua para, de
conformidad, dar por terminados los trabajos de restauracin.
9. Evaluacin de la conformidad
9.1 La evaluacin de la conformidad de la presente Norma Oficial Mexicana de Emergencia ser
realizada por la SEMARNAT.
9.2 En el caso de lo dispuesto en los numerales 7.1.3.1 a 7.1.3.3, 7.1.4.1, 7.1.5.1, 7.1.6.1 a 7.1.6.6,
7.2.1 a 7.2.3, 7.3.1, 7.4.1, 7.4.2, 7.5.1, 7.5.2, 7.6.1 y 7.6.2, la evaluacin de la conformidad podr ser
realizada por los laboratorios acreditados ante una entidad mexicana de acreditacin, en los trminos de
la Ley Federal sobre Metrologa y Normalizacin.
10. Grado de concordancia con normas internacionales
Esta Norma no coincide con ninguna Norma Internacional por no existir Norma Internacional sobre el
tema que integre las disposiciones tcnicas y de procedimientos que se establecen en la presente Norma.
Sin embargo, sta se elabor con base en mtodos analticos y fundamentos tcnicos y cientficos
reconocidos internacionalmente.
11. Bibliografa
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para la Evaluacin de Exposiciones. FR 57 (104) 22888-22938. 1992.
Agencia de los Estados Unidos para la Proteccin al Medio Ambiente (EPA). Metas Preliminares para
la Regin IX (PRGs). 1999. http://www.epa.gov/region09/waste/sfund/prg.
Agencia de los Estados Unidos para la Proteccin al Medio Ambiente (EPA). Remediaciones
Supuestas. Caracterizacin del Sitio y Seleccin de Tecnologas para Sitios Contaminados con
Componentes Orgnicos Voltiles en Suelos. Referencias Rpidas. Oficina de Emergencias y Divisin de
Control 5203G de Respuestas de Remediacin en Sitios Peligrosos.
Grupo de Trabajo para establecer Criterios sobre Hidrocarburos Totales del Petrleo. Anlisis de
Hidrocarburos del Petrleo en el Medio Ambiente (Volumen 1) Amherst Scientific Publishers. Amherst,
Massachusetts. 1998.

Grupo de Trabajo para establecer Criterios sobre Hidrocarburos Totales del Petrleo. Evaluacin de
Riesgo a la Salud de Sitios Liberados de Petrleo: Implementacin de los Acercamientos del Grupo
de Trabajo (Volumen 4) Amherst Scientific Publishers. Amherst, Massachusetts. 1997.
Grupo de Trabajo para establecer Criterios sobre Hidrocarburos Totales del Petrleo. Seleccin de
fracciones representativas de HTP basada en consideraciones de transporte y destino. (Volumen 3)
Amherst Scientific Publishers. Amherst, Massachusetts. 1997.
Grupo de Trabajo PROFEPA-SEMARNAT Procedimiento para Atencin de Emergencias Ambientales,
Asociadas con Sustancias Qumicas, Caracterizacin y Restauracin de Suelos, Documento Interno.
Mxico, mayo de 2002.
Ley General del Equilibrio Ecolgico y la Proteccin al Ambiente, 17a. Edicin. Porra. Mxico. 1999.
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Reglamento a la Ley General de Equilibrio Ecolgico y la Proteccin al Ambiente en Materia de
Residuos Peligrosos. Publicado en el Diario Oficial de la Federacin el 25 de noviembre de 1998.
Mxico, 1998.
Reglamento de la Ley de Aguas Nacionales. Publicado en el Diario Oficial de la Federacin el 12 de
enero de 1994. Mxico, 1994.
Saval, Susana. Remediacin y restauracin. En: Pemex Ambiente y Energa, Los Retos del Futuro,
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Saval, Susana. La Biorremediacin como alternativa para la limpieza de sitios contaminados con
hidrocarburos. En Memorias del Seminario Internacional sobre Restauracin de Sitios Contaminados,
Instituto Nacional de Ecologa, Mxico, 26 al 29 de mayo, Mxico. 1997. Pgs. 141-147.
Saval, Susana. Exitos y fracasos de la remediacin de suelos. En: Conservacin y Restauracin de
Suelos, UNAM, PUMA, SEMARNAP, Editores: Christina Siebe et al., Mxico,1999. Pgs. 511-526.
Seoanez Calvo, Mariano et al. Contaminacin del suelo: estudios, tratamiento y gestin. 1996.
Ed. Mundi-Prensa, Barcelona.
Total Petroleum Hydrocarbon Criteria Working Group. Human Health Risk-based Evaluation of
Petroleum Release Sites: Implementing The Working Group Approach (Volume 4). Amherst Scientific
Publishers. Amherst, Massachusetts. 1997.
Seoanez Calvo, Mariano. El gran
Mundi-Reusa/Coediciones. Mxico, 1997.

diccionario del

medio

ambiente

la contaminacin.

12. Observancia de esta Norma


La vigilancia del cumplimiento de la presente Norma Oficial Mexicana de Emergencia corresponde a la
Secretara del Medio Ambiente y Recursos Naturales por conducto de la Procuradura Federal de
Proteccin al Ambiente y la Comisin Nacional del Agua, en el mbito de sus respectivas atribuciones,
cuyo personal realizar los trabajos de inspeccin y vigilancia que sean necesarios. Las violaciones a la
misma se sancionarn en los trminos establecidos en la Ley General del Equilibrio Ecolgico y la
Proteccin al Ambiente, Ley de Aguas Nacionales y dems disposiciones legales aplicables.
TRANSITORIO
UNICO.- La presente Norma Oficial Mexicana de Emergencia, entrar en vigor el da siguiente a su
publicacin en el Diario Oficial de la Federacin.
Mxico, Distrito Federal, a los dos das del mes de agosto de dos mil dos.- El Subsecretario de
Fomento y Normatividad Ambiental de la Secretara de Medio Ambiente y Recursos Naturales, y
Presidente del Comit Consultivo Nacional de Normalizacin para la Proteccin Ambiental, Cassio
Luiselli Fernndez.- Rbrica.

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