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BALANCE DE MATERIA

EN BIOPROCESOS

adapatricia33@yahoo.es

ALREDEDORE
S

ALREDEDORES
SISTEMA

Sistema cerrado
proceso discontinuo

Sistema abierto
proceso continuo

Sistema se encuentra separado


os alrededores,
de l
los cuales son el resto de
universo.

El limite del sistema puede ser real como las paredes de un ferment
imaginario.

SISTEMA ESTACIONARIO
Cuando todas las propieadesdel sistemacomo son
temperatura,
presion
, concentracion
, volumen,
masa,etc no
varianconel tiempo
.

ECUACION GENERAL DE BALANCE DE MATE


Entrada
- salida + generacin
consumo = acumulacin

Sistema continuo en estado estacionario


Cuando Acumulacin = 0
Entrada + generacin = Salida + consumo

CUANTIFICACION DEL
CRECIMIENTO MICROBIANO

Estudiocuantitativo de
cint
la icade
ferment
aciones
.
Mtodosexperimentales sencillos para
determinar el crecimiento de poblacion
microbianas
Considerar el modo
reproduccin
de
de
las clulas

Las
clulas
procariticas
bacterianas se reproducen por
fisin binaria sin que sea posible
diferenciar una clula madre de
una clula hija.
Edad mxima c/clula es el
lapso comprendido entre dos
replicaciones
sucesivas
Edad de cultivo es el tiempo
transcurrido desde la inoculacin.

Las bacterianas se presentan en


forma individual o en
asociaciones dbiles de pocos
individuos,pudiendo ser
dispersadas homogneamente
en el medio de cultivo
Las eucariticas como
levaduras se desarrollan en
clulas individuales fcilmente
dispersables que se reproducen
por gemacin produciendo una
clula hija y una clula
madre.

Cultivode levaduras es heterogneo e


cuanto a la edad y por lo tanto el
estado fisiolgico de las clulas que
componen
.
Los hongos por crecimiento apical
formando hifas
Caractersticas
reolgicas
nonewtonianas
.

Mtodos de cuantificacin
del crecimiento microbian

Mtodo

Fundamento

Observaciones

Conteo directo N
Recuento en celda de clulas
Requiere clulas individuales
Nefelometra
N.M.P.
Peso Seco
Turbimetra

Conteo directo No RCI Influencias de


de clulas
condiciones de incubacin
Dispersin de luz Requiere
cultivo
homog. y traslcido
Estadstico
RCI y medio limpio
RCI y medio limpio

Vol. empacado

Transmisin de
luz
Centrifugacin

Fsico Qumicos

Variados indirectos

, pH, anlisis de
Comp. celulares, etc

Poco preciso

las

Balance de masa Conservacin de


masa

Gran cantidad de datos


analticos
o

dX =
.X
dt
X dX
t
= dt
.0
X0 X

.t
= X
.e
o

(lnX)
1
dX
d(lnX)
=
=
=
t
X. dt
dt

(lnX
)
= 1 dX = d(lnX) =
t
X . dt
dt

X = X. e.t
o

Ln X

Se estudia el crecimiento celular de un microorganismo


obteniendo los siguientes datos
t

dias

celulas/ml

4.50E+05

1.77E+06

2.5

2.13E+06

3.55E+06

0.2

5.20E+05

0.5

6.50E+05

3.5

4.02E+06

8.10E+05

3.77E+06

1.5

1.22E+06

4.5

2.20E+06

a) Calcular la velocidad especfica del crecimiento


celulardurante la fase de crecimiento
b) El tiempo de duplicacin del cultivo

4.5E+06

4.0E+06

3.5E+06

3.0E+06

2.5E+06

15
14.5
14

Ln (X)

13.5

15.5

2.0E+06

1.5E+06

1.0E+06

5.0E+05

0.0E+00

13

ln X = 13.01+0.67 t
R2 = 0.99

12.5
Estequiometra
del
0
0.5 1
1.5 2
2.5
crecimientoTiempo (dias)

El crecimiento de las clulas obedece la ley de


Conservacin de Energa y Materia

3.5

Los tomos de (C), (O), (N) y otros elementos


consumidos durante el crecimiento se incorporan a las
nuevas clulas o se expulsan como productos
SUSTRATO Fuente de
N

Biomasa
o clulas

CwHxOyNz + aO2 + bHgOhNi c CH


ON+dCO
2O
2+ eH
W=6, X=12, Y=6 y Z=0

a, b, c, d y e

(I)

Coef. Estequiom.

Aprox. macroscpica C,H,O y N


C
50
Na

95%
1

20

Ca

0.5

14

Mg

0.5

Cl

0.5

P
S

Fe

0.2

Otros

0.3

Composicin de la bacteria Escherichia coli

Calculo de Coeficientes
CwHxOyNz + aO2 + b HgOhNi c CHON +dCO2 + eH2O
Balance de C
Balance de H
Balance de O
Balance de N

:
:

w =

x+bg

c + d
c + 2e

y + 2a + bh = c + 2d + e
z + bi = c

COEFICIENTE MolesdeCO2 producidos=d


RESPIRACION

(i)
:

ii)

(iii)
(iv)

(I)

a
b
c
d
e

RQ=
MolesdeO2 consumidosa
Debemos estar seguros que el sustrato no se utiliza para sintetizar
otros productos extracelulares que no sean CO2 y H2O

Resolviendo el sistema de ecuaciones Lineales


Las bacterias tienden a tener contenidos de
nitrogeno ligeramente mayores (11-14%).
Los hongos tiene (6.3 9%) Cuando no se
dispone de la composicin puede utilizarse como
formula general : CH1.8O0. 5N1.2 este es el peso molecular
medio de la biomasa basado en los contenidos C,H,O,N

es por lo tanto

24.6,

aunque existe normalmente un 5

- 10% de ceniza residual que no se incluye en la formula.

14
12
10
s [g/l
C{elula

8
6
4
2
0

y = -0.461x + 11.675
R2 = 0.9999

Sustrato [g/l]

Rendimiento de biomasa

( Yx/s)

DURANTE el CRECIMIENTO existe una relacin lineal


entre [Biomasa] producida y el [Sustrato] consumido
g

clulasproducida MW
Yx/s
Y =c Clulas x/s
MWSustrato
tratoconsumido

Yx/s = k durante el crecimiento, su valor deter. experim.


puede utilizarse para calcular el coef. estequiom. C
Mw = peso molecular.
Para utilizar esta ecuacin el sustrato no se debe utilizar
para sintetizar otros productos que no sean CO2 y H2O.

Estequiometra del

(II)

producto

CwHxOyNz + aO2+ b HgOhNi cCHON


+dCO2+eH 2O+fCjHk OlNm
Fuente de N
Biomasa
Producto
Rendimiento de producto a partir del sustrato: Yp/s

SUSTRATO

g producto formado
Yp/s =
g
sustrato consumido

MW
Y= f

P roducto

MW

p/s
Sustrato

Se debe asegurare de que el sistema


experimental utilizado para medir Yp/s
corresponde a la ecuacin (II)
No puede aplicarse a la produccin
metablica secundaria como la fermentacin
de la penicilina
Formacin de producto debe estar asociado
directamente con el crecimiento celular
Balance de electrones
y grado de reduccin

[H2O]= k

Balances de H y O pueden presentar dificultades


Conservacin de potencia reductora o electrones
disponibles
Si no se conoce la composicin de las celulas el B
puede tomarse como 4.2

Electrones disponibles
Al nmero de electrones disponibles
para transferir al O2 en la combustin del
sustrato a CO2, H2O y compuestos que
contengan nitrgeno

Se calcula a partir de la valencia de su elemento

-2

6
-3

NH3

N2

NO3

CwHxOyNz + aO2+ b HgOhNi cCHON


+dCO2+eH2O+fCjHkOlNm

Se define como el nmero de equivalentes de electrones disponibles


en aquella cantidad de materia que contenga 1 g tomo de carbono
Origen

Frmula

Biomasa

CHON

Sustrato

CwHxOyNz

Producto

CjHkOlNm

# de electrones
disponibles

4 + - 2 - 3
4w + x - 2y - 3z
4j + k - 2l 3m

Grado de
reduccin

4+ -2-3
(4w + x 2y-3z)/w
(4j + k - 2l - 3m)/j

Composicin elemental y grado de


reduccin para algunos microorganis
(en relacin al3)NH

Demanda terica de oxigeno

w s 4 a = c B +f j p

(1)

a = ( w s - c B - f j p)

(2)

La Ec.(2) es muy til porque si se conoce el microorganismo


(B), el sustrato (w y s) y el producto (j y p) involucrados en el
cultivo celular, y el rendimiento de biomasa (c ) y de producto (f),
la demanda de oxgeno (a) puede calcularse rpidamente.
a puede determ. resolviendo los coef. Esteq.de la ecuacin (II).
La ec. (2) permite una evaluacin ms rpida y no es necesario
conocer las cantidades de NH3, CO2 y H2O involucrados.

BALANCE
DE
MASA
Y
ENERGIA
Reparto de electrones disponibles en el sustrato
Rendimiento mximo posible.

Demanda terica de oxigeno

+
+ (a) est directamente
La
demanda
B de oxgeno
relacionado
con los electrones disponibles
w. s w. s (B) (P)
O2 es el sustrato limitante en las fermenta
Fraccion de e
aerbicas
e

4a
w. s

(s)

fraccin de
disponibles transf
desde el Sust al O2
w
cmax =
s

fraccin de e

disponibles transf

transferidos al
Producto a

la Biomasa

w como
Cuando
existe
sntesis
d
e
producto,
B
fmax =
el representado
por la ecuacin
s(II) el
c f.j. pbalance
= 1 deelectrones
es:
j p

el rendimiento
mximo
si todos los e disponibles de producto en se
utilizaran para la sntesis ausencia de sntesis de
de biomasa B = 1
biomasa
Rendimientos termodinmicos mximos de
biomasa

Requerimientos
nutricionales del
Medio de Cultivo

para la construccin de una nueva clula esta


contenida en los cromosomas.
La materia debe ser suministrada a travs de los
componentes del medio de cultivo.
La E se obtiene del catabolismo de la fuente de C de
cultivo.
Crecimiento microbiano una ecuacin qumica.

C, H, O y N y Mg, S, P,Ca, Na y K

Otros compuestos a niveles muy bajos y deben ser


suministrados como compuestos aptos para ser
metabolizados.
La fuente de C: Carbohidrato-orgnico, CO2, CO3-2
HCO3-1 (caso de clulas quimioautotrficas o
fotosintticas).
La fuente de N : Amonio, nitrgeno amino de
aminocidos y protenas, rea, nitrato o nitrgeno
elemental

Medios complejos

Son formulados en base a desechos, subproductos y


extractos naturales.
la melaza, licor de maceracin de maz, extracto de
levadura y otros

Su composicin qumica es compleja y variable.


Contiene varias fuentes de cada elemento.
Pueden requerir ser suplementados con compuestos
que proporcionen cantidades adicionales de algunos
elementos, tales como, N, Mg y P
Muy utilizados en microbiologa bsica (taxonoma,
fisiologa y gentica), microb. analtica, produccin de
algas, alimentos, suelos y en fermentaciones
industriales

Componentes de medios complejos


industriales

a nivel industrial
Baratos Mejores rendimientos

Medios definidos
Se formulan en base a compuestos puros,
tales como la glucosa, sulfato de amonio,
metionina, fosfatos, etc
composicin
qumica es conocida
y
reproducible.
fuentes de cada elemento y los nutriente
esenciales que pueden ser requeridos.
investigacin
y desarrollo de Proceso de
fermentacin.
permiten un mejor control de las condiciones
ambientales de crecimiento y produccin.
resultan ms productivas cuando se utilizan
medios definidos.

Ejemplo de medios definidos

Ejercicios resueltos de Balance


de Materia Problema 1

Continua.

Ejercicios resueltos de Balance


de Materia Problema 1

Ejercicios resueltos de Balance


de Materia Problema 1

Corrida del Programa

Ejercicios resueltos de Balance


de Materia Ejercicio de Balance
resuelto en Excel

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