Clulas HEp-2

Clulas HEp-2 expuestas a autoanticuerpos humanos dirigidos

contra los lamentos de actina y marcadas con un anticuerpo
murino anti IgG humana conjugado con isotiocianato de uorescena.

Inmunouorescencia indirecta sobre clulas HEp-2. Los anticuerpos uorescentes revelan los anticuerpos antinucleares de un
paciente con LES.

Las clulas HEp-2 (segn la investigacin original de

Toolan es un acrnimo de Human Epidermoid carcinoma
strain #2,[1] aunque actualmente se utiliza tambin segn
la connotacin Human Epithelioma) son un tipo particular de clulas de cultivo neoplsicas inmortalizadas que
se utilizan en investigacin cientca y como sustrato en
varios tests comerciales para anticuerpos antinucleares.

xidasa, demostrando que se trata de un carcinoma epidermoide. Y se ha demostrado por medio de PCR que
presentan secuencias de ADN pertenecientes al HPV, el
virus responsable de la transformacin maligna de las clulas HeLa originales.[5][6]

2 Uso en diagnsticos inmunolgicos

Origen de la lnea celular

Hasta hace relativamente poco tiempo se crea que clulas originales provenan de un tumor metastsico nodular de laringe; extirpado en el ao 1952 de un paciente masculino de 57 aos de edad que padeca cncer de
garganta. Las clulas quirrgicamente removidas fueron
posteriormente implantadas en ratas inmunosuprimidas
por irradiacin con rayos X y cortisona, para nalmente
ser establecidas en cultivo celular.[2][1][3][4]
Sin embargo investigaciones ms recientes, demuestran
que en realidad las clulas HEp2 contienen marcadores
cromosmicos de HeLa, y que por lo tanto son una cepa
derivada de esta lnea celular, surgida posiblemente como producto de una contaminacin cruzada durante las
primeras etapas del cultivo. Dentro de estos estudios se
ha establecido sobre la base de anlisis de isoenzimas,
marcadores cromosmicos HeLa, y huellas dactilares del
ADN que pertenecen al linaje HeLa. Las clulas son positivas para queratina por la tcnica de la inmunopero- Patrn de uorescencia moteado
1

2 USO EN DIAGNSTICOS INMUNOLGICOS

Hasta el da de hoy, la deteccin de autoanticuerpos por

medio de clulas HEp2 sigue manteniendo un rol central.
En casos en que se sospecha una enfermedad autoinmune, el ensayo sobre clulas HEp2 es el mtodo de cribado
recomendado, el cual adems tiene una excelente relacin benecio/costo y permite un diagnstico diferencial
de alta calidad entre varias enfermedades autoinmunes.
Cualquier resultado positivo, es seguido por lo general de
una batera de determinaciones en etapas, las cuales, dependiendo de la reactividad que presenten los anticuerpos
frente a HEp2, pueden incluir otras pruebas inmunolgicas tales como ELISA para anticuerpos individuales, o
pruebas de inmunoblot.
Los cultivos celulares, o los cortes histolgicos de tejidos
presentan a los antgenos relevantes en su ambiente natural, adems de que permiten la determinacin de mltiples anticuerpos simultneamente con una alta sensibilidad. La deteccin de autoanticuerpos por medio de clulas HEp2 provee mucha ms informacin que una simple
seal, positiva o negativa. Muchos anticuerpos presentan
patrones de uorescencia caractersticos, (homogneo,
granular, nucleolar, punteado, citoplasmtico) que permiten la diferenciacin en varios grupos de autoanticuerpos. En especial para la determinacin de anticuerpos antinucleares (ANA), las clulas HEp2 de cultivo proveen
una mayor sensibilidad que los cortes histolgicos de tejidos de mamferos. Los diferentes patrones de uorescencia son fcilmente discernibles en la monocapa de clulas
HEp2, mientras que son difciles de apreciar en los cortes
de tejido de hgado y rin de rata.[7]

2.1

Ventajas y desventajas

medad autoinmune. Se han encontrado ttulos de AANs

elevados en aproximadamente el 13% de individuos sanos. En estos individuos, los ttulos tienden a ser bajos
(<1:80 en el 87% del grupo control). En contraste la mayor parte de los que padecen una enfermedad autoinmune
exhiben ttulos de ANAs elevados ( 1:80). En su mayor
parte los individuos no autoinmunes presentan una patrn
de uorescencia moteado no sin tincin de los cromosomas. Los patrones especcos (homogneo, centrmero,
clulas en divisin) slo aparecieron en el 4% de los individuos sanos.[8]
Los ensayos de inmunouorescencia permiten un diagnstico de alta calidad y buena relacin benecio/costo
en enfermedades autoinmunes. Sin embargo, este mtodo carece de posibilidades de estandarizacin y resulta
altamente dependiente de la cualicacin del observador.
Por lo que los hallazgos positivos deben ser subsecuentemente evaluados por otros test inmunolgicos, tales como ELISA o inmunoblot, en un enfoque diagnsitco por
etapas.[9]
Los ensayos de cribado para AAN por IFI son laboriosos, lentos y subjetivos. Se han hecho muchos intentos
para encontrar una solucin sustentable, se han hecho estudios que indican que un ELISA para la deteccin de
ANAs clnicamente signicativos puede ser una alternativa al IFI,[10] sin embargo todava hay algunos anticuerpos que solo pueden ser detectados por IFI.
El reemplazo de los mtodos de inmunouorescencia estndar por otros mtodos an contina en investigacin,
sin embargo la frecuencia de ANAs detectados por estos
mtodos contina siendo menor a los que se consiguen
por IFI, en especial en pacientes de ascendencia europea
con LES. La deteccin de ANAs por IFI en sustratos de
clulas HEp2 es superior a los ensayos automatizados y
contina siendo la tcnica estndar para la deteccin de
ANA.[11]

2.2 Sustrato ideal

Patrn de uorescencia sobre el huso mittico.

Debido al gran nmero de antgenos presentados por un

sustrato de clulas HEp2, la determinacin resulta altamente sensible, pero por la misma razn, la especicidad
es limitada. Los test AAN en clulas HEp2 son frecuen- Un sustrato ideal de clulas HEp2 debe cumplir ciertos
temente positivos en pacientes que no padecen una enfer- estndares:[12]

3
Los ncleos celulares deberan ser grandes y de tamao y forma regulares.
La distribucin de clulas no debera ser ni demasiado densa, ni demasiado dispersa, el nmero ptimo
debera estar entre 70 y 100 clulas por campo a un
aumento de 400, menos de 50 o ms de 110 no es
adecuado.
Es necesario que tengan citoplasmas amplios, donde
puedan distinguirse claramente diferentes patrones
citoplasmticos y donde el ncleo se encuentre clramente delimitado.
Debe poseer un nmero considerable de clulas en
diferentes fases del ciclo celular.
Debe permitir ver un nmero limitado de cromosomas (<10) con claridad. De dos a seis cromosomas
en los cuales de uno a tres se encuentren en metafasse es lo ptimo.
Debe tener una uorescencia de fondo mnima.

Etimologa

[6] Lacroix, Mark (2008). Persistent use of false cell lines (html). International Journal of Cancer 122 (1): 14. doi:10.1002/ijc.23233. Consultado el 15 de marzo de
2014.
[7] Hahon, N.; Eckert, H.L.; Stewart, J. (1975). Evaluation
of cellular substrates for antinuclear antibody determinations (pdf). J Clin Microbiol (2): 42-45. Consultado el 15
de marzo de 2014.
[8] Mariz, H.A.; Sato, E.I.; Barbosa, S.H.; Rodriguez, S.H.;
Dellavance, A.; Andrade, L.E. (2011). Pattern on
the antinuclear antibody-HEp-2 test is a critical parameter for discriminating antinuclear antibody-positive
healthy individuals and patients with autoimmune rheumatic diseases. (pdf). Arthritis Rheum (63): 191-200.
doi:10.1002/art.30084. Consultado el 16 de marzo de
2014.
[9] Bayer, P.M.; Fabian, B.; Hubl, W. (2001).
Immunouorescence assays (IFA) and enzymelinked immunosorbent assays (ELISA) in autoimmune
disease diagnosticstechnique, benets, limitations and
applications. (html). Scand.J Clin.Lab Invest Suppl
(235): 68-76. Consultado el 16 de marzo de 2014.
[10] Sinclair, D.; Saas, M.; Williams, D.; Hart, M.; Goswami,
R. (2007). Can an ELISA replace immunouorescence
for the detection of anti-nuclear antibodies?The routine
use of anti-nuclear antibody screening ELISAs. (html).
Clin.Lab. (53): 183-191. Consultado el 16 de marzo de
2014.

El nombre de estas clulas deriva del comportamiento

que presentan en cultivo, similar a un carcinoma epidermoide, y al nmero de cepa, en este caso la #2, al que
[11] Bruner, B.F.; Guthridge, J.M.; Lu, R.; Vidal, G.; Kelly,
pertenecan en el estudio de Toolan en el cual supuestaJ.A.; Robertson, J.M.; Kamen, D.L.; Gilkeson, G.S.;
[1]
mente se estableci esta lnea celular.
Neas, B.R.; Reichlin, M.; Scoeld, R.H.; Harley, J.B.; Ja-

Referencias

[1] Toolan, Helene Wallace (1954). Transplantable Human

Neoplasms Maintained in Cortisonetreated Laboratory
Animals: H.S. #1; H.Ep. #1; H.Ep. #2; H.Ep. #3; and
H.Emb.Rh. #1 (pdf). Cancer Res (14): 660-666. Consultado el 15 de marzo de 2014.
[2] Toolan, Helene Wallace (1953). Culture Characteristics
of Four Permanent Lines of Human Cancer Cells (pdf).
Cancer Res (13): 389-394. Consultado el 15 de marzo de
2014.
[3] Fjelde, Audrey (1955). Human Tumor Cells In
Tissue Culture (pdf). Cancer 8 (4): 845-851.
doi:10.1002/1097-0142. Consultado el 15 de marzo
de 2014.
[4] Moore, Alice E.; Sabachewsky, Lillian; Wallace Toolan,
Helene (1955). Culture Characteristics of Four Permanent Lines of Human Cancer Cells (pdf). Cancer Res
(15): 598-602. Consultado el 15 de marzo de 2014.
[5] Chen, T.R. (1988). Re-evaluation of HeLa, HeLa S3,
and HEp-2 karyotypes (html). Cytogenet Cell Genet 48
(1): 19-24. doi:10.1159/000132579. Consultado el 15 de
marzo de 2014.

mes, J.A (2012). Comparison of autoantibody specicities between traditional and bead-based assays in a large, diverse collection of patients with systemic lupus erythematosus and family members. (html). Arthritis Rheum
(64): 3677-3686. Consultado el 16 de marzo de 2014.
[12] Hammar, Friederike (28-03-13). Portrait of the HEp2
cell, the pet of immunouorescence professionals. ORGENTEC Autoimmunity Blog (en ingls). Consultado el 16
de marzo de 2014.

5 ORIGEN DEL TEXTO Y LAS IMGENES, COLABORADORES Y LICENCIAS

Origen del texto y las imgenes, colaboradores y licencias

5.1

Texto

Clulas HEp-2 Fuente: https://es.wikipedia.org/wiki/C%C3%A9lulas_HEp-2?oldid=90471146 Colaboradores: Fixertool, J3D3, MetroBot, Invadibot, BenjaBot y Annimos: 1

5.2

Imgenes

Archivo:ANA_MIDBODY.jpg Fuente: https://upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/2/21/ANA_MIDBODY.jpg Licencia: CC

BY-SA 3.0 Colaboradores: Trabajo propio Artista original: Simon Caulton
Archivo:DsDNA_Abs_2.jpg Fuente: https://upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/8/82/DsDNA_Abs_2.jpg Licencia: CC BY-SA
3.0 Colaboradores: Trabajo propio Artista original: Simon Caulton
Archivo:Hep2IntermediateFilaments2.JPG
Fuente:
https://upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/2/2a/
Hep2IntermediateFilaments2.JPG Licencia: CC BY-SA 3.0 Colaboradores: Trabajo propio Artista original: J3D3
Archivo:IFI-Nuclear_and_inespecific_citoplasmatic_stain_Hep-2_Line_cells.jpg Fuente: https://upload.wikimedia.org/wikipedia/
commons/6/60/IFI-Nuclear_and_inespecific_citoplasmatic_stain_Hep-2_Line_cells.jpg Licencia: CC BY-SA 3.0 Colaboradores: Trabajo propio Artista original: J3D3
Archivo:SPECKLED.jpg Fuente: https://upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/1/1d/SPECKLED.jpg Licencia: CC BY-SA 3.0 Colaboradores: Trabajo propio Artista original: Simon Caulton

5.3

Licencia del contenido

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