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Manual de Prcticas
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PRCTICA No. 6
INFORMACIN ADICIONAL
a) Concepto de cromatografa
La cromatografa se define como la separacin de una mezcla de dos o ms compuestos por distribucin
entre dos fases inmiscibles: una fase mvil, llamada tambin activa, que transporta las sustancias que se separan
y que progresa en relacin con la otra, denominada fase estacionaria. La fase mvil puede ser un lquido o un
gas y la estacionaria puede ser un slido o un lquido. Todas las tcnicas cromatogrficas dependen de la
distribucin de los componentes de la mezcla entre esas dos fases.
Segn lo anterior, son posibles varios tipos de cromatografa, dependiendo de la naturaleza de las dos
fases involucradas: pueden ser slido-liquido (capa fina, papel o columna), o bien liquido-liquido o gasesliquido (fase vapor).
Todos los slidos finamente pulverizados tienen el poder de adsorber en mayor o menor grado otras
sustancias sobre su superficie; y, similarmente, todas las sustancias pueden ser adsorbidas, unas con ms
facilidad que otras. Este fenmeno de adsorcin selectiva es el principio fundamental de la cromatografa.
b) Concepto de Rf
El smbolo Rf significa Relacin de frentes, es una relacin de distancias, y se expresa como el
cociente entre la distancia recorrida por la sustancia y la distancia recorrida por el disolvente hasta el frente
del eluyente:
Rf =
Muestra
Punto de aplicacin
(a) (b)
El valor de Rf depende de las condiciones en las cuales se corre la muestra: tipo de adsorbente, eluyente, as
como las condiciones de la placa, temperatura, vapor de saturacin, etc. Tiene una reproducibilidad de
20%, por lo que es mejor correr duplicados de la misma placa.
c) Cromatografa en capa fina
En la cromatografa en capa fina (ccf), se utiliza una placa recubierta con el adsorbente (fase
estacionaria) en forma de una capa delgada, de espesor constante, adherida sobre un soporte rgido, que puede
ser una placa de vidrio, aluminio o polister. Hay adsorbentes que contienen un indicador de fluorescencia para
facilitar la identificacin de muestras. Si no se usa indicador y los componentes no son coloridos, se requerirn
otras tcnicas de revelado.
El eluyente (fase mvil) ascender por capilaridad por la placa y arrastrar los componentes en forma
diferenciada a lo largo de sta, produciendo manchas de los componentes. El grado de elucin de las
sustancias depender tanto de su propia polaridad como de la polaridad del eluyente utilizado.
h) Gel de slice.
Es una forma granular y porosa de dixido de silicio, hecho a partir de silicato sdico. Es un gel slido y
duro, de aspecto cristalino, poroso, inerte, no txico e inodoro. Su frmula molecular es SiO2.nH2O, casi
insoluble en agua y en cualquier otro disolvente. Es qumicamente estable, slo reacciona con cido fluorhdrico
y con lcali.
OH
O
Si
OH
O
O
O
Si
O
Si
OH
O
O
O
Si
Si
OH
O
O
O
Si
O
Si
O
O
Si
El gel de slice, tambin conocido como Silicagel, es un producto absorbente que puede diferenciar la
adsorcin de diferentes molculas, actuando como un adsorbente selectivo en procesos de cromatografa, tanto
en columna como en placa fina.
El gel de slice est catalogado como el de mayor capacidad de absorcin de los que se conocen
actualmente, y bajo diferentes mtodos de fabricacin, se pueden conseguir diferentes tipos de gel de slice con
diversas estructuras de poro, pudiendo llegar a absorber hasta un 40% de su propio peso en agua, por lo que es
usado tambin para reducir la humedad en espacios cerrados.
Para el Informe. Para mayor claridad de los resultados, incluya en su informe los dibujos de las cromatoplacas a tamao
natural de todos los experimentos.
Conteste tambin las siguientes preguntas en cada experimento:
I.
b)
c)
d)
e)
f)