BUKU PETUNJUK PRAKTIKUM

PATOLOGI KLINIK
BLOK 1.5
BASIC SCIENCE OF BLOOD, SUPPORT AND MOVEMENT

Penyusun :

Dr. dr. Wahyu Siswandari, Sp.PK, M.Si.Med

dr. Vitasari Indriani, Sp.PK, M.Si.Med, MM
dr. Tri Lestari

LABORATORIUM PATOLOGI KLINIK

FAKULTAS KEDOKTERAN
UNIVERSITAS JENDERAL SOEDIRMAN
PURWOKERTO
2016
1

TATA TERTIB PRAKTIKUM

1. Mahasiswa wajib mengikuti semua kegiatan praktikum yang telah dijadwalkan

2. Mahasiswa wajib hadir 10 menit sebelum praktikum dimulai. Keterlambatan maksimal
15 menit.
3. Mahasiswa wajib memakai jas praktikum.
4. Mahasiswa wajib mengisi daftar hadir praktikum setiap kali mengikuti kegiatan
praktikum
5. Sebelum praktikum dimulai dilakukan pretest, nilai pretest masuk dalam komponen
penilaian praktikum.
6. Praktikum dilaksanakan dengan tertib dan sungguh-sungguh.
7. Mahasiwa wajib mengikuti praktikum dengan tertib, dilarang merokok bersenda gurau,
tidak berbicara diluar konteks mata acara praktikum yang sedang berlangsung dan atau
melakukan kegiatan/perilaku yang dapat mengganggu kegiatan praktikum
8. Mahasiswa wajib bekerja dengan hati-hati untuk menghindari kecelakaan di dalam
ruang praktikum (laboratorium)
9. Mahasiswa wajib mengganti alat-alat praktikum. apabila merusakkan.
10. Tiap kelompok wajib membuat laporan sementara hasil praktikum dan disahkan oleh
dosen pembimbing praktikum.
11. Sebelum meninggalkan ruangan, pastikan alat-alat dan reagen praktikum dalam
keadaan bersih dan rapi.
12. Laporan kelompok dikumpulkan 3 hari setelah praktikum.
13. Mahasiswa yang berhalangan hadir dalam praktikum wajib memberitahukan secara
tertulis kepada seksi akademik atau ketua blok.
14. Ketidakhadiran dalam praktikum harus disertai dengan alasan yang dapat diterima.
Alasan yang dapat diterima untuk tidak hadir dalam praktikum adalah:
i) Ada anggota keluarga (Bapak, Ibu dan Adik/Kakak) yang meninggal
ii) Sakit, yang harus dibuktikan dengan surat keterangan dokter. Ketua dan seksi
akademik blok BASIC SCIENCE OF BLOOD, SUPPORT AND MOVEMENT
berwenang memutuskan apakah surat keterangan sakit tersebut valid atau tidak
iii) Melaksanakan tugas dari Jurusan Kedokteran FK Unsoed, yang dibuktikan dengan
surat tugas dari Dekan FK Unsoed.

DESKRIPSI BLOK
Blok Basic Science of Blood, Support, and Movement merupakan blok kelima dalam semester
pertama. Pada blok ini mahasiswa belajar mengenai struktur dan fungsi system darah,
integument dan gerak tubuh (muskuloskeletal). Blok ini memiliki beban 4 SKS
KARAKTERISTIK MAHASISWA
Mahasiswa yang mengikuti Blok Basic Science of Blood, Support, and Movement adalah
mahasiswa Fakultas Kedokteran semester 1.
TUJUAN PEMBELAJARAN
Pada akhir blok, mahasiswa diharapkan mampu :
a. Tujuan umum
Pada akhir fase ini, mahasiswa diharapkan mampu :
1. Menerapkan proses berpikir kritis dilengkapi dengan penguasaan teknologi
informasi untuk memilih sumber belajar terpercaya dan mengorganisasi ilmu
pengetahuan yang telah diperoleh
2. Menunjukkan pemahaman mengenai konsep dasar terjadinya gangguan
kesehatan baik yang bersifat diturunkan maupun yang didapat secara terstruktur
dan sistematis sehingga dapat menjelaskan pencegahan dan penatalaksanaannya
sesuai dengan standar yang berlaku
b. Tujuan khusus
Pada akhir fase ini, mahasiswa diharapkan mampu :
1. Menerapkan proses berpikir kritis dalam menghadapi masalah kesehatan
2. Menunjukkan kemampuan pengelolaan informasi untuk menghimpun data yang
sahih dan relevan dengan kebutuhan dan ilmu pengetahuan terkini
menggunakan teknologi informasi dan komunikasi dengan baik
3. Menjelaskan konsep dasar dan pencegahan gangguan kesehatanyang mungkin
terjadi dalam setiap sistem tubuh manusia berdasarkan patogenesis dan
patofisiologi
4. Menjelaskan patologi,patomekanisme,dan patofisiologi kelainan sistem darah,
integumen dan gerak tubuh (muskuloskeletal) secara rinci
5. Menjelaskan prinsip-prinsip dasar farmakologi fungsi sistem darah, integumen
dan gerak (muskuloskeletal) tubuh manusia
6. Menjelaskan tentang mikroorganisme penyebab kelainan fungsi sistem darah,
integumen dan gerak (muskuloskeletal) tubuh manusia
7. Menjelaskan pemeriksaan laboratorium sistem darah, integumen dan gerak
(muskuloskeletal) tubuh manusia
Tujuan Praktikum Patologi Klinik:
1 Mahasiswa dapat mengidentifikasi sel-sel berdasarkan stadium eritropoiesis.
2 Mahasiswa mengidentifikasi sel-sel berdasarkan stadium lekopoiesis.
3 Mahasiswa mengidentifikasi sel-sel berdasarkan stadium trombopoiesis.
4 Mahasiswa mampu menjelaskan dan melakukan pemeriksaan darah rutin, meliputi:
pengukuran kadar hemoglobin, penghitungan jumlah eritrosit, jumlah lekosit, jumlah
trombosit, hitung jenis leukosit, indeks eritrosit, laju endap darah, dan apusan darah
tepi (normal)
5 Mahasiswa mampu menjelaskan dan melakukan pemeriksaan golongan darah
berdasarkan sistem ABO dan Rhesus
6 Mahasiswa mampu melakukan pemeriksaan rumple leede, clotting time dan bleeding
time sebagai aplikasi dari mekanisme hemostasis
3

A. BAHAN PEMERIKSAAN
Bahan/sampel darah sesuai dengan pemeriksaan yang akan dilakukan.
Macam bahan pemeriksaan :
1. Darah Vena
Bayi baru lahir
: Vena Umbilicalis
Bayi
: Vena Jugularis Ekterna
Dewasa
: Semua Vena Superficial terbaik Vena Mediana Cubiti
2. Darah Kapiler
Bayi
: tumit kaki bagian lateral dan medial
Dewasa
: Ujung jari tangan ke 2, 3, 4
B. JENIS PEMERIKSAAN DARAH
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.
12.

1.

Pemeriksaan Laju Endap Darah.

Identifikasi Sel (eritrosit, leukosit, trombosit)
Hitung jenis Leukosit / Diff. Count
Pemeriksaan Golongan Darah
Pemeriksaan Hemoglobin.
Pemeriksaan Hematokrit
Pemeriksaan Hitung Jumlah Leukosit.
Pemeriksaan Hitung Jumlah Eritrosit.
Pemeriksaan Hitung Jumlah Trombosit
Pemeriksaan waktu perdarahan
Pemeriksaan waktu pembekuan
Pemeriksaan Rumple leed

PEMERIKSAAN LAJU ENDAP DARAH (LED)

Macam pemeriksaan Laju Endap Darah :

1. Westergreen
2. Wintrobe (juga dapat mengukur hematokrit sekaligus)
3. Cutler
4. Hellige vollmer (menggunakan darah kapiler)
Prinsip Pemeriksaan :
Apabila sejumlah darah diberi antikoagulan, diletakan dalam tabung gelas dalam posisi
tegak lurus maka sel sel akan mengendap, sebaliknya plasma akan bergerak ke atas. Hal
ini karena perbedaan berat jenis.
WESTERGREEN
Alat
: Tabung Westergreen.
: Rak Westergreen.
Reagensia
: Larutan Natrium Sitrat 3,8 %.
Bahan
: Darah EDTA.
Cara pemeriksaan :
Hisaplah dalam semprit steril 0,4 ml lar natrium sitrat 3,8 %, masukan dalam tabung
4

Hisaplah 1,6 ml darah, masukan tabung, campur dengan Na sitrat 3,8%, sehingga
mendapatkan 2,0 ml campuran.
Isaplah darah itu ke dalam pipet Westergreen sampai garis bertanda 0 mm, kemudian
biarkan pipet itu dalam keadaan tegak lurus dalam rak Westergreen selama 60 menit.
Bacalah tingginya lapisan plasma dg milimeter dan laporkanlah angka itu sebagai laju
endap darah.

Gambar :

Nilai rujukan menurut :

JENIS KELAMIN
PRIA
WANITA

DACIE
0 5 mm / jam
0 7 mm / jam

WESTERGREEN
0 15 mm / jam
0 20 mm / jam

Pemeliharaan alat :
Tidak boleh dicuci dengan deterjen.
Cuci dengan aquadest, bilas dengan aceton.
Catatan : kesalahan karena :
Sampel harus fresh kurang dari 2 jam, darah tidak beku diberi antikoagulan.
Alat kotor akan menyebabkan hemolisa.
Kolom tidak sesuai, misalnya sempit maka akan lebih lama.
Analisis : Terhisap gelembung udara.
Posisi tabung dalam rak miring.
Diletakan ditempat yang panas dan sebagainya.
Adanya vibrasi ( getaran )
2.

IDENTIFIKASI SEL (ERITROSIT, LEUKOSIT, TROMBOST)

INCLUDEPICTURE
"https://drdjebrut.files.wordpress.com/2009/12/trombosit1.jpg?w=300&h=239" \*
MERGEFORMATINET INCLUDEPICTURE
"https://drdjebrut.files.wordpress.com/2009/12/trombosit1.jpg?w=300&h=239" \*
MERGEFORMATINET INCLUDEPICTURE
"https://drdjebrut.files.wordpress.com/2009/12/trombosit1.jpg?w=300&h=239" \*

MERGEFORMATINET

3.

HITUNG JENIS LEUKOSIT / DIFF. COUNT

Membaca preparat hapus darah tepi .
Gambar :

II

III

IV

VI

Preparat darah tepi dibagi dalam beberapa zone seperti diatas. Bila dilihat dengan mikroskop
akan tampak sebagai berikut:

Zone I (Irreguler
zone)
3%

Zone IV (Thin Zone)

18%

Zone II (Thin zone)

14%

Zone V (even zone)

11%

Pemeriksaan:
Dengan pembesaran 10 x ( obyektif )
Orientasi seluruh lapangan pandang.
Periksa adanya sel sel asing, parasit.
Estimasi jumlah leukosit.
7

Zone III Thick zone)

45%

Zone VI (Very thin zone)

14%

Dengan pembesaran 40 x ( obyektif )

Hitung jenis sel darah putih.
Morfologi sel darah merah.
Dengan pembesaran 100 x ( obyektif )
Penegasan.
Bangunan khas.
Estimasi Trombosit menurut Barbara Brown.
Arah perhitungan tertentu seperti dibawah ini :

Bandingkan ukuran masing masing sel dan amati bentuk inti, granula.
Stab / batang.

Segmen.

Eosinofil.

Basofil

Limfosit.

Monosit.
8

Tabel hitung jenis leukosit normal.

1
Eos
Bas
Staf
Sg
Limf
Mono
Jml
10

10

jumlah

10

10

10

10

10

10

10

10

10

100

Distribusi sel
Limfosit
Monosit
Neutrofil

: di tengah.
: tepi / ekor.
: tepi / ekor.

Pelaporan
:
Eos / Baso / Staf netro / Segmen netro / Limfo / Mono
Misal :
4 / - / 1 / 56 / 38 / 1.
Eritrosit berinti muda dilaporkan :./ 100 Leukosit.
Nilai normal menurut Miller :
Eosinofil
: 1 4 %.
Basofil
: 0 1 %.
Stab
: 2 5 %.
Segmen
: 50 70 %.
Limfosit
: 20 40 %.
Monosit
: 1 6 %.
4.

PEMERIKSAAN GOLONGAN DARAH ABO

Reagen / Kit golongan darah :

Serum anti A
Hijau / Biru.
Serum anti B
Kuning.
Serum anti A, anti B Tidak berwarna.

Cara Gelas Obyek:

Teteskan anti A, anti B, kontrol pada tempat yang berbeda, masing masing 1 tetes.
Kemudian masing masing ditetesi darah 1 tetes.
Aduk, perhatikan adanya aglutinasi.
Gambar :

Anti A

anti B

anti AB

INTERPRESTASI HASIL :

Anti B

Anti A
+
+

+
+

Anti A, Anti B

Golongan Darah

+
+
+

O
A
B
AB
10

Catatan :
Untuk membedakan poliaglutinasi, teteskan NaCl fisiologis.
Bila poliaglutinasi, aglutinasi akan hilang.
5.

PEMERIKSAAN HEMOGLOBIN

Metode yang dipergunakan :

A. Kolorimetri visual
1. Tallquis.
2. Spencer.
3. Haden Housser.
4. Sahli.
B. Kolorimetrik / Fotoelektrik
A.4. Metode SAHLI
Alat yang dipergunakan :
- Alat untuk mengambil darah vena atau kapiler.
- Hemometer Sahli.
Hemometer Sahli terdiri dari :
1. Tabung pengencer panjang 12 cm, dinding bergaris mulai angka 2 (bawah) s/d
22 ( atas )
2. Tabung standart Hb.
3. Pipet Hb dengan pipet karet panjang 12,5 terdapat angka 20 ul.
4. Pipet HCL.
5. Botol tempat aquadest dan HCL 0,1 N.
6. Batang pengaduk ( dari kaca )

Prinsip pemeriksaan :
Mengukur kadar Hb berdasar warna yang terjadi akibat perubahan Hb menjadi asam hematin
setelah penambahan HCL 0,1 N ( tidak semua Hb terukur ).
Sampel :
- Darah vena.
- Darah kapiler.
Cara pemeriksaan :
- Isi tabung pengencer dengan HCL 0,1 N sampai angka 2 ( 5 tetes).
11

Dengan pipet Hb hisap darah sampai angka 20 ul, jangan sampai ada gelembung
udara yang ikut terhisap.
Hapus darah yang ada pada ujung pipet.
Tuang darah kedalam tabung pengencer, bilas dengan HCL bila masih ada darah
dalam pipet, aduk sampai darah dan reagen tercampur.
Diamkan 1 3 menit
Tambahkan aquadest tetes demi tetes, aduk dengan batang kaca pengaduk.
Bandingan larutan dalam tabung pengencer dengan warna larutan standart.
Persamaan campuran dgn batang standard harus dicapai dalam waktu 3 5 menit
setelah darah tercampur dengan HCL.
Bila sudah sama warnanya penambahan aquadest dihentikan, baca kadar Hb pada
skala yang ada di tabung pengencer / gr / 100 ml darah.

Nilai rujukan menurut Dacie :

- Dewasa laki laki
- Dewasa wanita
- Bayi < 3 bulan
- Bayi > 3 bulan
- Umur 1 tahun
- Umur 3 6 tahun
- Umur 10 12 tahun

: 12,5 18,0 gr %
: 11,5 16,5 gr %
: 13,5 19,5 gr %
: 9,5 13,5 gr %
: 10,5 13,5 gr %
: 12,0 14,0 gr %
: 11,5 14,5 gr %

Catatan :
- Cara Sahli kurang teliti jika dibandingkan dengan cara cyanmethemoglobin tetapi
masih jauh lebih baik daripada Tallquis yang menggunakan kertas dan dicocokan
dengan kertas standar.
- Kesalahan sebesar 10 %.
- Kesalahan yang terjadi akibat :
1. Keadaan alat : - volume pipet tidak tepat.
- warna tabung standar sudah pucat.
2. Tehnik / pemeriksa : - Ketajaman mata berbeda beda.
- Intensitas sinar kurang.
- Terdapat gelembung udara.
- Darah pada ujung pipet tidak dihapus.
- Waktu tidak tepat satu menit, sehingga asam hematin
belum sempurna terbentuk.
3. Reagensia : HCL 0,1 N.
Bila menggunakan darah kapiler kemungkinan akan memberikan hasil yang
lebih rendah bila dipijit pijit pada waktu pengeluaran darah setelah
penusukan.
B. Cyanmethemoglobin ( Kalorimetri Fotometrik )
Reagen larutan Drabkin, yang terdiri dari :
Sodium Bikarbonat ( NaHCO3 )
Potasium Ferrycyanida ( K3 Fe ( CN ) 6 )
Aquadest
Stabilitas :
Tahan 3 minggu 1 bulan.
Simpan dalam botol berwarna coklat, ditempat yang sejuk.
12

10,0 gram.
0,2 gram.
1000,0 cc.

Prinsip pemeriksaan :
Hb ( Fe ++ )
Hemoglobin
Hb ( Fe +++ )
Methemoglobin

Ferry Cyanida

KCN

Hb ( Fe +++ )
Methemoglobin
Hb ( Fe +++ ) CN
Cyanmethemoglobin

Cara kerja :
Ke dalam tabung kolorimeter masukan 5,0 ml larutan Drabkin.
Dengan pipet hemoglobin diambil 20 ul darah ( kapiler, EDTA, atau oxalat ) bagian
luar ujung pipet dibersihkan, lalu darah itu dimasukan kedalam tabung kolorimeter
dengan membilas beberapa kali.
Campurlah isi tabung dengan membalikkannya beberapa kali.
Bacalah dalam spektrofotometer pada gelombang 540 nm,sebagai blanko digunakan
larutan Drabkin.
Kadar Hb ditentukan dari perbandingan absorbansinya dgn absorbansi standard
cyanmethemoglobin atau dibaca dari kurve tera.
Kesalahan yang mungkin terjadi :
Sampel.
Metode.
Analisis.
Alat.
Akurasi dipengaruhi :
Pipet : - akurat 20 ul.
- kering.
- bersih.
- tidak retak.
Tuang darah tepat diatas larutan reagen, bilaslah.
Waktu inkubasi tepat.
Alat : - Warming up 5 10 menit.
- Panjang gelombang 546 nm.
- Alat ditera.
Reagen tidak kadaluwarsa.
6.

PEMERIKSAAN HEMATOKRIT

Nilai Hematokrit adalah :

Besarnya volume sel sel eritrosit seluruhnya didalam 100 mm3 darah dan
dinyatakan dalam %.
Prinsip pemeriksaan :
Darah dengan antikoagulan diputar / disentrifuge, kemudian dibandingkan
kolom merah dengan kolom total.
Terdapat 2 metode pemeriksaan :
13

panjang

Makro Hematokrit
Mikro Hematokrit

tabung Wintrobe.
tabung kapiler.

Mikro Hematokrit
Alat :
Alat untuk memeperoleh darah vena / kapiler.
Pipet Hematokrit : panjang
7,5 cm.
diameter
1,2 mm.
Lampu spiritus / vasellin.
Sentrifuge yang dapat memutar dengan kecepatan 16.000 rpm.
Skala pembaca Ht.
Reagensia :
Heparin ( biasanya sudah melapisi lumen pipet kapiler Ht )
Bahan :
Darah vena / darah kapiler.
Cara pemeriksaan :
Bila menggunakan darah kapiler :
1. lakukan pengambilan darah kapiler :
Gambar :

2. Isi tabung kapiler dengan darah sampai 3/4 tabung.

Gambar :

3. Bakar ujung tabung yang kosong dengan lampu spiritus atau disumbat dengan
vasellin, hingga benar benar tertutup.
Gambar :

14

4. Sentrifuge dengan kecepatan 16.000 rpm selama 3 5 menit.

Gambar :

5. Baca dengan skala hematokrit panjang kolom merah.

INCLUDEPICTURE
"http://2.bp.blogspot.com/__iY2vaygxLo/TEbfn0SyP5I/AAAAAAAAA8/M4prC7tSUWY/s1600/ht.jpg" \*
MERGEFORMATINET
INCLUDEPICTURE
"http://2.bp.blogspot.com/__iY2vaygxLo/TEbfn0SyP5I/AAAAAAAAA8/M4prC7tSUWY/s1600/ht.jpg" \*
MERGEFORMATINET
INCLUDEPICTURE
"http://2.bp.blogspot.com/__iY2vaygxLo/TEbfn0SyP5I/AAAAAAAAA8/M4prC7tSUWY/s1600/ht.jpg"
\*
MERGEFORMATINET

Bila tidak punya skala Ht dipakai perhitungan :

Ht = Panjang kolom merah x 100 %
Panjang total kolom
Keuntungan mikro Hematokrit :
- Cepat, mudah.
- Kesalahan lebih kecil.
- Vol darah lebih sedikit.
Sumber kesalahan :
-

Sentrifuge tidak benar.

Lupa mengocok sampel.
Penutupan ujung kapiler tidak rapat.
Antikoagulan tidak tepat.
Tabung kapiler tidak ditera

Nilai rujukan menurut DACIE :

Pria
: 47
Wanita
: 42
Bayi baru lahir
3 Bulan
: 38

7 %.
5 %.
: 54 10 %.
6 %.
15

3 6 bulan
10 12 tahun
7.

: 40 45 %.
: 41 4 %

PEMERIKSAAN HITUNG JUMLAH LEUKOSIT

Alat yang digunakan :

Hemositometer :

- Bilik hitung.
- Pipet Leukosit.
- Pipet Eritrosit.
- Bilik hitung

Kaca penutup.
Mikroskop.
INCLUDEPICTURE
"http://2.bp.blogspot.com/BlOeEZ5TBu8/UFp7Po1KX0I/AAAAAAAAARY/t23HljDupEI/s1600/haemocytometer.jp
g" \* MERGEFORMATINET
INCLUDEPICTURE
"http://2.bp.blogspot.com/BlOeEZ5TBu8/UFp7Po1KX0I/AAAAAAAAARY/t23HljDupEI/s1600/haemocytometer.jp
g" \* MERGEFORMATINET
INCLUDEPICTURE
"http://2.bp.blogspot.com/BlOeEZ5TBu8/UFp7Po1KX0I/AAAAAAAAARY/t23HljDupEI/s1600/haemocytometer.jp

g" \* MERGEFORMATINET
Bilik hitung terbaik untuk pemeriksaan jumlah leukosit adalah bilik hitung Neubauer Improved
atau Burker karena mempunyai daerah perhitungan yang luas.
Neubauer Improved :
Luas seluruh bilik = 3 x 3 mm2.
Didalam bilik terdapat :
Kotak besar : 1 x 1 mm2.
Kotak sedang ada 2 macam :
Ditengah : 1/5 x 1/5 mm2.
Di empat sudut : x mm2.
Kotak kecil
: 1/20 x 1/20 mm2.
Tinggi / dalam : 0,1 mm.
Kotak sedang :
W
: Leukosit ( 1,3,7,9 ) : x mm2.
R
: Eritrosit ( 5 )
: 1/5 x 1/5 mm2.
Gambar:

16

Pipet Leukosit :
- Didalamnya terdapat bola berwarna putih.
- Mempunyai garis 0,5 1 11.
Gambar :
INCLUDEPICTURE
"http://2.bp.blogspot.com/3KGQ_7ErWwU/UFmHk9XgFjI/AAAAAAAAAB0/eK3ELJF4Cvc/s1600/pipet+lekosit+eryt
rosit.jpg" \* MERGEFORMATINET INCLUDEPICTURE
"http://2.bp.blogspot.com/3KGQ_7ErWwU/UFmHk9XgFjI/AAAAAAAAAB0/eK3ELJF4Cvc/s1600/pipet+lekosit+eryt
rosit.jpg" \* MERGEFORMATINET INCLUDEPICTURE
"http://2.bp.blogspot.com/3KGQ_7ErWwU/UFmHk9XgFjI/AAAAAAAAAB0/eK3ELJF4Cvc/s1600/pipet+lekosit+eryt

rosit.jpg" \* MERGEFORMATINET
Reagensia :
Larutan Turk terdiri dari :
Gentian Violet 1 % : 1 ml.
Asam Acetat Glacial : 1 ml.
Aquadest ad
: 100 ml.
Bahan :
Darah vena atau darah kapiler.
Prinsip pemeriksaan :
Menghitung sel leukosit di dalam suatu larutan yang merusak sel sel lain
dengan bilik hitung.
Cara kerja :
Bilik hitung dicari dengan mikroskop, cari kotak sedang di pojok ujung bilik hitung.
Hisap darah dengan pipet leukosit sampai angka 1 ( pengenceran = 10 kali ) atau
sampai 0,5 ( pengenceran = 20 kali ).

17

Hapus darah yang melekat pada ujung pipet.

Kemudian dengan ujung pipet yang sama hisap larutan Turk sampai garis tanda 11.
Hati hati jangan sampai ada gelembung udara
Angkatlah pipet dari cairan tutup ujung pipet dengan ujung jari lalu lepaskan karet
penghisap.
Kocok dengan arah horizontal selama 15 30 detik.

Buang 3 tetesan yang pertama.

Tuang pada bilik hitung yang telah ditutup dengan kaca penutup dan diletakan di
mikroskop.

Lakukan penghitungan sel leukosit dengan pembesaran obyektif 10 x atau 40 x.

Perhitungan :
Jumlah Leukosit = Jumlah leukosit x 16 x 10 (tinggi bilik hitung) x 10 (pengenceran)
Jumlah kotak
Contoh :
Dihitung dalam 12 kotak sedang
= 90 sel Leukosit.
Pengenceran
= 10 x.
90
Jumlah sel Leukosit
=
x 16 x 10 x 10 = 12.000 / mm3
12
Nilai rujukan menurut Dacie :
Dewasa pria
: 4 11 ribu / mm3.
18

Dewasa wanita
Bayi
1 tahun
12 tahun

: 4 11 ribu / mm3.
: 10 25 ribu / mm3.
: 6 18 ribu / mm3.
: 4,5 13 ribu / mm3.

Kesalahan biasanya oleh karena :

Alat, Reagensia, Sampel, Pemeriksa
Perawatan alat :
Pipet leukosit :
Begitu selesai digunakan harus segera dicuci, dengan aquadest dan disemprot aceton.
Bila tersumbat jendalan darah diambil dengan kawat lembut.
Bila gagal rendam dalam larutan ( salah satu ):
Ethanol 95 %.
Asam Acetat 0,5 %.
Dikromat cleaning solution.
Larutan Sodium Bikarbonat 1 %.
Bilik hitung :
Bersihan secepat mungkin.
Rendam dalam larutan deterjen 2 3 jam.
Bilas air.
Bilas alkohol.
Keringkan dengan kain halus.
8.
Alat :

PEMERIKSAAN HITUNG JUMLAH ERITROSIT

Alat untuk mengambil darah vena / kapiler

Hemositometer :
- Bilik hitung Neubauer Improve.
- Kaca penutup.
- Pipet Eritrtosit : pipet dengan bola merah dengan skala
0,5 1 101.
- Mikroskop.
Reagen :
- Lar. Hayem tdd :
- Na2SO4 kristal
: 5,0 gram.
- NaCl
: 1,0 gram.
- HgCl2
: 0,5 gram.
- Aquadest
: 200,0 ml.
Prinsip pemeriksaan :
Menghitung sel eritrosit dalam larutan yang menghancurkan sel sel lain.
Cara pemeriksaan :
Serupa menghitung sel Leukosit :
- Bilik hitung yang telah ditutup dengan kaca penutup diletakkan di bawah mikroskop.
- Cari kotak kecil / kotak eritrosit ( bila menggunakan bilik hitung Neubauer Improve
ada ditengah )
Gambar :
19

- Dengan pipet eritrosit, pipet darah sampai angka 1 ( pengencerran 100 x )

Atau sampai angka 0,5 ( pengenceran 200 x ). Bersihkan ujung pipet.
- pertahankan posisi pipet, hisap lar Hayem sampai angka 101.
- Bersihkan ujung pipet.
- Kocok dengan arah horizontal.
- Buang 3 tetes yang pertama.
- Teteskan ke bilik hitung lewat sela sela kaca penutup.
Perhitungan :
Jumlah eritrosit = jumlah eritrosit

x 400 x 10 (tinggi bilik hitung) x 100 (pengenceran)

Jml kotak kecil yg dihitung

Contoh:
Didapatkan 460 sel eritrosit dalam 80 kotak kecil ( 1 / 5 x 1 / 5 mm ) maka:
Jumlah eritrosit

= 460 x 400 x 10 x 100

80
= 2.300.000 / mm3

Nilai rujukan :
- Pria dewasa
- Wanita dewasa
- < 3 bulan
- 3 bulan
- 1 tahun
- 12 tahun

9.

: 4,5 6,5 juta / mm3

: 3,9 5,6 juta / mm3
: 4,0 5,6 juta / mm3
: 3,2 4,5 juta / mm3
: 3,6 5,0 juta / mm3
: 4,2 5,2 juta / mm3

PEMERIKSAAN NILAI ERITROSIT RATA- RATA ( NILAI

INDEKS ERITROSIT )

Tujuan :
Untuk memperkirakan :
- Ukuran Eritrosit rata rata.
- Banyaknya Hemoglobin tiap Eritrosit.
Macam :
1. MCV ( Mean Corpusculer Volume )
2. MCH ( Mean Corpusculer Hemoglobin )
3. MCHC ( Mean Corpusculer Hemoglobin Concentration )
1. MCV/V E R (Mean corpusculum volume/ volume eritrosit rata rata)
20

(Satuan Femtoliter)
MCV = VER =

Hematokrit
Jumlah Eritrosit (dalam juta)

x 10

Nilai normal = 82 92 Femtoliter.

2. MCH/H E R (Mean corpusculum hemoglobin/ Hemoglobin eritrosit rata rata)

Adalah : Banyaknya Hb pereritrosit, (Satuan Pikogram)
.
MCH = HER =
Hemoglobin
x 10
Jumlah Eritrosit (dalam juta)
Nilai normal : 27 32 Pikogram.
3. MCHC/KHER (Konsentrasi hemoglobin eritrosit rata rata)
Adalah : Kadar Hemoglobin Eritrosit yang didapat per Eritrosit. (Satuan : %).
MCHC = KHER =

Hb
Ht

x 100 %.

Nilai normal : 32 37 %.
10.

PEMERIKSAAN JUMLAH TROMBOSIT

Trombosit sukar dihitung karena mudah sekali pecah dan sukar dibedakan dari kotoran
kecil. Lagi pula sel sel-sel itu cenderung melekat pada permukaan asing (bukan endotel utuh)
dan menggumpal-gumpal. Cara yang digunakan untuk menghitung jumlah trombosit adalah
cara langsung dan cara tak langsung.
A. Cara Langsung (Rees Ecker)
Darah dienderkan dengan larutan Rees Ecker dan jumlah trombosit dihitung dalam bilik
hitung.
Larutan Rees Ecker terdiri dari :
Natrium sitrat 3,8 g
Larutan formaldehid 40%
Brilliantcresyblue 30 mg
Aquades ad 100 ml
Cara pemeriksaan :
1. Hisap darah menggunakan pipet eritrosit sampai garis tanda 0,5 bersihkan darah yang
melekat pada ujung pipet
2. Hisap larutan Rees Ecker sampai garis tanda 101
3. Angkat pipet dari cairan tutup ujung pipet dengan ujung jari lalu lepaskan karet
penghisap kocok secara horizontal selama 3 menit.
4. Teruskan tindakan seperti menghitung eritrosit dalam kamar hitung.
5. Biarkan bilik hitung yang telah terisi dalam sikap datar dalam cawan petri selama 10
menit agar trombosit mengendap
21

6. Hitunglah semua trombosit dalam kotak tengah (kotak eritrosit)

7. Jumlah yang didapat dikalikan 2.000 menghasilkan jumlah trombosit per ul darah.
B. Cara tak Langsung (Fonio)
1. Bersihkan ujung jari dengan kapas alkohol
2. Teteskan larutan magnesium sulfat 14% di ujung jari
3. Tusuklah ujung jari dengan lanset melalui tetes magnesiumsulfat
4. Setelah jumlah darah keluar menjadi kira-kira dari jumlah magnesiumsulfat campurlah
darah dengan magnesiumsulfat tersebut
5. Buat sediaan apus dan pulas Wright atau giemsa
6. Hitung jumlah trombosit yang dilihat bersama dengan 1000 eritrosit
7. Hitung jumlah eritrosit per ul darah
8. Hitung jumlah trombosit per ul darah berdasarkan kedua angka itu
C. Estimasi Barbara Brown
1. Bersihkan ujung jari dengan kapas alkohol dan biarkan kering
2. Tusuklah ujung jari dengan lanset
3. Setelah jumlah darah keluar, buat sedian apus dengan pewarnaan Giemsa
4. Pembesaran lensa objektif 100x, hitung jumlah trombosit/LPB, lakukan minimal 3x
(dalam lapangan pandangan yang berbeda ). Hitung reratanya.
5. Perhitungan: rerata trombosit x 20.000 = Estimasi jumlah trombosit /uL
Trombositopeni jumlah trombosit menurun
Trombositosiskenaikan jumlah trombosit
11. PEMERIKSAAN RUMPLE LEED
Pemeriksaan rumple leed merupakan salah satu pemeriksaan penyaring untuk
mendeteksi kelainan sistem vaskuler dan trombosit.
Prinsip pemeriksaan :
Dengan melakukan bendungan terhadap vena pada tekanan tertentu, bila dinding kapiler
kurang kuat akan rusak/pecah oleh bendungan dan terjadi perdarahan di bawah kulit.
Alat dan reagen :
Alat : - tensimeter
- stetoskop
Reagen
:Cara pemeriksaan :
1. Ukur tekanan sistole dan diastole, ambil rata-ratanya.
2. Lakukan bendungan pada lengan atas dengan tekanan rat-rata tersebut, maksimal 100
mmHg dan pertahankan selama 10 menit.
3. Baca hasilnya pada volar lengan bawah kira-kira 4 cm di bawah lipat siku dengan
penampang 5 cm.
Penilaian hasil :
Normal : bila dalam waktu 10 menit tak tampak perdarahan pada area pembacaan
atau timbul petechiae kurang dari 5 buah.
Positif : dalam waktu 10 menit timbul 10 atau lebih petechiae.
Negatif
: dalam waktu 10 menit atau lebih tidak timbul petechiae atau kurang
dari 10 buah.
Catatan :
22

1. Bila dalam waktu kurang dari 10 menit sudah tampak lebih dari 10 buah petechiae,
percobaan dihentikan.
2. Bila dalam 10 menit tak tampak petechiae atau timbul bercak kurang dari 10 buah,
percobaan dihentikan, tunggu 5 menit dan ulangi pembacaanya. Bila tak ada perubahan
penilaiannya negatif.
3. Sebelum percobaan dihentikan apakah ada bekas gigitan nyamuk pada daerah volar
lengan bawah/noda hitam yang mungkin menyebabkan hasil menjadi positif palsu.
4. Bila rat-rata tekanan darah lebih dari 100 mmHg lakukan bendungan vena maksimal
pada tekanan 90 mmHG.
Arti klinis :
RL positif
: - gangguan vaskuler
- gangguan trombosit.
Kegunaan pemeriksaan : untuk menguji kapiler dan fungsi trombosit.
12.PEMERIKSAAN WAKTU PERDARAHAN
Pemeriksaan ini terutama menilai faktor-faktor hemostasis yang
ekstravaskuler, tetapi keadaan dinding vaskuler dan trombosit juga berpengaruh.
Metode pemeriksaan :
1. DUKE
2. IVY

letaknya

Metode DUKE
Prinsip pemeriksaan :
Mengukur / menghitung waktu yang digunakan saat keluarnya darah dari luka yang dibuat
dengan standart tertentu sampai berhentinya perdarahan lewat luka tersebut.
Alat dan Reagen :
Alat :
1. Lancet
2.Kapas alkohol
3. Gelas obyek
4. Kertas saring
5. Stop watch, penggaris
Reagen
: (-)
Cara Pemeriksaan :
1. Cuping telinga tempat pemeriksaan dipijit-pijit atau digosok supaya hiperemis.
2. Bersihkan cuping telinga tersebut dengan kapas alkohol , biarkan kering.
3. Tusuk daerah tersebut (no. 2 ) dengan lancet sedalam 2-3 mm dan biarkan darah keluar
dengan bebas, saat darah keluar jalankan stopwatch.
4. Isap darah vena yang keluar dengan kertas saring tiap setengah menit sampai darah
berhenti mengalir jangan sampai kertas saring menyentuh luka, hentikan stopwatch saat
darah tidak dapat dihisap lagi, dan catat waktunya.
Catatan :
1. Pemeriksaan berhasil bila bercak pertama mempunyai penampang 3-5 mm.
2. Lakukan pada cuping telinga yang lain sebagai kontrol.
Penilaian hasil :
Normal : 1-3 menit.
13.PEMERIKSAAN WAKTU PEMBEKUAN
23

Waktu pembekuan adalah waktu yang diperlukan darah untuk membeku, hasilnya dapat
dijadikan ukuran aktivitas faktor-faktor koagulasi.
Metode pemeriksaan :
1. Gelas arloji.
2. Lee and White.
a. Metode Lee and White
Pemerikasaan waktu pembekuan dengan menggunakan darah lengkap seperti metode ini
merupakan pemeriksaan yang kasar tetapi masih dianggap yang terbaik.
Alat dan Reagen :
Alat :
1. Tabung reaksi
2. Alat pengambilan darah vena.
3. Stopwatch
4. Rak tabung
5. Inkubator ( kalau ada )
Reagen
: (-)
Cara Pemeriksaan :
1. Siapkan 3 tabung reaksi yang bebas dari kotoran letakkan pada rak.
2. Ambil darah vena 5 ml secara legeartis, saat darah mulai keluar jalankan stopwatch
( catat waktunya ).
3. Masukkan sampel ( no.2 ) perlahan-lahan pada 3 tabung pertama dengan posisi miring
masing-masing 1,5 ml, sisanya masukan dalam tabung ke-3 sebagai kontrol.
4. Diamkan 2-3 menit kemudian setiap 0.5 menit tabung I catat waktunya. Bila sudah
timbul bekuan lakukan hal yang sama terhadap tabung ke-2 catat waktunya.
5. Amati tabung ke-3 apakah sudah timbul bekuan bila belum tampak bekuannya lakukan
hal yang sama seperti tabung yang lain.
Penilaian hasil :
Waktu pembekuan dinyatakan dengan menentukan rata-rata hasil pemeriksaan tabung I dan
tabung II tersebut.
Contoh : misal tabung I beku dalam waktu 9 menit, tabung II beku dalam waktu 10 menit,
maka waktu pembekuannya = ( 9+10 ) : 2 = 9,5 menit.
Arti klinis :
Normal
: 9 15 menit.
Memanjang : kelainan beberapa faktor koagulasi ( koagulopati ) inhibitor dalam
darah misal heparin.
Catatan :
1. Pengambilan darah tidak boleh terlalu banyak tusukan supaya cairan jaringan tak ikut
masuk dalam darah ( mempercepat timbulnya bekuan darah )
2. Waktu pengambilan darah tidak boleh lebih dari 30 detik supaya tak terjadi proses
pembekuan sebelum pemeriksaan dikerjakan.
3. Alat-alat yang digunakan untuk pemeriksaan harus bebas kotoran dan kering.

24