ptica biome

dica
De la holografa digital a la o
Reporte 3
Conferencista: Dr. Freddy A. Monroy
5 de Septiembre, 2016
n
Seminario Fundamentos de Investigacio
Jorge Enrique Garca-Farieta

El profesor Dr. Freddy Monroy hace parte del Grupo de Optica

Aplicada (GOA), el cual tambien esta integrado por los profesores Germ
an Arenas, Ricardo Amezquita y Yobani Meja. Dentro de los objetivos de grupo
est
a brindar apoyo a la industra colombiana, a las ciencias basicas y a las ciencias de la salud a traves del
entendimiento de los fenomenos
opticos. Algunas de las areas de investigaci
on del grupo son: la holografa,
interferometra, dise
no
optico,
optica difractiva y pruebas opticas.
En la charla, el profesor Monroy hizo un recorrido a traves de las diferentes tecnicas de caracterizaci
on que se
utilizan en optica cl
asica, as como algunas de las posibles aplicaciones que se podran realizar. La motivaci
on
para estos estudios est
a en la comprensi
on de fenomenos biologicos y/o medicos utilizando tecnicas de cuantificaci
on de fase, por lo que este campo se denomina optica biomedica. Justamente as inicio la charla. Tpicamente
en el cuerpo humano hay millones de celulas, algunas de ellas, como los globulos rojos, deben atravesar por
canales, vasos, venas y/o arterias para realizar algunas de sus funciones. Los globulos se deforman al pasar por
el canal y con ello deben soportar esfuerzos mec
anicos para luego retomar su forma. Con la optica biomedica
se pretende describir las propiedades mec
anicas de los globulos para deformarse y retomar su forma sin da
no o
alteracion de las funciones biologicas. Estudiar este fenomeno es importante ya que con los esfuerzos mec
anicos
del globulo rojo en el torrente sanguneo, se podra pronosticar o diagnosticar enfermedades como la leucemia.
Para entender las propiedades mec
anicas y la morfometra de un cuerpo/objeto se puede recurrir al estudio de
im
agenes en fase y en amplitud de los mismos. Una descripci
on satisfactoria tanto cualitativa como cuantitativa
requiere combinar teora, experimento y computacion. Recordando, se sabe que en general una onda se puede
caracterizar por su amplitud y su fase, es decir y(x, y) = A cos(kx t + ), experimentalmente los sensores de
estado solido, al igual que nuestros ojos, sensan solo la intensidad, es decir una cantidad que proporcional a A2 ,
sin embargo la informacion de la fase se pierde o no es medida. Con base en la aproximaci
on de onda plana,
esto es una onda en la cual todos los puntos de fase del frente de onda forman un plano, se pueden estudiar dos
tipos de objetos:
Objeto de fase: Es un objeto traslucido cuyo ndice de refraccion es diferente al del medio en el que se
encuentra.
Objeto de Amplitud: Es un objeto reflectivo caracterizado por las variaciones de amplitud de la onda reflejada.
En el caso general un objeto puede transmitir y reflejar cierta cantidad de luz, as por ejemplo, cuando una onda
incide sobre una celula que es semitransparente, produce una diferencia de fase en la onda reflejada, adem
as, si
1

Objetos macroscopicos

El campo grabado
es dispersado
por el objeto

Objetos reflectivos
Objetos microscopicos

Informaci
on topogr
afica
Objetos macroscopicos
Espesor y variacion
del ndice de refracci
on

Objetos reflectivos
Objetos microscopicos
CCD

Beam
Splitter

PC

Combina
Haz

Piezo

O Colimador
L
aser

Espejo

Beam
Splitter

se mide la amplitud de dicha onda se puede obtener informacion completa de la celula. En el siguiente diagrama
se muestra la informaci
on que se puede obtener a partir del estudio de objetos macroscopicos y microsc
opicos
con base en las tecnicas de corrimiento de fase:
En el laboratorio, la amplitud se puede cuantificar utilizando detectores de estado solido, pero como medir la
fase?. Para ello se recurre a las tecnicas de cuantificacion de fase. En el diagrama esquematico de la siguiente
figura se describe la tecnica de corrimiento de fase de Yamaguchi (phase shiftting), en la que se aprecia como
cambia el campo optico a traves de cada camino hasta que la se
nal es registrada. Inicialmente un haz l
aser con
longitud de onda del orden de = 10nm se dirige hacia un divisor de haz, cuyo objetivo es dirigir el 50 % del
haz hacia un material piezoelectrico que produce un movimiento de 10-20m de un espejo; el otro 50 % se dirige
hacia un colimador que expande y homogeneiza el perfil gaussiano del haz, con esto se obtienen rayos paralelos
muy cercanos a una onda plana con la ventaja de que la densidad de energa es mas peque
na ya que el haz
es mas grande. Posteriormente la se
nal se dirige hacia un espejo para llevar la informacion hasta un sistema
de adquisicion de datos en un computador, y se compara la fase de la se
nal utilizando un segundo divisor de
haz hasta llegar al material piezoelectrico. Dependiendo del movimiento del espejo conectado al piezoelectrico
se obtiene informaci
on de la fase del frente de onda, y ademas se tiene la ventaja de que la informaci
on est
a
digitalizada. Cuantitativamente y en terminos de las amplitudes, la fase de la onda se puede escribir como:


I4 I2
(x, y) = ArcT an
I1 I3
Existen varias tecnicas para la descripci
on
optica de los objetos, una de ellas es la microscopia de contraste de
fase, pero con esta tecnica s
olo se obtienen resultados cualitativos; otra tecnica es la proyeccion de Fringe, en
la que se produce una deformaci
on del frente de onda, se forma corrimiento en las franjas del sistema
optico
y se determina la topografa de las superficies para reconstruir la informacion de un volumen 3D. Dentro de
2

Grabar
Holograma

FFT

Fourier
Filtering

Espectro de
Propagacion
angular

IFFT

Amplitud de Envolvimiento
Desenvolvimiento de fase

las aplicaciones de esta tecnica esta el an

alisis de documentos legalmente cuestionados, por ejemplo cheques,
con el objetivo de verificar si estos han sido modificados, para ello se observan los mapas de microestructura
del papel. Otra aplicaci
on esta en la balstica, en cuyo caso se puede determinar el arma del que fue disparado
cierto proyectil. Dentro de las tecnicas cuantitativas cabe resaltar la interferometra Talbot, que se basa en el
efecto Talbot, esto es, la difracci
on que sufre un campo optico cuando una onda plana incide sobre una red
periodica produciendo diferentes puntos de enfoque y desenfoque.
Todas estas tecnicas dan como resultado imagenes de muy buena resolucion, sin embargo muchas de ellas
son invasivas. Por esta raz
on el profesor Monroy se centro despues en hablar sobre las tecnicas hologr
aficas,
ya que no son invasivas y se pueden obtener buenos resultados. La holografa se inicia con los trabajos de
Dennis Gabor, y la diferencia fundamental entre una fotografa y un holograma radica en la informaci
on que se
registra, en las fotografas se captura la intensidad de un campo de luz, en tanto en un holograma se registra
la diferencia de fase, esto posibilita ver en profundidad. Esta tecnica consiste en grabar un campo
optico
complejo (experimentalmente) y luego recobrar numericamente el campo optico. En la holografa digital se
usan sensores de estado solido para grabar la informacion y hacer analisis cuantitativo, pero que es lo que
se graba?, esencialmente una matriz de amplitudes y fases. Las imagenes holograficas contienen ruido natural
denominado patron de speckle, este se caracteriza por ser un patron de interferencia aleatorio en todo el campo
optico; la demas informaci
on esta contenida en los patrones de difraccion que produce el objeto. Para grabar
el holograma se tienen dos campos, uno para el objeto O(x, y) y otro del campo de referencia R(x, y), que se
definen de la siguiente manera:
O(x, y) = |O(x, y)|ei(x,y)
R(x, y) = |R(x, y)|ei(x,y)
Para decodificar el campo por interferencia se calcula la intensidad en terminos del objeto y de la referencia,
teniendose:
I(x, y) = |O + R|2
= OO + RR + OR + O R
= O2 + R2 + 2OR cos[(x, y) (x, y)]
En esta expresion se puede diferenciar el termino que diferencia un holograma de
una diferencia de fase cos[(x, y) (x, y)]. La reconstruccion del holograma se
estudio con un haz igual al de referencia, es decir que = RI = R|R|2 + O|O|2 +
|
{z
}
Orden cero

una fotografa ya que aparece

hace iluminando el objeto de
2
|R|2 O + R
| {zO} . Una vez
| {z }

Twin image

Imagen real

reconstruido el holograma el problema se traslada al ambito numerico para filtrar el orden cero que contiene la
informacion relevante del objeto tanto en amplitud (I A2 ) como de fase (patrones de interferencia). Una de las
aplicaciones mas famosas de estas tecnicas no destructivas esta en la caracterizacion de objetos microsc
opicos,
por estas escalas se denomina Microscopia Digital Holografica (DHM), y es usual utilizar un interfer
ometro tipo
MachZehnder modificado para transmisi
on. El proceso esencialmente se resume en el siguiente diagrama: Con
los diagramas de fase producidos por los objetos iluminados se obtienen variaciones de ~r, es decir informaci
on
de topografa, y tambien del ndice de refraccion del medio n = n(~r). Experimentalmente no es sencillo grabar
un holograma de objetos inmersos en un medio, por ejemplo para las aplicaciones medicas existen diversas
variables que no pueden ser controladas como la temperatura, presion y dificultan el proceso de medici
on. Por
esta razon es que se ha complementado la tecnica holografica con la tomografa, realizando cortes transversales
3

de los planos de observaci

on para luego reconstruir las imagenes 3D a traves de las proyecciones capturadas. En
el ejemplo de la charla el profesor Monroy mostro una fibra optica a la que se la ha practicado una microtopografa que consta aproximadamente de 100 proyecciones holograficas de 0o a 180o y se reconstruyeron diferentes
planos a diferentes alturas dando la informacion geometrica necesaria para caracterizarla.
Finalmente el Dr. Monroy habl
o sobre los u
ltimos trabajos de maestra y doctorado que se han realizado en

el grupo de Optica Aplicada, los cuales est

an enfocados principalmente en la optica biomedica, y van desde
el estudio de ndices de refracci
on y topografa de granos de polen, hasta el estudio de esfuerzos mec
anicos de
globulos rojos en el torrente sanguneo. Este u
ltimo estudio tiene fines de pronostico medico para enfermedades
como la leucemia, ya que el estres osm
otico se puede caracterizar con la informacion de los mapas de fase de
las celulas y as estimar el contenido de hemoglobina infectada. Sin lugar a duda este es un campo altamente
activo, en el cual a
un hay mucho trabajo por realizar tanto a nivel teorico, experimental como computacional.