Microsoft Word - Protocolos de Laboratorio

LABORATORIO
CLINICO
PROTOCOLOS DE
PROCEDIMIENTOS
ROVIRA
Elaborado por JUAN PABLO MENESES BEDOYA.
Bacterilogo.
EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO

HOSPITAL "SAN VICENTE"
ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
NORMAS DE BIOSEGURIDAD .....................................................................................................................12

LAVADO DE MATERIAL ......................................................................................................................15
Lavado del Material en Hematologa ........................................................................................................15
Tubo y Frascos ......................................................................................................................................16
Lminas Nuevas ....................................................................................................................................16
Lminas Usadas .....................................................................................................................................16
Lavado del Material en Qumica Clnica ...................................................................................................16
Tubos y Pipetas......................................................................................................................................16
Lavado del Material en Parasitologa ........................................................................................................17
Lminas .................................................................................................................................................17
Laminillas ..............................................................................................................................................17
Lavado del Material de Orinas ..................................................................................................................17
Lminas y Lminillas ................................................................................................................................17
Tubos .........................................................................................................................................................18
Otro Material Contaminado .......................................................................................................................18
Lavado del Material en Bacteriologa........................................................................................................18
Control de la Limpieza del Material de Vidrio ..........................................................................................18
Interpretacin.............................................................................................................................................18
Preparacin de la Mezcla Sulfocrmica ....................................................................................................19
Esterilizacin .............................................................................................................................................19
Propsito de la Esterilizacin ....................................................................................................................19
Tipo de Esterilizacin ................................................................................................................................19
Autoclave...................................................................................................................................................19
Esterilizacin por Calor Seco ....................................................................................................................20
Horno .........................................................................................................................................................20
Desinfectantes ms Usados en Bacteriologa ............................................................................................20
Microbicida: ..............................................................................................................................................20
Agentes Reductores: ..................................................................................................................................21
Agentes Oxidantes: ....................................................................................................................................21
Agentes Halgenos: ...................................................................................................................................21
Fenoles y Cresoles: ....................................................................................................................................21
Alcoholes y ter: .......................................................................................................................................21
Detergente: ................................................................................................................................................21
TOMA DE MUESTRAS DE SANGRE........................................................................................................22
Instrucciones al Usuario: ...........................................................................................................................22
EN AYUNO ..............................................................................................................................................22
Qumica Clnica:........................................................................................................................................22
Hematologa: .............................................................................................................................................22
Serologa: ..................................................................................................................................................22
NO AYUNO ..............................................................................................................................................22
Hematologa: .............................................................................................................................................22
Inmunoserologa: .......................................................................................................................................22
RECEPCIN DE LAS MUESTRAS ............................................................................................................22
TOMA DE MUESTRAS EN HEMATOLOGA ..........................................................................................23
Mtodo de Extraccin de Sangre Capilar ..................................................................................................23
Materiales ..................................................................................................................................................23
Procedimiento ............................................................................................................................................23
Recomendaciones ......................................................................................................................................23
Complicaciones de la Puncin Cutnea .....................................................................................................23
Mtodo de Extraccin de Sangre Venosa ..................................................................................................24
Materiales ..................................................................................................................................................24
Procedimiento ............................................................................................................................................24

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
Complicaciones de la Venipuntura ............................................................................................................25

1. Local Inmediata .............................................................................................................................25
2. Local Diferida ................................................................................................................................25
3. General Tarda ...............................................................................................................................25
Toma de Muestras para Pruebas Bioqumicas ...............................................................................................26
Pasos a Seguir para la Separacin de la Sangre en Fracciones. .................................................................26
Sangre Completa .......................................................................................................................................26
Plasma .......................................................................................................................................................26
Suero..........................................................................................................................................................26
Informe, Entrega de Resultados.................................................................................................................26
Archivo de Resultados ...............................................................................................................................27
HEMATOLOGA .............................................................................................................................................28
Conservacin de la Muestra: .....................................................................................................................28
CUADRO HEMTICO ............................................................................................................................28
Procedimiento de Toma de Muestras ........................................................................................................28
RECUERDE!.............................................................................................................................................28
HEMATOCRITO ..........................................................................................................................................29
FUNDAMENTO .......................................................................................................................................29
MICROMETODO .....................................................................................................................................29
Equipo ...................................................................................................................................................29
Materiales ..............................................................................................................................................29
Procedimiento de Toma de Muestras ....................................................................................................29
VALORES NORMALES:.........................................................................................................................30
HEMOGLOBINA .........................................................................................................................................30
FUNDAMENTO .......................................................................................................................................30
PRINCIPIO ...............................................................................................................................................30
MUESTRA ............................................................................................................................................30
REACTIVO ...........................................................................................................................................31
PREPARACION DE LA SOLUCION DE TRABAJO.........................................................................31
MATERIALES Y EQUIPOS ................................................................................................................31
PROCEDIMIENTO ..............................................................................................................................31
VALORES NORMALES ......................................................................................................................32
ERITROSEDIMENTACION ........................................................................................................................32
FUNDAMENTO .......................................................................................................................................32
RECUERDE !............................................................................................................................................33
1. MTODO DE WINTROBE ..................................................................................................................33
EQUIPO ................................................................................................................................................33
MATERIALES ......................................................................................................................................33
REACTIVO ...........................................................................................................................................33
PROCEDIMIENTO ..............................................................................................................................33
2. METODO CON HEMATOCRITOS ....................................................................................................34
MATERIALES Y EQUIPOS ................................................................................................................34
PROCEDIMIENTO ..............................................................................................................................34
RECUENTO DE LEUCOCITOS ......................................................................................................................34
REACTIVOS Y MATERIALES...........................................................................................................34
PROCEDIMIENTO ..............................................................................................................................35
CALCULO ............................................................................................................................................35
EXTENDIDO PERIFRICO Y DIFERENCIAL LEUCOCITARIO ..........................................................35
Preparacin del Extendido .........................................................................................................................36

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
MATERIALES ......................................................................................................................................36
PROCEDIMIENTO ..............................................................................................................................36
COLORACIN DE WRIGHT ..................................................................................................................37
MATERIALES ......................................................................................................................................37
PROCEDIMIENTO ..............................................................................................................................37
CAUSAS DE UNA MALA COLORACIN............................................................................................38
A. EXTENDIDO AZUL........................................................................................................................38
B. EXTENDIDO ROJO ........................................................................................................................38
C. EXTENDIDO CON PRECIPITADO ...............................................................................................38
Para realizar un buen proceso de coloracin tenga en cuenta: ..............................................................39
LECTURA.................................................................................................................................................39
VALORES NORMALES DIFERENCIAL LEUCOCITARIO. ...............................................................39
RECUENTO DE RETICULOCITOS ...........................................................................................................40
EQUIPOS Y MATERIALES ................................................................................................................40
PROCEDIMIENTO ..............................................................................................................................41
CALCULO ............................................................................................................................................41
PRUEBAS DEL SISTEMA DE COAGULACIN. ........................................................................................41
TIEMPO DE PROTROMBINA ( PT ) Y TIEMPO PARCIAL DE TROMBOPLASTINA ( PTT ). .........41
Equipo
Material Reactivos ................................................................................................................42
Procesamiento de la Muestra .....................................................................................................................43
MATERIALES Y EQUIPOS: ...................................................................................................................44
PROCEDIMIENTO PARA DETERMINAR TP ..........................................................................................44
PROCEDIMIENTO PARA DETERMINAR PTT ........................................................................................45
OTROS EXMENES HEMATOLOGICOS ................................................................................................45
PROCEDIMIENTO DE TOMA DE MUESTRA .........................................................................................46
RECUENTO DE PLAQUETAS ...................................................................................................................46
RECUENTO DIRECTO ...........................................................................................................................46
MUESTRA ............................................................................................................................................46
MATERIALES Y REACTIVOS...........................................................................................................46
PROCEDIMIENTO ..............................................................................................................................47
RECUENTO INDIRECTO .......................................................................................................................47
MUESTRA ............................................................................................................................................47
MATERIALES Y REACTIVOS...........................................................................................................47
PROCEDIMIENTO ..............................................................................................................................47
RECUENTO DE EOSINOFILOS .................................................................................................................48
DREPANOCITOS.........................................................................................................................................48
DIAGNOSTICO DE HEMOPARASITOS ...................................................................................................49
Entrevista al Usuario .................................................................................................................................49
Mtodo de la Gota Gruesa .........................................................................................................................49
Materiales y Reactivos ..............................................................................................................................49
Toma de la Muestra ...................................................................................................................................50
Coloracin de Field ...................................................................................................................................50
Equipo, Materiales y Reactivos .............................................................................................................50
Procedimiento ........................................................................................................................................51
LECTURA E INFORME: .....................................................................................................................51
QUMICA CLNICA ........................................................................................................................................52
Instrucciones al Usuario: ...............................................................................................................................52
Procedimiento de Toma de Muestras ............................................................................................................52

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
Condiciones de la Muestra ............................................................................................................................53

Hemlisis .......................................................................................................................................................53
Causas de Hemlisis en la Puncin Venosa ..................................................................................................53
Causas de Hemlisis en la Puncin Capilar ..................................................................................................54
Turbidez ........................................................................................................................................................54
Contaminacin...............................................................................................................................................54
Conservacin de la Muestra ..........................................................................................................................55
Cuidados especiales .......................................................................................................................................56
GLICEMIA. ..................................................................................................................................................58
MUESTRA: ...............................................................................................................................................58
MATERIALES:.........................................................................................................................................58
LONGITUD DE ONDA............................................................................................................................58
TEMPERATURA DE REACCION ..........................................................................................................58
PROCEDIMIENTO ..................................................................................................................................58
VALORES NORMALES ..........................................................................................................................59
COLESTEROL. ............................................................................................................................................59
MUESTRA: ...............................................................................................................................................59
MATERIALES:.........................................................................................................................................59
LONGITUD DE ONDA............................................................................................................................59
PROCEDIMIENTO ..................................................................................................................................59
TRIGLICERIDOS .........................................................................................................................................60
MUESTRA: ...............................................................................................................................................60
MATERIALES:.........................................................................................................................................60
LONGITUD DE ONDA............................................................................................................................60
PROCEDIMIENTO ..................................................................................................................................60
ACIDO RICO .............................................................................................................................................61
MUESTRA: ...............................................................................................................................................61
MATERIALES:.........................................................................................................................................61
LONGITUD DE ONDA............................................................................................................................61
PROCEDIMIENTO ..................................................................................................................................61
UREA O NITROGENO UREICO ................................................................................................................62
MUESTRA: ...............................................................................................................................................62
MATERIALES:.........................................................................................................................................62
LONGITUD DE ONDA............................................................................................................................62
PROCEDIMIENTO ..................................................................................................................................63
COLESTEROL HDL ....................................................................................................................................63
MUESTRA ................................................................................................................................................63
LONGITUD DE ONDA............................................................................................................................63
TEMPERATURA .....................................................................................................................................64
MATERIALES:.........................................................................................................................................64
PROCEDIMIENTO ..................................................................................................................................64
COLESTEROL LDL .....................................................................................................................................64
CREATININA...............................................................................................................................................64
MUESTRA ................................................................................................................................................65

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
MATERIALES:.........................................................................................................................................65
LONGITUD DE ONDA............................................................................................................................65
PROCEDIMIENTO ..................................................................................................................................65
BILIRRUBINA TOTAL ...............................................................................................................................66
MUESTRA ................................................................................................................................................66
LONGITUD DE ONDA............................................................................................................................66
TEMPERATURA .....................................................................................................................................66
MATERIALES:.........................................................................................................................................66
PREPARACION DEL REACTIVO DE TRABAJO ................................................................................66
PROCEDIMIENTO ..................................................................................................................................67
BILIRRUBINA DIRECTA. ..........................................................................................................................67
MUESTRA ................................................................................................................................................67
LONGITUD DE ONDA............................................................................................................................67
TEMPERATURA .....................................................................................................................................67
MATERIALES:.........................................................................................................................................67
PREPARACION DEL REACTIVO DE TRABAJO ................................................................................68
PROCEDIMIENTO ..................................................................................................................................68
CURVA DE GLICEMIA ..............................................................................................................................69
No debe realizar la curva de glicemia a: ....................................................................................................69
GLICEMIA POST - CARGA A LAS DOS HORAS ....................................................................................70
Condiciones del Usuario ............................................................................................................................70
GLICEMIA POST - PRANDIAL .................................................................................................................71
DETECCIN DE LA DIABETES GESTACIONAL ...................................................................................72
Test de Sullivan .........................................................................................................................................72
Condiciones de la Usuaria .........................................................................................................................72
CURVA DE TOLERANCIA A LA GLUCOSA PARA LA DETECCIN DE DIABETES
GESTACIONAL ...........................................................................................................................................72
Condiciones de la Usuaria .........................................................................................................................72
Procedimiento de toma de Muestras ..........................................................................................................72
Tome muestras de sangre venosa as: ........................................................................................................73
UROANALISIS ................................................................................................................................................74
EXAMEN DE ORINA ..................................................................................................................................74
Recoleccin de la Muestra.........................................................................................................................74
Recepcin de la Muestra ...........................................................................................................................75
Procesamiento de la muestra .....................................................................................................................75
Equipo .......................................................................................................................................................75
Materiales ..................................................................................................................................................75
Examen Organolptico ..............................................................................................................................75
Aspecto ......................................................................................................................................................76
Color ..........................................................................................................................................................76
Olor............................................................................................................................................................76
Examen Fsico-Qumico ............................................................................................................................76
Tira Reactiva .............................................................................................................................................76
Procedimiento ............................................................................................................................................78

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
Precauciones en el Uso de las Tiras Reactivas ..........................................................................................79

Examen Microscpico del Sedimento Urinario .........................................................................................79
OTRAS PRUEBAS REALIZADAS EN ORINA. ........................................................................................79
DEPURACION DE LA CREATININA: ......................................................................................................79
PROCEDIMIENTO: .................................................................................................................................79
INFORME: ................................................................................................................................................80
VALORES NORMALES: HOMBRES: 98-156ml/min. ........................................................................80
EXAMEN DE MATERIAL FECAL ................................................................................................................81
COPROLOGICO DIRECTO ........................................................................................................................82
ADVIRTALE QUE: ...............................................................................................................................82
Recepcin de la Muestra ...........................................................................................................................82
Procesamiento de la Muestra .....................................................................................................................83
Materiales y Reactivos ..............................................................................................................................83
Examen Microscpico ...............................................................................................................................83
Consistencia
Color .............................................................................................................................83
Examen Microscpico ...............................................................................................................................84
EXAMEN DE MATERIA FECAL POR MTODOS DE CONCENTRACIN .........................................85
Tcnica de Flotacin del Sulfato de Zinc ..................................................................................................85
Equipo .......................................................................................................................................................85
Materiales ..................................................................................................................................................85
Reactivos ...................................................................................................................................................85
DIAGNOSTICO DE OXIUROS ...................................................................................................................87
Tcnica de Graham ....................................................................................................................................87
Materiales ..................................................................................................................................................87
SANGRE OCULTA EN MATERIA FECAL. ..............................................................................................89
Equipo, Materiales y Reactivos .................................................................................................................89
OTROS ANLISIS EN MATERIA FECAL ................................................................................................90
Ph:..............................................................................................................................................................90
Instrucciones al Usuario: .......................................................................................................................90
Procedimiento ........................................................................................................................................90
Azcares Reductores .................................................................................................................................90
Materiales y Reactivos ..........................................................................................................................91
Procedimiento ........................................................................................................................................91
Leucocitos .................................................................................................................................................91
Materiales y Reactivos ..........................................................................................................................91
Procedimiento ........................................................................................................................................91
COLORACIN DE ZIEHL NEELSEN MODIFICADA PARA CRYPTOSPORIDIUM ...........................92
SEROLOGIA ....................................................................................................................................................93
TECNICA - VDRL......................................................................................................................................93
Equipo, Materiales.....................................................................................................................................93
Procedimiento ............................................................................................................................................94
TECNICA - RPR .........................................................................................................................................94
TCNICA..................................................................................................................................................95
LECTURA DE RESULTADOS ...............................................................................................................95

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
Reaccin Negativa: ................................................................................................................................95

Reaccin Positiva Dbil: .......................................................................................................................95
Reaccin Positiva: .................................................................................................................................96
DIAGNOSTICO DE EMBARAZO ..................................................................................................................97
Instrucciones al Usuario: ...............................................................................................................................99
Equipo, Materiales...................................................................................................................................100
Procedimiento ..........................................................................................................................................101
Recomendaciones ....................................................................................................................................101
SECRECIN OCULAR .................................................................................................................................102
PROCEDIMIENTO DE TOMA DE MUESTRAS .....................................................................................102
Instrucciones al Usuario: .........................................................................................................................102
EXAMEN DIRECTO ..................................................................................................................................102
Materiales
Reactivos ...................................................................................................................102
Procedimiento ..........................................................................................................................................102
SECRECIN OTICA......................................................................................................................................104
PROCEDIMIENTO DE TOMA DE MUESTRAS .....................................................................................104
EXAMEN DIRECTO ..................................................................................................................................104
Materiales
Reactivos ...................................................................................................................104
Procedimiento ..........................................................................................................................................104
SECRECIN DE HERIDAS Y LESIONES ...................................................................................................105
Instrucciones al Usuario: .............................................................................................................................105
EXAMEN DIRECTO ..................................................................................................................................105
Materiales
Reactivos ...................................................................................................................105
Procedimiento de Toma de Muestras ......................................................................................................106
SECRECIN VAGINAL ................................................................................................................................107
Instrucciones a la Usuaria para el Examen Directo y el Cultivo. ................................................................107
EXAMEN DIRECTO ..................................................................................................................................107
Equipo
Materiales Reactivos ...........................................................................................................107
SECRECIN VAGINAL EN NIAS ........................................................................................................108
EXAMEN DIRECTO ..................................................................................................................................108
Examen en Fresco ...................................................................................................................................109
Frotis........................................................................................................................................................109
SECRECIN URETRAL ...........................................................................................................................109
Instrucciones al Usuario para el Examen del Frotis y el Cultivo. ................................................................109
EXAMEN DIRECTO ..................................................................................................................................109
Materiales
Reactivos ....................................................................................................................109
OROFARINGEO ........................................................................................................................................110
EXAMEN DIRECTO ..................................................................................................................................110
GARGANTA...............................................................................................................................................112
EXAMEN DIRECTO ..................................................................................................................................112
Materiales
Reactivos ...................................................................................................................112
FOSA NASAL. MICOBACTERIUM LEPRAE .......................................................................................113
EXAMEN DIRECTO ..................................................................................................................................113
Materiales
Reactivos ...................................................................................................................113
a. Procedimiento para la toma de muestras ............................................................................................114
Forma prctica de hacer los frotis............................................................................................................115
b. Coloracin ..........................................................................................................................................115
c. Lectura de la baciloscopia...................................................................................................................116

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
1. ndice Bacilar (IB) ...........................................................................................................................117

DIAGNOSTICO DE TUBERCULOSIS .........................................................................................................118
BACILOSCOPIA ........................................................................................................................................118
Recepcin de la Muestra .........................................................................................................................119
Conservacin de la Muestra ....................................................................................................................119
Remisin de las Muestras ........................................................................................................................119
Procesamiento de la muestra ...................................................................................................................120
Preparacin del Extendido .......................................................................................................................120
Materiales y Reactivos ........................................................................................................................120
Procedimiento ......................................................................................................................................120
Recomendaciones ................................................................................................................................121
Coloracin de Ziehl Neelsen ...................................................................................................................121
Materiales ............................................................................................................................................122
Reactivos .............................................................................................................................................122
Procedimiento ......................................................................................................................................122
Normas de Seguridad al Terminar el Trabajo..........................................................................................123
GUA PARA EL ENVI DE MUESTRAS AL LABORATORIO DE LA DIRECCIN GENERAL DE
MEDICINA LEGAL - BAGUE ......................................................................................................................124
BURUNDANGA: .......................................................................................................................................124
LQUIDOS: .................................................................................................................................................124
ALIMENTOS: .............................................................................................................................................124
PLANTAS: ..................................................................................................................................................124
ESPERMATOZOIDES: ..............................................................................................................................125
PARA MANCHAS QUE CONTENGAN SEMEN: ...................................................................................125
CONTAMINACIN VENREA: ..............................................................................................................125
SUERO PARA SEROLOGIA DE: VDRL: ................................................................................................125
HIV: .............................................................................................................................................................125
PRUEBA DE EMBARAZO:.......................................................................................................................125
PELOS:........................................................................................................................................................126
MANCHAS DE SANGRE DE ELEMENTOS TRANSPORTABLES: .....................................................126
MANCHAS DE SANGRE TOMADAS DIRECTAMENTE DEL INDIVIDUO: .....................................126
MANCHAS DE SANGRE DE ELEMENTOS NO TRANSPORTABLES: ..............................................126
ALCOHOLEMIA: .......................................................................................................................................126
OJO: ............................................................................................................................................................127
ROTULACION: ..........................................................................................................................................127
NOTA: En el caso de alcoholemia debe tomarse muestra tanto a la vctima como al victimario. ..............128
COLORACIN DE ALBERT ....................................................................................................................129
Equipo
Materiales Reactivos ...........................................................................................................129
NOTA: .....................................................................................................................................................129
COLORACIN DE GRAM ........................................................................................................................130
Equipo
Materiales
Reactivos .....................................................................................................130
Procedimiento ..........................................................................................................................................130
CAUSAS DE ERROR EN LA COLORACIN GRAM ............................................................................131
REMISIN DE MUESTRAS PARA MICOLOGIA ..................................................................................132
BIBLIOGRAFIA .........................................................................................................................................133

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
10
DEFINICIN.
Es el conjunto de procedimientos tcnicos administrativos que le permiten al
usuario acceder a la realizacin de estudios complementarios de diagnostico
mediante la toma, procesamiento y anlisis de fluidos lquidos corporales e
histolgicos en el laboratorio clnico y bacteriolgico del Hospital San Vicente de
Rovira.
OBJETIVO.
Garantizar la oportunidad acceso, continuidad y seguridad a los usuarios del
hospital la realizacin y obtencin de reportes de laboratorio de calidad y seguridad
al usuario y al mdico tratante.
OBJETIVOS ESPECFICOS.
Identificar las personas involucradas en cada proceso del rea.
Determinar las labores que se deben desarrollar as como los documentos a
diligenciar y el suministro de elementos.
Reducir al mximo los trmites en cada proceso.
Definir un manual de bioseguridad para implantar controles en el rea que
garantice la seguridad, eficacia y calidad en la prestacin del servicio.
Establecer un protocolo de limpieza y desinfeccin, un manual de toma de
muestras y unos instructivos, que faciliten la tarea de la bacteriloga para
aclarar y unificar conceptos en el momento de llevar a cabo su trabajo.
Contar con un protocolo de control de calidad tanto interno como externo en
el laboratorio clnico con el fin de garantizar la veracidad de los resultados
del laboratorio.
CARACTERSTICAS DEL SERVICIO.

El laboratorio clnico del hospital san Vicente, garantiza la oportunidad en la
realizacin de estudios complementarios de diagnostico, las 24 horas del da, en
jornada de ocho horas diarias y las restantes horas de acuerdo a la solicitud medica

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
11
de emergencias, los instructivos que se realizan son los correspondientes al nivel de

complejidad y capacidad resolutiva del hospital San Vicente de Rovira E.S.E.
Cada examen de laboratorio clnico debe ser realizado a los pacientes de forma
individual y existe una gran cantidad de factores que pueden afectar un resultado de
laboratorio. Factores propios del laboratorio clnico, factores endgenos de paciente,
factores genticos, factores exgenos, entre otros.
El trabajo en el laboratorio clnico se clasifica en tres grandes grupos temticos.
Toma de muestras.
Anlisis de muestras.
Entrega de resultados.
En cada uno de estos temas, se requiere de numerosas medidas de atencin y
cuidado con el fin de minimizar al mximo los errores factibles de ser cometidos en
la prctica diaria.
Debemos enfatizar que el trabajo en el laboratorio clnico, como cualquier tipo de
trabajo, es realizado por seres humanos y no estamos extensos de cometer
equivocaciones, pero estos errores pueden ser erradicados de nuestro laboratorio
clnico, si se mantienen eficientes actitudes ticas, profesionales y de
procedimientos.
PRINCIPALES RAZONES PARA UTILIZAR SERVICIOS DEL

LABORATORIO CLINICO.
Descubrir en etapas subclnicas.
Ratificar un diagnostico sospechado clnicamente.
Obtener informacin sobre el pronstico de una enfermedad.
Establecer un dialogo basado en una sospecha bien definida.
Vigilar un tratamiento o conocer una determinada respuesta teraputica.

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
12
NORMAS DE BIOSEGURIDAD
El trabajador de la salud est permanentemente expuesto al riesgo de infectarse con los

microorganismos presentes en los pacientes, en las muestras o en los objetos con los cuales
se instrumentan los pacientes, pero este riesgo puede reducirse si se conocen y respetan las
normas de bioseguridad existentes.
El principal riesgo es la contaminacin de las manos y de las mucosas ocular, nasal y bucal
por sangre y otros humores orgnicos infectados. Esa contaminacin se produce como
consecuencia de cortes y pinchazos, provocados por objetos afilados, as como por el
derrame y las salpicaduras de material de muestras.
Todas las muestras que se reciben en el laboratorio deben ser manejadas como
potencialmente infectantes, observando todas las normas de bioseguridad establecidas, para
as, garantizar la salud del trabajador.
Las siguientes normas deben observarse:
Use siempre la bata de laboratorio mientras trabaja y qutesela antes de salir, as no llevar
agentes infecciosos afuera del laboratorio.
La manipulacin de sangre o lquidos contaminados con ella debe hacerse siempre con
guantes; as mismo la limpieza de mesas, materiales, instrumentos y objetos contaminados
con sangre o lquidos de precaucin universal.
1. Deseche los guantes siempre que piense que se ha contaminado; lvese las manos y
pngase un par de guantes nuevos.
2.
No se toque con las manos enguantadas los ojos, la nariz, otras mucosas expuestas ni la
piel descubierta.
3. No abandone el lugar de trabajo ni se pasee por el laboratorio con los guantes puestos.
- La materia fecal no se considera una sustancia de Precaucin Universal, excepto
cuando
esta contaminada con sangre, sinembargo es ideal manipular estas muestras
con guantes.
Desarrolle el hbito de mantener sus manos lejos de la cara; no lleve sus dedos a la boca,
a los ojos o la nariz.
- Prepare diariamente una solucin desinfectante para la limpieza de reas de trabajo y
para descartar muestras y objetos contaminados. Puede utilizar Hipoclorito de Sodio el
cual se consigue como lmpido, Clorox, Decol, etc.; prepare una dilucin al 0.5% en un
recipiente no metlico, de pared dura, de color oscuro para protegerlo de la luz.
Asegrese de preparar una dilucin correcta porque tanto el exceso como la falta de
cloro libre hacen que el hipoclorito pierda su poder microbicida. En general se utiliza

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
13
una dilucin 1:10 dado que el producto que se consigue en el pas viene al 5%.
Disponga varios recipientes con la solucin cerca de las reas de manejo de muestras, as
facilitar el adecuado descarte de material contaminado o sucio, como placas, tubos,
agujas, jeringas, etc.
-
Nunca pipitee con la boca ningn tipo de material biolgico o qumico. Use siempre
pipeteadores.
No coma ni fume dentro del laboratorio; evite conversar mientras trabaja, as estar mas
concentrado y tendr menos riesgos de un accidente de trabajo
Rotule adecuadamente todas las muestras y los reactivos, colquelas en un lugar seguro,
evitando que se derramen o se rompa el envase.
Designe y marque las reas dedicadas al manejo de muestras.
No coloque objetos personales (gafas, bolsos, libros) sobre la mesa de trabajo.
Cuando tenga alguna herida o escoracin la piel, no trabaje con ella descubierta; cbrala
con gasa o micropore y emplee guantes para la manipulacin de muestras.
Lvese las manos con abundante agua y jabn inmediatamente despus de ensuciarse o
manipular alguna muestra.
Nunca los guantes son un sustituto del lavado de manos.

-
Cuando se derrame una muestra cubra la superficie sucia con Hipoclorito al 0.5%,
djelo actuar entre 5-10 minutos y limpie el rea, luego agregue mas Hipoclorito y
proceda normalmente a la limpieza. La persona que realiza esta actividad debe usar
guantes de caucho.
4. Al terminar la jornada de trabajo limpie el rea con la solucin de hipoclorito de sodio.
Descarte el material contaminado en bolsas plsticas, bien cerradas y marcadas
material contaminado; asegrese que el personal de servicios generales no va a
correr riesgos de infeccin por manipular basura descartada en forma insegura. Todo el
material de desecho debe ser desinfectado antes de descartarlo en la basura. La
bioseguridad sobrepasa los lmites del laboratorio.
5. Mantenga el laboratorio limpio y ordenado, evitando la presencia de equipo y material

que no tenga relacin con el trabajo.
6. Siempre que sea posible, evite usar agujas y otros instrumentos afiliados. Coloque las
agujas, jeringas y otros instrumentos y objetos afilados usados en un recipiente
imperforable.

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
14
7. Las agujas destruyalas en el equipo disponible (incinerador) en el laboratorio y

descartelas en los recipientes respectivos(guardianes).
No vuelva a tapar las agujas usadas ni las desacople de las jeringas.

8. Asegrese de que exista un programa eficaz de lucha contra insectos y roedores.
- Lave muy bien sus manos con agua y jabn antes de salir del laboratorio.
- En caso de tener un accidente laboral por trauma percutneo o de mucosas con un lquido
de precaucin universal, lave inmediatamente el rea expuesta e informe a su jefe
inmediato y acate las recomendaciones de manejo y seguimiento.
10. Manipulacin y Evacuacin de Material y Desechos Contaminados.
-
El material reutilizable, como pipetas, cnulas y tubos para muestras, debe colocarse en
un recipiente metlico o de plstico imperforable en el puesto de trabajo. Despus es
preciso desinfectarlo por mtodos qumicos antes de limpiarlo e introducirlo en el
autoclave. Durante las tareas de desinfeccin y limpieza deben llevarse guantes.
- Las batas y otras prendas protectoras contaminadas se depositarn en un recipiente

distinto
dentro del laboratorio. Antes de volver a usarlas es preciso esterilizarlas y
lavarlas.
- El material contaminado desechable con sangre, materia fecal y otros instrumentos u
objetos y lo que el personal considere, se colocan en una bolsa roja, la cual debe ser
recogida una (1) vez al da por el personal de aseo, quien la lleva al rea de
mantenimiento, donde existe un recipiente adecuado para su almacenamiento y posterior
entrega para su incineracin.

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
15
LAVADO DE MATERIAL
El material de vidrio es el de ms uso en el laboratorio y por ello su inadecuado lavado y
limpieza incide directamente sobre los resultados, introduciendo errores significativos.
Tenga en cuenta las siguientes recomendaciones en la limpieza del material:
-
Antes de empezar el proceso asegrese de disponer de los siguientes elementos:

desinfectantes, detergentes corrientes y biodegradables, agua destilada, mezcla crmica,
soda castica entre otros.
Use equipo personal de proteccin: delantal, guantes.
Seleccione el material para ser lavado.
Derrame los residuos de las muestras y los reactivos antes de lavar.
Deje el material en remojo.
Vierta abundante agua.
Lleve el material a un recipiente con agua jabonosa preparada previamente con jabn
lquido y una solucin bactericida.
Enjuague con abundante agua y proceda al lavado con jabn corriente diluido, jabn
lquido o detergente biodegradable.
Elimine el exceso de grasa del material utilizando un solvente orgnico como la mezcla
crmica.
Enjuague el material cuatro veces con agua corriente y dos veces con agua destilada, as
elimina los restos de cromatos que producen interferencia en la lectura de las
determinaciones, especialmente las enzimas.
Lave el fregadero con cepillo y jabn, luego desinfctelo con una solucin bactericida.
Lavado del Material en Hematologa

La cristalera no debe estar contaminada con detergentes. Su presencia as sea en
pequeas cantidades provoca hemlisis.

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
16
Tubo y Frascos
- Lave con agua corriente y con un cepillo suave.
- Colquelos en mezcla crmica durante 24 horas.
- Enjuguelos con agua corriente, luego con agua destilada.
- Colquelos en una gradilla a escurrir.
Lminas Nuevas
- Colquelas en mezcla cromtica durante 12 horas.
- Lvelas cuidadosamente con agua corriente.
- Djelas en alcohol etlico comercial.
- Squelas con un pao limpio.
Lminas Usadas
- Lvelas con agua jabonosa caliente para remocin del colorante, por 30 minutos.
- Enjuguelas con agua corriente.
- Sumrjelas en alcohol etlico comercial.
- Squelas con un pao limpio y suave.
Lavado del Material en Qumica Clnica
La cristalera para bioqumica no solamente debe estar limpia, sino que debe estar libre de
sustancias contaminadas y constituyentes potenciales orgnicos que puedan alterar el
resultado de un anlisis qumico.
Tubos y Pipetas
- Coloque los tubos y las pipetas separadamente en un recipiente que contenga agua
corriente para que el suero, la sangre y las soluciones qumicas no se sequen.
- Enjuague con agua del chorro.
- Pselo por hipoclorito de sodio al 5.25% para desinfectar.
- Lave con detergente biodegradable al 2% ( Extran.Tween ) o con un detergente nacional
lquido al 5%.
- Enjuague con agua corriente y por ltimo con agua destilada.
- Coloque el material en una gradilla y seque los tubos en el horno a 180 grados
centgrados por 30 minutos, y las pipetas a una temperatura de 37 GC.
- El material que se usa en la determinacin de sodio, potasio, calcio, hierro, colquelo en
cido ntrico al 20% durante 12 horas. Enjuague con agua desionizada.
- El material engrasado y manchado pselo por mezcla crmica media hora si se necesita
con urgencia o djelo durante 12 horas.
- Enjuague con agua corriente y luego con agua destilada.

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
17
Las puntas plsticas de las pipetas automticas para eliminarle los residuos adheridos,
enjuguelas con cido clorhdrico al 1% y luego con hidrxido de sodio al 1%.
Para eliminar de las cubetas contaminantes persistentes lavarlas con la siguiente
solucin: cido sulfrico al 50%, agua oxigenada al 10%, mezclar en partes iguales y
llenar la cubeta despus de dos horas, enjuagar con agua bidestilada.
Lavado del Material en Parasitologa

Lminas
1. Descrtelas en un frasco con solucin desinfectante.
2. Djelas en remojo en solucin jabonosa con hipoclorito por 24 horas.
3. Lvelas al da siguiente con agua jabonosa y luego con agua corriente.
4. Colquelas a secar al aire.
Laminillas
1. Colquelas en un vaso grande de precipitado con una solucin dbil de detergente
y con un desinfectante preparado como se indica a continuacin:
200 ml. de agua.
3 ml. de detergente
15 ml. de desinfectante
deje actuar durante 1 hora.
2. Enjuague cuatro veces con agua de grifo.
3. Lvelas con agua desmineralizada.
4. Escurra y colquelas en una pieza de gasa doblada y llvelas al horno a 60 GC y
consrvelas en caja de petri.
Lavado del Material de Orinas
Frasco para la recoleccin de muestras:
1. Enjuague estos recipientes con abundante agua corriente y agrgueles solucin
desinfectante hipoclorito de sodio al 5%.
2. Lvelos con agua jabonosa.
3. Enjuguelos con agua corriente.
4. Pngalos a secar en el horno a 170 GC, durante 30 minutos o esterilice en autoclave si
son para cultivo.
Lminas y Lminillas

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
18
Proceda como en el lavado de material para parasitologa.

Tubos
- Enjuague con agua corriente.
- Lave con solucin jabonosa con desinfectante.
- Enjuague con agua corriente varias veces.
- Seque en el horno.
Otro Material Contaminado
El material contaminado de lquidos y secreciones corporales que se utilicen en los anlisis
de las muestras, deben colocarse en autoclave para prevenir enfermedades.
Lavado del Material en Bacteriologa
- Coloque en el autoclave el material que se utiliz para el anlisis de las muestras y
esterilice a 15 libras de presin durante 30 minutos.
- Descarte el contenido ya estril (medios de cultivo, escobillones, bajalenguas, gasa o
algodones), en una bolsa plstica para su incineracin.
- El material colquelo en una solucin jabonosa y utilice escobillones en el proceso de
lavado.
- Enjuague con agua corriente.
- Seque el material de vidrio en el horno a 80 GC y el material de plstico a 50 GC.
- Coloque al material de vidrio limpio y seco tapones de algodn, material plstico
adherente ( parafilm ) o pequeas tapas hechas en papel y gurdelo en una vitrina para
protegerlo del polvo.
Control de la Limpieza del Material de Vidrio
Realice el siguiente procedimiento para comprobar si el detergente ha sido eliminado de la
vidriera.
1.
2.
3.
4.
Escoja al azar una pieza de la cristalera.

Agregue a la pieza a probar 20 ml. de agua desionizada y agite dentro del frasco.
Agregue dos gotas de bromosulfaleina (BSP) al agua, mezcle.
Haga un control positivo con otra pieza de vidrio a la cual se le ha adicionado 1 ml. de
detergente.
Interpretacin
POSITIVO, color prpura. Indica presencia de detergente.

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
19
Preparacin de la Mezcla Sulfocrmica

- Agregar lentamente y con agitacin constante a 500 ml. de agua destilada, 250 ml. de
cido sulfrico concentrado, efectuar este procedimiento en bao de hielo.
- Agregar 100 gr. de dicromato de potasio mezcle hasta disolver. Complete a 1000 ml.
con agua destilada.
Esterilizacin
Esterilizar es eliminar de un objeto o una sustancia todas las formas de vida.
El equipo de laboratorio que se esteriliza queda libre de microorganismos vivos.
Los propsitos de esterilizacin son:
a. Preparar el material para la recoleccin de muestras.
b. Desinfectar los materiales contaminados.
c. Preparar el material que se utiliza en los cultivos.
La esterilizacin se logra por medio de:
a.
b.
c.
d.
Calor hmedo, autoclave, ebullicin.

Calor seco, horno de aire caliente, flameado.
Filtracin.
Agentes qumicos.
Propsito de la Esterilizacin
1. Recipientes de recoleccin de muestra.
2. Desinfeccin de materiales contaminados.
3. Desinfeccin de utensilios empleados en microbiologa.
Tipo de Esterilizacin
a. Calor hmedo ( autoclave y ebullicin ).
b. Color seco ( horno de aire caliente y flameado ).
Autoclave
El aumento de la presin y la temperatura producida por el calentamiento del agua en un
recipiente cerrado, elimina toda clase de grmenes. La esterilizacin se logra a 121 GC y a
15 libras de presin durante 20 minutos. Esterilice el material contaminado durante 30
minutos.

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
20
Procedimiento
a. Llene con agua el fondo del autoclave ( hasta el soporte de la canasta ).
b. Introduzca en el autoclave la canasta con los materiales que se van a esterilizar.
c. Cierre la tapa del autoclave, atornillando a niveles iguales los sujetadores de la tapa con
firmeza pero sin apretar demasiado.
d. Abra la vlvula de salida de aire.
e. Inicie el calentamiento del autoclave.
f. Vigile la vlvula de salida del aire hasta que aparezca un chorro de vapor. Durante 3-4
minutos hasta que el chorro de vapor sea uniforme y continuo.
g. Cierre a continuacin la vlvula de salida de aire.
h. Cuando se observa la temperatura deseada: 120 grados centgrados ( 15 libras ) regular
el calor para esterilizar, con el botn Y.
i. Dejarlo durante 15 minutos.
j. Pasado este tiempo apagarlo.
k. Cuando halla salido todo el vapor, se puede abrir la olla y sacar el material esterilizado.
Preparacin del Material
Envuelva todo el material a esterilizar en papel Kraft, amarre con una piola los tubos y
frascos para toma de muestras. Las pipetas Pasteur colquelas en tubos grandes y amplios
y tapones con algodn.
Esterilizacin por Calor Seco
Horno
Esterilice en el horno el material de vidrio y de metal a una temperatura de 170 Grados
Centgrados durante una hora.
Esterilice el material voluminoso o pesado a 170 grados centgrados durante 2 horas.
Desinfectantes ms Usados en Bacteriologa
Microbicida:
Cualquier agente qumico que destruye ms de un tipo de microorganismos, por ejemplo
bacterias, virus, protozoos, algas.

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
21
Agentes Reductores:
Solucin de formaldehdo al 5% ( formol ).
Agentes Oxidantes:
cido ntrico, agua oxigenada, hipoclorito, permanganato de potasio.
Agentes Halgenos:
Cloro, bromo, yodo. Los hipocloritos son muy usados, eficaces en superficies limpias y en
concentracin adecuada. Los hipocloritos son provistos ya sea como lquidos o slidos y
en general contienen del 2% al 10% de cloro disponible en lquido y hasta el 70%
disponible en polvo.
Los desinfectantes con yodo, tienen accin bactericida, fungicida, viricida y accin
detergente.
Fenoles y Cresoles:
Son germicidas y fungicidas muy eficaces.
Alcoholes y ter:
Alcohol al 77%.
Detergente:
Jabones comerciales con sustancias germicidas.
El detergente es un producto destinado a combatir la suciedad visible, en presentaciones
lquidas y slidas.

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
22
TOMA DE MUESTRAS DE SANGRE

El laboratorio tiene un compromiso de calidad en la recoleccin de las muestras de los
pacientes. La realizacin correcta de este proceso requiere de una formacin adecuada del
personal en las tcnicas, unos procedimientos estandarizados, y un inters y preocupacin
por el bienestar del paciente.
Instrucciones al Usuario:
Explquele en que condiciones debe presentarse para la toma de muestras de sangre.
EN AYUNO
Qumica Clnica:
Glicemia pre, glicemia pre y post, curva de tolerancia a la glucosa, creatinina, colesterol,
triglicridos, cido rico, nitrgeno urico, perfil lipdico.
Hematologa:
Tiempo de protrombina (PT), PTT.
Serologa:
VDRL. RPR, PRUEBAS CONFIRMATORIAS DE SEROLOGIAS
Inmumologica:
Pruebas de embarazo, VIH PRUEBA RAPIDA.
NO AYUNO
Hematologa:
Hb, Hto, sedimentacin, leucograma, hemoparsitos, drepanocitos, fenmeno L.E.,
reticulocitos, recuento de plaquetas, tiempo de coagulacin.
Inmunoserologa:
Seroaglutinaciones, prueba de coombs directa e indirecta, hemoclasificacin, variante Du,
toxoplasma .
Explquele en que condiciones se recolecta, que cantidad y como se maneja la muestra.
RECEPCIN DE LAS MUESTRAS
- Sea cordial en la atencin al usuario.
- Solicite la orden mdica de los exmenes y el respectivo recibo de pago.

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
23
Revise que estn completos los datos: fecha, nombre, edad. Haga las correcciones en
caso necesario.
Anote si el examen es de carcter urgente o regular, si es control, si es diagnstico.
Anote en el registro de laboratorio la muestra e identifquela.
TOMA DE MUESTRAS EN HEMATOLOGA

Mtodo de Extraccin de Sangre Capilar
Materiales
- Torundas de algodn.
- Alcohol de 70 grados.
- Lancetas.
- Lminas limpias.
- Microhematocritos con anticoagulante.
Procedimiento
- Colquese los guantes.
- Frote fuertemente el sitio a puncionar, el taln o la yema del dedo.
- La puncin del taln se realiza en nios menores de un ao en la parte ms interna o
ms externa de la superficie plantar, por dentro de la lnea trazada desde la lnea media
del dedo gordo hasta el taln; o por fuera de una lnea desde el espacio del cuarto o
quinto dedo del pie hasta el taln .
- La puncin en los dedos de la mano se realiza en el centro de la superficie palmar de la
falange distal.
- Limpie con la torunda de algodn humedecida en alcohol, deje secar.
- Pinche con la punta de la lanceta el taln a una profundidad no mayor de 2.4 mm.
- El dedo de la mano a una profundidad no mayor de 3.1 mm.
- Llene los microhematocritos e invirtalos varias veces para evitar la coagulacin de la
muestra.
- Procese inmediatamente.
Recomendaciones
- No pinche en la curvatura posterior del taln.
- No pinche en los sitios donde se hayan hecho punciones anteriores que puedan estar
infectadas.
- No puncione en los lados o en la punta de los dedos.
- No puncione en el sitio seleccionado, si ste est hinchado; ah se ha acumulado lquido
tisular o sangre en la piel y se pueden producir resultados errneos.
Complicaciones de la Puncin Cutnea

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
24
Las complicaciones de la extraccin de sangre por puncin cutnea en el taln de los nios
pequeos son la osteocondritis del hueso del taln (calcaneo) y los microabcesos de la piel.
Otra complicacin son los focos de calcificacin de la piel del taln, en recin nacidos que
han recibido numerosas punciones en esta zona.
Las complicaciones que se han descrito en las punciones cutneas de la falange de los
dedos de los recin nacidos son la infeccin en el lugar de la puncin y la gangrena.
Mtodo de Extraccin de Sangre Venosa
Materiales
- Torunda de algodn.
- Alcohol de 70 grados.
- Jeringa desechable o tubo al vaco con EDTA
- Torniquete elstico de cinta.
- Lminas limpias.
- Frascos y tubos con anticoagulante.
Procedimiento
- Lea atentamente la solicitud del examen.
- Marque el tubo con el nmero consecutivo del da que le corresponde al paciente.
- Colquese los guantes.
- Indique al paciente que se siente en posicin cmoda con el antebrazo extendido,
colocado en el apoyabrazos inclinado de manera que forme una lnea recta desde el
hombro a la mueca.
- Palpe y elija la vena apropiada. La mayora de los procedimientos de puncin venosa
en los adultos, se utiliza las venas situadas en el brazo, la vena cubital media o mediana
del codo es la ms utilizada, porque es grande, esta cercana a la piel y es menos
doloroso para el paciente.
- Si no puede extraerle de esta vena, puede hacerlo de la vena ceflica o la baslica.
- Limpie el rea con el algodn empapado de solucin de alcohol al 70% con movimiento
circular desde el centro de la zona hacia afuera. Deje secar la piel para evitar la
hemlisis.
- Coloque el torniquete y puncione inmediatamente. Si las circunstancias no lo exigen lo
ideal es omitir su uso.
- Coja la jeringa con la mano derecha y hale el mbolo con la izquierda colocando el
bisel hacia arriba.
- O coloque la aguja en el soporte del tubo de vaco y enrsquelo hasta que este apretado
con ayuda de su funda, no lo quite hasta que no este listo para realizar el proceso de
extraccin.
- Extraiga la aguja de su funda y examine la punta.
- Introduzca el tubo para recoger la muestra en el soporte, no lo empuje contra la aguja.

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
25
Mantenga el tubo de vaco con una mano y con la otra empjelo hacia el interior del
soporte el extremo posterior de la aguja pincha entonces el tapn y activa el vaco para
extraer la sangre.
Afloje el torniquete.
Llene el tubo hasta que agote el vaco y cese el flujo de sangre, asegurando de esta
manera una relacin correcta entre anticoagulante y sangre.
Saque el tubo del soporte.
Si al paciente se le toma la muestra acostado, indquele que descanse confortablemente
su espalda en la camilla, puede colocarse una almohada bajo el brazo, y lo extienda en
la misma forma que para la posicin anterior.
Retire la aguja de la jeringa o del tubo de vaco, coloque una torunda de algodn en el
lugar de la puncin, durante tres minutos con el brazo extendido.
Destruya la aguja incinerandola o utilizando un guardian para eliminarla.
Recomendaciones
El alcohol es la solucin antisptica que se utiliza con ms frecuencia, pero pueden
utilizarse antispticos del tipo del yodoformo, evite utilizar esta solucin para realizar
determinacin de electrolitos y en personas alrgicas a los compuestos de yodo.
Complicaciones de la Venipuntura
1.
2.
Local Inmediata
No deje el torniquete por largo tiempo, esto produce hemoconcentracin, hemlisis y
hematoma.
Si al succionar no entra sangre en la jeringa puede haberse contrado la vena,
entonces hay que mover la aguja adelante y atrs.
Si al puncionar llega hasta la pared de la vena o la atraviesa y no llega sangre a la
jeringa, hay que sacar un poco la aguja y succionar de nuevo.
Cuando se produce hematoma en el momento de puncionar, se extrae la aguja y se
punciona en otro sitio.
Cuando se punciona dos o tres veces sin xito, es mejor esperar un poco y pedir a otra
persona que lo haga.
Local Diferida
Puede producirse trombosis de una vena por punciones repetidas en el mismo sitio. Siga
los pasos de las recomendaciones ya anotadas.
3.
General Tarda

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
26
La hepatitis y el SIDA pueden ser causadas por transmisin del virus con la jeringa o con
la aguja contaminada. EVTELO USANDO MATERIAL DESECHABLE.
Toma de Muestras para Pruebas Bioqumicas
1. Se necesita ayuno de por lo menos 8 a 12 horas para colesterol, cido rico, triglicridos,
glicemia, creatinina, nitrgeno urico, fsforo, calcio.
2. Utilice jeringas desechables con agujas de buen calibre, o sistema al vaco. La aguja
ms utilizada es la de calibre 22 y 1.5 pulgadas, en los nios utilice agujas ms
pequeas.
3. Para pruebas de calcio no use torniquete.
4. Quite la aguja del tubo de vaco o de la jeringa y vierta en esta ltima por las paredes del
tubo la sangre, muy lentamente para evitar la hemlisis.
Pasos a Seguir para la Separacin de la Sangre en Fracciones.
Sangre Completa
- Guarde la sangre tapada hasta su proceso por un tiempo no superior de una hora.
- Si no es procesada inmediatamente gurdela en la nevera de 4 GC a 8 GC.
- Mezcle suavemente por inversin varias veces antes de procesarlas.
Plasma
- Centrifugue la muestra inmediatamente despus de tomarla.
- Si no es procesada gurdela en la nevera de 4 GC a 8 GC.
Suero
-
Deje coagular la sangre como mnimo 20 minutos a temperatura ambiente o de 5 a 10

minutos a 37 GC.
Remueva el coagulo en los bordes del tubo, y centrifugue por 10 minutos a 1500 r.p.m.
Informe, Entrega de Resultados

-
Entregue a la persona interesada para que lleve al mdico el informe del resultado.
Revise que estn completos los resultados y los exmenes solicitados.
Recomendaciones
Evite solicitar nueva muestra por:
-
Omitir datos en la identificacin de la muestra.

Por ruptura del tubo en la centrfuga.
Por muestra coagulada.

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
27
Por muestra mal tomada.
ABSTNGASE DE INFORMAR AL PACIENTE ACERCA DE SU ESTADO DE

SALUD, ESTO ES COMPETENCIA DEL MEDICO.
Archivo de Resultados
-
Archive los exmenes por orden alfabtico de acuerdo al apellido.

Los resultados de los exmenes deben guardarse un ao como archivo vivo y dos aos
como archivo muerto.
Los formularios de registro diario y mensual gurdelos por un ao.
Guarde igualmente las hojas de trabajo.

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
28
HEMATOLOGA
Hematologa es el estudio de la sangre.
La sangre est formada por las clulas sanguneas suspendidas en un lquido llamado
plasma.
Las tcnicas hematolgicas permiten evaluar algunos trastornos funcionales, y determinan
la concentracin y distribucin relativa de los componentes celulares.
Conservacin de la Muestra:
Recuerde que las muestras deben conservarse adecuadamente hasta el momento en que se
procesen.
CUADRO HEMTICO
Es el examen de laboratorio que aporta ms datos generales del estado de salud de un
paciente, orientando al mdico en el diagnstico y evolucin de algunas enfermedades.
- Infrmele que no es necesario presentarse en ayunas.
Procedimiento de Toma de Muestras
- Lea la solicitud del examen.
- Inscriba el examen en el libro de registro diario del laboratorio.
- Rotule el tubo con anticoagulante EDTA, con el nmero correspondiente del da del
usuario y marque la lmina para el extendido.
- Extraiga 3.0 ml. de sangre venosa en el tubo al vaco. Dispense con la punta de la
aguja una gota de sangre en la lmina marcada y proceda a realizar el extendido para el
recuento diferencial..
- Retire con cuidado la aguja.
- Mezcle suavemente, la sangre con el coagulante varias veces, por inversin para
garantizar la homogenizacin de la sangre con el anticuagualante y evitar la formacin
de coagulos.
RECUERDE!
-
La muestra puede permanecer a temperatura ambiente ( 20 a 25 grados centgrados )

hasta por seis horas despus de su obtencin, a excepcin de la velocidad de
sedimentacin que es solo dos horas.
Si no se procesa en este tiempo, consrvela en refrigeracin de ( 4 a 8 grados
centgrados) por un perodo mximo de 24 horas.

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
29
HEMATOCRITO
FUNDAMENTO
El hematocrito es el examen que mide el volumen de eritrocitos, se expresa como un
porcentaje del volumen de sangre total existente en una muestra y depende de la
concentracin de la hemoglobina.
La relacin del hematocrito y la concentracin de la hemoglobina lo hacen un mtodo
practico para el diagnstico de anemia. As el hematocrito disminuye siempre que lo hace la
concentracin de la hemoglobina, aumenta cuando la concentracin de la masa eritrocitaria
es superior al valor norma; tambin depende del tamao globular.
El hematocrito en ciertas condiciones patolgicas debe tenerse siempre en cuenta, no
obstante que independiente de la concentracin de la hemoglobina, su valor puede variar
tambin y a veces de manera importante con el valor del volumen plasmtico. Un descenso
del volumen plasmtico dar lugar a un falso aumento del hematocrito debido a la
hemoconcentracin y un aumento del volumen plasmtico dar lugar a una falsa anemia
por hemodilucin.
El hematocrito de sangre venosa es menor que el de sangre capilar debido a la
concentracin plasmtica.
Existen dos mtodos para su determinacin: El micromtodo y el macromtodo, siendo el
ms utilizado el micromtodo.
MICROMETODO
Equipo
Microcentrfuga
Materiales
- Tubos capilares
circulo azul sin heparina: se utilizan para sangre con
anticoagulantes.
- Tubos capilares circulo rojo con heparina: se utilizan para tomar las muestras de
sangre capilar.
- Plastilina.
- Escala de medicin.
- Coloque su extremo ms delgado marcado con el crculo directamente en el punto de
puncin o tome la muestra directamente del frasco mezclndola suavemente por
inversin.
- Llene con sangre las partes del capilar sostenindolo en posicin horizontal.

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
30
Limpie la sangre que haya quedando en el extremo del capilar.

Tapone el capilar por el extremo que no ha estado en contacto con la sangre, con la
plastilina, asegurndose que halla quedado bien sellado
Coloque el capilar con el extremo taponado hacia afuera, en la ranura de la
microcentrfuga de acuerdo al nmero de la muestra que le corresponda.
Centrifugue la sangre por el tiempo necesario(aproximadamente 4 minutos), hasta que
el volumen de los eritrocitos permanezca invariable.
El Bacterilogo determina previamente en cada microcentrfuga el tiempo, de acuerdo a
las revoluciones que alcance entre 12.000 y 15.000 r.p.m., puede oscilar entre tres y
diez minutos.
Coloque los capilares verticalmente en la plastilina conservando la numeracin y realice
la lectura y anote los resultados.
La calibracin del tiempo de centrifugado se hace de la siguiente manera:

Se utilizan 8 capilares llenos de sangre de una misma muestra, se centrifugan dos capilares
por 2 munutos y se anota el resultado; luego otros 2 por tres minutos y se anota el resultado;
otros 2 por 4 minutos y se anota el resultado y por ltimo los otros 2 capilares por 5
minutos y se anota el resultado. Se escoge el tiempo donde halla la mxima aglutinacin de
eritrocitos, es decir, el resultado del hematocrito ms bajo que se halla obtenido.
VALORES NORMALES:
HOMBRES: 39-51%
MUJERES: 35-45%
HEMOGLOBINA
FUNDAMENTO
La determinacin de la concentracin de la hemoglobina es el criterio fundamental para el
diagnstico de una anemia.
PRINCIPIO
La hemoglobina es oxidada en metahemoglobina por el ferricianuro potsico, el cual es
convertido en cianmetahemoglobina por el cianuro potsico.
MUESTRA
Sangre anticuagulada con EDTA.

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
31
REACTIVO
- Cianmetahemoglobina
PREPARACION DE LA SOLUCION DE TRABAJO
Se disuelve 90ml de agua destilada con 10ml del reactivo cianmetahemoglobina, se coloca
en un recipiente que quede bien cerrado y rotulado como ALTAMENTE TOXICO.
MATERIALES Y EQUIPOS
-
Pipeta automatica de 5 a 50 lambdas.

Tubos de vidrio.
Gradillas.
Puntas amarillas para la pipeta.
Equipo de quimica RA50.
Cronometro.
Agua destilada.
PROCEDIMIENTO
-
Tomamos un tubo de vidrio y le adicionamos 2.5ml de la solucin de trabajo.

Homogenizamos bien la muestra de sangre total.
Calibramos la pipeta en 10 lambdas y tomamos esa cantidad de sangre.
Dispensamos la sangre en el tubo con el reactivo y enjuagamos varias veces la punta
amarilla dentro de la solucin de trabajo.
Mezclamos invirtiendo el tubo varias veces y lo dejamos por lo menos tres minutos.
Prendemos el equipo RA50 y esperamos que haga su rutina de chequeo de memoria,
filtros y luz.
En el men de botones azules del lado izquierdo encontramos la tecla Hb la cual
hundimos y seguimos las instrucciones que da el equipo.
Utilizamos el sistema de flujo para leer la reaccin
Tomamos agua destilada y la pasamos como blanco de reaccin.
Luego pasamos la muestra hundiendo el botn amarillo que queda por debajo del tubo
plstico del sistema de flujo. (ver manual de uso del equipo RA50).
Hacemos lo mismo con las otras muestras y anotamos los resultados que arroje el
equipo.
Limpiamos el sistema de flujo con agua destilada hundiendo la tecla rinse y colocando
un tubo con agua destilada en el tubo plstico del sistema de flujo.
Luego hundimos la tecla abort para salirnos de la tcnica de hemoglobina.

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
32
VALORES NORMALES
-
Recien nacidos:
Nios de 1 a 5 aos:
Mujeres en edad fertil:
Mujeres embarazadas:
Hombres adultos:
194 (g/dl).
122 (g/dl)
132 (g/dl)
112 (g/dl)
142 (g/dl).
ERITROSEDIMENTACION
FUNDAMENTO
La eritrosedimentacin o VSG constituye una medida de agregabilidad de los hematies y
depende fundamentalmente de los siguientes factores:
1. Tamao de los hematies
2. Diferencia de los hematies y el plasma.
3. Viscosidad plasmtica (concentracin de fibrinogeno y/o globulinas).
4. Temperatura ambiental.
La sediemtacin se realiza en tres etapas:
1. Hemglutinacin o tendencia de los hematies a formar agregados en pilas de monedas.
2. Sediementacin o desplazamiento de los hematies hacia el fondo del recipiente a
velocidad constante.
3. Acumulo de hematies en el fondo del recipiente.
De estas etapas la ms importante es la primera, ya que de ella depende la velocidad de
todo el proceso. As cuando ms pequeos sean los agregados, ms lentamente se
producir la sedimentacin y viceversa.
Aunque se trate de una prueba inespecfica, la determinacin de la VSG es de gran utilidad
en clnica ya que fuera de las posibles variaciones fisiolgicas (embarazo, deshidratacin,
ejercicio, sobrehidratacin, fiebre, etc.), constituye un signo de enfermedad.
Asimismo y debido a la frecuente correlacin que suele observarse entre el valor de la VSG
y el grado de actividad de la enfermedad, su determinacin resulta til para seguir el curso
evolutivo de ciertas afecciones, entre las que se destacan los procesos inflamatorios

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
33
crnicos (artritis, pilimialgias y tuberculosis), o para evaluar la respuesta a determinados

tratamientos cititostticos (enfermedad de Hodkin, linfomas, mielomas multiples).
RECUERDE !
Realice el procedimiento de eritrosedimentacin en las dos primeras horas de recolectada la
muestra.
1. MTODO DE WINTROBE
EQUIPO
- Reloj.
MATERIALES
- Tubos de wintrobe.
- Soporte para tubos de wintrobe.
- Jeringa con cnula.
REACTIVO
- Solucin Salina al 0.9 %.
PROCEDIMIENTO
- Marque los tubos de wintrobe con el nmero de la muestra correspondiente.
- Mezcle la sangre suavemente por inversin.
- Proceda a llenar el tubo de wintrobe de la siguiente manera:
1. Aspire con la jeringa aproximadamente 2 cc. de sangre.
2. Tome el tubo de wintrobe, inclnelo un poco e introduzca la cnula hasta el fondo
del tubo; vierta lentamente la sangre, conservndolo siempre inclinado.
3. Retire lentamente la cnula a medida que va llenando el tubo, conserve la punta
sumergida en la sangre, as evita la formacin de espuma y burbujas de aire.
4. Llene hasta la marca 100 sin dejar burbujas.
5. Coloque el tubo en el soporte y asegrese que se encuentre en posicin
completamente vertical y cronometre una hora.
6. Enjuague varias veces la jeringa con solucin salina al 0.9 %.
7. Prosiga con las dems muestras en la misma forma.
Al cabo de una hora lea desde el punto 100 hacia el punto cero y anote la cantidad de
milimetros que recorrrio la sangre en este tiempo.

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
2. METODO CON HEMATOCRITOS
MATERIALES Y EQUIPOS
- Tubos capilares de vidrio sin heparinizar.
- Sangre total, anticuagulada con EDTA o citrato de sodio al 3.8%
- Plastilina.
- Lector de hematocritos
- Cronometro.
PROCEDIMIENTO
- Homogenizar bien la sangre anticuagulada.
- Llenar el hematocrito las tres treceras partes con la sangre.
- Sellar una de sus puntas con la plastilina.
- Colocar en forma vertical en la plastilina por una hora.
- Al cabo de la hora leerlo en sentido contrario a la lectura del hematocrito.
VALORES NORMALES
- Nios:
- Mujeres:
- Hombres:
0 a 13 mm/hora.
0 a 20 mm/hora.
0 a 9 mm/hora.
RECUENTO DE LEUCOCITOS
Se determina el nmero de globulos blancos que se encuentran en un litro de sangre.
La sangre se diluye con un liquido que realiza la lisis de todas las celulas anucleadas.
REACTIVOS Y MATERIALES
- Pipeta autoamtica de 100 a 1000 y de 5 a 50 lambdas.
-
Tubos de ensayo de vidrio.
Reactivo de Turk.
Puntas amarillas y azules.
Microscopio
34

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
Camara cuentaglobulos (camara de neubauer).
Sangre anticuagulada o sangre capilar.
35
PROCEDIMIENTO
- Mezclar la sangre anticuagulada por un minuto aproximadamente.
-
Medir 380 lambdas de reactivo de turk y pasarlos al tubo de vidrio.
Medir 20 lambdas de sangre homogenizadas y agregarlas al tubo donde esta el reactivo

de turk enjuagando varias veces hasta que la punta quede limpia.
Limpiar bien la cmara cuentaglobulos verificando que no queden pelusas.
Colocar la lamina de cuarzo o laminilla en el rayado de la camara.
Con la pipeta de 5 a 50 lambdas tomamos la muestra y llenamos la camara, teniendo la

precaucin de que no queden burbujas ni muy llenas.
Dejamos en reposo por un minuto y leemos en el microscopio con el objetivo de 10x y

el diafragma medio cerrado.
Se cuentan los puntos oscuros dentro de las cuadriculas laterales grandes de la cmara.
Es necesario que los leucocitos se hallen repartidos en forma uniforme con una
diferencia no mayor de 10 clulas entre cada cuadrante.
CALCULO
Leucocitos/mm = No. De clulas contadas en los 4 cuadrantes x 50.
VALORES NORMALES
De 4.500 a 11.000 celulas/mm.
EXTENDIDO PERIFRICO Y DIFERENCIAL LEUCOCITARIO

El extendido perifrico estudia la morfologa de las clulas sanguneas y el porcentaje de
distribucin de los distintos tipos de leucocitos, morfologa y cantidad de plaquetas.

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
36
Preparacin del Extendido
MATERIALES
Lminas limpias y desengrasadas.
Lpiz marcador.
PROCEDIMIENTO
Realice los extendidos con sangre sin anticoagulante.
Seleccione una lmina nueva que tenga los bordes completamente lisos para hacer los
extendidos, marcada especialmente para realizar este proceso.
Tome la lmina que marc en el momento de la toma de muestras y colquela sobre la
superficie lisa y firme.
Dispense con la punta de la aguja una gota de sangre aproximadamente a 2 cc. del
extremo marcado.
Sostenga la lmina entre el ndice y el pulgar de la mano izquierda, y con la mano tome
la lmina escogida para hacer el extendido y colquela sobre la superficie de la lmina
que contiene la gota de sangre, formando un ngulo de 30 grados a 40 grados.
Llvela hacia atrs hasta que toque la gota y deje que la sangre se extienda por su borde.
Desplace la lmina hacia adelante en forma rpida y suave.
Revise que la extensin haya quedado bien hecha, en caso contrario vulvala a hacer.
Djela secar a temperatura ambiente.
Un Extendido esta bien hecho cuando:
La parte inicial es gruesa y disminuye gradualmente su grosor, hasta terminar en una

parte muy delgada.
Su aspecto es liso y sin ondulaciones ni poros, el extremo termina suave y gradualmente

sin desgarros ni vetas
No es ni demasiado largo.

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
Ni demasiado corto.
Ni demasiado grueso.
37
COLORACIN DE WRIGHT
MATERIALES
Bandeja de coloracin.
Reloj.
Gradilla.
Algodn.
REACTIVOS
Colorante de wright.
Solucin buffer con ph 6.7 + 2 H2O destilada igual ph.
Alcohol.
PROCEDIMIENTO
Coloque las placas con el extendido arriba sobre las varillas de la bandeja de coloracin.
Cubra el extendido con el colorante de wright durante tres minutos.
Agregue el extendido agua destilada o solucin Buffer.
Sople suavemente para que haya una distribucin uniforme de la mezcla: colorante y
agua destilada, sin que se derrame. Deje reposar la mezcla durante tres minutos.
Lave la placa mantenindola en posicin horizontal, agregndole agua destilada hasta
que no quede colorante.
Escurra la placa colocndola verticalmente sobre un papel secante.
Limpie el colorante que haya quedado en el dorso de la placa con un algodn
humedecido en alcohol.
Coloque las placas en una gradilla, djelas secar a temperatura ambiente.

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
Llvelas luego al sitio indicado para su observacin microscpica.
Un extendido bien coloreado es de color rosado .
CAUSAS DE UNA MALA COLORACIN
A. EXTENDIDO AZUL
Puede tener como causas las siguientes:
1. Extendido muy grueso.
2. Lavado insuficiente.
3. Tiempo prolongado de la coloracin.
4. Alcalinidad del agua.
5. Alcalinidad del colorante.
B. EXTENDIDO ROJO
Puede deberse a:
1. Exceso de acidez del agua.
2. Exceso de acidez del colorante.
3. Exposicin del colorante a vapores cidos.
C. EXTENDIDO CON PRECIPITADO

Puede deberse :
1. Placa mal lavada.
2. Colorante que se ha secado.
3. Colorear las placas en posicin oblicua.
38

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
39
4. Partculas de polvo sobre el extendido.
Para realizar un buen proceso de coloracin tenga en cuenta:

Que las reas destinadas a la preparacin y coloracin de los extendidos permanezcan
libres del polvo Que el
material utilizado este limpio, desengrasado y en buenas
condiciones.
Que el extendido est bien hecho.
Que el colorante est filtrado.
Que la coloracin de las lminas, los tiempos de coloracin y el lavado sean correctos.
LECTURA
- Colocar la lamina en el microscopio y leer con el objetivo de inmersin (110x).
-
Contar 100 celulas leucocotarias que se observen como neutrofilos, eosinofilos,

linfocitos, basofilos, cayados, etc.
VALORES NORMALES DIFERENCIAL LEUCOCITARIO.

- Neutrofilos: 65 a 70%
- Linfocitos: 30 a 40%
- Eosinofilos: 0 a 5%
- Basofilos:
0 a 2%
- Monocitos:
0 a 4%
En el extendido de sangre periferico se determina:

1. Hipocromia: Es la palidez central del eritrocito.
2. Anisocitosis: Alteracin en el tamao. Normocitos (normal), macrocitos (grandes),
microcitos (pequeos).
3. Policromacia: Inmadurez de los globulos rojos.
4. Poiquilocitosis: Alteracin en la forma del globulo rojo.

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
40
RECUENTO DE RETICULOCITOS
Los eritrocitos atraviesan 6 etapas hasta completar su total desarrollo y maduracin:
pronormoblasto,
normoblasto
basofilo,
normoblasto
policromatico,
normoblasto
ortocromatico, reticulocito y eritrocito maduro.

Los elementos de las cuatro primeras etapas se encuentran normalmente en medula osea,
sin embargo el reticulocito se puede hallar en medula sea o en sangre perifrica.
El recuento de reticulocitos es un instrumento diagnstico muy importante, ya que su
nmero refleja la cantidad de eritrocitos producidos por la medula sea.
Los reticulocitos son hematies que contienen restos de ARN (ribosomas), que es un
compuesto que se precipita en presencia de ciertos colorantes llamados vitales como el azul
de cresil brillante y da imgenes a formas filamentosas visibles mediante el microscopio
ptico.
EQUIPOS Y MATERIALES
- Sangre anticuagulada con EDTA.
-
Colorante azul de cresil brillante.
Pipeta pasteur o goteros.
Laminas porta objetos
Tubos de ensayo.
Microscopio
Bao de maria
Cronometro
Aceite de inmersin.

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
41
PROCEDIMIENTO
- Con una pipeta de pasteur o gotero aadir 3 gotas del colorante azul de cresil brillante a
un tubo de ensayo.
-
Agregar 3 gotas de sangre bien homogenizadas al mismo tubo con el colorante.
Agitar suavemente y colocarlo en el bao de maria por 15 minutos a 37 GC para que los
reticulocitos absorban el colorante.
Centrifugar por 5 minutos, desechar el sobrenadante y mezclar.
Depositar con un gotero limpio una gota del sobrenadante en un lamina porta objetos y
hacer un extendido.
Dejar secar y leer en el microscopio con objetivo de inmersin (100x).
Se ceuntan 500 eritrocitos y los reticulocitos que se encuentren en medio de los 500
eritrocitos.
CALCULO
Reticulocitos (%)= No. Reticulocitos contados x 100
No. Eritrocitos contados
VALORES NORMALES
Recin nacidos 2 - 6 %
Nios adultos
0.2 - 2 %
PRUEBAS DEL SISTEMA DE COAGULACIN.
TIEMPO DE PROTROMBINA ( PT ) Y TIEMPO PARCIAL DE

TROMBOPLASTINA ( PTT ).
Son de gran ayuda para el diagnstico de los trastornos hemostticos.

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
42
Algunas de las pruebas de coagulacin ms utilizadas son el tiempo de protrombina, con al

cual medimos la concentracin de la protrombina y los factores del sistema extrinseco de la
coagulacin como los factores II, V,VII y X.
El tiempo parcial de tromboplastina, valora los factores del proceso intrinseco de la
coagulacin como el PK, KAPM, XII, XI, IX, VIII, V, II y I. Sirve para el control de
pacientes con tratamiento de Heparina y para detectar la presencia de inhibidores
adquiridos.
- Informe al usuario que debe presentarse en ayunas.
Equipo
Centrfuga
Material
Tubos de ensayo
Reactivos
Anticoagulante: citrato
12 x 75 mm.
de sodio al 3.8%
Gradilla
Pipeta 1 ml y de 5ml o
Tubos tapa azul al vacio.

-
Preparar con anticipacin los tubos de ensayo con 0.5 ml. de anticoagulante (citrato de
sodio al 3.8%) o tubo al vaco Vacutainer con citrato de sodio al 3.8% (tapa azul).
Lea la solicitud del examen.
Inscriba el examen en el libro de registro diario del laboratorio.
- Interrogue al usuario si est tomando alguna droga, en caso afirmativo antela en la

solicitud del examen.
-
Rotule el tubo con el nmero que le corresponde al paciente.
Seleccione una buena vena.

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
43
Realice una puncin limpia sin utilizar torniquete, o utilice un torniquete plano, por un
tiempo no mayor a 30 segundos.
Utilice el tubo vacutainer.
Extraiga 4.5 ml. de sangre venosa o llene totalmente el tubo al vacio.
Retire con cuidado la aguja de la jeringa o tubo al vaco.
Mezcle suavemente varias veces por inversin para garantizar la homogenizacin de la

sangre con el anticuagulante y as evitar la formacin de coagulos.
Procesamiento de la Muestra
- Centrifugue la muestra inmediatamente a 3.500 r.p.m. durante 15 minutos.
-
Separe el plasma con una pipeta sin mezclarlo.
Realice las pruebas inmediatamente.
Si no es posible, refrigrela a una temperatura de 4 grados centgrados a 8 grados

centgrados durante un perodo mximo de dos horas.
Si el tiempo de conservacin es de ms de dos horas, llvelo a congelacin.
RECUERDE !
-
Las cantidades de anticoagulante 0.5 ml. y de sangre 4.5 ml. deben ser exactas.
El anticoagulante debe conservarse en refrigeracin de cuatro grados centgrados a 8

grados centgrados.
Una tcnica deficiente de puncin venosa contribuye a que se obtengan resultados

errneos en estudios de coagulacin.
Si tiene dificultad para extraer la sangre seleccione otra vena y repita la puncin
utilizando un nuevo equipo.
EVITE:
-
Escarbar con la aguja.
Aspirar burbujas de aire.
Formar hematomas.

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
44
Contaminar la muestra con lquidos tisulares.
El xtasis venoso prolongado (torniquete).
El material de vidrio debe ser exclusivo para las pruebas de coagulacin, muy limpio,
sin rayones ni opacidades y sometido a un lavado especial.
Tiempo de sangra
Retraccin del coagulo.
Tiempo coagulacin
Fibrinogeno
MATERIALES Y EQUIPOS:
- Cubeta desechable para coagulacin.
-
Pipeta automatica de 100 a 1000 lambdas.
Bao de maria a 37 GC
Equipo RA50
Vial de simplastin y PTT atemperados a 37 GC.
PROCEDIMIENTO PARA DETERMINAR TP

- Prender el equipo RA50 y colocarlo en modo de cubetas desechables (ver manejo
RA50).
-
Hundir la tecla TP y seguir las instrucciones del equipo.
Pipetear 200 lambdas de simplastin en una cubeta desechable para coagulacin,

colocarla en el equipo y hundir la tecla analyze.
Cuando el tiempo de incubacin del equipo llegue a cero y empiece a pitar pipetear 100
lambdas de plasma del paciente.
El tiempo que indique el equipo es el tiempo real de la prueba.
VALORES NORMALES:
De 10 a 14 segundos.

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
45
PROCEDIMIENTO PARA DETERMINAR PTT

- Prender el equipo RA50 y colocarlo en modo de cubetas desechables (ver manejo
RA50).
-
Hundir la tecla PTT y seguir las instrucciones del equipo.
Pipetear 100 lambdas del reactivo PTT en una cubeta desechable para coagulacin y
100 lambdas de plasma del paciente, colocarla en el equipo y hundir la tecla analyze.
Cuando el tiempo de incubacin del equipo llegue a cero y empiece a pitar pipetear 100
lambdas de calcio preincubado a 37 GC.
El tiempo que indique el equipo es el tiempo real de la prueba.
VALORES NORMALES:
De 25 a 38 segundos.
Existen sustancias que pueden prolongar el tiempo de reaccin del PT como los corticoides,
anticonceptivos orales, eritromicina, tetraciclina, heparina, Wuarfarina y tambien
encontramos sustancias que nos acortan los resultados como antihistaminicos, la cafeina y
la vitamina K; en las pruebas de PTT las sustancias que pueden prolongarlo son los
anticuagulantes orales, estrogenos, cumarin.
OTROS EXMENES HEMATOLOGICOS

Adems del hemograma existen otros exmenes hematolgicos que ayudan al diagnstico y
controlan la evolucin de algunas enfermedades. Entre ellos estn:
- Recuento de plaquetas.
- Recuento de eosinfilos.
- Drepanocitos.
- Fenmeno L.E.

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
46
PROCEDIMIENTO DE TOMA DE MUESTRA

Puede utilizarse sangre capilar o venosa.
La obtencin de sangre venosa se hace en igual forma que para un hemograma.
RECUENTO DE PLAQUETAS
Las plaquetas o trombocitos son clulas de tamao pequeo que cumplen un papel
primordial en los procesos de coagulacin.
Es de vital importancia para el diagnstico de trastornos hemorrgicos. El aumento de las
cifras de de plaquetas se denomina trombocitosis y puede hallarse en la trombocitemia
idiopatica, leucemia granulocitica crnica y despus de esplenectomias.
La disminucin de las plaquetas se llama trombocitopenia y se da en la purpura
trombocitopenica, anemias aplasticas, leucemia aguda, anemia perniciosa, virosis (dengue)
y a veces despus de una quimioterapia.
RECUENTO DIRECTO
MUESTRA
Sangre anticuagulada con citrato de sodio al 3.8%
MATERIALES Y REACTIVOS
- Solucin salina al 0.85%
-
Tubos de ensayo pequeos.
Pipeta pasteur o goteros.
Camara de neubauer.

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
47
PROCEDIMIENTO
- En un tubo medir 21 gotas de solucin salina al 0.85%
-
Agregar al tubo tres gotas de plasma citratado.
Mezclar bien y montar en la cmara de neubauer.
Se lee cinco cuadrantes, donde se leen los globulos rojos y se multiplica x 500, siendo
este el resultado.
RECUENTO INDIRECTO
MUESTRA
Sangre sin anticuagualnte o capilar.
MATERIALES Y REACTIVOS
- Lanceta.
-
Lamina porta objeto.
Reactivo para coloracin de wrigth
Microscopio.
Aceite de inmersin
PROCEDIMIENTO
- Limpiar bien el rea del dedo del cual se va a tomar la muestra.
-
Con la lanceta hacer la puncin, descartar la primera gota de sangre y colocar la

segunda en la lamina porta objetos.
Dejar secar y colorear con el reactivo de wrigth como se hace para los extendidos de
sangre perifrica.
Montamos en el microscopio y leer con objetivo de inmersin (100x).
Se cuentan las plaquetas de 10 campos se divide por el mismo nmero de campos y se

multiplica por 21.000, siendo este el resultado.

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
48
VALORES NORMALES
De 150.000 a 400.000mm.
RECUENTO DE EOSINOFILOS
Los eosinfilos son una clase de glbulos blancos y como tales hacen parte del sistema de
defensa del organismo.
El aumento de eosinfilos o eosinoflia se relaciona con diferentes formas de alergia y con
algunas parasitosis.
Tcnica: Extendido perifrico, coloracin de wright . Luego realizamos el conteo de 100
clulas e informamos el % de eosinfilos encontrados.
DREPANOCITOS
Son glbulos rojos que tienen forma de media luna. Se encuentran en una clase de anemia
denominada Anemia Drepanoctica.
Se informan cuando se encuentran en el extendido de sangre perifrica.

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
49
DIAGNOSTICO DE HEMOPARASITOS
El paludismo o malaria es una enfermedad producida por un parsito transmitido al hombre

en condiciones naturales por la picadura de un mosquito del gnero Anopheles. Existen
otros mecanismos menos frecuentes como la transmisin congnita, las transfusiones
sanguneas, jeringas contaminadas y los trasplantes de rganos.
Una parte de la evolucin de este parsito ocurre en el interior del glbulo rojo, y su
presencia se detecta en extensiones de sangre por el mtodo de la gota gruesa.
Entrevista al Usuario
Antes de proceder a tomar la muestra de sangre interrguelo formulando las siguientes
preguntas:
- Donde vive ? Direccin.
- Ha viajado ltimamente ? A donde ? Cuando ? .
- Ha presentado fiebre ? Dolor de cabeza? Escalofro?
- Cuando le comenzaron estos sntomas ?.
- Ha recibido transfusin en el ltimo mes ? Dnde ?.
- Qu droga est tomando ?.
Mtodo de la Gota Gruesa

Es un mtodo de concentracin que permite descubrir infecciones poco intensas.
Materiales y Reactivos
- Algodn.
-
Alcohol.

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
Lminas limpias.
Lanceta estril.
Lpiz marcador.
50
Toma de la Muestra
- Determine el sitio a puncionar. Este puede ser:
1. El lado externo del dedo cordial o anular de la mano izquierda, donde la sensibilidad
es menor .
2. El taln o el dedo gordo del pi en nios menores de seis meses.
3. Desinfecte con algodn humedecido en alcohol. Deje secar.
4. Puncione con firmeza y rapidez.
5. Limpie la primera gota de sangre con un algodn seco estril.
6. Presione suavemente el dedo, obtenga otra gota de sangre cuidando de no apretar el
sitio de puncin.
7. Tome una lmina, acrquela al dedo y sin rozarla deposite dos gotas de sangre. La
primera a 1.5 cm. del borde de la lmina y la segunda a 3 cm. del mismo.
8. Con el borde de otra lmina extienda cada gota de sangre haciendo solamente tres
movimientos: de derecha izquierda, el centro y levante formando un rectngulo de 1
cm. de ancho.
9. Coloque la lmina en azul de metileno por 30 segundos para obtener su
deshemoglobinizacin.
10. Deje secar la preparacin en posicin horizontal.
11. Cuando la gota gruesa no brille, esta lista para la coloracin.
Coloracin de Field
Equipo, Materiales y Reactivos

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
51
- Reloj.
- Bandeja curva para coloracin.
- Gradilla.
- Tubos de ensayo.
- Colorante de Field: Solucin A
Solucin B.
Sales amortiguadoras 4/5.
Procedimiento
Teniendo como base la proporcin siguiente por cada lmina a colorear. Mezcle en un tubo
de ensayo:
3 ml. de sales amortiguadoras
1 gota de solucin A.
1 gota de solucin B.
Coloque el extendido hacia abajo sobre la placa curva para coloracin.
Deje deslizar la solucin Field, recin preparada, por debajo de la lmina hasta llenar la
depresin, evitando que se formen burbujas.
Deje actuar el colorante durante 9 minutos.
Levante la lamina y deje secar a temperatura ambiente en posicin vertical.
Si la placa no se colorea en un lapso de 24 horas, sumrjela en azul de metileno

fosfatado durante 3 a 5 segundos, para preservar los elementos celulares de la sangre.
LECTURA E INFORME:
Se debe informar el tipo de parsito y el grado de infestacin en cruces o nmero de
parsitos por milmetro cbico.

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
52
QUMICA CLNICA
-
Solicite al usuario que se presente al laboratorio en las primeras horas de la maana

entre las 7:00 y las 9:00 a.m., para la toma de la muestra.
Infrmele que debe ingerir la ltima comida a las 9:00 de la noche del da anterior.
Recomindele, si los exmenes solicitados son slo los del perfil lipdico: Colesterol,
HDL, triglicridos, debe ingerir la ltima comida a las 6:00 de la tarde del da anterior.
Si el mdico solicita hipercolesterolemia al azar no es necesario el requisito de ayuno.
Advirtale que el da anterior al examen debe evitar:
* Tomar bebidas alcohlicas.

* Realizar ejercicios violentos.
* Ingerir carnes rojas, mariscos, frijoles, si el examen solicitado es CIDO URICO.
* Ingerir carne de cerdo, si el examen solicitado es TRIGLICERIDOS.
Recomindele que no tome medicamentos durante los tres das anteriores al examen.
En caso que no pueda suspenderlos, solictele que informe cuales est tomando y
antelos en la solicitud del examen.

-
Lea la orden e interrogue al paciente para cerciorarse si cumpli las instrucciones.
Inscriba la orden en el libro de registro diario de laboratorio.
Rotule el tubo de ensayo con el nmero que le corresponde de usuario.
Proceda a tomar la muestra.

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
53
Recuerde que el uso del torniquete no debe exceder de los 30 segundos.
De
preferencia tipo cinta y colocado en forma laxa.

-
Deje coagular la muestra mnimo 20 minutos a temperatura ambiente o de 5 a 10

minutos a 37 GC.
Separe el suero antes de una hora centrifugando la muestra durante diez minutos a 1599
r.p.m.
Condiciones de la Muestra
Cercirese que el suero no presente:
-
Ni hemlisis.
Ni turbidez.
Ni contaminacin.
Hemlisis
La hemlisis es la liberacin de la hemoglobina despus de la ruptura de los eritrocitos.
Cuando se produce hemlisis, el suero adquiere un color entre rosa y rojo.
Evite la hemlisis en la muestra porque causa interferencia en las determinaciones qumicas
o alteracin en la concentracin de los componentes sanguneos.
Causas de Hemlisis en la Puncin Venosa

Tenga en cuenta que la hemlisis puede producirse:
-
Si se vierte la sangre al tubo sin quitar la aguja.
Si no vierte la sangre por las paredes del tubo.
Si se extrae sangre cuando se ha formado un hematoma.
Si se hala con demasiada fuerza el mbolo de la jeringa.

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
Si se centrifuga la muestra de sangre antes de estar completamente coagulada.
Si utiliza una aguja de calibre no adecuado.
54
RECUERDE !
Si el usuario tiene unas venas delgadas debe utilizar agujas calibre 21; y si tiene unas venas
normales debe utilizar agujas calibre 20.
Causas de Hemlisis en la Puncin Capilar

Tenga en cuenta que la hemlisis puede producirse:
-
Si se deja residuos de alcohol sobre la piel, y se mezclan con la sangre de la muestra.
Se aplica demasiado fuerte el taln o el dedo, que puede ocasionar la ruptura de los
eritrocitos.
Turbidez
La causa ms comn de la turbidez del suero en la mayora de los casos es la lipemia,
causada en algunos casos por el no ayuno. Aunque no todos los anlisis en qumica
sangunea requieren un estricto ayuno, si se recomienda, porque la lipemia causa
interferencia en las mediciones fotomtricas.
Contaminacin
El material de vidrio que se utiliza debe estar qumicamente puro es decir que no deben
existir constituyentes potenciales orgnicos que puedan alterar el resultado de un anlisis
qumico, es por esto de suma importancia tener en cuenta las normas para el lavado del
material.
Evite la contaminacin bacteriana:

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
Manejando la sangre en forma estril.
Separando el suero de las clulas a los 30 minutos como tiempo mximo.
Almacenando las muestras de 4 a 8C. hasta anlisis.
Conservacin de la Muestra
Recuerde que las muestras deben conservarse adecuadamente hasta el momento en que se
procesen.
Conserve los sueros en refrigeracin entre: (4.- 8C ) para los anlisis de :

-
Colesterol HDL.
Creatinina.
Fosfatasa alcalina.
Glucosa.
Triglicridos.
Transaminasas.
Los sueros pueden permanecer a temperatura ambiente entre ( 20C y 25C ) hasta por
ocho horas para los anlisis de :
-
cido rico.
Albmina.
Amilasa.
Calcio.
Colesterol total.
Fsforo inorgnico.
Nitrgeno urico.
Protenas.
Las muestras pueden conservarse en refrigeracin entre ( 4C y 8C) hasta por cinco das
55

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
56
para los anlisis de :

-
cido rico.
Albmina.
Amilanas.
Calcio.
Colesterol total.
Fosfatasa alcalina.
Fsforo inorgnico.
Protenas totales.
Cuidados especiales
1. Si no se procesan las muestras el mismo da para realizar las determinaciones de
glucosa, colesterol, HDL, transaminasas, creatinina, nitrgeno urico y triglicridos.
Debe congelar los sueros inmediatamente a ( - 20C. ), as podr conservarlos hasta por
diez das.
2. Para la determinacin de Fosfatasa cida lleve la muestra de sangre al refrigerador
mientras se coagula, separe el suero a los 30 minutos y procese inmediatamente.
3. Para la determinacin de bilirrubinas conserve el suero todo el tiempo en la oscuridad y
a temperatura ambiente. Este suero debe procesarse el mismo da que se tom la
muestra.
4. Para determinacin de calcio guarde en tubo plstico cerrado para impedir la absorcin
de monxido de carbono del aire. En casos especiales guarde en el refrigerados el
suero, el plasma y la sangre, hasta que el mdico disponga de los resultados y no haya
solicitado la repeticin del anlisis.
5. Evite la hemlisis en las muestras.
Esta produce resultados falsamente elevados
especialmente en las siguientes determinaciones:

-
Deshidrogenasa lctica.
Fosfatasa cida prosttica.
Transaminasas oxalacetica y pirvica (GOT, GPT).

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
Creatinina.
En todas las tcnicas en las que su lectura se realice en el rango de 300 a 500 nm.
57
Para la conservacin de los sueros a temperatura de congelacin (-20C) se requiere un

congelador especial graduado a esta temperatura. El congelador de una nevera slo alcanza
una temperatura de (-8C).

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
58
GLICEMIA.
MUESTRA:
Suero o plasma sin hemlisis.
MATERIALES:
- Pipetas automaticas de 5 a 10 y de 100 a 1000 lambdas.
-
Tubos de vidrio.
Bao de mara.
Gradillas.
Equipo de qumica clnica RA 50.
LONGITUD DE ONDA.
De 500 a 560 nm.
TEMPERATURA DE REACCION
De 20 a 25 GC 37 GC.
PROCEDIMIENTO
- Pipetear 10 microlitros de suero de cada muestra en el respectivo tubo marcado.
-
Pipetear 10 microlitros de suero control o estandar cuando se necesite montar.
Pipetear 1000 microlitros del reactivo de glicemia en cada tubo.
Mezclar y dejar durante 30 minutos a temperatura de 20 a 25 GC o 5 minutos a 37 GC.
Prender el equipo de qumica clnica RA50 cuando falten 5 minutos de reaccin.
Hundir la tecla quer dice GLUC en el panel de color azul del equipo.
Seguir los procedimientos que indique el equipo.
Cuando se va a pasar el suero control se hunde la tecla QC y dentro del men el equipo
pregunta si el control que se esta utilizando es normal o anormal.
El resultado que da el equipo es la concentracin buscada.

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
59
VALORES NORMALES
De 65 a 110 mg/dl.
COLESTEROL.
MUESTRA:
MATERIALES:
-
Tubos de vidrio.
Bao de mara.
Gradillas.
LONGITUD DE ONDA.
De 500 a 560 nm.
De 20 a 25 GC 37 GC.
PROCEDIMIENTO
-
Pipetear 1000 microlitros del reactivo de colesterol en cada tubo.
Hundir la tecla quer dice CHOL en el panel de color azul del equipo.

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
60
VALORES NORMALES
Menor de 200mg/dl.
TRIGLICERIDOS
MUESTRA:
MATERIALES:
-
Tubos de vidrio.
Bao de mara.
Gradillas.
LONGITUD DE ONDA.
De 500 a 560 nm.
De 20 a 25 GC 37 GC.
PROCEDIMIENTO
-
Pipetear 1000 microlitros del reactivo de trigliceridos en cada tubo.

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
61
Hundir la tecla quer dice TRIG en el panel de color azul del equipo.
VALORES NORMALES
Menor de 170mg/dl
ACIDO RICO
MUESTRA:
MATERIALES:
-
Tubos de vidrio.
Bao de mara.
Gradillas.
LONGITUD DE ONDA.
De 500 a 560 nm.
De 20 a 25 GC 37 GC.
PROCEDIMIENTO

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
62
Pipetear 1000 microlitros del reactivo de cido rico en cada tubo.
Hundir la tecla quer dice URIC en el panel de color azul del equipo.
VALORES NORMALES
HOMBRES : De 3.4mg/dl a 7.0mg/dl
MUJERES: De 2.4mg/dl a 5.7mg/dl.
UREA O NITROGENO UREICO
MUESTRA:
Suero o plasma sin hemlisis y orina.
MATERIALES:
-
Tubos de vidrio.
Bao de mara.
Gradillas.
LONGITUD DE ONDA.
De 340 nm.

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
63
De 37 GC.
PROCEDIMIENTO
-
Pipetear 1000 microlitros del reactivo de urea en cada tubo.
Hundir la tecla quer dice GLUC en el panel de color azul del equipo.
El resultado que da el equipo es la concentracin buscada para la urea.
El valor del nitrgeno ureico se da de multiplicar el resultado de la urea x 0.467 y se da

en mg/dl.
VALORES NORMALES
UREA EN SUERO: 10 a 50mg/dl
UREA EN ORINA: 20 a 35mg/dl
NITROGENO UREICO: 4 a 23 mg/dl.
COLESTEROL HDL
MUESTRA
Suero o plasma sin hemolisis.
LONGITUD DE ONDA
De 510nm (500-530nm)

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
TEMPERATURA
De 20 a 25 GC 37 GC
MATERIALES:
-
Tubos de vidrio.
Bao de mara.
Gradillas.
Centrifuga.
PROCEDIMIENTO
- Pipetear 500 microlitros de suero o plasma en un tubo de ensayo.
-
Pipetear 500 microlitros del reactivo colesterol HDL en cada muestra.
Mezclar y centrifugar de 3.500 a 4000 RPM durante 10 minutos.
Tomar el sobrenadante y procesarlo siguiendo la tcnica del colesterol total.
VALORES NORMALES
HOMBRES Mayor de 45mg/dl
MUJERES Mayor de 35mg/dl.
COLESTEROL LDL
El colesterol LDL se saca mediante la siguiente formula.
Colesterol LDL = Colesterol total Trigliceridos colesterol HDL
5
CREATININA.
64

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
65
MUESTRA
Suero o plasma sin hemolisis, orina de 24 horas diluida 1:50 con agua destilada.
MATERIALES:
-
Cubetas desechables para equipo RA 50.
LONGITUD DE ONDA.
De 510 nm ( 500 a 520nm) .
De 37 GC.
PROCEDIMIENTO
- Pipetear 500 microlitros del reactivo 1 en cada cubeta desechable.
-
Pipetear 500 microlitros del reactivo 2 en cada cubeta desechable.
Colocar el equipo a trabajar por el mtodo de cubeta desechable hundiendo la tecla

select, luego el numero 1 y escoger cubeta desechable.
Salir de la opcin select.
El equipo por este mtodo siempre pide calibrador ya que lee contra vacio.
Hundir la tecla que dice CREA del panel de color azul en el equipo.
Seguir las instrucciones del equipo.
Introducir la cubeta desechable dentro del compartimiento para leer.
Pipetear primero 100 microlitros de calibrador dentro de la cubeta desechable y hundir

la tecla CALIBRATE de color amarillo en el panel del equipo.
Este mismo procedimiento se realiza con cada muestra que se valla a procesar y se
hunde la tecla ANALYZE en vez de la de calibrate.
Cuando se va realizar el control de calidad se procesa como una muestra y se hunde la

tecla QC y el equipo le pregunta si es una muestra anormal o normal.

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
66
VALORES NORMALES
SUERO HOMBRES: De 0.7 a 1.3mg/dl
MUJERES : De 0.5 a 1.1mg/dl
ORINA HOMBRES : De 21 a 26 mg/Kg 24hr.
MUJERES : De 16 a 22 mg/Kg 24hr.
BILIRRUBINA TOTAL
MUESTRA
Suero sin hemolisis.
LONGITUD DE ONDA
De 540nm
TEMPERATURA
De 20 a 25 GC 37 GC
MATERIALES:
- Pipetas automaticas de 100 a 1000 lambdas.
-
Tubos de vidrio.
Gradillas.
PREPARACION DEL REACTIVO DE TRABAJO

Se puede hacer de dos formas:
1. Vaciar el contenido de un vial de reactivo B en un frasco de reactivo AT, se agita
suavemente. Es estable por 20 das a 2 8 GC.
2. Mezclar en la proporcin de 1ml del reactivo B + 24ml del reactivo AT. Es estable por 20
das a 2-8 GC.

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
67
PROCEDIMIENTO
- Pipetar 100 microlitros de agua destilada en el tubo de blanco reaccin.
-
Pipetear 100 microlitros de suero en el tubo de muestra.
Pipetear 1000 microlitros en los tubos de blanco reaccin y muestra.
Agito y dejo durante 2 minutos a temperatura ambiente y leo.
Debo tener prendido el equipo con anterioridad.
Hundo la tecla que dice TOTAL BILI del panel azul del equipo y sigo las instrucciones
del equipo.
Es de aclarar que por cada muestra hay que montar un blanco de reaccin.
El resultado que de el equipo es la concentracin buscada.
VALORES NORMALES
Hasta 1mg/dl.
BILIRRUBINA DIRECTA.
MUESTRA
Suero sin hemolisis.
LONGITUD DE ONDA
De 540nm
TEMPERATURA
De 20 a 25 GC 37 GC
MATERIALES:
- Pipetas automaticas de 100 a 1000 lambdas.
-
Tubos de vidrio.
Bao de mara.

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
Gradillas.
68
PREPARACION DEL REACTIVO DE TRABAJO

Se puede hacer de dos formas:
1. Vaciar el contenido de un vial de reactivo B en un frasco de reactivo AD, se agita
suavemente. Es estable por 20 das a 2 8 GC.
2. Mezclar en la proporcin de 1ml del reactivo B + 24ml del reactivo AD. Es estable por
20 das a 2-8 GC.
PROCEDIMIENTO
- Pipetar 100 microlitros de agua destilada en el tubo de blanco reaccin.
-
Pipetear 100 microlitros de suero en el tubo de muestra.
Pipetear 1000 microlitros en los tubos de blanco reaccin y muestra.
Agito y dejo durante 5 minutos a 37 GC y leo.
Debo tener prendido el equipo con anterioridad.
Hundo la tecla que dice DIREC BILI del panel azul del equipo y sigo las instrucciones
del equipo.
Es de aclarar que por cada muestra hay que montar un blanco de reaccin.
El resultado que de el equipo es la concentracin buscada.
VALORES NORMALES
Hasta 0.25mg/dl.

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
69
CURVA DE GLICEMIA
-
Infrmele al usuario que se presente al laboratorio en las primeras horas de la maana

recomindele que no haga ejercicios fsicos violentos.
No fume, no ingiera caf, ni alcohol por lo menos ocho horas antes del examen.
Que realice una dieta normal.
No ingiera drogas ( hormonas, anticonceptivos orales, hipoglicemiantes ) tres das

antes del examen.
Si padece alguna enfermedad solictele que posponga el examen hasta que se encuentre
restablecido.
No debe realizar la curva de glicemia a:

- Personas que se encuentren agudamente enfermas.
-
Personas con glicemias en ayunas superiores a 140 mg/dl.
Nios, salvo casos excepcionales; para efectuarla se requiere supervisin del

especialista.

-
Efecte la curva de tolerancia a la glucosa entre las 7:00 y las 12:00 AM.
Interrogue al usuario para cerciorarse que cumple con las condiciones requeridas.
Si las cumple, entonces extrigale 5 ml. de sangre venosa.
Deje coagular la sangre mnimo 20 minutos y separe el suero antes de una hora.
Proceda a realizar la primera determinacin de glicemia.

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
70
Si el resultado en ayunas es inferior a 140 mg/dl puede proceder a administrar la dosis

de glucosa. Para adultos 75 gr. diluidos en 300 ml. de agua (puede agregarle el zumo de
un limn para evitar las nuseas. Para nios 1.75 gr. por kg. de su peso.
Esta mezcla debe ser tomada lentamente en un lapso de 5 minutos sta se contar como la
hora 0 (cero).
Tome luego muestras de sangre venosa as:
A los 60 minutos de ( 1 hora).
A los 120 minutos ( 2 horas).
A los 180 minutos ( 3 horas).
Si el mdico indica curva de tolerancia a la glucosa en 5 horas, prosiga y tome muestra a

los 240 minutos de la hora 0 ( 4 horas) y a los 300 minutos de la hora 0 ( 5 horas).
Recuerde !
Durante la prueba el paciente debe permanecer sentado, tranquilo sin correr, beber o fumar.
GLICEMIA POST - CARGA A LAS DOS HORAS
Condiciones del Usuario

-
Ayuno mnimo de 8 horas, mximo de 12 horas.
No hacer ejercicio fsico violento, ni fumar, ni ingerir caf, ni alcohol por lo menos 8
horas antes del examen.
No ingerir drogas ( hormonas, anticonceptivos orales, hipoglicemiantes ) tres das antes

del examen.
Si ha padecido alguna enfermedad posponer el examen hasta que est bien restablecido.
Solictele el resultado de una glicemia en ayunas realizada en la ltima semana.

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
71
No se debe realizar en :
-
Personas que se encuentren agudamente enfermas.
Personas con glicemia en ayunas superior a 140 mg/dl.
Nios salvo casos excepcionales.
Para efectuarla se requiere
supervisin del
especialista.

-
Interrogue al usuario para cerciorarse de que cumple con las condiciones requeridas.
Si las cumple, entonces extraiga 5 ml. de sangre venosa.
Deje coagular la sangre mnimo de 20 minutos y separe el suero antes de una hora.
Informe al Bacterilogo para que proceda a realizar la glicemia.
Si la glicemia en ayunas es inferior a 140 mg/dl. proceda a administrarle la dosis de

glucosa as:
Adultos 75 gr. diluidos en 375 ml. de agua, puede agregarse el zumo de un limn para
evitar las nuseas. Esta mezcla debe ser ingerida en un lapso no mayor de 5 minutos.
- Esta es la hora 0 .
Tome la siguiente muestra de sangre venosa a las dos horas de ingerir la glucosa.
Durante el lapso de tiempo que transcurra antes de la segunda muestra, el paciente

debepermanecer sentado, tranquilo, sin comer, beber o fumar.
GLICEMIA POST - PRANDIAL

Se utiliza nicamente como control del paciente diabtico.
Despus del desayuno habitual de usuario se realiza la determinacin de glicemia a los 120
minutos.

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
72
DETECCIN DE LA DIABETES GESTACIONAL
Test de Sullivan
Se realiza entre las semanas 24 ( 6 meses) y 28 semanas ( 7 meses ) de gestacin.
Condiciones de la Usuaria
- Ayuno mnimo de 8 horas, mximo de 12 horas.
- Adminstrele 50 gr. de glucosa diluidos en 200 ml. de agua fra. Puede agregarse el
zumo de un limn para evitar nuseas y el vmito.
-
Esta mezcla debe ser bebida lentamente en un lapso de 5 minutos.
A la hora de ser ingerida la glucosa, extraiga 5 ml. de sangre venosa.
Deje coagular la sangre mnimo 20 minutos y separe el suero antes de una hora.
CURVA DE TOLERANCIA A LA GLUCOSA PARA LA DETECCIN DE

DIABETES GESTACIONAL
Condiciones de la Usuaria
- Ayuno mnimo de 8 horas, mximo de 12 horas.
-
Ingerir una dieta normal.
Procedimiento de toma de Muestras

- Interrogue a la paciente para cerciorarse de que cumple con las condiciones requeridas.
-
Si las cumple, entonces extraiga 5 ml. de sangre venosa.

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
73
Adminstrele 100 gr. de glucosa diluida en 400 ml. de agua fra; puede agregarse el
zumo de un limn para evitar las nuseas y vmitos.
Esta mezcla debe ser bebida lentamente en un lapso de 5 minutos.
Esta es la hora 0 (cero).
Tome muestras de sangre venosa as:

- A los 60 minutos una hora de la hora 0 de la ingestin de la carga de glucosa.
-
A los 120 minutos dos horas de la hora 0 ingestin de la carga de glucosa.
A los 180 minutos tres horas de la hora 0 .
La embarazada debe permanecer sentada, tranquila, sin comer ni beber, durante la

prueba.
NOTA: Todas las diferentes curvas de glicemia se realizan con la tcnicas de glucosa
antes relacionada para cada muestra.

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
74
UROANALISIS
El examen de la orina constituye un indicador importante del estado de salud. Es una
ayuda valiosa en el diagnstico y tratamiento de las enfermedades renales, del aparato
urinario y en la deteccin de enfermedades metablicas o sistmicas que no estn
directamente relacionadas con el rin.
EXAMEN DE ORINA
Es uno de los anlisis ms solicitado en el laboratorio en incluye el examen organolptico,
el fsico-qumico y el microscpico del sedimento urinario.
- Solictele que realice un lavado de la regin genital con abundante agua y jabn.
-
Si es mujer, advirtale que no recolecte la muestra durante el perodo menstrual.
Recoleccin de la Muestra
- Utilice un frasco de boca ancha con tapa, limpio y seco. En los bebs, emplee un
colector peditrico de polietileno transparente y plegable. Si es posible suminstrele
estos recipientes.
-
Recolecte la primer orina de la maana teniendo en cuenta las siguientes instrucciones:

1. Deje salir un poco de la orina y luego recoja la muestra en el recipiente
aproximadamente hasta la mitad, evitando el contacto con la piel.
2. Cierre el recipiente y mrquelo con su nombre completo.
3. Lleve la orina al laboratorio antes de una hora.

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
75
Recepcin de la Muestra
- Reciba nicamente las muestras que estn en el recipiente y en la cantidad adecuada.
-
Verifique que el nombre en la orden mdica coincida con el de la muestra.
Inscriba la muestra en el libro de registro diario.
Si no se procesa en un lapso de 1 hora, guarde la muestra en la nevera.
Procesamiento de la muestra
Equipo
- Cliniteck 50
-
Centrfuga.
Reloj.
Microscopio.
Materiales
- Tiras reactivas.
-
Tubos de ensayo.
Lminas.
Laminillas.
Lpiz marcador.
Lleve las muestras al rea de preparacin y organcelas de acuerdo a la numeracin.

-
Mezcle bien la orina.
Envsela en un tubo de ensayo debidamente marcado, proceda a realizar los exmenes

organolptico y fsico-qumico de la orina.
Examen Organolptico

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
76
Las caractersticas organolpticas de una muestra de orina suministran una informacin

diagnstica til, razn por la cual no debern ser pasadas por alto.
-
Mezcle bien la orina y describa su aspecto y color.
Aspecto
Puede ser transparente, ligeramente turbio o turbio.
Color
Puede presentar una amplia gama de colores, blanco, amarillo, anaranjado, rosado, rojo,
castao, prpura, negro, azul e inclusive verde, dependiendo de sus constituyentes y su
concentracin.
Olor
La orina recin emitida tiene un olor ligeramente aromtico. El olor es importante para
reconocer muestras que por haber sido recolectadas con mucha anterioridad expiden un
olor amoniacal, ftido, que las hace inadecuadas para el examen de laboratorio.
Examen Fsico-Qumico
Las pruebas que anteriormente requeran anlisis qumico ms complejos, hoy se han hecho
ms fciles con la introduccin de tcnicas sencillas en que se utilizan tiras impregnadas de
reactivos.
Tira Reactiva
Es una banda angosta de plstico con pequeos tacos adheridos, cada uno de los cuales
contiene reactivos para diferentes pruebas que permiten la determinacin simultnea de:
1. PH: Mide una unidad de rango entre 5 y 8.5. Si no se sigue el procedimiento correcto
de escurrir la tira, permanece un exceso de orina en la tira produciendo un fenmeno

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
77
llamado runover, en el cual el buffer cido del reactivo de proteinas se desplaza al rea
del ph dando un resultado bajamente bajo.
2. LEUCOCITOS: las muestras normales en general dan resultados negativos. Los
positivos son de significado clnico. En ocasiones se pueden encontrar en mujeres
resultados positivos por descargas vaginales. Drogas como cefalexina, cefalotina o
altas concentraciones de cido oxalico pueden disminuir los resultados de la prueba. La
nitrofurantoina da un color pardo a la orina y puede enmascarar el color de la reaccin.
3. NITRITOS: Esta prueba se basa en la conversin de los nitratos en nitritos por accin
de las bacterias presentes en la orina, generalmente gram negativas. Es especifica para
nitritos y no reacciona con otras sustancias presentes en la orina. Concentraciones altas
de cido ascorbico pueden producir falsos positivos.
4. PROTEINAS: El reactivo del rea es ms sensible a la albumina que a las globulinas.
Cualquier color por enzima de trazas es significativo de proteinuria. En orinas con
densidad alta suelen aparecer resultados cercanos a trazas aunque los niveles sean
normales.
Orinas contaminadas con amonio cuaternario presentes en algunos
detergentes pueden dar lugar a falsos positivos.

5. GLUCOSA: Es especifica para esta sustancia ya que no se han encontrado otras
sustancias en la orina que reaccionen con esta rea. Elevadas concentraciones de
cetonas pueden dar falsos negativos en concentraciones de glucosas bajas. La prueba
de glucosa puede variar con la temperatura y decrece con el aumento de la densidad.
6. CETONA: El rea reacciona con el cido cetoacetico de la orina. Ciertas orinas de
densidad alta y ph bajos pueden dar falsos positivos. Niveles detectables se
puedenencontrar en pacientes con dietas, embarazo, o con ejercicios fuertes. En
cetoacidosis o ayunos prolongados aparecen en grandes cantidades en la orina antes
que aumente en sangre.
7. UROBILINOGENO: Detecta concentraciones bajas como 0.2mg/dl. El rango normal
es de 0.2 a 1.0mg/dl. La reactividad de la tira aumenta con la temperatura. Sustancias
que colorean la orina pueden enmascarar el desarrollo del color de reaccin.

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
78
8. BILIRRUBINAS: Normalmente esta no es detectable en orina, por eso las trazas son
suficientes para la investigacin clnica. Concentraciones altas de cido ascorbico
pueden causar falsos negativos metabolitos fenolicos pueden dar falsos positivos.
9. SANGRE: La interpretacin de trazas puede ser causa de investigacin clnica. La
presencia de puntos verdes o color verde indica presencia de hemoglobina (mioglobina
libre), por lo que la investigacin clnica debe ser ms profunda. El captopril puede
disminuir la sensibilidad oxidante; el hipoclorito puede dar falsos positivos.
Procedimiento
- Extraiga solamente la tira reactiva que va a ser usada inmediatamente y tape de nuevo
el frasco.
-
Observe que los colores de las reas reactivas de la tira correspondan a los de las cartas
de colores. En caso de observarse un cambio de color se deben descartar.
Tenga cuidado de no tocar las reas reactivas.
No saque el desecador que posee el frasco, sin que se hayan usado todas las tiras.
Consrvelas a una temperatura inferior a 30 grados centgrados, en un lugar seco y

fresco pero no refrigerado.
Prenda el equipo Clinitek 50 y espere que este listo.
Oprima el boton verde que queda a los extremos del panel de botones.
Sumerja completamente las reas reactivas de la tira, en la orina fresca, bien mezclada y
sin centrifugar rapidamente.
Retrela inmediatamente y elimine el exceso de orina rozando su borde con el tubo.
Coloque la tira en la bandeja, dentro del canal, teniendo la precaucin que quede bien
colocada y sin espacio al principio de la tira y la bandeja.
Anote los resultados que emita el equipo en el cuaderno de registro diario.

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
79
Precauciones en el Uso de las Tiras Reactivas

- Si se sospecha contaminacin de las tiras, coja una de ellas y introdzcala en agua
destilada y lala como una muestra, si le da leucocitos, nitrito o cuerpos cetnicos las
tiras estn contaminadas y hay que descrtalas.
Examen Microscpico del Sedimento Urinario

- Mezcle la orina y envase en un tubo de ensayo 10 ml.
-
Centrifugue durante 5 minutos a 2000 r.p.m. (revoluciones por minuto).
Descarte 9.0 cc del sobrante por inversin completa del tubo.
Marque la lmina con el nmero correspondiente a la muestra.
Agite suavemente el sedimento y coloque 50 ul sobre la lmina.
Cbrala con la laminilla y colquela en el sitio indicado para realizar su examen

microscpico.
Una vez examinadas las muestras, archive la copia de los resultados o antelos en el
libro de registro correspondiente.
Recomendaciones
- Coloque frente al microscopio dos frascos con solucin desinfectante para descartar
lminas y laminillas respectivamente.
-
Si el sedimento urinario no se va a examinar inmediatamente, refrigrelo.
OTRAS PRUEBAS REALIZADAS EN ORINA.
DEPURACION DE LA CREATININA:
PROCEDIMIENTO:
- Tomar un tubo con sangre para realizar una creatinina.
-
Recolectar orina de 12 o 24 horas.

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
80
Medir el volumen de la orina.
Filtrar o centrifugar la orina.
Hacer una dilucin de 1:50 con agua destilada.
Prender el equipo RA50 para trabajar en cubeta desechable, hundiendo la tecla select,
luego el nmero 1 y trabajar con cubeta desechable.
Colocar el equipo en la tcnica de creatinina.
Pipetear 500 ml del reactivo 1 en cada cubeta desechable.
Pipetear 500 ml del reactivo 2 en cada cubeta desechable.
Introducir la cubeta desechable en el equipo y pipetear 100 lambdas del patrn y hundir
la tecla calibrate y esperar el tiempo estipulado por el equipo.
Luego introducir otra cubeta y pipetear 100 lambdas de la dilucin y esperar el tiempo
estipulado por el equipo, el resultado que arroja el equipo es el valor buscado.
INFORME:
- Volumen total en 12 o 24 horas (ml)
-
Creatinina en sangre (mg%).
Creatinina en orina (mg%).
Creatinina en 12 o 24 horas (mg712 o 24 horas).
Volumen orinario por minuto (ml/min).
Depuracin urinaria en 12 o 24 horas (ml/min).
VALORES NORMALES: HOMBRES: 98-156ml/min.

MUJERES: 95-160ml/min.

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
81
EXAMEN DE MATERIAL FECAL

Es el examen ms sencillo y menos costoso y bien realizado tiene una adecuada
sensibilidad y especialidad.
La eliminacin de los productos de desecho de la digestin es indispensable para la salud.
Dichos productos excretados se conocen como excrementos o heces. El examen de stas se
realizan con frecuencia en la evacuacin de trastornos gastrointestinales y sus resultados
ayudan a descubrir sangrados, obstruccin intestinal, ictericia obstructiva, enfermedades
parasitarias, disenterias, colitis ulcerosa y aumento de la excrecin de grasas.
Un adulto excreta de 100 a 300gr de materia fecal por da, de los cuales el 70% puede ser
agua, las heces es lo que queda de los 8 o 10 litros de liquido que entran al intestino
diariamente.
Los lquidos y slidos ingeridos por va bucal, saliva, secreciones gstricas, jugo
pancretico y bilis constituye a la formacin de las heces.
Las heces se componen de:
-
Residuos de material indigerible como la celulosa de los alimentos ingeridos de cautro

das anteriores.
Bilis(pigmento y sales); el clor se debe normalmente a los pigmentos biliares, algo

altera por accin de las bacterias.
Secrecin intestinal, incluyendo el moco.
Leucocitos que migran del torrente circulatorio.
Celulas epiteliales desprendidas.
Gran cantidad de bacterias que contribuyen hasta una tercera parte de los slidos
totales.
Material inorganico del 10 al 20% principalmente calcio y fosforo.
Alimentos no digeridos o no absorbidos ( existen en cantidades muy pequeas).

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
82
COPROLOGICO DIRECTO
Es un mtodo sencillo y rpido que permite confirmar el diagnstico de parasitosis
intestinal.
- Indique al usuario que no debe ingerir laxantes y explquele que recolecte una pequea
porcin de la deposicin:
- Directamente en un recipiente plstico, de tamao mediano, de boca ancha, con
tapa de rosca, seco y limpio, en una bacinilla, cuidadosamente limpia y seca,
luego traslade con un bajalenguas o algo similar una pequea porcin de la deposicin al
recipiente plstico. En los menores de un ao, los cuales no controlan los esfnteres se
les coloca el paal desechable al revs para que no se absorba el lquido en el caso de ser
una diarrea.
ADVIRTALE QUE:
- No contamine la muestra con la orina.
- No contamine la parte exterior del recipiente, ni lo llene demasiado.
- Nunca recoja la muestra directamente de la taza del sanitario.
- Una vez recolecte la muestra, cierre el recipiente y mrquelo con su nombre completo.
- Lleve la muestra al laboratorio antes de una hora.
- Reciba nicamente las muestras que estn en el recipiente adecuado.
- Verifique que el nombre en la orden mdica coincida con el de la muestra.
- Enumere y matricule la muestra en el libro de registro diario.
- Se debe pedir mnimo tres muestras en das alternos, no consecutivos y antes de iniciar el
tratamiento.

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
83
- Llvela al rea destinada a su proceso.
Procesamiento de la Muestra
- Lminas.
- Laminillas.
- Aplicadores.
- Lpiz marcador.
- Solucin Salina al 0.85%
- Lugol.
Examen Microscpico
Observe la consistencia y el color de la muestra.
Normalmente la materia fecal presenta una consistencia firme y formada o blanda y
formada, y un color caf carmelito; pero factores fisiolgicos, patolgicos y alimenticios
modifican estas caractersticas presentando variaciones as:
Consistencia
Dura y seca.
Color
Amarilla.
Blanda no formada
Gris
Semilquida
Rojo
Lquida o acuosa
Verde, negro incluso blanco.
- Observe e informe si existen parsitos adultos.

-
Inicie la preparacin de las muestras por las heces lquidas y las que contienen moco y
sangre, que deben ser las primeras en examinarse.

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
84
Examen Microscpico
Proceda a la preparacin de las muestras de la siguiente manera:
- Marque las lminas con el nmero de la muestra correspondiente.
- Coloque sobre la lmina una gota de solucin salina y aproximadamente a dos centmetros
una gota de lugol.
- Tome con el aplicador una pequea porcin de la parte profunda y de la superficie de la
muestra, si las heces estn formadas.
- Si son lquidas o semilquidas tmela del moco sanguinolento y del lquido que las rodea.
- Homogenice la muestra primero en la gota de solucin salina y con el mismo aplicador
tome otra porcin y homogencela en la gota de lugol.
- Coloque una laminilla sobre cada gota, evitando se formen burbujas.
- Lleve las lminas al sitio indicado para realizar el examen microscpico conservando el
orden de numeracin.
- Archive la copia de los resultados o antelos en el libro de registro correspondiente, una
vez examinadas las muestras.
- Al terminar ele trabajo, descarte las muestras en una bolsa plstica, virtales solucin
desinfectante, selle la bolsa e incinere.
Recomendaciones
- No coloque el recipiente sobre la solucin del examen.
- Conserve siempre las muestras tapadas.
- Recuerde: Las muestras de materia fecal deben ser examinadas en la hora siguiente
despus de su recoleccin.
- Proteja de la luz directa el reactivo de lugol.
Los trofozoitos se inmovilizan en solucin de yodo y el ncleo se tie claramente.

La solucin salina permite observar los quistes y trofozoitos de las amibas mientras que el
lugol nos permite detectar ms facilmente los huevos de helmintos.

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
85
Se deben reportar los trofozoitos y quistes haciendo una estimativa de cantidad que se
observe por campo el caul se puede reportar por cruces o por cantidad, los huevos se deben
informar por cantidad teniendo en cuenta el tipo de huevo y la cantidad de materia fecal.
EXAMEN DE MATERIA FECAL POR MTODOS DE CONCENTRACIN

Los mtodos de concentracin en el examen de materia fecal aumentan la posibilidad de
encontrar parsitos en las heces, cuando stos se hallan en nmero reducidos.
Por consiguiente, debe realizarse alguno de los mtodos de concentracin a todas las
muestras con examen coprolgico directo negativo.
Tcnica de Flotacin del Sulfato de Zinc
Equipo
- Centrfuga.
- Reloj.
Materiales
- Lminas.
- Laminillas.
- Aplicadores de madera.
- Lpiz marcador.
- Tubos de ensayo.
- Asa bacteriolgica.
- Mechero.
Reactivos
- Solucin de sulfato de zinc D: 1.080.

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
86
- Solucin salina 0.85%.

- Lugol.
- Diluya aproximadamente un gramo de materia fecal en 10 ml. de agua.
- Trasvase la mezcla a un tubo de ensayo debidamente marcado.
- Centrifugue a 2500 r.p.m. durante un minuto.
- Decante el sobrenadante.
- Agregue 2 3 ml. de agua, agite el sedimento, golpeando suavemente con el dedo, la base
del tubo, termine de llenar con agua y centrifugue.
- Repita dos o tres veces el lavado hasta que el sobrenadante quede claro.
- Decante el sobrenadante.
- Agregue 3 4 ml. de solucin de Sulfato de Zinc; mezcle el sedimento y termine de llenar
el tubo con la solucin hasta un centmetro de su borde.
- Centrifuga a 2500 r.p.m. durante un minuto. No frene la centrfuga.
- Coloque cuidadosamente el tubo en la gradilla.
- Tome con asa estril la pelcula que se form en la superficie teniendo cuidado de no
romperla y depostela en la lmina.
- Coloque una gota de solucin salina, sin tocar la pelcula, y al lado opuesto una gota de
lugol.
- Cubra con una laminilla evitando que se mezcle la solucin salina con el lugol.
- Llvela al sitio indicado para observacin microscpica.

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
87
DIAGNOSTICO DE OXIUROS
El nemtodo Enterobius Vermiculares , comnmente denominado oxiuro, es el agente
causal de una enfermedad parasitaria llamada Oxiuriasis.
Su ciclo de vida tiene
caractersticas diferentes. La hembra grvida migra al ano y en los pliegues perianales

deposita sus huevos, ocasionando prurito.
Es por esto que la tcnica para su diagnstico es diferente a la de otras parasitosis
intestinales.
Tcnica de Graham
Es el mtodo ms utilizado para el diagnstico de oxiuros. Permite por una tcnica sencilla
observar los huevos adheridos a una cinta engomada transparente.
- Recomiende al usuario que se presente al laboratorio sin baarse y sin hacer la deposicin.
Materiales
- Cinta engomada transparente.
- Bajalenguas.
- Lminas.
- Gasa.
Toma de la Muestra
- Corte aproximadamente 12 cm. de cinta engomada transparente de 1 cm. de ancho y
pguela sobre una lmina, dejando que sobresalga la cinta por los extremos de sta.
- Doble uno de los extremos de la cinta sobre s mismo para usarlo de cogedera y el otro
extremo pguelo a la lmina.

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
88
- En el momento de tomar la muestra, coloque un bajalenguas debajo de la lmina haciendo

que sobresalga del extremo contrario a la cogedera , aproximadamente 2.5 cm.
- Separe la cinta de la lmina tomndola por la cogedera y dblela por detrs del
bajalenguas, dejando expuesta la superficie gomosa.
- Sujete firmemente la cinta y la lmina contra el bajalenguas.
- Solicite al usuario se despoje de su ropa interior y se coloque sobre la camilla en posicin
de gateo.
- Seprele los glteos y presione el extremo del bajalenguas, sin insertarlo, en varios sitios
de la piel que rodea el ano.
- Adhiera de nuevo la cinta a la lmina y alsela suavemente con una gasa.
- Deseche el bajalenguas y lleve la lmina para su observacin microscpica.
- Descarte la lmina, una vez examinada la muestra.
- Archive la copia del resultado o antelo en el libro de registro correspondiente.

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
89
SANGRE OCULTA EN MATERIA FECAL.

La hemorragia en el aparato gastrointestinal puede ser aguda o crnica, oculta o evidente, y
puede originarse en cualquier punto del aparato digestivo desde la boca hasta el recto.
Aunque con frecuencia es el resultado de una patologa menor, como en el caso de las
hemorroides y las fisuras anales, nunca debe ignorarse la presencia de sangre en las heces.
- Recomindele se abstenga de ingerir carne durante los tres das anteriores a la recoleccin
de la muestra:
- Solictele recolecte la muestra en la misma forma que para el examen coprolgico.
Equipo, Materiales y Reactivos

- Reloj.
- Papel filtro.
- Palillos de madera.
- Lminas.
- Reactivo en tabletas.
- Agua destilada.
Recomendaciones
Si el resultado es positivo y el usuario no se abstuvo de ingerir carne los tres das anteriores
a la recoleccin de la muestra, aconsjele que repita el examen atendiendo esta
recomendacin.

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
90
OTROS ANLISIS EN MATERIA FECAL

Algunas pruebas bioqumicas son tiles como complemento en el estudio de diversas
enfermedades.
Ph:
Esta prueba y el estudio de azucares reductores que se describen a continuacin tiene mayor
valor en la Enfermedad Diarreica Aguda en nios menores de 5 aos.
En diarreas por bacterias invasivas generalmente el Ph es cido, en las de origen txico es
neutro y en las vrales siempre es cido.
- Indique que recolecte la muestra en un recipiente adecuado.
- Marque la muestra con el nombre y apellidos.
Procedimiento
- Recorte 3 cm. de tira de papel indicadora de ph.
- Tome con un aplicador una porcin de la muestra y colquela sobre el papel indicador.
- Espere unos segundos y compare con la carta de colores.
Azcares Reductores
Se ha encontrado que siempre hay presencia de glucosa y ausencia de lactosa, en diarrea de
origen bacteriano-txico, mientras que lo contrario se encuentra en las diarreas vrales. La
prueba de lactosa positiva en materia fecal es tambin til en el diagnstico de diarrea, por
deficiencia de disacaridos, que se presenta en nios alimentados al pecho que no desdoblan
la lactosa, abundante en la leche materna.

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
91
- Tubos grandes.
- Solucin salina estril.
- Tabletas de clinitest.
- Pipetas.
Procedimiento
- Tome en un tubo grande 15 gotas de materia fecal si es lquida, si es consistente haga
dilucin en partes iguales con solucin salina.
- Adale una pasta de clinitest.
- Espere 30 segundos y compare con la carta de colores.
Leucocitos
Estas clulas en materia fecal se encuentran asociadas a moco y se observan en diferentes
enfermedades intestinales.
- Lminas porta-objetos.
- Palillos.
-Colorante de Wright.
-Buffer.
Procedimiento
- Tome con el palillo la parte mucosa y haga un extendido delgado y homogneo.
- Deje secar a temperatura ambiente.
- Colore con coloracin de Wright.
- Deje secar a temperatura ambiente y lleve al microscopio para ser observada.

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
92
COLORACIN DE ZIEHL NEELSEN MODIFICADA PARA CRYPTOSPORIDIUM

La muestra de materia fecal o esputo se extiende en el porta-objetos con una gota de
solucin salina, en un rea de aproximadamente uno y medio centmetro de dimetro.
Despus de seca la preparacin se fija 10 minutos con metanol. La coloracin se hace con
carbol-fucsina concentrada ( Fuscina bsica: 1 gramo; etanol: 10 ml y Fenol al 5%: 90 ml.
), con este colorante se deja 20 minutos, luego lavar 2 minutos con agua corriente. Se
decolora con cido sulfrico al 7%, para luego lavar durante 2 minutos con agua corriente.
El colorante de contraste es verde de malaquita al 5% (Verde de malaquita: 5 gr. y etanol al
10%: 100 ml), dejar 2 minutos. Este colorante puede reemplazarse por azul de metileno.
Finalmente se lava con agua corriente durante un minuto y se deja secar a temperatura
ambiente, antes de observar la preparacin al microscopio. Los ooquistes se observan
teidos de rojo brillante sobre fondo verde. Son redondeados u ovalados de 3-5 micras de
dimetro, en algunos se logran ver los corpsculos internos teidos ms oscuros que
corresponden a los esporozoitos.
Se puede tambin utilizar la coloracin del Z.N sin flamear por 20.

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
93
SEROLOGIA
La Sfilis es una enfermedad infecto-contagiosa producida por una espiroqueta, que se
transmite sexualmente, por va placentaria y por transfusiones sanguneas.
TECNICA - VDRL
Tiene buena sensibilidad y especificidad y hace de l una prueba til en el manejo de la
Sfilis. Su utilidad radica en que sirve para establecer un diagnstico, permite el control
del tratamiento y descubre los casos de Sfilis latente.
Equipo, Materiales
- Centrfuga.
- Bao mara.
- Agitador.
- Reloj.
- Lminas con anillos de 14 mm. de fondo plano.
- Portalminas.
- Pipetas.
- Tubos de ensayo.
- Gradilla.
- Agujas hipodrmicas recortadas No. 18, 19, 23.
- Jeringas de vidrio 1-2 ml.
- Frasco de 30 ml. fondo plano, boca angosta, tapa de vidrio esmeril.
Toma de la Muestra
- Cercirese que el usuario est en ayunas.
- Marque el tubos con el nombre del usuario y el nmero de la muestra.
- Extraiga 5 ml. de sangre.

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
94
- Retire la aguja del tubo al vaco o de la jeringa y vierta en esta ltima la sangre por la
pared del tubo.
Procedimiento
- Coloque los tubos en una gradilla y deje que la sangre se coagule a temperatura ambiente
mnimo por 20 minutos.
- Coloque los tubos en la centrfuga a 2.500 r.p.m. durante 10 minutos.
- Separe el suero del cogulo por inversin y centrifugue nuevamente por 5 minutos, si el
suero presenta turbidz o contaminacin con glbulos rojos.
- Inactive los sueros, colocndolos en el bao mara durante 30 minutos a una temperatura
de 56 grados centgrados. La temperatura no debe exceder ni disminuir de 0.5 grados
centgrados.
- Retire la gradilla.
- Examine los sueros y centrifugue aquellos que presentan partculas o turbidz.
- Deje los sueros a temperatura ambiente durante 10 minutos, en el sitio indicado para
realizar la prueba.
- Si la muestra no se procesa antes de 4 horas, inactvela nuevamente a 56 grados
centgrados durante 10 minutos.
Recomendaciones
- Cercirese que el suero no presente ni turbidz, ni hemlisis, ni contaminacin.
- Las muestras inactivadas el da anterior y no procesadas gurdelas en nevera a 4C. Al
da siguiente llvelas al bao mara 10 minutos a 56C.
- Escriba en el formulario de resultados el nmero de la cdula del usuario.
TECNICA - RPR
- Puede utilizarse suero o plasma.
inactivacin.
No contaminado ni hemolisado.
No requiere

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
95
- La suspensin del Antgeno viene lista para el uso, agitarlo suavemente. Para utilizarla
quitar el tapn de la botella de plstico con dispensador y colocar la aguja para dispensar
a travs del tapn de cierre. A continuacin, dispensar la Suspensin de Antgeno en la
botella con dispensador apretando la botella de plstico e insertando la punta de la aguja
en la suspensin del Antgeno.
TCNICA
1. Pipetear con la pipeta y un gotero la cantidad suficiente de muestra y dispensar UNA sola
gota en un circulo del porta objeto prueba. Utilizar una pipeta nueva para cada muestra
(vienen con el estuche). Mantener la pipeta en posicin vertical para un pipeteado
preciso.
2. Utilizando el palillo, esparcir la muestra por toda el rea del circulo.
3. Agregar el Antgeno con previa homogenizacin suave de la botella de plstico con
dispensador y la aguja situarla en posicin vertical y dispensar una sola gota en el
circulo. No agitar.
4. Situar inmediatamente el portaobjetos en un agitador automtico durante 8 minutos a 100
r.p.m.
LECTURA DE RESULTADOS
Reaccin Negativa:
Acumulacin de partculas de carbono uniforme en el centro del circulo. O suspensin de
una coloracin uniforme gris por todo el circulo.
Reaccin Positiva Dbil:

Acumulo de finos agregados negros circundados por un rea difusa de finos agregados
negros.

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
96
Reaccin Positiva:
Se observa la produccin de agregados negros normalmente por todo el circulo prueba.
PRUEBA CONFIRMATORIA DE TREPONEMA PALLIDUM.

PRUEBA RAPIDA.
La prueba es una prueba rpida diseada para la deteccin cualitativa de anticuerpos

Treponemicos IgG, IgA e IgM en suero humano, plasma o sangre total como soporte en el
diagnstico de sfilis.
MATERIALES:
1. Sangre total, suero o plasma.

2. Dispositivos de la prueba.
3. Diluyente.
TECNICA:
1. Llevar los dispositivos de la prueba a temperatura ambiente.
2. Sacar el test de su envoltura y rotularlo con la identificacin del paciente.
3. Dispensar 10 microlitros de suero o plasma o 20 microlitros de sangre total en la
ventana de muestra.
4. Aadir tres gotas del diluyente que viene en el kit.
5. Leer los resultados entre 5 y 10 minutos despus de comenzada la prueba.
RESULTADOS.
Los resultados se reportan:

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
97
POSITIVO: Cuando hay presencia de doble linea, una en la franja T y otra linea en la
franja C. Si hay una linea tenue en la franja T se toma la prueba como positiva.
NEGATIVO: Cuando solo se observa una linea en la franja C.
Si la prueba no muestra ninguna linea se toma como la tecnica erronea y se debe repetir.
PRUEBA RAPIDA DE VIH 1 Y 2.
La prueba es una prueba rpida diseada para la deteccin cualitativa de anticuerpos IgG,
IgA e IgM en suero humano, plasma o sangre total contra el virus VIH 1 y VIH 2 como
soporte en el diagnstico del virus de la inmunodeficiencia humana.
MATERIALES:
1. Sangre total, suero o plasma.

2. Dispositivos de la prueba.
3. Diluyente.
TECNICA:
1. Llevar los dispositivos de la prueba a temperatura ambiente.
2. Sacar el test de su envoltura y rotularlo con la identificacin del paciente.
3. Dispensar 10 microlitros de suero o plasma o 20 microlitros de sangre total en la
ventana de muestra.
4. Aadir tres gotas del diluyente que viene en el kit.
5. Leer los resultados entre 5 y 20 minutos despus de comenzada la prueba.
RESULTADOS.

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
98
Los resultados se reportan:

POSITIVO: Cuando hay presencia de doble lnea, una en la franja 1 o franja 2 y otra lnea
en la franja C. Tambin se puede presentar lnea en la franja 1, franja 2 y en la franja C.
NEGATIVO: Cuando solo se observa una lnea en la franja C.
Si la prueba no muestra ninguna lnea se toma como la tcnica errnea y se debe repetir.
PRUEBA RAPIDA DE AGLUTINACION EN LATEX PARA LA

DETERMINACION CUALITATIVA Y SEMICUANTITATIVA DE LA
PROTEINA C REACTIVA PCR.
Es un aprueba basada en la reaccin por aglutinacin de los anticuerpos anti PCR contra la
proteina C reactiva del paciente.
MATERIALES:
1.
2.
3.
4.
Suero.
Reactivo de latex PCR.
Lamina oscura para la reaccin.
Palillos mezcladores.
TECNICA:
1.
2.
3.
4.
Llevar el reactivo a temperatura ambiente.

Dispensar 40 microlitros de sureo en la lamina de reaccin..
Dispensar una gota del reactivo PCR sobre el suero.
Mezclar con el palillo y agitar suavemente por 2 minutos de tal forma que la muestra
rote dentro del rea de la lamina.
5. Leer bajo la luz artificial.
Cualquier aglutinacin indica un contenido de PCR de 6mg/dl en la muestra sin diluir.

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
99
Las muestras con resultados positivos en la prueba de tamizaje se le debe realizar la prueba
semicuantitativa.
Se debe realizar una dilucin de 1 en 1 y se considera positivo hasta la ltima dilucin que
presente aglutinacin.
A esta dilucin se debe multiplicar el valor de la dilucin por 6 y su resultado se informa en
mg/dl
DIAGNOSTICO DE EMBARAZO
El embarazo es un estado fisiolgico , con alteraciones hormonales, metablicas,
sanguneas y mecnicas que repercuten en la fisiologa de la mujer, con cambios
detectables por el laboratorio, que desempea un papel importantsimo para ella y el
producto de la concepcin.
El diagnstico precoz se realiza con la determinacin cualitativa de la hormona

gonadotropina corinica (HCG) presente en el suero o en la orina de la mujer embarazada.
Esta hormona se empieza a producir en la primera semana, cuando se implanta el vulo
fecundado.
Los mtodos ms sensibles detectan la hormona entre el 7 y el 10 da despus de la

concepcin.
- Para la determinacin de la hormona, infrmele que el da anterior restrinja la ingesta de
lquidos 12 horas antes y no ingiera analgsicos y sedantes por lo menos en las 48 horas
anteriores al examen.

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
100
- Es necesario que se presente en ayunas si la determinacin es en sangre; si la

determinacin se realiza en la orina, solictele se presente al laboratorio para recolectar la
primera muestra de la maana, que presenta mayor concentracin de la hormona HCG.
Equipo, Materiales
- Centrfuga.
- Tubos.
- Gradilla.

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
101
Procedimiento
- Centrifugue la sangre o la orina en tubos debidamente marcados.
- Coloque en la gradilla las muestras de orina o de suero y llvela al sitio indicado para
realizar la prueba.
-
La tcnica es de acuerdo al inserto de cada casa comercial que se este utilizando, el cual
debe ser leido cuidadosamente antes de montar las pruebas.
Recomendaciones
- Procese rpidamente las muestras, porque la hormona se altera si permanece a
temperatura ambiente por 8 horas o ms. O en refrigeracin por ms de 24 horas antes de
su anlisis.
- Refrigere los reactivos una vez realice la prueba si as lo requiere.

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
102
SECRECIN OCULAR
PROCEDIMIENTO DE TOMA DE MUESTRAS
- Indique al usuario que el da anterior al examen no utilice gotas, ni cremas oftlmicas.
- Recomindele que si tiene poca secrecin se presente al laboratorio sin hacerse limpieza
previa del ojo infectado.
- En caso de tener abundante secrecin indquele que haga una limpieza superficial, con un
algodn humedecido con agua.
EXAMEN DIRECTO
Materiales
Algodn.
Reactivos
Solucin salina estril al 0.9%.
escobillones estriles.
Hipoclorito de sodio al 5.25%.
Gradilla.
Hidrxido de potasio (K0H).
Tubos de ensayo.
Colorante de Gram.
Mechero.
Gradilla para lminas.
Laminillas.
Procedimiento
- Limpie el rea alrededor de la lesin con un algodn humedecido en solucin salina
estril.
- Descarte el algodn en Hipoclorito de Sodio.

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
103
- Tome con un escobilln estril la primera muestra y haga un frotis.

- Descarte el escobilln en Hipoclorito de sodio.
-
Tome con escobilln otra muestra y suspndala en Hidrxido de Potasio cuando el

mdico solicite KOH.
- Prepare la muestra, as:

* Coloque sobre una lmina una gota de la muestra y cbrala con una laminilla.
* Lleve la preparacin al sitio indicado para su observacin.
* Deje secar el frotis a temperatura ambiente, luego fjelo pasndolo a tres veces por
la llama y colorelo.
* Deje secar la lmina en el sitio indicado para su observacin microscpica.

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
104
SECRECIN OTICA
PROCEDIMIENTO DE TOMA DE MUESTRAS
- Indique al usuario que el da anterior al examen no utilice gotas, ni cremas pticas.
- Recomindele que el da del examen se haga una limpieza externa con un algodn
humedecido con agua.
EXAMEN DIRECTO
Materiales
Algodn.
Reactivos
Isodine.
Escobillones estriles.
Solucin salina estril al
0.9%.
Gradilla.
Hidrxido de Potasio (KOH).
Tubos de ensayo.
Hipoclorito de Sodio al 5.25%.
Laminillas.
Colorante de Gram.
Mechero.
Procedimiento
- Limpie el conducto externo con un algodn humedecido con isodine y djelo actuar
durante cinco minutos.
- Descarte el algodn en hipoclorito de Sodio.
- Tome con un escobilln estril la primera muestra y haga un frotis.
- Tome con otros dos escobillones, otras dos muestras y suspndalas:

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
105
Una en solucin salina estril y la otra en Hidrxido de Potasio (KOH).

- Proceda a montar el examen fresco y KOH, as:
* Coloque sobre una lmina una gota de la muestra suspendida en solucin salina y
separada de esta una gota de la muestra suspendida en Hidrxido de Potasio
(KOH).
* Cubra ambas preparaciones con laminillas.
* Deje secar el frotis a temperatura ambiente, luego fjelo pasndolo tres veces por
la llama y colorelo.
* Deje secar la lmina en el sitio indicado para su observacin microscpica.
SECRECIN DE HERIDAS Y LESIONES
- Informe al usuario que el da del examen haga una limpieza de la herida con agua y jabn,
y que no se aplique ningn vendaje ni medicamento (cremas, sulfatiazol, etc.).
EXAMEN DIRECTO
Materiales
Algodn.
Reactivos
Isodine.
Hidrxido de Potasio (KOH).
Gradilla.
Tubos de ensayo.
Colorante de Gram.

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
106
Laminillas.
Mechero.

- Limpie el rea alrededor de la lesin con un algodn humedecido con solucin salina
estril o isodine.
- Deje secar.
- Descarte el algodn en Hipoclorito de Sodio.
- Proceda a tomar la muestra con un escobilln estril, del fondo de la herida o de la lesin,
y haga un frotis.
- Deje secar a temperatura ambiente.
- Descarte el escobilln en Hipoclorito de Sodio.
- Tome otra muestra utilizando otro escobilln y suspndala en solucin de Hidrxido de
Potasio.
- Prepare el examen de KOH, as:
* Lleve la preparacin al sitio indicado para su observacin.
* Si no se procesa inmediatamente colquelo en cmara hmeda, fije el frotis
pasndolo tres veces por la llama y colorelo.
* Deje las lminas en el sitio indicado para su observacin microscpica.

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
107
SECRECIN VAGINAL
Instrucciones a la Usuaria para el Examen Directo y el Cultivo.

- Recomindele: que el da anterior a la toma del examen no se coloque vulos, ni cremas,
ni tenga relaciones sexuales.
- Que este examen no se puede realizar durante el perodo menstrual.
- Que se presente al examen con un vestido cmodo (falda) para facilitar la toma de
la muestra.
- Que el da del examen realice un lavado de la regin genital y advirtale que no
utilice las duchas internas.
EXAMEN DIRECTO
Equipo
Camilla ginecolgica con
Materiales
Sbana o papel Kraft.
Reactivos
Hipoclorito de Sodio
sus estribos.
Espculos.
al 5.25%.
Lmpara cuello de cisne.
Escobillones
Solucin salina
estriles.
estril al 0.9%.
Lminas limpias y
Colorante de Gram.
desengrasadas.
Gradilla para tubos.
Tubos de ensayo.
Laminillas.
Mechero.

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
108

- Cubra la camilla ginecolgica con una sabana o con un papel Kraft.
- Solicite a la usuaria que se despoje de su ropa interior y se coloque en la camilla en
posicin ginecolgica.
- Separe los labios genitales e introduzca el especulo por el canal vaginal, sin utilizar
aditivos, visualice el cuello uterino y asegure el especulo.
- Introduzca el escobilln estril en el canal endocervical y rtelo suavemente permitiendo
que permanezca all por espacio de 10 a 30 segundos.
- Haga un frotis de esta muestra.
- Proceda a tomar otra muestra del fondo del saco vaginal con el escobilln, y suspenda el
material en solucin salina estril al 0.9%.
- Retire el especulo con cuidado y colquelo en Hipoclorito de Sodio.
- Cambie la sbana o deseche el papel Kraft, una vez haya tomado la muestra.
SECRECIN VAGINAL EN NIAS
EXAMEN DIRECTO
-
Cubra la camilla ginecolgica con una sbana o con papel Kraft.
Solicite a la nia que se despoje de la ropa interior y se acueste en la camilla.
Indquele que flexione las piernas sobre su abdomen de tal manera que
quede
descubierta la parte genital.

-
Proceda a la toma de la muestra separndole los labios genitales e introduzca por el

canal vaginal un escobilln estril y rtelo suavemente.
Retire con cuidado el escobilln y haga el frotis.
Deje el escobilln en solucin salina estril al 0.9%.

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
109
Retire la sbana o deseche el papel Kraft, una vez haya tomado la muestra.
Examen en Fresco
- Prepare el examen fresco, as:
* Lleve la preparacin al sitio indicado para su observacin microscpica.
Frotis
- Deje secar el frotis a temperatura ambiente, luego fjelo pasndolo tres veces por la llama
y colorelo.
- Deje las lminas en el sitio indicado para su observacin microscpica.
RECUERDE
Las tomas de secreciones vaginales como uretrales en menores de edad siempres deben
realizarse en presencia de los padres o un adulto acompaante y una persona que trabaje
con usted.
SECRECIN URETRAL
Instrucciones al Usuario para el Examen del Frotis y el Cultivo.

- Indique que se presente al laboratorio sin haber orinado.
EXAMEN DIRECTO
Materiales
Algodn.
Reactivos
Solucin salida estril al 0.9%.
Escobillones o asa estril.

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
110
Colorante de Gram.
Mechero.
Tubos de ensayo.

- Indique al usuario que descubra su parte genital.
-
Limpie el meato con un algodn humedecido en solucin salina estril.
Pidale al paciente que presione el pene de manera que salga una gota de pus por el
meato.
Tome la muestra directamente en una lmina y haga el frotis.
Tome otra muestra con el escobilln y suspndala en solucin salina estril al 0.9%.
Si al presionar no sale la gota de pus, suministre al usuario un recipiente estril o un

tubo de ensayo y solictele que recolecte las tres primeras gotas de orina.
Proceda a realizar el frotis.
Descarte el escobilln en Hipoclorito de Sodio.
Deje secar el frotis a temperatura ambiente, luego fjelo pasndolo tres veces por la
llama y colorelo.
Deje las lminas en el sitio indicado para su observacin microscpica.

OROFARINGEO
EXAMEN DIRECTO
La cavidad bucal posee numerosos microorganismos que conforman su flora normal, pero
adems de estos puede ocurrir colonizacin por otros microorganismos que se establecen
para originar el estado de PORTADOR SANO o por el contrario ser responsables de
entidades como:
Diftera, entre otras.
Amigdalitis,
Faringitis, Laringitis,, Faringoamigdalitis, Epiglotitis,

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
111
Debido a que tanto los microorganismos que conforman la flora normal como los que
causan enfermedad tienen una morfologa similar resulta imposible diferenciarlos en un
frotis, por esto se considera que el Examen directo no tiene ningn valor diagnstico,
requirindose siempre un cultivo.
Solamente se considera la posibilidad de una coloracin de GRAM en el caso que se

sospeche Angina de Vincent.
Cuando se sospecha Difteria, el mdico debe hacer su diagnstico basado en el cuadro

Clnico; el examen directo o coloracin de Albert lo orientar pero su confirmacin debe
hacerse con el cultivo y la prueba de toxigenicidad.

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
112
GARGANTA
EXAMEN DIRECTO
Se realiza una coloracin de GRAM de un frotis de garganta cuando se sospecha Angina de
Vincent. Y la coloracin de Albert cuando se sospecha Difteria.
Materiales
Reactivos
Bajalenguas.
Coloracin de GRAM.
Mechero.
Coloracin de Albert.

- Humedezca el escobilln en solucin salina.
-
Tome con la mano izquierda un bajalenguas.
Solicite al paciente que abra la boca y presinele la lengua hacia abajo con el
bajalenguas.
Proceda a tomar la muestra tocando con el escobilln las amgdalas y la parte posterior
de la faringe. En caso de sospecha de Difteria se toma la muestra de las amgdalas y
pseudomembranas.
Haga un frotis.
Descarte el bajalenguas y el escobilln en Hipoclorito de Sodio.
Deje secar el frotis a temperatura ambiente, luego fjelo pasndolo tres veces por la
llama y colorelo con GRAM o con ALBERT.
Deje las lminas en el sitio indicado para su observacin microscpica.

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
113
FOSA NASAL. MICOBACTERIUM LEPRAE
EXAMEN DIRECTO
Materiales
Escobilln estril.
Reactivos
Colorantes de Ziel Neelsen.
Solucin salina estril.
Mechero.

Bolsa plstica.
Lancetas.
Pinza

La Baciloscopia es un examen bacteriolgico que busca la presencia de bacilos cido
alcohol resistentes (baar) y que sirve como ayuda para la clasificacin de la enfermedad de
lepra. Es necesaria porque confirma y aclara el diagnstico.
1.- Baciloscopia: se realiza en cinco o ms partes del cuerpo:
-
Lbulos auriculares
Moco nasal que se hace recoger al paciente en una bolsa plstica o de celofn.
Dos lesiones cutneas activas (si el paciente presenta lesiones)
Una de codo o de rodilla
La baciloscopia debe hacerse por lo menos cada seis meses con los siguientes materiales:
-
Pinzas atraumticas
Bistur No.15 (cuchilla desechable) o lancetas (2)
Alcohol antisptico

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
Algodn
Lminas porta-objetos nuevas
Aplicadores de madera (para hacer el extendido del moco)
Mechero y marcadores
114
a. Procedimiento para la toma de muestras

Los procedimientos para la toma de cada una de las muestras (linfa de oreja, moco, lesin y
leproma) son muy sencillos si se siguen los pasos correspondientes.
1. Toma de linfa de oreja

Se limpia muy cuidadosamente el lbulo de la oreja con alcohol. Una vez desinfectada el
rea se toma el lbulo entre los dedos ndice y pulgar y se hace isquemia con una pinza
atraumtica.
Se realiza una incisin en la dermis de aproximadamente 5 mm. de largo x 3 mm. de
profundidad, con un bistur No.15 y cuchilla desechable.
Si se presenta hemorragia se debe limpiar con un algodn seco.
Es necesario utilizar para el frotis la linfa clara y el raspado de la incisin obtenida al girar
el bistur dentro de la pequea herida.
La linfa se extiende suavemente en una lmina transversal en forma de zig-zag, en lneas
muy seguidas, con el borde romo de la cuchilla. La Lmina se marca y se deja secar a
temperatura ambiente.
La muestra tambin se puede tomar haciendo varios pinchazos con una lanceta y tomando
la linfa sin sangre para el frotis.
Inmediatamente se limpia el lbulo con alcohol y algodn y, si es necesario se le pone una
banda adhesiva, o hemostasis por presin.
2. Toma de moco

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
115
Se hace sonar al paciente en una bolsa de celofn o plstico y del moco all recogido se har
un frotis. Si el paciente no produce moco, con un aplicador de algodn se friccionan suave
pero firmemente, los lados del septo nasal.
Si la mucosa est muy seca, se humedece con un aplicador empapado en solucin salina.
Se extiende el moco en lmina, en la misma forma en que se hace con la linfa de oreja y se
deja secar a temperatura ambiente.
3. Toma de linfa de lesin

Esta prueba es similar a la toma de linfa de oreja, teniendo en cuenta que se toma el borde
de la lesin con las pinzas atraumticas para la isquemia.
4. Leproma
Se toma de cualquier parte del leproma y se extiende en la lmina de la manera ya descrita.
Forma prctica de hacer los frotis

Una vez que se sequen las lminas de todas las muestras, a temperatura ambiente, se fijan
suavemente al calor de un mechero del lado opuesto a aquel en el que se encuentra la
muestra. Despus de esto, las lminas se pueden colorear.
b. Coloracin
La coloracin de las muestras se realiza para visualizar los bacilos.
Existen dos tcnicas para realizar la coloracin: En fro o en caliente.
Nuestras experiencias indican que no existe diferencia entre la coloracin en fro y la
coloracin en caliente si sta se realiza segn el procedimiento utilizado en nuestro pas
para el diagnstico de tuberculosis y si se tiene en cuenta que se debe prolongar en 10
minutos la produccin de vapores con la fucsina.

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
116
c. Lectura de la baciloscopia
Esta lectura se realiza en el microscopio con un objeto de inmersin 90x 100x, ocular 10x
y una buena fuente de luz.
El estudio se realizar en las zonas en donde los bacilos estn disgregados y por lo menos
en 100 campos microscpicos.

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
117
La determinacin del grado de positividad de cada frotis se realiza de esta manera:
1. ndice Bacilar (IB)

Este nos proporciona un nmero aproximado de bacilos en la baciloscopia y se lee de la
siguiente manera:
0
(-)
No se encuentran bacilos cido-alcohol resistentes ((baar) en 100 campos.
Menos de un baar por campo en 100 campos observados.
++
1 a 10 baar por campo en 50 campos observados.
+++
Ms de 10 baar por campo en 20 campos observados.
Si se encuentran globias se anotarn: G
El IB se calcula totalizando el nmero de cruces por cada frotis dividiendo el nmero de

muestras tomadas, de acuerdo a la frmula:
Sumatoria Nmero de cruces = IB

Zonas examinadas
Un ejemplo ms concreto para explicar cmo se aplica esta frmula es:

1 Oreja derecha
+++
(3)
1 Oreja izquierda
+++
(3)
14 +
1 Frtis nasal
+++
(3)
5 Zonas examinadas
1 Lesin cutnea
1 Codo
++ (2)
+++
(3)
---
------
14
examinadas
= 2.8 IB

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
118
DIAGNOSTICO DE TUBERCULOSIS
La Tuberculosis es una enfermedad infecto contagiosa crnica producida por el
Micobacterium Tuberculoso. Afecta ms los pulmones, pero puede lesionar los riones, los
huesos, los ganglios linfticos, el aparato digestivo, el sistema nervioso central, los rganos
genitales, o puede diseminarse a todo el organismo.
La transmisin ocurre principalmente al inhalar partculas de esputo que exhala el enfermo
al toser, hablar o estornudar.
Por esto el paciente con baciloscopia positiva, es la fuente ms importante de contagio para
la comunidad; y requiere la mayor y mejor atencin del personal de salud.
BACILOSCOPIA
Es el mtodo ms sencillo y rpido para confirmar el diagnstico de la Tuberculosis y
evaluar la evolucin de la enfermedad durante el tratamiento.
Consiste en la bsqueda microscpica de bacilos cido alcohol resistentes a partir de
muestras de cualquier espcimen clnico.
- Solictele que recolecte, en recipientes plsticos, de tamao adecuado, de boca ancha,
con tapa, seco y limpio, como mnimo tres muestras de esputo as:
-
La primera muestra en el momento de la consulta.
La segunda muestra al da siguiente, el primer esputo de la maana, previo

enjuague de la boca.
La tercera muestra el mismo da, despus de entregar la segunda muestra.
Aclrele que si tiene dificultad para llevar las tres muestras en dos das diferentes, las
recolecte en el transcurso del mismo da.
Indquele que obtenga la muestra de esputo de la siguiente forma:

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
119
Inspire profundamente y despus de un esfuerzo de tos, obtenga en esputo que no sea

saliva, ni moco.
Si el paciente manifiesta que no logra expectorar despus de varios esfuerzos de tos,

explquele que proceda as:
Acustese en la cama boca abajo con la cabeza fuera de su borde y una almohada
debajo del trax .
Coloque previamente en el piso un papel peridico para protegerlo.
Tome el recipiente con una mano e inspire profundamente y con una sola aspiracin
tosa tan fuerte como pueda y deposite en l el material expectorado.
Cierre y marque en el cuerpo del recipiente con su nombre completo y llvelo al

laboratorio.
- Verifique que la muestra est identificada correctamente.
-
Si la muestra se ha derramado un poco, desinfecte la parte exterior del recipiente con

fenol al 5% o con hipoclorito de sodio al 5.0%.
Esterilice o incinere si el derrame es masivo.
Informe al usuario o a la institucin remitente, cuando las muestras presenten

deficiencia en la calidad, cantidad, conservacin y transporte.
Conservacin de la Muestra
- Si no se procesa inmediatamente, consrvela en el refrigerador hasta por una semana, o
a temperatura ambiente por 24 horas o adicionando fosfato trisdico o cido brico al
1%, en cantidad igual a la de la muestra.
Remisin de las Muestras

- Si otras instituciones envan muestras de esputo para procesarlas recomindeles que
tomen las siguientes precauciones:

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
120
Proteja las muestras del calor excesivo y de la luz solar.
Mrquelas y enve una lista de todas ellas.
Selle hermticamente los recipientes con esparadrapo o cinta adhesiva.
Acondicinelas en una caja de madera o metlica con tabiques para que no se derrame y
as se evita el riesgo de contaminacin a las personas que la transportan.
Procesamiento de la muestra
Area
-
El rea de trabajo del laboratorio donde se realiza el montaje de la baciloscopia debe

cumplir las siguientes condiciones mnimas:
Buena iluminacin ventilacin.
Mesn y pozuelo de acero inoxidable u otro material de fcil desinfeccin.
Preparacin del Extendido
- Hipoclorito de sodio al 5.0%.
-
Lminas nuevas desengrasadas, conservadas en alcohol.
Aplicadores de madera o baja lenguas.
Mechero.
Lpiz marcador (que no sea rojo).
Papel Kraft o peridico.
Tarro metlico con bolsa plstica.
Gradilla.
Procedimiento
- Lvese las manos y colquese la blusa de proteccin antes de empezar el trabajo.

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
121
Cubra la mesa de trabajo con papel Kraft o peridico.
Enumere y ordene las muestras en lnea horizontal.
Tome cada lmina y trace una lnea por la cara inferior que divida un tercio para la
numeracin y los dos tercios restantes para el extendido.
Mrquela con el nmero de la muestra correspondiente y djela al frente de ella.
Divida en dos un aplicador de madera y astllelo.
Coloque el mechero entre la muestra y usted. Encindalo y destape solamente la

muestra a procesar.
Tome la porcin purulenta de la muestra, utilizando la parte astillada del aplicador.
Extindalo uniformemente, sosteniendo la lmina por el tercio numerado con los dedos
ndice y pulgar.
Deseche el aplicador en hipoclorito de sodio.
Flamee los bordes de la lmina.
Coloque las lminas sobre una gradilla previamente forrada, hasta que se sequen los
extendidos.
una vez secos, fjelos pasndolos rpidamente tres veces sobre la llama.
Coloque las placas en la gradilla y llvelas al rea de coloracin.
Deseche el papel y el material contaminado en el recipiente de basura.
Recomendaciones
- Recuerde el uso obligatorio de la blusa y los guantes.
-
No descarte las muestras sino hasta despus de su observacin microscpica.
No deje extendidos sin colorear.
Desinfecte el rea de trabajo con fenol o hipoclorito al 5%.
Incinere el material contaminado.
Coloracin de Ziehl Neelsen

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
122
Materiales
- Varillas para coloracin.
-
Mechero.
Reactivos
- Fucsina fenicada.
-
Alcohol cido al 3%.
Azul de metileno.
Procedimiento
- Coloque las lminas sobre las varillas para la coloracin, con el nmero hacia el
operador.
-
Cubra totalmente el extendido con fucsina previamente filtrada.
Caliente las lminas pasando el mechero por debajo, hasta que se produzcan vapores.
Suspenda el calentamiento cuando estos se hagan visibles.
Caliente nuevamente una vez cesen los vapores y repita este procesamiento durante un
tiempo no inferior a 10 minutos.
Evite que la fucsina hierva, y si disminuye por evaporacin o derrame repngala.
Deje reposar por un tiempo no menor de 5 minutos.
Derrame la fucsina tomando la lmina por el extremo numerado e inclinndola hacia

adelante. Lave dejando caer agua corriente a baja presin donde no hay extendido.
Cubra el extendido con alcohol cido al 3% y sosteniendo la lmina por el extremo

numerado, efecte el movimiento de vaivn hasta decolorarla.
Cuando el alcohol cido adquiera color rojizo derrmelo.
Decolore nuevamente si las partes ms densas del extendido presentan un tinte rosado.
Enjuague con agua corriente a baja presin.
Cubra el extendido con azul de metileno durante 1 a 1 y minutos.
Lave con agua a baja presin.

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
123
Coloque las lminas en la gradilla, revise su numeracin y djelas secar a temperatura

ambiente.
Una vez procesadas las muestras, archive la copia de los resultados y antelos en el
libro de registro correspondiente.
Normas de Seguridad al Terminar el Trabajo

- Descarte las muestras cuando el bacterilogo realice la lectura e informe el resultado.
-
Recoja todo el material utilizado, el material desechable y contaminado se lleva a

incinerar o al autoclave.
El material no desechable esterilcelo inmediatamente.
Limpie la mesa de trabajo con una gasa o algodn humedecido con desinfectante.
Lvese cuidadosamente los antebrazos y manos con agua y jabn, cepillando

especialmente las uas y la parte inferior del dorso de la mano.
Haga uso de pequeos recortes de papel para abrir y cerrar la llave del agua, para no
contaminarla.

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
124
GUA PARA EL ENVI DE MUESTRAS AL LABORATORIO DE LA

DIRECCIN GENERAL DE MEDICINA LEGAL - BAGUE
BURUNDANGA:
Muestra orina. 50 ml de orina con fluoruro de Sodio al 1%, como preservativo. 0.2 ml de
fluoruro de Sodio por 4.5. ml orina. Post Morten igual. Mantener la muestra refrigerada
hasta su envo.
LQUIDOS:
Refrigerados, sin preservativos. Si es agua, 500 ml o un litro, o lo disponible. En caso de
otros lquidos, enviarlos en su envase original o en frasco estril de boca ancha. No usar
frasco plstico si se solicitan pesticidas.
ALIMENTOS:
Muestras lquidas, 500 ml o lo disponible. Muestras slidas, 250 gr. o lo disponible;
preferible enviar en el envase original. Mantener la muestra refrigerada hasta su envo. Si
son residuos de comida, especificar el tiempo transcurrido entre la ingestin y el envo. Si
quedan alimentos sin preparar enviarlos tambin para su anlisis.
PLANTAS:
Muestra representativa, sin humedad, en bolsa de polietileno selladas al calor. Si es posible
enviar flores, frutos, hojas, etc.

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
125
ESPERMATOZOIDES:
Enviar un escobilln con frotis vaginal secado a temperatura ambiente (sin solucin salina).
Dos frotis para la bsqueda de espermatozoides. Los frotis se dejan secar y se fijan al calor,
se empacan entre dos cartones para evitar ruptura de las lminas. Los frotis deben ser
tomados por el mdico o la bacterilogo, de fondo de saco, cuello uterino, o frotis anal
(para la vctima). Para el agresor se toma muestra del glande.
PARA MANCHAS QUE CONTENGAN SEMEN:

Se dejan secar a la temperatura ambiente, se empacan individualmente doblando la prenda
sobre la mancha.
CONTAMINACIN VENREA:
Se toman dos frotis: Vaginal y anal en placas de vidrio (inmediatamente despus de la
violacin y ocho das despus), cuando se trate de Gonococo. En caso de solicitar cultivo,
utilizar medio de Thayer Marti.
SUERO PARA SEROLOGIA DE: VDRL:

Se toma inmediatamente despus de la violacin y un mes despus.
HIV:
Se toma inmediatamente despus de la violacin, tres semanas despus y tres meses
despus.
PRUEBA DE EMBARAZO:
Se realiza en sangre, suero u orina inmediatamente despus de la violacin y un mes
despus de ella.

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
126
PELOS:
Muestra obtenida por arrancado, enviarla en papel o bolsa plstica, Jams utilizar
material adhesivo. Nombre a quien pertenece, sitio donde fue hallado. Favor enviar
contramuestra del sospechoso para fines comparativos.
MANCHAS DE SANGRE DE ELEMENTOS TRANSPORTABLES:

Son todos aquellos elementos que por su tamao y bajo peso pueden enviarse completos
para examinar manchas tiles. Deben dejarse secar a temperatura ambiente y enviar al
menor tiempo posible.
Empacar en forma individual cada evidencia, cuidar que la
superficie manchada no est en contacto directo con la envoltura. Si se trata de prendas se

proteger la mancha con un papel por cada cara y fijado con alfileres. En caso de armas de
fuego o cortopunzantes donde la superficie no es absorbente y la mancha podra
desprenderse, utilizar un colchn de algodn y embalar entre cartones inmovilizando el
arma. Nunca utilizar material adhesivo o papel peridico impreso.
MANCHAS DE SANGRE TOMADAS DIRECTAMENTE DEL INDIVIDUO:

En ocasiones no es posible enviar un detenido hasta el laboratorio para hemoclasificar. En
este caso fabricar una mancha. Dejar secar la mancha en una tela a temperatura ambiente,
doblar la tela sobre la mancha, empacar en bolsa de papel y enviar.
MANCHAS DE SANGRE DE ELEMENTOS NO TRANSPORTABLES:
Son elementos que por sus dimensiones no se pueden transportar (paredes, pisos, puertas,
etc.). Estas manchas se retiran por dos mtodos: por raspado o por limpieza con un hisopo
de algodn humedecido en solucin salina( de pocillo tintero con agua ms una pizca de
sal de cocina), dejar secar y enviar en sobre de carta sellado.
ALCOHOLEMIA:
Muestra de sangre (puncin venosa), asepsia SIN ALCOHOL, anticoagulante citrato de
sodio al 3.8%: 0.5 ml de anticoagulante para 4.5 ml de sangre, se adiciona 0.2 ml de

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
127
fluoruro de sodio al 1% por 4.5 ml de sangre como preservativo, se guarda en nevera hasta
su envo, si es posible tambin refrigerada. Sangre sin hemlisis. Post Morten: Muestra de
sangre tomada de vena femoral con fluoruro de sodio al 1%. 20 ml de sangre y 0.8 ml de
fluoruro de sodio al 1%. Los tubos donde se toman las muestras de sangre deben ser
hermticamente tapados para evitar prdida de sustancias voltiles. Muestras coaguladas o
putrefactas no son aptas para el anlisis.
OJO:
La toma de sangre venosa para determinar alcoholemia se recomienda en los siguientes
casos:
1.
En ausencia de nistagmus postural, pero

con presencia de otros signos neurolgicos y de aliento alcohlico.
2. En sujetos politraumatizados a quienes no sea posible realizar el examen clnico.

2.
En sujetos sin aliento alcohlico, pero con

signos clnicos del rea neurolgica a quienes adems, debe tomrseles orina para
investigacin de psicofrmacos y efectuarles un examen neurolgico completo.
A criterio del perito mdico, ante la duda
3.
en los resultados de la valoracin de los signos clnicos.

4.
Por
solicitud
expresa
competente.
ROTULACION:
Este procedimiento se utiliza en todas las muestras que se vayan a enviar:
Nombre de la vctima o sospechoso
Sexo
Edad
Fecha de la toma de la muestra
Hora de toma de muestra
Copia o fotocopia del oficio petitorio
No. de la necropsia (si es un cadver)
de
autoridad

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
128
Firma y sello de la autoridad remitente

Identificacin del examinado (cdula de ciudadana o huellas dactilares)
Hora del accidente.
NOTA: En el caso de alcoholemia debe tomarse muestra tanto a la vctima como al

victimario.
El fluoruro de sodio lo provee medicina legal Seccional Ibagu.
Las casas comerciales venden tubos especiales para la toma de la alcoholemia.
OJO:..
La toma de muestras en medicina legal es competencia del medico legista de turno, el
laboratorio puede ser un apoyo en ciertos procedimientos.
La custodia, embalaje y envo de muestras a medicina legal es competencia y
responsabilidad del mdico legista quien realizo el procedimiento.

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
129
COLORACIN DE ALBERT
Se realiza a solicitud del mdico cuando se sospecha Difteria.
Equipo
Reloj.
Materiales
Reactivos
Colorante de Albert.

- Cubra la preparacin con el colorante de Albert y djelo actuar por un minuto.
-
Derrame el colorante, tomando la lmina por uno de los extremos o inclinndola hacia
adelante.
Lave dejando caer agua corriente a baja presin donde no hay extendido.
Deje secar la placa a temperatura ambiente.
Lleve las placas al sitio indicado para su lectura microscpica.
NOTA:
Observe al microscopio bacilos de color azul y los grnulos al interior del cuerpo de color
rojo.

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
130
COLORACIN DE GRAM
La coloracin de GRAM es la ms importante en Bacteriologa. Adecuadamente realizada
permite en la mayora de los casos establecer un diagnstico presuntivo o la orientacin
inicial del microorganismo presente en la muestra en estudio.
Equipo
Reloj.
Materiales
Reactivos
Solucin de cristal violeta.
Solucin Iodo-iodurada de lugol.

Solucin de safranina.
Agua.
Alcohol etlico al 95%.
Procedimiento
- Coloque las lminas sobre las varillas de coloracin.
-
Cubra la preparacin con solucin de cristal violeta y deje actuar por un minuto.
Derrame el cristal violeta, tomando la lmina por un lado de los extremos e inclinndola
hacia adelante.
Lave dejando caer agua corriente a baja presin donde no hay extendido.
Cubra la preparacin con Lugo y deje actuar por un minuto.
Enjuague con agua corriente a baja presin.
Decolore con alcohol etlico o alcohol acetona durante tres segundos hasta que
desaparezca el color azul.
Lave con agua corriente a baja presin.
Cubra la preparacin con solucin de safranina y deje actuar por minuto.
Lave con agua corriente a baja presin.
Deje secar la placa a temperatura ambiente.
Lleve las placas al sitio indicado para su observacin microscpica.

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
131
CAUSAS DE ERROR EN LA COLORACIN GRAM

-
Frotis muy gruesos. Se decoloran insuficientemente, el material aparecer de un color

azul a prpura.
Frotis muy delgado. Se decoloran excesivamente y el material aparecer de color rojo.
Fijacin al calor por la cara de la lmina donde est el material a examinar ocasionando
el deterioro o prdida del material.

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
132
REMISIN DE MUESTRAS PARA MICOLOGIA

La remisin de muestras de piel, uas y pelo, a un Laboratorio de Micologa debe realizarse
colocando las muestras en sobre de papel o cajas de Petri, o enviar en recipientes cerrados,
debido a que la humedad permite que los hongos no patgenos se multipliquen.
El procedimiento de toma de muestras, colocacin y cultivos esta descrito en el manual

Diagnstico micologico por examen directo.

ROVIRA TOLIMA
NIT 809005719-4
133
BIBLIOGRAFIA
VELASQUEZ DE V GLORIA, MD , Normas de Bioseguridad en el laboratorio de

Parasitologa.
MATTAR DE NAJLA, MD, ABBOTT, Apuntes sobre Hematologa.
OMS-1992, Normas sobre Bioseguridad.
INSTITUTO NACIONAL DE SALUD-1986 , Manual de procedimientos Qumica Clnica

y Orinas.
INSTITUTO NACIONAL DE SALUD-1991 , Manual de Garanta de Calidad.
INSTITUTO NACIONAL DE SALUD-1987 ,
Manual de procedimientos -TBC -
LEPRA.
INSTITUTO NACIONAL DE SALUD-1988, Manual de procedimientos Microbiologa

Mdica.
HERNANDEZ DE DUQUE MARLENY, BACTERIOLOGA M,S,P., Manual de
procedimientos, el laboratorio en la fase preanlitica.
ORGANIZACION PARAMERICANA DE LA SALUD-1983, Manual de Tcnicas bsicas

para un laboratorio de salud

Microsoft Word - Protocolos de Laboratorio

Uploaded by

Document Information

Copyright

Available Formats

Share this document

Share or Embed Document

Sharing Options

Did you find this document useful?

Is this content inappropriate?

Copyright:

Available Formats

Microsoft Word - Protocolos de Laboratorio

Uploaded by

Copyright:

Available Formats

LABORATORIO

EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO

NORMAS DE BIOSEGURIDAD .....................................................................................................................12

EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO

Complicaciones de la Venipuntura ............................................................................................................25

EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO

EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO

Condiciones de la Muestra ............................................................................................................................53

EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO

EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO

Precauciones en el Uso de las Tiras Reactivas ..........................................................................................79

EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO

Reaccin Negativa: ................................................................................................................................95

EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO

1. ndice Bacilar (IB) ...........................................................................................................................117

EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO

CARACTERSTICAS DEL SERVICIO.

EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO

de emergencias, los instructivos que se realizan son los correspondientes al nivel de

PRINCIPALES RAZONES PARA UTILIZAR SERVICIOS DEL

EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO

El trabajador de la salud est permanentemente expuesto al riesgo de infectarse con los

EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO

Designe y marque las reas dedicadas al manejo de muestras.

No coloque objetos personales (gafas, bolsos, libros) sobre la mesa de trabajo.

Nunca los guantes son un sustituto del lavado de manos.

5. Mantenga el laboratorio limpio y ordenado, evitando la presencia de equipo y material

EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO

7. Las agujas destruyalas en el equipo disponible (incinerador) en el laboratorio y

No vuelva a tapar las agujas usadas ni las desacople de las jeringas.

- Las batas y otras prendas protectoras contaminadas se depositarn en un recipiente

EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO

Antes de empezar el proceso asegrese de disponer de los siguientes elementos:

Use equipo personal de proteccin: delantal, guantes.

Seleccione el material para ser lavado.

Derrame los residuos de las muestras y los reactivos antes de lavar.

Deje el material en remojo.

Vierta abundante agua.

Lavado del Material en Hematologa

EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO

EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO

Lavado del Material en Parasitologa

EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO

Proceda como en el lavado de material para parasitologa.

Escoja al azar una pieza de la cristalera.

EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO

Preparacin de la Mezcla Sulfocrmica

Calor hmedo, autoclave, ebullicin.

EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO

EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO

EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO

TOMA DE MUESTRAS DE SANGRE

EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO

TOMA DE MUESTRAS EN HEMATOLOGA

EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO

EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO

EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO

Deje coagular la sangre como mnimo 20 minutos a temperatura ambiente o de 5 a 10

Informe, Entrega de Resultados

Omitir datos en la identificacin de la muestra.

EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO

Por muestra mal tomada.

ABSTNGASE DE INFORMAR AL PACIENTE ACERCA DE SU ESTADO DE

Archive los exmenes por orden alfabtico de acuerdo al apellido.