Identificacin de los aminocidos por reacciones qumicas de sus

cadenas laterales.

RESUMEN

Sergio Alejandro Castro lzate1

Los aminocidos son los monmeros de las

protenas y le confieren a estas sus propiedades
especiales, todos los aminocidos tienen una
estructura
bsica
y
se
diferencian,
principalmente, por los grupos funcionales de su
cadena lateral. Este informe tiene como objetivo
reconocer,
cualitativamente,
algunos
aminocidos por medio de reacciones
colorimtricas. Por medio de diez reacciones
colorimtricas;
ninhidrina,
Xantoproteica,
Milln, Hopkins-Cole, Sakaguchi, nitroprusiato
de sodio, acetato de plomo, Ehrlich, Pauly y
Biuret se analizaron una serie de patrones,
soluciones problema y una solucin diluida 1:6
de clara de huevo, se pudieron determinar una
serie de aminocidos en las soluciones problema
como arginina y
tirosina; as como los
aminocidos que componen la clara de huevo
entre estos triptfano, tirosina, arginina y
cistena. Es posible determinar la presencia de
una serie de aminocidos por medio de
reacciones cualitativas colorimtricas.

PALABRAS

CLAVES:
Aminocidos,
pruebas colorimtricas, composicin huevo,
identificacin aminocidos.
ABSTRACT
Amino acids are the monomers of proteins and
give them its principal properties, all amino
acids have a basic structure an differentiate from
one another, mainly, by the functional groups of
their side chain. This work wants to recognize,
qualitatively, some amino acids with colorimetric
reactions. Using ten colorimetric reactions;
ninhidrine, Xantoproteic, Milln, Hopkins-Cole,
Sakaguchi, nitroprusiate, lead acetate, Ehrlich, Pauly y
Biuret a series of controls were analyzed, as well as
some problem solutions and a diluted 1:6 solution of
egg. It could be determined a series of amino acids in
the problem solutions such as arginine and tyrosine, as
well as the amino acids that are contained in eggs such
as tryptophan, tyrosine, arginine and cysteine. It is
possible to determinate the presence or absence of
amino acids using colorimetric tests.

Particular, 20152180016.
Universidad Distrital Francisco Jos de Caldas.
Facultad de Medio Ambiente y Recursos Naturales,
Bogot, Colombia.
E-mail: sacastroa@correo.udistrital.edu.co
Andrs Morales Dussan2
2

Particular, 20152180048.
Universidad Distrital Francisco Jos de Caldas.
Facultad de Medio Ambiente y Recursos Naturales,
Bogot, Colombia.
E-mail: moralesdussan@correo.udistrital.edu.co

KEYWORDS: Amino acids, colorimetric tests,

egg composition, identification of amino acids.

INTRODUCCIN.
Las protenas se encuentran en todos los
organismos vivos, son de muchos tipos
diferentes y desempean funciones
biolgicas distintas. La queratina de la piel
y uas de los dedos, la fibrina de la seda y
las telaraas, y el estimado de 50000 a
70000 enzimas que catalizan las
reacciones biolgicas en nuestros cuerpos
son todas protenas. (McMurry J., 2008)
Independientemente de su funcin, todas
las protenas estn construidas de muchas
unidades de aminocidos unidos entre s
en una cadena larga. (McMurry J., 2008)
Los aminocidos, como su nombre lo
implica, son bifuncionales. Contienen un
grupo amino bsico y un grupo carboxilo
cido. (McMurry J., 2008)

Fig. 1. Alanina, un aminocido. (McMurry J.,

2008)

Su valor como bloques de construccin

para formar protenas se deriva del hecho
de que los aminocidos pueden asociarse
entre s en cadenas largas formando
enlaces amida entre el NH2 de un
aminocido y el CO2H de otro. (McMurry J.,
2008)
Los aminocidos se ligan entre s, como lo
hacen los monmeros de los polisacridos
y lpidos (Audesirk T., et al, 2013),

expulsando una molcula de agua. Se

desprende un OH del grupo carboxilo del
primer aminocido y un H del grupo
amino del siguiente. El enlace formado
entre los tomos C y N de los grupos
carboxilo y amino se llama enlace
peptdico. (Fried G., 1990)
Un dipptido es una molcula formada por
dos aminocidos unidos por un enlace
peptdico. Un tripptido tiene tres
aminocidos unidos por dos enlaces
peptdicos, un tetrapptido tiene cuatro
aminocidos, y as sucesivamente. Los
pptidos que tienen ms de 30 a 50
aminocidos son polipptidos. Las
protenas son polipptidos con alguna
funcin biolgica. (Carey F., 2006)
Todos son -aminocidos, lo que significa
que el grupo amino en cada uno es un
sustituyente en el tomo de carbono,
siguiente al grupo carbonilo. Diecinueve de
los 20 aminocidos son aminas primarias,
NH2, y nicamente difieren en la naturaleza
del sustituyente unido al carbono, llamado
cadena lateral. (McMurry J., 2008)

asociadas con las sales. Tienen momentos

dipolares grandes, son solubles en agua
pero insolubles en hidrocarburos y son
sustancias cristalinas con puntos de fusin
relativamente altos. (McMurry J., 2008)
Adems, los aminocidos son anfteros,
ya que pueden reaccionar como cidos o
como bases, dependiendo de las
circunstancias. En disolucin cida acuosa,
un zwitterion de aminocido es una base
que acepta un protn para producir un
catin; en disolucin bsica acuosa, el
zwitterion es un cido que pierde un protn
para formar un anin. Ntese que es el
carboxilato, CO2 el que acta como el sitio
bsico y acepta un protn en la disolucin
cida, y es el catin amonio, NH3, el que
acta como el sitio cido y dona un protn
en la disolucin bsica. (McMurry J., 2008)
Los aminocidos soportan los cambios de
acidez y alcalinidad y por lo tanto son
importantes amortiguadores biolgicos.
(Solomon P., et al, 2013)

Fig. 3. Aminocido con pH de 7 (Solomon P.,

2013)

Fig. 2. Estructura de los aminocidos (Audesirk

T, et al, 2013)

Los aminocidos existen en disolucin

acuosa principalmente en la forma de un
ion dipolar, o zwitterion (del alemn
zwitter, que significa hbrido). (McMurry
J., 2008)
Los zwitteriones de los aminocidos son
sales internas y, por lo tanto, tienen
muchas de las propiedades fsicas

Los 20 aminocidos comunes pueden

clasificarse como neutros, cidos o
bsicos, dependiendo de la estructura de
sus cadenas laterales. Quince de los veinte
tienen cadenas laterales neutras, dos
(cido asprtico y cido glutmico) tienen
una funcin extra de cido carboxlico en
sus cadenas laterales, y tres (lisina,
arginina e histidina) tienen grupos aminos
bsicos en sus cadenas laterales.
(McMurry J., 2008)
Sin embargo, la cistena (un tiol) y la
tirosina (un fenol), es usual clasificarlos

como aminocidos neutros, tienen cadenas

laterales dbilmente cidas que pueden
desprotonarse
en
una
disolucin
fuertemente bsica. (McMurry J., 2008)
Entre los aminocidos con cadenas
laterales no polares, encontramos: La
Glicina es el aminocido ms pequeo,
porque no tiene cadena lateral. El principal
servicio que ofrece es a la cadena misma
de polipptidos. Puede aadir longitud y
flexibilidad a un poli pptido, sin sacrificar
la resistencia ni tener por s mismo
demandas espaciales. (Carey F., 2006)
Despus de la glicina, los siguientes cuatro
aminocidos tienen grupos alquilo (R)
como cadena lateral: la Alanina (R =
metilo), Valina (R = isopropilo), leucina (R
= isobutilo) y la isoleucina (R = sec-butilo).
Todas son cadenas laterales hidrofbicas,
y aunque se parecen electrnicamente, su
tamao es diferente. La Alanina es un poco
ms grande que la Glicina, la Valina un
poco ms grande que la Alanina, la
Leucina un poco ms grande que la Valina,
y la Isoleucina es algo ms esfrica que la
Leucina. (Carey F., 2006)
En comparacin con ellas, la presencia de
azufre en su cadena lateral hace que la
Metionina sea algo ms polarizable, y
aumenta su capacidad de participar en
fuerzas de dispersin. (Carey F., 2006)
La Prolina es relativamente compacta y
tiene flexibilidad conformacional limitada
porque su cadena lateral es cclica.
Adems, las amidas de la prolina no tienen
enlaces N-H, as que no pueden formar
puentes de hidrgeno. En consecuencia, la
presencia de prolina afecta la forma de una
cadena peptdica, ms que la mayora de
los dems aminocidos. (Carey F., 2006)
La fenilalanina y el triptfano poseen
cadenas laterales que contienen anillos
aromticos, grandes e hidrofbicos.
Adems de ser mayor que la fenilalanina,

el triptfano tiene un anillo aromtico ms

rico en electrones, y es ms polarizable.
Su funcin es ms especializada, y abunda
menos en las protenas que la mayora de
los dems aminocidos. (Carey F., 2006)
En cuanto a los aminocidos con cadenas
laterales polares, pero no ionizadas la
serina es el menor; no es mucho ms
grande que la Alanina. Con una cadena
lateral -CH2OH, participa bien en los
puentes de hidrgeno, y con frecuencia se
presenta en regiones de un pptido que
estn expuestas al agua. La treonina tiene
un grupo metilo en lugar de uno de los
hidrgenos del grupo -CH2OH de la serina,
que obstaculiza estricamente al grupo OH
y lo hace menos efectivo en la formacin
de puentes de hidrgeno. (Carey F., 2006)
Como p-hidroxiderivado de la fenilalanina,
la tirosina tiene propiedades parecidas a
ella, y adems la capacidad de formar
puentes de hidrgeno donde interviene un
grupo fenlico -OH. (Carey F., 2006)
La cistena se relaciona con la serina
porque su cadena lateral es CH 2SH y no
CH2OH. La cantidad de cistena en una
protena suele ser relativamente pequea,
pero su efecto sobre su forma
tridimensional es apreciable. La oxidacin
de dos cistenas convierte sus cadenas
laterales en un puente CH2S-SCH2 - entre
ellas. Esto une entre s a dos aminocidos
que con frecuencia estn alejados, y ayuda
a guiar el doblez de la protena para tener
una forma especfica. (Carey F., 2006)
La asparagina y la glutamina son amidas.
Las cadenas laterales de ambas terminan
en O=CNH2, y difieren slo por un grupo
CH2. Las funciones amida son bastante
polares, e interaccionan fuertemente con
molculas de agua mediante puentes de
hidrgeno. Al igual que la serina, la
asparagina y la glutamina se encuentran
con frecuencia en las regiones de un

pptido que estn en contacto con agua.

(Carey F., 2006)
Los aminocidos tienen las reacciones
caractersticas de sus grupos funcionales
amino y cido carboxlico. Una reaccin
tpica del grupo amino es la acilacin. La
formacin de steres es una reaccin
tpica del grupo carboxilo. Se puede
detectar la presencia de aminocidos por
la formacin de un color prpura al
tratarlos con ninhidrina. El mismo
compuesto causante del color prpura se
forma con todos los aminocidos en los
que el grupo -amino es primario. La
prolina, donde el grupo -amino es
secundario,
produce
un
compuesto
anaranjado al reaccionar con la ninhidrina
(Carey F., 2006)
En este informe se busca reconocer
algunos aminocidos por medio de
reacciones
cualitativas
colorimtricas.
Adems de demostrar la presencia de
grupos funcionales orgnicos en la cadena
lateral de algunos aminocidos e identificar
en una marcha analtica los aminocidos
presentes en una solucin problema.
MATERIALES Y MTODOS.
En cada prueba se utiliz un aminocido
control, una solucin problema y una
solucin de clara de huevo 1:6 con agua
destilada. A excepcin de la prueba de
acetato de plomo para aminocidos
azufrados donde no se utiliz solucin
problema.
Reaccin de Ninhidrina.
Se utiliz un tubo de ensayo para calentar
suavemente 1 ml de cido asprtico o de
serina, se realiz el mismo procedimiento
para la solucin problema y la solucin de
clara de huevo. A cada tubo se agreg 0.5
ml de la solucin de ninhidrina y se calent
a bao de mara por 10 minutos.

Reaccin Xantoproteica.
Se calentaron, hasta que hirvieron, 2 ml de
tirosina, solucin problema y solucin de
clara de huevo en 2 ml de cido ntrico
concentrado.
Luego
se
agreg
cuidadosamente gota a gota hidrxido de
sodio al 40% hasta alcalinizar.
Reaccin de Milln.
Se agregaron en tres tubos de ensayo por
separado 3 ml de tirosina, solucin
problema y solucin de clara huevo,
respectivamente. Luego se aadieron 5
gotas de Millon a cada uno de los tubos,
observando que no quedara reactivo en las
paredes, se calent en un bao de agua
hirviendo durante 10 minutos y luego se
dej enfriar. Despus se agregaron 5 gotas
de nitrito de sodio al 1%.
Reaccin del cido glicoxlico.
A 3 ml de solucin de triptfano; solucin
problema y solucin clara de huevo, se
adicionaron 2 ml de reactivo de Hopkins
Cole, se mezcl bien y se agreg
cuidadosamente, por las paredes de los
tubos, 1 ml de cido sulfrico concentrado.
Reaccin de Sakaguchi.
Se enfri en un bao con hielo tres tubos
de ensayo que contenan 5 ml de solucin
de arginina, solucin problema y solucin
de clara de huevo respectivamente. Se
aadi a cada uno 1 ml de hidrxido de
sodio al 10%, 1 ml de -naftol al 0.5%, se
mezcl y se les puso en bao de hielo
durante 3 minutos. Luego se aadieron de
10 a 20 gotas de hipoclorito de sodio, se
agit bien y despus de 20 segundos se
aadi 1 ml de urea y se mezcl.
Reaccin de nitroprusiato.

Se utilizaron 3 tubos de ensayo limpios y

secos, agregando 2 ml de cistena,
solucin problema y solucin de clara de
huevo respectivamente. Se adicion a
cada uno 0.5 ml de nitroprusiato de sodio.
Se mezcl bien y se aadi a cada uno 0.5
ml de NH4OH, por ltimo se agitaron los
tubos de ensayo.
Prueba del acetato de plomo.
Se calentaron 2 ml de cistena y solucin
de clara de huevo con 2 ml de solucin de
hidrxido de sodio al 40%, luego se
aadieron 10 gotas de acetato de plomo al
10%, se calent nuevamente hasta que se
dio el oscurecimiento de los tubos de
ensayo.
Prueba de Ehrlich.
Se mezcl 1 ml de cido sulfanlico con 1
ml de nitrito de sodio al 0.5% en tres tubos
de ensayo, se dej reposar la mezcla
durante 15 minutos. Luego se agreg a
cada tubo 1 ml de tirosina, solucin
problema y solucin de clara de huevo
respectivamente. Por ltimo se alcaliniz
con una gota de hidrxido de amonio al
2%.
Prueba de Pauly.
Se mezcl 1 ml de cido sulfanlico con 2
ml de triptfano, solucin problema y clara
de huevo respectivamente. Se dejaron
enfriar en hielo durante 2 minutos y se
agreg 1 ml de solucin de nitrito de sodio
(NaNO2) a cada uno, se los dej enfriar
durante 3 minutos. Por ltimo se alcalinizo
aadiendo 2 ml de Na2CO3 a cada uno de
los tubos.
Prueba de Biuret.
A 2 ml de solucin de problema se
aadieron 3 ml del reactivo de Biuret, se
mezcl y se dej calentar a 37 C durante
10 minutos. Por ltimo, se dej enfriar.

RESULTADOS.
Reaccin de Ninhidrina.
Compuesto.
Serina.
Solucin Problema.
Solucin clara de
huevo.

Resultado.
-

Tabla 1. Resultados para reaccin con

ninhidrina.

Reaccin Xantoproteica.
Compuesto.
Triptfano.
Solucin Problema.
Solucin clara de
huevo.

Resultado.
+++
+++

Tabla 2. Resultados para reaccin

xantropoteica.

Reaccin de Milln.
Compuesto.
Tirosina.
Solucin Problema.
Solucin clara de
huevo.

Resultado.
+++
+++

Tabla 3. Resultados para reaccin de Milln.

Reaccin del cido glicoxlico.

Compuesto.
Triptfano.
Solucin Problema.
Solucin clara de
huevo.

Resultado.
-

Tabla 4. Resultados para reaccin de Milln.

Reaccin de Sakaguchi.
Compuesto.
Arginina.
Solucin Problema.

Resultado.
+
++

Solucin clara de
huevo.

+++

Tabla 5. Resultados para reaccin de

Sakaguchi.

Reaccin de nitroprusiato de sodio.

Compuesto.
Cistena.
Solucin Problema.
Solucin clara de
huevo.

Resultado.
+++
-

Tabla 6. Resultados para reaccin de

nitroprusiato de sodio.

Reaccin de acetato de plomo.

Compuesto.
Cistena.
Solucin clara de
huevo.

Resultado.
+++
+++

ANLISIS DE RESULTADOS.
Reaccin de Ninhidrina.
Para la ninhidrina el resultado fue negativo
para el patrn y para las dos soluciones.
Esto contradice a la teora presentado por
Carey F., (2006) ya que tanto el patrn
como la solucin de huevo contienen aminocidos capaces de reaccionar con
est, formando dixido de carbono,
amoniaco y un aldehdo.
Las posibles causas de este resultado son
un error experimental o la contaminacin
de la ninhidrina que no le permiti
reaccionar con la cadena lateral del
aminocido estudiado.
Reaccin Xantoproteica.

Tabla 7. Resultados para reaccin de acetato

de plomo.

Reaccin de Ehrlich.
Compuesto.
Tirosina.
Solucin Problema.
Solucin clara de
huevo.

Tabla 10. Resultados para reaccin de Biuret.

Resultado.
+++
+++
+++

La reaccin Xantoproteica present un

resultado positivo para el triptfano y la
solucin de clara de huevo, pero no para la
solucin problema.
Se confirma lo dicho en la teora ya que el
huevo contiene en su composicin
triptfano segn lo reportado por Carbajal
A., (2016).

Tabla 8. Resultados para reaccin de Ehrlich.

Reaccin de Pauly.
Compuesto.
Triptfano.
Solucin Problema.
Solucin clara de
huevo.

Resultado.
+++
+++
+++

Adems tanto el triptfano del huevo como

el patrn presentan un ncleo aromtico
que reacciona para formar derivados nitro.

Tabla 9. Resultados para reaccin de Pauly.

Reaccin de Biuret.
Compuesto.
Cistena.
Solucin Problema.
Solucin clara de
huevo.

Resultado.
+
+
+++

Fig. 4. Estructura del triptfano. (McMurry J.,

2008)

Reaccin de Milln.
La reaccin de Milln present un
resultado positivo para el patrn tirosina y

para la solucin de clara de huevo.

Carbajal A., (2016) confirma que el huevo
contiene en su composicin el aminocido
tirosina que forma parte de las protenas
corporales.
Tambin, McMurry J., (2008) confirma que
la tirosina reacciona con el reactivo de
Milln debido a la presencia de anillos
fenlicos.

Fig. 5. Estructura de la tirosina, con su anillo

fenlico en la cadena R. (McMurry J., 2008)

Adems esta prueba permite determinar

que la solucin problema utilizada presenta
Arginina.
Es importante remarcar que el resultado
ms prximo a un color rojo intenso fue el
del huevo, seguido por la solucin
problema y por ltimo el patrn esto se
pudo deber a la concentracin de arginina
en el huevo y en la sustancia problema.
Carbajal A., (2016) reporta que 100 g de
huevo pueden contener hasta 755 mg de
arginina.
Se confirma entonces que el grupo
guanidino de la arginina reacciona para
formar compuestos de color rojo.

Reaccin del cido glicoxlico.

Para la reaccin de Hopkins-Cole o cido
glicoxlico se present un resultado
negativo tanto para el patrn como para las
dos soluciones estudiadas, sin embargo
esto contradice a lo reportado por Carbajal
A., (2016) ya que el huevo, como se
confirm en la prueba Xantoproteica, si
contiene triptfano.
Estos resultados pudieron deberse a un
error experimental de tipo sistemtico o a
la composicin de los reactivos utilizados
as como la influencia del cido sulfrico
utilizado en el pH.
Reaccin de Sakaguchi.
La reaccin de Sakaguchi present un
resultado positivo para los 3 compuestos
estudiados. Confirmando la teora, ya que
el huevo segn Carvajal A., (2016)
presenta un contenido de arginina, un
sustrato en la sntesis de xido ntrico y
creatina, adems necesario para la sntesis
de urea.

Fig. 6. Estructura del aminocido arginina

(McMurry J., 2008)

Reaccin de nitroprusiato de sodio.

La reaccin de nitroprusiato de sodio slo
presento un resultado positivo para el
patrn de cistena, sin embargo segn
Carbajal A., (2016) el huevo contiene
cistena dentro de su estructura, aunque a
una concentracin baja comparada con los
dems aminocidos, esta concentracin es
de 236 mg por cada 100 g de huevo
(Carbajal A., 2016)
El resultado entonces se puede deber a un
error experimental o a la concentracin de
cistena en la solucin de clara de huevo.
Reaccin de acetato de plomo (para
aminocidos azufrados)
La reaccin de acetato de plomo slo se
realiz para el patrn cistena y para la
solucin de clara de huevo. El resultado
fue positivo para estos dos, confirmando lo
reportado por Carbajal A., (2016) y Carey

F., (2006) en cuanto a la composicin del

huevo y a la confirmacin estructural del
aminocido cistena.
Carey F., (2006) tambin reporta que la
cistena es el aminocido responsable del
plegamiento
en
algunas
protenas
conocidas como protenas terciarias.
En consecuencia la formacin del
precipitado al tratar estos compuestos con
acetato de plomo es una consecuencia de
su conformacin estructural, que se puede
observar en la figura 7.

Fig. 7. Estructura del aminocido cistena.

(McMurry J., 2008)

Reaccin de Ehrlich.
La reaccin de Ehrlich se present positiva
para los tres compuestos estudiados,
indicando la presencia de tirosina o
histidina, como se observ en la prueba de
Milln y segn lo reportado por Carbajal A.,
(2016) el huevo contiene dentro de su
estructura tirosina.
Esta prueba tambin permiti determinar la
presencia de tirosina en la sustancia
problema.
Reaccin de Pauly.
La reaccin de Pauly present sustancias
coloreadas para cada uno de los reactivos,
es decir fue positiva para cada uno de
ellos, presentndose un color amarillo, rojo
y naranja para la solucin patrn, solucin
problema y solucin de clara de huevo
respectivamente.
Este resultado es consecuencia directa de
la conformacin estructural de los
aminocidos ya que la prueba de Pauly

acta sobre las aminas. Una caracterstica

esencial de los aminocidos es la
presencia de un grupo amino y uno
carboxilo segn McMurry J., (2008), Carey
F., (2006) Fried G., (1990) y Solomon P., et
al (2013).
Reaccin de Biuret.
Para la reaccin de Biuret se present un
resultado positivo para el patrn y las dos
soluciones estudiadas. Ya que el reactivo
de Biuret acta sobre el enlace peptdico
esto confirma lo reportado por McMurry J.,
(2008) y Carey F., (2006).
Para el patrn es poco probable que la
reaccin se d fuertemente debido a la
presencia de un solo aminocido, sin
embargo es de esperarse que el huevo
reaccione con una mayor intensidad
debido a la gran cantidad de enlaces
peptdicos que se presentan en su
conformacin.
Tambin se pudo detectar que la solucin
problema presenta un agregado de
aminocidos, probablemente un pptido o
protena de alguna clase o conformacin.
En consecuencia la muestra de huevo
utilizada contiene una composicin de
aminocidos como triptfano, tirosina,
arginina y cistena.
CONCLUSIONES.

Es posible reconocer algunos

aminocidos
con
reacciones
cualitativas colorimtricas y los
mtodos adecuados.
Algunos aminocidos presentan en
su cadena lateral grupos funcionales
orgnicos como la arginina, la
tirosina y el triptfano.
Es
posible
identificar
los
aminocidos presentes en una

10

solucin problema por medio de

pruebas cualitativas.
CUESTIONARIO.
1. Consultar otras reacciones con
las cuales se puedan identificar
aminocidos por la presencia de
grupos funcionales en el radical.

Mtodo de Lowry.

constituyente del reactivo de FolinCiocalteau

es
el
cido
fosfomolibdotngstico,
de
color
amarillo, que al ser reducido por los
grupos fenlicos da lugar a un
complejo de color azul intenso.
(O.H. Lowry, N.J. Rosebrough, A.L.
Farr y R.J. Randall. J. Biol., 1951)

2. Consultar
las
ecuaciones
qumicas de las reacciones que
no aparecen en la gua.

Mtodo colorimtrico de valoracin

cuantitativa de las protenas. A la
muestra se aade un reactivo que
forma un complejo coloreado con
los protenas, siendo la intensidad
de
color
proporcional
a
la
concentracin de protenas, segn
la ley de Lambert-Beer A= .l.c Este
mtodo consta de dos etapas:
1) Los iones Cu2+, en medio
alcalino, se unen a las protenas
formando complejos con los tomos
de nitrgeno de los enlaces
peptdicos. Estos complejos Cu2+protena tienen un color azul claro.
Adems,
provocan
el
desdoblamiento de la estructura
tridimensional de la protena,
exponindose los residuos fenlicos
de tirosina que van a participar en la
segunda etapa de la reaccin. El
Cu2+ se mantiene en solucin
alcalina en forma de su complejo
con tartrato.
2) La reduccin, tambin en medio
bsico, del reactivo de FolinCiocalteau, por los grupos fenlicos
de los residuos de tirosina,
presentes en la mayora de las
protenas, actuando el cobre como
catalizador.
El
principal

Fig. 8. Reaccin por el mtodo de Lowry.

(O.H. Lowry, et al., 1951)

3. Escriba el o los posible(s)

aminocido(s)
que tiene la
solucin problema completando
el cuadro 1.
Nmero
Problema.
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10

Aminocidos.
No se encontraron.
No se encontraron
No se encontraron.
No se encontraron.
Arginina
No se encontraron.
No se utiliz muestra
problema.
Tirosina o histidina.
Cualquier aminocido.
Cualquier aminocido,
pptido o protena.

11

Tabla 11. Identificacin aminocidos en

las muestras problema.

4. Completar el cuadro.

12

Reaccin.

Aminocido
patrn.

Ninhidrina.
Xantoproteica
Milln.
Hopkins Cole.
Sakaguchi.
Nitroprusiato
de sodio.
Acetato de
plomo.
Ehrlich.
Pauly.
Biuret.

Serina.
Triptfano.
Tirosina.
Triptfano.
Arginina.
Cistena.
Cistena.
Tirosina.
Triptfano.
Cistena.

Color que se
obtuvo con el
aminocido
patrn.
Amarillo.
Naranja.
Precipitado rojo.
Naranja.
Rojo claro.
Carmes.

Color que se
obtuvo con la
solucin
problema.
Transparente.
Amarillo.
Transparente.
Transparente.
Rojo.
Amarillo.

Color que se
obtuvo con la
solucin de clara
de huevo.
Amarillo.
Naranja.
Precipitado rojo.
Naranja.
Rojo intenso.
Transparente.

Precipitado
oscuro.
Naranja.
Amarillo.
Violeta Oscuro.

Precipitado oscuro.

Naranja.
Rojo.
Azul.

Naranja.
Naranja.
Violeta.

Tabla 12. Determinacin colorimtrica de las reacciones utilizadas.

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