Tesis Definitiva Scarlet 28 Mayo Ultima

UNIVERSIDAD DE CIEGO DE VILA Mximo Gmez Bez
FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS.
Efectividad del (Trichoderma harzianum spp) sobre la poblacin de

nemtodos fitoparsitos y el desarrollo del cafeto (coffea arabica
L.) en condiciones de vivero en el Estado Tchira.
Tesis presentada en opcin al grado acadmico de Mster en Agroecologa y

Desarrollo Endgeno.
Autor: Ing. Scarlet Svetlana Snchez de Prato
Tchira, 2015
UNIVERSIDAD DE CIEGO DE VILA Mximo Gmez Bez

FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS.
Efectividad del (Trichoderma harzianum spp) sobre la poblacin de

nemtodos Fitoparsitos y el desarrollo del cafeto (coffea arabica
L.) en condiciones de vivero en el Estado Tchira.
Tesis presentada en opcin al grado acadmico de Mster en Agroecologa y

Desarrollo Endgeno.
Autor: Ing. Scarlet Svetlana Snchez de Prato

Tutor Dra. Mayra Rodrguez
Tchira, 2015
Pensamiento
La educacin empieza con la vida, y no acaba sino con la muerte.

Jos Mart
Dedicatoria
A Dios y a la santsima Virgen Mara por darme la fuerza y la fe necesaria para

culminar m meta.
A mis padres Jos y Mercedes por su ejemplo de lucha y por su apoyo
Incondicional, sin ustedes no habra sido posible alcanzar este logr, que tambin
es de ustedes.
A mi familia, mi esposo, mis hermosos hijos, todos fuente de inspiracin en cada
instante de mi vida.
A mis compaeros de estudios, por su apoy y compaa a lo largo del recorrido.
Agradecimiento
A DIOS primeramente por darme salud y permitirme cumplir esta meta.

A mi tutora Mayra Rodrguez por su imprescindible orientacin.
Al laboratorio de INSAI, en especial a el Ing. Rosario Chacn por su apoyo y
participacin en la parte experimental.
A Universidad de Ciego de vila (UNICA) en especial a mis profesores de la
maestra por su ayuda en todo momento en la confeccin del trabajo.
A mis amigos Edixn, Days, Vctor y Wilmer por ser tan buenos compaeros,
ejemplo de solidaridad, apoyo y comprensin.
A la familia Guerreo Murillo, ya que sin su colaboracin hubiese sido ms difcil.
A todas las personas que han hecho posible la realizacin de este trabajo.
A todos, muchas gracias, mil gracias.
RESUMEN
Con el objeto de determinar la cuanta en que se puede prescindir del control

qumico para manejar los nemtodos fitoparsitos en el cultivo del caf, se realiz
un estudio sobre la efectividad del Trichoderma harzianum como biocontrolador en
base al estado fitosanitario del cultivo de caf (coffea arabica, L.) en la fase de
vivero, evalundose la infestacin causada por los nemtodos. La investigacin se
desarroll en el municipio Junn, Estado Tchira. Se utilizaron plntulas en bolsas
con sustrato de mezcla 2 partes de tierra, 1 de materia orgnica y 1 de arena,
realizando aplicaciones con Trichoderma harzianum con tres concentraciones de
conidios. Se utiliz un diseo de bifactorial con siete tratamientos y diez
repeticiones T1: Plntula + testigo absoluto; T2: plntula + Trichoderma 1 x
109ufc/ml; T3: plntula +
Trichoderma de 1 x 1018ufc/ml. T-4:plntula +
Trichoderma de 1 x 1027ufc/ml; T-5:sustracto solo + Trichoderma de 1 x 109ufc/ml;

T-6:sustracto solo + Trichoderma de 1 x 1018ufc/ml;T-7:sustracto solo +
Trichoderma de 1 x 1027ufc/ml. Se concluye que la aplicacin del tratamiento T7 =
sustrato solo + Trichoderma de 1 x 1027ufc/ml, a
los 103 das despus del
trasplante, Erradico en un 100% los nemtodos de los gneros meloidogyne spp

y pratylenchus spp , y en cuanto al desarrollo agroproductivo de las plntulas de
caf en la fase de vivero el tratamiento T-4:plntula + Trichoderma de 1 x
1027ufc/ml, es el que aumenta el crecimiento, desarrollo de las plntulas y el
control de los nemtodos Fitopatgenos de forma adecuada.
INDICE.
CONTENIDO
I. INTRODUCCIN..
II .REVISIN BIBLIOGRFICA...
II.1 Generalidades del cultivo de caf (coffea arabica L) Seleccin y
PAG.
8
11
tratamiento de la semilla de caf.

II.2 Preparacin y manejo del germinador ......
II.3 Preparacin y manejo estructura y localizacin del vivero.
II.3.1 Seleccin de envases y mezcla de suelos....
II.3.2 Trasplante siembra abonamiento y deshierbe.
II.4 Plagas y su manejo integrado ....
II.5Nematodos Fitopatgenos en viveros de caf................
II.6Mecanismo de accin de trichoderma harzianum..
II.6.1Micoparasitismo.......
II.6.2Resistencia Inducida. Uso de (Trichoderma harzianum) para el
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21
control de patgenos..
III. MATERIALES Y MTODOS
IV. RESULTADOS Y DISCUSIN..
CONCLUSIONES.
RECOMENDACIONES
BIBLIOGRAFA.
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49
50
I.INTRODUCCIN
En la actualidad, uno de los grandes problemas que presenta la agricultura
sostenible es el uso del bromuro de metilo, el cual es un agroqumico que desde la
dcada de los 70 se ha venido usando en la agricultura, principalmente para
desinfectar suelos y cultivos como granos y frutas para el control de plagas del
7
suelo, sobre todo hongos y nemtodos fitoparsitos. Sin embargo, durante su

aplicacin, una parte importante se libera a la atmsfera, lo que disminuye la
concentracin de ozono y contribuye tambin a incrementar el efecto invernadero
en nuestro planeta (Piedra, 2008).
Otro de los grandes retos que enfrenta la agricultura actual, adems de
buscar alternativas al bromuro de metilo, se plantea en la necesidad de disminuir
el uso de insecticidas, nematicdas y fungicidas qumicos. El inters es mltiple;
por un lado, reducir el riesgo de que haya residuos en los alimentos, mxime
cuando se consumen frescos, como es el caso de numerosos productos
hortcolas. Por otro, aumentarla seguridad laboral del agricultor y, finalmente,
preservar el medio ambiente, a travs de programas que respondan a una
agricultura de manejo sostenible.
Una de las alternativas que existen para reducir la utilizacin de insecticidas,
nematicidas, fungicidas y desinfectantes como el bromuro de Metilo es el uso del
manejo biolgico de plagas; es decir, la utilizacin de organismos vivos para
combatir las plagas que afectan a los cultivos. El manejo biolgico es un
componente esencial, tanto en el control integrado de plagas, como en una
agricultura ecolgica sostenible Piedra (2008).
En el pasado se utiliz para el combate de estos microorganismos productos tales
Como el Nemagn, el cual fue prohibido en la dcada de 1980 por sus efectos
negativos en la salud de los trabajadores. En la actualidad, los ms utilizados son
nematicidas no fumigantes qu pertenecen a dos grupos qumicos: carbamatos y
organofosforados (Arauz, 1998).Es entonces que surge como necesario dentro del
concepto de agricultura sostenible fomentar un tema de gran importancia, como lo
es la sustitucin de nematicidas qumicos por nematicidas biolgicos, utilizando
hongos y bacterias dentro de un programa de manejo integrado de cultivos
agrcolas.
En Amrica Latina, el caf (coffea arabica L.) Es uno de los cultivos ms
importantes en las zonas de pie de monte y montaa. Puede ser explotado, tanto
en pequeas unidades agrcolas como en grandes plantaciones Mogolln et al.,
(1995). As mismo, en Amrica Central en las ltimas dcadas ha surgido una
8
diversificacin intensa en los sistemas de produccin del rubro, tratndolo tanto

orgnico como convencionalmente CENICAFE (2005).
Muchos pases del mundo presentan exitosos modelos organizacionales en
cuanto a la produccin de caf que generan grandes ganancias econmicas
basadas en manejo de procesos administrativos y operativos que abarcan la
tecnificacin del rubro y el manejo tradicional del mismo incluyendotodos los
sectores del mercado (Cadena de comercializacin), lo que garantiza obtener los
resultado que se han propuesto alcanzar en un tiempo determinado Galloway y
Beer (1997).
En este sentido, las estrategias para la optimizacin de los procesos de
produccin en los cafetos, aplica corrientes de causa-efecto donde se utilizan las
mejores alternativas para mejorar la calidad de los granos producidos; siendo los
biocontroladores una eleccin a los problemas causados por nemtodos Urreta
(2008).Este autor considera adems, que el biocontrol hoy en da se ha convertido
en un concepto, que propone opciones para integrar y mejorar todos los niveles
del cultivo del caf principalmente en la fase de vivero.
De esta manera, segn la FAO (2010) en Venezuela dentro de la economa
agrcola se encuentra la actividad cafetalera, donde la misma ha sido atacada por
la incidencia e infestacin de las plntulas de caf por los nemtodos que
minimizan los niveles de produccin, mermando la calidad de los granos, en este
sentido se han iniciado estudios sobre el uso de los biocontroladores como base
del estado fitosanitario del cultivo de caf en esta fase.
De tal forma, los ataques de nemtodos a los cafetos son conocidos en todo el
universo, por lo que se hace necesario realizar un estudio que permita
diagnosticar la efectividad del control biolgico para nemtodos utilizando
biocontroladores, contribuyendo as al manejo hacia una agricultura ms sana. En
este contexto, la Constitucin de la Repblica Bolivariana de Venezuela CRBV,
(1999), en el artculo 305 hace nfasis en la necesidad de promover la agricultura
sustentable como base estratgica del desarrollo rural integral.
As mismo, es lgico pensar que, para el buen desarrollo de las plntulas de caf
en fase de vivero se mantenga un control biolgico con la efectividad requerida,
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tomando la decisin ms viable hacia un determinado tratamiento, y que estos

sean revisados y monitoreados para verificar su seguridad sobre la incidencia de
los nemtodos, siendo este requerimiento indispensable para la adecuacin
itinerante y respectiva sobre la optimizacin de los recursos y materiales utilizados
para este fin, estableciendocontroles internos y manuales, y evalundolos para
determinar dosis ptimas y efectivas ,Snchez (2015).
Con respecto a lo anteriormente sealado, es necesario resaltar el estudio de
la efectividad de los biocontroladores (trichoderma harzianum) en el cultivo de
caf(coffea arabica L)en fase de vivero, a tal efecto, la finalidad de este trabajo
investigativo es probar la capacidad y la efectividad de los biocontroladores,
aplicando tratamientos y dosis adecuadas a las plntulas de caf en fase de
vivero, y del que existen muy pocos reporte a escala mundial y nacional para este
cultivo en fase de vivero, por lo tanto ser de gran ayuda para las unidades de
produccin con problemas de nemtodos, siendo una herramienta que permite
balancear acciones en los controles de plagas que necesitaran las fincas.
Las conceptualizaciones antes descritas, permiten exponer el contexto actual del
uso de controladores biolgicos en el estado Tchira; donde se plantean las
siguientes interrogantes para hacer la formulacin del problema:
-Qu situacin actual presenta la unidad de produccin el campito con respect
a la implementacin de controladores biolgicos sobre nemtodos fitoparsitos en
el cultivo de caf en la fase de vivero?
-Cul es el impacto provocado por las diferentes concentraciones de conidio del
biocontrolador a utilizaren el sustrato y en las plntulas de caf?
En atencin a lo expuesto, se plantea como problema cientfico.
Cul es la efectividad del trichoderma harzianum en el control biolgico de
nemtodos fitoparsitos en el cultivo de caf en fase de vivero y en el desarrollo
de las plntulas?
Teniendo en cuenta la problemtica planteada se propone la siguiente Hiptesis:
10
Con la aplicacin de trichoderma harzianum en diferentes concentraciones se

lograra disminuir las poblaciones de nemtodos en plntulas de vivero en el cultivo
de caf.
Para corroborar la validez de la hiptesis se traz una secuencia experimental con
los objetivos que se expone a continuacin:
Objetivo General
Evaluar
la efectividad del Trichoderma harzianum sobre las poblaciones de
nemtodos fitoparsitos y el desarrollo del cafeto (Coffea arabica .L) en la unidad

de produccin el campito ubicada en Bramn, Municipio Junn del estado
Tchira.
Objetivos Especficos
1. Diagnosticar la presencia de nemtodos fitoparsitos en el sustrato a ser
empleado en viveros de cafeto (Coffea arabica L).
2. Determinar la susceptibilidad de los nemtodos fitoparsitos con la aplicacin
de tres concentraciones de conidios de Trichoderma harzianum.
3. Evaluar el desarrollo de las plntulas de caf (Coffea arabica L)
con la
aplicacin de tres concentraciones de conidios de Trichoderma harzianum.
II. REVISIN BIBLIOGRFICA

II.1 Generalidades del cultivo de caf (coffea arabica L). Seleccin y
tratamiento de la semilla.
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Se trata de un arbusto siempre verde originario de Etiopa. Es sin duda hoy una de
las plantas ms conocida en el mundo entero. El caf, la familiar bebida que se
hace hirviendo los granos tostados y molidos de Coffea arabica L. y otras especies
de Coffea, ha sido por mucho tiempo una de las bebidas ms importantes en el
mundo, siendo rivalizado slo por el t, la cocoa y el mate. Durante el siglo XVII, el
caf se produca en reas localizadas en Arabia y los pases vecinos, para el
consumo en toda la regin musulmana. La popularidad de la bebida fue tal que su
uso por los mahometanos fue prohibido por algn tiempo. El arbusto de caf
puede propagarse por mtodos sexuales o asexuales. El primer mtodo incluye el
uso de la semilla en grano y el segundo la utilizacin de estacas, esquejes o
injertos Agrios (2000).
El cultivo de caf es un sistema productivo que ha sido objeto de muchos estudios,
y esta tendencia contina en la bsqueda de mejores alternativas para una
produccin sostenible a largo plazo. Segn Carvajal (1985) el caf bajo sombra es
una prctica comnmente extendida en Centro Amrica, Colombia y Mxico.
La prctica de seleccin y los programas de mejoramiento tienen como objetivo
escoger adecuadamente las mejores semillas para obtener una buena viabilidad y
plantas de alta calidad que aseguren al mximo el xito de las futuras
plantaciones. Un arbusto de caf sano, vigoroso resistente a las plagas y
altamente productivo slo se logra mediante una seleccin, procesamiento y
almacenamiento apropiado de la semilla a usarse Gliessman (2002).
El mismo autor sugiere que se cosechen los frutos en su estado ptimo de
madurez (color rojo) concentrndose en la seccin de mayor produccin en el
rbol y la rama durante ese ao. Los frutos que no estn completamente maduros
tienen un por ciento de germinacin ms bajo. El grano de caf arabico es
normalmente de forma plano-convexa. Su tamao flucta con la variedad. Pueden
presentarse variaciones de ao en ao y en diferentes pocas de la cosecha en el
mismo arbusto Boyce et al., (1994).
II.2.Preparacin y manejo del germinador.
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El germinador o semillero de caf es el paso siguiente a la seleccin y beneficio de

la semilla. En ste se colocan las semillas en un ambiente adecuado para su
germinacin, desarrollo de races, tallos y hojas. Si la semilla es fresca pueden
obtenerse plntulas listas para el trasplante a los 2 a 3 meses despus de la
siembra Sandoval (2009).
El predio debe ser plano con una leve inclinacin de medio al uno por ciento de
pendiente ( - 1%), esto es, de 6 pulgadas a un pie de cada por cada 100 pies de
distancia. La inclinacin debe hacerse de este a oeste si las condiciones del predio
lo permiten. Localice el germinador de este a oeste para protegerlo de los rayos
solares en la parte ms amplia del germinador. Llen completamente el
germinador con arena cernida y presinela con un pedazo de madera para sellar
los bolsillos de aire que se hayan formado. Agregue ms arena y emparjela con
una tabla a nivel con la parte superior de la caja cementera.
II.3.Preparacin y manejo del vivero, estructura y localizacin.

El vivero es el lugar o sitio adecuado donde permanecern las plantas de caf
procedentes del germinador hasta alcanzar el desarrollo necesario para el
trasplante al campo. Generalmente el cafeto tarda 6 meses en estar listo para
establecer la plantacin definitiva.
Se prepara utilizando estacas de madera tratada de 2 X 2 pulgadas y 4 pies de
largo. Estos se colocan en parejas con una separacin de 4 pies y a 20 pies de
distancia unos de otros. Deje una altura de 30 a 36 pulgadas del nivel del terreno.
Luego coloque un pedazo de madera de 2 X 1 pulgada y 4 pies de largo entre las
estacas separadas a 4 pies. Tienda la red de Sarn de 4 X 100 pies de largo sobre
el armazn preparado.
La orientacin del vivero debe ser de saliente al poniente, esto es, de este a oeste.
El declive del terreno debe ser de 1 a 2 % de inclinacin en esa misma direccin si
el predio lo permite. El vivero debe estar cerca a fuentes de agua y en un lugar de
fcil acceso para transportar los arbolitos y los materiales. Compacte la superficie
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del terreno con un rolo de manera que no haya mucha penetracin de agua al
suelo ni acumulacin excesiva sobre ste. CENICAFE (2005)
II.3.1. Seleccin de envases y mezcla de suelos, colocacin de las bolsas y
desinfeccin del medio.
Se utilizan bolsas de polietileno de 3.5 X 12, de color negro y con agujeros por
los lados y en el fondo de sta para permitir la salida de agua en exceso. Utilice
una mezcla de 2 partes de tierra frtil y una parte de materia orgnica para llenar
las bolsas. Como fuente de materia orgnica se usa la pulpa de caf, la gallinaza o
estircol de animales bien descompuesto o curado. La mezcla debe cernirse para
que quede suelta, facilite el trasplante y permita el libre crecimiento de las races.
Los terrones, piedras u otros materiales pueden causar deformaciones y
entorpecer el crecimiento del sistema radical del arbolito.
La orientacin de las eras debe ser de este a oeste siguiendo el declive del terreno
para facilitar la salida del exceso de agua de lluvias o del riego del predio. Es
conveniente realizar esta prctica para evitar el exceso de humedad de forma
prolongada en el rea. Si la humedad se acumula por perodos largos entre y en
las eras puede crear un ambiente favorable para el ataque de enfermedades a los
arbolitos de caf. Esto dificulta, adems, el acceso de los trabajadores y de los
vehculos de transporte de arbolitos. Carvajal (1984)
Con anterioridad a la siembra de las plntulas en las bolsas conviene desinfectar
el medio de crecimiento contenido en las mismas. Esto debe hacerse como una
prctica preventiva ya que los ataques de plagas posteriores son difciles de
controlar y resultan costosos. Para estos propsitos puede utilizarse la
solarizacin del medio o el uso de vapor de agua.
II.3.2.Trasplante y siembra, abonamiento, deshierbe y riego.
Antes del trasplante puede aplicarse el herbicida pre-emergente Goal sobre la
mezcla en las bolsas para prevenir los yerbajos en una etapa temprana de
crecimiento de las plntulas. Humedezca la mezcla antes de aplicar el producto. El
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herbicida se aplica a razn de media onza del producto por galn de agua. Espere
de 2 a 5 das para el trasplante de las chapolas.
Coloque la raz pivotante derecha dentro del hueco y asegrese de que no se
doble formando el llamado Cuello de ganso (Esta condicin puede traer serios
problemas de anclaje y pobre desarrollo del sistema radical del arbusto a nivel de
campo) y evite causarle daos fsicos a las races. Descarte toda plntula con
races malformadas o rotas y aquellas con hojas clorticas, dbiles, enfermas,
anormales, etc. Sandoval (1998).
Al sembrar la plntula en la bolsa el cuello de la raz debe quedar al mismo nivel
en que creca en el germinador. No la siembre muy profundo cubriendo parte del
tallo con tierra ya que puede traer problemas con pobre crecimiento y ataque de
enfermedades.
Luego de colocar la plntula adecuadamente en el hueco introduzca la coa de
forma inclinada, cercano al borde de la bolsa y muvala en direccin de la plntula
para tapar el hoyo. Presione bien la tierra contra las races para sellar los espacios
de aire y el sistema radical venga en contacto con el medio para obtener agua y
nutrimentos.
Se recomienda iniciar el programa de abonamiento pasados 10 das despus del
trasplante de las plntulas al vivero. Para la fertilizacin foliar se utiliza abono 2020-20 que contenga elementos menores. La dosis a usarse es de 1 onza del
producto por galn de agua aproximadamente 3 libras del fertilizante en 50
galones de agua. Sandoval (1998)
Las aplicaciones de abono a las plntulas deben hacerse cada 15 das. Si las
plantas no responden adecuadamente y ocurren problemas con enfermedades
abone cada 10 das o aumente la dosis a dos (2) onzas de abono cada 15 das en
lo que stas se recuperan. En casos de deficiencias de nitrgeno se requerir de
la aplicaciones foliares de urea a razn de una (1) onza por galn de agua en
adicin al abono completo. Dosis altas de urea y su uso frecuente pueden causar
un crecimiento anormal de las plantas.
15
Para obtener arbolitos de caf de buena calidad es muy importante manejar y

cuidar las plantas con esmero y dedicacin de manera que se obtenga el xito
esperado de stos en el campo.
En la condicin de monocultivo, cualquier planta que no sea caf es considerada
indeseable por lo que se elimina, dejando el suelo a pleno exposicin solar y sin
ninguna proteccin. Las gotas de lluvia golpean directamente a la planta, lo que
provoca daos fsicos, y el suelo queda susceptible a la escorrenta de las lluvias y
a la erosin consiguiente. A largo plazo, esta erosin desplaza los horizontes
frtiles de los suelos Bornemisza et al (1999).
Las caractersticas propias del sistema tradicional de inhibir el desarrollo de
algunas malezas y albergar organismos parsitos y depredadores de las plagas
del caf, reduce el uso de sustancias curativas, si es necesario se aplica,
primeramente, remedios naturales como infusin de hojas de tabaco como
insecticida. Como preventivo caldo bordels o sulfato de cobre para controlar las
enfermedades en ltima instancia se aplica fungicidas e insecticida sintticos
cuando las incidencias son muy altas, esta ltima aplicacin generalmente es casi
nula Fernndez y Muschler (1999).
Tres o cuatro semanas antes de llevar los arbolitos al campo, quite la cubierta de
Sarn. Exponga las plantas a la luz solar, controle el riego y el abonamiento para
que stas endurezcan y se vayan adaptando a las condiciones del campo. Cuando
no se realiza esta prctica el estrs en el campo es mayor y puede observarse el
escaldamiento y la cada de las hojas.
II.4. Plagas y su manejo integrado.
El sistema de manejo convencional del caf, caracterizado por la reduccin del
uso de sombra, genera un ambiente particular que influye sobre la presencia de
ciertos patgenos causantes de enfermedades como: mancha de hierro
(Cercospora coffeicola Berk & Che), Antracnosis (Colletotrichum spp.Noackco) y
mal de hilachas (Pellicularia Koleroga Cooke). Sin embargo, un exceso de sombra
como una alta densidad de esta en el sistema orgnico, puede incrementar
enfermedades como el ojo de gallo Beer et al., (1998). No obstante, se pueden
16
utilizar diversas prcticas agrcolas que pueden resultar desfavorables para el

desarrollo de las enfermedades al modificar las condiciones micro climticas del
cultivo Zentmyer y Bald (1977).
Es evidente que el uso de plaguicidas en estos sistemas tecnificado es necesario
para mantener el sistema cafetalero saludable y con una alta productividad, pero
este tipo de manejo puede ser peligroso debido a la exposicin de los trabajadores
del campo con la manipulacin directa de los productos txicos, y por la
contaminacin ambiental ya que muchos de estos productos son residuales y
pueden permanecer en el ambiente por muchos aos Rice y McLean (1996).
Estas modificaciones del microclima influyen en el desarrollo de enfermedades del
caf. En Nicaragua, se han observado niveles de Hemileia vastatrix ms altos en
condiciones de sombra, como respuesta a la alta humedad que se producen en
los estratos bajos del caf. Mientras que, Cercospora coffeicola bajo condiciones
de sombra no increment su severidad, pues las condiciones ptimas para su
desarrollo son a pleno sol Guharay et al., (2002).
Segn Guzmn (2012) los principales gneros que afectan al cultivo de caf en
Centro Amrica son el Meloidogyne, nemtodo agallador, y Pratylenchus,
nemtodo lesionador de la raz que afectan las funciones de la nutricin mineral y
de la
absorcin del agua en las plntulas, y cuyo manejo y control se ha
fundamentado bsicamente en el control qumico, empleando productos de alto

costo, que afectan el medio ambiente y la salud humana por su accin residual. El
mismo autor plantea que se conocen 4.105 especies de nemtodos fitoparsitos,
pueden sobrevivir en casi todos los hbitats, son esencialmente acuticos, son
microscpicos, que miden entre 300 y 1.000 m de largo y 15 a 35 m de ancho y
causan prdidas anuales equivalentes a 80 billones US$/ao.
Los rboles de sombra asociados con el caf son un elemento a tomar en cuenta,
en su estado natural el caf crece bajo sombra. Sin embarg existe una
controversia en cuanto a si la sombra beneficia o no al cultivo de caf. Por
ejemplo, la broca del cafeto (Hypothenemus hampei Ferrari), considerada la plaga
de mayor importancia y la mayor amenaza econmica para el cultivo, se ha
reportado en cafetales con sombra densa, pero se ha sugerido que algunos tipos
17
de sombra favorecen la persistencia de controladores biolgico Beauveria

bassiana y Cephalonomia stephanoderis, segn Beer et al.; (1998).
II.5.Nemtodos Fitopatgenos en viveros de caf.
Los nemtodos son los organismos pluricelulares ms numerosos en los agros
ecosistemas; se conocen unas 20.000 especies y se pueden encontrar en
densidades de hasta 30 millones por metro cuadrado. Se encuentran como
organismos de vida libre y se alimentan de hongos, bacterias, protozoarios u otros
nemtodos, o como parsitos de plantas y animales; adems, forman parte
importante de las cadenas trficas del suelo Rodrguez, (1998). Por otra parte, el
mismo autor refiere que los conocimientos sobre organismos antagnicos de
nemtodos fitoparsitos son tan viejos como los que se tienen sobre la
importancia econmica de estos en la produccin agrcola; es decir, los
nemtodos fitoparsitos tienen enemigos muy eficaces que limitan sus niveles
poblacionales, adems, se tiene el conocimiento de la existencia de una microflora
y microfauna en el suelo cuyas especies son antagonistas o reguladoras de las
actividades de los fitonemtodos.
Los fitonemtodos en caficultura en fase de vivero, constituyen un grupo de
organismos poco estudiados y en consecuencias pobremente entendidos. Es
hasta hace poco tiempo cuando en Centroamrica se empez a hablar sobre
ellos, debido en gran medida a la reconfirmacin de problemas en la produccin
Mendoza et al (1995).
Los nemtodos son uno de los grupos de invertebrados ms numerosos sobre la
tierra; son de gran importancia en la agricultura debido a los problemas que
causan. Una parte importante de los daos se generan debido a la secrecin que
los nemtodos inyectan al alimentarse de la planta. Esta secrecin afecta el tejido
vegetal causando necrosis, destruccin de las paredes celulares o provocando la
supresin de la divisin celular en el meristemo apical, impidiendo as el
crecimiento de la raz Gonzlez (1993).
Los nemtodos predisponen a las plantas para la infeccin por otros organismos,
ya que al penetrar en las races causan cambios fisiolgicos en los tejidos, lo que
18
facilita la accin de los hongos, bacterias y virus que habitan el suelo Taylor y
Sasser (1983), ocasionan daos indirectos; no permiten que el caf se desarrolle
normalmente y exprese plenamente su potencial productivo.
Los nemtodos se reproducen mayormente durante el perodo lluvioso pero sus
daos en las plantas se acentan durante el perodo seco Mateille (1993). A
escala mundial, existe una gran abundancia de antecedentes que permiten
aseverar que los nemtodos son atacados por numerosos y variados organismos
del suelo, pero la accin de ellos an es poco conocida (Jimnez, 1979).
Segn Arauz, (1998). Los agentes biocontroladores como los organismos que
interactan con los nemtodos fitoparsitos en el suelo deben tener algunas
caractersticas bsicas: No deben ser patgenos de plantas, hombres o animales,
capaz de reducir o suprimir eficientemente las poblaciones de nemtodos por
debajo del nivel crtico, capacidad de adaptacin a diferentes ambientes del suelo
(textura, grado de humedad, composicin qumica y materia orgnica), buena
habilidad competitiva, alto potencial de reproduccin para obtener una poblacin
alta, capacidad de sobrevivir en pocas difciles; por ejemplo, Verticillium
chlamydosporium tiene clamidosporas y puede sobrevivir a condiciones adversas
del ambiente, capacidad de producir antibiticos u otros compuestos que inhiben
nemtodos u otros organismos para mejorar su oportunidad de supervivencia,
habilidad para afectar a ms de una especie de nemtodos, dispersin efectiva en
el suelo, capacidad para reproducirse in vitro en grandes cantidades a nivel
comercial y de fcil aplicacin, resistencia a la fertilizacin y a algunos plaguicidas;
el producto biolgico debe aumentar la produccin con respecto al testigo sin
aplicar.
Conforme se conoce ms de la ecologa de los microorganismos con potencial
para el combate biolgico y sus relaciones con los patgenos y las plantas, el
desarrollo comercial del combate, a los agentes biocontroladores formulados para
su uso comercial se les ha denominado plaguicidas microbiales o bioplaguicidas,
con las respectivas categoras, como bioinsecticida, biofungicida, bioherbicida y
bionematicida. De acuerdo con Arauz (1998), el concepto de combate biolgico es
definido como el combate de enfermedades mediante el uso de organismos; el
19
uso de sustancias naturales cae dentro de la categora o clasificacin de combate

qumico. Esta revisin de literatura combina ambos conceptos dentro del uso de
los nematicidas biolgicos; as mismo, se hace mencin de algunas experiencias a
escala mundial con sustancias naturales y microorganismos en el combate de los
nemtodos fitoparsitos
El desarrollo de una poblacin de fitonemtodos en un cultivo, involucra los
procesos de supervivencia, diseminacin, infeccin, alimentacin y reproduccin.
En ausencia del hospedante los estos microorganismos pueden sobrevivir
perodos de semanas o meses en estados de baja actividad metablica, como el
reposo o diapausa, inducidos por factores endgenos y ambientales Arauz (1998).
Segn Miller (1975) muchos patgenos que habitan en el suelo, tambin son
causa importante de prdidas en la produccin, este autor compar en Nicaragua
poblaciones de nemtodos en cafetales con manejo convencional y sombra menor
de 10% y cafetales con sombra entre el 60% encontrando la predominancia de los
gneros Meloidogyne y Pratylenchus, siendo Meloidogyne el ms abundante.
Debido a que estos organismos que viven en el suelo, son de tamao
microscpico y que a menudo no causan sntomas especficos en las partes
areas de los cafetos, los nemtodos no son detectados fcilmente, por ello su
impacto econmico ha sido subestimado por largo tiempo Noir et al., (2003).
II.6Mecanismo de accin de trichoderma harzianum.
Las conidios de Trichoderma harzianum, al entrar en contacto con el suelo y
detectar la presencia de un hongo fitopatgenos generan una hifa o hilo que crece
paralelamente a la hifa del hongo daino. Despus de reconocerlo, se adhiere y lo
penetra,
enrollndolo
hasta
estrangularlo,
consumindolo
(parasitismo)
compitiendo con l por espacio, energa y luz. La produccin de antibiticos por

parte del Trichoderma hace que el rea donde se desarrolla este hongo est libre
de otros hongos (Arias, 2004).
Harman (2001) reporta varios mecanismos, demostrados recientemente, con los
cuales Trichoderma spp, acta como biocontrolador y como colonizador de las
races, como son: micoparasitismo, antibiosis, competencia por nutriente y
20
espacio, desactivacin de las enzimas de los patgenos, tolerancia al estrs por

parte de la planta, al ayudar al desarrollo del sistema radical, solubilizacin y
absorcin de nutrientes inorgnicos, y resistencia inducida. De estos, los primeros
cuatro mecanismos mencionados tienen accin en el Fitopatgenos, los otros son
indirectos, ya que su accin es impulsar mecanismos de defensa fisiolgicos y
bioqumicos de la planta.
II.6.1.Micoparasitismo.
Es el ataque directo de un hongo a otro, es un proceso complejo que involucra
eventos secuenciales, incluyendo reconocimiento, ataque, penetracin y muerte.
Trichoderma puede ejercer un biocontrol directo por parasitismo en un rango de
hongos. El modelo de mecanismo de accin difiere de una especie a otra. Este
proceso consiste en la formacin de estructuras llamadas apresorios, que
contienen una alta concentracin de solutos osmticos como glicerol y su funcin
es penetrar en el hospedero. Trichoderma utiliza los carbohidratos de la pared
celular de los patgenos, algunas enzimas que degradan la pared celular de los
patgenos son: quitinasa, gluconasa, proteasa (Bentez et al, 2004), exoglucan-b1,3 glucosidasas, endoglucan-b-1,6 glucosidasa, etc. (Lorito, 1998). Estas enzimas
son inducidas por los diferentes polmeros componentes de la pared de distintas
estructuras de los hongos Fitopatgenos. Este proceso puede ser dividido en
cuatro sucesos principales:
Crecimiento quimiotrfico: donde exudados del patgeno atraen a Trichoderma
spp.
Reconocimiento: algunos aislamientos de Trichoderma spp son especficos a
algunos fitopatgenos, y es en esta etapa donde el fenmeno de especificidad de
ataque se define, siendo medida por leticinas.
Adhesin: una vez que Trichoderma spp ha reconocido al patgeno, lo envuelve y
se adhiere a las hifas cubrindolo totalmente.
Degradacin: el paso final es la degradacin de la pared celular.
Antibiosis: para Trichoderma este mecanismo est fuertemente ligada la
produccin de enzimas propias del proceso de micoparasitismo Tronsmo y
21
Gordon, (1998). Ocurre durante la interaccin de compuestos de bajo peso

molecular o
produccin
de
antibiticos que
inhiben
el crecimiento
de
microorganismos. La mayora de las especies de Trichoderma producen

metablitos txicos voltiles y no voltiles, que impiden la colonizacin de otros
hongos. Entre estos metablitos se encuentran; el cido harzianico, alameticina,
tricolin, antibiticos, peptaibols, 6-pentil--pirona, entre otros Bentez et al.,
(2004).
Competencia: puede resultar en control biolgico por aniquilacin de la poblacin
perjudicial, y puede darse a favor de Trichoderma spp debido a su alta frecuencia
de crecimiento y desarrollo Tronsmo y Gordon, (1998). Trichoderma es capaz de
vencer el efecto de otros hongos del suelo, como resultado de metablitos
producidos por otras especies incluidas las plantas y sobrevive bajo condiciones
competitivas extremas. La causa ms comn de muerte de los microorganismos,
tanto, as que la competencia por nutrientes limitados se traduce en un biocontrol
entre hongos. Trichoderma tiene una capacidad superior de movilizar y extraer
nutrientes del suelo comparado con otros microorganismos Bentez al., (2004).
II.6.2. Resistencia Inducida, uso de (Trichoderma harzianum) para el
control de patgenos.
Trichoderma produce un mecanismo de resistencia similar a la respuesta de
hipersensibilidad, resistencia sistmica adquirida y resistencia sistmica inducida
en plantas Bentez et al., (2004).
Sarmiento (2009) al evaluar el efecto de la aplicacin de Trichoderma spp sobre el
control de la antracnosis (Colletotrichum) en mango, tanto en condiciones in vitro
como in vivo, realizando estudio de evaluaciones in vitro mediante enfrentamiento
de diferentes especies de Trichoderma (T. harzianum, T. longibrachiatum y T.
crassum) con C. gloeosporioides. La evaluacin se realiz midiendo el nmero y el
dimetro de las manchas durante ocho das. De las evaluaciones in vitro result
que no existan diferencias estadsticamente significativas entre los tratamientos,
pero destac el T. harzianum, con un porcentaje de inhibicin de crecimiento de
(72,29%) y porcentaje de inhibicin de esporulacin de (99,5%), el autor concluye
22
que la aplicacin de T. harzianum control la antracnosis en frutos de mango en

forma similar en todos los tratamientos.
Hernndez (1999) evalu el efecto biocontrolador de Trichoderma harzianum
sobre la pudricin apical del fruto de guayaba (PAG) causado por Dothiorella spp.
Bajo condiciones in vitro, se enfrentaron los hongos en cultivos dual mediante
discos de micelio de 5 mm de dimetro, colocados equidistantes en capsulas de
Petri con PDA, incubados a 25oC y luz continua. In vivo se evaluaron tres tiempos
(24 h antes, 0 h y 24h despus de la inoculacin con el patgeno), y dos formas
de aplicacin de Trichoderma sobre la fruta (inmersin en solucin de
3x106conidios/ml; y discos de PDA de 5mm de dimetro con micelio). El patgeno
se coloc en discos de PDA de 5mm. In situ se realizaron tres aplicaciones de
Tricobiol y Carbendazin. Los resultados in vitro mostraron que Trichoderma
controla eficientemente a Dothiorella, ya que logra ocupar mayor rea al
desintegrar la colonia del patgeno. In vivo efectivamente Trichoderma logra frenar
el crecimiento del patgeno cuando se coloc 24 horas antes que el patgeno. In
situ no se observaron diferencias significativas con respecto al control qumico,
pero si entre los controles y las plantas testigo las cuales registraron un 70 % de
infecciones un 40% con el uso de Trichoderma.
El hongo antagnico coloniza los sustratos utilizados y alcanza una profundidad de
4 cm a los 12 das de inoculado en la superficie Espino y Stefanova, (1999)
La morfologa de los nemtodos formadores de agallas cambia durante su ciclo de
vida y se caracteriza por presentar un marcado dimorfismo sexual.
Los huevos de Meloidogyne spp Estn retenidos dentro de una matriz gelatinosa
secretada por la hembra y tienen aproximadamente de 50 a 100 m de longitud y
de 20 a 50 m de ancho. La cubierta o cscara del mismo est constituida por una
capa vitelina exterior, una capa quitinosa media y una capa glicolipdica interior. La
capa glicolipdica permite que los huevos de las nemtodos formadores de agallas
sean muy resistentes a los productos qumicos.
Los juveniles de segundo estado son infectivos, frecuentemente libres en el suelo
y tienen usualmente entre 250 a 600 m de longitud. El esqueleto de la regin
ceflica es dbil y el estilete es delicado con pequeas cabecitas basales, con 9 a
23
16 m de longitud. La cola es conoide y termina en una punta estrecha y

redondeada, con una regin hialina clara cuya extensin permite distinguir entre
especies.
El control de nemtodos se realiza usualmente por la combinacin de varias
estrategias de manejo: el control cultural utiliza a los barbechos, las inundaciones,
aplicaciones de abonos orgnicos, plantas trampa y de cobertura, rotacin de
cultivos, etc. El control fsico, a la solarizacin, vapor de agua, encharcamiento,
etc.; estos mtodos reducen notoriamente las poblaciones de Meloidogyne spp. Y
pueden ser usados de manera individual o combinada, pero son poco usados por
los agricultores por su alta inversin y largos periodos de aplicacin, que reduce el
tiempo de produccin agrcola .Actualmente, el control qumico es una de las
medidas que ms se utiliza para minimizar los daos causados por Meloidogyne
spp., pues es indudable su eficacia; sin embargo, la principal limitacin es que su
aplicacin modifica la microflora y microfauna del suelo, alterando las cadenas
trficas, eliminando los microorganismos antagonistas de los nemtodos
fitoparsitos.
III. Materiales y Mtodos
24
III.0. Ubicacin y caractersticas climticas del rea experimental.

El ensayo se realiz durante el periodo comprendido entre enero abril 2015
sobre una losa de concreto para evitar la contaminacin por nemtodos, ubicada
en la finca el campito, Bramn, Municipio Junn, estado Tchira , a una altitud de
980 msnm, con temperatura promedio anual de 22C y precipitacin anual de
1600 mm. Los anlisis de poblacin y caracterizacin de los nemtodos fueron
realizados en el Laboratorio de Fitopatologa del Instituto Nacional de Salud
Agrcola Integral (INSAI) ubicado en la prolongacin de la 5ta avenida en san
Cristbal estado Tchira
Condiciones experimentales.
Se emplearon semillas de caf variedad INIA01 las que se establecieron en fase
de vivero de la unidad de produccin El Campito, las cuales fueron soterradas
en germinador de arena esterilizada con agua hirviendo y solarizacin, luego de
dos meses fueron trasplantadas a la bolsa de polietileno negro de 25 cm de alto x
12 cm dimetro. Se llenaron un total de 350 bolsas.
Se recolect suelo de lotes infestados con nemtodos fitoparsitos, una parte de
este fue trasladado a una losa de concreto de 12 m 2 se dej infestado con
nemtodos para ser utilizado as. Al suelo infestado se le determin la poblacin
de nemtodos fitoparsitos y se realiz mezcla para un sustrato elaborado en
proporcin 2:1:1 (suelo de infestado de nemtodos: arena: materia orgnica)luego
se separaron en grupos de 10 bolsas para facilitar el montaje de cada tratamiento;
posteriormente, se tomaron 200 plntulas de cafeto (coffea arabica, L)
y se
sembraron los correspondientes al tratamiento 1, a los cuales no se les aplic

ningn producto, despus se establecieron los tratamientos del 2 al 4 con igual
procedimiento, aplicndosele
estos
Trichoderma
harzianum
en
las 3
concentraciones .
Cada bolsa de vivero se consider como unidad experimental. Se utiliz un diseo
experimental completamente aleatorio con 10 repeticiones por tratamiento.
25
Los tratamientos seleccionados fueron los siguientes:

T1: Testigo absoluto + plntula.
T2: Plntula +Trichoderma 1 x 109ufc/ml.
T3: Plntula + Trichoderma 1 x 1018ufc/ml.
T4: Plntula + Trichoderma 1 x 1027ufc/ml
T5: sustrato solo+ Trichoderma 1 x 109ufc/ml;
T6: sustrato solo + Trichoderma 1 x 1018ufc/ml;
T-7: sustrato solo + Trichoderma de 1 x 1027ufc/ml; diez (10) repeticiones.
Posteriormente se recolect la mezcla de suelo infestado con nemtodos y se
llenaron
otras
150
bolsas,
las
que
no
seran
sembradas
de
cafeto,
correspondindose con los tratamientos 5, 6,7.

Finalmente se procedi a rotular cada una de las bolsas con su respectivo
tratamiento y con el nmero de la repeticin. Despus de la siembra, se aplic
riego al suelo para mantenerlo a capacidad de campo.
Los aislamientos fueron identificados en el Laboratorio de Micologa del INSAI del
Estado Tchira, corroborando que estos pertenecan al gnero Trichoderma
harzianum. Cada tratamiento const de 5 repeticiones; y tanto los tratamientos
inoculados con Trichoderma harzianum, como el testigo fueron sometidos a la
misma evaluacin.
El esquema de la distribucin de los bloques totalmente al azar de los 7
tratamientos fue de la siguiente forma:
R1: T1; T2; T3; T4; T5; T6; T7
R2: T7; T6; T5; T4; T3; T2; T1
R3: T3; T5; T6; T1; T4; T7; T2
R4: T5; T4; T1; T2; T3; T6; T7
R5: T6; T5; T7; T3; T2; T4; T1.
Estandarizacin del inoculo de conidios de Trichoderma harzianum.
26
Se agreg 10 ml de agua destilada estril y 1 g del arroz colonizado con el hongo

respectivo a un matraz estril, agitndose moderadamente a fin de liberar los
conidios del hongo, determinndose la concentracin de la suspensin resultante,
mediante recuento en la cmara de Neubauer. Posteriormente se estandariz
dicha suspensin a la concentracin de 10 9conidias.ml-1. Este procedimiento se
emple para cada una de las concentraciones del hongo a evaluar.Se usaron 3
concentraciones de ccultivos de Trichoderma harzianum1 x 109 conidios ml, 1 x
1018 conidios ml ,1 x 1027 conidios ml,
las que fueron suministradas por el
laboratorio de bioinsumos Cipriano Castro

Inoculacin de Trichoderma Harzianum
El da del trasplante de los fosforitos de caf se inocul una suspensin de 10 9
conidios.ml-1 al tratamiento 2 y tratamiento 5, luego se inocul una suspensin de
1018 conidios.ml-1 al tratamiento 3 y tratamiento 6, luego se inocul una suspensin
de 1027 conidios.ml-1 al tratamiento 4 y tratamiento 7, Para cada tratamiento se
realiz 4 inoculaciones del hongo respectivo, con un intervalo de 25 das entre
cada una de ellas. Las bolsas se incubaron a temperatura ambiente.
Tres das despus de inoculada la suspensin con la respectiva concentracin de
conidios de cada tratamiento, se procedi a tomar una muestra de 0,5 kg de
sustrato de cada tratamiento y se determin la cantidad de juveniles 2 de
Meloidogyne spp en el sustrato inoculado con trichoderma harzianum. Cada
sustrato se pas por tamices de 145 y 38 m, de mayor a menor tamao
respectivamente.
Posteriormente se procedi a extraer las plantas pertenecientes a cada
tratamiento y se determin el peso de las races de coffea arabica L,
expresndose estos resultados como porcentaje promedio.
III.1. Diagnstico de nemtodos Fitoparsitos en el sustrato a ser empleado
en viveros de cafeto (Coffea arabica L)

27
Con el objetivo de realizar el diagnstico y la susceptibilidad de los nemtodos con

la aplicacin de Trichoderma harzianum
se llevaron muestras de sustratos al
laboratorio de anlisis. La extraccin de nemtodos se realiz por el mtodo de

tamizado y decantacin, segn Cobb (1981) modificado. El procedimiento seguido
para la aplicacin de esta metodologa y los materiales necesarios fueron
siguientes:
Material necesario:
- 100 ml de suelo
- 2 recipientes (baldes 1 y 2) de aproximadamente 4 litros de capacidad
- 1 esptula
- Tamices de 500u \ 34 mesh, 350u \ 45 mesh, 175u d 80 mesh 100u \ 150 mesh,
50u \ 280 mesh
- 4 beakers (vasos) de 500 \ 250 ml.
Procedimiento:
1. Se coloc 100 ml de suelo en un recipiente o balde (1) con agua (m<s o menos
2 litros). Agitar bien con una esptula para separar los nemtodos de las partculas
del suelo, se dej reposar la suspensin por 5 segundos para permitir que las
partculas ms grandes del suelo sedimenten.
2. Se pas toda la suspensin a travs de un tamiz de 500u sobre el otro
recipiente o balde. Se descart el suelo que qued en el balde 1 y el material
grueso que ha quedado en el tamiz de 500u, porque todos los nemtodos activos
han pasado a travs del tamiz y se encuentran en el recipiente 2. Algunos
nemtodos muy largos como los Mermithidae y algunos Longidoridae, no pasan
rpidamente, por lo que es conveniente agitar suavemente dentro del agua los
restos que quedaron en el tamiz.
28
3. Se agit la suspensin que contiene el recipiente 2 y se filtr lentamente por un

tamiz de 350u sobre el recipiente 1 una vez lavado y esterilizado este. Al suelo
que ha quedado en el recipiente 2 agreg un poco ms de agua. Se repiti esta
operacin una tercera vez. Se descarta el suelo que queda en el recipiente o balde
2 y deje limpio el recipiente.
4. Lo que queda en el tamiz de 350u son los nemtodos activos muy grandes
como Longidorus y algunos Xiphinema. Para extraerlos se enjuaga el tamiz con
un frasco lavador y recoja la suspensin en un beaker que le llamaremos 1. Esta
operacin se realiza cada vez que se pasa la suspensin del recipiente 2, a travs
del tamiz de 350 u. Deje limpio el tamiz de 350u.
5. Agitar la suspensin que se colecta en el recipiente 1 del paso 3, y pasndola
lentamente a travs de un tamiz de 175u sobre el recipiente 2 el mismo nmero de
veces y de la misma manera como en el paso 3. Descarte el suelo que queda en
el recipiente 1 y deje limpio el recipiente.
6. Lo que queda en el tamiz de 175u son nemtodos medianos como por ejemplo:
Helicotylenchus. Para extraerlos, enjuague el tamiz con un frasco lavador y
reciba la suspensin en un beaker que le llamaremos 2. Esta operacin se realiza
cada vez que se pasa la suspensin del recipiente 1 sobre el tamiz de 175u. Deje
limpio el tamiz de 175u.
7. Agitar la suspensin que se colecta en el recipiente 2 del paso 5 y pasarla
lentamente a travs de un tamiz de 100 u, sobre el recipiente 1, de la misma
manera y el mismo nmero de veces como en el paso 3. Descarte el suelo que
queda en el recipiente 2 y deje limpio el recipiente.
8. Lo que queda en el tamiz de 100u son nemtodos pequeos como por ej.:
Pratylenchus, para extraerlos enjuague el tamiz con el frasco lavador y reciba la
suspensin en un beaker al que llamaremos 3. Esta operacin se realiza despus
que se pasa la suspensin del recipiente 2 sobre el tamiz de 100 u. Deje limpio el
tamiz de 100 u.
29
9. La suspensin que se recibi en el recipiente 1 del paso 7 se agita y pasa

lentamente a travs de un tamiz de 50 u, el mismo nmero de veces y de la misma
manera como en el paso 3. La suspensin que pasa por el tamiz y el recipiente 1
se descarta. Se deja limpio el recipiente.
10. Lo que queda en el tamiz de 50u son los nemtodos ms pequeos y
juveniles; para extraerlos enjuague el tamiz con un frasco lavador y reciba la
suspensin en un beaker que llamaremos 4. Deje limpio el tamiz de 50 u.
11. Los nemtodos que se encuentran en los beakers 1, 2, 3 y 4 se observan
directamente pero si las suspensiones contienen muchas partculas de suelo y
estn turbias, se pueden colocar en embudos de Baerman o filtros de algodn
para clarificar las suspensiones.
Despus del mtodo de Coob (1981) se realiz el mtodo del embudo de
Baerman para lo cual seguimos los siguientes pasos:
1. Coloque los embudos sobre los soporte de madera o metal, coloque las
mangueritas en la parte final del embudo y cirrelas con el clip.
2. Colocar el suelo sobre el pedazo de nylon, amrrelo y pngalo en el embudo.
3. Con un frasco lavador agua llene con cuidado el embudo.
4. Al cabo de 48 horas los nemtodos pasaran por la gasa o nylon hacia el fondo
del embudo.
5. Abrimos el clip y recolectamos los nemtodos en una caja Petri.
6. se realizaron los conteos e identificacin en el estereoscopio.
El experimento se realiz con un diseo de bloque al azar y 10 repeticiones.
30
III.2. Determinar al efecto de la aplicacin de Trichoderma harzianum en

variables de desarrollo de las plntulas de (coffea arabica, L).
De los tratamientos 1, 2,3, y 4 se tomaron muestras de plntulas (10 plantas por
tratamientos con tres repeticiones) cada 25 das (momento de evaluacin; a los
28, 53, 78 y 103 das) y se midieron las siguientes variables de desarrollo:
Peso seco de races: Para determinar el peso seco de las races se colocaron en
un horno, marca 1DIES, ubicado en el Laboratorio de Qumica de Suelos de la
Universidad Nacional Experimental del Tchira a una temperatura de 80C en
diferentes momentos por espacio de 72 h Las muestras se pesaron con balanza
digital OHAUS Analytical Plus, hasta alcanzar un peso constante.
Altura (cm) de plntulas: se hizo con una cinta mtrica, tomando la distancia desde
el nivel del suelo hasta la base de las hojas.
Nmero de hojas: se determin por conteo directo en la cual se contabilizo las
hojas verdaderas.
Dimetro del tallo (mm) se realiz con un vernier a un centmetro por encima del
cuello de la plntula.
Anlisis estadstico de los resultados.
Todos los experimentos se realizaron con un diseo de bloque al azar con tres
repeticiones. Se realizaron pruebas paramtricas (t- test, ANOVA bi-factorial,
Tukey p 0,05) despus de chequear la distribucin normal y la homogeneidad de
varianza con la ayuda del paquete estadstico Statistix versin 8.0
31
IV. RESULTADOS Y DISCUSIN

IV.1 Diagnstico de nemtodos fitoparsitos en el sustrato a ser empleado
en viveros de cafeto (Coffea arabica L)
El diagnstico de nemtodos fitoparsitos en el sustrato para ser empleado en

viveros de cafeto (Coffea arabica L) se observa en la figura 1.
10
9
8
7
6
Cantidad de nemtodos
meloidogyne sp
pratylenchus sp
rotylenchus
4
nemtodos de vida libre
3
2
1
0
MUESTRA DE TIERRA NEGRA
Figura 1. Cantidad de nemtodos fitoparasitos presentes en los materiales

empleados en la mezcla para el sustrato del vivero de caf (Coffea arabica L.).
El anlisis mostr que la mayor cantidad de nemtodos de vida libre se encontr

en la muestra de tierra negra, seguidos en la muestra de materia orgnica. Los
mayores
valores
fundamentalmente
de
los
nemtodos
fitoparsitos
se
presentaron
en los gneros meloidogyne y pratylenchus y la menor

32
cantidad fue encontrada es el gnero rotylenchus. En la muestra de arena lavada

de rio no se identific ningn tipo de nemtodo.
Segn Carvajal (1984), la apertura de nuevas reas cafetaleras, as como la
sustitucin de plantaciones viejas con variedades de alto rendimiento requiere
producir grandes volmenes de plantas de buena calidad en vivero (almcigo)
para establecer plantaciones sanas, vigorosas y por consiguiente, capaces de
producir altos rendimientos.
En reas destinadas al establecimiento de los viveros de caf por lo general se
encuentran infestaciones de nemtodos, lo cual resulta perjudicial para el cultivo.
Tradicionalmente para los viveros se usan entre otros sustratos compuestos por
tierra negra que a pesar de ser la que tiene la mayor concentracin de materia
orgnica, se encuentran infestadas por nemtodos de diversos gneros Carvajal
(1984).
Mndez (2006) establece 24 gneros de nemtodos fitoparsitos que incluyen
especies que atacan cultivos de importancia econmica, las cuales se estima que
causan prdidas de alrededor del 10% de la produccin agrcola mundial, esto
representa un tercio de las prdidas atribuidas a plagas. En Cuba, Fernndez
(1995) refiere afectaciones por nemtodos fitoparsitos en diferentes cultivos de
importancia econmica como: caa (Saccharum officinarum L.), caf (Coffea
arabica L.), tabaco (Nicotiana tabacum L) y otros vegetales.
Para que ocurra un crecimiento satisfactorio de la planta se necesita de un suelo
formado por materiales slidos, lquidos y gaseosos, que deben estar presentes
en las proporciones adecuadas Hartmann y Kester, (2007). Segn estos mismos
autores, un factor importante en el suelo es el tamao de sus partculas, que
influyen en la absorcin de los nutrientes que luego son extrados por las plantas.
En la investigacin que se realiz, se utiliz una mezcla de sustratos que incluy,
tierra negra, arena lavada de ro y materia orgnica porque es la que
tradicionalmente se usa en los viveros de caf, aun cuando se conoca que tena
presencia de nemtodos.
33
IV.2. Determinacin del efecto de la aplicacin de Trichoderma harzianum en

variables de desarrollo de las plntulas de (coffea arabica, L).
Se observa en la figura segunda , la cantidad de nemtodos fitoparsitos con diferentes
concentraciones de Trichoderma harzianum, en los diferentes momentos de evaluacin
del sustrato ms la plntula. En la figura A T1 (testigo) se observ en este ensayo que
ambos gneros disminuyeron sus poblaciones, lo que pudo estar motivado a las altas
temperaturas que se presentaron en el recipiente de muestreo en ese perodo de
evaluacin. En la figura B correspondiente al T2 con aplicaciones de Trichoderma
harzianum 1X109 uc.ml se logr un descenso en los nemtodos, especialmente en los
del gnero meloidogyne spp, no se mostraron diferencias significativas entre los
gneros estudiados para ninguno de los momentos de evaluacin, aunque se sigue
una tendencia a disminuir sus poblaciones, lo que evidencia que Trichoderma
harzianum realiza un control efectivo sobre los dos tipos de nemtodos.
Leyenda: letras diferentes para un mismo momento de evaluacin difieren segn Tukey, p< 0,05. A: testigo, B:
sustrato+ plntula + trichoderma harzianum 1X1009 uc.ml. C: sustrato+ plntula + trichoderma harzianum
1X1018 uc.ml. D: sustrato+ plntula + trichoderma harzianum 1X1027 uc.ml
34
Figura 2.Cantidad de nemtodos fitoparsitos con la aplicacin de Trichoderma
harzianum a diferentes concentraciones, en los diferentes momentos de

evaluacin del sustrato y la plntula.
En la figura C tratamiento tres correspondiente al tratamiento T3, se muestra la
cantidad de nemtodos fitoparsitos con la aplicaciones de Trichoderma
harzianum 1X1018uc.ml, en los diferentes momentos de evaluacin del sustrato
ms plntula .En este tratamiento cabe sealar que los nemtodos pratylenchus
spp tuvieron una resistencia a los 53 das despus del trasplante, mientras que los
Meloidogyne se mantuvieron en descenso desde el primer momento de la
aplicacin. El cuarto tratamiento (D) se puede observar que los dos gneros de los
nemtodos desde el primer momento de evaluacin
tuvieron tendencia a
disminuir sus poblaciones, logrando a los 103 das despus del trasplante el
control casi total de los fitoparsitos presentes en el sustrato ms la plntula.
Dentro del gnero Meloidogyne han sido descritas ms de ochenta especies
Subbotin y Moens, (2006), de las cuales diez son importantes organismos
causantes de plagas, y cuatro de ellas se encuentran distribuidas en reas
agrcolas de todo el mundo, por lo que se consideran las principales especies de
este gnero.
Estas especies son: M. incgnita, M. javanica (Treub) Chitwood, M. arenaria (Neal)
Chitwood y M. hapla (Chitwood). Las dos primeras son ms comunes en climas
tropicales, M. arenaria es frecuente en climas subtropicales y M. hapla en regiones
templadas, aunque tambin puede encontrarse en las zonas altas de las regiones
tropicales. En Cuba se ha informado la presencia de M. incgnita, M. arenaria, M.
javanica, M. hapla, M. grahami Golden y Slana y M. mayaguensis Rammah y
Hirschmann.
Segn Fundesyram (2013), se conoce como semillero de caf al lugar que el
productor selecciona y acondiciona para depositar la semilla de caf, para que
germine, emerja y alcance el desarrollo necesario para el trasplante al vivero o
criadero de caf. sta, bajo condiciones adecuadas de temperatura, humedad y
luminosidad, germina en promedio a los 45 das despus de sembrada, el fruto
deber tener buena calidad tanto fsicas (peso, densidad, forma, tamao y color
35
del grano) como qumicas y organolpticas, encontradas luego de un muestreo y

anlisis de laboratorio (aroma, sabor, cuerpo y acidez).
Encontrar el sustrato adecuado ayudar a disminuir el rango de daos causados y
contribuir al desarrollo adecuado de la planta, es una forma de prevenir
enfermedades razn por la cual producir buenas plantas en los viveros es
fundamental para el sector cafetalero. Sarmiento (2011).
Los niveles poblacionales y duracin del ciclo de vida de Meloidogyne spp.
Dependen de su adaptacin al ambiente fsico y biolgico del suelo, su
compatibilidad con la planta hospedante y el consiguiente acceso a fuentes de
nutrientes. En el suelo, es difcil separar la interaccin de factores tales como
textura, humedad, aireacin y temperatura. La temperatura se considera el factor
que mayor influencia tiene en la duracin del ciclo de vida de Meloidogyne spp.
Cuando sta se mantiene a bajos niveles, el nmero de nemtodos se incrementa
lentamente y con el aumento de las temperaturas se reduce la duracin del ciclo.
El proceso completo alcanza alrededor de tres semanas entre 28 y 30 0C.
Si se tiene en cuenta que las relaciones entre los nemtodos fitoparsitos, sus
hospedantes y el ambiente varan de acuerdo a la combinacin nemtodo-planta
hospedante, la regin geogrfica y las caractersticas del agro ecosistema; el
agricultor, adems del conocimiento de la biologa, hbitos de vida y alimentarios
de la plaga, debe tomar en cuenta los elementos anteriormente mencionados para
la adopcin de las tcticas y estrategias de manejo ms adecuadas para su
situacin particular; as como, deben contar con varias opciones que puedan
evaluar y asumir, segn sus necesidades y disponibilidad de insumos.
Los dos principales gneros o grupos de nemtodos parsitos del cafeto, son los
nemtodos
"lesionadores"
(Pratylenchus)
los
nemtodos
"agalladores"
(Meloidogyne). Datos recientes indican que en la zona Sur y Suroccidental,

aproximadamente el 20% de los cafetales presenta fuertes niveles de dao
ocasionados por nemtodos, con prdidas de produccin de hasta 60% en los
lotes afectados. Las plantas afectadas muestran sntomas de amarillamiento,
prdida de vigor, defoliacin.
36
En la figura tercera se muestra la cantidad de nemtodos fitoparsitos con la

aplicacin de Trichoderma harzianum a diferentes concentraciones, en los
diferentes momentos de evaluacin del sustrato sin plntula. Mostrando igual
comportamiento para los tres tratamientos evaluados, aunque es notorio destacar
que en la figura B y C a los 103 das despus del trasplante se realizo un control
efectivo de los nemtodos fitoparsitos.
Leyenda: letras diferentes para un mismo momento de evaluacin difieren segn Tukey, p< 0,05. A: sustrato+
trichoderma harzianum 1X1009 uc.ml. B: sustrato + trichoderma harzianum 1X1018 uc.ml. C: sustrato +
trichoderma harzianum 1X1027 uc.ml
Figura 3.Cantidad de nemtodos fitoparsitos con la aplicacin de Trichoderma
harzianum a diferentes concentraciones, en los diferentes momentos de

evaluacin del sustrato.
Este comportamiento se produce a partir de las altas concentraciones de

trichoderma aplicado al sustrato lo que ocasion la eliminacin total de los
parasitoides presentes en el sustrato de los dos gneros evaluados.
Los resultados muestran la capacidad bioestimulante de Trichoderma spp., tal
fenmeno se le atribuye al control realizado sobre Meloidogyne spp., a la
37
produccin de metablitos estimuladores del crecimiento vegetativo por parte del

hongo, o la accin simultnea de ambos factores. Se sabe que Trichoderma es un
antagonista de excelencia, comprobada su efectividad no solo contra Meloidogyne
spp. Sino tambin sobre numeroso patgeno del suelo que pueden afectar el
crecimiento y desarrollo del cultivo. Chung y Baker (1986) encontraron
incrementos en el crecimiento y desarrollo de las plantas con la aplicacin de
bioestimulantes.
Se observa en el sexto tratamiento un descenso gradual de los nemtodos sin
presentar resistencia en ningn da del tratamiento.
Inicialmente deben tomarse en cuenta los antecedentes de la finca por medio de
resultados de laboratorio; sntomas en las races; historial de lotes "problema". Si
no se tienen estos datos es necesario proceder a muestrear las diferentes reas
de la finca, especialmente las que tienen plantas clorticas y defoliadas. La
identificacin por anlisis nematolgico de las poblaciones de los gneros y/o
especies de nemtodos presentes, determinarn las alternativas de control ms
apropiadas para cada caso.
a. En el caso de plantaciones nuevas no injertadas, deben considerarse solamente
cafetales con potencial productivo y que lleven un adecuado manejo agronmico
(sombra regulada, fertilizacin, conservacin de suelos, adicin de materia
orgnica). Bajo estas condiciones, el uso de nematicida puede tener respuesta
econmica, la recomendacin general es aplicar 1 gramo de ingrediente activo por
planta al inicio de las lluvias, y cuando se realizan dos, efectuar la primera al inicio
y la segunda al final del perodo de lluvias.
b. En cafetales de ms de 10 aos (sin injerto) debe evaluarse su rentabilidad, la
utilizacin sistemtica de nematicidas no es aconsejable. En condiciones de baja
productividad y plantas muy afectadas se recomienda la renovacin utilizando
plantas injertadas.
Los controles qumicos han sido dirigidos a la desinfeccin de los suelos, mediante
la aplicacin de productos. Sin embargo, el gran volumen de suelos a tratar, hace
que esta medida sea muy cara, adems de depender de qumicos de gran
toxicidad. Hooper y Evans, (1993).
38
En el campo los daos ms intensos son provocados por este tipo de nemtodos,
en estos casos, el control qumico es poco efectivo y antieconmico. Estos lotes
deben ser renovados con plantas injertadas.
A escala mundial, existe una gran abundancia de antecedentes que permiten
aseverar que los nemtodos son atacados por numerosos y variados organismos
del suelo, pero la accin de ellos an es poco conocida. Jimnez, (1979). Segn
Arauz, (1998).
En la figura cuarta se puede observar que el nivel ms elevado de infestacin se
presenta para meloidogyne spp en el T3 hasta el 3er momento de medicin a
comparacin con los dems, esto indica que las poblaciones de este gnero de
nemtodos son abundantes para las condiciones de vivero en la zona estudiada,
sin embargo, estas disminuyen significativamente con el tiempo de aplicacin,
denotndose la efectividad de las aplicaciones realizadas, acotndose que su
control casi total es con altas concentraciones de conidios de t. harzianum y
despus de varias aplicaciones.
60
50
40
Nemtodos (unidad)
54.6
52.3
5250.5 51.2
51.7
50.9
41.139.3
33.8
52.2
39.9
42.6
39
38.1
31.2
30
26.7
20
21.7
18.2 19.1 17.2
3.1
T1
T2
T3
17
20
13
2.3
1.2
T4
03 das
27.4
11.6
10
34
40
34.7
T5
T6
23
9.8
28 das
53 das
78 das
103 das
0.1
T7
Tratamientos
Leyenda: letras diferentes para un mismo momento de evaluacin ninguno difiere segn Tukey, p< 0,05. T1:
testigo E = m 0,5; T2: sustrato + plntula + trichoderma harzianum 1X1009 uc.ml. E= m 0,94; T3: sustrato +
plntula + trichoderma harzianum 1X1018 uc.ml. E= m 0,64; T4: sustrato + plntula + trichoderma harzianum
1X1027 uc.ml. E= m 0,64; T5: sustrato + trichoderma harzianum 1X1009 uc.ml. E= m 0,88; T6: sustrato +
39
trichoderma harzianum 1X1018 uc.ml. E= m 0,78; T7: sustrato + trichoderma harzianum 1X1027 uc.ml E = m
0,82;
Figura 4. Susceptibilidad de meloidogyne spp
con la aplicacin de 3
concentraciones de conidios de Trichoderma harzianum a travs de muestreos al

sustrato.
Estos gneros de nemtodos causan enfermedades en las plantas con diversos
sntomas. En primer lugar daan directamente a las clulas y tejidos
alimentndose de ellos o perforndolos, lo que hace que los rendimientos de los
cultivos se afecten, sin embargo, este dao depende de la planta y del nemtodo
que ataca la raz,
daos tales como : puntas abultadas de la raz, agallas,
lesiones o races acortadas y atrofiadas, adems se
afecta la extraccin de
nutrientes y agua, provoca el marchitamiento y otros sntomas areos, La picadura

de los nemtodos puede tambin causar heridas para la entrada de hongos y
bacterias que causan podredumbre de la raz y marchitamiento vasculares, Los
nemtodos carecen de aparato respiratorio, y circulatorio los que afectan la planta
tienen una estructura llamada estilete son fitoparsitos.
Segn Prez et al. (2006) el trichoderma harzianum es un hongo antagonista
empleado puede producir diferentes antibiticos voltiles y no voltiles, es capaz
de parasitar, controlar y destruir los fitonemtodos, sobre todo los del gnero
Meloidogyne.
En la figura quinta se puede observar el nivel ms elevado de infestacin para el
gnero pratylenchus spp en los diferentes momentos de la medicin y se aprecia
un comportamiento similar al del gnero Meloidogyne spp, para el tratamiento
que no recibi inoculacin T1, poniendo una vez ms en evidencia la efectividad
que ejerce el Trichoderma como biocontrolador de esta plaga. El desarrollo de los
nemtodos en el suelo est influenciado por el manejo inapropiado de este, en
propiedades tales como humedad, aireacin y temperatura. Plantas en contacto
con el suelo y material de propagacin vegetativa infectada son los responsables
de este efecto.
40
56.6
60
50
42.9
40.2
40.2
36.7
40 36.5
Cantidad de nemtodos
03 das
30
32.9
30.3
30.6
30
29.8
23.3
21
19.6
53 das
16.5
28 das 20
7818.6
das
T2
44.3
34.1
28.1
103 das 19.8
8.9
2.6
T1
29.1
29
23
22.6
14
13.6
10
0
22.2
40.8
39.5
35.6
T3
3.3
T4
2.3
T5
T6
1
T7
Tratamientos
Leyenda: letras diferentes para un mismo momento de evaluacin difieren segn Tukey, p< 0,05. T1: testigo
E = p 0,62; T2: sustrato + plntula + trichoderma harzianum 1X1009 uc.ml. E= p 0,85; T3: sustrato + plntula +
trichoderma harzianum 1X1018 uc.ml. E= p 0,67 T4: sustrato+ plntula + trichoderma harzianum 1X1027 uc.ml.
E= p 0,72. T5: sustrato+
trichoderma harzianum 1X1009 uc.ml. E= p 0,96; T6: sustrato + trichoderma
harzianum 1X1018 uc.ml. E= p 0,78; T7: sustrato + trichoderma harzianum 1X1027 uc.ml E = p 0,96
Figura 5. Susceptibilidad de
pratylenchus spp con la aplicacin de 3
concentraciones de conidios de Trichoderma harzianum a travs de muestreos al

sustrato.
Como se puede observar en la figura sexta, disminuyo significativamente la masa
de huevos despus de la aplicacin del trichoderma en concentraciones ms
elevadas, en la que adems se observa, entre el tratamiento 3 y el tratamiento 4
que no existen diferencias significativas estadsticamente. El nemtodo formador
de ndulos en races ( Meloidogyne incgnita) ocasiona,
graves daos
econmicos en los cultivos bajo invernadero, para las condiciones de

Extremadura, Espaa, sobre todo para aquellos terrenos que se sitan en zonas
arenosas, por lo que este gnero de nemtodos fitoparsitos son los considerados
de mayor importancia mundial, siendo los ms extendidos por todo el mundo, ya
que afectan a ms de 3.000 especies de plantas, al ser altamente especializados,
su infeccin se caracteriza por la formacin de agallas.
41
3.5 3.3
3
2.66
2.5
2
2
Cantidad de masa de huevos
1.55
1.5
0.80.77
0.330.22
0.5
0
masa de huevos ANTES de

aplicacin
masa de huevos DESPUS
de aplicacin
T1 T2 T3 T4
Tratamientos
Leyenda: letras diferentes para un mismo momento de evaluacin difieren segn Tukey, p< 0,05. T1:
testigo; T2: sustrato + plntula + trichoderma harzianum 1X1009 uc.ml; T3: sustrato + plntula + trichoderma
harzianum 1X1018 uc.ml; T4: sustrato+ plntula + trichoderma harzianum 1X1027 uc.ml. ES x antes = 0,53; ES
x despus = 0,32
Figura 6. Desarrollo de las plntulas de caf (Coffea arabica L) con la aplicacin

de 3 concentraciones de conidios de Trichoderma harzianum en cuanto a nmero
de agallas.
Los daos causados por Meloidogyne incgnita se manifestaron por la declinacin
de las plantas de forma prematura, poco desarrollo del rea foliar, clorosis y poco
desarrollo del sistema radical, lo cual coincide con los resultados obtenidos por
Dunn (2001) y Noling (1999). Estos nemtodos provocan profundas lesiones en
las races; en el punto de infeccin se desarrolla una necrosis que se extiende
inicialmente en la superficie de la raz y posteriormente hacia el interior de la
misma, en esta fase la corteza de las races pequeas es destruida provocando su
separacin del cilindro central dando la apariencia de "pelos" finos.
El efecto combinado de estos cambios es una alteracin de la fisiologa del
husped, una reduccin del crecimiento de races y brotes, as como de la
biomasa de la raz, clorosis de las hojas debido a que las races son daadas. Las
plantas tambin manifiestan signos de deficiencia de agua en las horas de mayor
calor.
42
El controlador biolgico estudiado reduce la eclosin de huevos y la movilidad de

larvas a concentraciones mayores de 108 con/g, la efectividad tcnica de las
aplicaciones alcanza valores elevados con dosis mayores de 1013 con/ha cuando
las poblaciones del parsito no exceden de grado 3. La eficacia del hongo en el
suelo se incrementa a medida que l se establece, Prez et al., (2006).
IV.3 Desarrollo de las plntulas de caf (Coffea arabica L) con la aplicacin

de 3 concentraciones de conidios de Trichoderma harzianum con respecto
al peso fresco radical, peso seco radical, altura de las plntulas, dimetro
del tallo y el nmero de hojas en el vivero.
En la figura sptima se puede observar que despus
de aplicados los
tratamientos, en las plantas a los 103 das despus del trasplante se obtuvo mayor
peso seco radical, lo que se corresponde con una respuesta fisiolgica del cultivo,
lo cual es normal su incremento, sin embargo, el tratamiento que mejor resultado
obtuvo fue el tratamiento 4 que es el de mayor concentracin de conidios de
trichoderma harzianum.
53 DDT
78 DDT
103 DDT
T1
4,02
4,25
5,32
T2
4,71
5,11
6,11
T3
4,97
5,37
6,27
T4
5,04
5,44
6,34
Leyenda: T1: testigo; T2: sustrato + plntula + trichoderma harzianum 1X1009 uc.ml; T3: sustrato + plntula +
trichoderma harzianum 1X1018 uc.ml; T4: sustrato+ plntula + trichoderma harzianum 1X1027 uc.ml.

de 3 concentraciones de conidios de Trichoderma harzianum en cuanto a peso
seco radical.
Del Busto et al., (2007) y Santana et al., (2008), reportan incrementos en los
rendimientos del tomate, en casas de cultivo, con la aplicacin de T. viride a dosis
de 9.0 kg/ha. En este sentido Prez (2008), logr incrementos superiores al 50%
43
en rendimientos agrcolas con aplicacin de Trichoderma y otros productos

orgnicos en diferentes sistemas de la agricultura urbana.
18
16.84
16
10
Altura (Centimetros)
15.1
14.85
14
altura de las plantas 3 das (cm)
12
10.87
8.68
7.83
8
6
4.43
4
2
altura de las plantas 103
0 das (cm)
T1
15.6

12.2
11.85
11.27
9.91
9.23
8.83
7.82
6.51
6.32
5.2
4.63
4.43
T2
T3
T4
Tratamientos
trichoderma harzianum 1X1018 uc.ml; T4: sustrato+ plntula + trichoderma harzianum 1X1027 uc.ml. ESx =
0,23
Figura 8 Desarrollo de las plntulas de caf (Coffea arabica L) con la aplicacin

de 3 concentraciones de conidios de Trichoderma harzianum en cuanto a altura
de las plntulas.
En la figura 8 se puede observar que despus aplicados los tratamientos las
plantas a los 103 das comenzaron a crecer ms rpido y en mejores condiciones.,
as como marcadas diferencias significativas entre todos los tratamientos, y del
cual se puede inferir que el mejor tratamiento para la altura de las plntulas es el
tratamiento 4 a los 103 das despus del trasplante.El empleo de mtodos de
control bien manejados como componente de la tecnologa de produccin, puede
ofrecer grandes beneficios econmicos, toxicolgicos, ambientales, siempre y
cuando se seleccionen el mtodo y las molculas adecuadas y su manejo se
44
ajuste a las recomendaciones de MIP. Cerca del 90% de los agricultores utilizan al
menos algunos de estos componentes: Las prcticas ms recomendables para un
manejo integrado son: Labores de cultivo, higiene y sanidad, variedades
resistentes, control biolgico, fsico y qumico.
4.5
3.83
4
3.5
Dimetro tallo 3 das (cm)
Dimetro (centimetros)
3.37
3.21
3.9
3.47
3.22
3.03
3
2.62tallo 28 das (cm)
Dimetro
2.5
2
1.5
1.43
4.07
3.9
3.79
3.62
3.6
3.31
3.27
2.91
1.75
1.65
1.37
1
Dimetro tallo 78 das (cm) 0.5
0
T1
T2
T3
T4
Tratamientos
trichoderma harzianum 1X1018 uc.ml; T4: sustrato+ plntula + trichoderma harzianum 1X1027 uc.ml. ESx =
0,06

de 3 concentraciones
de conidios de Trichoderma harzianum en cuanto al
dimetro del tallo.

Al igual que con el grafico anterior se puede observar un aumento en el dimetro
de la planta luego de ser aplicados los tratamientos. Notoriamente se observ en
el da 103 despus del trasplante, lo cual se corresponde con el desarrollo
fisiolgico normal del cultivo, pero si se observa detenidamente se infiere que las
plntulas de mayor desarrollo en el dimetro de su tallo son las del tratamiento 4,
a pesar de que todas fueron trasplantadas en la misma fecha, y se logra atribuir
este incremento del desarrollo a la mayor cantidad de conidios de trichoderma
harzianum, las cuales fueron empleadas en este tratamiento.
45
El control biolgico Basado en el uso de nematicidas no fumigantes. Actualmente,

es la alternativa ms eficiente para reducir los niveles poblacionales de
Fitonemtodos a densidades menores del nivel crtico. Sin embargo, la sociedad
consumidora de alimentos exige cada da mayor compromiso con el agro
ecosistema, sobre todo por las repercusiones negativas al ambiente y para el
consumo humano, de los ya conocidos nematicidas Carbofuran y Oxamil.
10
9
8
7
NM DE HOJAS 28 DAS6
5
Nmero de hojas
4
3
2
NM DE HOJAS 103 DAS
1
0
6.33
6
NM DE HOJAS 53 DAS
5
4.33
3.33
3
2.33
1.33
T1
8.6
7.6
6.33
6
NM DE HOJAS 78 DAS
4
4.33
2.33
T2
T3
T4
Tratamientos
trichoderma harzianum 1X1018 uc.ml; T4: sustrato+ plntula + trichoderma harzianum 1X1027 uc.ml. ES x =
0,55
de 3 concentraciones
de conidios de Trichoderma harzianum en cuanto al
nmero de hojas en el vivero.

El nmero de hojas fue en ascenso luego de comenzar la aplicacin del
tratamiento observndose hermosas plantas a los 103 das. Sobre todo en el
tratamiento T4, el cual posee la mayor concentracin de conidios de trichoderma
harzianum lo cual repercuti en el desarrollo, adaptacin, resistencia y tolerancia a
los daos por Fitonemtodos.
Los resultados evidencian, de forma general, que la aplicacin de los productos
biolgicos y orgnicos evaluados, promovi incrementos en el desarrollo del
46
cultivo, unido a un efecto positivo en la reduccin del grado de infestacin de

Meloidogyne spp., coincidiendo esto con los criterios de Verdejo (2005) y
Rodrguez (2007), quienes plantean que la aplicacin de materiales orgnicos y
preparados biolgicos permite un manejo de las poblaciones de nemtodos
fitoparsitos, incrementando el vigor de la planta y la obtencin de mayores
rendimientos en el cultivo.
Las plantas de cafeto necesitaron concentracin de conidios de trichoderma
harzianum altas
para alcanzar buen trmino previo a su establecimiento en
campo, mientras que en las concentraciones ms bajas hubo desarrollo del ciclo
biolgico sin que ello se reflejara en aumento del crecimiento. La altura de las
plantas a los 103 das fue de 16,84 cm presentando ventajas sobre las ms
pequeas, para el dimetro del tallo se debe acotar que alcanzo 4,07 cm el
tratamiento 4 en el mismo momento de medicin y para el numero de hojas
tambin alcanzo su tope mximo el tratamiento 4, y por tanto se recomienda la
aplicacin de trichoderma harzianum a razn de 1x 1027ufc /ml para producir
plantas vigorosas, potencialmente aptas para lograr cafetos adultos de elevado
rendimientos
47
V. CONCLUSIONES
1. Las poblaciones de nemtodos fitoparsitos encontradas en el sustrato para el
vivero de caf (Coffea arabica L), fueron los gneros meloidogyne spp,
pratylenchus spp, y otros gneros de vida libre.
2. En la evaluacin del meloidogyne spp
tratamientos se encontraron con
y pratylenchus spp todos los
una infestacin inicial alta,
sin diferencias
significativas entre ellos (figuras 4 y 5). Sin embargo, la infestacin final mostr
diferencias significativas entre los tratamientos evaluados. El menor grado de
infestacin final se obtuvo evaluando T7: sustrato + T. harzianum 1x1027ufc /ml a
los 103 das despus del trasplante sobre el resto de los tratamientos, sin
embargo el T4: sustrato + Plntula + T. harzianum 1x1027ufc /ml, es el que mejor
control proporciona en presencia de plntulas y en cuanto al nmero de agallas.
3. El tratamiento en el cual se evidencio el mayor desarrollo agroproductivo del
cultivo de caf (coffea arabica L) en vivero fue el tratamiento T4: sustrato +
plntula + T. harzianum 1x1027ufc /ml a los 103 das despus del trasplante, tanto
para peso seco radical, altura, dimetro del tallo y nmero de hojas.
48
VI. RECOMENDACIONES
Se recomienda continuar realizando estudios sobre control biologico con
trichoderma harzianum, en los cuales se debera incluir diversos factores agro
climticos los cuales influyen tanto en el ciclo biologico de la plntula de caf
(coffea arabica .l) como del trichoderma harzianum.
.
49
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55

Tesis Definitiva Scarlet 28 Mayo Ultima

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UNIVERSIDAD DE CIEGO DE VILA Mximo Gmez Bez

FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS.

Efectividad del (Trichoderma harzianum spp) sobre la poblacin de

Tesis presentada en opcin al grado acadmico de Mster en Agroecologa y

Autor: Ing. Scarlet Svetlana Snchez de Prato

UNIVERSIDAD DE CIEGO DE VILA Mximo Gmez Bez

Efectividad del (Trichoderma harzianum spp) sobre la poblacin de

Tesis presentada en opcin al grado acadmico de Mster en Agroecologa y

Autor: Ing. Scarlet Svetlana Snchez de Prato

La educacin empieza con la vida, y no acaba sino con la muerte.

A Dios y a la santsima Virgen Mara por darme la fuerza y la fe necesaria para

A DIOS primeramente por darme salud y permitirme cumplir esta meta.

A todos, muchas gracias, mil gracias.

Con el objeto de determinar la cuanta en que se puede prescindir del control

Trichoderma de 1 x 1018ufc/ml. T-4:plntula +

Trichoderma de 1 x 1027ufc/ml; T-5:sustracto solo + Trichoderma de 1 x 109ufc/ml;

los 103 das despus del

trasplante, Erradico en un 100% los nemtodos de los gneros meloidogyne spp

tratamiento de la semilla de caf.

suelo, sobre todo hongos y nemtodos fitoparsitos. Sin embargo, durante su

diversificacin intensa en los sistemas de produccin del rubro, tratndolo tanto

tomando la decisin ms viable hacia un determinado tratamiento, y que estos

Con la aplicacin de trichoderma harzianum en diferentes concentraciones se

la efectividad del Trichoderma harzianum sobre las poblaciones de

nemtodos fitoparsitos y el desarrollo del cafeto (Coffea arabica .L) en la unidad

aplicacin de tres concentraciones de conidios de Trichoderma harzianum.

II. REVISIN BIBLIOGRFICA

El germinador o semillero de caf es el paso siguiente a la seleccin y beneficio de

II.3.Preparacin y manejo del vivero, estructura y localizacin.

Para obtener arbolitos de caf de buena calidad es muy importante manejar y

utilizar diversas prcticas agrcolas que pueden resultar desfavorables para el

absorcin del agua en las plntulas, y cuyo manejo y control se ha

fundamentado bsicamente en el control qumico, empleando productos de alto

de sombra favorecen la persistencia de controladores biolgico Beauveria

uso de sustancias naturales cae dentro de la categora o clasificacin de combate

compitiendo con l por espacio, energa y luz. La produccin de antibiticos por

espacio, desactivacin de las enzimas de los patgenos, tolerancia al estrs por

Gordon, (1998). Ocurre durante la interaccin de compuestos de bajo peso

microorganismos. La mayora de las especies de Trichoderma producen

que la aplicacin de T. harzianum control la antracnosis en frutos de mango en

16 m de longitud. La cola es conoide y termina en una punta estrecha y

III. Materiales y Mtodos

III.0. Ubicacin y caractersticas climticas del rea experimental.

sembraron los correspondientes al tratamiento 1, a los cuales no se les aplic

Los tratamientos seleccionados fueron los siguientes:

correspondindose con los tratamientos 5, 6,7.

Se agreg 10 ml de agua destilada estril y 1 g del arroz colonizado con el hongo

las que fueron suministradas por el

laboratorio de bioinsumos Cipriano Castro

III.1. Diagnstico de nemtodos Fitoparsitos en el sustrato a ser empleado

en viveros de cafeto (Coffea arabica L)

Con el objetivo de realizar el diagnstico y la susceptibilidad de los nemtodos con

se llevaron muestras de sustratos al

laboratorio de anlisis. La extraccin de nemtodos se realiz por el mtodo de

3. Se agit la suspensin que contiene el recipiente 2 y se filtr lentamente por un

9. La suspensin que se recibi en el recipiente 1 del paso 7 se agita y pasa

III.2. Determinar al efecto de la aplicacin de Trichoderma harzianum en

IV. RESULTADOS Y DISCUSIN

El diagnstico de nemtodos fitoparsitos en el sustrato para ser empleado en

nemtodos de vida libre

Figura 1. Cantidad de nemtodos fitoparasitos presentes en los materiales

El anlisis mostr que la mayor cantidad de nemtodos de vida libre se encontr

en los gneros meloidogyne y pratylenchus y la menor