UNIVERSIDAD NACIONAL DE PILAR

Facultad de Ciencias Aplicadas

Instituto de Ciencias Ambientales
Ctedra de Ecotoxicologa y Biorremediacin Ambiental
PRCTICA DE FITORREMEDIACIN: MACRFITAS QUE EXTRAEN METALES
INTRODUCCIN
La Fitorremediacin se ha probado activamente desde principios de la dcada de los
noventa, y est en aumento. Hay pruebas a escala completa o de demostracin en ms de
200 proyectos en todo el mundo.
La Fitorremediacin se ha aplicado con cierto xito en tuberas, vertederos industriales y
municipales, campos agrcolas, antiguas plantas madereras, establecimientos militares,
reas para tanques de almacenamiento de combustible, plantas de municiones del ejrcito,
plantas de tratamiento cloacal y minas. Los primeros usos de la Fitorremediacin, a
mediados de los aos 90, fueron enfocados a la extraccin de metales pesados acumulados
en el suelo,
Entre los posibles contaminantes, se eligi el ion de cobre (II) porque todos los compuestos
de este ion deberan tratarse como si fueran txicos. Una cantidad de 30 g de sulfato de
cobre (II) es potencialmente letal para una persona. El agua con niveles superiores a 1 mg/l
puede ensuciar con cobre las ropas y objetos lavados con ella y aquellas que contengan ms
de 5 mg/l provocan la aparicin de color en el agua y le confieren un sabor desagradable.
La OMS en la Gua para la calidad del agua potable recomienda un nivel mximo de 2 mg/l
de ion cprico, valor adoptado por la Unin Europea como valor lmite, mientras que en
EE.UU. la Agencia de Proteccin Ambiental ha establecido un valor superior de 1,3 mg/l.
Las actividades mineras son las mayores fuentes de la contaminacin de ros y aguas
subterrneas con iones metlicos, siendo el cobre uno de ellos. Adems, la contaminacin
de suelos agrcolas por el ion cobre, se debe al empleo de determinados plaguicidas en la
produccin de frutales y hortalizas.
El sulfato de cobre (II) tiene color azul y la intensidad del color de sus soluciones es
directamente proporcional a la concentracin de dicha sal. Es decir que se cumple la ley de
Lambert Beer en un amplio rango de concentraciones. Esta propiedad permite utilizar
mtodos colorimtricos para determinar la cantidad de estos compuestos metlicos en
muestras desconocidas.
OBJETIVOS DE LA PRCTICA
Aplicacin prctica de los principios de Fitorremediacin en laboratorio para extraer
contaminantes no biodegradables del medio ambiente.
Determinar la capacidad de absorcin del ion cprico (Cu+2) en solucin, de dos
especies de macrfitas acuticas, Pistia stratiotes y Azolla spp, utilizando mtodos
colorimtricos.
Relacionar los resultados con su aplicacin en la Fitorremediacin de aguas
contaminadas con metales.

HIPTESIS.
Las macrfitas Pistia stratiotes y Azolla spp cultivadas en una solucin acuosa de
sulfato de cobre (II) absorben los iones cpricos de la solucin.
La intensidad de color (absorbancia) de las soluciones donde crecen las macrfitas
acumuladoras de iones cpricos decrece a medida que transcurre el tiempo debido a
que este parmetro es directamente proporcional a la concentracin de los solutos
coloreados en la solucin.
Las macrfitas acuticas Pistia spp y Azolla spp son tiles en Fitorremediacin.
MATERIALES Y REACTIVOS.
Macrfitas acuticas Pistia stratiotes y Azolla spp.
Solucin madre de sulfato de cobre (II) 0,25 M
Matraces aforados o probetas para realizar al menos 3 diluciones consecutivas 1:2
(0, 125 M, 6,25 x 10-2 M, 3,13 x 10-2 M).
Pipetas
Balanza analtica
Agua destilada
Erlenmeyer de 250 ml
Tapones de algodn o tapones de goma agujereados con un tubo tapado con algodn
que permita el intercambio de gases, pero evite la entrada de contaminantes del
ambiente.
Espectrofotmetro DR5000. En caso de no contar con este instrumento, puede ser
reemplazado por una escala colorimtrica que consiste en una gradilla de tubos de
ensayos con un amplio rango de concentraciones de soluciones standard de sulfato
de cobre (II).
Peachmetro y Conductmetro.
METODOLOGA.
Transferir 3 g de macrfitas a cada uno de los Erlenmeyer.
Agregar 150 ml de las soluciones de sulfato de cobre (II) segn el protocolo de la
Tabla N 1 a los Erlenmeyer conteniendo las macrfitas (siempre se trabajar por
duplicado). Taparlos con el tapn y colocarlos en una mesa cerca de la ventana para
que tengan una buena iluminacin.
Determinar el valor inicial de absorbancia de cada una de las muestras o el color y
coincidencia con el patrn de color, pH y conductividad.
Dejar las muestras en las mismas condiciones por 10 das y repetir el paso anterior.
Recolectar datos por un mes en intervalos de 10 das.
Calcular la variacin de absorbancia y/o concentracin en estos perodos. Construir
una tabla con los resultados y a partir de ellos realizar un grfico para mostrar la
variacin.
Realizar tambin un registro fotogrfico durante todo el experimento para observar
posibles cambios en la apariencia de la biomasa.
VARIABLES EXPERIMENTALES
Independientes: las concentraciones iniciales de iones cprico.
Dependientes: la velocidad de absorcin por las plantas. Absorbancia es la medida
de la cantidad de luz absorbida por una solucin, y es proporcional a la
concentracin. Se la determina con un colormetro o espectrofotmetro. El trmino
absorcin se refiere al proceso fsico de absorber luz. En el caso de una solucin, la
absorbancia mide absorcin.

 Controladas: se debe tener el mismo suministro de luz y oxgeno durante todo el

experimento (se utiliza el mismo lugar fsico para todo el experimento). La
temperatura, la presin y la humedad tendran que controlarse, se las deja en las
mismas condiciones ambientales durante un mes (se aproxima ms a la situacin
real donde sern colocadas las macrfitas).
EXPRESIN DE RESULTADOS.
Construir una tabla con los resultados, y, a partir de la misma realizar un grfico.
Concentraci
n del
CuSO4/M

VALOR
MUESTRA
INICIAL

VALOR
FINAL

DIFERENCI
A

% DE
REMOCI
N

de Remocin=

CiCf
100
Ci

Dnde:
Ci = concentracin inicial (mg/l)
Cf = concentracin final (mg/l)
CONCLUSIONES.
Presentar un informe en el esquema de un artculo cientfico con los siguientes apartados:
Ttulo.
Resumen.
Introduccin (basada en la descripcin de las macrfitas utilizadas, generalidades,
hbitat, potencial fitorremediador de medios contaminados con cobre)
Metodologa.
Resultados con Tablas, grficos y fotos.
Conclusiones.
Referencias Bibliogrficas.
BIBILOGRAFA.

Bernal, M. P. (1997). Rutas a tecnologas para la investigacin y limpieza de

terrenos contaminados. Apuntes. Departamento de Conservacin del Suelos y Aguas
y Manejo de Residuos Orgnicos de Edafologa y Biologa Aplicada. Consejo
Superior de Investigacin Cientfica. (CSIC). Murcia, Espaa.
Ballesteros, J. (2011). Determinacin de la eficacia de Azolla caroliniana como
matriz de hiperacumulacin de metales pesados cuantificados. Trabajo de Grado.
Universidad Politcnica Salesiana. Quito, Ecuador.