TEMA 13.

PRODUCCIN INDUSTRIAL DE
ANTIBITICOS
1. INTRODUCCIN
Los antibiticos son productos del metabolismo microbiano capaces de matar o inhibir el
crecimiento de otros microorganismos a bajas concentraciones.
Para buscar antibiticos que ataquen a las clulas bacterianas y no a las humanas debemos
buscar aquellos que destruyen elementos que no posean las clulas humanas y s las
bacterianas, como por ejemplo, la pared celular solo presente en las bacterianas, o los
ribosomas que son diferentes en ambos tipos de clulas.
De los grupos taxonmicos conocidos, las bacterias (unicelulares) son el 14& de los
antibiticos, los hongos el 22% y los actinomicetos (bacterias filamentosas) el 64%; el principal
productor de antibiticos es el gnero Actinomyces.
De los sistemas de produccin industrial solo unos pocos sirven y se usan comercialmente, el
principal es la fermentacin, que produce 123 antibiticos, luego los mtodos semisintticos, que
producen 50 y por ltimo los mtodos sintticos, con los que solo se han obtenido tres
antibiticos, cloranfenicol, fosfomicina y pirrolnitrina, ya que su estructura es muy simple.
De los 1600 antibiticos producidos por hongos, solo 10 son comerciales y solo 4 se usan en
clnica, penicilinas, cefalosporina C, griseofulvina y cido fusdico.
A partir de la dcada de los 70 no se ha descrito ningun nuevo antibitico que se pueda usar
en clnica, todos los que se han desarrollado son modificaciones de antibiticos ya conocidos;
esto se debe a que han aumentado muchsimo los costes para el desarrollo de un nuevo
antibitico, se necesitan desde que se describe a nivel de laboratorio hasta que se comercializa
una media de 10 aos y el coste es de entre 10 y 20 millones de euros, las pruebas clnicas son
lo ms costoso. La bsqueda de nuevos antibiticos por tanto se centra en la mejora de
antibiticos por procedimientos uqmicos o genticos (mutasntesis, fusin de protoplastos,
ingeniera gentica...) y en sintetizar antibiticos con estructuras bsicas nuevas, se realizan
screening en nuevos grupos de microorganismo y se utilzan nuevos procedimientos de prueba.

TIPOS DE ANTIBITICOS
Se pueden clasificar segn su estructura qumica:
-LACTMICOS
Penicilinas: Bencilpenicilina (Penicillium chrysogenum)
Clavamas: cido clavulnico (Streptomyces clavuligerus)
Cefalosporinas: 3 generacin.cefotaxina (Acremonium-Cephalosporium)
Monobactamas: Aztreonam (Chromobacterium violaceum)
Carbapenemas: Imipenem (Streptomyces cattleya)
MACRLIDOS: Eritromicina (Streptomyces griseus)
AMINOGLICSIDOS: Estreptomicina (Streptomyces griseus)
TETRACICLINAS: Doxiciclina (Streptomyces)
POLIPEPTDICOS: Bacitracina (Bacillus subtilis); polimixina B (Bacillus polymixa)
POLIENOS: Nistatina (Streptomyces noursei), anfotericina B (Streptomyces nodosus)
OTROS: Cloranfenicol (Streptomyces venezuelae)-ya no se usa en humanos
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2. ANTIBITICOS -LACTMICOS-PENICILINA
Todos los antibiticos -lactmicos tienen en comn el anillo -lactmico en su estructura.
La penicilina fue descrita por Fleming en 1929, aislada por Florey y Chain en 1940,
comprobaron que la penicilina era muy lbil al cido y se desactivaba, esto implica que la
penicilina G no se puede administrar oralmente. Florey y Chain viajan a EEUU y en 1942 ya
consiguen cantidad suficiente de penicilina para distribuirla, gracias al licor de maceracin del
maz que se us como caldo de cultivo para Penicillium. La penicilina es producidad por muchos
hongos como Penicillium y Aspergillus, adems tiene baja toxicidad, solo el 0.5-2 % de los
pacientes desarrollan alergias.
Las penicilinas son inhibidores especficos de la sntesis de peptidoglicano ya que son
anlogos estructurales de la D-alanil-D-alanina, pptido que une las cadenas de Nacetilglucosamina que forman la pared bacteriana.
Al ser anlogos estructurales las
transpeptidasas tienen mayor afinada por ellos y se unen irreversiblemente, inactivndolas.
La penicilina G es muy efectiva frente a G+, ya que para inactivar las transpeptidasas tiene
que entran en el interior de la clula y es ms difcil atravesar la membrana externa que poseen
las bacterias G-.
AMOXICILINA: es la penicilina que se puede administrar por va oral. El Clamoxyl es el
nombre comercial de un antibitico que contiene amoxicilina y cido clavulnico.

ESTRUCTURA Y SNTESIS
La penicilina est compuesta por el cido-6aminopenicilnico (6-APA), que en la posicin
6 tiene un radical que vara y en funcion de la
estructura que haya tendremos los distintos
tipos de penicilina.
La primera descrita,
llamada penicilina G, es la bencilpenicilina, y
tiene como radical all fenilactico. El 6-APA
consta del anillo -lactmico y un anillo
tiazolidnico.
Segn el medio de obtencin hay tres tipos de penicilinas, naturales, biosintticas y sintticas.
PENICILINAS NATURALES: Se producen cuando se lleva a cabo la fermentacin sin adicin
de precursores de la cadena lateral; solo es til teraputicamente la bencilpenicilina.

PENICILINAS BIOSINTTICAS: Se producen cuando se lleva a cabo la fermentacin con

adicin de precursores de la cadena lateral. De las ms de 100 penicilinas biosintticas
obtenidas solo se han comercializado la G, V y pequeas cantidades de O.

PENICILINAS SEMISINTTICAS: Se producen cuando se aade qumicamente la cadena

lateral al cido 6-APA

PRODUCCIN DE 6-APA: Penicillium

chrysogenum puede sintetizar este cido si el
medio de cultivo carece de precursores de la
cadena lateral. Sin embargo, la produccin de
6-APA en estas condiciones es tan pequea
que hace inviable este procedimiento.

Actualmente el uso de las penicilinas naturales es 38% en medicina humana, 12% en veterinaria
y un 43% son penicilinas semisintticas.

BIOSNTESIS Y REGULACIN
El cido 6-APA siempre est unido al
grupo acilo. La bencilpenicilina es un
tripptido cuyo origen es el anillo L-alfa
aminoadpico, al que se le une la L-cistena
y luego la L-valina. No se sabe muy bien
como ocurre, solo que en una ciclacin de
dos etapas se obtiene la isopenicilinaN
para luego dar la bencilpenicilina gracias a
la penicilina transacetilasa.

SISTEMAS DE REGULACIN:
-REGULACIN POR RETROALIMENTACIN.- La observamos en la biosntesis de lisina y
penicilina por Penicillium chrysogenum. Se produce porque a partir del -aminoadipato (-AA)
se produce lisina y bencilpenicilina. La lisina inhibe a la homocitrato sintasa, primera enzima de
la sntesis y se inhibe la sntesis de bencilpenicilina.

-REGULACIN CATABLICA: El azcar que reprime la biosntesis de la penicilina es la

glucosa, determinadas concentraciones hacen que la enzima se inactive y que se produzca
menos penicilina; se puede sustitiur la glucosa como fuende de carbono por lactosa o por una
cantidad inferior a la que acta como represor catablico.
-INDUCCIN ENZIMTICA
REGULACIN POR EL ESTADO ENERGTICO

DESARROLLO DE CEPAS
Es la obtencin de cepas ms productoras que la original. Mtodos:
-Mutacin-seleccin (mtodo ms utilizado):
La primera productora de penicilina fue el contaminante sobre el Staphylococcus aureus, ese
hongo era Penicillium notatum. En 1945 se cambi el hongo a P.chrysogenum. En 1951 se
empez a trabajar con P.chrysogenum NRRL
-Recombinacin
Los objetivos son:
1- Reunir en una cepa las mejoras obtenidas en varias por distintos mtodos.
2- Eliminar mutaciones indeseables que tienen defectos pleiotrpicos para el rendimiento
(limpieza gnica); el incremento de produccin es un 8%. Los defectos pleiotrpicos son
aquellos que reproducen en una mutacin al azar defectos colaterales al utilizar un mutgeno.
3- Eliminar en las cepas de alta produccin cambios fisiolgicos indeseables. Esporulacin
ms estable.
-Ingeniera gentica que incluye la tecnologa del DNA recombinante "in vitro"

MTODOS DE PRODUCCIN
Se aade cultivo hasta llegar a la produccin en fermentacin. Hay que evitar la formacin de
agregados, ya que son hongos filamentosos y puede haber un dficit de la llegada de oxgeno.
Una vez obtenida la penicilina se filtra y nos quedaremos con el sobrenadante de cultivo que se
purifica.
PROCESO FERMENTATIVO:
1- Fermentacin sumergida en tanques de 40000 a 200000L
2- Velocidad de aireacin: 0.5-1.0 vvm
3- Agitacin: impulsores tipo turbina (120-150 rpm)
4- Temperatura ptima: 25-27C
5- pH: 6.5
MEDIO DEFINIDO :
FUENTE DE CARBONO

Lactosa
Glucosa
Almidn

30 g/L
10 g/L
15 g/L

cido ctrico
cido actico

10 g/L
2.5 g/L

cido fenilactico

0.5 g/L

Etilamida
Sulfato amnico

3.0 g/L
5.0 g/L

Fosfato potsico
Sulfato magnsico
"
ferroso
"
cinc
"
cobre
"
manganeso
"
cobalto
"
sdico

1.0 g/L
0.5 g/L
50 mg/L
10 mg/L
10 mg/L
10 mg/L
5.0 mg/L
1.0 mg/L

Lactosa
Glucosa
Almidn

30-40 g/L
5.0 g/L
15 g/L

cido lctico
cido actico

0.5 g/L
0.5 g/L

PRECURSORES

cido fenilactico

0.5 g/L

FUENTE DE NITRGENO

Aminocidos
Aminas
Sales de amonio
Ntotal

1.5-2.0 g/L

CIDOS ORGNICOS
PRECURSORES
FUENTE DE NITRGENO
SALES MINERALES

MEDIO COMPLEJO:
FUENTE DE CARBONO

CIDOS ORGNICOS

ALIMENTACIN CONTINUA DEL FERMENTADOR

Con glucosa como fuente de carbono y amonio como fuente de nitrgeno; el rendimiento es:
65% en mantenimiento energtico, 25% en crecimiento, y un 10% en la penicilina.

RECUPERACIN DEL PRODUCTO

Se lleva a cabo por dos etapas de extraccin continua en contracorriente del caldo de
fermentacin con acetato de amilo o de butilo a 0-3C y pH 2.5-3-0. El caldo acuoso de
fermentacin se pone en contacto con un solvente inmiscible, se produce la concentracin de la
fase solvente y la purificacin adicional.
CRISTALIZACIN Y PRECIPITACIN: La penicilina G del caldo de fermentacin se pone en
contacto con acetato de butilo (solvente orgnico) y acetato potsico en solucin etanlica y
precipita la penicilina G con un rendimiento del 90%.