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Presentacin general y
conceptos bsicos
Justificacin
La biotecnologa se perfila como una de las reas
que generara grandes beneficios para la humanidad
Produccin y optimizacin de
procesos
Vegetal
Alimentos
Idea general
Ambiental
Objetivo general
Presentar al estudiante aspectos prcticos
relacionados con la Biotecnologa como sus
mtodos, tcnicas, logros, usos y perspectivas
futuras enfatizando los procesos que involucran
las plantas, los alimentos y el medio ambiente.
Objetivos especficos
Conocer algunas de las aplicaciones prcticas a nivel industrial y
medioambiental, de la biotecnologa de vegetal y ambiental.
Conocer algunas de las aplicaciones prcticas en las que la biotecnologa
aporta al mejoramiento del las plantas y el medio ambiente.
Motivar al estudiante de pregrado en la bsqueda de oportunidades de
desarrollo alternativo que cumplan con las expectativas requeridas por un
mundo globalizado.
Presentar al estudiante algunos de los desarrollos relevantes y de aplicacin
actual y/o prxima derivados del desarrollo biotecnolgico local y forneo.
Desarrollar en el estudiante hbitos de bsqueda y lectura crtica de
artculos aparecidos en publicaciones seriadas y textos especializados.
Conocer las tcnicas de uso comn en biotecnologa as como los equipos
asociados a ests.
Desarrollar las competencias de comunicacin oral y lecto-escritora en los
estudiantes.
BIO103 Introduccin a la Biotecnologa
Notas de clase J. Felipe Osorio-Tobn
Ph.D.
Metodologa
Clase Magistral
Profesor
Presentaciones
Estudiantes
Seminarios
Profesor
+
Estudiantes
Exmenes
Estudiantes
Seminarios
Introduccin.
Antecedentes histricos de los cultivos in vitro.
Plantas transgnicas y manipulacin vegetal
Biotica.
Introduccin.
Alimentos producidos a travs de la biotecnologa, Alimentos
GM, riesgos y seguridad alimentaria.
Desarrollo de sistemas reguladores, diagnostico e inocuidad de
los alimentos GM.
Biotica
Introduccin.
Microorganismos, plantas, animales en la bioremediacin.
Tratamiento de residuos slidos, aguas residuales y polucin.
Productos biotecnolgicos y su impacto a nivel ambiental.
Biotica.
Bibliografa
Addison-Wesley. (2010). Introduccin a la biotecnologa.
William J. Thieman, Michael A. Palladino.(2010). Introduccin a la
biotecnologa.
CEPAL. (2009). Biotecnologa y desarrollo. Comisin econmica para
Amrica latina y el Caribe.
M.C.Brown. (2009). Introduccin a la Biotecnologa. (2nd Edition)
Published by Benjamin Cumming.
Muoz M.A. Biotecnologa. Universidad Quilmes. ArgenBio.
Organizacin (2005). OMS. Manual de Bioseguridad en Laboratorio. 3ed
Ginebra.
Schaffe J. La promesa de la Biotecnologa. Departamento de estado de
Estados Unidos. Vol 10 / Num 4. 2005.
Renneberg, Reinhard. Biotecnologa para principiantes. 2008.
Biotecnologa
Como y porque?
BIO103 Introduccin a la Biotecnologa
Notas de clase J. Felipe Osorio-Tobn
Ph.D.
Qu es la biotecnologa?
Biotecnologa
La biotecnologa es un rea multidisciplinaria, que
emplea la biologa, qumica y procesos, con gran uso en
agricultura, farmacia, ciencia de los alimentos, ciencias
forestales y medicina.
Toda aplicacin tecnolgica que utilice sistemas
biolgicos y organismos vivos o sus derivados para la
creacin o modificacin de productos o procesos para
usos especficos
Uso de organismos vivos, o los productos de los mismos,
para el beneficio humano (o el beneficio de su entorno)
con el fin de desarrollar un producto o resolver un
problema.
BIO103 Introduccin a la Biotecnologa
Notas de clase J. Felipe Osorio-Tobn
Ph.D.
Mejorar, modificar
y crear SERES
VIVOS
MICROBIOLOGIA
GENETICA
INGENIERIA
BIOQUIMICA
BIOLOGIA
MOLECULAR
MATEMATICA
Procedimientos
y Tcnicas
Con fines
benficos
2000 a.C.
Chinos, babilnicos,
griegos, romanos y
egipcios.
BIO103 Introduccin a la Biotecnologa
Notas de clase J. Felipe Osorio-Tobn
Ph.D.
TIPOS DE BIOTECNOLOGA
BIO103 Introduccin a la Biotecnologa
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Ph.D.
Microbiana
Bacterias
Levaduras
Alimentos
Enzimas y
m.o.
Amb
Clonaciones
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Ph.D.
Vegetal
Transgnicos
Biocombustibles
Biofbricas
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Ph.D.
Animal
www.genome.gov
Anticuerpos
Knockout
Clonacin
Ambiental
Biorremediacin
Fitoremediacin
Alimentos
Transgnicos
Funcionales
Fermentaciones
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Ph.D.
Industrial
Metabolitos
primarios y
secundarios.
www.bioprocessonline.com
Cultivo celular.
Simulacin.
Downstream.
Fermentaciones
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Ph.D.
Biotecnologa vegetal
Fuentes: http://www.monsanto.com/
Brevsima historia
4.000 a.c.
Seleccin natural
Cruzamiento selectivo
ADN recombinante
Transgnicos
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Ph.D.
DARWIN
PASTEUR
La industria de conservacin de
alimentos.
MENDEL
ADN (1953)
Estructura
Replicacin
Transcripcin
Mayor obtencin
de alimentos
Aplicacin de
abonos y pesticidas
maz, el trigo y el
arroz
Nacimiento de la biotecnologa
Cohen y Boyer
domesticacin
del gen
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Ph.D.
Primeros avances
1982
1994
1999
2000
Casi se ha
duplicado
Solo ha
crecido
10%
Poblacin mundial
Plantas transgnicas
Transferencia de material gentico proveniente del
mismo u otro organismo (TRANSFORMACIN)
Nuevas tendencias
Caf descafeinado
Finalmente
www.ted.com/talks/pamela_ronald_the_case_f
or_engineering_our_food#t-324531
Cultivos in-vitro
Conceptos bsicos
Terminologa bsica
Determinacin
Totipotencialidad
Capacidad que tiene cualquier clula para dar origen a todos los
tipos de clulas diferenciadas de un organismo dado.
Competencia
Explante
Callo
Historia del
Cultivo de Tejidos Vegetales
Murashige y
Skoog (1962)
Fusin de
protoplastos
(1970)
Sacko y Knop
(1960)
Kinetina
embriognesis y
organognesis
(80s)
Polaridad del
crecimiento
White (medio
nutritivo)
Plsmido Ti de
Agrobacterium
tumefaciens
Scheleiden y
Schwann (1938)
Que es?
El cultivo de tejidos son
las tcnicas para la
regeneracin de plantas
funcionales bajo
condiciones artificiales y
de asepsia sobre un
medio nutritivo, o para
producir alguna
sustancia de inters
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Notas de clase J. Felipe Osorio-Tobn
Ph.D.
Caractersticas
del Cultivo de Tejidos
Ser a microescala.
Condiciones ambientales optimas.
Exclusin de otros seres vivos.
No hay un patrn normal de desarrollo.
Aplicacin de reguladores del crecimiento.
Reprogramacin celular.
Ventajas
Desventajas
Seleccin del material madre.
Personal capacitado.
Costos.
Aplicaciones
del cultivo de tejidos
Micropropagacin
Plantas libres de
enfermedades
Mejoramiento
Plantas resistentes
Totipotencialidad vs determinacin
Malajovich (2006)
Qu se puede cultivar?
Malajovich (2006)
Meristemos
Yemas
Fragmentos de tejido
Explantes nodales
Componentes
Caractersticas y ejemplos
Agua destilada
Fuente de carbono
Sustancias inorgnicas
Macroelementos (N, P, K, Ca, Mg, S) y microelementos (Fe, Co, zn, Ni, B, Al,
Mn, Mo, Cu, I), en una proporcin adecuada para la planta elegida.
Vitaminas
Vitaminas B1, B2, B6, vitamina H, vitamina E, cido flico, cido nicotnico,
entre otras.
Hormonas y reguladores
del crecimiento
Mezclas de sustancias
poco definidas
Materiales inertes
Malajovich (2006)
Medios de cultivo.
Balanzas. pH metro, planchas.
Lavado y
esterilizacin
Transferencia
Incubacin
Observacin
y examen
En incubacin o transferencia.
Microscopios.
Crecimiento
Acondicionamiento y trasplante.
Materas, casas de malla o invernaderos.
Cuarentena
y control
fitosanitario
Oficina
Personal administrativo.
Malajovich (2006)
Malajovich (2006)
Malajovich (2006)
Ph.D.
Fuente: www.mpimp-golm.mpg.de
Para reafirmar
Plantas transgnicas
La importancia de las tcnicas de
fitomejoramiento
Para incrementar la produccin
agrcola
Fitomejoramiento
Rendimiento
Facilidad
de cultivo
Calidad
nutricional
Resistencia a
los agentes
Incompatibilidad
Cruzamientos
Mendel
Factores discretos
heredables (genes), y
no son resultado de
la mezcla azarosa de
las cualidades de los
progenitores.
Individuos
sobresalientes.
Cruzas y retrocruzas.
Nueva variedad.
sexual
No semillas viables.
Mayor nmero de
generaciones.
Fitomejoramiento actual.
Fitomejoramiento
tradicional
Produce
variedades
vegetales
extremadamente
dependientes de
agroqumicos.
Aumentar el rendimiento.
Disminuir las prdidas
ocasionadas por plagas y
enfermedades.
Reducir los costos de
produccin.
Generar productos de
alto valor agregado.
Ingeniera gentica
Manipulacin en el
laboratorio de la informacin
gentica de un organismo
utilizando las tcnicas de la
biologa molecular
Acceso,
manipulacin
y creacin
Otras especies
Cultivos transgnicos
El cdigo
gentico es
universal
Se requiere
Alternativos
Fisicos
Agrobacterium
tumefaciens.
Plantas y
hongos.
Electroporacin
de protoplastos
Tratamientos
con
polietilenglicol
y cloruro de
calcio.
Bombardeo con
micropartculas
recubiertas de
DNA.
Viven en la mayora de
los suelos y que
infectan a un gran
nmero de especies
vegetales.
agalla de la corona (A.
tumefaciens) y raz
pilosa (A. rhizogenes).
www.kws-uk.com
A. tumefaciens y A. rhizogenes
Como funciona?
Herida
Opinas
Se reintegran
en el ADN
T-DNA
Reguladores
del
crecimiento
Producen
protenas
funcionales
Plasmidos
Ti (tumores)
Ri (Races)
BIO103 Introduccin a la Biotecnologa
Notas de clase J. Felipe Osorio-Tobn
Ph.D.
Modificar Ti/Ri
Construccin de un vector
VECTOR
Es necesario disponer del
gen de inters dentro de un
vector (vehculo) apropiado
para ser transferido al tejido
que se quiere transformar
Fitomejoramiento
mediante ingeniera gentica
Gracias a la biotecnologa
podemos aislar y clonar
genes de inters
antropocntrico.
Mediante el empleo de
alguno de los mtodos de
transformacin
disponibles, dichos genes
pueden incorporarse en
el genoma de las plantas
en un solo ciclo de
cultivo.
Biobalstica
Mtodo fsico de
transformacin.
Bombardeo de
tejidos con
micropartculas
cubiertas con DNA o
con otra biomolcula.
Caractersticas
Microproyectiles de oro o tungsteno en un acelerador de
partculas.
Para el bombardeo es posible utilizar cualquier tipo de
explante vegetal.
No causa daos letales.
Bajo nmero de transformantes producido por evento de
bombardeo.
Mejor opcin para la produccin rutinaria de plantas
transgnicas de soya, maz, sorgo, papaya, esprrago, caa
de azcar, arroz y trigo.
Recientemente no se usa para la transformacin gentica
de plantas que van a ser destinadas a su uso comercial.
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Notas de clase J. Felipe Osorio-Tobn
Ph.D.
Ingeniera de cloroplastos
Thieman y Palladino (2010)
Su ADN puede
aceptar varios
genes nuevos
simultneame
nte.
Los genes
insertados
permanecen
activos.
Esta separado
del DNA
liberado por la
planta.
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Notas de clase J. Felipe Osorio-Tobn
Ph.D.
Tomate
PG
mRNA
Pectina
Antisentido
Papas sin
magullar
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Tecnologa antisentido
Etapas en la
obtencin de un transgnico
Corroborar que existe un gen que codifica
para la caracterstica de inters.
Clonar el gen de inters.
Modificar el gen para que funcione mejor en
el organismo receptor.
Transferir el gen al organismo receptor.
Caracterizar el organismo receptor
transformado.
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Ejemplo
Metodologa
1. Corroborar
Se identifica el gen de inters por medio
de cruzamientos a partir de una
caracterstica que se expresa, y se
verifican las proporciones mendelianas. Si
la caracterstica se atribuye a una
protena, que es producto directo de un
gen, ser ms sencillo transferir esa
caracterstica a un organismo que no la
tiene.
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2. Clonar
i) Extraccin de ADN; ii) Bsqueda de un gen
entre la mezcla de genes del ADN; iii)
Secuenciacin; iv) Construccin del vector
recombinante.
El ADN de inters se inserta en plsmidosvectores que son molculas de ADN lineales o
circulares en las cuales se puede guardar
(clonar) un fragmento de ADN. Los ms usados
son los plsmidos de origen bacteriano.
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4. Secuenciacin
La bandita del gel que contiene el ADN de
inters se recorta y se purifica el ADN. Luego
se realiza la secuenciacin que consiste en
conocer la cantidad y el orden en que se
ubican los nucletidos en el fragmento de
ADN analizado. Actualmente se realiza en un
secuenciador automtico utilizando
nucletidos marcados fluorescentemente,
que son ledos por un lser acoplado a una
computadora.
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5. Modificar el gen
Se pone en una bacteria y se clona.
Se le introduce por medio de ligasas una
secuencia promotora.
ANIMALES
Biobalistica,
agrobacterium.
Inyeccin en el ovulo
fecundado
7. Caracterizar el
organismo receptor transformado
Southern Blot
Membrana
Sondas
radioactivas
Extraer ADN
Transferirlos
Fluorescencia
Cortar con
enzimas
Electroforesis
www.ted.com/talks/jill_farrant_how_we_can_make_crops_survive_with
out_water#t-35272
APLICACIONES PRACTICAS EN EL
CAMPO
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Ph.D.
defensas
naturales
Vacunas
Thieman y Palladino (2010)
Virus y plagas
Cepas
muertas o
debilitadas
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Ph.D.
BT
Protena
cristalizada
Gen Cry
Auto
digestin
esparcir
esporas?
polen
mortfero?
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Ph.D.
Pesticidas genticos
Almacenamiento seguro
perdidas
Pases
subdesarrollados
Maz transgnico
Avidina
Plagas =
Bloquea la biotina
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Bloqueo de una
enzima necesaria
para la fotosntesis
Enzima
alternativa
Soya
Glifosato
Qumicos
mas
suaves
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Ph.D.
Exterminan plantas
buenas y malas
Nutricin mejorada
Salvar vidas
Arroz dorado
Liposoluble
Betacaroteno
Hierro y
protenas
El futuro:
de los frmacos a los biocombustibles
Protenas
(Trigo MG)
HCH (Tabaco)
Vacunas
comestibles
Refrigeracin y
economa
Tomates y
pltanos
(Hepatitis B)
Tabaco sin
nicotina
Plsticos
biodegradables
Caries dental
Actividad
Considera que la biotecnologa es un evento reciente?
explique
Haz un esquema con un da rutinario de tu alimentacin,
indica los que corresponden a plantas o derivados de estas.
La domesticacin de las plantas es el evento biotecnolgico
ms antiguo, que opinas si esto no hubiese sucedido?
En aproximadamente 10 renglones relacione las siguientes
palabras en el marco de la historia de la biotecnologa
vegetal: domesticacin, mejorador, consumidor, revolucin
industrial, gentica, revolucin verde, transferencia de
genes.
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Notas de clase J. Felipe Osorio-Tobn
Ph.D.
BIOSEGURIDAD Y BIOETICA
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Ph.D.
OGM
Posibles riesgos
realograma.net
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Ph.D.
Natural Seguro?
Ensayos de campo
Viabilidad biolgica
Thieman y Palladino (2010)
meln y pepino
Preocupaciones por la
salud humana
Consumo de
genes
Generacin
de alergias
Cncer
www.pinterest.com
Resistencia a
antibiticos
addingtoaconversation.wordpress.com
www.opednews.com
http://ccr.ucdavis.edu/
ALGUNAS CONSIDERACIONES
TICAS
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Ph.D.
Introduccin
Rotacin de cultivos
Desafiar la
estructura
socioeconmica y
poltica
Biotecnologa =
ciencia + industria
monopolizada
La biotecnologa es
una solucin que
evade los problemas
ambientales
Vida + civilizacin
artificializacin
Motivaciones
econmicas
dominan
USA
Cultivos
modificados
genticamente
(FDA)
Environmental
Protection
Agency (EPA)
Sustancialmente
equivalentes a los
cultivos
convencionales
Ms comerciales
Cultivo
Caracterstica introducida
Evento*
Ao de aprobacin
Soja
Maz
Maz
Algodn
40-3-2
176
T25
MON531
1996
1998
1998
1998
MON810
MON144
5
Bt11
NK603
TC1507
1998
2001
GA21
2005
Maz
Resistencia a insectos lepidpteros
Algodn Tolerancia al herbicida glifosato
Maz
Maz
Maz
Maz
2001
2004
2005
Country
USA
Brazil
Argentina
Canada
42.2 million
24.3 million
11.6 million
India
China
11.6 million
3.9 million
Paraguay
Pakistan
South Africa
Uruguay
3.9 million
2.9 million
2.7 million
1.6 million
cotton
cotton, papaya, poplar, tomato, sweet
pepper
soybean, maize, cotton
cotton
maize, soybean, cotton
soybean, maize
Fuentes: http://www.genewatch.org/
Transgnicos en Colombia
www.portafolio.co
Los
transgnicos
no han
aliviado el
hambre de la
poblacin sino
ahorrado
tiempo y
recursos a los
productores!
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Notas de clase J. Felipe Osorio-Tobn
Ph.D.
La investigacin es
dominada por intereses comerciales!
Quin se beneficia de la tecnologa?Quien pierde?
Poblaciones hambrientas
en medio de la abundancia
El hambre se debe a una brecha entre la produccin de alimentos y
la densidad de la poblacin humana o la tasa de crecimiento
www.taringa.net
Mitos de la biotecnologa
Las compaas multinacionales
sostienen que la biotecnologa
resolver los problemas de la
agricultura tradicional y librara a
la gente del tercer mundo de la
pobreza y el hambre!
BIO103 Introduccin a la Biotecnologa
Notas de clase J. Felipe Osorio-Tobn
Ph.D.
La finalidad no es resolver
problemas agrcolas si no
obtener ganancias
Industrializar y aumentar la
dependencia de insumos
agrcolas
Control del germoplasma
Aumenta el problema de la
revolucin verde
El objetivo es la ganancia,
no la filantropa
Biopiratera
Utilizan germoplasma y
plantas medicinales
Campesinos e indgenas
son materia prima
No regalas
No al re-uso de la semilla
Homogeneidad gentica
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Notas de clase J. Felipe Osorio-Tobn
Ph.D.
Mito 5: La biotecnologa no es
ecolgicamente daina y dar origen a una
agricultura sostenible, libre de qumicos
Sper malezas
Transferencia de genes