BYRON NEZ-FREILE

Captulo 13: Positivo! Pruebas diagnsticas de la infeccin VIH/SIDA

Positivo! Pruebas diagnsticas de la infeccon VIH/SIDA

vez, se recomienda una consejera pre-prueba y

post-prueba apropiada, mediante la cual se educa
en prevencin y tratamiento de la enfermedad.

xisten dos procedimientos bsicos

para el diagnstico por el laboratorio de la infeccin VIH/SIDA: el
uno parte del proceso de deteccin de los anticuerpos en contra del VIH en sangre y diversos uidos del cuerpo humano, en tanto que
el otro detecta las estructuras microscpicas
del virus. En el entorno global se han estandarizado dos tipos de exmenes encargados
de la deteccin de anticuerpos en la sangre: el
examen ELISA y Western Blot. A la vez se
ha diseado un examen para cuanticar la unidades de virus circulantes en el torrente sanguneo, la llamada Carga Viral. Por ltimo, no
debemos olvidar que un examen fundamental
para denir el grado de inmunodeciencia y
la evolucin clnica de la infeccin VIH es el
contaje absoluto de Clulas CD4 circulantes.
Consentimiento Informado: Un derecho
a cumplir!
Toda prueba relacionada con el diagnstico de la infeccin VIH/SIDA debe ser voluntaria y un consentimiento informado por
parte del paciente, generalmente es requerido; cuya rma es la garanta del cumplimiento de los derechos que tenemos los ciudadanos en relacin al diagnstico del VIH y
a la condencialidad de sus resultados. A la

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Figura 13.1. Se debe exigir la rma de un

consentimiento informado para la realizacin
de las pruebas de diagnstico del VIH/SIDA
Las Pruebas ELISA y Western Blot: detectando los anticuerpos
La pruebas encargadas de evidenciar los
anticuerpos circulantes se han desarrollado para
medir anticuerpos humanos generados en contra
de varios componentes estructurales del VIH (seroconversin). Dentro de estas pruebas tenemos
dos anlisis muy conocidos en el mundo entero:
ELISA (Enzyme-Linked Immunoabsorbent Assay). Es una prueba cuyo objetivo es el tamizaje
de portadores del VIH con una prueba sangunea
de bajo costo. La positividad de esta prueba obliga a la realizacin de una prueba conrmatoria.

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Figura 13.2. Esquema de una prueba ELISA

Western Blot. Esta prueba de carcter

conrmatorio, y por lo tanto ms costosa,
detecta anticuerpos en contra de las protenas virales del ncleo, la polimerasa y
la envoltura. Es una prueba muy sensible (detecta mayor nmero de verdaderos
positivos) y especca (detecta mayor nmero de verdaderos negativos) con un ndice de error menor a 1 x 10000 pruebas.

anticuerpos detectables (Falso Negativo),

debido a que stos aun no se han generado
luego de la exposicin al VIH. Los anticuerpos en la infeccin VIH se tornan positivos
en
un perodo no menor de 10 14 das, pero
virtualmente todos los pacientes infectados
seroconvierten dentro de seis meses. Estos
pacientes se les debe realizar una prueba
de deteccin de Carga Viral
Pruebas Rpidas. Existen tres tipos de
pruebas sanguneas (serolgicas) denominadas rpidas y cuyos resultados se disponen
en no ms de 30 minutos y tiene una alta
sensibilidad y especicidad. Se las aplica
en situaciones especiales como servicios
de urgencias, centros de trauma, campaas
de diagnstico etc.
Por ltimo es necesario mencionar que se
han desarrollado algunas pruebas para detectar los anticuerpos en contra del VIH en
orina, saliva y uidos genitales, pero que
no se comercializan en nuestro medio.

Figura 13.3. Prueba de Wester Blot

con sus respectivas bandas de positividad
El perodo de Ventana. Se denomina al perodo de tiempo, al inicio
de la infeccin VIH, en que el paciente a pesar de estar infectado no presenta

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Carga Viral: contando el nmero de virus

El anlisis de carga viral mide la cantidad
de virus circulantes en la sangre y se expresan como nmero de copias por mililitro
(ml). La deteccin de la

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carga viral es un mtodo que sirve para el

diagnstico precoz de la infeccin VIH aguda,
predecir la probabilidad de transmisin, predecir la progresin de los pacientes infectados
crnicamente y para el monitoreo teraputico.
Se cuantica la carga viral hasta un tope mximo que oscila en varios millones de copias y el
mnimo depende de la sensibilidad de la prueba, siendo en la actualidad de hasta 50 copias/
ml y de 5 copias /ml en pruebas de investigacin. No hay que olvidar que los laboratorios
tambin reportan la carga viral en una escala
logartmica de base 10 que se utiliza de mejor
manera para vigilar la respuesta al tratamiento
antiretroviral. Se han desarrollado tres tcnicas
para cuanticar los virus a partir de sus cidos
nucleicos:
-PCR (Polymerase Chain Reaction). Utiliza
una enzima para multiplicar al VIH de la muestra de sangre. Luego una reaccin qumica marca al virus. Los marcadores son medidos y se
calcula la cantidad de virus. Este mtodo es el
ms usado en nuestro medio.

Antgeno p 24. Cabe aadir que existe una

prueba que detecta el antgeno p24 a travs de
la cuanticacin de su antigenemia. Esta prueba es barata y permite una deteccin precoz
de una de las partculas virales del VIH.
CD4: Cuanticando nuestras defensas
El cuanticar las clulas CD4 encargadas de la inmunidad celular es un anlisis que
nos permite evaluar el pronstico de la progresin del enfermo al SIDA o a la muerte, denir
el estado y diagnstico diferencial en un paciente asintomtico, y denir las decisiones teraputicas en relacin al tratamiento antiviral o
prolaxis para las enfermedades oportunistas.
La tcnica recomendada para esta prueba usa
un analizador hematolgico de citometra de
ujo, que cuantica a los CD4 en un rango de
800 a 1050 clulas/ml. No debemos olvidar que
un control de CD4 puede tener una variabilidad analtica de alrededor de +/- 50 clulas en
cada medicin, por lo que es necesario ser muy
cuidadoso al interpretar las oscilaciones pequeas en el contaje de CD4. El contaje de CD4
debe realizarse cada 3-6 meses en pacientes con
o sin tratamiento.
Algunos laboratorios expresan la cuanticacin
de los CD4 en porcentaje como en la siguiente
tabla:

Figura 13.4 Mquina para realizacin de

PCR del VIH/SIDA
-bDNA (branched DNA). Combina la muestra
con un material que emite luz. Este material se
conecta con las partculas del VIH. Luego se
mide la cantidad de luz y se calcula la cantidad
de virus.
-NASBA (Amplicacin Basada en la Secuencia del Acido Nucleico). Amplica las
protenas virales para producir un conteo.

Tabla 13.1. Correlacin de contaje absoluto

y porcentual de las Clulas CD4

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