PRACTICA DE LABORATORI LA OSMOSIS ASOCIADA A LOS GLOBULOS ROJOS INTRODUCCION Una de las caracter(stcas bisicas de las eélulas vivas es of cardcter semipermeable de su membrana. La difusién in- volucra fenémenos de intercambio de solutos entre dos es- pacios separados por membranas como también entre dos sitios dentro de un mismo espacio, cada uno de fos cuales ‘con concentraciones diferentes. El resultado final con el tiempo es un equiibrio dindmnico basado en la equivaler- cia de concentraciones en todo el sistema, producto de la migracién de solutos de un espacio 0 de un sitio a otro. Et fendmeno de ésmosis involucra necesariamente la pre sencia de una membrana semipermeable que separa dos espacias con concentraciones diferentes. Con el tiempo so produce como en e caso anterior un equilibrio dinémico por compensacién de concentraciones en los comparti- rmentos que separa la membrana, La migracién del sol vente de uno a otro compartimento es en este caso la base de! equilibrio del sistema, por la cual, mientras disminuye fl volumen final de la soluci6n en un lugar del sistema, aaumente necesariamente en otro lugar del mismo, De lo anterior se desprende que la disminucién de la pre- sién de un compartimento se compensa con un aumento fequivalente de la misma en el otto compartimento del sisterma, El movimiento del agua a través de las membranas biol6- sicas es siempre pasivo. En la mayoria de las membranas la permeabilidad a! agua es muy elevada y por lo tanto fos ‘movimientos pasivos de ella son extremadamente répidos. En muchos casos el estado de equilibrio de agua se alcanza ‘asi instantaneamente, I tiempo medio del intercambio Por: Hermann J. Droste (1) Francisco Merino (1) del agua en eritrocitos humanos tiene un valor de 4,5 ms {milisegundos). Basados en un fenémeno como el descrito, se puede espe- rar que el aumento de presién en un compartimento cerra- do como es la célula, dé como resultado un camblo drdsti- co en su forma y tamafio que puede llevarla Finalmente a su destruccion, oBjeTIVOS “Mediante esta prictica se pretende que el estudiante adquie- ‘ala capacidad d 1, Comprender ef fenémeno de la Osmosis realizada en <élulas animales. 2. Distinguir entre soluciones a! por ciento, normales, smolares y esmolares. MATERIALES El siguiente material se necesita para cada grupo de tres estudiantes, Gradilla 16 Tubos de ensayo Tubos de centrifuga Gotero Pinza CCentrffuga clinica Fotémetro Jeringa de S ml Sangre humana 0 de un ratén blanco (1) Profesores Departamento de Biolog, Universidad de Antiogula,Medelln, Colombia, Actualidades Biologicas, Vol. 12, No. 45Heparina Etanot absolute o alcoho! antiséptico Soluciones de NaCl al 0,20/0, 0,30/0, 0,40/0, 9,50/0, 0,60/o, 0,70/o y 0,80/0. Soluciénes de glucosa al 0,50/0, 10/0, 20/0, 30/0, 40/0, 5o/o y¥ 60/0. PROCEDIMIENTO 1. Extraiga 3 mi de sangre venosa a un compafero y viértalos a un tubo de ensayo que contenga 1 mg de heparina © decapite un ratGn blanco y colecte la sangre em un tubo que contenga 1 mg de heparina_ 2. Rotule 7 tubos de ensayo con cada una de tas con- centraciones de NaCl. Agregue a cada uno de ellos. S mf de soluci6n de NaCl con su respectiva concen- tracién.” 3 Rotule 7 tubos de ensayo con cada una de las con- centraciones de glucosa, Agregue a cada uno de ellos S ml de soluciGn de glucosa con su respectiva concentracién. 4. En otro tubo de ensayo agregue 5 mi de agua desti- lada. Este tubo sirve come control. del experimento. Agregue a cada uno de 10s 15 tubos de ensayo 3 go- tas de la sangre recolectada y agftelos bien. Deje reposar los tubes por espacio de “10 min. Al cabo de este tiempo mida la turbidez de cada uno de los tubes poniendo un papel blanco detrés de ellos. De esta forma se observa mejor el grado de turbidez. Otra forma serfa medir ta turbidez me- diante un turbid imetro. Centrifugue las soluciones- durante 5 min en una centrifuga clinica a aproximadamente 2.000 grave- dades. Mida arbitrariamente la cantidad y el cotor del preci- pitado. Dele el valor de 1000/0 al precipitado de la solucién que contiene 0,80/o de NaCl o So/o de glucosa. 2. Con el fin de cuantificar la cantidad de hemoglobi- na mida mediante un fotGmetro la absorbancia decada uno de los sobrenadantes de las soluciones a 550 nm y andtelos. PREGUNTAS 1. Explique la actuacién de los glébulos rojos a dife- rentes concentraciones de NaCi y glucosa, 2 Interprete la forma como acttan los eritrocitos a la concentraci6n de 0,S50fo de NaCt y de glucosa. 3. iDe acuerdo con los resultados se puede decir que existe una relacién entre el grado de turbidez de las soluciones y la concentracién de NaCl y/o de gluco- sa? Explique su respuesta, 4, Comparando Jas soluciones de glucosa con las de NaCl, gen cual habraé mayor presi6n osmética y por que?. 5S. 2Qué relaci6n existe entre las absorbancias obteni- das y las presiones osméticas de las soluciones?