ADN recombinante

No debe confundirse con recombinacin gentica.

Diagrama de ADN ligado. Esta secuencia pertenece a un gen de la hemoglobina humana.

El ADN recombinante, o ADN recombinado, es una molcula de ADN artificial formada

de manera deliberada in vitro por la unin de secuencias de ADN provenientes de dos
organismos distintos que normalmente no se encuentran juntos. Al introducirse este ADN
recombinante en un organismo, se produce una modificacin genticaque permite la
adicin de una nueva secuencia de ADN al organismo, conllevando a la modificacin de
rasgos existentes o la expresin de nuevos rasgos. La produccin de una protena no
presente en un organismo determinado y producidas a partir de ADN recombinante, se
llaman protenas recombinantes.
El ADN recombinante es resultado del uso de diversas tcnicas que los bilogos
moleculares utilizan para manipular las molculas de ADN y difiere de la recombinacin
gentica que ocurre sin intervencin dentro de la clula. El proceso consiste en tomar una
molcula de ADN de un organismo, sea virus, planta o una bacteria y en el laboratorio
manipularla y ponerla de nuevo dentro de otro organismo. Esto se puede hacer para
estudiar la expresin de un gen, para producir protenas en el tratamiento de
una enfermedad gentica, vacunas o con fines econmicos y cientficos.1
ndice
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1Procedimiento

2Aplicaciones

3Produccin y terapia con protenas recombinantes

3.1Produccin en bacterias

3.2Produccin en levaduras

3.3Produccin en clulas de insecto

3.4Produccin en clulas de mamfero

4Referencias

5Enlaces externos

Procedimiento[editar]
El proceso de produccin de un ADN recombinante comienza con la identificacin desde
un organismo de una secuencia de ADN de inters con el fin de propagarlo en otro
organismo que carece de la secuencia y, por ende, del producto protico de esa secuencia
de ADN.2 As se pueden producir cantidades ilimitadas de la protena codificada por el
susodicho gen. En trminos simples, el procedimiento consiste en: 3

Localizacin de genes y sus funciones.

Clonacin del ADN, y su posterior almacenamiento en genes.

Reaccin en cadena de la polimerasa (PCR)

Utilizacin de vectores de expresin.

Aplicaciones[editar]
El vector que se utiliza contiene secuencias de ADN que al ser replicadas confieren
resistencia a antibiticos especficos. Esta tcnica ha sido ampliamente utilizada en el
campo de la medicina y ha permitido el desarrollo de importantes avances teraputicos
como por ejemplo la produccin de insulina recombinante.2
Permite adems la posibilidad de utilizar plantas y alimentos transgnicos, as como
microorganismos modificados genticamente para producir frmacos u otros productos de
utilidad para el hombre, entre los que se pueden citar: la insulina humana, la hormona del
crecimiento, interferones, la obtencin de nuevas vacunas o la clonacin de animales.
Con el uso de ADN recombinante se ha logrado obtener plantas transgnicas resistentes
a insectos, hongos, bacterias y herbicidas, con mejores caractersticas de calidad durante
poscosecha y con alto contenido nutricional.4 Tambin ha permitido la clonacin, expresin
y produccin mediante esta tcnica de diversos antgenos, por ejemplo, lavacuna contra la
hepatitis B5 y la vacuna contra el virus del papiloma humano.6

Produccin y terapia con protenas recombinantes [editar]

Las protenas recombinantes son aquellas que se producen mediante la tcnica del ADN
recombinante, es decir, expresando un gen de un organismo en otro organismo distinto.
Para que estas protenas sean tiles desde el punto de vista teraputico tienen que
conservar su actividad. Adems, se debe evitar que sean inmunognicas para el ser
humano. Para ello es importante decidir para cada protena recombinante cual es el
organismo de expresin ms adecuado.

Produccin en bacterias[editar]
Estas protenas recombinantes han intentado expresarse en bacterias como E. coli, ya que
son fciles de mantener, crecen rpido y se conoce bien su genoma. Sin embargo, el
mayor problema que presenta la produccin en bacterias es que en ellas no existe
glicosilacin proteica, por lo que algunas protenas producidas en bacterias pierden
totalmente su funcin. Aun as se han logrado producir con xito algunas protenas
recombinantes en bacterias. La primera protena recombinante que se produjo en E. coli
fue la somatostatina, una hormona anti-crecimiento de 14 aminocidos. Sin embargo,
aunque desde el punto de vista cientfico fue un xito, desde el punto de vista econmico
fue un fracaso, ya que su utilidad estaba reducida a personas con problemas de
gigantismo y similares, que son poco comunes. Posteriormente se logr un gran xito en
este campo mediante la produccin de insulina en bacterias. La insulina presenta la

ventaja de no necesitar modificaciones postraduccionales, por lo que se evita este

problema de su produccin en bacterias. Adems, la diabetes es una enfermedad muy
frecuente en la sociedad, con unos 347 millones de diabticos.7 En EEUU el 6% de la
poblacin (20 millones de habitantes) son diabticos y esta enfermedad es la 6 causa de
muerte. Antes de esta produccin en bacterias, se usaba insulina porcina.

Produccin en levaduras[editar]
Al ser clulas eucariotas y por lo tanto ms similares a las humanas que las bacterias y ser
muy fciles de emplear industrialmente, las levaduras constituyen otro grupo de
organismos susceptibles de producir protenas recombinantes para uso humano. Sin
embargo, aunque s presentan glicosilacin proteica, al contrario que las bacterias, esta es
totalmente distinta a la humana, por lo que estas protenas presentan problemas, en
muchos casos incluso inmunognicos.

Produccin en clulas de insecto[editar]

Ms cercanas an a las clulas humanas que las levaduras son las de insecto, como las
de Spodoptera frugiperda (una polilla parsito del maz y del algodn), que se cultivan
fcilmente in Vitro, aunque el medio de cultivo es caro. Dicho medio, adems, no contiene
suero, lo que hace ms fcil el procesado de la protena. Otra de las propuestas ha sido el
uso no de clulas de insecto, sino de los insectos completos para la produccin de estas
protenas. Para ello se infectan a los insectos con baculovirus modificados (que adems no
infectan a los seres humanos) para que expresen la protena recombinante. Sin embargo,
este sistema presenta exactamente el mismo problema que el de levaduras: que las
clulas de insecto presentan glicosilacin, pero esta es totalmente distinta a la de
mamferos.

Produccin en clulas de mamfero[editar]

Al ser clulas ms parecidas a las humanas, el procesamiento que sufren las protenas
recombinantes producidas en clulas de mamfero tambin es ms similar, por lo que se
conserva su funcin (aunque puede haber ligeros cambios en el patrn de glicosilacin).
Los inconvenientes de este mtodo es que el crecimiento celular es ms lento, tardando
de 6 a 24 horas en duplicarse las clulas, que los cultivos pueden sufrir contaminacin de
bacterias u hongos y que se puede contaminar el producto con virus que infecten a
humanos. Para la produccin en mamferos se usan las clulas CHO, de ovario de ratn
chino, que presentan la ventaja de que crecen bien y existen gran cantidad de mutantes de
glicosilacin. Adems, se est intentando que los animales secreten estas protenas en la
orina, en la leche, etc.

El nacimiento de una nueva era

En la dcada de 1950 se descubri que los genes no eran nada ms y nada menos que
cadenas de nucletidos. Un descubrimiento que parece tan sencillo desencaden, sin
embargo, el nacimiento de una nueva era: la de la tecnologa del ADN recombinante.
La primera molcula de ADN recombinante fue creada por Paul Berg, a comienzos de
los 70. Para aquella poca, los bilogos moleculares haban aprendido a alterar genes
individuales, cortar y pegar pedazos de ADN de diferentes organismos y moverlos de
uno a otro.
Otros pioneros de esta tecnologa fueron Stanley Cohen, un genetista estadounidense,
y Herbert Boyer, un bioqumico de la misma nacionalidad . Cohen estaba interesado
en aprender cmo los genes de plsmidos otorgan resistencia a las bacterias y Boyer
trabajaba con enzimas de restriccin (ver apartado 3.3.), por lo que decidieron trabajar
juntos en la combinacin de dos plsmidos resistentes a antibiticos diferentes para
crear una bacteria resistente a ambos.

Qu es la tecnologa del ADN recombinante?

ADN recombinante es una molcula que proviene de la unin artificial de dos
fragmentos de ADN. Por lo tanto, la tecnologa de ADN recombinante es el conjunto
de tcnicas que permiten aislar un gen de un organismo, para su posterior
manipulacin e insercin en otro diferente. De esta manera podemos hacer que un
organismo (animal, vegetal, bacteria, hongo) o un virus produzca una protena que le
sea totalmente extraa.
Estas tcnicas se emplean normalmente para la produccin de protenas en gran escala,
ya que podemos hacer que una bacteria produzca una protena humana y lograr una
superproduccin, como en el caso de la insulina humana, que actualmente es producida
por bacterias en grandes recipientes de cultivo, denominados biorreactores. Como las
bacterias se multiplican muy rpidamente y pueden expresar grandes cantidades de
protenas, es posible lograr una sobreproduccin de la protena deseada. A esto
justamente se dedica la biotecnologa, es decir a la utilizacin de organismos vivos o
de sus productos con fines prcticos.
El desarrollo de la tecnologa del ADN recombinante fue posible gracias a varias lneas
de investigacin: 1) el conocimiento de las enzimas de restriccin, 2) la replicacin y
reparacin de ADN, 3) la replicacin de virus y plsmidos y 4) la sntesis qumica de
secuencias de nucletidos.

Cmo cortar y pegar el ADN? Tijeras moleculares:

enzimas de restriccin
En 1975 Daniel Nathans y Hamilton O. Smith descubrieron un tipo de protenas -las
enzimas endonucleasas o enzimas de restriccin- que actan como "tijeras
moleculares", cortando la doble cadena de ADN a travs del esqueleto de fosfatos sin
daar las bases. El descubrimiento de estas enzimas condujo a dichos microbilogos al
Nobel en 1978 y dio origen a la ingeniera gentica.
Las enzimas de restriccin son producidas por bacterias como mtodo de defensa contra
virus y degradan el ADN extrao.
A su vez, el propio genoma bacteriano est protegido contra sus enzimas de restriccin
mediante metilaciones (es decir, el agregado de un grupo metilo [-CH3)]) en un tomo
especfico de ciertos nucletidos.
Estas molculas son indispensables para la ingeniera gentica, ya que producen
fragmentos que se pueden unir entre s fcilmente (con la ayuda de un "pegamento
molecular": la enzima ligasa).
Las enzimas de restriccin cortan dejando extremos cohesivos o romos. Los
extremos cohesivos son generados cuando la enzima corta las dos hebras
asimtricamente, dejando los extremos de cada hebra de simple cadena
complementarios entre s. Por otro lado, los extremos romos son generados cuando la
enzima corta las dos hebras por el mismo lugar, generando dos extremos doble cadena.

Figura 1. Enzimas de restriccin. Este tipo de endonucleasas puede dejar dos tipos de
extremos. En el primer caso, el corte genera nuclotidos de simple cadena llamados
extremos cohesivos. Estos extremos se pueden unir por medio de otra enzima, la ADN
ligasa. En el segundo caso, se generan extremos doble cadena (extremos romos). Estos
extremos tambin pueden ser unidos con la ayuda de una enzima ligasa pero, como no
los extremos no son complementarios, la unin ser ms inespecfica.
Las enzimas de restriccin permiten cortar el genoma de cualquier organismo en
pequeos fragmentos llamados fragmentos de restriccin. La coleccin de miles o
millones de estos fragmentos se llama biblioteca gnica.

Cmo introducir ADN recombinante en las bacterias?

Una vez que los bilogos encontraron cmo fabricar ADN recombinante usando enzimas
de restriccin y ligasas, el desafo siguiente fue cmo producir grandes cantidades de
genes y cmo introducirlos en bacterias u otras clulas husped. El primer problema fue
solucionado con el uso de plsmidos, pequeas molculas de ADN circular presente en
muchas bacterias.
Los plsmidos contienen uno o ms genes de resistencia a antibiticos y son capaces de
autorreplicarse, ya que contienen una secuencia de iniciacin. Esto les permite
replicarse de manera independiente del ADN genmico.
Podemos crear una molcula de ADN recombinante usando un plsmido. Este proceso
consta de las siguientes etapas:
1. Cortamos el ADN circular del plsmido con enzimas de restriccin, para generar
extremos cohesivos.
2. Cortamos el ADN que queremos multiplicar. Debemos asegurarnos de que los
extremos del plsmido y los del ADN a insertar sean complementarios y puedan
unirse.
3. Unimos el gen que queremos introducir (inserto) por medio de la enzima ADNligasa y luego introducimos el plsmido con inserto en bacterias.
4. Seleccionamos las bacterias que hayan introducido el plsmido con la ayuda de
antibiticos. Dado que los plsmidos contienen un gen de resistencia a
antibitico, al exponer las bacterias a ese antibitico, slo las que hayan
incorporado el plsmido (y con l la resistencia) sobrevivirn, mientras que las
que no lo tengan morirn.
Esta es una manera relativamente eficaz de obtener millones de copias del ADN
incorporado. Dado que todas las copias del gen provienen de una sola molcula

multiplicada a partir de una nica bacteria que dio origen a la colonia, esta tcnica lleva
el nombre de clonacin. El trmino clon proviene de la jardinera; desde hace siglos los
jardineros generan plantas nuevas a partir de gajos. Estas plantas son genticamente
idnticas y constituyen un clon.
Un clon es un grupo de clulas u organismos genticamente idnticas.
El uso fragmentos de ADN como vectores cumple un rol fundamental en la ingeniera
gentica, ya que sirven para transferir material gentico de un organismo a otro.
Vector: cualquier organismo o virus capaz de mover genes de un organismo a otro

Cmo amplificar el ADN? Reaccin en cadena de la

polimerasa
Durante las dcadas de 1970-1980, la manera ms prctica de hacer mltiples copias
de una secuencia particular de ADN era introduciendo una molcula de ADN
recombinante (un plsmido ms un gen) en una clula husped. Esto poda resultar un
poco engorroso, ya que muchas veces se dispona de una cantidad muy pequea de
molculas de ADN para realizar pruebas.
A mediados de la dcada de los 80, la invencin de una tcnica capaz de generar
centenares de miles de copias de una secuencia sin la necesidad de clonarla en ningn
tipo de vector resolvi este problema. Kary Mullis, un bioqumico americano que
trabajaba sintetizando ADN, resolvi este problema con la invencin de la reaccin en
cadena de la polimerasa.
Esta se basa en la separacin de ambas hebras de ADN, la posterior unin de pequeos
fragmentos (denominados primers) y la extensin de estos fragmentos usando de
molde el ADN de la muestra. As se obtienen dos copias idnticas por cada molcula en
cada ciclo de reaccin. Para llevar a cabo esta reaccin se requiere de una enzima
polimerasa que sea capaz de soportar la alta temperatura del proceso de
desnaturalizacin. Esta enzima es una ADN-polimerasa especial obtenida de una
bacteria termfila (la Thermus aquaticus), resistente a altas temperaturas.
La reaccin en cadena de la polimerasa permite amplificar la muestra de manera
espectacular y su sensibilidad es tal que alcanza con una molcula para que la reaccin
genere una infinidad de copias. Esto la convierte en una importante, si no
imprescindible, herramienta para el anlisis de filiacin o de criminalstica forense, ya
que con slo una pequesima muestra se pueden realizar diferentes estudios
comparativos que nos permiten conocer el dueo de un "rastro" gentico en particular.
Tambin se usa para el desarrollo de nuevas estrategias de diagnstico mdico, como la
deteccin de virus o de mutaciones que provocan enfermedades genticas, a partir de
una muestra de ADN tan pequea como un cabello o una gota de sangre.
Otra aplicacin de la tcnica de la reaccin en cadena de la polimerasa es la
transcripcin inversa de ARNm. Mediante el uso de una enzima de origen viral
denominada transcriptasa reversa puede usarse como molde una molcula de ARNm,
transcribirla a una secuencia de ADN, y luego ser amplificada como cualquier otra
secuencia por la reaccin en cadena de la polimerasa, con lo que se obtiene una gran
cantidad de ADN a partir de unas pocas molculas de ARNm. Esta tcnica es muy
empleada para el estudio de expresin gnica, as como para la produccin de protenas
en diferentes organismos.

Cmo encontrar el gen adecuado? Imanes biolgicos:

sondas y anticuerpos
Hasta hace relativamente poco, encontrar un gen en un genoma era como encontrar
una aguja en un pajar. Si tuviramos que realizar dicha tarea, probablemente usaramos
un imn para atraer la aguja (siempre y cuando esta sea de metal y posea propiedades
magnticas). De manera anloga, hoy da podemos encontrar genes o protenas
usando, respectivamente, sondas y anticuerpos, que actan como imanes moleculares.
Las sondas son fragmentos de ADN o ARN de simple cadena complementarias a la
regin de ADN o ARN que queremos encontrar. Contienen alguna "marca" que permite
revelar su unin (hibridacin) a la secuencia elegida y de esa manera revela presencia
de la regin buscada.
Cmo se marcan esas sondas o fragmentos de cidos nucleicos? Las sondas
pueden ser "coloreadas" durante su sntesis utilizando nucletidos marcados con
istopos radiactivos. Otra manera de marcarlas es mediante la unin con una molcula
que pueda ser detectada posteriormente como fluorescente, un marcador qumico que
puede ser detectado por un anticuerpo, o una enzima cuya actividad produce el cambio
de color de su sustrato.
Una de las tcnicas ms empleadas para localizar fragmentos determinados del genoma
(o la expresin de algn gen en particular por medio de la deteccin de la presencia de
su correspondiente ARNm) es la hibridacin in situ. Durante este proceso se incuba el
ADN con una sonda (de ADN o ARN) complementaria a la secuencia buscada, y marcada
radiactiva o qumicamente.
La sonda "navega" por el interior de la clula hasta encontrar una secuencia
complementaria a ella. Una vez que esto ocurra se formar una doble cadena que
permitir no slo detectar la presencia de esta secuencia, sino indicar el lugar especfico
que ocupa dentro de la clula. Si se tratara de un fragmento de un cromosoma, nos
permitira saber su localizacin exacta o locus.
Para revelar la presencia de hibridacin de la sonda, la muestra debe exponerse a una
placa radiogrfica; en el caso de las sondas marcadas qumicamente se procede a su
revelado mediante el uso de molculas fluorescentes o que puedan ser detectadas por
colorimetra (utilizando una enzima que provoque el cambio de color de un sustrato).
Se puede tambin utilizar colonias de bacterias con ADN recombinante con una tcnica
similar, pero que usa anticuerpos en vez de sondas. Se comienza por una colonia de
bacterias que contengan y expresen el gen de ADNc. Luego se trata las bacterias con un
anticuerpo marcado, que se unir a la colonia que sintetice la protena deseada. De esta
manera se puede localizar el gen en cuestin y clonarlo para obtener mltiples copias.

Cmo estudiar la expresin de diversos genes?

Si visitamos un laboratorio de biologa molecular, probablemente encontraremos una
cuba con un gel al cual se le aplica una corriente elctrica. Este mtodo,
llamado electroforesis en gel, es muy usado para separar molculas de diversos
tamaos y es la base de las tcnicas que describiremos para identificar ADN, ARN, y
protenas. En los prrafos siguientes describiremos entonces la electroforesis para poder
comprender luego cmo funcionan las dems tcnicas.

Separacin de cidos nucleicos y protenas.

Electroforesis en gel

La electroforesis en gel es uno de los mtodos ms utilizados en los laboratorios para

separar cidos nucleicos o protenas, de acuerdo con su tamao. Esto se logra por la
diferencia de desplazamiento de las molculas a lo largo de un gel sometido a un campo
elctrico. La carga elctrica sirve como fuerza impulsora que atrae las molculas
cargadas negativamente hacia el otro extremo del gel que posee carga positiva. Existen
distintos tipos de gel; comnmente se utiliza agarosa o poliacrilamida.
La velocidad de desplazamiento de las molculas es inversamente proporcional a su
tamao. En los cidos nucleicos la carga est dada por los nucletidos, por lo que el
tiempo que tardar la molcula en atravesar el gel ser directamente proporcional al
nmero de nucletidos que tenga, es decir a su tamao. De esta manera, para un
tiempo determinado, las molculas ms grandes quedarn ms retrasadas en el gel que
las molculas ms pequeas.
La separacin de protenas es un poco mas complicada, ya que stas poseen una
estructura tridimensional compleja y compacta, adems de una carga neta que depende
de la identidad de los aminocidos que la componen. Esto hace ms difcil separarlas
slo por su tamao y por eso se emplea una versin modificada conocida
como electroforesis en gel de poliacrilamida. Las protenas forman bandas de
acuerdo con su tamao; si se corre una muestra con protenas de tamao conocido se
puede determinar el tamao de la protena estudiada por la distancia recorrida en el gel.
Las protenas ms grandes quedarn arriba y las ms chicas quedan abajo (y las de
tamao medio quedarn entre las dems). Adems, el grosor de la banda obtenida
depender de la cantidad de protena que se haya sembrado; cuanto mayor sea la
cantidad de protenas, ms gruesa ser la banda.

Figura 1. Electroforesis en gel. Se siembra la muestra (ADN, ARN o protenas) en un gel

que es sometido a una corriente elctrica. Las molculas se mueven a travs del gel
impulsadas por dicha corriente. Esta tcnica permite separar molculas de acuerdo a su
tamao y carga ya que las ms pequeas (o aquellas con mayor carga) se mueven con
mayor velocidad. El grfico muestra bandas de distinto ancho, correspondientes a
distinta cantidad y tamao de la muestra de protenas.

Cmo estudiar la expresin de diversos genes?

Southern, Northern y
Western Blot
Existen diferentes tcnicas que emplean la separacin en gel por electroforesis como
primer paso para identificar la presencia de determinadas molculas dentro de una
muestra. Una de ellas fue inventada por Edward M. Southern en 1975 para la
deteccin de ADN. Una vez finalizada la corrida en el gel, se realiza la transferencia (o
blotting) de las muestras a una membrana para su posterior revelado. Luego se utiliz
el mismo sistema para detectar ARN y se lo denomin Northern Blot (en clara alusin
al nombre del cientfico inventor de la tcnica basada en ADN).

Estas dos tcnicas consisten en una electroforesis seguida de transferencia y emplean

secuencias especficas (sondas) complementarias a la molcula de cido nucleico a
identificar. Es decir, ambas utilizan la hibridacin de cidos nucleicos para la deteccin
de las molculas buscadas. Los principios generales son los mismos, pero hay
diferencias en el procedimiento debidas principalmente a que el ARN se degrada mucho
ms fcilmente que el ADN; esto hace necesario tomar muchas ms precauciones.
Una vez sembradas las muestras en un gel, se realiza una corrida electrofortica hasta
lograr que las molculas se separen por tamaos de manera tal que se puedan
distinguir las buscadas. Luego se transfieren los cidos nucleicos del gel a la membrana.
De esta manera los que quedan retenidos pueden ser sometidos a ensayos de
hibridacin con sondas especficas para detectar la presencia de determinadas
secuencias.
Estas dos tcnicas persiguen fines distintos: el Southern Blot, que detecta la presencia
de ciertas secuencias en el ADN, se usa, por ejemplo, para estudiar mutaciones en el
genoma. El Northern, en cambio, permite detectar qu genes son transcriptos en
determinadas condiciones. Hemos visto que dos clulas del mismo organismo se
distinguen por los genes que expresan y no por su ADN. El Southern Blot nos permite
evidenciar el mismo material gentico y el Northern Blot, la expresin de diferentes
genes.
Si luego queremos detectar protenas, usaremos otra tcnica similar: el Western Blot,
que deriva de la electroforesis en gel y separa protenas mediante la utilizacin de
anticuerpos especficos. Una vez que la muestra con las protenas que se quiere
identificar ha corrido en un gel, se la transfiere a una membrana especial donde las
protenas quedan "ancladas" o adheridas. Despus, se incuba esta membrana con el
anticuerpo especfico contra la protena blanco, y se revela. Con esta tcnica pueden
obtenerse datos aproximados del tamao de la protena y su concentracin en la
muestra sembrada.

Cmo sacar fotos de genes activados? Microarreglos

Otra tcnica que emplea la hibridacin de sondas especficas marcadas es la de
microarreglos (Microarrays), que consta de una membrana dividida en celdillas que
poseen adheridas sondas que representan un gen en particular. En conjunto, estas
celdillas contienen todos los genes conocidos de un organismo. De esta manera, cuando
se coloca una muestra en estos chips se ir hibridando cada gen que se encuentre en la
muestra con su sonda correspondiente en la casilla determinada. Cuando una celdilla da
positivo, quiere decir que ese gen determinado est presente en la muestra.
Los ensayos con microarreglos son rpidos de realizar, pero muy engorrosos de analizar.
Adems, estn muy limitados a los genes que ya se conocen. Permiten obtener un
pantallazo rpido sobre qu est pasando en la clula en ese momento determinado, en
cuanto a qu genes estn encendidos y cules apagados. Sin embargo, los resultados
obtenidos nunca deberan ser concluyentes, sino que tendran que ser validados
mediante otras tcnicas (por ejemplo, Northern Blot).

Microarreglos: esta tcnica permite analizar simultneamente miles de genes.