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MICROBIOLOGA CLNICA

Nociones bsicas de los


fundamentos bioqumicos de los
medios de cultivo
Ponencia:

Ponencia:

Implementacin y Ejecucin del


Programa
de ECOEFICIENCIA
SESIN
04: Coprocultivo,
aislamientoen la
Catlica
Los ngeles
primario, Universidad
identificacin
bioqumica
primariade
Chimbote Sede Central

Ponente:
Mg. Blgo. Mblgo. Luis Alberto Snchez Angulo

27 de marzo 30 de abril de 2016


Chimbote - Per

COPROCULTIVO
Muestra de heces

Medio de
enriquecimiento

Aislamiento primario

Agar SS
(Salmonella Shigella)
Agar XLD
Agar desoxicolato citrato
Agar verde brillante

Caldo selenito
Caldo tetrationato
Caldo GN
(incubar de 8 12 horas)

Serologa

1. Agar TSI
2. Agar LIA

3. Medio SIM
4. Agar Citrato de Simons

5. Agar (caldo) nitrato


6. Caldo Peptonado (indol)

El COPROCULTIVO es el mtodo indicado para el aislamiento e identificacin de bacterias enteropatgenas, estas


pertenecen principalmente a la familia de las enterobacteriaceae.

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Nociones bsicas de los fundamentos bioqumicos de los medios de cultivo

Identificacin
bioqumica primaria

COPROCULTIVO

El coprocultivo es un estudio
clnico que pertenece al rea de
bacteriologa y consiste en hacer
un cultivo de heces fecales de
los pacientes que presenten
alguna infeccin en el tracto
gastrointestinal.

Las principal utilidad que tiene


este estudio, es la identificacin
de enterobacterias (Escherichia.
coli, Vibrio cholerae, Shigella,
Salmonella entre otras bacterias
patgenas), que son siempre las
principales causantes de una
enfermedad gastrointestinal.

Tomado de la Universidad de Santander

El cultivo de las heces es de gran ayuda en la determinacin del agente etiolgico de


la diarrea, as como el estado de portador (Salmonella, Shigella etc.). La identificacin
final se realiza por mtodos bioqumicos y serolgicos.
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Nociones bsicas de los fundamentos bioqumicos de los medios de cultivo

Materia

Agua peptonada

Campy-Bap

Seleccionar
colonias y
sembrar en TSI,
Hacer pruebas de
acetato de plomo
y de hidrlisis de
hipurato

TCBS

Seleccionar
colonias
amarillas y
sembrar en TSI,
LIA, MIO, caldo
peptonado y
arginina

Reaccin de
aglutinacin con
suero anti Vibrio
cholerae O1

McConkey o
EMB

Seleccionar
colonias y
sembrar TSI,
LIA y MIO

Reacciones de
aglutinacin con
sueros anti A, B, C
y D de Shigella

fecal

Caldo
tetrationato

Tincin de
Kinyoun

Coproparistoscpico

Sulfito de bismuto,
SS Verde Brillante

Seleccionar
colonias y
sembrar en
TSI, LIA y
MIO

Campylobacter
Escherichia coli
Tipificar con
antisueros

Yersinia

Pruebas
rpidas

Identificacin de
Coccidias

Deteccin de
Rotavirus

Tipificacin de
Salmonella con
sueros anti A, B,
C1, C2, D y E

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Identificacin de
quistes de
protozoarios ,
huevecillos y
larvas de
helmintos

Medio Aislamiento
MEDIO ENREQUECIMIENTO

Muestras
(heces)

DC XLD

Mc

MEDIO DE
TRANSPORTE

incubar por 18-24 horas

Cary Blair
(Stuart)

Colonias
transparentes
e incoloras

Incubar 8-12 horas

Turbidez
colonias
rojas y secas

TSI - LIA
SS
TSI - LIA

SEROLOGIA
Salmonella
Shigella B C D A

Colonias:
transparentes e
incoloras con
puntos negros
en el centro

Incubar 18-24 Hrs

TSI - LIA
SEROLOGIA: E. coli,
enteropatgeno A B C

SEROLOGIA
Salmonella

Enterobacterias

Lactosa Positiva
cido

Lactosa Negativa
No cido

Rojo Neutro
Colonias Rosadas

Escherichia coli
Klebsiella spp
Enterobacter spp
Citrobacter spp

Colonias incoloras

Salmonella spp
Shigella spp
Proteus spp
Yersinina spp

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Agar
MacConkey
Contiene

Sales
Biliares

Cristal
Violeta

Rojo
Neutro

Lactosa

Causa del diferencial


Inhibir el crecimiento
de bacterias Gram+

Indicador de pH
cidico: Rosado

Causa de
Selectividad
Fermentadores de Lactosa
Colonias Rosadas

No Fermentadores de Lactosa
Colonias incoloras

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CRECIMIENTO DE ENTEROBACTERIAS EN AGAR MACCONKEY

Colonias Incoloras
Inoculo de la Placa

No Fermentadores
Salmonella, Shigella,
Proteus

Colonias Rosadas
Fermentadores
E. coli, Citrobacter
Klebsiella, Enterobacter

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CULTIVOS PRIMARIOS

Peptona
Sales
Biliares

Agar Mac Conkey


Cloruro
sdico

Cristal
Violeta

Permite diferenciar las bacterias


fermentadoras de lactosa de las
no fermentadoras
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Citrato,
tiosulfato

S.S Agar

Sales
biliares

Verde
brrillante
Cristal
Violeta

Permite aislar a las bacterias del


gnero de las salmonellas y
shguelas
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IDENTIFICACIN SEROLGICA

Antisueros para identificar escheriachia coli (polivalente I, II, III)


Antisueros para identificar salmonella del subgrupo I
Antisuero para identificar shigellas (A, B, C y D)
Antisuero para identificar vibrio cholerae

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Muchas gracias...!!!
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