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Optimizacin de la produccin de la goma de xantano por Xanthomonas

campestris crecido en melaza Stavros Kalogiannis un , Gesthimani Iakovidou un
, Mara Liakopoulou-Kyriakides segundo , Dimitrios A. Kyriakidis do , George N.
Skaracis un, * un Departamento de Mejora Vegetal y Biotecnologa, Hellenic
Sugar Industry, Salnica 57400, Grecia segundo Departamento de Ingeniera
Qumica, Universidad Aristteles de Tesalnica, Salnica 54124, Grecia do
Facultad de Qumica de la Universidad Aristteles de Tesalnica, Salnica
54124, Grecia Recibido el 27 de septiembre de 2002; recibido en forma 19 de
diciembre 2002 revisado; aceptaban 12 de febrero de de 2003
Abstracto Se estudi la produccin de goma xantana por Xanthomonas
campestris ATCC 1395 mediante melaza de remolacha azucarera como fuente
de carbono. los pre-tratamiento de la melaza de remolacha azucarera y la
suplementacin del medio se investigaron con el fin de mejorar la goma de
xantano produccin. La adicin de K 2 HPO 4 al medio tuvo un efecto positivo
significativo tanto en la produccin de goma xantana y la biomasa. los medio
se optimiz posteriormente con respecto a la melaza, K 2 HPO 4 la
concentracin y pH inicial. Goma xantana mximo Se observ la produccin
(53 g / l) despus de 24 horas a 175 g / l de melaza, 4 g / l de K 2 HPO 4 y a un
pH inicial neutral. Los resultados indican que K 2 HPO 4 sirve como un agente
tampn, as como un nutriente para el crecimiento de X. campestris. Melaza de
remolacha azucarera parece ser una sustrato industrial adecuado para las
fermentaciones de goma xantana. # 2003 Elsevier Science Ltd. Todos los
derechos reservados. Palabras clave: La goma xantana; biomasa; Melaza; X.
campestris; Fermentacin
1. Introduccin
La goma de xantano, el exopolisacrido de Xantho- monas campestris pv
campestris, es uno de los principales biopolmeros comerciales producidos con
una planta anual en todo el mundo la produccin de 30 000 toneladas, lo que
corresponde a un mercado de $ 408 millones de [1,2] . Debido a su singular
estructura, pantallas de xantano especial pseudoplstico PROP- propie-, alta
viscosidad y solubilidad, estabilidad mejorada en un amplio intervalo de valores
de pH y temperaturas, como as como la compatibilidad con muchas sales,
ingredientes alimenticios y otros polisacridos usados como agentes
espesantes. Estas caractersticas contribuyen al empleo de xantano en una
amplia gama de aplicaciones, especialmente en el industria alimentaria como
un agente espesante y estabilizador, en cosmticos, en la molienda de papel,
textil y de la farmacoterapia tria sector y la recuperacin de petrleo mejorado
tambin en. los produccin, la recuperacin y las propiedades de la goma de
xantano tiene sido revisado recientemente [3] . La melaza es un co-producto
de la produccin de azcar, tanto de la remolacha azucarera, as como de la
caa de azcar, y es definida como el jarabe de la escorrenta de la etapa final
de cristalizacin, de la que la cristalizacin adicional de azcar es

antieconmico [4] . A pesar de sus similitudes, remolacha y de caa melaza

presentan diferencias significativas en lo que respecta a los compuestos
nitrogenados, fermentable azcares, cenizas y contenido de vitamina [5] .
melaza de remolacha azucarera, Por lo tanto, es una solucin de azcar,
orgnica e inorgnica materia en agua con una sustancia seca de 74A / 77% (w
/ w). Azcares totales (principalmente sacarosa) constituyen aproximadamente
el 47A / 48% (w / w) de la melaza, ceniza 9A / 14% (w / w) y el total de
compuestos que contienen nitrgeno (principalmente betana y cido
glutmico) 8A / 12% (w / w). Las variaciones en la composicin de no ocurrir
entre los aos y las plantas de azcar [5] . Remolacha azucarera melaza es
ampliamente utilizado como sustrato en fermentaciones ya que constituye una
valiosa fuente de sustrato de crecimiento posturas tales como el cido
pantotnico, inositol, elementos traza y, en menor medida, la biotina [5] . sin
embargo, el ocurrencia de pirazinas nitrogenadas voltiles no deseados, *
Autor correspondiente. Tel .: ' / 30-310-79-8610; fax: ' / 30-310-79- 8726. Email: skarebz@otenet.gr (GN Skaracis). Process Biochemistry 39 (2003) 249A /
256 www.elsevier.com/locate/procbio 0032-9592 / 03 / $ - see front matter #
2003 Elsevier Science Ltd. Todos los derechos reservados. doi: 10.1016 /
S0032-9592 (03) 00067-0
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pirroles, as como los furanos y fenoles han sido descrito [5] . Otros
contaminantes tales como metales pesados, biocidas y cidos orgnicos
tambin se detectaron, pero la mayora de ellos a niveles de concentracin
ms bajos que la necesaria para afectar a la inhibicin proceso [5] . Sin
embargo, en los procesos con melaza como sustrato nico o cuando se utiliza
en alta cantidades como co-sustrato, inhibidores especficos son en parte
eliminarn al pretratamiento [5] . Para nuestro conocimiento, la melaza de
remolacha azucarera slo ha sido utilizado en un estudio anterior para producir
xantana [6] , en que se seleccionaron un nmero de sustratos industriales para
la produccin de goma de xantano. En el presente estudio la la optimizacin de
la produccin de la goma de xantano a partir de azcar melaza de remolacha
en trminos de la composicin del medio y melaza se llev a cabo un
tratamiento previo. Remolacha azucarera melaza result ser un sustrato
excelente ya que bajo condiciones optimizadas tanto la produccin de goma
xantana y formacin de biomasa se han mejorado.
2. Materiales y mtodos
2.1. Condiciones de microorganismos y de crecimiento X. campestris ATCC
1395, una cepa de tipo salvaje, era utilizado en todo este estudio. La cepa se
adapt a altas concentraciones de melaza como se describe a continuacin y
mantenido en cultivos sumergidos en caldo LB100s (en g / l: extracto de
levadura 5, triptona 10, NaCl 10, sacarosa 100) se almacena a ( / 73 8C. Para
los dos primeros pasos de adaptacin X. campestris se cultiv durante la noche
en un orbital agitacin incubadora (250 rpm) a 30 8C en medio LB que contiene
25 y 100 g de sacarosa, respectivamente, mientras para los prximos tres

pasajes que se cultiv bajo la mismas condiciones en 200 g / l de melaza de

remolacha azucarera. En cada biomasa paso y goma de xantano se midieron y
los mejores resultados se obtuvieron en el quinto pasaje anterior (20,0 y 40,5 g
/ l, respectivamente).
2.2. inculo Slants consistentes en LB25S (sacarosa 25 g / l) eran inoculado a
partir del cultivo almacenado sumergidas por rayas. Los cultivos inclinados se
incubaron a 289 / 1 8C para 36A / 40 h y que se utilizaron para inocular 20 ml
de LB25S en 100 ml matraces Erlenmeyer. La absorbancia inicial a 600 nm
(A600) del medio se ajust a aproxi- madamente 0,1 y matraces se incubaron
en una agitacin rotativa incubadora (289 / 1 8C, 200 rpm) durante 7 h hasta
que su A600 alcanzado aproximadamente 1,4. Se utilizaron alcuotas de 10 ml
para iniciar cultivos de 100 ml en frascos de 500 ml Erlenmeyer que contiene
una concentracin final de melaza de remolacha azucarera de 105 g / l y se
cultivaron bajo condiciones idnticas para 17 h. Cultivos de produccin de
goma de xantano fueron rior consiguiente inoculado con un inculo de 5% (v /
v) de la ltimo cultivo.
2.3. Las fermentaciones Los experimentos se llevaron a cabo en 500 ml
Erlenmeyer frascos con 100 ml de medio que contiene la remolacha azucarera
melaza en las mismas condiciones que los precultivosde durante 3 das. Los
cultivos se desarrollaron en los duplicados y estril se aadieron aditivos en
condiciones aspticas despus de tratamiento en autoclave. Las alcuotas de
aproximadamente 12 ml eran retirado aspticamente de los cultivos cada 24 h.
2.4. Melaza y resinas Melaza de remolacha azucarera fueron suministrados por
el Platy Azcar Planta de Hellenic Azcar Industria SA La industriales resinas de
grado utilizados para el tratamiento previo de la melaza eran ofrecido
amablemente por Rohm & Haas SA
2.5. La goma de xantano estimacin La goma de xantano se ensay de
acuerdo como anteriormente reportado [7] con la diferencia de que el potasio
solucin de cloruro fue suplementado con EDTA a conseguir una concentracin
de EDTA final de 4 mM. Cuenta fue tomada por los precipitados derivados de la
no-inoculacin medios de comunicacin y los valores RELAClONADAS se
corrigieron en consecuencia. Todas los ensayos se realizaron por duplicado y
las medias se sobre la base de los valores derivados de los cultivos duplicados.
2.6. El peso molecular y el contenido de piruvato de xantana El peso molecular
se determina de acuerdo con papa- Gianni et al. (2001) [8] . Se determin el
contenido de piruvato por HPLC despus de la hidrlisis con HCl al 80 8C y
extraccin con acetato de etilo como se inform anteriormente [8] 2.7. Diseo
experimental y anlisis estadstico el Plackett / Burman diseo experimental
[9,10] era utilizado para evaluar la importancia relativa de los diversos
nutrientes para la produccin de goma de xantano en base a la primera Modelo
de la orden: Y 0b 0 ' X segundo yo x yo sin interaccin entre los factores
utilizados. Cinco las variables se seleccionaron en ocho experimentos con dos
variables ficticias, siendo cada variable un medio con- Constituyente. Los
coeficientes de regresin y valores t se calcularon RELAClONADAS por anlisis

compatible de los datos obtenidos a partir de los cultivos duplicados en la

goma xantana y la biomasa la produccin mediante el MINITAB software de
clculo. S. Kalogiannis et al. / Process Biochemistry 39 (2003) 249A / 256 250
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3. resultados
3.1. Adaptacin Crecimiento de X. campestris en melaza Con el fin de lograr un
crecimiento rpido y acto seguido mayor la eficiencia, el organismo se ha
adaptado a las altas melaza entornos de subcultivos consecutivos. El resultadoing cultivo puro tuvieran caractersticas de mejora en trminos de crecimiento
y produccin de goma xantana.
3.2. Modificacin del ensayo de la goma de xantano Durante la precipitacin
biomasa cuando eran melaza se utiliza como sustrato se observ que parte de
xantano co-precipita con biomasa, incluso cuando las muestras se diluyeron a
un factor de dilucin de hasta 10 [7] . Por lo tanto, el mtodo se modific como
se describe en la Seccin 2 de Para evitar la observada co-precipitacin de
xantano goma con la biomasa durante la centrifugacin. la ptima
Concentracin EDTA para la goma de xantano con- solubilidad sin afectar la
biomasa se determin comparando la centrifugacin y etanol precipitados a
aumentar Concentraciones de EDTA. A concentraciones de EDTA hasta 4 mM
centrifugacin el precipitado se redujo drsticamente mientras que el
precipitado de etanol mostr un aumento igual ( Fig. 1 ). A concentraciones
ms altas de hasta 10 mM, tanto centrifugacin y etanol precipitados se
mantuvieron UN- cambiado. Por lo tanto, a una concentracin de EDTA de 4
mM, recuperacin de la goma de xantano fue considerado como mximo y esta
concentracin se utiliz para la biomasa subsiguiente y la separacin goma de
xantano.
3.3. El tratamiento previo de la melaza Se emplearon varios reactivos y
tratamientos para el pre-tratamiento de la melaza con miras a la eliminacin
de la inhibicin de los factores de crecimiento tales como metales pesados [11]
, cidos orgnicos voltiles y alcoholes con seis o siete tomos de carbono
[12,13] . Los pretreaments utilizados, su respectivos modos de accin y la ms
alta xantana produccin de goma obtenida a partir de cada cultivo se
enumeran en tabla 1 , Donde se demuestra que ninguna de estas
pretratamiento mentos tuvo un efecto positivo tanto en la goma xantana o en
la produccin de biomasa
3.4. Seleccin de aditivos Un conjunto inicial de cinco componentes de medios
se identificaron ficado como potencialmente afecta a la goma xantana y la
biomasa produccin. La disposicin de los niveles de factor, de acuerdo a la
Plackett / Burman Plan experimental, est previsto en la Tabla 2 . Los datos
sobre la goma de xantano y la biomasa la produccin a las 24 h de
fermentacin mostr una amplia variacin 11,9-47,5 g / l de goma de xantano
y 12,6 a 31,7 para la produccin de biomasa. Desde el respuestas (goma de
xantano y de produccin de biomasa) de la ocho experimentos reportados en la

Tabla 2 , El efecto de cada de las cinco variables se calcul y fue claramente se

indica que la adicin de K 2 HPO 4 tenido un positivo efecto sobre la biomasa y
la produccin de la goma de xantano. Por otra parte, las culturas con la
concentracin de la melaza 210 g / l mostr una mayor biomasa y la
produccin de goma xantana que los que a una concentracin de 140 g / l.
Todos los dems factores tenan un efecto ligeramente negativo en los tres
valores medidos. La prueba t para cualquier efecto individual permite una
evaluacin la de una probabilidad, P, que mostr que la nivel de confianza del
clculo de los efectos de K 2 HPO 4 y melaza fue mayor que 95%.
3.5. Determinacin de la concentracin ptima de melaza La goma xantana y
la produccin de biomasa de cultivos con concentraciones crecientes de la
melaza que van desde 105-245 g / l se muestran en la Fig. 2 A y B,
respectivamente. La produccin de goma xantana mxima de 55 g / l era
obtenido a una concentracin de melaza de 210 g / l despus de 48 h de
incubacin. El efecto de la concentracin de melaza en la produccin de
biomasa no era tan profunda como la de produccin de xantano ( Fig. 2 un).
biomasa mxima fue obtenida por los cultivos con la concentracin de la
melaza superior a 175 g / l, mientras que la biomasa fue menor a las 72 h de
incubacin en todas las culturas, lo que indica la lisis de las clulas. El peso
molecular (MW) determinacin de xantano goma producida en las condiciones
experimentales anteriores, mostr que vari desde 0,8 hasta 1,4) / 10 6 Da.
Goma xantana mximo MW se obtuvo tras el crecimiento en una concentracin
melaza de 105 g / l. la disminucin en el MW de xantano se observ con
aumento de la concentracin de melaza ( Fig. 3 ).
3.6. Determinacin de la concentracin ptima de K 2 HPO 4 X. campestris se
hizo crecer en cultivos que contienen el concentracin ptima melaza (175 g /
l) y el aumento de concentraciones de K 2 HPO 4 vara de 0 a 10 g / l. Fig. Higo.
1. Efecto de la concentracin de EDTA en la separacin de xantano goma de la
biomasa. S. Kalogiannis et al. / Process Biochemistry 39 (2003) 249A / 256 251
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4 muestra que la produccin mxima de la goma de xantano fue obtenido a 4 g
/ l K 2 HPO 4 concentracin despus de 24 h, mientras se era inferior a las 72 h
en todas las culturas que contienen ms de 4 g / l de K 2 HPO 4 . La mxima
produccin de biomasa fue de obtenido en la misma concentracin de K 2 HPO
4 adems despus de 24 h. El ptimo determinado experimentalmente
concentracin es comparable con el fosfato ptima concentracin de 6 g / l
observ en un estudio anterior [14] . Con el fin de investigar si K 2 HPO 4
mejorado la productividad como iones fosfato estaban actuando como un
buffer- agente ING o porque los fosfatos esenciales para la el crecimiento del
microorganismo se facilitan y, adems si los iones de potasio juegan un papel
importante, cultivos que contienen las concentraciones equimolares de K 2
HPO 4 (4 g / l, aproximadamente 23 mM), Na 2 HPO 4 y TRISA / tampn, pH 7,0
se compararon con respecto a la biomasa y la produccin de la goma de
xantano ( Fig. 5 ). culturas con Na aadido 2 HPO 4 exhibido produccin

idntica como los que tienen K 2 HPO 4 y ms altas que las que contiene Trisa /
buffer. Sin embargo, los cultivos de contencin ING Trisa / amortiguar exhibido
mayor biomasa y xantana la produccin de las encas que los que no tienen
ningn tipo de aditivos. La presencia de K 2 HPO 4 y KH 2 correos 4
concentracin las no tuvo un efecto significativo en la media MW del xantano
producido que se mantuvo en el orden de 1.1a / 1.3) / 10 6 Da. En cuanto el pH
inicial valores, se encontr que la goma xantana con la mxima MW se obtuvo
a un valor de aproximadamente 6,0 (datos obtiene, pero no se muestra). A
pesar de pretratamientos melaza no mejoraron la produccin de la goma
xantana MW fue mayor en todos los casos ( / 1.4) / 10 6 Da). piruvato
contenido se estim en el orden de 1.2a / 2,3%. 3.7. Determinacin del pH
inicial ptima El efecto del pH inicial se estudi en X. culturas campestris con
pH inicial que oscila entre 5,1 y 7,7 ( Fig. 6 ). La adicin de sales de fosfato a la
soluciones melaza esterilizados afectados en gran medida su pH valores como
soluciones tampn de una concentracin significativa tabla 1 melaza
pretratamientos Tratamiento Accin aplicaciones Produccin de xantano (g / l)
a las 24 y 48 h No hay un tratamiento 26.5 / 46.9 Aireacin, la aireacin del
mo- caliente muchachas La eliminacin de los cidos y de baja emisin de
carbono alcanoles Fattohi, [13] 29.2 / 30.3 K 4 Fe (CN) 6 Reduccin La
fermentacin del cido ctrico [5] 14.9 / 14.3 La acidificacin (H 2 ASI QUE 4 ) Y
pre- precipitacin a pH 4,0 La eliminacin de cationes Produccin de levadura
de Baker 38.8 / 36.5 IRC 748, resina de intercambio inico La eliminacin de
cationes, principalmente pesada rieles Tratamiento de aguas residuales
Metalurgia 15.1 / 15.9 XAD 761, intercambio inico AB- resina de adsorcin
Eliminacin del color, HMF, protenas, tan- ninjas y complejos de hierro Organis
cidos fermentaciones, farmacutica aplicaciones, la hidrlisis del almidn 20.5
/ 23.3 XAD 1180, resina de absorcin La eliminacin selectiva de composicin
orgnica libras La recuperacin y purificacin de los antibiticos, ster- oids,
enzimas, etc. 18.8 / 16.8 carbn activo Absorcin Los metales pesados [11]
32.7 / 21.9 La acidificacin (H 2 ASI QUE 4 ) Y la accin tiva de carbono La
eliminacin de cationes y de absorcin 35.9 / 36.6 Tabla 2 Plackett / Matriz
Burman de cinco factores a dos niveles en ocho frascos de fermentacin y la
goma de xantano producido, la biomasa y el rendimiento de xantano (medios
de dos experimentos) Nmero Factor ( ' / , alto nivel/( / , nivel bajo) Xantano
(g / l) La biomasa (g / l) K 2 HPO 4 Extracto de levadura maniqu 1 Agua del
grifo Melaza maniqu 2 Triton 80 1 ' / ( / ( / ' / ( / ' / ' / 26.0 27.6 22.9 22.6 2 ' / ' /
( / ( / ' / ( / ' / 38.6 52.3 35.0 25.3 3 ' / ' / ' / ( / ( / ' / ( / 27.9 35.1 23.6 20.4 4 ( /
' / ' / ' / ( / ( / ' / 4.0 4.6 12.8 12.8 5 ' / ( / ' / ' / ' / ( / ( / 48.3 45.8 33.2 30.9 6 ( / ' /
( / ' / ' / ' / ( / 19.2 21.1 13.2 11.9 7 ( / ( / ' / ( / ' / ' / ' / 23.8 26.7 20.9 15.6 8 ( /
( / ( / ( / ( / ( / ( / 12.0 11.8 17.2 17.4 Los respectivos niveles altos y bajos de los
aditivos fueron; 0 y 10 g / l K 2 HPO 4 , 0 y 10 g de extracto / l de levadura, 140
y 210 ml / l de melaza, 0 y 0,1 g / l Triton 80, la ausencia y la presencia de agua
del grifo. S. Kalogiannis et al. / Process Biochemistry 39 (2003) 249A / 256 252
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fueron creados (23 mM). Esta propiedad particular de la iones fosfato fue
explotado con el fin de lograr molaridad de fosfato equivalente pero diferente

pH inicial Los valores [15] . En todas las culturas con pH inicial por encima de
5,9 la produccin de biomasa fue superior a 30 g / l despus de 24 h ( Fig. 6 b)
mientras que la fluctuacin de pH mostr un similares patrn en todas las
culturas. Despus de 20 h el pH de los cultivos cado a aproximadamente 6,0
mientras que despus de 48 y 72 h se elev a aproximadamente 7,0 ( Fig. 6
do). Mximo se obtuvo la produccin de goma xantana despus de 24 h de los
cultivos con un pH inicial de 6,6 ( Fig. 6 un). Higo. 2. Efecto de la concentracin
de melaza en (a) goma de xantano y (b) la produccin de biomasa. Higo. 3.
Dependencia de peso molecular medio en goma de xantano la concentracin
de la melaza del medio. Higo. 4. Cintica de (a) goma de xantano y (b) la
produccin de biomasa en diferentes concentraciones K 2 HPO 4 . Higo. 5. Se
obtiene (a) goma de xantano y (b) la biomasa a partir de cultivos donde Na 2
HPO 4 , K 2 HPO 4 y Trisa / tampn de pH 7,0 se utilizaron como aditivos. S.
Kalogiannis et al. / Process Biochemistry 39 (2003) 249A / 256 253
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3.8. Comparacin de los medios Higo. 7 proporciona una comparacin entre la
LB y melaza utilizados como medios de fermentacin y inculo. En la
produccin de la melaza, el crecimiento y la goma de xantano fueron ms alto
que en el LB sustrato sinttico que contiene concentraciones de sacarosa
idnticas. Adems, la cultura turas inoculados a partir de los sustratos melaza
mostraron la produccin de la goma de xantano ms altos que los inoculacin
RELAClONADAS de LB.
4. Discusin La adaptacin de X. campestris en altas melaza ambientes
mientras que mantiene su capacidad de producir Se ha informado de xantano.
El xito se realiz en el logro crecimiento a concentraciones de melaza mayor
que 140 g / l, superando as las dificultades encontradas por re- buscadores
anteriormente [16] que inform de la inhibicin de la crecimiento en
concentraciones tan melaza. En una semejante la moda con estos resultados,
la ocurrencia de espon- nea alta produccin de variantes de X. campestris ha
sido anterior demostrada por un nmero de investigadores [17 / 20] .
Adems, la importancia de la adaptacin cepa a la melaza tambin se ha
subrayado anteriormente [6] . El mtodo para la determinacin de la goma de
xantano se modific con el fin de evitar la cooperacin observada la
precipitacin de la goma de xantano y la biomasa, debido a la presencia de
cationes polivalentes, especialmente calcio que es abundante en la melaza de
remolacha azucarera [5] . cationes polivalentes tal como calcio, aluminio y
amonio cuaternario sales son especialmente eficaces en la precipitacin de
goma de xantano debido a ion de unin de los cationes a la grupos ionizados
en el polisacrido polianinico [3] . En comparacin con otros polisacridos
usados como alimento aditivos, goma de xantano se ha demostrado ser una de
los que se unen de calcio el ms fuerte [21] . Por lo tanto, que complementa la
solucin de KCl, que se utiliza en la biomasa precipitacin con EDTA, dio como
resultado en la mejora de solubilidad goma de xantano ( Fig. 1 ). Aunque la
melaza de remolacha normalmente contienen la mayor parte sub- posturas
necesarios para la nutricin de los microorganismos, dependiendo de la

fermentacin, que puede ser complementaria ted con ciertos componentes

tales como nitrgeno, fosfo- rus o magnesio [5] . Debido a su bajo coste, el uso
de agua del grifo se investig ya que tambin puede servir como una fuente
adicional de magnesio para el medio, ya que contenan aproximadamente 34
mg / l de magnesio. Triton 80 se ha informado para mejorar el rendimiento de
xantano y calidad del polmero por X. campestris cultiva en un qumicamente
medio definido [22] . Sin embargo, en el presente experimento tos, la
productividad no mejor ( Tabla 3 ) blema blemente debido a la melaza ya
contiene sustancias que actan como agentes tensioactivos [5] . Esto tambin
est indicado por el hecho de formacin de espuma que se observa con
frecuencia en la melaza fermentacin Higo. 6. Efecto del pH inicial en (a) la
goma de xantano, (b) la biomasa y (c) pH fluctuacin. Higo. 7. Se obtiene (a)
goma de xantano y (b) la biomasa a partir de cultivos inoculadas y cultivadas
en a partir de melaza ( / "UN / ), Inoculado a partir de una qumicamente
definido medio y cultivados en melaza ( / mam / ) y inoculadas y cultivadas
en un medio qumicamente definido ( / 2A / ). S. Kalogiannis et al. / Process
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taciones cuando la adicin de un agente anti-espuma no es suficiente. Extracto
de levadura, que sirve como un adicional de fuente de nitrgeno, tuvo un
efecto negativo tanto en xantana y la produccin de biomasa ( Tabla 3 )
probablemente porque el contenido de nitrgeno orgnico en la melaza es
suficiente para apoyar el crecimiento de X. campestris mientras que ms al
aumento por la adicin de extracto de levadura tenido un efecto perjudicial.
Esto tambin es apoyado por los hallazgos anteriores que indicaban el efecto
inhibitorio de concentraciones altas de nitrgeno tanto en crecimiento y
produccin de goma de xantano [23] . En conclusin, entre los aditivos que
fueron investigados, solamente fosfatos demostrado tener un efecto positivo
en la produccin de goma de xantano ( Tabla 3 ). Los niveles ptimos de
melaza y fosfatos fueron posteriormente ms definido con precisin en
experimentos en el presente estudio. Aunque, Abd El Salam et al. (1993) [24]
inform de la fortificacin con cloruro de amonio de un medio de el uso de
melaza de caa de azcar como fuente de carbono, una comparacin entre sus
resultados y los que se presentan en este estudio, deben ser tratados con
cuidado. melaza de remolacha contiene compuestos nitrogenados y
significativamente ms se espera para satisfacer la demanda de nitrgeno de
la organismo en mayor medida, pero por otro lado tienen tambin contener
menos biotina [5] . La investigacin del papel de los fosfatos en el medio de
cultivo revel que la produccin de xantano era inferior en presencia de Tris
que en la presencia de K 2 HPO 4 y Na 2 HPO 4 pero ms alto que en los
medios de comunicacin con sin aditivos. Esto indic que la adicin de fosfatos
aumento de la produccin de goma de xantano tanto porque el medio era
deficiente en fosfatos y se requiere su suplementacin y porque servir como un
agente tampn, la reduccin de las fluctuaciones de pH de la cultura. Por lo
tanto, un K 2 HPO 4 concentracin de 4 g / l es la concentracin crtica a la que
el nutriente requisitos del organismo se conocieron cuando el pH es mantenido

relativamente constante. En general se acepta que un pH casi neutro es ptimo

para polisacrido sntesis y el crecimiento del organismo. la importancia tancia
de pH en las fermentaciones de X. campestris ha sido revisado anteriormente
[3] . En el presente trabajo la produccin de aproximadamente 53 g / l de goma
de xantano en 24 h se informa utilizando como sustrato melaza de remolacha
de azcar, un subproducto de la industria alimentaria. Pro- produccin y
rendimiento (61%) se encuentran entre las ms altas todava reportado para
las fermentaciones de goma de xantano en una industria juicio o un medio de
laboratorio [3] . En un estudio anterior de una produccin de la goma de
xantano 22,8 g / kg de medio de melaza de remolacha azucarera se inform [6]
. Aunque, en biorreactores de laboratorio, la produccin de polisacrido rara
vez excede de 25 g / l [3] , Los procesos industriales pueden alcanzar un
contenido final de goma de xantano de aproximadamente 50 g / l [25,26] . Sin
embargo, Abd El Salam et al. (1993) reportaron una produccin de la goma de
xantano tan alto como 70,5 g / l de una cultura cultiva en melaza de caa de
azcar utilizando un relativamente alta concentracin de azcar inicial del 25%
[24] . los aumento de la produccin y el crecimiento observado usando melaza
como sustrato son probablemente atribuirse en parte a la alta disponibilidad de
aminocidos y en especial glutamato en la melaza. De hecho, en un estudio
anterior que era se muestra que la mejor fuente de nitrgeno para X.
campestris era glutamato a una concentracin de 15 mM (2,2 g / l) [27]
mientras que en el presente estudio el medio de fermentacin contenan
aproximadamente 1,3 g / l de glutamato libre y unido compaero, con un
contenido de aminocidos total de 4,0 g / l. Ms- encima, la melaza de
remolacha azucarera contiene cantidades significativas de cidos orgnicos [4]
, lo que podra aumentar la goma de xantano produccin como se ha
observado anteriormente en el presencia de cidos orgnicos metabolizables
[28] y ctrico cido [27,28] . Por lo tanto, el efecto combinado de aminocidos y
el contenido de cidos orgnicos de la melaza junto con el la adaptacin cepa
podra ser las razones de la elevada produccin observada en el presente
estudio. El trabajo futuro se centrar principalmente en la qumica y
caracterizacin reolgica del producto, as como en purificacin y clarificacin
de los mtodos. La escala hasta biorreactores de laboratorio y planta piloto es
un requisito previo para el estudio detallado de los efectos del tiempo y
parmetros de ingeniera sobre la produccin y la xantana calidad. referencias
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polisacridos. Trends Biotechnol 1998; 16: 41A / 6. [2] Demain AL. Pequeos
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