Instituto Politcnico Nacional

Escuela Nacional de Ciencias Biolgicas

Prctica #10 Determinacin de colesterol en la yema de huevo

Ramrez Aguilera Michelle Yazareth; Surez Hernndez Roberto

2OM1
SECCIN 2
Entrega: --/--/16

Introduccin
Los lpidos se clasifican en tres grupos de los
guales
los principales son simples y
complejos. Dentro de la clasificacin simple
se encuentran los esteroides, en el cual se
encuentra el tan mencionado colesterol, que
es el esteroide ms abundante en los
animales. Se clasifica como esteroide debido
a su grupo C3-OH. El colesterol es un
componente principal de las membranas
plasmticas
animales
y
constituye
tpicamente del 30 al 40 mol% de los lpidos
de la membrana plasmtica.
En la yema de huevo hay una gran variedad
de lpidos presentes, entre los cuales se
quiere determinar la cantidad de colesterol de
la yema de huevo, para lo cual se utilizara un
mtodo colorimtrico llamado LiebermanBurchard en el cual la reaccin tiene lugar en
un medio fuertemente acido en el cual el
colesterol pasa por una etapa de oxidacin
gradual, la cual dar lugar a una color verde
producto de coloraciones amarillas y azules,
para despus en un espectrofotmetro leer
un mximo de absorbancia de 640 nm.
Objetivo
Determinar la concentracin de colesterol en
la yema de huevo, por el mtodo de
Lieberman-Burchard
Resultados
Durante el desarrollo de la prctica se
obtuvieron los resultados siguientes:

Tubo
1
2
3
4
5
P1
P2

Cest
0.02 mg
0.04 mg
0.06 mg
0.08 mg
0.1 mg
0.00
0.00

g
20
40
60
80
100
10
24

Discusin
Se realiz la determinacin de colesterol por
medio del mtodo de Lieberman-Burchard,
en donde a una serie de cinco tubos, se le
agrego estndar de colesterol el cual consitio
en 4 mg de colesterol disueltos en 50 ml de
cloroformo; es importante mencionar que a
los tubos testigo y problema no se le
agregaron ml de estndar de colesterol, esto
porque el testigo es para ajustar el
espectrofotmetro a cero y el problema no
tiene colesterol por que el colesterol vendr
del extracto de lpidos utilizado (solo
agregado al tubo problema) el cual se
cuantificara despus interpolando en la curva
tipo realizada con la absorbencia medida en
el espectrofotmetro a 640 nm; por supuesto
que antes los tubos tuvieron que haber

pasado por una agregacin en ml de

cloroformo y anhdrido actico para despus
agregarles cido sulfrico; todo esto para
cumplir con el mtodo de LiebermanBurchard el cual consiste en que la reaccin
se realiza en general en un medio acido
fuertemente constituido por cido sulfrico,
cido actico y anhdrido actico. En la
reaccin, el colesterol sufre una oxidacin
gradual formndose en cada capa una
molcula de colestapolieno que posee un
doble enlace adicional con respecto al
compuesto del cual deriva. La etapa inicial de
la reaccin consiste en la protonacin del
grupo OH del colesterol, con la siguiente
perdida de agua obtenindose el ion carbonio
3,5-colestadieno que constituye el primer
paso de la reaccin de color. La oxidacin
secuencia de este ion carbonio alilico por el
SO2- produce un cido colesta-hexanosulfrico cromoforo con mximos de
absorbancia, que en la mayora de la
literatura dice 620 nm, sin embargo en este
caso se realiz a 640nm.
Este mximo de absorcin se torna de color
verde, que es el intermediario que medimos,
si bien no parece ser el producto final de la
reaccin. La formacin del intermediario tiene
un bajo rendimiento en el tiempo que se
considera
ptimo
para
la
medicin
espectromtrica del colesterol.
El valor de la interpolacin del tubo problema
fue de:
P1= 10 g
P2= 24 g
En la curva tipo se tom la decisin de omitir
dos puntos debido a que en las lecturas el
espectrofotmetro estaba
fallando
sin
embargo la curva se pudo realizar con tres
puntos.

Conclusin
Se realiz la determinacin del colesterol con
el mtodo de Lieberman-Burchard, en donde
la curva tipo se realiz con algunos
problemas debido a las lecturas, sin embargo
al interpolar los tubos problemas se logr
determinar la cantidad de g del extracto de
lpidos.

Bibliografa
http://sisbib.unmsm.edu.pe/bibvirtualdata/tesi
s/salud/ramirez_v_s/cap2.pdf.
Vista
16/04/2016
http://es.slideshare.net/ingridjohanasierrameji
a/practica-colesterol. Vista 16/04/2016
https://profesoramaribelarnes.files.wordpress.
com/2009/11/lab-5-colesterol-tec-2010.pdf.
Vista 16/04/2016
Donalt- Voet, Judith G.V, Charlotte P. 2011.
Fundamentos
de
Bioqumica.Segunda
edicin. Medica panamericana. Buenos
Aires.pp 1264
file:///C:/Users/michelle/Downloads/Qu
%C3%ADmica%20Cl%C3%ADnica
%201994%3B13%20(7)%20496-503.pdf.
Visto el 22/04/2016

Pregunta extra
Los huevos son altamente nutritivos. Proveen
una gran cantidad de protenas completas
como lipovitelina, fosfovitina y lipoprotenas
de baja densidad, vitamina A, riboflavina,
cido flico, vitamina B6, vitamina B12;
adems de oligoelementos como hierro,
calcio, fsforo o potasio.