Biossegurana

Laboratrio de Influenza

Introduo

A gripe H1N1 consiste em uma doena causada por uma mutao do vrus da
gripe. Tambm conhecida como gripe Influenza tipo A ou gripe suna, ela se
tornou conhecida quando afetou grande parte da populao mundial entre 2009
e 2010.
Os sintomas da gripe H1N1 so bem parecidos com os da gripe comum e a
transmisso tambm ocorre da mesma forma. O problema da gripe H1N1
que ela pode levar a complicaes de sade muito graves, podendo levar os
pacientes at mesmo morte.
Surge ento a necessidade de criar um meio responsvel por salvaguardar a
populao, a vacina contra a gripe, tem como intuito proteger contra a influenza
A, incluindo a preveno contra a cepa H1N1, e a influenza B.
Neste trabalho, abordaremos as tcnicas necessrias para fabricar e conservar
as vacinas, bem como o laboratrio adequado para tanto.

Desenvolvimento

Processos a serem executadas

Recepo e controle dos ovos embrionados
Um caminho leva da granja para o Laboratrio entre 120 e 250 mil
ovos de galinha embrionados de 10-11 dias, acondicionados de forma
bem protegida para no haver perda.
Eles so retirados do caminho para o interior do centro de produo
passando por uma esteira, so retirados da bandeja da granja e
realocados em bandejas do laboratrio livres de contaminao, a
troca de bandejas feita por uma ventosa, onde o brao conectado a
ventosa se move de deposita o ovo na bandeja do laboratrio.
Os ovos podem ser analisados automaticamente no ovoscpio
automtico, para verificar sua qualidade.
A ovoscopia manual realizada em uma amostragem do
carregamento, colocando uma luz no topo dos ovos para verificar se
tem boa vascularizao e se o embrio est vivo (adequado para
concluir a vacina).

Inoculao e incubao
Os ovos selecionados seguem para a inoculao automtica. Isso
significa que sero introduzidos neles o Vrus da Influenza.
A inoculao feita assim: uma agulha faz um furinho no topo da
casca e outra agulha injeta o vrus diretamente na cavidade
alantica.
A etapa seguinte a INCUBAO. Em cada incubadora cabem em
torno de 120 mil ovos. Depois de um tempo de incubao, aps a
replicao do vrus, os ovos so colocados na cmara fria para que
ocorra a morte dos embries, a retratao dos vasos sanguneos e a
liberao do vrus no lquido alantico.

Colheita do lquido alantico

Nessa fase, os ovos so cortados no topo e o lquido alantico
colhido, por inverso dos ovos, isto , virando-os de cabea para
baixo.

Clarificao e concentrao do vrus

O material colhido - 1500 litros - filtrado e vai para a sala de
clarificao. Passa pela centrfuga para que sejam retirados os restos
de membrana, de casca de ovos e hemcias. Ao final dessa fase,
ento, os 120-140 mil ovos se tornam aproximadamente 100 litros de
material concentrado.

 Purificao
O material ser purificado duas vezes e os 120-140 mil ovos se
transformam, ento, em 1000 mL. Cada mL equivale a
aproximadamente 400 doses. a parte mais preciosa, porque uma
gotinha contm vrias doses de vacina.

Fragmentao e inativao viral

Nessa fase o material diludo e recebe um detergente para que
ocorra a fragmentao do vrus. Aps um tempo a suspeno viral
fragmentada clarificada para tirar os restos maiores ou mesmo
vrus inteiros.

Filtrao esterilizante
A seguir o material diafiltrado para tirar um pouco do detergente.
Esse ajuda na imonogenicidade da vacina e ajuda tambm a no
formar agregados, sendo assim, importante que no seja retirado
todo o detergente.
O produto passa por uma filtrao esterilizante e, em seguida, feita
uma amostragem, para verificar a qualidade da vacina influenza
monovalente.

Suspenso monovalente
A suspenso viral fragmentada processo de rompimento do vrus -
ento inativada com formaldedo, para tornar o vrus sem capacidade
de replicar, infectar e causar doena. O material fica estocado em
cmara fria, at a aprovao.

Formulao e envase Vacina Influenza Trivalente

(fragmentada e inativada)

Em seguida vem a etapa de formulao, quando so misturados os

trs tipos de monovalente e outras substncias, para que a vacina
fique com a composio e diluio final. Finalmente, a vacina
formulada segue para a fase do envase, que sua distribuio em
frascos. Depois de mais alguns procedimentos de controle de
qualidade, as vacinas so ento rotuladas, embaladas e entregues ao
Ministrio da Sade.

Equipamentos necessrios