INTEGRANTES

Juan Esteban Santana Ocampo

Tania Isabel Buelvas Jaramillo
Tomas Morales Rodas
Miguel ngel Galeano Osorio.

CAF
ORGANIC

PROYECTO DE INNVESTIGACION
INSTITUCION EDUCATIVA COLEGIO LOYOLA PARA LA CIENCIA Y LA
INNOVACION

Creada por resolucin N 00003 de Enero 5 de 2010

DANE:105001025984 NIT: 90033925984

VERCION
2016

INTRODUCION -------------------------------------------------------------------------------------------------------------2
PLANEAMIENTO DEL PROBLEMA -------------------------------------------------------------------------------------3
PREGUNTA DE INVESTIGACIN ---------------------------------------------------------------------------------------4
OBJETIVOS ------------------------------------------------------------------------------------------------------------------4
OBJETIVO GENERAL: ----------------------------------------------------------------------------------------------------------4
OBJETIVOS ESPECFICOS: -----------------------------------------------------------------------------------------------------4
JUSTIFICACIN -------------------------------------------------------------------------------------------------------------5
MARCO TERICO ----------------------------------------------------------------------------------------------------------6
QU ES LA PLAGA HYPOTHENEMUS HAMPEI (BROCA)? -----------------------------------------------------------------6
QU DAOS CAUSA LA BROCA? --------------------------------------------------------------------------------------------6
CONTROL DE LA BROCA ------------------------------------------------------------------------------------------------------6
QU ES UN HONGO ENTOMOPATGENO? --------------------------------------------------------------------------------7
QU ES EL HONGO ENTOMOPATGENO METARHIZIUM ANISOPLIAE? --------------------------------------------------7
USOS DE METARHIZIUM ANISOPLIAE ---------------------------------------------------------------------------------------8
QU ES EL HONGO ENTOMOPATGENO BEAUVERIA BASSIANA? -------------------------------------------------------8
METODOLOGA --------------------------------------------------------------------------------------------------------8
1.1 MUESTREO Y AISLAMIENTO DE LOS HONGOS Y EL COLEPTERO -----------------------------------------------------8
1.2 CULTIVO IN-VITRO DE LOS HONGOS -----------------------------------------------------------------------------------9
1.3 EVALUACIN DEL EFECTO ANTAGNICO DE LOS HONGOS CONTRA EL COLEPTERO. -------------------------------9

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Evaluacin de la efectividad de los hongos

entomopatogenos nativos de cultivos de caf (coffea
arabica,1887) del municipio de Amga como Biocontrolador del coleptero Hypothenemus Hampei
(Broca,1983 Colombia) por medio pruebas in-vitro e
invernadero.

INTRODUCION
El caf es la segunda bebida ms consumida en el mundo, lo que lo convierte, en
el segundo producto que ms divisas mueve despus del petrleo. En Colombia,
por su parte es el tercer producto de mayor exportacin, siendo uno de los pases
con mayor participacin en el mercado internacional, ocupando el cuarto puesto
en cantidad de produccin. Sin duda alguna, fue un elemento clave en el
desarrollo social, poltico y econmico del pas, luego de su gran auge obtenido
por su alta rentabilidad; el cual, se ha ido perdiendo, debido al incremento del
costo de mantenimiento del cultivo.Los caficultores, se enfrentan da a da con un
sinnmero de problemticas, la competencia internacional con mtodos de
tecnologa avanzada, hasta el cambio climtico, pero, la ms perjudicial de todas,
las plagas. El coleptero Hypothenemus Hampei Broca, cual causa daos desde
un 5% hasta un 50% en la cosecha de este fruto, adems de est asociado a
determinados hongos portadores de la Ocratoxina, sustancia que causa adems
de un mal sabor, efectos negativos en la salud; para la plaga no se ha
implementado un mtodo de control completamente efectivo, por eso, se busca
desarrollar un biocontrolador a base de hongos entomopatgenos aislados del
mismo cultivo, que, a diferencia de los insecticidas qumicos, puede tener un bajo
costo y ser amigable con el medio ambiente.

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PLANEAMIENTO DEL PROBLEMA

El caf es uno de los productos con mayor importancia en la economa y la cultura

a nivel internacional. Colombia se incluye en la lista de pases que ms influencia
tiene en el mercado, pero la produccin en nuestro pas, ha venido reduciendo en
los ltimos aos, pasando de representar el 2,8% del PIB total nacional en 1990, a
representar el 1,8% en el 2001, adems, Pese a que histricamente el caf ha
sido el producto lder en las exportaciones nacionales, actualmente ha sido
relegado al tercer puesto. Perdi su tradicional primer lugar a manos del sector
petrleo y sus derivados en el ao 1990, y se ubic en el tercer puesto a partir del
2001, ao en el que el carbn super el valor de sus exportaciones. (Covaleda,
2005). Toda esta cada en los ndices de produccin e importancia econmica
tanto en el contexto nacional como en el internacional, se debe a que da a da los
caficultores enfrentan un sinnmero de problemticas, desde la competencia con
grandes potencias que usan tecnologas avanzadas, hasta el cambio climtico y el
desarrollo de plagas que afectan la calidad y el nivel de produccin. Como
consecuencia de la crisis muchos productores se han visto obligados a cambiar
sus cosechas por diferentes productos, o abandonar por completo sus terrenos.
Este conjunto de razones, convierten en un aspecto fundamental el desarrollo de
planes e investigaciones que permitan devolver la rentabilidad, evitando la cada
de la productividad, que visiblemente se ha incrementado en los ltimos tiempos.
Hypothenemus Hampei es un coleptero conocido por ser el principal riesgo en un
cultivo de caf (Barrera, 2002), ya que su ataque consta en perforaciones a los
frutos y la caida de estos cuando estan jovenes, con un porcentaje de caida del
50% en frutos de 2 meses y 25% en frutos de 3 meses, ocacionandose un estado
de maduracin prematura, perdiendo un porcentaje de 18.1% del peso y
repercutiendo en perdidas que van desde 5% hasta un 24% y en casos extremos
de un 50% de todo el cultivo (BustilloPardey, 2010). Pero a diferencia de otros
problemas (como la roya) a los que ya se les ha encontrado una solucin eficaz y
viable en trminos econmicos y salubres, la broca del caf sigue siendo un
obstculo a la hora de sembrar y aunque han tratado de controlarla, estas no han
sido lo suficientemente eficaces, entre estas se cuentan:
El control biolgico por medio de enemigos naturales de H. Hampei, se realiza con
parasitoides como Hymenopteros, o de depredadores como los Anthocoridae
(Hemiptera) y Cucujidae (Coleoptera). Este mtodo es muy poco utilizado, debido
a que los insectos no son nativos de estas condiciones climticas por lo cual no
tienen un entorno apropiado para la ofensiva y solo afecta un pequeo porcentaje
de la poblacin.

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El control qumico se basa principalmente en la utilizacin de insecticidas,

especficamente de Clorpirifs y de Endosulfan, los cuales segn estadsticas es
el mtodo ms eficaz en cuanto al control de esta plaga, aun as se han notificado
que algunos de estos insectos desarrollaron resistencia a estos. No obstante, en
general cualquier insecticida es peligroso para la salud del ser humano y daino
para el ambiente.

Pregunta de investigacin
Cmo determinar la efectividad de los hongos entomopatogenos nativos en un
cultivo de caf del municipio de Amaga como Bio-controladores del coleptero
Hypothenemus Hampei en condiciones in-vitro e in-vivo?

Objetivos
Objetivo general:
Evaluar el efecto antagnico de los hongos entomopatogenos nativos de los
cultivos de caf del municipio de Amag sobre el coleptero Hypothenemus
Hampei para contrarrestar los efectos causados por ste en los cultivos de caf en
condiciones in-vitro e in-vivo.

Objetivos especficos:

Aislar e identificar hongos entomopatgenos nativos de cultivos de caf en el

municipio de Amag.
Cultivar y caracterizar los hongos entomopatgenos aislados del cultivo de caf.
Aislar el coleptero Hypothenemus Hampei de los cultivos del municipio de
Amag y cultivarlo por el mtodo de invernadero.
Comprobar el efecto antagnico de los hongos entomopatgenos previamente
asilados, enfrentndolos por mtodo in-vitro contra brocas del caf cultivadas en
el invernadero.

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Justificacin
Da a da los caficultores colombianos enfrentan un sinnmero de problemticas,
desde la competencia con grandes potencias que usan tecnologas avanzadas,
hasta el cambio climtico y la expansin de plagas que afectan la calidad y el nivel
de produccin. Como consecuencia de la crisis muchos productores se han visto
obligados a cambiar sus cosechas por diferentes productos, o abandonar por
completo sus terrenos. Este conjunto de razones, convierten en un aspecto
fundamental el desarrollo de planes e investigaciones que permitan devolver la
rentabilidad, evitando la cada de la productividad, que visiblemente se ha
deteriorado en los ltimos tiempos.
La Federacin Nacional de Cafeteros ha llevado a cabo investigaciones y puesto
en prctica diversas estrategias para enfrentar el cambio climtico y mantener la
postura del caf ante el mercado internacional. Adems, su institucin Cenicaf, el
centro de investigaciones ms importante de caf a nivel mundial, ha desarrollado
variedades de caf resistentes a diferentes plagas, como la roya, con el propsito
de mantener la calidad y la cantidad de la produccin, evitando el uso de agentes
qumicos. Sin embargo, an no se cuenta con una forma de control
completamente efectiva para La broca del fruto del caf (Hypothenemus Hampei),
una de las plagas ms dainas para los cultivos, que ocasiona prdidas muy
significativas en los rendimientos por cosecha. Los daos, van desde un 5% hasta
un 24% segn la infestacin que se presente, llegando incluso en casos extremos
en los que se reportan prdidas hasta del 50%. Este coleptero puede alcanzar
altos niveles de poblacin y si no se ejerce ninguna medida de control puede
infectar todos los frutos de un cafetal, adems de atraer diferentes tipos de
parsitos y hongos que se alimentan de la larva y causan daos a la salud del
consumidor, por lo que los campesinos se ven obligados a usar insecticidas
qumicos, el ms popular de estos, el Endosulfn, producto altamente txico tanto
para el suelo como para la salud humana, razn por la que incluso ha sido
prohibido en diferentes pases.
Se ha descubierto que los hongos entomopatgenos tienen una alta posibilidad de
ejercer una accin efectiva para el control de la plaga, pero an no se ha
encontrado un mtodo de aplicacin que resulte completamente efectivo para
contrarrestar los efectos negativos de la Broca. Por ello, resulta conveniente aislar
hongos nativos de los cultivos de caf y buscar la forma de potencializar su efecto,
para as poder implementar un biocontrolador a base de dichos hongos, buscando
brindar una prevencin prctica del coleptero, sin afectar el ecosistema del
cultivo.

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Marco terico

Qu es la plaga Hypothenemus Hampei (Broca)?

La Hypothenemus Hampei hace parte de la familia de los colepteros y la
subfamilia Scolytide, es conocida como una de las plagas ms dainas en los
cultivos de caf, ya que ataca al fruto.
La broca, en edad adulta es negra brillante, puede alcanzar un tamao de 1,5
milmetros de largo, nacen a los cinco das de puestos los huevos, a las dos
semanas se convierten en pupas y una semana despus se convierten en brocas
adultas; Los machos pueden llegar a vivir dos meses, y las hembras hasta seis
meses.
Viven en los frutos del caf. Las hembras perforan la corona del fruto buscando la
almendra o semilla. Si el fruto est tierno, la broca se queda en el orificio o lo
abandona. Cuando el fruto tiene la semilla dura, la broca hace la perforacin hasta
alcanzar la semilla, donde agranda una galera en forma de cueva, para
posteriormente poner sus huevos, a los pocos das nacen y las hembras salen en
busca de frutos canos.

Qu daos causa la Broca?

La broca ataca los frutos de caf en cualquier estado de desarrollo. Los frutos
tiernos perforados se pudren o caen al suelo. Los frutos duros atacados que no
caen son de menor peso. A veces la broca consume toda la semilla produciendo
caf vano. El caf Brocado pierde su calidad y por lo tanto tiene menor precio.

Control de la Broca
Un buen control de la broca seda por medio de unas buenas prcticas culturales,
el control biolgico y el uso correcto de insecticidas.
1 Control cultural
- Rehabilitacin y renovacin de cafetales: es necesario mejorar la plantacin
para que permita la ejecucin de medidas fitosanitarias esenciales.
- Cosecha y rapase: despus de la cosecha se debe hacer una recoleccin de los
frutos que quedaron en la planta y en el suelo, para eliminar la posibilidad de un
campo de sobrevivencia de la broca.

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- Acortar el intervalo de cosecha: en cultivos grandes, es necesario hacer un

repaso mensualmente de los frutos ya gechos.
- Podas: para mantener el cafetal bien ventilado, se recomienda efectuar podas al
caf y a los arboles de sombra
2. Control Biolgico: hasta ahora el enemigo natural ms importante de la broca es
el hongo endomopatogeno beauveria bassiana. En las zonas y pocas hmedas
este hongo causa la mortalidad de hasta el 45 por ciento de las brocas.
Recientemente se han introducido dos enemigos naturales de frica Prorops
nasuta y Caphalonomia stephano deris Avispas de Uganda.
3. Control Qumico: Para este control primero se bebe hacer una prueba de la cantidad de
infestaciones en el cultivo, se toman 100 frutos y se comprueba la existencia de la broca,
y si hay ms del 10 por ciento se procede con el esparcimiento del qumico.

Qu es un hongo entomopatgeno?
Los hongos entomopatgenos son aquellos que parasitan diferentes rdenes de
artrpodos, desde araas hasta casi todos los grupos de insectos. Existen hongos
que pueden invadir insectos muertos llamados saprfagos y hongos entomfagos
que infectan insectos vivos provocndoles micosis. Los hongos entomopatgenos
comienzan su infeccin a travs de la cutcula externa del insecto/araas
(hospedero). Se reconocen las siguientes fases de desarrollo del hongo:
Adhesin: germinacin de la espora en la cutcula del hospedero. Penetracin a
travs de un tubo germinativo. Colonizacin que es el desarrollo del hongo dentro
del cuerpo del insecto. Posteriormente se da la muerte del insecto, se produce un
crecimiento hifal mayor dando como resultado el desarrollo de los cuerpos
fructferos. Existen aprximadamente 700 especies de hongos entomopatgenos
en 100 gneros. Estos datos reflejan un potencial para desarrollar programas de
control biolgico con hongos en casi todas las especies de insectos que actan
como plagas1.

Qu es el hongo entomopatgeno Metarhizium anisopliae?

Metarhizium anisopliae es un hongo que crece naturalmente en los suelos en todo
el mundo y causa la enfermedad en diversos insectos, actuando como un
parasitoide; es un hongo mitosporico2. Este hongo produce una enfermedad
denominada como enfermedad muscardina verde, por el color verde de sus
esporas, cuando estas esporas mitticas3 del hongo entran en contacto con el
cuerpo de un insecto husped, germinan y las hifas4 que emergen penetran la

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cutcula. Luego el hongo se desarrolla en el interior del cuerpo y mata al insecto

despus de unos pocos das; en algunas ocasiones este efecto es ayudado por la
produccin de insecticidas cclicos pptidos

Usos de Metarhizium anisopliae

Este hongo entomopatgeno se sabe que ataca a ms de 200 especies de plagas
de insectos, incluyendo termitas. Se utiliza actualmente como un insecticida
biolgico para controlar muchas plagas tales como termitas, trips , etc. Adems
est en investigacin el uso de esta para controlar el mosquito de la malaria. M.
anisopliae no aparece para infectar a seres humanos u otros animales y se
considera una opcin segura para fabricar insecticidas. En 2007 un grupo de
investigadores del Instituto Indio de Tecnologa y Qumica, hallo la manera de
utilizar la gran cantidad de lipasa producida por el hongo en la fabricacin de
biodiesel, gracias a esto, el hongo es ahora un gran candidato para la produccin
en masa de la enzima.

Qu es el hongo entomopatgeno Beauveria Bassiana?

Beauveria Bassiana es un hongo que crece naturalmente en los suelos de todo el
mundo y causa la enfermedad muscardina blanca en una gran variedad de
insectos. Es uno de los hongos con mas poder entomopatgeno, llegando a ser
utilizado como un biopesticida por una gran variedad de pases.

Metodologa
1.1 Muestreo y aislamiento de los hongos y el coleptero
El muestreo de los hongos nativos se efectuar en varias fincas cafeteras del
municipio de Amga, valle de aburra; se llevar a cabo 4 colectas aleatorias de

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insectos silvestres muertos, cubiertos de hongos externamente, dos de ellas se

harn en temporada seca de pocas lluvias, y las otras dos en temporada de
lluvias.
Para procesarlos se examinarn los insectos bajo estereoscopio para corroborar la
presencia de hongos, posteriormente se aislan y se inoculan en medio de cultivo
Papa Dextrosa Agar (PDA), enriquecido con Extracto de Levadura (EL) para su
desarrollo e identificacin.
Se muestrear el coleptero en una finca cafetera en el municipio de Amga, en
un cultivo de caf ya establecido. identificando y aislando los frutos infectados con
la Broca. Posterior al aislamiento se guardaran las muestras en un refrigerador
portable, especial para su transporte
Luego, en los laboratorios del SENA, se proceder a analizar los frutos, de los
cuales se ara una separacin de las larvas y se depositaran en un invernadero
para su conservacin y reproducion de la Broca.

1.2 Cultivo in-vitro de los hongos

Las muestras de hongos se aslaran, se desinfectaran las muestras con hipoclorito
de sodio al 5% durante un minuto, posterior a esto se inoculara en medio de
cultivo Papa Dextrosa Agar (PDA), enriquecido con Extracto de Levadura (EL). La
incubacin se realizara a temperatura de 20C a 25C 2C, adems el medio de
cultivo debe de tener un pH de 6 a 6.3 (cido).
Posteriormente se prepararn diluciones sucesivas (10) en cajas de petri teniendo
como dilucin madre el hongo incubado anteriormente (Marcada como 0).

1.3 Evaluacin del efecto antagnico de los hongos contra el coleptero.

Para evaluar el efecto antagnico de los diferentes hongos previamente aislados
se proceder con las diferentes pruebas:
-La primera prueba se har con mtodo In-vitro, se utilizarn cada uno de los
hongos y se aplicaran en una caja de petri, una por hongo, con un espcimen de
Hypothenemus Hampei en el centro, se sellar y se analizar el tiempo y la
colonizacin del hongo contra el coleptero.
-La segunda face se aplicaran cada uno de los hongos en el fruto, posteriormente
se pondr en el medio de la caja Petri y un espcimen de Hypothenemus Hampei
en uno de los lados, se sellar y se analizara el comportamiento del coleptero.

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Finalmente se recopilaran los datos recogidos durante cada una de las pruebas y
se escogern los hongos con mayor eficiencia en tiempo de accin contra la
Broca.