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6.

- Medios de cultivo para el aislamiento de levaduras del gnero Candida


El agar glucosado de Sabouraud con antibiticos es un buen medio para el cultivo
primario de muestras orofarngeas, pero dada la similar morfologa colonial que
exhiben las distintas especies de levaduras es deseable el empleo de un medio
capaz de diferenciar las especies ms frecuentes y detectar cultivos mixtos, como
es el CHROMagar Candida, donde se identifican muy bien C. albicans, C.
glabrata, C. tropicalis y C. krusei
La produccin de tubos germinativos y de clamidosporas, son pruebas muy
rentables para identificar a C. albicans. La produccin de tubos germinativos es
adems una prueba sencilla y rpida (2-4 horas) que puede obviar otras ms
lentas.La produccin de clamidosporas en medio de agar harina de maz, agar de
Wolin-Bevis, agar arroz o agar patata-zanahoria, es ms rentable para la
confirmacin de C. albicans cuando la prueba del tubo germinativo es negativa o
se presta a confusin, pero requiere ms tiempo.
Cultivo en agar dextrosa Sabouraud con y sin cicloheximida. Crecimiento de
colonias levaduriformes, de bordes enteros, limitadas, poco elevadas y de color
blanco. Crecen en un promedio de 3 a 5 das a temperatura ambiente.
7.- Pruebas que se utilizan para la identificacin rpida de C. albicans

Examen directo en fresco de orina, lquido cefalorraqudeo, materia fecal o


agregando KOH al 15% en muestras de esputo, lavado/cepillado bronquial
y/o macerados de fragmentos de tejido.

Examen microscpico en fresco con KOH.

La toma de muestras se lleva a cabo de diferentes maneras: frotis directo con


torunda estril, enjuague bucal con solucin salina (para cuantificacin),
impregnacin con un cuadrado de espuma estril (para cuantificacin), biopsia (en
candidiasis hiperplsica y esofagitis).

El examen directo con solucin salina y azul de lactofenol puede ser til para el
diagnstico rpido de la candidiasis oral pseudomembranosa, pero las tcnicas de
cultivo suelen ser ms sensibles, ya que la microscopa directa precisa de la
existencia de un nmero significativo de levaduras. La tincin de Gram mejora
mucho la observacin en fresco, pues pueden distinguirse ms fcilmente las
clulas levaduriformes. Buen rendimiento ofrece tambin la tincin con
fluorocromos (rojo Congo, blanco de calcoflor). La presencia de pseudohifas o
hifas y clulas inflamatorias en un frotis se valora ms que la de blastosporas en
relacin con una posible infeccin. La presencia de hifas o pseudohifas sugiere
infeccin por Candida albicans.

Actualmente, existen tcnicas de aglutinacin que ofrecen una buena alternativa


diagnstica por su rapidez (5 minutos), sensibilidad y especificidad. As, el test
Bichro-Latex Albicans utiliza partculas de ltex recubiertas con anticuerpos
monoclonales que reaccionan con antgenos de C. albicans, y el llamado test
Krusei color va dirigido a la identificacin de C. krusei; el test Candida Check
posibilita identificar las especies ms frecuentes en clnica y detectar los serotipos
A y B de C. albicans
8.- Pruebas bioqumicas para la identificacin de especies de Candida
Las pruebas fisiolgicas y bioqumicas ms utilizadas para identificar
a Candida spp., son:
Utilizacin de medios de cultivo cromognicos (agar BIGGY/Nickerson, agar
Pagano-Levine, CROMO-AGARCandida, CANDI-SELECT, etc.).
Formacin de seudomicelio, hifas y clamidoconidios en agar harina de maz con
Tween 80.

Cultivo agar harina de


maz con Tween 80.
Hifas y clamidoconidios
= C. albicans o C.

dubliniensis.
Formacin de tubo germinativo (filamentacin) en levaduras cultivadas en suero
humano a 37C.

Prueba de filamentacin en suero. Levaduras filamentizando = Candida


albicans o C. dubliniensis.
Formacin de clamidoconidios en agar Niger.
Asimilacin de carbohidratos y compuestos nitrogenados (auxanograma:
manuales y automatizados).
Fermentacin de carbohidratos (zimograma).
Serotipificacin.

9.- Antifngicos de eleccin para el tratamiento de esta micosis y su


mecanismo de accin

Nistatina y anfotericina B

La nistatina en forma tpica es efectiva contra la C. albicans. Cuando se


administra por va - oral es mnima, siendo su accin limitada al intestino. La
duracin del tratamiento es de 7- 10 das y este debe mantenerse como mnimo 2
das despus de desaparecer las lesiones.
La anfotericina B es efectiva en las micosis profundas. En aquellos casos de
infeccin mictica en pacientes portadores de prtesis

Fluconazol

El fluconazol es miembro de la familia de agentes antifngicos triazlicos; es un


inhibidor potente y especfico de la sntesis de esteroles en los hongos. El
fluconazol, administrado tanto por va oral como intravenosa, es activo en una

variedad de infecciones fngicas en animales. Las propiedades farmacodinmicas


de fluconazol son similares luego de la administracin por va oral o intravenosa.
Esta indicado en Candidiasis orofarngea, esofgica, infecciones por cndida del
tracto urinario, peritonitis, y formas sistmicas de candidiasis. Pacientes
inmunocompetentes, pacientes con sndrome de inmunodeficiencia adquirida
(SIDA), transplante de rganos o con otras causas de inmunodepresin

Ketoconazol

Es una droga fungisttica, que puede ser fungicida, segn su concentracin.


Inhibe la biosntesis de ergosterol u otros esteroles, lesionando la membrana de la
pared celular del hongo y alterando su permeabilidad; inhibe la biosntesis de
triglicridos y fosfolpidos de los hongos y la actividad enzimtica oxidativa y
peroxidativa. En candidiasis por C. albicans, inhibe la transformacin de los
blastosporos en su forma micelial invasora. Debe administrarse con alimentos
para reducir las nuseas y vmitos, facilitando su absorcin.

Miconazol

Es un fungisttico, Acta por inhibicin de la biosntesis del ergosterol o de otros


esteroles, lo que lesiona la membrana de la pared celular fngica y altera su
permeabilidad; como consecuencia, puede producirse la prdida de orgnulos
intracelulares esenciales. En Candida albicans inhibe la transformacin de las
blastosporas en la forma inicial invasora. Es un frmaco de segunda eleccin, para
el tratamiento de la candidiasis mucocutnea crnica

Otros productos utiles, son los azoles tpicos para el tratamiento de candidiasis
superficial son, clotrimazol o econazol.

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