El fibringeno es una protena soluble del plasma sanguneo precursor de la fibrina, su

longitud es de 46 nm, su peso 340 kDa.

Es responsable de la formacin de los cogulos de sangre. Cuando se produce una herida se
desencadena la transformacin del fibringeno en fibrina gracias a la actividad de la trombina.
Es una molcula fibrilar, que en sus extremos tiene cargas fuertemente negativas. Estos
extremos permiten la solubilidad del compuesto y tambin repelen a otras molculas del
compuesto, previniendo la agregacin. Compuesto por tres pares de cadenas de polipptidos
que son, 2 cadenas A, 2 B y 2 (A,B,)2 unidas por enlaces disulfuro, estas cadenas
adems estn genticamente ligadas y reguladas en forma coordinada en el ser humano.
Estas cadenas son sintetizadas en el hgado.

Coomassie Blue (azul de coomassie) (C45H44N3NaO7S2; Mr = 825,97) . El CBB

(de Coomassie Brilliant Blue, azul brillante de Coomassie) es el colorante para protenas
ms popular. Es de tipo aninico, y se une a protenas de modo inespecfico. Su
estructura es predominantemente no polar, por lo que habitualmente se usa (al 0,025%)
en disolucin con metanol (40%) y actico (7%). Las protenas del gel se fijan gracias al
cido actico y al mismo tiempo se tien. El colorante en exceso que se incorpora en el
gel se puede eliminar destiendo con una disolucin de composicin idntica excepto por
el colorante. Las protenas se detectan como bandas azules contra un fondo claro. Puesto
que el SDS tambin es aninico, puede interferir con el proceso de tincin. Por tanto, se
recomienda un gran volumen de disolucin de tincin, aproximadamente diez veces el
volumen del gel.
Propiedades fsicas

Masa molar

854,03 g/mol

Azul de coomassie

Diagnstico[editar]

Prueba de VIH: Aunque el VIH suele detectarse mediante la tcnica ELISA, el Western
Blot se usa como prueba confirmatoria cuando el ELISA da un resultado positivo en un
grupo que no es de riesgo o en una poblacin donde la prevalencia del virus es muy baja.
Mediante el Western blot se buscan los anticuerpos anti-VIH en una muestra de suero
humano. Se transfieren a una membrana las protenas de clulas que, se sabe, estn
infectadas por el VIH. Entonces, se incuba el suero que hay que probar con esta
membrana. Este paso es equivalente a la incubacin con el anticuerpo primario; si hay
anticuerpos anti-VIH en el suero, sern estos los que realicen el papel de anticuerpo
primario. Se lava, para eliminar los anticuerpos no unidos, y la membrana se vuelve a
incubar con un anticuerpo secundario anti-humano unido a una enzima-seal. La aparicin
de bandas indica la presencia de protenas contra las cuales el suero del paciente
contiene anticuerpos, es decir, el paciente es seropositivo.

Se emplea como prueba definitiva de la encefalopata espongiforme bovina, comnmente

llamada "enfermedad de las vacas locas".

Algunas clases de la prueba para la enfermedad de Lyme usan el Western blot.

En veterinaria, ocasionalmente se emplea el Western blot para confirmar la presencia

del FIV en gatos.

En la prctica clnica, el Western Blot se utiliza para diagnosticar enfermedades

infecciosas, ms frecuentemente famoso, el VIH. Algunos laboratorios clnicos
inmunofluorescencia emplean tcnicas de Western Blot como confirmacin as como
pruebas (tales como la deteccin de anticuerpos circulantes anti-colgeno VI anticuerpos
en la epidermlisis ampolla adquirida o varios anti-protenas propias en pnfigo
paraneoplsico). A menudo, Sin embargo, estas aplicaciones clnicas son suplantados por
ms productivos ELISA con costo reducido y el rendimiento acelerado.

WESTERN BLOT
Es una discriminacin de los antgenos del VIH frente a los que se dirigen los anticuerpos
presentes en la muestra.
Bsicamente se basa en la separacin de las protenas, antgenos obtenidas del VIH-1

procedentes del lisado del cultivo del virus y purificadas por centrifugacin. La protena viral as
obtenida se coloca en un gel de poliacrilamida en forma de lminas delgadas y luego se efecta
una electroforesis con la que las protenas de menor peso molecular, p17 y p24, emigran ms lejos
en el gel, mientras que las de mayor peso molecular se mantiene cerca de su lugar de depsito.
Posteriormente, se transfieren a una tira de nitrocelulosa y se cortan en tiras de unos 5 mm de
ancho. Estas son las tiras que se exponen al suero humano diluido, despus de una incubacin se
lavan y se vuelven a incubar con una IgG antihumana marcada con una enzima que con la
exposicin a un revelador enzimtico producir una banda coloreada en las zonas
correspondientes a los anticuerpos especficos que contenga la muestra.
GENERALMENTE SE USA PRUEBA ELISA
TEST DE ELISA
La tcnica de Elisa ( Enzyme Linked Inmunoabsorbevent Assay ) se basa en un ensayo que
permite detectar un antgeno inmovilizado sobre una fase slida, mediante la utilizacin de un
anticuerpo apropiado.
Emplea reactivos econmicos, fciles de conseguir y es utilizada en combinacin con deferentes
mtodos de espectrofotometra para la posterior identificacin del antgeno.
Existen mtodos ELISA directos ( utilizando un solo anticuerpo), indirecto (utilizando un anticuerpo
marcado y otro secundario marcado contra el primario) y en sandwich (que combina las tcnicas
anteriores en forma sucesiva.

Western blot: Esta prueba consiste en primer lugar en la separacin de las protenas virales
mediante electroforesis en gel de poliacrilamida, seguida de una transferencia
electrofortica de los antgenos a una membrana de nitrocelulosa. El suero del paciente en
el que se investiga la presencia de anticuerpos frente al VIH se pone en contacto con esa
membrana. Las reacciones antgeno-anticuerpo se detectan por la reaccin con
antiinmunoglobulina humana, conjugada con una enzima. Despus de una reaccin de
oxidorreduccin y de precipitacin, se observan protenas virales en la tira de nitrocelulosa.
Esta prueba se utiliza para confirmar el resultado reactivo del ELISA, o sea, es tambin una
prueba de confirmacin de la infeccin. Tiene una alta especificidad y sensibilidad.

Los rangos de los valores normales son:

Protena total: 6.4 a 8.3 g/dL (gramos por decilitro)

Albmina: 3.5 a 5.0 g/dL

Alfa-1 globulina: 0.1 a 0.3 g/dL

Alfa-2 globulina: 0.6 a 1.0 g/dL

Beta globulina: 0.7 a 1.2 g/dL

Gammaglobulina: 0.7 a 1.6 g/dL

La disminucin de la protena total puede indicar:

Prdida anormal de protenas del tubo digestivo o incapacidad de ste para absorber protenas
(enteropata perdedora de protenas)
Desnutricin
Trastorno renal llamado sndrome nefrtico
Cicatrizacin y funcionamiento deficiente del hgado (cirrosis)
El aumento de las protenas alpha-1 globulina puede deberse a:

Enfermedad inflamatoria aguda

Cncer

Enfermedad inflamatoria crnica (por ejemplo artritis reumatoidea, LES)

La disminucin de las protenas alfa-1 globulinas puede ser un signo de:

Deficiencia de alfa-1 antitripsina

El aumento de las protenas alfa-2 globulinas puede indicar:

Inflamacin aguda

Inflamacin crnica
La disminucin de las protenas alfa-2 globulinas puede indicar:

Descomposicin de los glbulos rojos (hemlisis)

El aumento de las protenas beta globulinas puede indicar:

Un trastorno en el cual el cuerpo tiene problemas para descomponer las grasas (por ejemplo,
hiperlipoproteinemia, hipercolesterolemia familiar)
Terapia de estrgenos
La disminucin de las protenas beta globulinas puede indicar:

Nivel anormalmente bajo de colesterol LDL

Desnutricin
El aumento de las protenas gama globulinas puede indicar:

Cncer de mdula sea llamado mieloma mltiple

Enfermedad inflamatoria crnica (por ejemplo, artritis reumatoidea)

Sistema inmunitario hiperactivo (Hiperinmunizacin)
Infeccin aguda

Cncer de glbulos blancos llamado macroglobulinemia de Waldenstrom

Enfermedad heptica crnica

Electroforesis de hemoglobina
Este examen de laboratorio mide los niveles de diferentes tipos de la protena transportadora de oxgeno
(hemoglobina) en la sangre.

Enfermedad por hemoglobina C

Hemoglobinopata rara

Anemia drepanoctica

Talasemia (trastorno sanguneo hereditario en el cual el cuerpo produce una forma anormal de
hemoglobina)

Electroforesis de protenas en la orina

Inflamacin aguda
Amiloidosis
Disminucin de la funcin renal
Nefropata diabtica
Insuficiencia renal
Mieloma mltiple
Sndrome nefrtico
Infeccin urinaria aguda

4. Tincin
Las protenas coloreadas naturales como la mioglobina, hemoglobina, ferritina y
citocromo C, pueden ser observadas directamente en los geles, sin embargo la
visualizacin de la mayora de las protenas requiere el uso de colorantes.
Los colorantes orgnicos fueron los que se emplearon primero para teir
protenas en los geles (ejemplo de estos bromofenol azul, azul de Coomassie,
etc.).
Una rpida tincin, destincin y fijacin son esenciales en el caso de las protenas
pequeas para evitar su elusin; la omisin del metanol de la solucin de tincin
es beneficiosa ya que se reduce el tiempo de tincin y disminuye el hinchamiento
de los geles.12
Existen diferentes tipos de tincin, entre ellos la plata que es muy sensible y tiene
la caracterstica de producir generalmente coloraciones carmelita o negro, sin
embargo algunas protenas tienen colores caractersticos como las lipoprotenas
que tienden a colorearse de azul y algunas glicoprotenas que aparecen amarillas,
carmelitas o rojas. 24 Este efecto cromtico se ha demostrado que est dado por la
difraccin de la luz en la plata. Se han desarrollado algunos procedimientos de
tincin con plata para identificar ciertas protenas, con el empleo de
combinaciones de tincin.
La tincin con Coomassie puede emplearse para la determinacin de protenas
cuando estas son abundantes, pero no para la determinacin de pureza de
protenas trazas. Esta tincin requiere un medio cido para la generacin de la
atraccin electrosttica entre las molculas del colorante y los grupos amino de
las protenas. La atraccin inica es a travs de las fuerzas de Van Der Walls, que

une a las protenas y al colorante formando un complejo. Esta unin es

totalmente reversible en condiciones apropiadas.
Se ha reportado la tincin de protenas por otros mtodos entre los que se
encuentran: eriocromo negro, compuestos fluorognicos, modificacin de los
aminocidos de las protenas.8